专利名称：：新的2,3,3a,4-四氢硫色烯并[4,3-c]吡唑类抗炎、抗真菌化合物的制作方法
技术领域：
：本发明专利涉及含氮硫的杂环化合物，特别是涉及一类2,3,3M"四氢硫色烯并二氢吡唑系列抗炎、抗真菌合成药物。
背景技术：
：'真菌是一种与宿主细胞有相似结构和生理代谢过程的真核细胞生物,按照真菌引起的感染部位不同，分为浅部菌感染和深部菌感染。浅部真菌感染主要是由各种癣菌引起，如手足癣、头癣、体癣等，目前常以灰霉菌素、制霉菌素、酮康唑等作为治疗药物。深部真菌感染危害大，甚至危机生命，他主要由致病真菌引起，它包括白色念珠菌、新型隐球菌、曲霉菌、毛霉菌等，这些真菌属于正常机体内菌群成员，正常情况下不引起疾病，但是，长期大量使用广谱抗生素、激素和兔疫抑制剂等可以导致发病。近年来，深部真菌感染的发病率有逐年上升的趋势。由于真菌的生物特性，一般抗真菌药物往往在破坏真菌细胞同时，又織伤宿主细胞,再加上耐药菌株的不断出现,使得真菌感染疾病的治疗陷于两难之境。截至目前，可应用于临床的疗效好、毒副作用小、安全系数(safetyIndex,LDs/ED95)高的药物寥寥无几。两性霉素B和三唑类氣康唑类药物也因其毒副作用大而在应用方面受限。因此，开发和探求一种高效低毒、具有治疗预防双重功效的广谱和窄谱抗真菌活性的新化合物，成为当前一项具有重要i义的研究工作。
发明内容本发明的目的在于弥补上述现有技术中的不足之处，而提供合成方法简单、效果好的2，3,3M-四鲺硫色烯并[4,3-c〗吡唑系列抗真菌合成药物。本发明目标物可以通过如下措施来达到:抗真菌2,3，3M-四氢硫色烯并4，3《]吡啤类化合物，其特征在于用通式(I)、(H沐示化合物-<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中当R,、R2、R3中有一个或两个为H时，另外两个或一个分别为-R产X(卤素取代基)、-OH、-OMe、-OEt、-Me、-EtR2=X(卤素取代基)、Me、-OMe、-OEt、-CF3R3=X(鹵素取代基)、Me、-OMeR4=H、-MeRs=-COCH3、-COCH2CH3当&、R7、Rs中有一个或两个为H时，另外两个或一个分别为:R=H、X(鹵素取代基)、-OMe、-OEt、-Me、-扱、-NMeaR产H、X(离素取代基)、-OMe、-OEt、-Me、-Et、-NMeaR晷-H、X(卤素取代基)、-Me卤素取代基是指氟、氯、溴、碘。2，3,3a^-四氯硫色烯并[4,3-c〗吡喃系列药物的合成方法是(详见附表1)在苯磺酰氯(或取代苯磺酰氯)中加入金属锌，然后向其中滴加4MH2S04，边滴加边搅拌,分离纯化得到苯硫酚(或取代苯硫酚),再将该产物溶于2MNaOH溶液中(可和入适量的乙醇)。另将t氯丙酸(或其甲基酯、乙基酯)溶于计算量的Na2C03溶液中，然后与上述溶液混合超声，回流6—8小时，除尽醇后抽滤，滤液用4MHaS04酸化，减压蒸馏，抽滤，水洗干燥，得p—(取代苯硫)一丙酸，再用聚磷酸(或浓硫酸)缩合，分离纯化得到取代塞克尔曼酮(Thiochromano加)粗品。在芳香醛(取代芳香醛)的乙醇和10%NaOH混合溶液中室温下滴加上述得到的取代塞克尔曼酮，加完后保持温度反应1小时，冷却抽滤，水洗，得取代亚甲基取代塞克尔曼酮。得到的产品与水合肼在冰醋酸中加热回流15小时，然后倒入冰水中抽滤的粗品。粗品柱分离得到产物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(ni)、<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(IV)、<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(V)、<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(￥1)。R,、R2、R3、R4、Rs、Rfi、R7、R定义同上。附表12A3M-四氨硫色烯并43"CP比唑类化合物的合成方法<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>R2、Rs、R4、Rs、Re、R7、R定义同上-本发明相比现有技术具有如下优点-2，3,3M-四氢硫色烯并4,3-c]吡唑类系列化合物是含有氮硫原子的杂环化合物，具有广泛生物活性。它不但对常见浅表真菌感染具有较好的抑制活性，而且对深部真菌具有良好的杀菌活性。本发明原料常见易得、合成方法简单、收率较高，有很好的研究价值和应用前景。具#雄力《下面列举制备例和实施例，结合附表2对本发明加以进一歩说明。制备例1附表2中化合物l苯硫酚的制备取0.2mol苯磺酰氯置于三颈瓶中，另称取27g金属锌粉加入，搅拌均匀，OX)冰水浴滴加4MH2S04，边滴加边搅拌，反应6—8小时后，过滤分离，洗涤，干燥，重结晶纯化。产率为89.8—92.1%,熔点为70.71C。若合成取代苯硫酚，可用取代苯磺酰氯合成，方法与上述步骤基本相同；例如卤代苯磺酰氯收率一般在77%—89%之间。制备例2附表》中化合物2[6—氟一塞克尔曼酮〗的制备将上述制得的氟代苯硫酚50mmo1溶于2MNaOH溶液中(可加入适量的乙醇)。另将8.2gp—氯丙酸(或10g其甲基酯)溶于计算量的Na2C03溶液中，然后与上述溶液混合，超声，回流6—8小时，除尽醇后抽滤，滤液用4MH2S04.酸化搅拌1—2小时后抽滤，水洗干燥，得P—(取代苯硫)一丙酸，再用聚磷酸(或浓硫酸)縮合24小时，分离纯化得到6—氟一塞克尔曼酮。产率70—75%，熔点92_93t!。测得的理化常数见附表2。制备例3附表2化合物3f3-次苄基-6-氟-硫色满酮]在38mmo110%KOH溶液和7.4ml无水乙醇中，搅拌下加入30mmd6—氟一硫色满酮(3),温度控制在22-301C,加入30咖o1苯甲醛，保持反应温度反应3.5h。反应液在冰箱中放置10h，.冷至0C抽滤水洗至中性。用乙醇/水重结晶干燥得浅黄色3-次苄基-6-氟-硫色满酮，产率85-92%。测得的理化常数见附表2。实施例！lOOmmol对氟苯硫酚，120rnmo13—氯丙酸，加入250mmol20%NaOH溶液,.充分搅拌，覽于500ml的锥形瓶中，混合均匀，微波辐射45min，得到白色粘稠液体，盐酸调pH^1，有大量浅黄色沉淀产生，抽滤，干燥，以95%乙醇/水重结晶.得到白色固体3-(4-氟-苯巯基)-丙酸，产率65-75%。取制备的3-(4-氟-苯巯基)-丙酸(2)13mmol溶解在20ml浓硫酸在室温下放置18h。反应液冰解，过滤，滤饼用5-10MN必CO3溶液洗涤，洗至中性，抽滤干燥，得浅黄色固体6—氟一硫色满酮，产率80-85%。在38mmd10%KOH溶液和7.4ml无水乙醇中，搅拌下加入30mmol6—氟一硫色满酮(3),温度控制在22-30C加入30咖ol苯甲醛，保持反应温度反应3.5h。反应液在冰箱中放置10h,冷至01C,抽滤水洗至中性。用乙醇/水重结晶干燥得浅黄色3-次苄基-6-氟-硫色满翻，产率85-92%。18mmo13—次节基一6—氟-硫色满酮和和72mmo180%水合肼在75ml冰醋酸中加热回流4.5h,将反应液倒入冰水中，抽滤干燥，硅胶(300-400目)柱分离纯化，洗脱剂使用二氯甲烷&酸乙酯(120:1),得到白色画体4和5。其它化合物的制备同4和5。<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>抑菌试验本发明2,3,3a,4-四氢硫色烯并[4，3《]吡唑系列药物通过对10属、18种18株真菌，采用二倍浓度稀释法进行体外抑菌实验，结果参见附表3。供试菌株白色念珠菌(C.albkas)、热带念珠菌(C.tropicalis)、啤酒酵母菌(C.cecerisiae)、新生隐球菌(C.neofoimans)、絮状表皮癣菌(E.floccosum)、石裔样毛癣菌(T.gypscnmi)、红色毛癣菌(T.vubrum)、断发毛癣菌(T.tonsurans)、石裔样小孢子菌(M.epseum)、木霉菌(trichoderum)、黑曲霉菌(A.niger)、灰绿曲菌(A.glaucus)、普通青霉菌(P.commime)、裴氏瓶霉菌(P.pedrosoi)、卡氏枝孢霉菌(C.carionii》、紧密瓶霉菌(P.comaitum)、疣状瓶霉菌(P.veircosa)和申克孢子丝菌(S,sc^enekn)。菌液配制将充分发育的供试菌种移至5ml无菌生理盐水内，捣碎后超声充分震荡，去除块状不溶物质，混匀，作为原菌液，测试时调整其浓度为106个细胞/ml后使用。实验方法供试化合物用适量二甲亚砜溶解，再用无菌蒸馏水稀释，加入灭过菌的m(热)的葡萄糖蛋白陈琼脂培养基中，样品浓度为200,100,50,25,12.5,6.25,3.12,L60mg/mL,接种供试菌以后，置恒温烘箱培养5-7日以无真菌生长的最高稀释浓度为最小抑菌浓度虹C。从实验结果可以看出，2,3,3a,4-四氢硫色烯并[4，3-c]吡唑系列化合物对真菌都有不同程度的抑制活性，其中一些化合物的抗真菌活性与对照品克霉哇相当；有些甚至优于克霉哇的抗真菌活性。总之，本发明涉及到的药物，都是以苯磺酰氯(或取代苯磺酰氯)作为原料合成出来的，合成反应过程中用到的各种化学试剂都是常见和简单易得的，反应的收率也比较理想。通过药理毒理学实验，表明系列化合物对真菌都有不向程度的抑制活性。本发明化合物广泛应用于抗真菌领域，有广阔的研究价值和应用前景。附表3体外抑菌实验结果表MC(m^L)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>权利要求1.具有抗炎、抗真菌活性的2，3，3a，4-四氢硫色烯并[4，3-c]吡唑类化合物。2.根据权利要求l,2,3,3a,4-四氛硫色烯并[4,3《p比唑类化合物，其特征在于用通式(I)、(I!)表示化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>(I)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>(I!)其中当R1、R2、R3中有一个或两个为H时，另外两个或一个分别为:R产X(鹵素取代基)、-OH、-OMe、-OEt、-Me、歸EtR2=X(齒素取代基)、Me、-OMe、-OEt、-CF3R3=X(卣素取代基)、Me、-OMeR4=H、-Me、-EtRs=-COCH3、-COCH2CH3当Re、R7、Ri中有一个或两个为H时，另外两个或一个分别为Re-H、X(鹵素取代基)、-OMe、《0扱、-Me、-Et、-NMeaR产H、X(鹵素取代基)、-OMe、-OEt、-Me、-Et、-NMeiRs-H、X(卤素取代基)、-Me卤素取代基是指氟、氯、溴、碘。3.根据权利要求1,2,3,3a,4-四氢硫色烯并[4,3-e吡唑类化合物的特征在于具有抗炎、抗真菌活性，可作为抗炎、抗真菌药物。全文摘要本发明公开了新的具有抗炎、抗真菌活性的含氮硫的并三环杂环化合物2，3，3a，4-四氢硫色烯并二氢吡唑类化合物。针对现有技术中抗真菌药物少，毒性大的研发现状，本发明进行了新的2，3，3a，4-四氢硫色烯并二氢吡唑类化合物的设计合成，并进行了真菌实验，实验结果表明这一类化合物具有好的抗真菌活性。本发明化合物合成方法简单，原料易得，合成方法详见说明书。本发明产品可用于抗炎抗真菌药物。文档编号A61P31/10GK101353351SQ20071012973公开日2009年1月28日申请日期2007年7月25日优先权日2007年7月25日发明者杨更亮,祝士国,马正月申请人:杨更亮