专利名称：广谱杀菌和抗单纯疱疹病毒外用液体制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种从传统中药中提取有效成分并与其它成分制成制剂以及该制剂的用途。
黄精是百合科(Liliaceae)黄精属(Ploygonatum)多种植物的干燥根茎，我国有30余种，《中国药典》(2000年版一部)收藏了3种即黄精polygonatum sibiricum Red.，多花黄精P.cyrtonema Hua及滇黄精P.kingianum Coll.et Hemsl.。黄精始载于《名医别录》，具补肾益精、滋阴润燥之功，用于滋补强身和治疗肾虚精亏，肺虚燥咳以及脾胃虚弱之证已有很长历史，是中医常用药物之一。近年来对黄精的研究逐渐增多并不断深入。现代药理学研究证明黄精具有增强免疫，降低血脂、血糖，延缓衰老等多种药理作用。对黄精化学成分的研究表明黄精含有黄精皂苷，菸酸，糖类，醌类，氨基酸及微量元素。近年来对黄精多糖的研究取得一些很有意义的进展，药理学研究证明黄精多糖具有免疫激发，增强免疫，延缓衰老，抗病毒等作用，黄精多糖是黄精生物学活性物质的一个非常重要的成分。
近十余年来，由于膜化学、免疫物质的化学研究和发展以及新药资源寻找与研究等方面的进展，发现糖类参与了生命现象中细胞和机体的各种活动，具有多种多样的生物学功能，因而对糖的研究逐渐活跃，尤其对分子量几千左右，具很强生物活性多糖的研究曰益受到重视，其生理活性、化学结构以及相互关系成为多糖研究的热点，取得了很大的进展。
在抗病毒和抗炎方面的实验表明，黄精多糖具有极强地抗病毒和抗炎症活性。用家兔眼结膜、角膜炎症模型，口服黄精多糖，视察黄精多糖的抗炎药理研究结果表明，黄精多糖消除兔模型结膜充血、水肿、分泌物增加、角膜混浊、睫状充血等局部表现；能明显抑制小鼠耳廓肿胀、大鼠足趾肿胀；降低大鼠肉芽肿的重量，减少肉芽肿内渗出；对治疗大鼠免疫性关节炎的原发病灶和继发病变有显著疗效。用0.2％黄精多糖液、2mg/ml黄精多糖注射液及0.5％黄精多糖口服液三种黄精多糖制剂治疗家兔实验性单纯疱疹病毒性角膜炎，与无环鸟苷治疗组及氯霉素组进行对照，结果表明各种黄精多糖制剂组与氯霉素组比较，疗效均有统计学意义(P＜0.05)；黄精多糖滴眼液配合黄精多糖注射液结膜下注射和黄精多糖滴眼液配合黄精多糖口服液2组疗效优于无环鸟苷组(P＜0.05)；从中药黄精的块状根茎中用水提醇沉法制备的黄精多糖，纯度大于90％，作体外细胞培养抗单纯疱疹病毒II型实验，分别用1.感染病毒后再加入供试黄精多糖2.病毒和供试黄精多糖同时加入细胞培养3.培养细胞中先加入供试黄精多糖再感染病毒三种不同实验条件测试黄精多糖的抗病毒活性，以无环鸟苷作为阳性对照。结果表明供试黄精多糖具有明显的抗HSV-II的作用，在浓度0.1---0.8％范围内均无细胞毒性反应(无细胞病变及损伤)，空斑抑制率分别为95.31％、100％、100％；且以浓度为0.4％-----0.8％的黄精多糖先作用细胞后再感染HSV-II时，可见对细胞的保护作用，提高了空斑抑制率。
二癸基-二甲基溴化铵是一种双链季铵盐型杀菌剂(DidecylDimethyl Ammonium Bromide)由两条石蜡长链取代两个原子团，使杀菌力倍增，再结合杀菌力强的原子使分子中的亲水性和亲脂基团比一般单链季铵盐化合物强几倍。从而使双链季铵化合物无论是杀菌能力还是亲水、亲脂性方面都是一般单链季铵盐化合物所不能比拟的。
蛇床子，苦参，百部，大黄，黄柏等中药，长期作为外用中药，对皮肤病有一定疗效。
基于上述，本发明的目的是以黄精多糖和中药水提物及二癸基-二甲基溴化铵为主要成分，制成一种具广谱杀菌和抗单纯疱疹病毒外用液体制剂以及该制剂的用途。
本发明的技术关键及方案是先从中药黄精中提取分离出具抗病毒活性的黄精多糖，再将具杀菌止痒功能的中药配伍进行提取得中药水提物，添加高效杀菌成份双链季铵盐-----二癸基-二甲基溴化铵并按一定配比混合再添加丙二醇制成具高效杀菌和抗单纯疱疹病毒活性的外用液体制剂并将该制剂进行应用。
下面详细介绍该制剂的制作和应用一、黄精多糖的制备1、原料药，黄精生药以选择无霉变、颜色黄纯、无杂什的中药黄精块根为原料。《中国药典》收载的3种黄精即黄精polygonatum sibiricumRed.，多花黄精P.cyrtonema Hua及滇黄精P.kingianum Coll.et Hemsl.之一种或多种，以多花黄精P.cyrtonema Hua品种疗效更好。2、洗涤干净，切片。3、干燥(可用烘干设备等，干燥至含水量12％左右为宜)，粉碎成细颗粒。4、乙醇回流，将粉碎后的黄精生药投入回流容器中，用高浓度乙醇(70％以上的乙醇)进行回流处理，去除色素等小分子物质。5、过滤、浸提，可用滤器(也可用离心设备)过滤，取滤渣供浸提黄精多糖用，乙醇回收蒸馏后再用。用适当浓度的乙醇(30～60％)浸提滤渣，提取具生物活性的黄精多糖浸提液备用。6、浓缩，采用负压浓缩至含糖量为＞10％。7、冷藏保存黄精多糖浓缩液备用。二、中药水提物的制备。将中药蛇床子、苦参、百部、大黄、黄柏(按等量)混合水煎煮沸10--30分钟，取水煎液，连续三次水煎，三次水煎液混合。用少量70％乙醇将冰片(用量为中药水煎液的0.5-1.0％)溶解后加入中药水煎液中。三、本发明的主要成分配比黄精多糖含量 1---3％二癸基-二甲基溴化铵， 0.1％---0.2％中药(蛇床子、苦参、百部等)提取物 20％----50％丙二醇5％-----10％去离子水 余量先量取总体积20--30％的去离子水，再加入占总体积10-30％的黄精多糖浓缩液，搅拌溶解后，加入二癸基-二甲基溴化铵，中药提取物混合，搅拌下逐渐加10％的脂肪醇聚氧乙烯醚水溶液，直至溶液澄清，然后加入丙二醇，并加去离子水至100％，搅拌均匀。若添加相应适当的基质和辅料，可开发生产成不同的产品形式，如软膏剂，霜剂，栓剂等。四、本制剂定量杀菌效果在25℃下检测，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌，分别以奥得福尔消毒液制剂原液1∶1稀释液及1∶5稀释液作用1分钟、5分钟、10分钟、20分钟、30分钟，结果该消毒剂原液1∶1稀释液作用1分钟，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌对杀灭率达99.9％以上；消毒剂原液1∶5稀释液作用10分钟，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌杀灭率均达99.9％以上，且杀灭率随作用时间延长，消毒液浓度增加而上升。
本制剂安全性试验结果1.小鼠经口急性毒性试验结果表明本制剂为实际无毒。2.大鼠皮肤刺激试验结果表明本制剂对大鼠皮肤无刺激。3.家兔眼粘膜刺激试验结果表明本制剂对家兔眼粘膜无刺激性。
本发明具有以下优点1、制作工艺简单；2、无毒；3、应用广泛。
实施例1本广谱抗病毒杀菌外用液体制剂的生产制备，原料黄精多糖1-3％；二癸基-二甲基溴化铵1％；中药(蛇床子、苦参、百部等)提取物50％；丙二醇10％；脂肪醇聚氧乙烯醚(乳化剂)适量；去离子水加至100％。配制方法先量取总体积20--30％的去离子水，加入黄精多糖，搅拌溶解后，加入二癸基-二甲基溴化铵，中药提取物混合，搅拌下逐渐加入10％的脂肪醇聚氧乙烯醚水溶液，直至溶液澄清，然后加入丙二醇，并加去离子水至100％，搅拌均匀。实施例2采用实施例1生产工艺制备的黄精多糖和中药水提取物及二癸基-二甲基溴化铵为主要功效成分制备的外用液体制剂，经药效和药理试验及安全性试验表明，本组合物液体制剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌作用10分钟，杀灭率均可达99.9％以上；本组合物液体制剂放置室温下稳定，有机物的存在对杀灭作用有轻度影响，但杀灭率仍可达99.9％以上；体外抗病毒试验结果表明，该制剂的主要抗病毒功效成分------黄精多糖，对单纯疱疹病毒的空斑抑制率达到100％；稳定性试验表明，该制剂常温下存放一年其杀菌率不变；动物急性毒性试验表明本品属实际无毒级；对正常皮肤无刺激性；家兔眼刺激试验表明对眼粘膜无刺激性。实施例3本组合物液体制剂临床治疗生殖器疱疹应用效果有如下77例，男性38例，女性39例，年龄最大为56岁，最小为18岁，诊断标准生殖器疱疹采用PCR或酶联免疫确诊，疗效标准显效为临床症状消失或明显减轻，有效为临床症状减轻。生殖器疱疹治愈为临床症状消失60天以上，显效为临床症状消失或明显减轻，有效为临床症状减轻。临床应用结果表明本组合物液体制剂对单纯疱疹病毒感染引起的生殖器疱疹，治愈率为76.6％，显效率为92.2％；总有效率为96.1％。实施例4本组合物液体制剂临床治疗细菌性和真菌性阴道炎42例，诊断标准细菌性和真菌性阴道炎由菌检确诊。疗效标准细菌性和真菌性阴道炎治愈为临床症状消失60天以上，菌检为阴性者；显效为临床症状消失或明显减轻，菌检为阳性者；有效为临床症状减轻，菌检为阳性者。治疗结果表明，本组合物液体制剂对细菌性和真菌性感染引起的阴道炎具有很好的治疗作用，治愈率为84.4％％，显效率为93.3％，总有效率为100％。
权利要求
1.一种由黄精多糖和中药水提物及二癸基-二甲基溴化铵为主要功效成分组成的广谱杀菌和抗单纯疱疹病毒外用液体制剂，其特征是由采用生化技术从中药黄精中提取的抗病毒生物活性成分黄精多糖以及中药水提物和二癸基-二甲基溴化铵及丙二醇组成并按一定比例混匀制备而成的的液体制剂。
2.如权利要求1所述的外用液体制剂，其特征是制剂的组成为黄精多糖含量1～3％二癸基-二甲基溴化铵 0.1％中药(蛇床子、苦参、百部等)提取物 50％丙二醇 10％脂肪醇聚氧乙烯醚(乳化剂) 1～5％去离子水补加至100％
3.根据权利要求2所述的外用液体制剂，其特征是黄精多糖采用中药黄精切片干燥，粉碎，70％以上高浓度乙醇去除小分子物质，过滤后用30-60％乙醇提取滤渣，得到黄精多糖浸提液。
4.根据权利要求2所述外用液体制剂，其特征是中药提取物采用蛇床子5-20％、苦参5-20％、百部5-20％、冰片1-3％、大黄10-20％、黄柏10-20％混合水煎，水煎液负压浓缩而得。
5.根据权利要求1所述的外用液体制剂，其特征是具有快速杀灭革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌、真菌和单纯疱疹病毒作用。
6.根据权利要求5所述的外用液体制剂，其特征是可用于治疗和预防生殖器部位的性疾病病原物感染。
7.据权利要求5所述的外用液体制剂，其特征是可用于治疗和预防病毒性皮肤病包括口唇疱疹、眼疱疹、疱疹性甲沟炎、湿疹性疱疹及全身性单纯疱疹。
8.根据权利要求5所述的液体制剂，其特征是可用于治疗和预防细菌性皮肤病如.淋病(gonorrhea)、金黄色葡萄球菌性烫伤样综合症(staphylococcal scalded skin syndrome，SSSS)毛囊炎、疖及疖病、脓疱疮(impetigo vulgaris)、细菌性阴道病(bacterial vaginosis，BV)、增殖性皮炎(dermatitis vegetans)、棒状杆菌癣样红斑(dermatomycoid erythemacorynebacteris)、腋毛棒状杆菌病(corynebacteriasis axillaris)、窝状角质松解症(pitted keratolysis)。
9.据权利要求5所述的外用液体制剂，其特征是可用于治疗和预防真菌性皮肤病及性病(Dermatoses and veneroses due to Fungi)如念珠菌病(candidiasis)。
10.根据权利要求5所述的外用液体制剂，其特征是可用于治疗和预防生殖器部位非性传播疾病包括瘙痒症(pruritus)、阴道毛滴虫病、烫伤、烧伤及创口的抗感染。
11.根据权利要求1所述的液体制剂，其特征是适合制成喷雾剂或涂抹液体制剂或洗涤剂。
全文摘要
本发明提供了一种外用液体制剂的配制和用途，制剂采用黄精多糖和中药水提物及二癸基－二甲基溴化铵为主要功效成分配制而成，具有制作工艺简单、无毒、应用广泛的特点，可快速杀灭革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌、真菌和单纯疱疹病毒的作用，且无毒副作用。
文档编号A61K9/08GK1411802SQ0112893
公开日2003年4月23日 申请日期2001年10月8日 优先权日2001年10月8日
发明者石林, 何开泽, 谭健, 李伟, 蒲蔷, 蒙义文 申请人:中国科学院成都生物研究所