专利名称：制备转移因子的工艺方法-全滤法的制作方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，涉及生物制品转移因子的制备工艺的改进技术。
背景技术：
转移因子发现于二十世纪四十年代并于二十世纪七十年代应用于临床，是一种能传递迟发性超敏反应、分子量小于10000的具有生物活性的多肽及核苷酸的混合物，其具有活性不被胰蛋白酶、核糖核酸酶所破坏，耐热、无种属界限的特点。目前主要用于对病毒性感染及自身免疫性质病的治疗。能双向调节机体的免疫功能，对于细胞免疫功能与体液免疫功能的增高和低下具有双向免疫调节作用。同时促进T淋巴细胞的增殖，对骨髓造血免疫功能有调节作用。
转移因子的一般工艺流程如下(1)对新鲜组织进行预处理，用匀浆捣碎机进行匀浆后进行-20℃-37℃反复冻融1-3次，以破碎细胞。
(2)用高速冷冻离心机离心，取离心液。
(3)用透析技术在4℃条件下透析，取透析外液。
(4)将透析外液进行限分子量超滤，截留分子量6000-10000取超滤液。
(5)将所获不同分子量的超滤液供制备不同剂型的转移因子需要<包括冻干粉针、水针、口服液>。
(6)根据制备转移因子剂型的浓度需要用冻融法适量浓缩。
上述制备转移因子的工艺流程从原料处理到制备出二级半成品所需时间长约一星期，细胞破碎不完全及原材料浪费多，得率低，成本高而活性容易降低，产品浓缩费时费力，有一定难度。
发明内容
本发明解决了以往转移因子制备工艺中的冻融、透析等步骤而造成了制备的工艺时间长，生物活性受影响，有效成分产出率低，生产成本高等诸多不足之处，本发明的新制备工艺具有制备时间短、生物活性得以保护，产出率高同时将纳滤技术应用到转移因子半成品原料液浓缩上获取高浓度原料品等众多优点，适合于制备不同剂型不同规格需要的转移因子制剂。
本发明提出的制备的转移因子的工艺流程如下(1)在12℃以下用匀浆捣碎机高速捣碎匀浆处理原材料并可根据细胞破碎率，控制温度及匀浆速率是保证活性和保证高得率的重要步骤。
(2)高速冷冻离心后取离心液采用压滤技术经压滤器压滤为第一步滤过，去除粗蛋白。
(3)采用超滤技术用不同规格分子量的超滤膜根据不同制剂需要进行分级超滤，获取分子量为6000-10000的超滤液得到为一级原料液适应制备单位含量较低的不同剂型转移因子产品的需要。
(4)根据转移因子生产产品单位含量浓度的需要，应用纳滤技术进行浓缩成二级产品为高浓度原料液，以满足制备高含量浓度制剂的需要。
本制备工艺发明要点如下(1)在低温条件下，应用高速匀浆器捣碎脾脏组织并可根据细胞破碎率，或可对对经过匀浆器匀浆的组织进行处理以使脾脏等组织中的细胞破碎更完全，在保证生物活性与温度条件下，提高了转移因子的产出率。
(2)高速冷冻离心后取离心液经压滤器压滤除掉粗蛋白为第一步滤过，此步骤缩短了生产时间，又进一步增加产出率，保证了制品的生物活性。
(3)采用用不同规格分子量超滤膜进行梯度分级连续超滤截流分子量为6000以下或10000以下的转移因子超滤液供制备不同剂型转移因子产品的需要。如注射用转移因子(限分子量6000)口服用转移因子(限分子量10000)，使产品质量完全符合国家该产品质量标准的要求，保证产品质量。
(4)将纳滤浓缩技术应用到转移因子超滤液的浓缩，可制备出高浓度的转移因子原料液，以供制备高含量转移因子制剂的产品需要或根据需要储存-30℃备用。
权利要求
制备转移因子工艺流程采用各种不同的滤过法—压滤法、梯度超滤法、纳滤法完成制备全过程是其主要工艺特征。1、在10-12℃以下用高速组织捣碎机对新鲜脾脏组织进行处理以最大限度破碎细胞，保证了有效成分的高提取率。
2.用高速冷冻离心法对经过粉碎处理的液体进行处理取离心上清液，弃参渣。
3.使用压滤机对冷冻离心所获取的离上清液进行压滤通过压滤技术以去除粗蛋白缩短了生产时间。
4.应用超滤技术，通过使用超滤器采用不同规格分子量超滤膜进行的梯度超滤技术对去除了粗蛋白的压滤液进行分级超滤最后取截留分子量为6000-10000以下超滤液物质。
5.应用钠滤技术对转移因子超滤液根据含量浓度需要进行浓缩，获取高浓度原料液。供转移因子系列不同剂型产品生产高含量转移因子制剂需要或可放入零下30℃以下储存备用。
6.采用压滤、分级超滤、纳滤、滤违技术手段为其主要工艺特征，提高了产出率，缩短生产工艺时间，降低了成本，保证了制剂的生物活性及质量，可根据需要获取不同浓度的转移因子制剂。
7.应用纳滤浓缩技术对转移因子原料药进行浓缩的这一转移因子浓缩方法。
全文摘要
本项发明属于生物医药高新技术领域，该发明涉及生物制品转移因子制备新工艺方法。其主要步骤为采用不同的滤过方法来制备转移因子，本发明可明显缩短制备工艺时间，提高产出率，保证制品的生物活性，大幅降低了生产成本等优点。其主要制备步骤对新鲜的脾脏进行预处理后按比例加入预冷的温度控制在10℃－12℃去热源无离子液。用高速匀浆捣碎机对脾进行破碎细胞；经高速冷冻离心后取得离心上清液经压滤机进行压滤；压滤后取得的压滤液根据制备制剂不同剂型的要求经不同规格超滤器进行梯度分级超滤。制剂制备出分子量为6000－10000的原料药，可再根据生产不同制剂需要应用纳滤技术将超滤液进行浓缩成所需要的制剂。
文档编号A61K38/02GK1546165SQ200310118439
公开日2004年11月17日 申请日期2003年12月16日 优先权日2003年12月16日
发明者霍保来 申请人:北京世纪昭宝转移因子研究中心