专利名称：微生物抗氧化剂及制作方法
技术领域：
本发明涉及一种微生物抗氧化剂的制作方法，该微生物抗氧化剂可促使营养物质的转化吸收、提高机体免疫力，有利于各种疾病的预防和康复，属于生物制品技术领域。
背景技术：
目前，已申请的专利，申请号为CN02136360，公告号为CN1471847，题为苷肽组合物及其制备方法和应用，其特征在于将微生物菌种经液体培养后作发酵培养，发酵物用碱抽提后进行核酸酶水解制成核苷酸；将动物脏腑破碎、匀浆后用蛋白酶水解，热处理，上清液经过滤、透析后冷冻浓缩，制成细胞活性多肽；二者按一定比例混合。这种苷肽组合物仅仅是两种普通方法制备产物的简单混合，在工艺上无突出新颖之处。
发明内容
本发明的目的是提供一种由优化的有益菌在培养基中培养所产生的代谢产物，其由多种活性成分组成，在进入人或动物体内后，其所含的抗自由基物质能拮抗体内过量的自由基，避免组织的氧化损伤，还可起到营养和修复细胞、促进细胞代谢的作用，形成人或动物机体内的良性生态环境，促使营养物质的转化吸收、提高机体免疫力，有利于各种疾病的预防和康复。
为实现以上目的，本发明的技术方案是提供一种微生物抗氧化剂，其特征在于，发酵前它由下述重量百分比的原料配制菌种原液5-20％、培养基1-15％、无菌水65-94％，所述的菌种原液为沼泽红假单胞菌、啤酒酵母菌、植物乳杆菌中至少两种，它由下述重量百分比的原料配制沼泽红假单胞菌30-50％、植物乳杆菌0-30％、啤酒酵母菌25-50％。
所述的培养基为灵芝孢子粉、绞股蓝、刺梨、野生蜂蜜、海带、米糠中至少一种与无菌水的混合物，其由下述重量百分比的原料配制灵芝孢子粉0.01-1％、绞股蓝0.1-2％、刺梨0.1-2％、野生蜂蜜1-4％、海带0.5-3.5％、米糠2-5％、无菌水83-96.2％。
培养基作为营养物质，在部分被菌体利用后，通过菌体代谢产生的酶对培养基中的有机物质进行分解，并在特定的条件下组合，可形成目的产物，包括胡萝卜素、维生素B1、B2及B12、还原型维生素C、维生素P的槲皮酮-3-0吡喃葡萄糖(栎素)、槲皮酮(类黄酮)、肌醇、氨基酸及多种微量元素的金属衍生物。
微生物抗氧化剂中的微量元素，都以衍生物的形式存在。这些衍生物能对癌细胞选择性地产生自由基，从而杀伤癌细胞，通常情况下，如果可溶性金属离子较多，会产生大量自由基，从而造成对DNA的损伤。但在微生物抗氧化剂的作用下，这些金属有机衍生物会与DNA的特定部位结合，或与蛋白质结合，从而发挥选择性的保护作用。
研究表明，小金属衍生物有将超氧化阴离子分解成氧分子与过氧化氢的作用。超氧化阴离子的一部分被氧化，变成氧分子，另一部分被还原成为过氧化氢。金属衍生物接受了氧化还原反电子后，变成低氧化状态，这种低氧化状态的金属离子进一步与超氧化阴离子发生反应，并传递给它一个电子，使之成为多一个电子的超氧化阴离子，金属离子自身恢复原来的氧化状态。这个多一电子的超氧化阴离子在进一步反应接受一氢离子后，就变成过氧化氢。以上反应过程只要超氧化阴离子存在，就会一直进行下去，直至超氧化离子全部消失。
微生物抗氧化剂中维生素类及FAD等生理活性物质的量较多，这些化合物皆具有抗氧化作用。在多种成分协同作用下，发挥强大的抗氧化效力。同时氨基酸含量高，尤其是脯氨酸，这可能是酵母菌代谢过程中来自DNA的成分。另外，组氨酸可能是来自海带的物质，18种重要氨基酸几乎全部含有，这些成分在抗氧化作用方面也有重要意义。
所述的微生物抗氧化剂的制作方法，其特征在于，采用的沼泽红假单胞菌、啤酒酵母菌、植物乳杆菌菌种均通过筛选优化而来；同时采用复合发酵方法，它包括下列步骤第一步.将已筛选的地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、啤酒酵母菌菌种在同一培养基中进行增殖培养；第二步.将三种菌种同时接入肉汤培养基中，在35-40℃温度下培养22-26小时后，取培养液进行划线分离，将分离到的三种菌种单独挑出进行纯种培养，保存作为生产菌种；第三步.分别将生产菌种转接装有营养琼脂作培养基的茄子瓶中，在35-40℃温度下培养45-50小时，然后放入2-6℃的冰箱中进行保存；第四步.将沼泽红假单胞菌、啤酒酵母菌、植物乳杆菌按比例同时接种于肉汤培养基中，放入搅拌机中搅拌，在温度35℃-40℃、搅拌机转速为180r/min-220r/min条件下培养12-17小时，进行菌种扩培；第五步.将经过扩培的菌种按照2-4％的比例接种于经过蒸汽灭菌的培养基中搅拌混合均匀后，在培养温度35-40℃下密闭发酵7-14天；第六步.发酵结束后，将发酵液通过螺旋沉降离心机后再进入碟式离心机，将离心后得到的液体在115-130℃温度下灭菌消毒30-60min；第七步.在灭菌后的液体中通入无菌空气进行曝气，通气量为1∶0.2，曝气10-14天；第八步.将曝气后的液体灌装入经消毒的瓶中，即得到微生物抗氧化剂成品。
本发明采用由筛选出的菌种与多种有机营养物质混合，通过微生物发酵和后处理工艺制成，在培养物中含有丰富的胡萝卜素、维生素B1、B2及B12、还原型维生素C、维生素P的槲皮酮-3-O吡喃葡萄糖(栎素)、槲皮酮(类黄酮)、肌醇、L-天门冬氨酸、L氨基丙酸及多种微量元素的金属衍生物。
现代医学证明，生物体许多疾病的发生大多是由机体内不饱和脂肪酸共价键上一系列自由基的反应诱导所致。最新研究证明，氧自由基可使生物蛋白质聚合，核酸主键断裂、碱基修饰和氢键破坏，从而使机体内大分子物质产生过氧化变性、交联或断裂，引起细胞结构和功能的破坏，导致机体组织损害和器官退行性变化。
在机体内的超量自由基攻击机体细胞膜富含的脂质和蛋白质，产生脂质过氧化反应，导致脂质过氧化物积累；超量自由基还攻击生物膜及DNA键，破坏其结构，使其功能丧失；超量自由基又攻击酶邻近特定氨基酸残基，使酶失活，并使机体抗氧化功能减弱，最终引起机体免疫力下降。
微生物抗氧化剂所含丰富的生物抗氧化物质能够直接清除自由基，并具有通过SOD传递电子而增强其清除自由基的特殊功效，消除自由基对机体组织器官正常功能的负面影响，增强组织细胞尤其是代谢强度极高的乳腺细胞的机能，从而提高机体的代谢水平，促进免疫器官的发育，提高增强机体细胞免疫和体液免疫水平，提高血浆中cAMP水平及cAMP/cCMP的比值，同时显著提高血浆GH和T3、T4浓度。
本发明的优点是1.有效清除体内产生的活性氧自由基，保护细胞膜的正常结构，保证体内活性分子的正常功能；2.促进机体免疫器官的发育，提高机体免疫力和综合抗病力；3.保护细胞的活力，可使NK细胞、B细胞、T细胞等免疫系统的细胞还有巨噬细胞等等的活性明显升高；4.可改善所有疾病且转向安稳，免疫力、自然治愈力的提升；5.加速手术后、疾病后的体力回复，改善自律神经失调症；6.防止老化，回复肌肤的润泽、白发变黑发；7.活化脑部机能，改善并可预防老人痴呆症的发生。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细说明实施例1微生物抗氧化剂的制作方法采用的沼泽红假单胞菌、啤酒酵母菌、植物乳杆菌菌种均通过筛选优化而来；同时采用复合发酵方法，它包括下列步骤第一步.将已筛选的地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、啤酒酵母菌菌种在同一培养基中进行增殖培养，培养基的重量配比为灵芝孢子粉0.04％、绞股蓝0.1％、刺梨0.3％、野生蜂蜜1％、海带2.5％、米糠豆饼粉4％、无菌水92.06％；第二步.将三种菌种同时接入肉汤培养基中，在37℃温度下培养24小时后，取培养液进行划线分离，将分离到的三种菌种单独挑出进行纯种培养，保存作为生产菌种；第三步.分别将生产菌种转接装有营养琼脂作培养基的茄子瓶中，在37℃温度下培养48小时，然后放入4℃的冰箱中进行保存；
第四步.将沼泽红假单胞菌、啤酒酵母菌、植物乳杆菌按照35％、25％和40％的比例同时接种于肉汤培养基中，放入搅拌机中搅拌，在温度37℃、搅拌机转速为200r/min条件下培养15小时，进行菌种扩培；第五步.将经过扩培的菌种按照2-4％的比例接种于经过蒸汽灭菌的培养基中搅拌混合均匀后，在培养温度37℃下密闭发酵10天；培养基的重量配比为灵芝孢子粉0.04％、绞股蓝0.1％、刺梨0.3％、野生蜂蜜1％、海带2.5％、米糠豆饼粉4％、无菌水92.06％，pH值调节至6.0，温度为121℃，蒸汽灭菌30min；第六步.发酵结束后，将发酵液通过螺旋沉降离心机后再进入碟式离心机，将离心后得到的液体在121℃温度下灭菌消毒30min；第七步.在灭菌后的液体中通入无菌空气进行曝气，通气量为1∶0.2，曝气12天；第八步.将曝气后的液体灌装入经消毒的瓶中，即得到微生物抗氧化剂成品。
实施例2第一步.将已筛选的地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、啤酒酵母菌菌种在同一培养基中进行增殖培养，培养基的重量配比为灵芝孢子粉0.02％、绞股蓝0.12％、刺梨0.4％、野生蜂蜜1.3％、海带3.5％、米糠豆饼粉3％、无菌水91.66％，pH值调节至6.0，温度为121℃，蒸汽灭菌30min；第二步.将两种菌种同时接入肉汤培养基中，在37℃温度下培养24小时后，取培养液进行划线分离，将分离到的两种菌种单独挑出进行纯种培养，保存作为生产菌种；第三步.分别将生产菌种转接装有营养琼脂作培养基的茄子瓶中，在37℃温度下培养48小时，然后放入4℃的冰箱中进行保存；第四步.将沼泽红假单胞菌、啤酒酵母菌按照50％、50％的比例同时接种于肉汤培养基中，放入搅拌机中搅拌，在温度37℃、搅拌机转速为200r/min条件下培养15小时，进行菌种扩培；第五步.将经过扩培的菌种按照2-4％的比例接种于经过蒸汽灭菌的培养基中搅拌混合均匀后，在培养温度37℃下密闭发酵10天；培养基的重量配比为灵芝孢子粉0.02％、绞股蓝0.12％、刺梨0.4％、野生蜂蜜1.3％、海带3.5％、米糠豆饼粉3％、无菌水91.66％，pH值调节至6.0，温度为121℃，蒸汽灭菌30min；第六步.发酵结束后，将发酵液通过螺旋沉降离心机后再进入碟式离心机，将离心后得到的液体在121℃温度下灭菌消毒30min；第七步.在灭菌后的液体中通入无菌空气进行曝气，通气量为1∶0.2，曝气12天；第八步.将曝气后的液体灌装入经消毒的瓶中，即得到微生物抗氧化剂成品。
权利要求
1.一种微生物抗氧化剂，其特征在于，发酵前它由下述重量百分比的原料配制菌种原液5-20％、培养基1-15％、无菌水65-94％，所述的菌种原液是沼泽红假单胞菌、啤酒酵母菌、植物乳杆菌中至少两种，由下述重量百分比的原料配制沼泽红假单胞菌30-50％、植物乳杆菌0-30％、啤酒酵母菌25-50％。
2.根据权利要求1所述的微生物抗氧化剂，其特征在于，所述的培养基为灵芝孢子粉、绞股蓝、刺梨、野生蜂蜜、海带、米糠中至少一种与无菌水的混合物，其由下述重量百分比的原料配制灵芝孢子粉0.01-1％、绞股蓝0.1-2％、刺梨0.1-2％、野生蜂蜜1-4％、海带0.5-3.5％、米糠2-5％、无菌水83-96.2％。
3.根据权利要求1所述的微生物抗氧化剂及制作方法，其特征在于，采用的沼泽红假单胞菌、啤酒酵母菌、植物乳杆菌菌种均通过筛选优化而来；同时采用复合发酵方法，它包括下列步骤第一步.将已筛选的地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、啤酒酵母菌菌种在同一培养基中进行增殖培养；第二步.将三种菌种同时接入肉汤培养基中，在35-40℃温度下培养22-26小时后，取培养液进行划线分离，将分离到的三种菌种单独挑出进行纯种培养，保存作为生产菌种；第三步.分别将生产菌种转接装有营养琼脂作培养基的茄子瓶中，在35-40℃温度下培养45-50小时，然后放入2-6℃的冰箱中进行保存；第四步.将沼泽红假单胞菌、啤酒酵母菌、植物乳杆菌按比例同时接种于肉汤培养基中，放入搅拌机中搅拌，在温度35℃-40℃、搅拌机转速为180r/min-220r/min条件下培养12-17小时，进行菌种扩培；第五步.将经过扩培的菌种按照2-4％的比例接种于经过蒸汽灭菌的培养基中搅拌混合均匀后，在培养温度35-40℃下密闭发酵7-14天；第六步.发酵结束后，将发酵液通过螺旋沉降离心机后再进入碟式离心机，将离心后得到的液体在115-130℃温度下灭菌消毒30-60min；第七步.在灭菌后的液体中通入无菌空气进行曝气，通气量为1∶0.2，曝气10-14天；第八步.将曝气后的液体灌装入经消毒的瓶中，即得到微生物抗氧化剂成品。
全文摘要
本发明涉及一种微生物抗氧化剂的制作方法，其特征在于，将经筛选优化后的沼泽红假单胞菌、啤酒酵母菌、植物乳杆菌菌种与培养基、无菌水等原料进行密闭厌氧发酵，然后将发酵液离心后进行高温消毒，再通入定量的无菌空气进行曝气，最后经无菌灌装后即得到成品，本发明使产品中含有大量的维生素、抗氧化物质、氨基酸、肽等生理代谢物质，能够直接清除自由基，并具有通过SOD传递电子而增强其清除自由基的特殊功效，消除自由基对机体组织器官正常功能的负面影响，增强组织细胞尤其是代谢强度极高的乳腺细胞的机能，从而提高机体的代谢水平，促进免疫器官的发育，提高增强机体细胞免疫和体液免疫水平。
文档编号A61P39/00GK1919216SQ20051002905
公开日2007年2月28日 申请日期2005年8月24日 优先权日2005年8月24日
发明者江瀚 申请人:上海亘卓生物工程有限公司