专利名称：促进血管健康的组合物和方法
技术领域：
本发明涉及含有多酚例如可可多酚(如矢车菊苷配质)和至少一种胆固醇降低剂的组合物，以及包括治疗和预防动脉粥样硬化和心血管疾病的促进血管健康的方法。
背景技术：
冠状动脉疾病是心血管疾病(CVD)的主要形式，在美国它是目前人死亡的主要原因。冠状血管疾病名列第三位。冠状动脉疾病和脑血管疾病两者的病因都归因于动脉粥样硬化症。通过其临床表现可知，动脉粥样硬化是超过一百万的心脏病发作的主要原因，每年大约有400,000发作以及大量的血管循环问题。许多患者患有高血压病。
大量事实确证在高胆固醇血症和早期动脉粥样硬化症之间存在着因果关系。血浆胆固醇水平越高，其后心脏病发作的风险越大(见Steinberg，D.，JAMA 2643047(1990))。在导致动脉粥样硬化的系列过程中，人们相信最初的过程是在颈动脉、冠状动脉和脑动脉以及在主动脉中形成“脂肪条斑”。这些病变包括主要发现于内膜层平滑肌细胞和巨噬细胞内的胆固醇和胆固醇酯的脂肪性沉淀。血管平滑肌细胞的迁移和增殖在脂质最初沉淀之后的动脉粥样硬化的发病机理中起着关键作用。
另外，动脉粥样硬化和心血管疾病的发展受LDL氧化作用、环加氧酶(COX)活性、脂氧合酶(LOX)活性、氧化氮(NO)生成和氧化氮合酶(NOS)活性调节和/或与之有关。
图1中给出由此相关的各种途径和过程中的关系，详细内容可见国际申请PCT/US97/05693，公开为WO97/36497中的说明，其相关部分结合到本发明中作为参考。简言之，LDL的氧化作用是当巨噬细胞吸收氧化性改变的LDL并转化成所谓的“泡沫细胞”时出现的引发病变(动脉粥样化)的关键步骤。酶COX和LOX与花生四烯酸途径有关，该途径引发前列腺素和血栓烷A2的产生，已知后者能引起血管收缩和血小板聚集，由此引起动脉粥样硬化的进行。已知氧化氮能抑制血小板聚集、单核细胞的粘附/趋化以及血管平滑肌的增殖，认为所有这些都与动脉粥样硬化的进行有关。已表明可可多酚可通过抑制LDL氧化作用、增强NO/NOS活性和抑制COX/LOX活性，对上述过程具有有益的作用。这些作用可见如公开为WO97/36497的国际专利申请PCT/US97/05693以及该申请中的实例。可将可可多酚用于治疗或预防已知通过给予非甾体抗炎药(如阿司匹林)进行治疗的疾病。
尽管可可多酚有益于与动脉粥样硬化和CHD的诱发和发展有关的途径和症状的数目，但已发现这些化合物不具有明显的胆固醇降低作用。因此，本发明制备一种含有多酚并结合至少一种胆固醇降低剂的改良组合物。与以前所知的含有多酚或胆固醇降低剂的组合物相比，该组合物对哺乳动物(尤其是人)的血管健康具有改进的作用。
发明概述本发明涉及促进哺乳动物，尤其是人或动物血管健康的组合物和方法。
一方面，本发明涉及一种包含可可多酚和胆固醇降低剂的组合物，如食品、食品添加剂、饮食补充剂或药物。该组合物可任选包含L-精氨酸。
在另一实施方案中，本发明涉及降低胆固醇的糖果，最优选降低胆固醇的巧克力(如黑巧克力)和含有降低胆固醇巧克力的糖果。
在另一方面，本发明涉及一种促进哺乳动物(如人或动物)血管健康的方法，包括预防或治疗动脉粥样硬化和心血管疾病，该方法包括给予一种包含可可多酚和胆固醇降低化合物以及任选L-精氨酸的组合物。在本发明的组合物和方法中，还可以与胆固醇降低剂(如基于甾醇和/或甾烷醇(stanol)的胆固醇降低剂)联合使用具有与可可多酚类似性质的其它来源的多酚。
在另一方面，本发明涉及一种促进多酚(如黄烷醇或黄酮醇)吸收的方法，其通过联合给予哺乳动物所述多酚和植物甾醇和/或植物-甾烷醇。本发明还提供所述方法中使用的组合物和产品的制备法。
图示简介图1是表明冠心病(CHD)发展的主要影响因素以及表示可可多酚如何预防该病发展的示意图。
图2A-D表示植物化学物对BAECS中前列腺素类和内皮缩血管肽的基础内皮细胞合成的影响(*＝与对照组明显不同p＜0.05)。
图3A-B表示细胞种类对前列腺环素和内皮缩血管肽的EC释放中矢车菊苷配质诱发的变更的影响。
图4A-C表示在有或无弱激动剂刺激下，可可饮料消耗对活化的GPIIb-IIIa的血小板表面表达的影响。
图5A-C表示在有或无弱激动剂刺激下，可可饮料消耗对活化的P-选择蛋白的血小板表面表达的影响。
图6表示植物甾醇、可可矢车菊苷配质及其结合物对表儿茶精吸收入血浆的影响。
图7表示植物甾醇、可可矢车菊苷配质及其结合物对氧化损害DNA的影响。
图8表示植物甾醇、可可矢车菊苷配质及其结合物对氧化损害脂质的影响。
发明详述本申请中摘录的所有专利、专利申请以及参考文献都结合到本发明中作为参考。在任何不一致的情况下，以本公开为准。
本发明涉及一种含有可可多酚并结合有胆固醇降低剂(如基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂)的组合物，该组合物可用于改善或促进哺乳动物的血管健康。该组合物可任选包含L-精氨酸、钙、钾、镁、维生素E、维生素C、任何一种复合维生素B、类胡萝卜素、瓜耳胶或者单或多不饱和脂肪酸(如ω-3脂肪酸)。在本发明的组合物和方法中，还可以使用包含具有与可可多酚类似性质的其它来源的多酚的组合物，与胆固醇降低剂如基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂进行联合应用，这也包括在本发明的范围之内。
此处所用术语“可可多酚”(CP)指存在于可可豆中或者从可可豆或可可成分中提取出来的多酚物质，包括原花色素，更优选是矢车菊苷配质。术语“矢车菊苷配质”包括儿茶素和表儿茶精的单体和低聚物。应当理解本发明中任何涉及可可多酚之处也适用于可可矢车菊苷配质。术语“可可成分”指含有可可固体的物质，它们来源于无壳的可可碎粒，如巧克力液体和部分或全部脱脂的可可固体(如饼或粉末)。术语“胆固醇降低剂”指当以有效量进行给药时，具有降低哺乳动物胆固醇水平的性质的任何天然存在或加工的化合物、化合物组合物、提取物或植物成分。当这些胆固醇降低剂是甾醇或甾烷醇类型(即包括衍生物和异构体形式)的化合物或化合物组合物时，该“胆固醇降低剂”被称为“基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂”。当用该术语指一种组合物时，如“降低胆固醇的黑巧克力”，是指该组合物具有降低胆固醇的性质。本领域技术人员从本说明书中可清楚，术语“血管”指全身的血管系统，即它包括心脏的血管系统，术语“血管健康”指心血管健康和/或冠状血管健康。“促进血管健康”指达到本文说明的有益的健康效果。
可可多酚可以是天然产物，即源于可可豆，或者通过合成制备。本领域技术人员可根据可利用性或成本来选择天然或合成的可可多酚。可可多酚可包含在作为含有可可多酚的可可成分的组合物中，如巧克力中的巧克力液体，或者可作为如提取物、部分提取物、蓄积的提取部分或合成制备的化合物，独立加入可可成分中。所述可可多酚包括可可矢车菊苷配质，它可以是表儿茶精和儿茶素的单体和/或低聚物。矢车菊苷配质单体包括(+)-儿茶素、(-)-表儿茶精及其各自的差向异构体(如(-)-儿茶素和(+)-表儿茶精)，其具有以下结构 矢车菊苷配质低聚物可含有2至约18，优选2至约12，最优选2至约10个单体单元。例如，低聚物可以是二聚体、三聚体、四聚体、五聚体、六聚体、七聚体、八聚体、九聚体和十聚体。在所述低聚物中，单体通过(4→6)和/或(4→8)的黄烷间链接进行连接。只有(4→8)链接的低聚物是线性的；当存在至少一个(4→6)键时，可得到支链的低聚物。
可通过从可可豆、可可碎粒或可可成分，如巧克力液体、部分脱脂可可固体和/或全脱脂可可固体中提取制备所述可可多酚。优选从全脱脂或部分脱脂的可可粉中制备所述提取物。可使用任何种类的可可(Theobroma)、Herrania或其属内或属间杂种的豆类。所述提取物可通过发酵、正在发酵或未发酵的豆类制备，发酵的可可豆具有最少量的可可多酚，未发酵的含量最高。可根据该豆的发酵因子选择可可豆，例如从具有275或275以下的发酵因子的豆中进行提取。可按公开为WO98/09533的国际申请PCT/US97/15893中的说明，通过控制发酵程度来最优化所述可可成分及其提取物中的多酚水平，该专利相关内容结合到本发明中作为参考。
可采用传统的可可加工方法(例如1997年New York，Blackie Acad.&Professional出版的，Beckett，S.T.编辑的Industrial ChocolateManufacture and Use中，如第1、5和6章中说明的方法)或者采用与传统方法相反的、保护可可成分中的多酚(通过预防其分解)的Kealey等在美国专利No.6,015,913中说明的改进方法，从已加工的可可成分中提取可可多酚。该改进的可可加工方法省略了传统的烘烤步骤。因此，可利用通过以下步骤得到的可可成分(a)在不烘烤可可粒条件下，将可可豆在能使可可壳松开的温度下，加热一定时间；(b)从可可壳中分离可可粒；(c)螺旋式碾压可可粒，然后(d)回收含有防腐水平的可可多酚的可可脂和部分脱脂的可可固体。该方法比传统方法保留了更高水平的高矢车菊苷配质低聚物。该方法制备的可可固体每克脱脂固体含有总的矢车菊苷配质超过20,000μg；优选超过25,000μg/g，更优选超过28,000μg/g，最优选超过30,000μg/g。为了实现本发明目的，总的矢车菊苷配质的量可按实施例3所述确定。
可可多酚可通过采用溶解该多酚的溶剂，从以上所述的资源中提取制备。适当的溶剂包括水或有机溶剂，如甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇和乙酸乙酯。还可以使用溶剂混合物。当用水作为溶剂时，优选将其用例如乙酸微酸化。优选的溶剂为水和有机溶剂的混合物，例如甲醇、乙醇或丙酮的水溶液。含水有机溶剂可包含如约50％-约95％的有机溶剂。因此，可使用50％、60％、70％、80％和90％有机溶剂的水溶液。该溶剂还可含有少量酸，如乙酸，其量约为0.5％-约1.0％。所述提取物的组成，即表达式(即低聚物表达式)以及该矢车菊苷配质的量根据所选择的溶剂而定。例如，水提取物主要包含单体，乙酸乙酯提取物包含单体和低级低聚物(主要为二聚物和三聚物)，甲醇、乙醇和丙酮水溶液提取物含有单体和较高级低聚物。提取单体以及较高级矢车菊苷配质低聚物的优选溶剂之一为70％丙酮。但是，本发明可用含有多酚的任何提取物。可可多酚的提取方法是本领域熟知的方法，可见Romanczyk等在美国专利No.5,554,645以及公开为WO97/36497的国际申请PCT/US97/05693中说明的方法。因此，在一实施方案中，可通过将可可豆压缩成可可粉、将该粉末脱脂、提取可可多酚，然后纯化提取物来制备可可提取物。可可粉可通过将将可可豆和可可豆浆冷冻干燥，将冷冻干燥的可可豆脱浆、去壳，然后将去壳的可可豆碾磨制备。
可可多酚提取物可通过例如除去咖啡因和/或可可碱进行纯化，还可通过凝胶渗透色谱和/或高效液相色谱(HPLC)进一步纯化。可使用凝胶渗透色谱(如在Sephadex LH-20柱上)浓缩提取物以得到高级矢车菊苷配质低聚物。例如，直至开始从柱中洗脱所选择的低聚物时，才开始收集含有单体和低级低聚物的洗脱液。这种提取的实施例在本领域是熟知的，可见公开为WO97/36497的国际申请PCT/US97/05693的实施例5中说明的方法，该专利相关内容结合到本发明中作为参考。通过采用制备HPLC，例如，正相HPLC，将所述提取物分成含有至少50％重量的单体或特定低聚物的单体或低聚物部分。当所述部分包含该单体或低级多聚物(最多至包括四聚体)时，该部分含有约90％-95％重量的特定低聚物部分。分离后，将所需的部分蓄集，得到例如含有低聚物3-10或5-10的所选低聚物的混合物。本领域技术人员可通过本说明书的指导、本领域中的一般知识以及例如通过Romanczyk等在美国专利No.5,554,645以及公开为WO97/36497的国际申请PCT/US97/05693中的方法，调节色谱条件获得所需的矢车菊苷配质分布图。
可通过含有多酚的可可成分或者通过包含巧克力，它可以是牛奶、甜味和中等甜度巧克力，优选黑巧克力以及低脂肪巧克力，在本发明组合物中提供可可多酚。可用传统的可可加工方法制备所述可可成分，但优选采用Kealer等在美国专利6,015,913中说明的方法制备。或者，为提高可可多酚的水平，可使用巧克力液体或用具有275或275以下发酵因子可可豆制备的可可固体。这些成分含有的可可多酚含量比采用传统可可加工法(如烘烤法)和全发酵豆获得的高。可采用常用的方法，从以上说明的成分中制备所述巧克力或者按公开为WO99/45788的国际申请PCT/US99/05414中说明的在制备巧克力期间保护可可多酚的改进方法制备，该专利的相关内容结合到本发明中作为参考。根据以下非传统方法中的至少一个方法制备的巧克力此处称为“具有储备量可可多酚的巧克力”(i)从正在发酵或未发酵可可豆中制备的可可组分；(ii)在可可组分生产过程中保护可可多酚；和(iii)在巧克力生产过程中保护可可多酚。
还可使用合成的矢车菊苷配质，其可通过本领域常用的方法以及例如公开为WO99/19319的国际申请PCT/US98/21392中说明方法制备，该专利的相关内容结合到本发明中作为参考。还可使用可可多酚衍生物。它们包括没食子酸盐化的单体和低聚物、糖基化的单体和低聚物及其混合物；矢车菊苷配质单体和低聚物的代谢物，如硫酸酯化、葡糖醛酸酯化(glucoronidated)和甲基化形式；以及通过克隆微生物系统代谢或哺乳动物内代谢产生的矢车菊苷配质的酶裂解产物。这些衍生物可以是天然产物或者合成制备。
所述组合物还包含胆固醇降低剂。可使用任何作用方式的胆固醇降低剂。适当的降低剂可通过降低在哺乳动物胆汁中的胆固醇吸收或降低胆固醇的合成而发挥作用。适当的胆固醇降低剂的实例为植物甾醇、植物甾烷醇及其衍生物和异构体；大豆蛋白；可溶性纤维，例如来自如燕麦和欧车前、坚果、稻糠油的β-葡聚糖，其每一种都特别适用于食物、饮食补充物和食品添加剂组合物。还可使用已知的胆固醇降低剂，但不优选用于食物和食品添加剂组合物中，但可用于药物中。本领域技术熟练人员将很清楚胆固醇降低剂的选择依据预定的传递介质(如食物、添加物、药物)以及给药方式而定。因此，可降低胆汁中胆固醇吸收的降低剂不优选用于静脉内给药。类似地，如果传递介质是食物，则具有较强药物味道或气味的胆固醇降低剂可能不符合要求。
植物甾醇是不溶于水并具有类似于胆固醇的分子量和结构的植物甾醇。植物甾醇降低胆汁中的胆固醇吸收(包括内源性和食物胆固醇)以及血清胆固醇水平(总水平和LDL)，同时本身并不被吸收。现已证实了四十多种植物甾醇，但β-谷甾醇、菜油甾醇和豆甾醇是最丰富的。可应用的甾醇的其它实例是菜子甾醇、链甾醇、chalinosterol、多孔甾醇、穿贝海绵甾醇。可使用天然来源或合成的单个甾醇或甾醇混合物及其异构体和衍生物。特别有用的是甾醇的饱和衍生物，即甾烷醇，其中环上的所有碳-碳键都是饱和的。适当的甾烷醇具有28或29个碳原子，包括β-谷甾烷醇、穿贝海绵甾烷醇、22,23-脱氢菜子甾烷醇和菜油甾烷醇。植物甾醇可以是固体(如粉末、颗粒)或液体(如油)形式。
在多种植物材料中可发现甾醇和甾烷醇，可见例如国际申请PCT/EP96/02344中的说明。甾醇/甾烷醇的来源实例为松树皮、豆油、妥尔油、竹根提取物(见公开为WO98/57545的国际申请PCT/US98/12556中说明)、可可壳和油以及稻糠油。妥尔油是纸浆和纸工业的副产物，它是好的甾烷醇(即β-甾烷醇)资源。
可通过相对简单和廉价的方法，从天然资源，如植物油、植物油浆、植物油蒸馏液以及其它植物油资源(如妥尔油)中获得植物甾醇。例如，Hamunen在美国专利4,420,427中说明的通过采用溶剂(如甲醇)，从植物油浆中制备甾醇的方法。天然发现的甾烷醇的量较小，但它可通过本领域技术人员熟悉的各种任何方法，通过将甾醇氢化，很容易从甾醇中制备出来。当从植物材料制备甾醇原料时，它将含有多种不同甾醇的混合物，氢化后，所得到的甾烷醇也将是不同甾烷醇的混合物。该混合物适用于本发明中。但是，也可将纯的特定甾醇原料氢化，制备也可应用的纯的甾烷醇。
可可壳中提取的可可油是一种好的植物甾醇资源。可可植物甾醇是游离和结合甾醇的混合物，该游离甾醇最高约占存在的该植物甾醇的90％。该植物甾醇包括菜油甾醇、β-谷甾醇、豆甾醇、环阿屯醇(cycloartenoyl)、24-亚甲基环阿屯醇以及极少量的其它植物甾醇。结合的植物甾醇包括所述植物甾醇的脂肪酸酯或阿魏酸酯衍生物。所述可可油还包括母育酚，后者包括生育酚(具有抗氧化作用)和生育三烯甘油酯(tocotrienol)(具有降低胆固醇的活性)。该可可油可通过包含以下步骤的方法制备(i)碾磨可可壳；(ii)用溶剂提取研磨后的可可壳得到植物甾醇；(iii)除去溶剂；和(iv)收集可可油。可可壳是可可豆烘烤的副产物，可从干燥的发酵可可豆、微粉化的可可豆、烘烤的可可豆中得到，优选从干燥的未发酵可可豆中得到，在该可可豆中含有最高的甾醇总量。优选的可可豆来源于可可(Theobromacacao)。优选的溶剂是石油醚、己烷、戊烷和乙醚。该溶剂可通过真空蒸馏回收。在一实施方案中，用Tekmar磨(Cincinatti，OH)将冷冻干燥的壳研磨成细粉，然后在Soxtec装置(Fisher Scientific，Springfield，NJ)中，将研磨物用再蒸馏石油醚(b.p.38-39.6℃)进行过夜提取。次日清晨，在氮气流下，通过慢慢蒸发，小心除去溶剂，将得到的提取物在-40℃下储存。然后经制备HPLC或柱层析纯化该植物甾醇。
也可以使用甾醇和甾烷醇的酯化形式。酯化可使所述甾醇/甾烷醇更易溶于脂肪和油中，在某些情况下，这可帮助将它们加入到食品或其它传递介质中。例如，可用脂肪酸酯将甾醇酯化。这些酯化的甾醇的实例包括乙酸谷甾醇酯、油酸谷甾醇酯和油酸豆甾醇酯。可根据本领域已知的方法以及例如van Amerongen等在美国专利6,031,118、Higgins等在美国专利5,892,068、Miettenen等在美国专利5,502,045以及国际申请PCT/CA99/00655(公开为WO00/04887)中说明的方法，制备甾烷醇酯。在一实施方案中，可按Miettenen等在美国专利5,958,913中说明，通过用C2-C22脂肪酸酯将至少一种甾醇酯化，制备有用的甾烷醇酯。可使用本领域已知的其它方法增加哺乳动物服用的甾醇/甾烷醇的溶解度。Ostlund在美国专利5,932,562中说明了一种该方法，其中将所述甾醇/甾烷醇与卵磷脂混合得到水溶性粉末。
通过与其它成分混合，可将粉末形式的甾醇/甾烷醇加入到组合物中。如果是食物组合物，一般在混合步骤中加入甾醇/甾烷醇以及其它胆固醇降低剂。在制备降低胆固醇的巧克力时，例如，可将甾醇/甾烷醇加入到含有糖、融化油脂的干燥混合物中；研磨前的颗粒中；或者融化的巧克力中，后者较不优选。为易于混合，可先将甾醇/甾烷醇溶解于加溶剂，如脂肪、植物油、单甘油酯、二甘油酯、三甘油酯、生育酚及其混合物中。制备甾醇/甾烷醇混悬液和乳液的有效载体是甾醇/甾烷醇至少部分溶于其中的水、醇类、多元醇类、其它食用化合物(如巧克力液体)及其混合物。
可以以任何已知的方式，如可以是游离的大豆蛋白、浓缩的大豆蛋白、蓬松的大豆蛋白或大豆粉末、饼和颗粒，将大豆蛋白加入到所述组合物中。也可按如实施例5中说明，使用谷粒或其粉末。各种形式的大豆蛋白在本领域都是熟知的并可由市售提供。其性质及制备方法可见如Acad.Press，NY，1979出版的Wilcke等编辑的SoyProtein and Human Nutrition中的说明。可将大豆蛋白与任何基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂联合使用。
可溶性植物纤维(如β-葡聚糖)具有降低血浆胆固醇的能力。本发明使用的纤维可从任何β-葡聚糖资源中获得，优选从燕麦颗粒或燕麦糠中获得。可根据本领域已知的方法，制备所述纤维，并加入到组合物中。它们是特别适于口服传递的组合物，如食物和饮食补充物。可将β-葡聚糖和其它可溶性植物纤维与任何基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂联合应用。
本发明组合物也可包含L-精氨酸，其可以以各种形式提供于本发明组合物中，如以纯化合物形式、从含有L-精氨酸植物中提取的提取物形式或者种子/坚果组分形式，如坚果粉末，或者以整个种子/坚果形式。可使用合成或天然的任何L-精氨酸资源。优选的L-精氨酸资源是大豆和坚果肉，如花生、胡桃、杏仁和榛子。可使用脱脂或部分脱脂的坚果肉。可将它们研成粉末，均称为坚果粉。
所述组合物还可含有钙、钾、镁、维生素E、维生素C、任何一种复合维生素B、类胡萝卜素、瓜耳胶或者单或多不饱和脂肪酸(如ω-3脂肪酸)，它们均可根据本领域已知的方法获得。可使用橄榄油、鱼油或坚果油形式的所述单或多不饱和脂肪酸。适于该用途的坚果的实例包括花生、胡桃和杏仁。
本发明范围之内还包括含有具有至少一种以下性质的多酚以及胆固醇降低剂的组合物诱发血管舒张作用、抑制COX活性、抑制LOX活性、抑制LDL的氧化作用、增强NOS活性、增加NO水平、抑制血小板聚集作用、单核细胞粘附和血管平滑肌增殖作用、降低血压作用、降低血栓形成作用以及调节氧化应激作用。可使用任何胆固醇降低剂，如基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂。在该组合物中，基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂能增强多酚的生物利用度。这些多酚的实例为黄烷醇(如儿茶素、表儿茶精和及其没食子酸盐衍生物)、黄酮醇(如槲皮黄酮、kaempserol、杨梅酮及其糖基化衍生物)和矢车菊苷配质(如矢车菊苷配质二聚物，其可从可可中得到)。
本发明组合物可用作食物、食品添加剂、饮食补充物或药物。该组合物可包含载体、稀释剂或赋形剂。根据所指定的用途，可选择适于人或兽用、食物、添加剂、添加物或药物用途的载体、稀释剂或赋形剂。
此处所用“食物”是指基本上由蛋白质、碳水化合物和/或脂肪组成的物质，其用于保持体内器官的生长、修复和生命过程以及提供能量。食物也包含补充物，如矿物质、维生素和调味品。见1993年第十版Merriam-Webster’s Collegiate Dictionary。术语食物包括适于人或动物食用的饮料。此处所用“食品添加剂”根据FDA中21C.F.R.170.3(e)(1)中定义，包括直接及间接的添加剂。此处所用“药物”是医用药物。见1993年第十版Merriam-Webster’s Collegiate Dictionary。药物(pharmaceutical)也可称为药物(medicament)。此处所用“饮食补充物”是一种用于补充饮食的产品(不是烟草)，其带有或包含一种或多种以下食物成分维生素、矿物质、草药或其它植物性药材、氨基酸、用于人体通过增加总日常摄取来补充饮食的食物、或者这些组分的浓缩物、代谢物、组成分、提取物或混合物。
本发明范围内还包括任何通过使胆固醇降低剂与多酚如可可多酚及其衍生物联合应用，并任选与L-精氨酸、钙、钾、镁、维生素E、维生素C、任何一种复合维生素B、类胡萝卜素、瓜耳胶和/或单或多不饱和脂肪酸(如ω-3)联合应用而改良的常用食物(包括饮料)。
如果是可可多酚，则可通过以下任一种方式进行改良(i)向不含有可可多酚的食物中加入可可多酚或其衍生物或(ii)当食物中原来含有可可多酚时，如巧克力，可通过增加原制备的食物中所发现的多酚的水平进行改良。这种改良提高可通过以下过程达到通过加入如提取物形式的添加的可可多酚；通过将可可多酚与另一种含有多酚的组分(如坚果皮)联合加入；通过按以上说明控制可可组分的处理及可可豆的选择，以保护用于制造食品的可可成分中的可可多酚；或者通过按以上说明控制巧克力生产过程。因此与相当的常用食物(包括饮料)相比，这些食物(包括饮料)包含“水平升高的多酚”(包括可可矢车菊苷配质)。当巧克力制造商将含有可可多酚的可可提取物加入到其以前市售的产品中的时候，就出现具有“水平升高的多酚”的巧克力的实例。该食物还可被称为“高可可多酚食品”，即它们含有比其传统对应物更高水平的多酚。
含有可可多酚和至少一种胆固醇降低剂(如基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂)以及任选的L-精氨酸、钙、钾、镁、维生素E、维生素C、任何一种复合维生素B、类胡萝卜素、瓜耳胶或者单或多不饱和脂肪酸(如ω-3)的食物适于人或兽用，包括宠物食品。该食物不是糖果，但是但优选的胆固醇降低剂食品是糖果，如有品质标准(SOI)或无-SOI的巧克力，如牛奶、甜味和中等甜度巧克力，包括黑巧克力、低脂巧克力和巧克力包裹的饼干。其它实例包括烘烤的产品(如界仁巧克力饼、烘烤的小吃、小甜饼、饼干)、调味品、燕麦花卷(granola)棒、太妃口嚼糖、麦片替代棒、涂抹酱、糖浆、粉末饮料混合物、可可或巧克力调味的饮料、布丁、米饼、米混合物、咸调味汁等。如果要求，这些食品可以是巧克力或可可味道。除包含可可多酚和胆固醇降低剂外，还包含L-精氨酸的食品优选是包含坚果(如花生、胡桃、杏仁和榛子)的巧克力和饼干，如燕麦花卷棒。应指出向本发明说明的食品中加入带皮的坚果也可增加总的多酚含量，原因是例如花生皮含有大约17％矢车菊苷配质，而杏仁皮含有大约30％矢车菊苷配质。在一实施方案中，向含有胆固醇降低剂的巧克力糖果的杏仁蛋白糖中加入所述坚果皮。
在优选实施方案中，含有胆固醇降低剂的非巧克力食品每克中包含至少约5μg-约10mg，例如至少5μg，优选至少10μg，更优选至少100μg的可可矢车菊苷配质。如果需要，该非巧克力食品可含有比在以下说明的巧克力食品中发现的更高水平的可可矢车菊苷配质。
特别优选的食品是胆固醇降低糖果，最优选是黑巧克力。在某些实施方案中，根据该产品中非脂肪可可固体的总量，该巧克力每克中包含至少3,600μg，优选至少4,000μg，优选至少4,500μg，更优选至少5,000μg，最优选至少5,500μg可可矢车菊苷配质。在其它实施方案中，根据该产品中非脂肪可可固体的量，该巧克力每克中包含至少6,000μg，优选至少6,500μg，更优选至少7,000μg，最优选至少8,000μg，更加优选10,000μg可可矢车菊苷配质。
根据牛奶巧克力产品中非脂肪可可固体的总量，胆固醇降低牛奶巧克力糖果每克中可包含至少1,000μg，优选至少1,250μg，更优选至少1,500μg，最优选至少2,000μg可可矢车菊苷配质。在优选实施方案中，根据该牛奶巧克力产品中非脂肪可可固体的总量，该牛奶巧克力每克中包含至少2,500μg，优选至少3,000μg，更优选至少4,000μg，最优选至少5,000μg可可矢车菊苷配质。
食品中L-精氨酸的量是可以变化的。一般地，相对于每100克部分脱脂的可可固体，可可包含1-1.1克L-精氨酸。每100g可可含0.8-1.5克。本发明的巧克力食品含有的L-精氨酸的量比该可可成分中天然存在的L-精氨酸的量高。由于知道食品中所用的可可成分和L-精氨酸的量，本领域一般技术人员可很容易确定终产品中L-精氨酸的总量。所述食品一般每克中含有至少5μg，优选至少30μg或至少60μg，更优选至少200μg的L-精氨酸。
食物中所述胆固醇降低剂的量根据所使用的降低剂的类型而定，本领域技术人员可根据本说明书的指导，尤其是以下提供的日剂量以及本领域的知识进行测定。食品组合物例如每45g食品中可包含约0.5-约10g，优选约1.5-约5g，最优选约2-约4.5g的甾醇/甾烷醇。对于燕麦中的大豆蛋白和可溶性纤维，FDA已提供了每克食品中能满足健康要求的最低量。根据FDA要求，含有β-葡聚糖的食品必须含有至少0.75g，含有大豆蛋白质的食品必须含有至少6.25g大豆蛋白质。也可将这些值用作确定食品中这些胆固醇降低剂的量的标准。
在一个优选实施方案中，该胆固醇降低剂和该可可多酚的每日有效量以单一一份食品提供。因此，一种降低胆固醇的糖果(如巧克力)每份中含有至少1.5(如1.5-4.5g)甾醇/甾烷醇，并至少含有约100mg(如150-200，200-400mg)的可可矢车菊苷配质。
包含具有本发明所提性质的多酚(如可可多酚或其衍生物)联合胆固醇降低剂以及任选的L-精氨酸的药物可通过多种途径给药，如口服、经颊(bucally)、经鼻、直肠、静脉内、非肠道和局部给药。本领域技术人员能够根据给药方式确定适当的胆固醇降低剂。因此，适于各类型给药的剂型也在本发明的范围之内，其包括固体、液体和半固体剂型，如片剂、胶囊剂、明胶胶囊、多剂量或单位剂量粉末剂或颗粒剂、乳剂、悬浮剂、糊剂、霜剂、凝胶剂、泡沫剂或胶状剂。缓释剂型也包括在本发明范围之内，其可按美国专利5,024,843；5,091,190；5,082,668；4,612,008和4,327,725中说明制备，这些专利的相关部分结合到本发明中作为参考。适当的药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂一般是本领域已知的，本领域技术人员很容易确定。例如，片剂可包含有效量的含有可可多酚的组合物以及任选的载体，如山梨糖醇、乳糖、纤维素或磷酸二钙。含有可可多酚、至少一种胆固醇降低剂以及任选的L-精氨酸的饮食补充物可通过本领域已知的方法制备，可包含例如营养素，如磷酸二钙、硬脂酸镁、硝酸钙、维生素和矿物质。
本发明范围内还包含一种商品，该商品包含一种食物、饮食补充剂或药物以及说明(i)多酚和/或其衍生物存在或含量提高以及(ii)胆固醇降低剂存在的标签。该标签可任选说明L-精氨酸的含量，混合的多酚、胆固醇降低剂和任选L-精氨酸的有利性质及其使用说明。此处所用有利的性质包括降低血浆胆固醇、总量及LDL、抑制COX活性(包括COX1活性)、抑制LOX活性、增强氧化氮生成、增加动脉粥样静态与动脉粥样产生因子(即产生的类花生酸和内皮素)的比率和抑制LDL的氧化作用，其反过来可单独或联合起来帮助降低血管收缩和血小板聚集作用、抑制单核细胞粘附、抑制血管平滑肌的过度增殖、降低血栓形成、降低血压，并由此降低与血管和心血管疾病(如动脉粥样硬化和心血管疾病)有关的风险。
本发明范围内也包含一种包装，该商品包含(i)包含具有至少一种以下性质的多酚和一种胆固醇降低剂如基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂的组合物诱发血管舒张作用、抑制COX活性、抑制LOX活性、抑制LDL的氧化作用、增强NOS活性、增加NO水平、抑制血小板聚集、单核细胞粘附和血管平滑肌增殖作用、降低血压作用、降低血栓形成作用以及调节氧化应激作用；以及(ii)使用该组合物促进血管健康(也可使用术语心血管健康)和/或降低心脏病风险的标签和/或说明书。当使用基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂时，该标签和/或说明书可说明该组合物促进或增加多酚的吸收作用。该标签和/或说明书也可说明以上提到的其它有利作用。它们是降低血浆胆固醇、总量及LDL、抑制COX活性、抑制LOX活性、增强氧化氮生成、增加动脉粥样静态与动脉粥样产生因子(即产生的类花生酸和内皮素)的比率和抑制LDL的氧化作用，其反过来可单独或联合起来帮助降低血管收缩和血小板聚集作用、抑制单核细胞粘附、抑制血管平滑肌的过度增殖作用、降低血栓形成、降低血压，并由此降低与血管和心血管疾病(如动脉粥样硬化和心血管疾病)有关的风险。
本发明范围也包括治疗和/或预防与COX活性、LOX活性、NO产生、NOS活性、LDL氧化作用和血浆总量和LDL胆固醇增加有关或受这些因素调节的疾病和/或症状的方法。此处所用“治疗”指通过影响相关疾病或症状的病理而改善存在的疾病状态，如高血压或动脉粥样硬化。术语“预防”指降低与疾病发展有关的风险，包括降低疾病的产生。可在已知高风险发病的个体或大规模人群中，采用预防措施以保持良好健康，如保持血管健康。该方法可用于人或动物(如狗、猫和马)中。
与COX活性、LOX活性、NO产生、NOS活性、LDL氧化作用和/或高胆固醇有关或受这些因素调节的疾病和/或症状包括动脉粥样硬化、高血压、冠心病(CHD)、脑血管疾病、心脏病发作、中风、外周血管疾病和肾衰竭。还包括治疗或预防高胆固醇血症(包括中度高胆固醇血症)、诱发血管舒张作用、抑制COX(包括COX1)和LOX活性、抑制LDL的氧化作用、增强NOS活性和增加NO水平、抑制血小板聚集作用、单核细胞粘附和血管平滑肌增殖作用、降低血压作用、降低血栓形成作用以及调节氧化应激作用的方法。
所述方法包括给予哺乳动物(优选人或兽类动物)一定量的包含多酚(如可可多酚)和胆固醇降低剂以及任选L-精氨酸的组合物，以有效治疗、预防或达到除降低胆固醇外的至少一种上述有利效能。所述方法还包括通过如测定血浆胆固醇水平来测定治疗效果的方法。
可将该组合物给予健康哺乳动物以达到预防目的，或者给予需要此种治疗或具有至少一种相关风险因素的哺乳动物。任何具有至少一种与血管健康问题相关的风险因素的个体都是本发明组合物治疗的受者。有家族性胆固醇水平升高、绝经期或绝经后妇女、绝经后妇女/心肌局部缺血后损伤、手术或化学性引起的雌激素缺乏的妇女、老年人、有高血糖、糖尿病、高血压和肥胖症以及吸烟的个体都是需要此处所述治疗的敏感个体。对于本领域技术人员来讲，其它易于发生血管健康问题的哺乳动物群体是显而易见的受治疗群体。
所述方法特别对于治疗或预防再狭窄有用。美国每年约有330,000患者进行冠状和/或外周血管成形术(Marx，265 Science 320，1994)，即一种打通由动脉粥样斑块阻塞的血管(如冠状动脉)而保持正常血液流动的方法。但是，这些患者中的近33％会发生再狭窄，即所治疗的动脉很快再被阻塞。这些患者未见好转，并且可能比进行血管成形术之前更坏。血管壁平滑肌细胞(SMC)的过度增殖形成再狭窄。因此，可根据技术熟练的医务人员决定，在进行血管成形术之前或之后给予含有可可多酚和胆固醇降低剂(及任选L-精氨酸)的组合物。
可给予兽类动物(如狗、猫和马)上述组合物以治疗或预防心力衰竭、瓣膜退化和慢性肾衰竭。例如可给狗服用本发明组合物以治疗下列症状慢性瓣膜疾病(房室瓣膜的心内膜炎(endocardiosis)或粘液瘤的退化)、扩张性cariomyopathy、心包病、心内膜炎、早期心律失常和犬恶丝虫病。
本发明还提供一种促进多酚吸收入人或兽类动物(如宠物)血中的方法。该方法其本质上是增加对人或动物健康有益的多酚的生物利用度，其包括联合给予该人或动物(i)具有至少一种以下性质的多酚诱发血管舒张作用、抑制COX活性、抑制LOX活性、抑制LDL的氧化作用、增强NOS活性、增加NO水平、抑制血小板聚集作用、单核细胞粘附和血管平滑肌增殖作用、降低血压作用、降低血栓形成作用以及调节氧化应激作用，和(ii)基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂。所述多酚可以是如黄烷醇或黄酮醇，其实例上文已提供。该方法可通过将所述多酚和所述甾醇/甾烷醇以同一组合物的组分形式给予或者分别给予来进行。
本领域技术人员可采用本说明书提供的指导以及本领域的一般知识来确定该有效量。例如，采用甾醇/甾烷醇要获得降低胆固的作用，应该给予超过非素食者平均饮食中一般存在的量。一典型北美饮食的人每日吸收约200-400mg。因此，当用植物甾醇(如谷甾醇)降低胆固醇水平时，应该给予约至少1g/日，优选至少约3g/日。优选使用至少约1g/日，优选至少约4.5g/日，至约20g/日的范围。但是，该量将根据所述植物甾醇降低胆固醇的效能而定，因此，例如如果使用效能更强的谷甾醇，则该量可以降低至约1-约3g/日。可采用Roger等在J.Amer.Oil Chem.Soc.70(30)1993和Carpenter等在J.Amer.OilChem.Soc.71(8)1994中说明的分析方法来确定该量。大豆蛋白可给予例如至少约25g/日。也可见National Res.Council/National Acad.Sci.，Washington，D.C.出版的第9版Recommended Daily Allowances中的指导。可溶性纤维可给予例如至少3g/日。可可多酚可给予约50mg/日至约1000mg/日，优选约100-150mg/日至约900mg/日，最优选约300mg/日至约500mg/日。但是，如果多酚天然存在于食物中且无毒性时，可使用比上述更高的量。L-精氨酸可给予约2g/日至约50g/日，优选约3g/日至约10g/日，最优选约6g/日至约8g/日。同样，如果L-精氨酸天然存在于食物中，可使用比上述更高的量。多酚一般可以以本领域所知的量给予。当确定该有效量时，也可将甾醇/甾烷醇存在时增强的吸收作用考虑在内。
治疗/预防性给药可按给药方案，如每日、每月、每两个月、每年或者必要时按技术熟练的医务工作者确定的其它给药方案继续进行。优选每日，最优选每日2或3次，例如早晨和夜晚，给予所述组合物以保持哺乳动物体内有效化合物的水平。为达到最佳效果，可给予该组合物至少约30-约60日。这些方案可周期性重复。
本发明还可通过以下非限定实施例说明。
根据Grossman & Zakut(Methods Biochem.Anal.25303-329，1979)方法，用乳化剂吐温20，使亚油酸增溶。将脂氧合酶以5000U/mL溶解于pH8.6的PBS中。将可可酚溶解于纯水中，然后用以下储备液稀释。将1-6聚物以1mM浓度溶解，提取物以1mg/mL(1g粗品丙酮提取物/L～3.0mM单体，1g富含5聚物提取物/L～3.4mM)溶解。
根据下式计算各套样品6个反应池(1个用水的对照样本，5个酚的水溶液试验样本)的抑制作用％抑制作用＝(对照品Δabs.-试验品Δabs.)/对照品Δabs.)×100。该反应混合液中包含溶解于pH7.4的PBS中的亚油酸(100μM)加上/减去试验酚的水溶液。加入终浓度为100U/mL的脂氧合酶开始反应。用Beckman Du-600UV分光光度计(37℃，吸光度234nm)，通过记录5或10分钟内的动力学扫描，测定亚油酸的过氧化氢形成的共轭二烯量度。
该可可组分的高UV吸收度未给出准确浓度下的IC50值。因此，通过将该对数回归曲线(％抑制率对log酚浓度)外推至推出试验物质达到50％抑制脂氧合酶活性下的浓度，计算出IC50值。外推的IC50值给出可可多酚提取物的脂氧合酶抑制活性的粗略值。
NDGA是大豆和几种哺乳动物脂氧合酶的既定抑制剂(Kemal等，Biochemistry 267064-7072，1987)。商业上可用作脂肪和油类的抗氧化剂。NDGA用作阳性对照，因为其IC50值为2×10-6M，其它试验酚类未能达到该值。假定(+)-儿茶素和(-)-表儿茶精结构上与可可多酚单体类似。
在摩尔基础上对所述酚类进行比较。(+)-儿茶素的脂氧合酶抑制作用(3×10-3M)比(-)-表儿茶精(3×10-1M)强两个数量级，并与+可可单体(5×10-3M)、二聚物(2×10-3M)和三聚物(2×10-3M)的抑制作用非常类似。高级低聚物的脂氧合酶抑制作用与其摩尔浓度的对数值关系不大。在终浓度0.3-25μM下，四聚物、五聚物和六聚物抑制5-30％脂氧合酶的活性。但是，酚的浓度和抑制作用并不明显相关。粗丙酮提取物呈现出与浓度相关的脂氧合酶抑制作用(IC50＝5μM，以单体为基础比较)，比单体至三聚物部分弱大约3个数量级。富含五聚物的提取物(IC50＝59M)在合理的水平上未呈现抑制脂氧合酶的活性。
可可酚提取物的大豆脂氧合酶抑制活性与(+)-儿茶素的类似。如果在摩尔水平上比较，单体至三聚物的活性之间差别很小，因此推断为对该酶的空间抑制。对于低分子量的组分(单体至三聚物)，该抑制作用可能是特异性的，原因是四聚物至六聚物化合物呈现出非常小的脂氧合酶抑制活性，而富含五聚物的提取物比含有大部分单体至三聚物低聚物部分的粗品提取物抑制作用更低。因此，可可多酚或者可通过螯合弥补性铁离子或者通过在氧化反应中借助于酚羟基清除游离基来抑制大豆脂氧合酶，其中游离基包括游离基中间体。较大的低聚物(四聚物至六聚物)可能被立体屏蔽，并因此不能解读该酶的催化部位。
实施例2可可矢车菊苷配质提取物和可可矢车菊苷配质低聚体部分对基础内皮细胞释放的前列腺素类和总内皮素(ET)的影响研究在培养基内，经纯化的矢车菊苷配质单体和可可多酚提取物中五聚物对牛和人体内皮细胞中前列腺素类前列腺环素、前列腺素(PGE2)和血栓烷以及总内皮素释放的影响。
吲哚美辛购自Cayman(Ann Arbor，MI USA)。通过1996年9月10日授权的美国专利5,554,645的实施例1-5中说明的方法，从富含矢车菊苷配质的可可豆(通过2000年1月18日公开的美国专利6,015,913中说明的方法处理)纯化单体和五聚体的矢车菊苷配质部分。
根据Hammerstone等(J.Agric.Food Chem.，472490-496，1999)的方法分析所述样本。通过质谱获得分子量纯度的确认。
根据Schramm等先前说明(J.Nutr.Biochem.8647-651，1997；J.Agric.and Food Chem.，46(5)1900-1905，1998)，在Eagle氏极限必需培养基中培养牛主动脉内皮细胞(BAEC)和人体主动脉内皮细胞(HAEC)。
将ECs(传代＜11)接种于装有EMEM的24孔培养板中，该EMEM中包含2mmol谷氨酰胺/L、10％胎牛血清、100单位青霉素/L、0.1mg链霉素/L和0.25pg两性霉素/L。将汇合细胞在250ml含有适当治疗化合物的无酚红EMEM中处理。在加入矢车菊苷配质部分(10、20和30pmol/L)并用ECs培养0和20分钟后，对用EC’s培养的培养基进行分析。将该培养基在-70℃下储存，直至通过以下说明的免疫试验进行分析。根据Bioadjieras等在Methods in Lab.Invest.50239-246，1984中说明，通过锥虫蓝排斥试验监测EC完整性。
根据Westcott等在Prostaglandins32857-873，1986；Yakota等在Adv.Prostgl.Thrombox.Leukot.Res.1533-34，1985；Schramm等在1997；1998；1999中说明的方法实施免疫试验步骤。用Cayman免疫试验#583151测定培养基总ET(ET-1+ET-2+ET-3)。用Cayman酶免疫试验#515211测定前列腺环素(PGI2)代谢物6-酮基前列腺素F1-α，用Cayman酶免疫试验#519031测定血栓烷(TXA2)代谢物TXB2，用Cayman免疫试验#514016测定PGE2。
所建立的试验条件模仿以前用过的那些条件，表明质量＜3000的酒剂部分比质量＞3000的酒剂部分对EC前列腺素合成直接产生不同的影响(Schramm等，J.Agric.and Food Chem.，46(5)1900-1905，1998)。测定对基础细胞功能的作用。细胞存活和细胞形态都不受可可矢车菊苷配质处理的影响。用BAECs培养20分钟的每毫升对照培养基中包含73.5＝+/-0.044ng TXB2和294+/-6.3pg PGE2。
如图2中所示，当与单独的对照培养基比较时，向用BAECs培养了20分钟的培养基中加入单体或五聚物可可矢车菊苷配质，可改变培养基前列腺素和ET的浓度。含有单体(A1)或五聚物(A2)矢车菊苷配质的培养基比对照培养基包含更多的6-酮基-PGF1-α。可通过单体部分(B1)以剂量依赖性方式以及通过以30μM的五聚物部分(B2)降低培养基PGE2。可可矢车菊苷配质对培养基TXB(C1-2)未呈现出明显的作用。虽然所述单体和五聚物可可矢车菊苷配质部分对6-酮基-PGF1-α和PGE2具有相似的作用，但它们对培养基ET作用相反，单体部分(D1)在30μM下增加培养基中ET的浓度，而五聚物部分(D2)以剂量依赖性方式降低培养基中的ET浓度。
图3A-B中的数据表明单体和五聚物可可矢车菊苷配质以相似的方式影响牛(BAEC)和人体(HAEC)中的主动脉ECs。
以上数据表明所述可可矢车菊苷配质引发类花生酸和内皮素作用，其起到舒张血管和降低血小板聚集/血栓形成的作用，即引发前列腺环素和抑制内皮素和前列腺素。
实施例3饮用富含矢车菊苷配质的可可饮料对血小板活性的影响研究饮用可可饮料对调节血小板活性和初期淤血的影响。
将30位无心脏病或淤血病病史的健康、不吸烟成人分成3个治疗组(a)10人(4男，6女，24-49岁)，饮用可可饮料(b)10人(4男，5女，26-50岁)，饮用咖啡因饮料作为对照组，和(c)10人(4男，6女，24-50岁)，饮用水作为对照组。所有女性均为绝经前并未服用雌激素。在试验前和试验期间，受试者至少在4日内禁止服用非甾族抗炎药物，至少2日内禁止饮用酒精饮料，并且至少24小时内禁止食用含咖啡因或可可碱的食物。
早晨8-10点期间，从每位受试者体中取血，将样本收集在2个装有0.5ml 3.2％柠檬酸钠缓冲溶液(Becton Dickinson，Franklin Lakes，NJ)的5ml排空的管中。然后试验组成员饮用300ml含有18.75g富含矢车菊苷配质可可粉末(其提供大约960mg的总矢车菊苷配质、17mg咖啡因和285mg可可碱)和12.5g蔗糖与蒸馏水混合的饮料(见Adamson，G.E.等，J.Ag.Food Chem.；1999；47(10)4184-4188)。对照组成员饮用含有17mg咖啡因和12.5g蔗糖的饮料或者饮用纯水。饮用所述饮料后2和6小时，再收集血液样本。一名女性成员在饮用可可饮料后6小时取血时未出现。
矢车菊苷配质定量如下组合标准品用市售提供的(-)-表儿茶精制备，纯品的二聚体至十聚体通过Hammerstone J.F.等在J.Ag.FoodChem.；1999；47(10)490-496中、Lazarus S.A.等在J.Ag.Food Chem.；1999；47(9)3693-3701中以及Adamson，G.E.等在J.Ag.Food Chem.；1999；47(10)4184-4188中说明的方法制备。使用这些化合物的标准储备液采用以上摘引的Adamson文献中的正相HPLC方法分析，该方法的荧光检测的激发和发射波长分别为276nm和316nm。将所有异构体的任何级别的低聚物的色谱峰分类，并将其峰面积加和，用二次方程拟和法做出校准曲线。单体和较小的低聚物几乎成线性，这与以前使用线性回归做出的以单体和二聚物为基础的校准曲线一致。
然后用这些校准曲线计算以下制备的样本中的矢车菊苷配质水平首先，用己烷三次提取(每次45mL)将所述可可或巧克力样本(约8g)脱脂。然后将1g脱脂物质用5mL丙酮/水/乙酸混合液(70∶29.5∶0.5v/v)提取。然后通过将该样本的HPLC数据与按如上说明的得到的校准曲线(其采用纯的低聚物)相比较，确定所述脱脂物质中的矢车菊苷配质的量。采用Association of Official Analytical Chemists(AOACOfficial Method 920.177)的标准方法，测定样本(1g巧克力样本或0.5g液体样本)中的脂肪百分率。然后计算原样本(带有脂肪)中总的矢车菊苷配质水平的量。在每个样本试验之前进行校正，以防止柱与柱之间的变化。
在抽血后10分钟内，将全血在聚苯乙烯试管中在存在或不存在肽Arg-Gly-Asp-Ser(Sigma，St.Louis，MO)的情况下与10μl HEPES缓冲液(pH7.4，未经刺激的对照)、20或100μM ADP或20μM肾上腺素(BioData，Horsham，PA))在室温下孵育5分钟。5分钟后，将样品悬浮于1ml HEPES缓冲液中，然后将100μM样品转移到装有饱和浓度(20μL)的每种以下荧光标记的单克隆抗体的试管中PAC1-异硫氰酸荧光素(FITC)、抗CD62P-藻红蛋白(PE)和抗CD42a-PerCP。PAC1识别纤维蛋白原结合受体GPIIb-IIIa的活化构象，而抗CD62P识别存在于活化血小板表面的P-选择蛋白。抗CD42a识别存在于活化血小板和静息血小板两者表面的GP1b-1X。小鼠IgG、FITC和小鼠IgG、PE用作同种型对照。使用Arg-Gly-Asp-Ser-肽阻断所述PAC1抗体与血小板的结合，从而在流式细胞仪上设置阴性对照标记。抗体和同种型对照购自Becton Dickinson Immunocytometry Systems，Inc.，SanJose，CA。
在存在和不存在激动剂ADP和肾上腺素的情况下，将全血样品与单克隆抗体或同种型对照在室温下避光孵育20分钟。然后将样品在经过滤的1％低聚甲醛(pH7.2)中固定，于2-8℃避光保存。所有样品都在48小时内在FACScan流式细胞仪上运用LYSYS II软件进行分析。该流式细胞仪的性能使用1μm、2μm和10μm校准微珠(BectonDickinson Immunocytometry Systems，Inc.，San Jose，CA和FlowCytometry Systems，Research Triangle Park，NC)加以证实。以列表方式收集2万个事件的对数代码(in logarithmic code)的全光散射和荧光参数。基于光散射和CD42a表达门控血小板。活化血小板定义为共表达GPIIb-IIIa或P-选择蛋白活化构象的CD42a阳性事件百分率。血小板微粒定义为大小小于2μm的CD42a阳性事件百分率。
采用血小板功能分析仪(PFA-100TM，Dade Behring International，Miami，FL)，根据生产厂指导说明，在四小时内，分析三个研究时间点各自所取的血液样本。见Mammen等在Sem.Thromb.Hemostas.24195-202，1998和Fressinaud等在Blood 911325-31，1998中说明。将功能作为以秒计的闭合时间测量，该闭合时间被定义为血液闭合试验膜通道的孔径所需要的时间。
采用秩的Friedman重复测定ANOVA方法，按顺序对各治疗组和对照组数据进行方差分析(SigmaStat for Windows，SPSS，Richmond，CA)。用Student-Newman-Keuls多次对比法确定基线与2和6小时饮用后结果之间的差别。认为P值小于0.05具有统计学意义。
在摄食后2和6小时时，饮用可可能抑制未经刺激的(P＝0.035，图4A)离体肾上腺素诱发(P＝0.008，图4B)的活化GPIIb-IIIa的表达。在摄食后0、2和6小时时，未受刺激的表达活化GPIIb-IIIa的血小板的中值百分率分别为0.9、0.5和0.3％，对应的肾上腺素诱发的中值百分率分别为9.6、6.8和3.3％。而饮用咖啡因饮料的对照组中的肾上腺素刺激的活化GPIIb-IIIa表达增加(P＝0.048，饮用后0、2和6小时时的中值＝5.3％、6.5％和7.5％)。饮水的对照组中没有变化。
摄食后2和6小时，所述可可能降低血小板上20μM ADP-诱发的活化GPIIb-IIIa的表达(P＜0.001，图4C，摄食后0、2和6小时时间点处的中值分别为58.5、44.2和38.8％)。当通过100pm ADP诱发活化时，该趋势认定能降低摄食可可后血小板上活化GPIIb-IIIa的表达(P＝0.067，摄食后0、2和6小时时间点处的中值分别为76.5、68.7和57.6％)。在饮用咖啡因饮料和水的对照组别中，ADP诱发的活化GPIIb-IIIa的表达无变化。
监测到摄食可可后没有降低P-选择蛋白表达(P＝0.053，图5A)的明显趋势。饮用可可能降低摄食后2和6小时时的20μM ADP-诱发的P-选择蛋白表达(P＝0.007，图5C)，摄食后0、2和6小时时的100μM ADP-诱发的P-选择蛋白分别为56.1、54.7和41.7％。
没有发现饮用含咖啡因饮料或水的对照组中血小板兴奋或抑制作用的现象。
通过血细胞计数检测的饮用可可饮料后的血小板微粒数目在从基线开始2小时时降低，在6小时时进一步降低(参见表1)。相反地，在饮水后2和6小时以及在饮用含咖啡因饮料后6小时时，血小板微粒数目增加。血小板微粒是在生理性血小板活化期间形成的具有止血活性、含丰富磷脂的微泡。
↑总CD42正向作用的微粒百分率。数值代表中值(范围)，每组n＝10。
*与“饮用之前”明显不同(P＜0.05)。
饮用所述可可饮料后6小时，使胶原蛋白-肾上腺素诱发的闭合时间延长(见表2)。由此表明饮用可可饮料能延缓与血小板相关的初期淤血。观察到在胶原蛋白-ADP-诱导后闭合时间的延长趋势(p＝0.097)；在所述咖啡因对照组中，闭合时间没有变化。
↑以秒计与血小板相关的初期淤血闭合时间。数值代表中值(范围)，每组n＝10。
*与“饮用之前”明显不同(P＜0.05)。
采用秩的Friedman重复测定ANOVA方法，然后用Student-Newman-Keuls多次对比法。
结果表明饮用所述巧克力饮料可改变人体中的血小板功能。首先，在摄食可可后，血小板活化降低，该活化通过血小板活化标记物对体外弱激动剂的响应表达测定。其次，摄食可可后，血小板微粒形成降低。第三，所述可可的摄食对血小板功能引起阿司匹林样效应，该效应可通过与血小板相关的初期淤血测定。所述咖啡因饮料对照组引起肾上腺素诱发的活化GPIIb-IIIa表达以及微粒形成的增加的事实表明可可饮料中存在的可可矢车菊苷配质具有抑制血小板活化和作用的功能。
实施例4口服可可对胆固醇抑制血管内皮依赖性松弛(EDR)的影响已有报道表明某些含有黄酮类化合物的植物提取物能体外诱发家兔主动脉的EDR。我们研究了慢性口服可可对EDR的影响，并研究了其对食用胆固醇时出现的EDR损失的保护性活性。以4种食物，将新西兰白兔喂养7周(1)食物，(2)食物+200mg可可/日，(3)2％胆固醇3周，接着4周食物，(4)2％胆固醇3周，接着4周食物+200mg可可/日。在悬垂于器官浴液(20ml)中的主动脉环上测定EDR。将该环用去甲肾上腺素(NE)(10-5M)预收缩。EDR对乙酰胆碱(Ach)和可可五聚物提取物(10-7-10-5M)的效应按对NE松弛作用的百分率测定。
*与表栏中其它数据明显不同实施例5口服可可矢车菊苷配质、植物甾醇及其混合物的作用本试验结果表明食用妥尔油(“植物甾醇”)中的非酯化植物甾醇和植物甾烷醇与可可粉(CPd，含约70mg/g总可可矢车菊苷配质)混合物(1)对氧化应激和损伤的指数以及(2)对胆固醇水平的影响，并说明植物甾醇与可可矢车菊苷配质联合服用的协同作用。
在纯蛋壳中补充植物甾醇(2wt％)和/或CPd(0、0.5、1、2wt％)，给雄性大鼠喂食2周。将所述大鼠分成8组(每组3只)，根据下表每日喂食20-25克对照和试验食物饮食+2％植物甾醇(440mg/d)饮食-植物甾醇1组 0％CPd(0.0mg/d) 5组0％CPd(0.0mg/d)2组 .5％CPd(110mg/d) 6组.5％CPd(110mg/d)3组 1％CPd(220mg/d) 7组1％CPd(220mg/d)4组 2％CPd(440mg/d) 8组2％CPd(440mg/d)无限制喂水，通过称量在食物杯下收集的剩余/溅落的食物的重量，确定食用量。每日测定食用的食物量，每隔一日给大鼠称重。
测定该氧化损伤/应激参数、胆固醇水平以及表儿茶精吸收入血浆中的水平。
采用Yagi(Biochem Med 15212-6，1976)说明的改进方法，测定血浆TBARS。将100μL全血加入到1ml生理盐水中，以1700g速度离心15分钟。收集上清液，在-70℃下冷冻至分析使用。用磷钨酸/硫酸体系将脂质沉淀、分离。然后使该脂质部分与硫代巴比土酸反应，用1，1’，3，3’-四乙氧基丙烷作标准物，通过荧光测定法测定所得产物。结果以每毫升血浆中MDA的纳摩尔表示，是血浆多不饱和脂肪酸的浓度的函数。
按如下方法测定8-羟基-2’-脱氧鸟苷(8OH2’dG)。采用Wako DNA提取WB试剂盒(Wako Chemical USA，Inc.，Richmond，VA)分离核DNA。将组织(100-250mg)或细胞(106细胞)在该试剂盒溶胞缓冲液中均化，然后在4℃下，以10,000g的速度离心20秒。将沉淀用该溶胞缓冲液处理，将得到的沉淀溶解于该试剂盒的酶反应溶液中。加入RNA酶至终浓度20μg/ml，将样本在50℃下温育10分钟。加入试剂盒的蛋白酶溶液，继续在50℃下再温育1小时。室温下，将样本以10,000g的速度离心5分钟，将上清液用试剂盒的NaI溶液和异丙醇处理，纯化DNA。室温下，以10,000g的速度离心10分钟收集沉淀，用试剂盒中的溶液A和B洗涤。将最后的沉淀物简单进行空气干燥，然后再混悬于200μlpH 4.8的0.1mM desferyl/20mM乙酸钠中。根据Shigenaga等(Methods Enzymol 23416-33，1994)的稍许修改方法，进行该DNA酶切消化和分析。简单地讲，通过在65℃下与终浓度为0.1mg/ml的核酸酶P1一起温育15分钟，将DNA消化成核苷酸5’-单磷酸酯。用pH 8.5的1M Tris-HCl调节pH，然后用牛小肠碱性磷酸酯酶进一步将样本消化成核苷酸(1小时，37℃)。用pH 5.1的3M醋酸钠缓冲液调节样本pH，加入0.1mM EDTA/0.1mM desferyl抑制金属诱发的氧化反应。通过30,000MW断流旋转滤器过滤样本，然后置于HPLC注射瓶中。在制备48小时内分析样本以防止人工产物形成。分析时，将样本注入装备有电化学检测器(ESA，Coulochem II)的Hewlett Packard 1100 HPLC中。采用Supelcosil LC-18-DB柱(150×4.6mm，3微米粒度)，以带有5％甲醇的100mM乙酸钠缓冲液pH5.2为流动相，以1.0ml/min流速的无梯度洗脱进行分离。采用电化学检测器，在450mV下检测OH8dG，用UV检测器在248nm下检测2’-脱氧鸟苷(dG)。以相对于样本中dG的量表达OH8dG的水平。
按Rein等在J.of Nutr.，2000，130(8S)，2109S-2114S中说明的方法测定表儿茶精的吸收。
结果该结果确证了联合给服植物甾醇和多酚的出乎意料的好处。
参见图6，吸收的表儿茶精的量以剂量依赖性方式增加。令人惊奇的是，服用植物甾醇能增加表儿茶精的吸收，因此，例如与摄食不含植物甾醇的食物相比，服用2wt％CPd的食物，表儿茶精血浆水平增高约30％因此，所述植物甾醇能增大表儿茶精的生物利用度。
参见图7，CPd以剂量依赖方式抑制对DNA的氧化损伤。令人惊奇的是，在服用高剂量CPd(2wt％)时，观测到在对DNA的氧化损伤中的意外的降低作用，这表明植物甾醇和CPd在抑制对DNA氧化损伤中的协同作用。
参见图8，喂食含有植物甾醇的食物可令人吃惊地引起比对照食物组更高的氧化应激，即将植物甾醇与食物(不含可可矢车菊苷配质)一起食用加重该氧化应激，该方法是本申请提出之前本领域中所推荐的方法。喂食可可矢车菊苷配质能逆转或减弱植物甾醇的这种副作用。
也对总血浆胆固醇进行了测定，结果见表3。
表3血浆总胆固醇
参见表3，如所料想的一样，植物甾醇能降低胆固醇水平。但是，令人惊奇的是，当将植物甾醇与CPd一起服用时，胆固醇水平以剂量依赖方式更加降低。例如，喂食含植物甾醇食物的3只大鼠的平均总胆固醇水平为84mg/dl。将该食物中补充2wt％CPd使总胆固醇水平降至80mg/dl，该结果表明了这两种化合物的协同作用。喂食对照食物的大鼠其平均胆固醇水平为88.3mg/dl。
实施例6包含胆固醇降低剂并结合含有可可矢车菊苷配质的可可或巧克力的食物组合物制备包含胆固醇降低剂的黑巧克力、太妃口嚼糖和燕麦花卷棒。
太妃口嚼糖的制备，可采用表4中所示的组分，通过先将糖与可可混合，再与焦糖混合进行。将游离的植物甾醇(原型或粉末化)加入到该糖和可可的混合物中。
表4.含植物甾醇的太妃口嚼糖
含有游离甾醇的黑巧克力可采用市售提供的黑巧克力(Mars公司的DOVE Dark)制备。为易于与熔化的巧克力混合并避免对该巧克力结构产生任何负面影响，用IKA制造的Universal Muche M20，将颗粒形式的植物甾醇/甾烷醇研磨30-60秒，混合，再研磨30秒，直至该颗粒的大小与巧克力的体积相当。将黑巧克力熔化，通过慢慢混合加入植物甾醇，以保证甾醇颗粒的均匀分布。得到的组合物见表5所示。
表5.含植物甾醇的黑巧克力
采用表6和7中所列的组分制备包含具有降低胆固醇作用的燕麦纤维的燕麦花卷棒。该糖浆粘合剂可通过将棕榈核油在45C融化，然后在该温度下保存备用来制备。将玉米糖浆、甘油、可可粉、红糖、盐、卵磷脂和没食子酸丙酯混合，然后加入棕榈核油。将混合液保温。为制备燕麦花卷，将涨泡的燕麦或大豆(购自Sovex Food，Collegedale，TN)与所述巧克力片一起混合，将按以上说明制备的温热糖浆粘合剂合并入混合液中。然后将该燕麦花卷混合物制成厚片，撒上10X糖(62％)、可可粉(33％)和桂皮(5％)的混合物，切成片状。该混合物中所用的可可粉可根据Kealey等的美国专利6,015,913的方法制备。
表6.含巧克力和燕麦的燕麦花卷棒
表7.含巧克力和大豆蛋白的燕麦花卷棒
权利要求
1.一种药物、饮食补充剂或食品添加剂，其包含可可矢车菊苷配质单体和/或低聚物以及基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂。
2.权利要求1的药物、饮食补充剂或食品添加剂，其还包含大豆蛋白、可溶性纤维和/或L-精氨酸。
3.权利要求1的药物、饮食补充剂或食品添加剂，其还包含至少一种以下物质钙、钾、镁、维生素E、维生素C、任何一种复合维生素B、类胡萝卜素、瓜耳胶或者单或多不饱和脂肪酸。
4.权利要求1的药物、饮食补充剂或食品添加剂，其中所述可可矢车菊苷配质单体和/或低聚物以可可成分、含有矢车菊苷配质的可可提取物或者含有至少一种矢车菊苷配质单体或低聚物的可可提取物的部分的形式存在。
5.一种不是糖果的食品，其包含可可矢车菊苷配质单体和/或低聚物以及基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂。
6.权利要求5的食品，其还包含大豆蛋白、可溶性纤维和/或L-精氨酸。
7.权利要求5的食品，其还包含至少一种以下物质钙、钾、镁、维生素E、维生素C、任何一种复合维生素B、类胡萝卜素、瓜耳胶或者单或多不饱和脂肪酸。
8.权利要求5的食品，其中所述可可矢车菊苷配质单体和/或低聚物以可可成分、含有矢车菊苷配质的可可提取物或者含有至少一种矢车菊苷配质单体或低聚物的可可提取物的部分的形式存在。
9.权利要求5的食品，其中所述食品为饮料。
10.权利要求5的食品，其中所述食品为宠物食品。
11.一种降低胆固醇的糖果，其包含可可矢车菊苷配质单体和/或低聚物以及基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂。
12.权利要求11的糖果，其还包含大豆蛋白、可溶性纤维和/或L-精氨酸。
13.权利要求11的糖果，其还包含至少一种以下物质钙、钾、镁、维生素E、维生素C、任何一种复合维生素B、类胡萝卜素、瓜耳胶或者单或多不饱和脂肪酸。
14.权利要求11的糖果，其中所述可可矢车菊苷配质单体和/或低聚物以可可成分、含有矢车菊苷配质的可可提取物或者含有至少一种矢车菊苷配质单体或低聚物的可可提取物的部分的形式存在。
15.权利要求11的糖果，其中所述糖果是巧克力、巧克力包裹的饼干、烘烤产品和燕麦花卷棒。
16.权利要求11的糖果，其中所述糖果具有至少一种以下的性质诱发血管舒张、抑制LOX活性、抑制LDL的氧化作用、增强NOS活性、增加NO水平、抑制血小板聚集、单核细胞粘附和血管平滑肌增殖、降低血压、降低血栓形成以及调节氧化应激。
17.一种降低胆固醇的巧克力，其包含可可矢车菊苷配质单体和/或低聚物以及基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂。
18.一种包装，其包含权利要求5-10中任一项的食品或权利要求11-17中任一项的糖果以及使用所述食品或糖果促进心血管健康和/或降低心脏疾病风险的标签和/或说明书。
19.一种包装，其包含权利要求5-10中任一项的食品或权利要求11-17中任一项的糖果以及使用所述食品或糖果诱发血管舒张、抑制LOX活性、抑制LDL的氧化作用、增强NOS活性、增加NO水平、抑制血小板聚集、单核细胞粘附和血管平滑肌增殖、降低血压、降低血栓形成以及对抗氧化应激的标签和/或说明书。
20.一种包装，其包含权利要求5-10中任一项的食品或权利要求11-17中任一项的糖果以及用于说明该食品或糖果能促进和/或增强可可矢车菊苷配质吸收的标签和/或说明书。
21.一种包装，它包含(i)一种组合物，该组合物包含一种具有至少一种以下性质的多酚和一种基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂诱发血管舒张、抑制COX活性、抑制LOX活性、抑制LDL的氧化作用、增强NOS活性、增加NO水平、抑制血小板聚集、单核细胞粘附和血管平滑肌增殖、降低血压、降低血栓形成以及调节氧化应激；以及(ii)使用该组合物促进心血管健康、降低心脏病风险和/或促进或增强该多酚吸收的标签和/或说明书。
22.权利要求21的包装，其中所述多酚是黄烷醇。
23.权利要求21的包装，其中所述多酚是黄酮醇。
24.一种包装，它包含(i)一种组合物，该组合物包含一种具有至少一种以下性质的多酚和一种胆固醇降低剂诱发血管舒张、抑制COX活性、抑制LOX活性、抑制LDL的氧化作用、增强NOS活性、增加NO水平、抑制血小板聚集、单核细胞粘附和血管平滑肌增殖、降低血压、降低血栓形成以及调节氧化应激；以及(ii)使用该组合物促进血管健康和/或降低心脏病风险的标签和/或说明书。
25.权利要求24的包装，其中所述多酚是黄烷醇。
26.权利要求25的包装，其中所述黄烷醇是可可黄烷醇。
27.权利要求24的包装，其中所述多酚是黄酮醇。
28.权利要求24的包装，其中所述多酚是与黄烷醇相关的低聚物。
29.权利要求28的包装，其中所述与黄烷醇相关的低聚物是可可矢车菊苷配质低聚物。
30.一种组合物，其包含一种具有至少一种以下性质的多酚和一种胆固醇降低剂诱发血管舒张、抑制COX活性、抑制LOX活性、抑制LDL的氧化作用、增强NOS活性、增加NO水平、抑制血小板聚集、单核细胞粘附和血管平滑肌增殖、降低血压、降低血栓形成以及调节氧化应激。
31.一种促进人或动物的心血管和/或血管健康的方法，它包括给予该人或动物一种包含多酚和胆固醇降低剂的组合物。
32.权利要求31的方法，其中所述多酚是可可矢车菊苷配质单体和/或低聚物。
33.权利要求31的方法，其中所述胆固醇降低剂是基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂。
34.权利要求32的方法，其中所述胆固醇降低剂是基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂。
35.一种促进多酚吸收入人或动物血中的方法，该方法包括联合给予该人或动物(i)一种具有至少一种以下性质的多酚诱发血管舒张、抑制COX活性、抑制LOX活性、抑制LDL的氧化作用、增强NOS活性、增加NO水平、抑制血小板聚集、单核细胞粘附和血管平滑肌增殖、降低血压、降低血栓形成以及调节氧化应激，和(ii)一种基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂。
36.权利要求35的方法，其中将所述多酚和所述基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂分别给予。
37.权利要求35的方法，其中将所述多酚和所述基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂在同一组合物中给予。
38.权利要求35的方法，其中所述多酚是黄烷醇。
39.权利要求36的方法，其中所述多酚是黄烷醇。
40.权利要求37的方法，其中所述多酚是黄烷醇。
41.可可矢车菊苷配质和基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂在制造用于促进人或动物血管健康的药物、食品、饮食补充剂或食品添加剂中的用途。
42.基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂在制造与可可矢车菊苷配质一起应用来促进人或动物血管健康的药物、食品、饮食补充剂或食品添加剂中的用途。
43.可可矢车菊苷配质在制造与基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂一起应用来促进人或动物血管健康的药物、食品、饮食补充剂或食品添加剂中的用途。
44.多酚和基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂在制造用于促进多酚吸收入人或动物血中的药物、食品、饮食补充剂或食品添加剂中的用途。
45.基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂在制造与多酚一起应用来促进多酚吸收入人或动物血中的药物、食品、饮食补充剂或食品添加剂中的用途。
46.多酚在制造与基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂一起应用来促进多酚吸收入人或动物血中的药物、食品、饮食补充剂或食品添加剂中的用途。
47.权利要求44-46中任一项的用途，其中所述多酚是黄烷醇。
48.权利要求47的用途，其中所述黄烷醇是可可黄烷醇。
49.一种促进血管健康的产品，其包含分别、同时或顺次应用的多酚和基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂。
50.联合应用促进血管健康的多酚和基于甾醇和/或甾烷醇的胆固醇降低剂。
全文摘要
本发明涉及含有多酚例如可可多酚(如矢车菊苷配质)和至少一种胆固醇降低剂的组合物，以及促进血管健康包括治疗和预防动脉粥样硬化和心血管疾病的方法。
文档编号A61K36/61GK1436047SQ01810924
公开日2003年8月13日 申请日期2001年4月10日 优先权日2000年4月14日
发明者H·H·施米茨, K·A·彻沃西, A·多姆布罗施基, R·杰罗梅 申请人:马尔斯公司