专利名称：一种注射用清开灵冻干粉针剂的制备方法
技术领域：
本发明属中药制药领域，具体涉及一种注射用清开灵冻干粉针剂及其制备方法。
背景技术：
清开灵注射液由安宫牛黄丸化裁而得，为一现代中药复方制剂。它主要由胆酸、珍珠母、水牛角、黄芩、栀子、板蓝根、金银花7味药材经提取、精制、混合配制而成，临床广泛用于上呼吸道感染、肺炎、脑出血、脑血栓、脑水肿的治疗。
水牛角具有清热解毒，凉血定惊的作用，主要含有蛋白质、肽类、氨基酸、胆甾醇、强心成分等，其中蛋白质、肽类经水解后能得多种氨基酸；珍珠母具有平肝潜阳、定惊止血、清肝明目的功效，作为佐使药入方，为一较重要的药味。但由于水牛角中的蛋白质属于角蛋白，珍珠母90％以上成分为碳酸钙，均不易溶于水，因此对其水解所需时间较长。众所周知，药材粒度越小，与溶媒接触的有效表面积越大，可以提高其有效成分的溶出度，并缩短溶出时间。但是，由于水牛角和珍珠母的特殊质地，使得对其的进一步超细粉碎存在一定的困难。
现行清开灵注射液制备工艺对栀子、金银花、板蓝根采用煮沸提取1h(第一次)、0.5h(第二次)，使药材的木栓层和皮层被煮烂，树脂状物、植物蛋白和木质部薄壁细胞中大量的淀粉粒溶出，且在煮沸过程中淀粉粒进一步糊化，以致提取液浓缩、醇沉时，大量沉淀物吸附、包裹，使有效成分的含量不高，对药材是一种极大的浪费，且注射液水剂存在运输不便，质量稳定性差等问题，需要对其进行改进，为临床提供更好的药品。
中药冻干粉针剂由于低温干燥，活性成分不被破坏，真空或惰性气体填充，不易发生氧化，便于贮存和运输，得到越来越广泛的应用和认可，但有关清开灵冻干粉针的中国发明专利CN1145795A、CN1160548A、CN1440773A制备方法烦琐，工艺复杂，生产周期长。入世后，中药市场竞争将更加激烈，要求企业更注重药材有效成分的提炼，采用高新制药技术，改进生产工艺，提高中药制剂水平，从而生产出更高质量的中药产品。因此，有必要对清开灵冻干粉针剂的制备工艺作进一步研究，优化生产工艺，充分、有效地利用药物资源，缩短生产周期，生产出更具竞争力的产品。
发明内容
本发明针对水牛角和珍珠母质地特殊，不易超细粉碎的特点，对水牛角和珍珠母采用先冷冻干燥，再进行超微粉碎的方法；对栀子、金银花、板蓝根采用微波萃取的生产工艺，生产出的清开灵冻干粉针剂质量高、疗效显著。
本发明的一种注射用清开灵冻干粉针剂是通过以下技术方案实现的①发明药物是由下列组分制成的(用量为重量份)胆酸16.25份，猪去氧胆酸18.75份，黄芩苷25份，珍珠母250份，水牛角125份，板蓝根1000份，金银花100份，栀子125份；
②水牛角和珍珠母均先冷冻-20℃以下，再行超微粉碎，备用；③水牛角粉和珍珠母粉分别在搅拌下水解；对水牛角的水解可采用酸水解、碱水解或酶水解法，优选碱水解法；④混合水牛角粉和珍珠母粉水解液，加入乙醇使含醇量达60～80％，搅匀，离心，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，调节pH值至6～7，滤液备用；⑤栀子、金银花、板蓝根粉碎成粗粉，加入8-10倍量水，再用300～600W微波处理10～20min。按上述方法处理2-3次后，合并水提取液，浓缩，加入乙醇使含醇量达60～80％，静置，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，浓缩、浓缩液备用；⑥取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉分别溶解，搅拌下加入上述提取液，加入适量葡甲胺，补充注射用水至规定量，搅匀、静置、冷藏、滤过，加入适量冻干赋形剂，调PH 6.5～7，再加入适量活性炭煮沸15min，趁热滤过，放冷，得溶液，灭菌后分装，冷冻干燥，压盖即得。
本发明的一种注射用清开灵冻干粉针剂制备工艺根据超细粉比普通细粉更易溶解的特性以及水牛角和珍珠母的质地特点，对水牛角和珍珠母采用先冷冻，使药物酥脆，易于粉碎，再进行超微粉碎，其操作简单，劳动强度低，药物损耗少，极大地提高了工作效率。在水解时采用搅拌法促进超细粉分散，使超细粉与水解液有效地接触，极大地缩短了水牛角和珍珠母的水解时间。对栀子、金银花、板蓝根采用微波萃取技术，极大地促进了药材有效成分的浸出，而且在浸出过程中，药材细粉不凝聚，不焦化，具有节约能源，缩短生产周期，降低生产成本等优点。本发明的一种清开灵冻干粉针剂制备工艺，在传统中药领域中应用微粉和微波技术，为中药制剂水平的提高打下了基础。应用本发明方法制得的一种注射用清开灵冻干粉针剂有效成分含量高，制剂疏松多孔、复溶性好，含水量低，符合国家标准，其生产周期短，生产过程无菌操作，低温干燥，活性成分不被破坏，真空或惰性气体填充，不易发生氧化，贮存时间长，稳定性高，便于贮存、运输和销售，也便于保证产品质量。实验表明，清开灵冻干粉针剂对流感病毒的抑制作用优于现有的清开灵注射液。
下面通过实验对本发明的一种清开灵冻干粉针剂作进一步的说明。
1实验材料甲型流感病毒，广东省防疫站提供；清开灵注射液，山西太行制药厂生产；清开灵冻干粉针制剂(清开灵冻干粉针制剂10mg与清开灵注射液1ml所含生药量相当)，广东天之骄药物开发有限公司实验室提供。
2实验方法实验分3组生理盐水组、清开灵注射液组和清开灵冻干粉针剂组(将清开灵冻干粉用注射用水配成10mg/ml溶液备用)。将鸡胚在实验室39℃下孵育至12d胚龄，备用。将病毒以0.1ml/胚接种至鸡胚内，4h后再以0.1ml/胚接种药液。接种5个鸡胚，35℃孵育3d，4℃过夜后收获尿囊液，进行血凝实验。在大孔塑料板内用生理盐水将尿囊液先按1∶10稀释，再进行倍比稀释1∶20，1∶40，1∶80，1∶160，1∶320，1∶640，共得7个浓度梯度。每孔加入1％的鸡红细胞悬液，摇匀，静置45min后观察。根据血细胞凝集程度的不同来进行判断，以“++”为终点，即观察到红细胞在孔底形成一个环状，四周有小凝集块，以此为标准测定血凝滴度。判断结果时如果药物实验组血凝滴度为病毒对照组的1/4以下，即说明药物对病毒增殖有抑制作用。
3实验结果实验中测得病毒对照组的血凝滴度为1∶320，所以，若实验组血凝滴度低于1∶80，则说明有效。由表1可见，清开灵注射液组和清开灵冻干粉针剂对流感病毒均有抑制左右，清开灵冻干粉针剂对流感病毒的抑制作用优于清开灵注射液。
表1 清开灵注射制剂抗流感病毒作用组别1 2 3 4 5生理盐水组 1∶3201∶3201∶3201∶3201∶320清开灵注射液组 1∶50 1∶40 1∶60 1∶45 1∶60清开灵冻干粉针剂组 1∶20 1∶30 1∶50 1∶50 1∶40具体实施方式
实施例一规格1000瓶胆酸16.25g，猪去氧胆酸18.75g，黄芩苷25g，珍珠母250g，水牛角125g，板蓝根1000g，金银花100g，栀子125g，①水牛角和珍珠母均先-20℃冷冻，再行超微粉碎，备用；②水牛角粉加入8倍量4N氢氧化钡热溶液，加热至沸，不断搅拌，水解3～5h，至水牛角粉全部被水解止，倾出上清液，过滤，滤渣用少量热蒸馏水洗2次，收集所有溶液，备用；③珍珠母粉加入8倍量4N硫酸溶液，加热至沸，不断搅拌，水解3～5h，至珍珠母粉转为黄色沉淀物止，分别在搅拌下水解，倾出上清液，过滤，滤渣用少量热蒸馏水洗2次，收集所有溶液，备用；④水牛角水解液在搅拌下加入珍珠母水解液中，用氢氧化钡固体调节溶液pH值为4，过滤，减压浓缩，调节pH值为6～7，加入乙醇，使含醇量达60％，充分搅拌后静置，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，浓缩，得滤液A；⑤栀子、金银花、板蓝根粉碎成粗粉，加入8倍量水，再用600W微波处理10min。按上述方法处理2次后，合并水提取液，浓缩，加入乙醇使含醇量达60％，搅匀，离心，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，浓缩，得滤液B；⑥黄芩苷粉以10倍量注射用水溶解，调节pH至7左右，加热至沸，过滤，得滤液C；⑦胆酸及猪去氧胆酸粉置于75％乙醇溶液中，调节pH至9，使其完全溶解，得溶液D；⑧滤液A、B、C在搅拌下逐一加入溶液D中，加入5g葡甲胺，20g葡萄糖，补充注射用水至规定量，搅匀、冷藏、滤过，加入甘露醇20g，乳糖20g，调PH 6.5～7，滤液加适量活性炭煮沸15min，趁热过滤，放冷，得溶液，灭菌后分装，冷冻干燥，压盖即得。
实施例二规格100瓶胆酸1.625g，猪去氧胆酸1.875g，黄芩苷2.5g，珍珠母25g，水牛角12.5g，板蓝根100g，金银花10g，栀子12.5g，①水牛角和珍珠母均先-20℃冷冻，再行超微粉碎，备用；②水牛角粉加入6倍量4N氢氧化钡热溶液，加热至沸，不断搅拌，水解3～5h，至水牛角粉全部被水解止，倾出上清液，过滤，滤渣用少量热蒸馏水洗3次，收集所有溶液，备用；③珍珠母粉加入6倍量4N硫酸溶液，加热至沸，不断搅拌，水解3～5h，至珍珠母粉转为黄色沉淀物止，分别在搅拌下水解，倾出上清液，过滤，滤渣用少量热蒸馏水洗3次，收集所有溶液，备用；④水牛角水解液在搅拌下加入珍珠母水解液中，用氢氧化钡固体调节溶液pH值为4，过滤，减压浓缩，调节pH值为6～7，加入乙醇，使含醇量达80％，充分搅拌后静置，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，浓缩，得滤液A；⑤栀子、金银花、板蓝根粉碎成粗粉，加入10倍量水，再用300W微波处理20min。按上述方法处理3次后，合并水提取液，浓缩，加入乙醇使含醇量达80％，搅匀，离心，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，浓缩，得滤液B；⑥黄芩苷粉以10倍量注射用水溶解，调节pH至7左右，加热至沸，过滤，得滤液C；⑦胆酸及猪去氧胆酸粉置于75％乙醇溶液中，调节pH至9，使其完全溶解，得溶液D；⑧滤液A、B、C在搅拌下逐一加入溶液D中，加入0.5g葡甲胺，2g葡萄糖，补充注射用水至规定量，搅匀、冷藏、滤过，加入甘露醇30g，调PH 6.5～7，滤液加适量活性炭煮沸15min，趁热过滤，得溶液，灭菌后分装，冷冻干燥，压盖即得。
实施例三规格500瓶胆酸8.125g，猪去氧胆酸9.375g，黄芩苷12.5g，珍珠母125g，水牛角62.5g，板蓝根500g，金银花50g，栀子62.5g，①牛角和珍珠母均先-20℃冷冻，再行超微粉碎，备用；②水牛角粉加入6倍量4N硫酸溶液，加热至沸，不断搅拌，水解3～5h，至水牛角粉全部被水解止，倾出上清液，过滤，滤渣用少量热蒸馏水洗3次，收集所有溶液，备用；③珍珠母粉加入6倍量4N硫酸溶液，加热至沸，不断搅拌，水解3～5h，至珍珠母粉转为黄色沉淀物止，分别在搅拌下水解，倾出上清液，过滤，滤渣用少量热蒸馏水洗3次，收集所有溶液，备用；④水牛角水解液在搅拌下加入珍珠母水解液中，用氢氧化钡固体调节溶液pH值为4，过滤，减压浓缩，调节pH值为6～7，加入乙醇，使含醇量达80％，充分搅拌后静置，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，浓缩，得滤液A；
⑤栀子、金银花、板蓝根粉碎成粗粉，加入10倍量水，再用300W微波处理20min。按上述方法处理3次后，合并水提取液，浓缩，加入乙醇使含醇量达80％，搅匀，离心，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，浓缩，得滤液B；⑥黄芩苷粉以10倍量注射用水溶解，调节pH至7左右，加热至沸，过滤，得滤液C；⑦胆酸及猪去氧胆酸粉置于75％乙醇溶液中，调节pH至9，使其完全溶解，得溶液D；⑧滤液A、B、C在搅拌下逐一加入溶液D中，加入2.5g葡甲胺，10g葡萄糖，补充注射用水至规定量，搅匀、冷藏、滤过，加入甘露醇40g，乳糖20g，调PH 6.5～7，滤液加适量活性炭煮沸15min，趁热过滤，得溶液，灭菌后分装，冷冻干燥，压盖即得。
权利要求
一种注射用清开灵冻干粉针剂的制备方法，其特征在于以胆酸16.25份，猪去氧胆酸18.75份，黄芩苷25份，珍珠母250份，水牛角125份，板蓝根1000份，金银花100份，栀子125份的重量份为主要原料，采用以下步骤制成的①水牛角和珍珠母均先冷冻-20℃以下，再行超微粉碎，备用；②水牛角粉和珍珠母粉分别在搅拌下水解；对水牛角的水解可采用酸水解、碱水解或酶水解法；③混合水牛角粉和珍珠母粉水解液，加入乙醇使含醇量达60～80％，搅匀，离心，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，调节pH值至6～7，滤液备用；④栀子、金银花、板蓝根粉碎成粗粉，加入8-10倍量水，再用300～600W微波处理10～20min。按上述方法处理2-3次后，合并水提取液，浓缩，加入乙醇使含醇量达60～80％，静置，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，浓缩、浓缩液备用；⑤取黄芩苷粉、胆酸粉、猪去氧胆酸粉分别溶解，搅拌下加入上述提取液，加入适量葡甲胺，补充注射用水至规定量，搅匀、静置、冷藏、滤过，加入适量冻干赋形剂，调PH6.5～7，再加入适量活性炭煮沸15min，趁热滤过，放冷，得溶液，灭菌后分装，冷冻干燥，压盖即得。
全文摘要
本发明涉及一种注射用清开灵冻干粉针剂的制备工艺，其特征在于根据超细粉比普通细粉更易溶解的特性以及水牛角和珍珠母的质地特点，将水牛角和珍珠母采用先冷冻，使药物酥脆，再进行超微粉碎；采用搅拌法促进超细粉分散，使超细粉与水解液有效地接触，缩短了水解时间。对栀子、金银花、板蓝根采用微波萃取技术，促进药材有效成分浸出，降低生产成本。本发明为临床应用提供一种有效成分含量高、成本低、生产周期短、质量好、制备工艺更合理的清开灵冻干粉针剂，可用于上呼吸道感染、肺炎、脑出血、脑血栓、脑水肿等疾病的治疗。
文档编号A61P7/02GK1554433SQ20031012514
公开日2004年12月15日 申请日期2003年12月26日 优先权日2003年12月26日
发明者张正生 申请人:北京乾露春科技有限公司