专利名称：含抗肿瘤药物和羟肟酸衍生物且具有抗肿瘤增强活性和/或副作用降低的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明是申请日为1998年6月22日的中国专利申请98807103.7的分案申请，原案的发明名称为“含抗肿瘤药物和羟肟酸衍生物且具有抗肿瘤增强活性和/或副作用降低的药物组合物”。
本发明涉及具有抗肿瘤活性增强和/或副作用降低的药物组合物。
抗肿瘤药物(细胞抑制剂)的有效部分通过抑制DNA和RNA的合成，特别是通过破坏完整的DNA来破坏肿瘤细胞的活动。已知的抗肿瘤药物会严重破坏健康细胞，导致线粒体和核染色体发生突变和缺失。除了主要的抗肿瘤作用，抗肿瘤药物经常造成细胞的普遍破坏。这样，治疗往往由于副作用而不能继续下去，甚至造成患者死亡。因此，抗肿瘤治疗中最关键的问题是患者对细胞抑制剂的严重副作用的敏感性。
由于上述问题，制备具有细胞抑制剂的抗肿瘤活性或增强的抗肿瘤活性、同时没有副作用或至少副作用降低的药物组合物非常重要。
本发明的目的是提供一种药物组合物，其中已知的抗肿瘤活性物质的活性或被增强或被保持而同时已知活性物质的副作用则被降低。
式I的羟肟酸衍生物是现有技术中已知的 其中R1是氢或C1-5烷基；R2代表氢；C1-5烷基；C3-8环烷基；或选择性地被羟基或苯基取代的苯基；或者R1和R2和相邻的氮原子形成5-8元环，该环选择性地含有其他的氮、氧或硫原子；所述的环可以与其他脂环烃或杂环稠合，优选与苯、萘、喹啉、异喹啉、吡啶或吡唑啉环稠合；此外，如果需要或可能，氮和/或硫作为杂原子以氧化物或二氧化物形式存在；
R3代表氢或选择性地被一个或多个卤素原子或C1-4烷氧基取代的苯基、萘基或吡啶基；Y是氢；羟基；选择性地被氨基取代的C1-24烷氧基；含有1-6个双键的C2-24多烯基氧基C1-25烯酰基；C3-9烯酰基；或式R7-COO-基团，其中R7是有1-6个双键的C2-30多烯基；X代表卤素原子；氨基；或C1-4烷氧基；或X和B一起形成氧原子；或X和Y与相邻的碳原子和中间的-NR-O-CH2-基团形成式(a)的环， 其中Z是氧或氮；R是氢；或R和B一起形成化学键；A代表C1-4亚烷基或化学键；或式(b)代表的基团， 其中R4代表氢；C1-5烷基C3-8环烷基；或优选被卤原子，C1-4烷氧基或C1-5烷基取代的苯基；R5代表氢；C1-4烷基；或苯基；m是0，1或2；和n是0，1或2。
US 4308399公开了属于式(I)羟肟酸衍生物范围的化合物，用于治疗糖尿病性血管疾病。
EP-PS No.417210描述了也属于式(I)化合物的范围的羟肟酸卤化物，具有选择性的β-阻断作用，用于治疗糖尿病性血管疾病。
HU-PS在No.T/66350中公开了一些其他属于式(I)化合物范围的羟肟酸衍生物。这些已知的物质被用于治疗血管变形，特别是糖尿病。
从PCT专利申请No.WO 97/13504中可以了解到，式(I)羟肟酸衍生物可用于预防和治疗线粒体源疾病。
本发明的目的是提供一种具有已知细胞抑制剂的作用但将其副作用程度降低的药物组合物。
已经发现上述目的可以通过本发明药物组合物来实现。本组合物包括已知的细胞抑制剂或，如果需要或可能，其可治疗用的酸加成盐或其治疗适用盐和式(I)羟肟酸衍生物，其中R，R1，R2，R3，A，B，X和Y如上所述，或其治疗适用的酸加成盐和一种或多种可用的载体。
从本发明的角度，与式(I)有关的取代基如下-C1-5烷基代表例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基或正戊基，优选甲基或乙基；-C3-8环烷基是，例如环丙基、环戊基、环己基、环庚基或环辛基，优选环戊基或环己基；-5-8元坏可以是，例如吡咯、吡唑、咪唑、噁唑、噻唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、哌嗪、吗啉、吲哚或喹啉环等；-C1-24烷氧基可以是，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、叔丁氧基、正戊氧基、癸氧基、十二烷氧基、十八烷氧基等；-C1-5烷酰基代表，例如甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、己酰基、棕榈酰基、或硬脂酰基等；-C3-9烯酰基表示，例如丙烯酰基、戊烯酰基、己烯酰基、庚烯酰基、辛烯酰基等；C1-4亚烷基可以是，例如亚甲基、1，2-亚乙基、亚丙基或亚丁基；-卤素为，例如氟、氯、溴或碘，优选氯或溴。
Y为R7-COO-基团时可以是，例如亚麻酰氧基、亚油酰氧基、二十二碳己酰氧基、二十碳五酰氧基或花生四烯酸酰氧基等；
式(I)化合物的生理学(治疗)适用的酸加成盐指与治疗适用的无机酸如盐酸或硫酸等形成的酸加成盐；或与治疗适用的有机酸，如乙酸、富马酸或乳酸等形成的酸加成盐。
式(I)化合物中，优选式(II)羟肟酸衍生物， 其中R1，R2，R3，R4，R5，m和n如式(I)所定义的，X指卤素或氨基；Y代表羟基。
式(II)化合物，其中R1和R2与相邻的氮原子一起形成哌啶子基；R3是吡啶基；m和n都是0；X如上定义，特别优选这些O-(3-哌啶子基-2-羟基-1-丙基)烟酸酰氨肟二盐酸盐(化合物“L”)是特别适宜的。
-另一类优选的式(I)化合物是式(III)化合物， 其中R1，R2，R3和A如式(I)定义。
第三个优选的式(I)羟肟酸衍生物包括式(IV)环状化合物， 其中R1，R2，R3和A如式(I)定义，Z是氧或氮。
另一个优选的式(I)羟肟酸衍生物包括式(V)化合物，
其中R1，R2，R3和A如式(I)定义，R6代表C1-4烷基。
式(I)化合物可以用US-PS 4308399，EP-PS 417210以及已公开的匈牙利专利申请T/66350中述及的方法制备。
从活性角度说，已知的细胞抑制剂(物质)具有这样的活性成分，能直接或间接地抑制肿瘤细胞的DNA合成和/或转录(RNA合成)和/或翻译；或破坏已形成的DNA。
具有抗肿瘤活性的已知药物化合物是能够直接或间接抑制DNA合成和/或转录(RNA合成)和/或翻译，及破坏癌细胞中的完整DNA的化合物。详细地说，有抗肿瘤活性的已知药物化合物抑制-腺苷脱氨酶，-嘌呤碱基的生物合成及核苷酸的转化，-嘧啶碱基的生物合成，-核糖核甙酸的还原，-胸腺嘧啶单磷酸酯(盐)的合成，-RNA的合成-DNA的加成，-DNA的合成，-DNA的损坏，-嘌呤碱基的合成和二氢叶酸盐的还原，-蛋白合成和天门冬酰胺的脱氨基化；-增殖作用。
从化学结构的角度讲，已知的细胞抑制剂可以是-烷基化剂，包括含氮芥子衍生物、吖丙啶和甲基蜜胺衍生物；烷基磺酸酯；亚硝基脲；吖丙啶；三氮烯等；
-抗代谢物，有叶酸类似物、嘧啶类似物、嘌呤类似物等；-天然物质，包括长春花属生物碱、鬼臼毒素、抗生素等；-激素，包括肾上腺皮脂类固醇、雌激素、雄激素、抗雌激素等，和-其他物质，如复合成形剂。
在已知的细胞抑制剂中，例如优选的烷基化剂如下氮芥 2-氯-N-(2-氯乙基)-N-甲基-乙胺盐酸盐，氮芥氧化物2-氯-N-(2-氯乙基)-N-甲基-乙胺N-氧化物，环磷酰胺 N，N-双(2-氯乙基)-四氢-2H-1，3，2-氧氮杂膦英(oxazaphosphorin)-2-胺-2-氧化物，异环磷酰胺N，3-双(2-氯乙基)-四氢-2H-1，3，2-氧氮杂膦英-2-胺-2-氧化物，苯丙氨酸氮芥 4-[双(2-氯乙基)氨基]-L-苯基-丙氨酸，苯丁酸氮芥4-[双(2-氯乙基)氨基]-苯基丁酸，噻替派三亚乙基-硫代磷酸酰胺，白消安二甲磺酸1，4-丁二醇酯，卡氮芥1，3-双(2-氯乙基)-1-亚硝基脲，罗氮芥1-(2-氯乙基)-3-环己基-1-亚硝基脲，司莫司汀 1-(2-氯乙基)-3-(4-甲基环己基)-1-亚硝基脲，英丙舒凡 N，N-双(3-甲基磺酰氧-丙基)-胺，哌泊舒凡 1，4-双(3-甲磺酰基氧-1-氧代-丙基)哌嗪，苯佐替派 双(1-吖丙啶基)氧膦基氨基甲酸苯基甲基酯，美妥替哌 双(2，2-二甲基-1-吖丙啶基)氧膦基氨基甲酸乙基酯，乌瑞替哌 双(1-吖丙啶基)氧膦基氨基甲酸乙基酯，卡波醌2-[(2-氨基羰基氧)-1-甲氧基乙基]-3，6-双(1-吖丙啶基)-5-甲基-2，5-环己二烯-1，4-二酮，
六甲蜜胺N，N，N’，N’，N”，N”-六甲基-1，3，5-三嗪-2，4，6-三胺，三亚乙基磷酰三(1’-吖丙啶基)膦氧化物，胺三羟甲蜜胺 2，4，6-三(羟甲基氨基)-1，3，5-三嗪萘氮芥 N，N-双(2-氯乙基)-2-萘胺，环磷酰胺N，N-双(2-氯乙基)-四氢-2H-1，3，2-氧氮杂膦英-2-胺2-氧化物，雌莫司汀雌-1，3，5(10)-三烯-3，17-二醇-3-[双(2-氯乙基)氨基甲酸酯]，新恩比兴2-氯-N，N-双(2-氯乙基)丙-胺盐酸盐，苯芥胆甾醇 胆甾-5-烯-3β-醇-4-[双(2-氯乙基)氨基]-苯基乙酸酯，泼尼莫司汀 21-{4-[4-[双(2-氯乙基)氨基]苯基]-1-氧代丁氧基}-11，17-二羟基孕烷-1，4-双烯-3，20-二酮，氯乙环磷酰胺N，N，3-三(2-氯乙基)四氢-2H-1，3，2-氧氮杂膦英-2-胺2-氧化物，乌拉莫司汀 5-[双(2-氯乙基)氨基]-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮，氯尿菌素2-[(2-氯乙基)-亚硝基氨基羰基氨基]-2-脱氧-D-葡萄糖，福莫司汀[1-[(2-氯乙基)-亚硝基氨基羰基氨基]乙基]磷酸二乙基酯，尼莫司汀N’-[(4-氨基-2-甲基-5-嘧啶基)甲基]-N-(2-氯乙基)-N-亚硝基脲，雷莫司汀甲基6-[(2-氯乙基)亚硝基氨基羰基氨基]-6-脱氧-D-吡喃葡萄糖苷，
甘露莫司汀 1，6-双(2-氯乙基氨基)-1，6-二脱氧-D-甘露醇二盐酸盐，二溴甘露醇 1，6-二溴-1，6-二脱氧-D-甘露醇，二溴卫矛醇 1，6-二溴-1，6-二脱氧半乳糖醇，哌泊溴烷1，4-双(3-溴-1-氧代丙基)-哌嗪，迪卡泊嗪5-(3，3-二甲基-1-三氮烯基)咪唑-4-羧酰胺。
优选的代谢拮抗物如下甲氨蝶呤N-[4-[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基-甲基氨基]苯甲酰基]-L-谷氨酸或其钠盐；三甲曲沙5-甲基-6-[(3，4，5-三甲氧基苯基)-氨基甲基]-2，4-间二氮杂萘-二胺，氟尿嘧啶 5-氟-2，4(1H，3H)嘧啶二酮或其钠盐，氟尿苷 5-氟-2’-脱氧尿苷，碘苷 5-碘-2’-脱氧尿苷，去氧氟尿苷 5’-脱氧-5-氟尿苷，阿糖孢苷4-氨基-1β-D阿拉伯呋喃糖基-2(1H)-嘧啶酮，氮杂孢苷4-氨基-1β-D核糖呋喃糖基-1，3，5-三嗪-2(1H)-酮，吉西他滨2’，2’-二氟-脱氧胞苷，巯基嘌呤6-巯基嘌呤，硫代鸟嘌呤 6-硫代鸟嘌呤，氟达拉滨9β-D-阿拉伯呋喃糖基-2-氟-9H-嘌呤-6-胺磷酸盐，喷司他丁(R)-3-(2-脱氧-β-D-赤-五呋喃糖基)-3，6，7，8-四氢咪唑并[4，5-d][1，3]二吖庚因(二氮杂)-8-醇，克拉屈滨2-氯-脱氧腺苷，
硫咪嘌呤6-(1-甲基-4-硝基-1H-咪唑-5-基硫基)-1H-嘌呤-2-胺，安西他滨2，3，3a，9a-四氢-3-羟基-6-亚氨基-6H-呋洲 [2’，3’，4，5]噁唑并[3，2-a]嘧啶-2-甲醇，氮杂胞苷4-氨基-1-β-D-核糖呋喃糖基-1，3，5-三嗪-2(1H)-酮，氮尿苷 2β-D-核糖呋喃糖基-1，2，4-三嗪-3，5(2H，4H)-二酮，卡莫氟 5-氟-N-己基-3，4-二氢-2，4-二氧代-1(2H)-嘧啶甲酰胺，依诺他滨N-(1β-D-阿拉伯糖呋喃糖基-1，2-二氢-2-氧代-4-嘧啶基)二十二烷酰胺，替加氟 5-氟-1-(四氢-2-呋喃基)-2，4(1H，3H)嘧啶二酮。
在已知的细胞抑制活性药物中，下面例举的天然来源物质是优选的硫酸长春碱 硫酸长春碱，硫酸长春新碱22-氧代长春花碱硫酸盐，长春地辛3-(氨基羰基)-O-4-脱乙酰-3-脱-(甲氧基羰基)长春花碱硫酸盐，Paclitaxel [2aR，4S，4aS，6R，9S(αR，βS)，11S，12S，12aR，12bS]-β-苯甲酰基氨基-α-(羟基苯基)丙酸[6，12b-双(乙酰氧基)-12-苯甲酰氧基-2a，3，4，4a，5，6，9，10，11，12，12a，12b-十二氢-4，11-二羟基-4a，8，13，13-四甲基-5-氧代-7，11-亚甲基-1H-环十[3，4]苯并[1，2-b]氧杂环丁-9-基]酯，
Docetaxel[2aR-[2aα，4β，4aβ，6β，9α(αR*，βS*)，11β，12α，12aα，12aα，12bα]]-β-(叔-丁氧基羰基氨基)α-(羟基苯基)丙酸[12b-乙酰氧基-12-苄氧-1，2，3，4，4a，6，9，10，11，12，12a，12b-十二氢-4，6，11-三羟基-4a，8，13，13-四甲基-5-氧代-7，11-亚甲基-5H-环十[3，4]苯并[1，2-b]氧杂环丁-9-基]酯，依托泊苷 [5R-[5α，5αβ，8aα，9β-(R)]-[9-(4，6-O-亚乙基-β-D-葡萄糖呋喃糖基氧)-5，8，8a，9-四氢-5-(4-羟基-3，5-二甲氧基苯基)-呋喃并[3’，4’6，7]萘并[2，3-d]-1，3-二氧杂环戊二烯-6-(5aH)酮，替尼泊苷 [5R-[5α，5αβ，8aα，9β-(R)]-[5，8，8a，9-四氢-5-(4-羟基-3，5-二甲氧基苯基)-9-[4，6-O-(2-噻吩基亚甲基)-β-D-葡萄糖吡喃糖基氧-呋喃并[3’，4’6，7]萘并[2，3-d]-1，3-二氧杂环戊二烯-6-(5aH)酮，放线菌素D放线菌素D柔红霉素 (8S-顺式)-8-乙酰-10-(3-氨基-2，3，6-三脱氧-α-L-来苏-己吡喃糖基氧)-7，8，9，10-四氢-6，8，11-三羟基-1-甲氧基-5，12-并四苯二酮，阿霉素 (8S-顺式)-8-(羟基乙酰)-10-(3-氨基-2，3，6-三脱氧-α-L-来苏己吡喃糖基氧)-7，8，9，10-四氢-6，8，11-三羟基-1-甲氧基-5，12-并四苯二酮，
表柔比星(8S-顺式)-10-(3-氨基-2，3，6-三脱氧-α-L-阿拉伯己吡喃糖基氧)-7，8，9，10-四氢-6，8，11-三羟基-8-(羟基乙酰)-1-甲氧基-5，12-并四苯二酮，伊达比星(7S-顺式)-9-乙酰-7-(3-氨基-2，3，6-三脱氧-α-L-来苏-六吡喃糖基氧)-7，8，9，10-四氢-6，9，11-三羟基-5，12-并四苯二酮，米托蒽醌1，4-二羟基-5，8-双[2-(2-羟基乙基)氨基乙基氨基]-9，10-蒽二酮或其二盐酸盐，博莱霉素从轮枝链霉菌种分离出的糖肽抗生素的混合(A2，B2)物，多为硫酸盐或盐酸盐的形式，普卡霉素泥质链霉菌、田无链霉菌和褶皱链霉菌产生的抗生素，丝裂霉素[1aR-(1aα，8β，8aα，8bα)]-6-氨基-8-氨基羰基氧杂-甲基-1，1a，2，8，8a，8b-六氢-8a甲氧基-5-甲基-氮丙啶并[2’，3’3，4]-吡咯并[1，2-a]吲哚-4，7-二酮，阿克拉霉素(A属于蒽环的抗生素，由加利利链霉菌产生，和B)安曲霉素3-(5，10，11，11a-四氢-9，11-二羟基-8-甲基-5-氧代-1H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-2-基)-2-丙烯酰胺，偶氮丝氨酸 O-二偶氮基乙酰-L-丝氨酸，卡柔比星8-乙酰-10-(3-氨基-2，3，6-三脱氧-α-L-来苏-六吡喃糖基氧)-7，8，9，10-四氢-1，6，8，11-四羟基-5，12-并四苯二酮，放线菌素C 放线菌素C，一种由金羊毛链霉菌产生的抗生素，嗜癌素 一种由左八郎链霉菌产生的抗生素，
色霉素 一种由灰色链霉菌产生的抗生素，橄榄霉素一种由橄榄色网状链霉菌产生的抗生素，诺加霉素[2R-(2α，3β，4α，5β，6α，11β，13α，14α)]-11-(6-脱氧-3-C-甲基-2，3，4-三-O-甲基-α-L-甘露吡喃糖基氧)-4-二甲基氨基-3，4，5，6，9，11，12，13，14，16-十氢-3，5，8，10，13-五羟基-6，13-二甲基-9，16-二氧代-2，6-环氧-2H-并四苯并[1，2-b]噁辛英(oxocin)-14-甲酸甲酯培洛霉素N’-[3-(1-苯基乙基)氨基丙基]博莱霉素酰胺，泊非霉素6-氨基-8-(氨基羰基氧甲基)-1，1a，2，8，8a，8b-六氢-8a-甲氧基-1，5-二甲基氮丙啶并[2’，3’3，4]吡咯并[1，2-a]吲哚-4，7-二酮，链黑霉素5-氨基-6-(7-氨基-5，8-二氢-6-甲氧基-5，8-二氧代-2-喹啉基)-4-(2-羟基-3，4-二甲氧基-苯基)-3-甲基-2-吡啶甲酸，链脲霉素2-脱氧-2-(甲基-亚硝基氨基羰基氨基)-D-吡喃葡萄糖，块菌素 7β-D-核糖呋喃糖基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺，乌苯美司[2S，3R]-3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酰基-L-亮氨酸，佐柔比星苯甲酸[1-[4-(3-氨基-2，3，6-三脱氧-α-L-来苏-己吡喃糖基氧)-1，2，3，4，6，11-六氢-2，5，12-三羟基-7-甲氧基-6，11-二氧-2-并四苯基]-亚乙基]-酰肼。
在已知的细胞抑制活性药物中，下面述及的激素是优异的
泼尼松龙(11-β)-11，17，21-三羟基孕-1，4-二烯-3，20-二酮，羟基孕酮17-羟基孕-4-烯-3，20-二酮或其己酸盐，甲羟孕酮(6α)-17-羟基-6-甲基孕-4-烯-3，20-二酮或其乙酸盐，甲地孕酮17-羟基-6-甲基孕-1，4-二烯-3，20-二酮或其乙酸盐，己烯雌酚(E)4，4’-(1，2-二乙基-1，2-亚乙烯二基)-双(酚)，乙炔基雌二醇(17α)-19-去甲孕-1，3，5(10)-三烯-20-炔-3，17-二醇，他莫昔芬(Z)-2-[4-(1，2-二苯基-1-丁烯基)苯氧基]N，N-二甲基乙胺或其柠檬酸盐，睾酮(17-β)-17-(1-氧代丙氧基)-雄甾-4-烯-3-酮或其丙酸盐，氟甲睾酮(11-β，17β-9-氟-11，17-二羟基-17-甲基雄甾-4-烯-3-酮。
在已知的细胞抑制活性药物中，其他类优选物质为，例如顺铂 顺式-二氨-二氯铂，卡铂 顺式-二氨-[1，1-环丁烷-二甲酸基(2)]合铂，L-天门冬酰胺 已知例如由大肠杆菌产生的酶，酶丙卡巴肼 N-(1-甲基乙基)-4-(2-肼基甲基)苯甲酰胺米托坦 1-氯-2-[2，2-二氯-1-(4-氯苯基)乙基]苯，氟他胺 2-甲基-N-(4-硝基-3-三氟甲基苯基)丙酰胺，亮丙瑞林 5-氧代-L-脯氨酰-L-组氨酰-L-色氨酰-L-丝氨酰-L-酪氨酰-D-亮氨酰-L-亮氨酰-L-精氨酰-N-乙基-L-脯氨酸酰胺或其乙酸盐。
已知的细胞抑制活性药物也可以以其治疗适用酸加成盐的形式使用，只要其化学结构允许制备酸加成盐。类似地，当已知细胞抑制活性药物的化学结构适于制备治疗适用盐的时候，也可以以这样的盐形式使用，如金属盐、铵盐或与有机碱所成的盐。
本发明的细胞抑制药物组合物优选含有顺铂作为细胞抑制(抗肿瘤)活性成分，和O-(3-哌啶子基-2-羟基-1-丙基)烟酸氨肟或其可治疗用酸加成盐作为式(I)羟肟酸衍生物。
本发明药物组合物一般含有0.1-95wt％，优选1-50wt％，优选5-30wt％的活性剂(成分)以及药物组合物的常规载体。
在本发明的药物组合物中，两种活性成分(试剂)的重量比最好为(1-50)∶(50-1)，特别优选(1-10)∶(10-1)。
本发明药物组合物可以是固体或液体组合物，用于口服、非肠道或直肠给药或局部治疗。
用于口服给药的固体药物组合物可以是粉末、胶囊剂、片剂、膜包衣片剂、微胶囊等；可以含有粘合剂作为载体，如明胶、山梨醇、聚乙烯吡咯烷酮等；填充材料，如乳糖、葡萄糖、淀粉、磷酸钙等；制片助剂，如硬脂酸镁、滑石、聚乙二醇、二氧化硅等；以及湿润剂，如月桂基硫酸钠等。
口服给药的液体药物组合物是溶液、悬浮液或乳剂，其含有载体如悬浮剂如明胶、羧甲基纤维素等；乳化剂，如脱水山梨醇一油酸酯；溶剂如水、油、甘油、丙二醇、乙醇；以及防腐剂如对-羟基苯甲酸甲基或丙基酯等。
非肠道给药的药物组合物通常为活性成分的无菌溶液。
上述例举的剂量(剂量单位)以及其他剂量形式本身是已知的，参见如题目为《雷明顿药物科学》(Remington’s Pharmaceutical Sciences)的手册，第18版，Mack出版公司，Easton，USA(1990)。
在多数情况下，本发明的药物组合物含有给成人的剂量单位，其特征是每日剂量为0.1-1000mg已知细胞抑制活性成分和0.1-1000mg式(I)化合物，可以一次给药或多次给药。实际的剂量由多种因素决定，应由医师确定。
本发明药物组合物的制备是将活性试剂(成分)与一种或多种载体混合，然后用本身已知的方法将所得混合物转变成药物组合物。使用的方法是现有技术中已知的，如参考手册Remington’sPharmaceutical Sciences。
I.细胞抑制剂副作用的减弱通过对羟肟酸衍生物化合物“L”进行试验来研究式(I)羟肟酸衍生物的细胞抑制剂副作用的减弱效果。下面介绍试验及其结果。
用鼠进行体内试验 用顺铂(50mg/kg体重日剂量)和化合物“L”(40mg/kg体重日剂量)对6组Wistar大鼠进行治疗，分别单独给药和联合给药。试验开始时试验鼠是健康的(没有任何的肿瘤接种)，抗肿瘤化合物的剂量激发性(provocatively)地/相当地高，其本身即有很高的导致组织损害的可能性。对照组不接受任何活性化合物。在治疗中，用ECG跟踪试验鼠的心脏功能，治疗两周后测定试验鼠血液中的酶活性。总结酶活性的值，得到顺铂给组织造成的损害程度。
组织损害的研究通过测定酶在细胞内的释放来评价组织的损害。用H.U.Bergmeyer法测定酶活性。(酶分析方法，第2板，Academic出版社(1974))。测定下面的酶GOT＝谷氨酸-草酰乙酸-转氨酶，GPT＝乳酸-丙酮酸-转氨酶，LDH＝乳酸脱氢酶，CK ＝肌酸-激酶，LipDH ＝硫辛酰胺脱氢酶，CS ＝柠檬酸-合成酶。
下面给出m单位/ml血清中的酶活性。结果列于表1。
表1酶 酶活性(mU/ml)
顺铂 顺铂+“L” 对照GOT 273 131 94GPT 87 47 45LDH 5136 19501523CK9776 14451200LipDH 69 41 43CS22 86如表1所示，用顺铂治疗，酶活性提高，表明组织受到损害。当顺铂和化合物“L”结合给药时，酶活性与对照组中观察到的结果很接近。因此，化合物“L”的共同给药明显给组织提供了保护，免受顺铂造成的损害。
心脏功能的研究用AT-6 ECG在四肢上监测心脏功能。测定QRS、RR、PR和TQ距和J点的抑制。结果列于表2。
表2J点阻抑mmQRS msQRS强度普通0.1±0.1 67恒量顺铂2.1±0.3 102 波动顺铂+化合物“L”0.3±0.3 77恒量如表2所示，化合物“L”和顺铂的共同给药对心脏功能有明显的保护作用，使其免受顺铂的损害。应当注意的是，QRS的波动表明由顺铂治疗造成的明显心脏损害，在有化合物“L”的存在下此波动停止。
治疗一个月后的存活情况研究经过上述两周治疗后有百分之几的试验鼠仍然活着。结果列于表3。
表3治疗1个月存活(％)顺铂25顺铂+化合物“L”83未治疗 100如表3所示，由于顺铂的极度毒性，经一个月治疗后只有25％的试验鼠活着，而所有的未治疗试验鼠均活着。相反，接受顺铂和化合物“L”结合用药的试验鼠有83％还活着，死亡率降低。
用小鼠进行体内试验 用正常小鼠研究化合物“L”对已知细胞抑制剂顺铂(Platidiam，50 La Chema，Brno)系统毒性的调整作用。[c.f.肿瘤学报告(REP/O.O.I/1988/01)]用第一代杂交BDF1(C57B1雌性x DBA/2雄性)成年雄性，重22-24g，非特异病原体(SPF)小鼠进行这些试验。试验小鼠被放在22-24℃(40-50％湿度)的macrolon笼中，光照制度为12/12h光/暗。试验鼠可以自由使用自来水，并随意食用无菌标准膳食(Altromin1324片，Altromin公司，德国)。为了进行毒性试验，将化合物“L”、顺铂及其混合物溶解在无菌生理盐水中，其浓度使给药剂量以体积计为0.1ml/10g体重，腹膜内给药或口服。
化合物“L”、顺铂和化合物“L”+顺铂的混合的急性毒性作用用不同剂量的化合物“L”、顺铂和化合物“L”+顺铂的混合物治疗BDF1雄性鼠的存活率列于表4。
表4
25天后结束观察阶段。化合物“L”的剂量中，750mg/kg体重剂量，腹膜内给药是致死的(表4)。其他的单独化合物“L”治疗对BDF1鼠的存活均没有影响(表4)。观察顺铂的毒性对剂量的依赖性。在存活率基础上评价的细胞抑制剂的毒性在高剂量和反复治疗下特别显著。剂量4mg/kg，腹膜内给药，重复5次(Sqd)接近致死(表4)。但顺铂(15mg/kg，腹膜内给药)与化合物“L”(500mg/kg，腹膜内给药)结合起来，毒性则大大地降低(表4)。
当顺铂以10mg/kg剂量与化合物“L”联合给药时，所有动物都存活(表4)。
II、抗肿瘤活性用羟肟酸衍生化合物“L”进行试验，研究细胞抑制剂与式I羟肟酸衍生物相结合的抗肿瘤效果。下面讨论试验及其结果。
用细胞培养进行试验将Sp-2(鼠骨髓瘤，悬浮液)细胞涂在有10％FCS(胎儿腓肠血清)的DMEM(Dubelso改性的Eagle培养基)上。将细胞涂在96孔板上，初始细胞计数为104/250μl。
一部分细胞在不加药物的情况下涂布，一部分细胞在有0.35微克/ml顺铂下涂布，另一部分在有40微克/ml化合物“L”下涂布，还有一部分在有0.35微克/ml顺铂+40微克/ml化合物“L”下涂布。治疗即加入上述化合物48小时后，对孔中的细胞计数，方法是用10微升台盼蓝着色然后悬浮。计数是在Burker室中进行的。
对肿瘤生长的影响表6总结了治疗后存活的细胞量，以百分数计。
表5治疗 存活细胞(％)未治疗 100化合物“L” 51±8顺铂 12±4顺铂+化合物“L” 10±5如表5所示，所有的未治疗细胞均存活。顺铂自己可使肿瘤细胞明显减少，当顺铂与化合物“L”结合起来时，这一效果不改变。
用氟尿嘧啶代替顺铂重复上述试验时观察到类似的效果。此时，一部分细胞在不加药物的情况下涂布，一部分细胞在有13微克/ml氟尿嘧啶下涂布，另一部分在有13克/ml氟尿嘧啶+40微克/ml化合物“L”下涂布。治疗后40小时后测定存活率。表6列出了治疗后存活细胞的量，以百分数计。
表6治疗 存活细胞(％)未治疗 100化合物“L”51±8氟尿嘧啶 13±3氟尿嘧啶+化合物“L” 10±4如表6所示，氟尿嘧啶自己使肿瘤细胞明显减少，当顺铂与化合物“L”结合起来时，这一效果不受影响。这些单独用抗肿瘤试剂(顺铂或氟尿嘧啶)或结合使用化合物“L”进行的体外试验表明它们明显降低细胞培养中的肿瘤细胞。这样，在体内条件下，化合物“L”不影响所研究的抗肿瘤试剂的抗肿瘤能力。
上述观察结果表明式I药物组合物降低了抗肿瘤试剂的副作用，同时其抗肿瘤活性保持不受影响。
用小鼠进行体内试验在P-388或S-180肿瘤移植后的第一天开始进行一次或重复治疗。在存活时间和肿瘤体积基础上评价治疗效果。45天后结束试验。超过45天后试验小鼠的长时间存活不再跟踪，终点定于肿瘤移植后的第46天。各个治疗组经过治疗后的平均存活天数与对照组进行对比，评价抗肿瘤效果，用T/C表示。
在S-180实体肿瘤的情况中，用数字式测径规对化合物对肿瘤生长的抑制作用进行控制，一周三次。用下式计算肿瘤的体积V＝a2×b2×π/6其中“a”和“b”分别是给定肿瘤的最小和最大半径(Tomayko M.M.和Reynolds C.P.无胸腺/裸/鼠的皮下肿瘤大小的测定)。计算平均值(X)和标准误差(S.D.)。适宜时用t检验测定统计上明显的差异(p)。
化合物“L”在体内对细胞抑制剂顺铂的抗肿瘤活性的影响顺铂自己或化合物“L”+顺铂对接种了1×106 P-388白血病细胞的BDF1小鼠的存活率的影响列于表7。
表7
腹膜内肿瘤移植后的第一天开始治疗。第45天结束试验，长时间存活的数目列于表7。如表7所示，在有化合物“L”的存在下，顺铂的作用被增强。尽管当与顺铂结合给药时，化合物“L”还将平均存活时间大大延长，但这一结合在重复给药后特别有效，特别是对长时间存活(即，长至45天)。相对于对照值(0％)，用化合物“L”+顺铂治疗有P-388肿瘤的试验鼠后的长期存活率为86％。但用顺铂单独治疗的试验鼠的长期存活率仅43％(表7)。
化合物“L”对顺铂对S-180肉瘤的生长抑制作用的影响在肿瘤生长曲线和平均肿瘤体积的基础上，观察到一次注射(
图1)或重复注射(图2)后，顺铂和化合物“L”+顺铂混合物有明显的抑制效果。
图3示意的是在肿瘤移植后的第18天，顺铂和混合物“L”+顺铂的混合物对肿瘤生长的抑制作用的对比。化合物“L”的存在明显地提高了顺铂对肿瘤生长的抑制作用(图3)。
本发明药理学化合物被证明非常安全(即，即使对有肿瘤的动物也非常无毒)，可以用来增强癌症患者抗肿瘤治疗的效果和降低副作用。在治疗中，以(1-50)∶(1-50)％质量比例补充入式I羟肟酸衍生物或其药物可接受的酸加成盐的已知抗肿瘤化合物或其药物可接受的酸加成盐对患者进行治疗。
权利要求
1.具有降低的副作用的抗肿瘤活性的药物组合物，其包含a)O-(3-哌啶子基-2-羟基-1-丙基)烟酰氨肟或其生理可接受的酸加成盐和b)具有抗肿瘤作用的已知活性物质，其选自含氮芥子衍生物，吖丙啶和甲基蜜胺衍生物、烷基磺酸酯、叶酸类似物、嘌呤类似物、长春花属生物碱、鬼臼毒素或激素。
2.权利要求1所要求的药物组合物，其包含环磷酰胺作为含氮芥子衍生物。
3.权利要求1所要求的药物组合物，其包含六甲蜜胺作为甲基蜜胺衍生物。
4.权利要求1所要求的药物组合物，其包含甲氨蝶呤作为叶酸类似物。
5.权利要求1所要求的药物组合物，其包含6-巯基嘌呤作为嘌呤类似物。
6.权利要求1所要求的药物组合物，其包含硫酸长春新碱作为长春花属生物碱。
7.权利要求1所要求的药物组合物，其包含泼尼松龙作为激素。
8.O-(3-哌啶子基-2-羟基-1-丙基)烟酰氨肟或其生理上可接受的酸加成盐用于制备降低已知抗肿瘤剂副作用的药物组合物的用途，其中的抗肿瘤剂选自含氮芥子衍生物、吖丙啶和甲基蜜胺衍生物、烷基磺酸酯、叶酸类似物、嘌呤类似物、长春花属生物碱、鬼臼毒素或激素。
全文摘要
本发明涉及具有增强的抗肿瘤活性或副作用降低的药物组合物，包括已知的具有抗肿瘤作用的活性物质，或其药物可接受的酸加成盐，以及O－(3－哌啶子基－2－羟基－1－丙基)烟酰氨肟或其生理上可接受的酸加成盐。
文档编号A61K45/00GK1494905SQ20031010069
公开日2004年5月12日 申请日期1998年6月22日 优先权日1998年6月22日
发明者B·苏米吉, B 苏米吉 申请人:N基因研究实验室公司