一种药物组合物在制备抗前列腺炎的药物中的应用的制作方法

专利名称：：一种药物组合物在制备抗前列腺炎的药物中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明属于中药
技术领域：
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背景技术：
：吉林华康药业股份有限公司拥有中国发明专利《治疗热淋的中药制剂》，专利号为02146487.1，授权公告号CNU68488C，其特征在于，每1000剂由以下重量配比的中药原料制成，金银花125375份，半枝莲62187份，瞿麦37~112份，扁蓄37112份，石韦37U2份，木通1956份，车前子37112份，淡竹叶37112份，灯心草1237份，桑寄生62187份。本发明的制剂其功能主治为清热解毒、利湿通淋。适用于热淋(下焦湿热证)相当于急性泌尿系感染各症。
发明内容本发明提供一种药物组合物在制备抗前列腺炎的药物中的应用，是《治疗热淋的中药制剂》，专利号为02146487.1的药物组合物的新的药物用途，该药物组合物由以下重量配比的中药原料制成，金银花125~375份，半枝莲62187份，瞿麦37~112份，扁蓄37112份，石韦37-112份，木通19~56份，车前子37112份，淡竹叶37112份，灯心草1237份，桑寄生621S7份。本发明中，该药物组合物由以下重量配比的中药原料制成金银花187312份，半枝莲93156份，瞿麦56~93份，扁蓄5693份，石韦5693份，木通28~47份，车前子56~93份，淡竹叶56~93份，灯心草1931份，桑寄生93-156份。本发明中，该药物组合物由以下重量配比的中药原料制成金银花190-270份，半枝莲110136份，瞿麦6585份，扁蓄6585份，石韦6585份，木通6585份，车前子6585份，淡竹叶65~85份，灯心草12~28份，桑寄生U0136份。以上药材重量份，若以克为单位计算可制成1000剂药剂，如制成胶囊制剂1000粒，片剂1000片等。本发明的中药制剂，在制备成药剂时可加入药物可接受的载体，所述药物可接受的载体可以是淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维素类及其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土温80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性剂、聚乙二醇、环糊精、(3-环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁等。本发明的中药制剂可以是任何可药用的剂型，这些剂型包括片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂。本发明的制剂，优选的是口服剂型，如胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂、丸齐U、散齐廿、丹剂、膏剂，最优选的是胶囊剂。本发明具有抗前列腺炎的作用，药物配方中的中药，其药源丰富，价格低廉，携带方便，易为患者所接受。适用于广大患者使用，故有相当可观的社会效益及经济效益。本发明的制剂在使用时根据病人的情况确定用法用量，可每日服三次，每次1~10粒/或片。本发明的中药制剂可通过以下方法制备金银花的半量，用乙醇提取，滤过，回收乙醇，浓缩备用，另取半枝莲、瞿麦等9味加水煎煮滤过，浓縮备用。再取金银花的半量、去杂质、粗粉碎，同以上二个备用的稠膏、合并，干燥，粉碎成细粉，过筛，得到活性成分，该活性成分可直接制成制剂，也可加入药物可接受的载体制成药物制剂。下面通过药效学实验来进一步验证本发明。受试药物1.本发明药物以下简称银花泌炎灵片(YinhuamiyanlingPian)，由吉林华康药业股份有限公司提供，批号:050903。每片生药含量为1,875g，高效液相色谱法进行定量测定，本品每片含金银花，以氯原酸(C1QH1809)计不得少于3.60mg。2.配制方法临用时将银花泌炎灵片去薄膜衣后以蒸馏水配成所需浓度，用时摇匀，4r保存。3.剂量选择成人每人每日口服16片，每片重0.5g，每片含原生药1.875g,人按70kg计算，相当于0.428g生药/kg,按人体与动物体表面积等效剂量比值计算，选择小白鼠三种给药剂量为15.0g、7.5g、3.75g生药/kg;大白鼠为10.8g、5.4g、2.7g生药/kg(分别相当于等效剂量的4倍，2倍和等效剂量)，动物均灌胃给药(ig)。给药途径与临床一致。动物1.Wistar大白鼠，封闭群，雌雄兼用，动物合格证号SCXK(吉)2003—0004。2.远交系，昆明种小白鼠，封闭群，体重18-22g,动物合格证号SCXK(吉2003—0004。Wistar大白鼠和昆明种小白鼠均由长春高新医学动物实验研究中心提供。饲养条件动物室为普通级，室温26X:，相对湿度为40%，通风良好，采用标准饲料饲养，小白鼠笼具26X16cm，雌雄分笼，每笼5只。大白鼠笼具50X35cm，雌雄分笼，每笼5只动物阳性对照药物选择l.阿司匹林(肠溶片)，临床成人每日口服本品40mg，含乙酰水杨酸25mg,临用时研碎，选择剂量大白鼠0.2g/kg、小白鼠0.3g/kg(参照有关资料实验剂量确定)，石家庄神威药业股份有限公司生产，批号20050209。2呋塞米片，临床成人每日四片，每片含呋喃苯胺酸20mg。天津力生制药股份有限公司生产，按人体与动物体表面积等效剂量比值计算。选择剂量大白鼠36mg/kg(5倍等效剂量)，批号040811。3前列通片，(国药准字Z44022456号)与银花泌炎灵片治疗作用基本相同，给药途径一致，故选择为阳性对照品。本品为糖衣片，除去糖衣后显浅褐色至褐色，基片重0.34g，成人每天3次，每次6片，按人体与动物体表面积等效剂量比值计算，选择大白鼠剂量为2.75g/kg，相当于5倍等效剂量，临用时去糖衣，研碎，以蒸馏水配成所需浓度，动物均灌胃(ig)给药，由广州中一药业有限公司生产，批号04507。4阿莫西林，成人每人每日2000mg，试验选择2倍等效剂量520mg/kg，黑龙江三勤制药有限公司出品，批号031010仪器1、JN—A型精密扭力天平(上海第二天平仪器厂)2、SARTORIUSGMBHGOTTINGEN精密天平(精度0.00001)，德国3、L-301型生物显微镜(广州光学仪器厂)4、超薄切片机LKB2088(瑞典制造)5Leitjl512石蜡切片机(德国制造)6SW-CJ-113标准型净化工作台(苏州净化设备厂)7WX-753型微循环显微镜(徐州医用光学仪器厂)8生物医学图象分析仪(CIMA-400)9上海复星FORTUNE.IMS微生物鉴定/药敏分析系统10、恒温振荡培养箱，HZQ-XIOO，太仓市实验设备厂ll双人超净工作台，SW-CT-ZF型，中国苏州12电热鼓风干燥箱，101A-2型，中国上海；13真空冷冻干燥机，MRK，日本；14家用冷藏冰箱，BCD-226型，美菱，中国合肥。试剂角叉菜胶由沈阳药学院中药系提供，临用时以生理盐水配制，无批号；冰醋酸，由北京北化精细化学药品有限公司生产，批号020730，25%消痔灵注射液，由广州中医药业有限公司生产，批号H0031;氯化钠(分析纯)，北京化工厂生产；BactoTryptone，OXOID，英国；BactoYeastExtract,OXOID，英国；琼脂粉，上海化学试剂采购供应站试剂厂生产，批号77-07-14。蛋白栋，上海东海制药厂生产。菌株标准菌株(AmericanTypeCultureCollectionATCC):大肠埃希氏菌ATCC44102、金黄色葡萄球菌ATCC26003、福氏志贺氏菌ATCC51571。均由中国药品生物制品鉴定所提供。临床分离菌株(ClinicalIsolatedBacterialStrainCIBS):金黄色葡萄球菌株CIBS831、表皮葡萄球菌株CIBS2972、腐生葡萄球菌株CIBS3586、变形杆菌株CIBSl(r72、克雷伯杆菌株CIBS861、粪肠球菌株CIBS859、绿脓杆菌株CIBS868、真菌白色念珠菌株CIBS850及3株大肠杆菌菌株CIBS872、CIBS614、CIBS853。金黄色葡萄球菌，菌号26003(长春中医学院附属医院细菌室提供)。数据统计方法试验110结果数据均以(S士SD)表示，组间差异的显著性采用t检验，试验10、11结果采用f检验。试验方法与结果1、银花泌炎灵片对消痔灵致动物慢性前列腺炎模型的影响根据张氏等前列腺直接注射法制作非细菌性前列腺炎大白鼠模型。取Wistar大白鼠50只，雄性，体重350400g，经腹腔注射3。/。水合氯醛10ml/kg进行麻醉,在无菌条件下，下腹正中用酒精消毒后用镊子提起皮肤，逐层切开皮肤，直达腹腔，提起膀胱及两侧精索，暴露膀胱背侧前列腺背侧叶，分别注入25。/。消痔灵注射液0.1ml，缝合肌肉、皮肤，碘酒消毒伤口。术后精心饲养7天，于第7天将大白鼠随机分为5组，第l、2、3组为银花泌炎灵片高、中、低剂量组，剂量分别为10.8g、5.4g、2.7g生药/kg，第4组为前列通片阳性药组，剂量为2.75g/kg，第5组为模型组，另取10只为正常对照组，14组按剂量灌胃给药(ig)，其余给蒸馏水，连续给药30天，于末次给药l小时后，称体重，断头处死大白鼠，解剖取前列腺称重，然后各取前列腺的一半，置于lml生理盐水中，充分混匀，于显微镜下测定前列腺液中白细胞数和卵磷脂小体数，其余前列腺用10%甲醛液固定，做病理组织学切片检察。结果见表l、表2。表1银花泌炎灵片对大白鼠慢性前列腺炎模型前列腺液的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>用药组与模型对照组比较*P<0.05正常对照组与模型组比较##P〈0.01###P〈0.001前列腺液测定表明，模型组与正常对照组比较，白细胞数明显升高，且卵磷脂小体数明显降低，证实该模型成立，受试药物银花泌炎灵片高、中剂量组的白细胞数量与模型对照组比较明显减少，卵磷脂小体数具有明显升高，经统计学处理有显著性差异P〈0.05。表2银花泌炎灵片对大白鼠慢性前列腺炎模型的影响半定量分级组别剂量动物数(只)0级l级2级3级(g生药/kg)银花泌炎灵片10.85.42.7前列通片2.75模型对照正常对照注分级标准0级正常前列腺，间质无增宽和水肿，无炎细胞浸润，无明显纤维组织增生；l级腺体排列尚整齐，间质轻度增宽，水肿较轻微，有少量炎细胞浸润和纤维组织增生；2级腺体排列较整齐，间质中度增宽，水肿较重，有较多炎细胞浸润和纤维组织增生；3级腺体组织有破坏，间质明显增宽，水肿明显，可见大量炎细胞浸润和较明显纤维组织增生，被膜下有浸润的炎细胞。病理组织学观察结果(1)、正常对照组前列腺腺腔形状不规则，腺上皮腺腔内凸出，形成多个皱襞伸向腺腔。腺上皮细胞呈柱状或立方形，上皮增生不活跃，形成的乳头少而短，腺腔内可见稀薄嗜伊红分泌物。腺体间紧密排布，间质狭窄，间质成分明显少于腺体，间质内含及少量平滑肌细胞、淋巴细胞和成纤维细胞。约为腺体的1/3，无明显炎细胞。而且排列整齐，1073001063101036101064001000461010000(2)、模型组前列腺体排列疏松，腺上皮呈柱状。腺上皮无明显增生，间质明显扩宽、水肿，可见多数淋巴细胞浸润和成纤维细胞增生。纤维组织沉积较正常对照组多。有些部位纤维组织沉积较较正常对照组明显增多。(3)、阳性对照药组腺体排布较疏松，腺上皮较矮，腺上皮无明显增生，未形成较多突向腺腔的乳头。腺腔内可见少量嗜伊红分泌物。腺体间紧密排布。间质轻度扩宽、淋巴细胞浸润和成纤维细胞增生的程度较模型组明显减轻，间质纤维组织沉积不明显。(4)、高剂量组腺体排布趋于正常对照组的形态，腺上皮细胞呈柱状或立方形，腺上皮增生不明显，未形成多数突向腺腔的乳头。腺腔内可见少量嗜伊红分泌物。与模型组比较，间质宽度明显变窄，水肿明显减轻，浸润的炎细胞稀疏。间质纤维组织沉积不明显。(5)、中剂量组腺上皮无明显增生，未形成较多突向腺腔的乳突，腺腔内可见少量嗜伊红分泌物。腺体形态与阳性对照组相近，间质扩宽程度和间质水肿明显减轻，浸润的炎细胞数量减少，稀疏分布，间质纤维组织沉积不明显。(6)、低剂量组腺体排列尚整齐，腺上皮无明显增生，未形成较多突向腺腔的乳突，腺腔内可见少量嗜伊红分泌物。间质扩宽和水肿较模型组有所减轻，间质炎细胞数量减少，可见少量间质纤维组织沉积。结论模型组腺体排布较疏松，紊乱，间质明显水肿扩宽，可见多数炎细胞浸润，出现成纤维细胞增生和纤维组织沉积，有些部位纤维组织沉积明显增多，表明建立的慢性前列腺炎模型是成功的。银花泌炎灵片高、中剂量组及阳性药对照组，前列腺腺体排布趋于正常，前列腺间质扩宽、水肿程度较模型组明显减轻，间质浸润的炎细胞明显减少，间质纤维组织沉积明显减轻，其中高剂量的改善作用最明显。2银花泌炎灵片对大鼠非细菌性前列腺炎的影响取大鼠60只，体重300—350g，后随机分为6组，1—3组为银花泌炎灵片高、中、低剂量组，剂量分别为10.8g、5.4g、2.7g生药/kg，4组为阳性药前列通片组，剂量为2.75g/kg，5组为模型对照组，6组为正常对照组，14组均灌胃(ig)给药，模型对照组及正常对照组按给药高剂量给予同体积蒸馏水。每天1次，连续10天，于末次给药后lh按戴氏法稍加改良，每鼠以腹腔注射3M水合氯醛10ml/kg麻醉，无菌条件下剖开腹腔，于每鼠前列腺内注入灭菌1.5%角叉菜胶0.05ml，(正常对照组注射无菌生理盐水)，缝合，24h断头处死大鼠，(其间再行给药一次)，取前列腺称重，后取半个前列腺于lml生理盐水中，充分混匀，用毛细管吸取前列腺混悬液，滴入血细胞计数池内，移入显微镜下，用低倍镜计数，按白细胞方法镜下记录白细胞数和卵磷质小体数；同时将前列腺液接种于普通血琼脂平板上，37°C培养24h。检查有无菌落生长。剩余前列腺用福尔马林固定，取大鼠前列腺做病理组织学检査。结果见表3、表4。表3对大白鼠非细菌性前列腺炎模型前列腺液检验指标的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由表3结果表明，银花泌炎灵片10.8g生药/kg、5.4g生药/kg剂量组对大鼠角叉菜胶性前列腺炎模型具有明显的抑制白细胞增生及提高卵磷质小体密度作用，与模型对照组比较分别PO.Ol、P<0.05。同时前列腺液培养均未见菌落生长。组织病理学观察结果表明，正常对照组前列腺腺腔规整，腺体间紧密排布，间质狭窄，无明显炎细胞浸润。模型对照组前列腺体排列疏松，紊乱，间质明显扩宽、水肿，可见多数淋巴细胞浸润和成纤维细胞增生。纤维组织沉积较正常对照组多。有些部位可见前列腺被膜下炎细胞浸润明显(前列腺炎模型成功)。银花泌炎灵片10.8g生药/kg剂量组腺体排布趋于正常对照组程度，腺上皮增生不明显。间质宽度较模型组明显縮窄，水肿轻微，浸润的炎细胞稀疏。大部分被膜未见明显炎细胞浸润。银花泌炎灵片5.4g生药/kg剂量组腺体排布较疏松，间质扩宽程度明显减轻，间质浸润的炎细胞数量减少，水肿减轻，前列腺被膜下可见少数炎细胞浸润。阳性药前列通片组腺体形态与银花泌炎灵片5.4g生药/kg剂量组相近，间质扩宽程度较模型对照组减轻，间质浸润的炎细胞数量较少。综上所述，银花泌炎灵片对大鼠前列腺炎有明显减轻作用，尤其以高剂量作用显著。表4银花泌炎灵片对大鼠非细菌性前列腺炎模型的影响半定量分级组另lj剂量动物数(只)o级1级2级3级(g生药/kg)银花泌炎灵片10.81073005.41064002.7102800前列通片2.75106400模型对照100145正常对照1010000注分级标准(半定量分级标准见表2分级标准)由表4结果表明，银花泌炎灵片高、中剂量组均有减轻前列腺组织病变的作用，其中给药高剂量组作用最为明显。3、银花泌炎灵片对大肠杆菌所致大鼠细菌性前列腺炎的影响取大鼠60只，体重280—340g，后随机分为六组，按戴氏法以0.1ml大肠肝菌(1.4X107/ml)致炎(方法同2)，致炎前5天开始按表4所示组别与剂量分组给药(ig),模型组及正常对照组按给药高剂量给予同体积蒸馏水。每天1次，致炎后继续给药3天，于末次给药后lh，断头处死大鼠，分别在无菌条件下取前列腺50mg，于lml生理盐水中，充分混匀，镜下记录白细胞数和卵磷质小体数；同时将前列腺液接种于普通血琼脂平板上，37°C培养48h。记录菌落数，同时各组取前列腺用福尔马林固定做病理组织学检査。表5银花泌炎灵片对大肠杆菌致大鼠细菌性前列腺炎模型前列腺液检验指标的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>给药组与模型对照组比较*P<0.05**P<0.01正常对照组与模型对照组比较**P<0.01***P<0.001由表5结果表明，银花泌炎灵片10.8g生药/kg、5.4g生药/kg剂量组对大肠杆菌致大鼠细菌性前列腺炎模型具有明显的减少白细胞数量及提高卵磷质小体密度作用，同时还可降低前列腺炎大鼠前列腺中的细菌数，与模型对照组比较均有统计学意义，P<0.01、P<0.05。4、对小白鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响选取健康小白鼠50只,体重为18-22g，雌雄各半，随机分为5组，每组动物IO只。第l、2、3组为银花泌炎灵片高、中、低剂量组，剂量分别15.0g、7.5g、3.75g生药/kg，第4组为阳性药阿司匹林，剂量为0.3g/kg，第5组为对照组，动物连续灌胃给药5天，于末次给药lh后尾静脉注射0.5。/。伊文思蓝溶液0.01mL/g,立即腹腔注射0.6。/。醋酸生理盐水0.2ml/只,20min后脱颈椎处死小白鼠，轻擦腹部lmin，剖开腹腔用适量生理盐水反复冲洗,收集洗出液，滤纸滤过,并用生理盐水调整容积至6mL,用离心机(3000rPm)离心15min，取上清于752型分光光度计中(波长590nm)测定OD值,比较各组的差异,并直接计算抑制率。结果见表6。表6银花泌炎灵片对小白鼠腹腔毛细血管通透性的影响(X土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>与对照组比较*P<0.05**P<0.01表6结果显示，银花泌炎灵片高、中剂量对醋酸致小白鼠腹腔毛细血管通透性增高具有明显抑制作用(与对照组比较，PO.05)，但其作用不如阳性药物(PO.01)5、对大白鼠胸腔白细胞游走的影响''取大白鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组动物10只，1—3组为银花泌炎灵片高、中、低剂量组，剂量分别为10.8g、5.4g、2.7g/kg，4组为阳性药阿司匹林组，剂量为0.2g/kg，5组为对照组，实验时14组按剂量灌胃(ig)给药，每天1次，连续5天，对照组按给药高剂量组给予同体积蒸馏水。于末次给药lh后，将大白鼠用乙醚浅麻醉，仰位固定于手术台上。在大鼠右侧胸腔注入0.5M角叉菜胶0.5ml，5小时后断头处死大鼠，在横隔周边部打开胸腔，用注射器吸出胸腔液，记录渗出量和白细胞数，结果见表7。表7银花泌炎灵片对大白鼠胸腔白细胞游走的影响(X士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>与对照组比较*P<0.05**P<0.01由表7可知，银花泌炎灵片高、中剂量均大白鼠胸腔白细胞游走具有一定的抑制作用，但其作用弱于阳性对照药阿斯匹林。6、对大白鼠角叉菜胶性足肿胀的影响取大白鼠50只，雄性，随机分为五组，每组动物10只，1—3组为银花泌炎灵片高、中、低剂量组，剂量分别为10.8g、5.4g、2.7g/kg，4组为阳性药阿司匹林组，剂量为0.2g/kg，5组为对照组，实验时l"4组按剂量灌胃(ig)给药，每天1次，连续7天，对照组按给药高剂量组给予同体积蒸馏水。用自制窄带尺测量大白鼠左后足踝关节周长。于末次给药30min后，分别在大白鼠右后足皮下注射"/。角叉菜胶混悬液0.1ml/只。每小时测右后足踝关节周长1次，共6h。以每鼠左后足自身为对照，以左右后足踝关节周长之差为炎症肿胀度(mm)，结果见表8表8银花泌炎灵片对大白鼠角叉菜胶性足肿胀的影响(X土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>由表8结果表明，银花泌炎灵片10.8g/kg组对l~5h大白鼠角叉菜胶性足肿胀具有明显的抑制作用；银花泌炎灵片10.8g生药/kg组和5.4g生药/kg组12h有抑制作用，但其作用不如阳性药阿司匹林，说明本品具有一定的抗炎作用。7、对小白鼠扭体反应发生率的影响取小白鼠50只，雌雄各半，按表9所示剂量随机分成五组，每组动物IO只，动物ig给药，每天l次，连续5天(阳性药物当日给药)，对照组给同体积蒸馏水，于末次给药后lh,每鼠由腹腔注射0.6%醋酸溶液0.1ml/10g(体重)，5min后开始观察并记录lOmin内小白鼠扭体反应次数，结果见表9。计算公式对照组扭体次均数一给药组扭体次均数抑制率=-xioo%对照组扭体次均数表9银花泌炎灵片对小白鼠扭体反应的影响(X士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>与对照组比较***P〈0.001由表9结果表明，银花泌炎灵片高、中、低三个剂量均具有明显的镇痛作用，抑制率分别为47.21%、42.49%、51.07%。但作用不如阳性药阿司匹林组。8、对大白鼠的利尿作用取大白鼠50只，随机分为5组，第l、2、3组为银花泌炎灵片高、中、低剂量组，第4组为阳性药呋塞米片组，第5组为对照组。各给药组按剂量灌胃给药，连续5天，对照组给同体积蒸馏水，于末次给药后0.5小时，各鼠按2.5ml/100g的生理盐水腹腔注射，并轻压下腹部使膀胱排空(试验前一天禁食不仅水18hr)，立即将大白鼠放入代谢笼内，一个笼放动物l只，60分钟后收集各组动物的尿量共3次，每次60分钟。将各组大白鼠相应时间内的尿量的均值进行组间比较，作统计学处理，结果见表IO。表10银花泌炎灵片对大白鼠尿量的影响(X士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>与对照组比较*P<0.05***P<0.001由上表结果表明银花泌炎灵片高剂量组对小白鼠的利尿作用显著(*P<0.05)，但作用不如阳性药组(***P<0.005)，中剂量组和低剂量组作用效果不明显。9、银花泌炎灵片对大鼠棉球肉芽组织增生的影响取大鼠50只，每鼠以腹腔注射3%水合氯醛10ml/kg麻醉麻醉，在无菌条件下，将大鼠左右蹊部用碘酒消毒，75%酒精脱碘后，各切开l-1.5cm长小口，用眼科镊将20mg(灭菌)棉球埋入皮下，随即缝合皮肤，动物稳定一天，随机分成5，每组10只，按表ll所示剂量，动物均ig给药，每天1次，连续7天，对照组给同体积蒸馏水。于第7天将大鼠处死，打开原切口，取出棉球，剔除脂肪组织，放烘箱7(TC烘干，称重。结果见表11。计算公式肉芽肿重量=(两个肉芽肿重量/2)—20mg对照组肉芽肿重均数一给药组肉芽肿重均数抑制率=-xl00%对照组肉芽肿重均数表11银花泌炎灵片对大鼠棉球肉芽组织增生的影响组别剂量动物数(只，帛球肉芽肿重抑制率(g生药/kg)(mg)(%)银花泌10.81080.7±17.68**29.46炎灵片5.41087.1±18.80*23.862.710101.2±35.6611.54阿斯匹林0.2g/kg1074.1±8.76***35.23对照10114.4±29.87与对照组比较*P<0.05林P〈0.01林举P〈0.001由表11可知，银花泌炎灵片10.8g生药/kg、5.4g生药/kg两种剂量对棉球肉芽组织增生具有明显的抑制作用，其中10.8g生药/kg组经统计学处理P〈0.01，但作用不如阳性对照药阿斯匹林。10、银花泌炎灵片对金黄色葡萄球菌体内感染小白鼠的保护作用将金黄色葡萄球菌冻干品，复苏后接种于液体培养基中，于培养箱中37"C进行培养18小时，取出后用生理盐水以IO倍顺序稀释，同时加入5%浓度胃粘膜素(以强化毒力)制成不同梯度的菌悬液。经预试验，本试验条件下腹腔注射金黄色葡萄球菌最小致死量(MLD)为10"。正式试验，取小鼠75只，雌雄各半，体重18-20g，随机分为5组，每组15只，第l、2、3组为银花泌炎灵片组，剂量分别为31.2g、15.6g、7.8g生药/kg(分别相当于小鼠等效剂量的8倍、4倍、2倍)，第4组为阳性药阿莫西林胶囊组，剂量为0.52g/kg(相当于2倍等效剂量)，第5组为正常对照组给蒸馏水10ml/kg，每日ig给药2次，上、下午各一次，连续给药5天，于第5天给药后腹腔注射10"金黄色葡萄球菌悬液，每只0.5ml，并继续给药，观察24h死亡动物数，计算死亡率并进行x2统计学处理，结果见表12。表12银花泌炎灵片对金黄色葡萄球菌体内感染小鼠保护作用<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>表12结果表明，银花泌炎灵片31.2g生药/kg剂量组对金黄色葡萄球菌致小鼠体内感染有明显的保护作用与对照组比较P<0.05，其它两个剂量也有不同程度的抑制趋势，但统计学处理无明显性差异。说明本品具有明显的体内抑菌作用。11、银花泌炎灵片对大肠杆菌体内感染小白鼠的保护作用将大肠杆菌冻干品，复苏后接种于液体培养基中，于培养箱中37C进行培养18小时，取出后用生理盐水以IO倍顺序稀释，同时加入5%浓度胃粘膜素(以强化毒力)制成不同梯度的菌悬液。经预试验，本试验条件下腹腔注射金黄色葡萄球菌最小致死量(MLD)为菌原液。正式试验，取小鼠75只，雌雄各半，体重18-20g，随机分为5组，每组15只，第1、2、3组为银花泌炎灵片组，剂量分别为31.2g、15.6g、7.8g生药/kg(分别相当于小鼠等效剂量的8倍、4倍、2倍)，第4组为阳性药阿莫西林胶囊组，剂量为0.52g/kg(相当于2倍等效剂量)，第5组为正常对照组给蒸馏水10ml/kg，每日ig给药2次，上、下午各一次，连续给药5天，于第5天给药后腹腔注射IO"金黄色葡萄球菌悬液，每只0.5ml，并继续给药，观察24h死亡动物数，计算死亡率并进行x2统计学处理，结果见表13。表13银花泌炎灵片对大肠杆菌体内感染小鼠保护作用组别剂量动物数死亡数存活率P值(g生药/kg)(只)(只)(%)银花泌31.215473.3<0.05炎灵片15.615753.3>0.057.8151136.7>0.05阿莫西林0.5215473.3<0.01对照蒸馏水15146.7表13结果表明，银花泌炎灵片31.2g生药/kg剂量组对金黄色葡萄球菌致小鼠体内感染有明显的保护作用与对照组比较P<0.01，其它两个剂量也有不同程度的抑制趋势，但统计学处理无明显性差异。说明本品具有明显的体内抑菌作用。12、银花泌炎灵片体外抑菌试验和杀菌试验l.最低抑菌浓度(MIC)测定将银花泌炎灵片药粉用LB液体培养基分别配制成300、250、200、150、100、80、60、40、20、10mg.mr1。实验设21组，l-10组分别加入上述300mg.ml"-10mg.ml"10个浓度的药液,每组3只平行对照管；11-20组为只加上述相同浓度银花秘炎灵片药液不加菌液组，做为观察药物是否污染的药物对照组，每组3只平行对照管；21组为不加银花泌炎灵片药液只加细菌的对照组，同时设3只平行对照管。将接种细菌稀释适宜倍数后涂平板，37'C孵箱内培养过夜，菌落计数并拍照。将各组试验管置37"C恒温振荡培养箱内培养1618小时后，将观察未见细菌生长(与药液对照组比较)的最低药物浓度以上各药物组分别将管内液体稀释适宜倍数涂平板，37"C孵箱内培养过夜。菌落计数并拍照。抑菌率达到99.99%的最低药物浓度即为最低抑菌浓度(MIC)。测定结果表14和表15。2.最低杀菌浓度(MBC)测定将银花泌炎灵片药粉用LB液体培养基分别配制成300、250、200、150、100、80、60、40、20、10mg.mr1。实验设21组，1-10组分别加入上述300mg.ml丄10mg.mr110个浓度的药液，每组3只平行对照管；11-20组为只加上述相同浓度银花秘炎灵片药液不加菌液组，做为观察药物是否污染的药物对照组，每组3只平行对照管；21组为不加银花泌炎灵片药液只加细菌的对照组，同时设3只平行对照管。经接种菌液后，置37'C恒温振荡培养箱内培养1618小时。观察药物最低抑菌浓度(MIC)以上的各试验管培养物，分别吸取0.1ml，移至普通平板琼脂培养基上，用玻璃棒涂匀菌液，置37"C培养过夜，平板培养基中，计数少于5个菌落者作为该药物的最低杀菌浓度(MBC)。测定结果见表15。3.结果与分析银化泌炎灵片对大肠埃希氏菌株ATCC44102、金黄色葡萄球菌株ATCC26003、福氏志贺氏菌株ATCC51571;临床分离金黄色葡萄球菌株CIBS831、表皮葡萄球菌株CIBS2972、腐生葡萄球菌株CIBS3586、变形杆菌株CIBS1072、克雷伯杆菌株CIBS861、粪肠球菌株CIBS859、绿脓杆菌株CIBS868、真菌白色念珠菌株CIBS850及3株大肠杆菌菌株CIBS872、CIBS614、CIBS853体外抑菌实验均有较好的抑菌及杀菌效果。银化泌炎灵片对大肠杆菌菌株CIBS872、CIBS614、CIBS853、表皮葡萄球菌株CIBS2972、变形杆菌株CIBS1072、粪肠球菌株CIBS859、大肠埃希氏菌株ATCC44102、金黄色葡萄球菌株ATCC26003的MIC均为80mg.ml";金黄色葡萄球菌株CIBS831的MIC为100mg.ml";克雷伯杆菌株CIBS861的MIC为150mg.ml";腐生葡萄球菌株CIBS3586和绿脓杆菌株CIBS868的MIC均为60mg.ml";真菌白色念珠球菌株CIBS861和福氏志贺氏菌ATCC51571的MIC均为40mg-ml"。金黄色葡萄球菌株CIBS831和大肠埃希氏菌株ATCC44102的MBC均为300mg.ml";大肠杆菌菌株CIBS872、变形杆菌株CIBS1072和金黄色葡萄球菌ATCC26003的MBC均为250rng-rnr1;大肠杆菌菌株CIBS614、CIBS853、表皮葡萄球菌株CIBS2972、腐生葡萄球菌株CIBS3586、克雷伯杆菌株CIBS861、粪肠球菌株CIBS859、真菌白色念珠球菌株CIBS861的MBC均为200mg.ml";福氏志贺氏菌ATCC51571的MBC为150mg.mr1，绿脓杆菌株CIBS868的MBC为80mg.mr1。从上面的结果可以看出，银花泌炎灵片对大肠杆菌株CIBS872、CIBS614、CIBS853，表皮葡萄球菌株CIBS2972、变形杆菌株CIBS1072、粪肠球菌株CIBS859、绿脓杆菌株CIBS868、真菌白色念珠球菌株CIBS850和大肠埃希氏菌株ATCC44102、金黄色葡萄球菌株ATCC26003、福氏志贺氏菌株ATCC51571均有一定的抑菌作用；银花泌炎灵片对大肠杆菌株CIBS614、CIBS853,表皮葡萄球菌株CIBS2972、腐生葡萄球菌株CIBS3586、克雷伯杆菌株CIBS861、粪肠球菌株CIBS859、绿脓杆菌株CIBS868、福氏志贺氏菌株ATCC51571和真菌白色念珠球菌株CIBS861均有一定的杀菌作用。上述试验结果表明，银花泌炎灵片对标准菌株细菌大肠埃希氏菌株ATCC44102、金黄色葡萄球菌株ATCC26003、福氏志贺氏菌株ATCC51571;临床分离金黄色葡萄球菌株CIBS831、表皮葡萄球菌株CIBS2972、腐生葡萄球菌株CIBS3586、变形杆菌株CIBS1072、克雷伯杆菌株CIBS861、粪肠球菌株CIBS859、绿脓杆菌株CIBS868、真菌白色念珠菌株CIBS850及3株大肠杆菌菌株CIBS872、CIBS614、CIBS853具有一定的抑制作用。表14银花泌炎灵片对不同培养菌株的抑菌率(％)(单位-mg.mr1扭Sn=3)<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>表15银花泌炎灵片对体外培养不同菌株抑菌实验MIC及MBC计算结果(单{立mg'mr1)<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>结论通过动物试验研究结果表明，银花泌炎灵片不同剂量均对慢性前列腺炎动物模型具有明显的治疗作用。同时对细菌性、非细菌性两种急性前列腺炎模型亦有明显的抑制作用，证明本品对前列腺炎有明显治疗作用。试验还证实了该药的抗炎效果，实验者认为其抗炎活性可能是本品的药理基础。本品对小白鼠腹腔毛细血管通透性、大白鼠角叉菜胶性足肿胀及大白鼠棉球肉芽组织增生有明显的抑制作用。对小白鼠体内感染金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有明显的保护作用，体外抑菌、杀菌试验结果表明对标准菌株细菌大肠埃希氏菌株、金黄色葡萄球菌株、福氏志贺氏菌株；临床分离的金黄色葡萄球菌株、表皮葡萄球菌株、腐生葡萄球菌株等菌株均有一定的抑菌及杀菌作用。表明本品具有抗炎、抑菌、杀菌作用；另外，本品还具有明显的利尿及减少小白鼠扭体反应发生率等作用。综上所述，银花泌炎灵片具有较好的治疗急、慢性前列腺炎(新的适应症)作用，同时该药还有抗炎、止痛、改善微循环及利尿等多方面药理作用。具体实施例方式实施例1:片剂处方金银花270g,半枝莲136,瞿麦85g扁蓄85g,石韦85g,木通85g,车前子85g，淡竹叶85g,灯心草28g,桑寄生136g,制成1000片。制法金银花的80%，用70%乙醇回流提取2次，每次3小时，加乙醇量依次为生药量的8倍、6倍，合并提取液，滤过，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.21.5(6(TC)时备用，另取半枝莲、瞿麦等9味加水煎煮提取3次，煎煮时间依次为1,5小时、1.5小时、1小时，加水量依次为生药量的10倍、8倍、6倍合并提取液，滤过，浓縮至相对密度为1.101.35(6(TC)时备用。再取金银花的半量、去杂质、粗粉碎，同以上二个备用的稠膏合并，干燥，粉碎成细粉，过筛，制成颗粒，干燥，压制成1000片，包糖衣，即得。实施例2:胶囊剂处方金银花270g，半枝莲136g,瞿麦85g，扁蓄85g，石韦85g,木通85g，车前子85g,淡竹叶85g，灯心草28g,桑寄生136g，制成1000粒胶囊。制法金银花的80%，用70%乙醇回流提取2次，每次3小时，加乙醇量依次为生药量的8倍、6倍，合并提取液，滤过，回收乙醇，浓縮至相对密度为1.21.5(6(TC)时备用，另取半枝莲、瞿麦等9味加水煎煮提取3次，煎煮时间依次为1.5小时、1.5小时、1小时，加水量依次为生药量的10倍、8倍、6倍合并提取液，滤过，浓縮至相对密度为1.101.35(6(TC)时备用。再取金银花的半量、去杂质、粗粉碎，同以上二个备用的稠膏合并，干燥，粉碎成细粉，过筛，制成颗粒，干燥，装入1000粒胶囊即得。权利要求1、一种药物组合物在制备抗前列腺炎的药物中的应用，该药物组合物由以下重量配比的中药原料制成，金银花125～375份，半枝莲62～187份，瞿麦37～112份，扁蓄37～112份，石韦37～112份，木通19～56份，车前子37～112份，淡竹叶37～112份，灯心草12～37份，桑寄生62～187份。2、如权利要求1所述的药物组合物在制备抗前列腺炎的药物中的应用，该药物组合物由以下重量配比的中药原料制成金银花187-312份，半枝莲93156份，翟麦5693份，扁蓄5693份，石韦5693份，木通2847份，车前子56~93份，淡竹叶5693份，灯心草19~31份，桑寄生93156份。3、如权利要求2所述的药物组合物在制备抗前列腺炎的药物中的应用，该药物组合物由以下重量配比的中药原料制成金银花190-270份，半枝莲110-136份，瞿麦6585份，扁蓄6585份，石韦6585份，木通6585份，车前子6585份，淡竹叶6585份，灯心草12-28份，桑寄生110136份。全文摘要本发明涉及一种药物组合物在制备抗前列腺炎的药物中的应用，属于中药领域。是《治疗热淋的中药制剂》，专利号为02146487.1的药物组合物的新的药物用途，该药物组合物由以下重量配比的中药原料制成，金银花125～375份，半枝莲62～187份，瞿麦37～112份，扁蓄37～112份，石韦37～112份，木通19～56份，车前子37～112份，淡竹叶37～112份，灯心草12～37份，桑寄生62～187份。本发明具有抗前列腺炎的作用，药物配方中的中药，其药源丰富，价格低廉，携带方便，易为患者所接受。适用于广大患者使用，故有相当可观的社会效益及经济效益。文档编号A61K36/899GK101181540SQ20071005635公开日2008年5月21日申请日期2007年11月27日优先权日2007年11月27日发明者刘传贵,张广民,朱继忠,李春燕,王福文,董长萍,贾学忠,波路,闫智力申请人:吉林华康药业股份有限公司