专利名称：难溶性药物纳米粒的制备方法
技术领域：
本发明涉及到医药技术领域，涉及一种难溶性药物纳米粒的制备方法。
技术背景近10年来，药物高通量筛选技术得到了广泛应用，但筛选出的活性化合物 大多分子量高、疏水性强。据统计，目前至少有40%的药物因水溶解度问题使 用受到限制， 一些药物甚至难溶于有机溶剂。在制剂过程中，采用环糊精包合 技术、表面活性剂增溶、乳剂、微乳、包合物、固体分散技术、聚合物纳米粒 及脂质系统等可解决一些难溶性药物的低生物利用度问题，但均存在载药量低、 制备工艺复杂及稳定性较差等问题。而本发明所提到的这种纳米粒给这些药物 提供了重现自身价值的机会，近年来国外研究者对此种纳米粒给予了高度重视。 该剂型是加入适宜表面活性剂的纳米级"纯药物"的稳定胶状分散体系，又叫 作纳米混悬剂(nanosuspensions)。而传统意义上的纳米粒如聚合物纳米粒、固 体脂质纳米粒等属基质骨架型，是由高分子聚合物或脂质材料裹载药物组成的 固态胶状粒子，与纳米混悬剂的概念有别。此外，对纳米级药物进行表面修饰(如 PEG化)后所得的粒子也属于纳米混悬剂的范畴。近年来的研究发现，纳米混悬剂能增加药物溶出度、提高药物的生物利用 度、增加药物稳定性及提高药效，这使得那些溶解性差的抗生素类药物、抗肿 瘤药物和一些治疗窗窄的药物能发挥更好的作用。纳米混悬剂的制备关键是纯药物的纳米粒的制备，美国专利2002/0168402 Al、 6951656 B2报道了一种通过微沉淀来制备药物亚微米粒的方法。另外美国 专利2006/0280786 Al和其它文献报道有微乳法、溶剂蒸发沉淀法、熔融乳剂 法、超临界流体法等方法制备药物亚微米粒。但是微沉淀法制备药物亚微米粒 时，采用高速分散或加热来添加能量的过程，能量分散不均(导致粒径分布不 均)、或可能引起药物不稳定；采用微乳法、乳剂法制备药物亚微米粒时，需要 的表面活性剂量较大，会带来较多的毒副作用；另外采用蒸发沉淀法制备药物 亚微米粒时，也可能会引起药物的不稳定。以上这些问题影响了制剂的长期稳 定性和给药途径，或者限制了待开发药物的适用性，从而影响了此制剂的推广。 发明内容本发明目的在于提供一种简单、快速、耗能少、易规模化的制备难溶性药物 纳米粒的方法，从而提供一种解决难溶性药物的低溶解度、高毒副作用、低生物 利用度问题的制剂化方法和一种开发难溶性药物的新剂型。本发明的制备方法采用如下技术方案(l)将药物溶于第一溶剂(良溶剂)中 形成溶液，(2)把溶液与第二溶剂(非良溶剂)混合形成预混悬液，(3)对预混悬 液施加能量以形成平均有效粒径小于2to纳米粒。(4)对此纳米混悬液作进一步 的制剂加工。药物溶液配制过程稳定剂可以随药物一起加入到良溶剂中，也可以加入到 非良溶剂中，或者将不同的稳定剂分别加入到良溶剂和非良溶剂中。另外，药 物-稳定剂质量比范围为20:1 -2:1。预混悬液制备过程两种溶液混合时，第一溶液加入到第二种溶液中的形态可以是细流和液滴形式，这一点能通过加入用的器具来控制，如滴管、注射器 等。其具体步骤为1) 药物溶液的配制将药物加到良溶剂中，60°C， 500 rpm条件下加热并 搅拌，至药物完全溶解，继续搅拌15min，放冷，0.22陶膜过滤，备用；2) 稳定剂溶液的配制把等渗调节剂加入水中，搅拌溶解，再加入稳定剂， 搅拌或超声至溶解，最后加入li稳定剂，并超声溶解，0.22to膜过滤，备用；或把等渗调节剂加入水中，搅拌溶解，再加入稳定剂，搅拌或超声至溶解； 0 22Mm膜过滤，备用5或把溶液^为两^分来配制； 一部分是把等渗调节剂加入水中，搅拌溶解， 再加入助稳定剂，搅拌或超声至溶解，调pH值至8.0士0.5，用0.22Mm膜过滤； 另一部分是将稳定剂通过超声或薄膜分散法分散于水中，再将以上两部分混合 在一起，备用；3) 稳定剂替代溶液的配制方法同稳定剂溶液的配制，但总量为200ml; 或将稳定剂与等渗调节剂一同加入水中，其余同稳定剂溶液的配制，但总量为200ml;4) 微沉淀的制备将过滤好的药物溶液在200-5000 rpm搅拌条件下以 1-3ml/min的速度注入稳定剂溶液，同时保持稳定剂溶液的温度在0°C - l(TC 范围内，药液加完后，维持同样的条件继续搅拌30min，制成预混悬液；5) 高压匀质过程用高压均质机，将预混悬液加入均质机加料斗中，缓慢 增加均质压力到操作压力600-1200bar，保持50。C以下，预混悬液均质15-25 次，得纳米混悬液，用5ml安娀取2ml样品测粒径，冷却其余样品至l(TC以下；6) 洗涤和替换把上述纳米混悬液在8000-13000rpm的转速下，离心30min， 并保持混悬液温度在1(TC以下，测定上清液体积并弃去，用新鲜的替代液替换， 用药勺将沉淀物定量转移到适当的容器中，用高速分散匀质机重新分散沉淀， 分散速度为8000-12000rpm。上述得到的混悬液，再一次经过洗涤和替换操作；7) 第二次高压均质均质条件及过程同5);8) 分装用5ml安瓿取最后产品2ml测粒径，其余样品冷却至1"C以下， 向混悬液中充氮气10min，但其要经过O. 22陶膜过滤，测粒径后将每10ml混悬液分装于分装于西林瓶中，备用；9) 冻干将样品在-2(TC下预冻2h，快速冷冻到-4(TC/24h，然后在-25°C 下冻干24h，封装即可。良溶剂可以选自N-甲基吡咯烷酮、2-吡咯烷酮、二甲基乙酰胺、乳酸、 二甲基亚砜、甲醇、乙醇、异丙醇、丙醇、甘油、丙二醇、乙二醇、丁二醇、 丙酮、二甲基甲酰胺、聚乙二醇、聚乙二醇酯、聚丙二醇等中的一种或一种以 上的混合物；稳定剂可选自如羟丙基纤维素、盐酸精氨酸、十二垸基硫酸钠、 聚乙烯吡咯烷酮、维生素ETPGS、羧甲基纤维素钠、吐温80、泊洛沙姆188、 普朗尼克127、卵磷脂、羟基卵磷脂、大豆卵磷脂、大豆磷脂、胆固醇、胆酸钠、 去氧胆酸钠、Transcutol中的一种或一种以上的混合物。药物纳米粒制备技术添加能量过程中，可以选择超声、高速分散匀质、高压匀质中的一种或一种以上的联合方法。药物纳米粒制备技术最后制成的剂型可以是注射剂、冻干粉针剂、片剂、 丸剂、胶囊剂、凝胶剂、粘膜黏附剂等各种剂型。本发明的优点在于将难溶性药物制成"纯药物"纳米粒，可以提高药物的 饱和溶解度，从而提高药物的血管外用药的生物利用度；本发明是以较少量的 辅料来稳定高药物含量的制剂，因此可以大幅度降低药物制剂的使用体积，结 果起到降低制剂中赋形剂、溶剂和增溶剂等辅料所引起的剂量依赖性毒副作用； 另外，采本发明中研究的制备方法具有工艺简单、制剂稳定性好的特点；本 发明中的纳米粒具有被动靶向和缓控释作用。
具体实施例方式下面的实例将为本发明作进一步阐明，并将作为本发明的内容。 实施例1伊曲康唑纳米混悬液的制备本发明在每100ml伊曲康唑纳米混悬液中含有以下组分伊曲康唑lg， N-甲基吡咯垸酮6ml，稳定剂0.2g，助稳定剂0.05g，等渗调 节剂2.2g，其余为水。所述的稳定剂为poloxamer 188，所述助稳定剂为脱氧 胆酸钠，新述等渗调节剂为甘油。制备方法1. 药物溶液的配制将伊曲康唑加到N-甲基吡咯烷酮中，加热并搅拌(60 °C， 500 ipm)，至药物完全溶解，继续搅拌15min，放冷，0. 22to膜过滤，备用。2. 稳定剂溶液的配制把甘油加入水中，搅拌溶解，再加入poloxamer 188， 搅拌或超声至溶解，最后加入脱氧胆酸钠，并超声溶解。0.22Wn膜过滤，备用。'3.稳定剂替代溶液的配制方法同"稳定剂溶液的配制"，但总量为200ml。4. 微沉淀的制备将过滤好的药物溶液在搅拌条件下(800 rpm)以lml/min 的速度注入稳定剂溶液，同时保持稳定剂溶液的温度在0°C - l(TC范围内。药 液加完后，维持同样的条件继续搅拌30min，最后产品本发明称为"预混悬液"。5. 高压匀质过程用高压均质机，将预混悬液加入均质机加料斗中，缓慢 增加均质压力到操作压力600bar，保持5(TC以下，预混悬液均质20次，得纳 米混悬液，用5ml安瓿取2ml样品测粒径，冷却其余样品至l(TC以下。6. 洗涤和替换把上述纳米混悬液在10000rpm的转速下，离心30min，并 保持混悬液温度在l(TC以下，测定上清液体积并弃去，用新鲜的替代液替换， 用药勺将沉淀物定量转移到适当的容器中，用高速分散匀质机重新分散沉淀， 分散速度为8000rpm。上述得到的混悬液，再一次经过洗涤和替换操作。7. 分装用5ml安瓿取最后产品2ml测粒径，其余样品冷却至TC以下。 向混悬液中充氮气10min，但其要经过0. 22陶膜过滤。粒径测定结果满意后(平 均粒径为100 _ 1000nm)，将每25ml混悬液分装于适当的容器中，封口前用氮 气充满容器空间。实施例2紫杉醇纳米混悬液的制备本发明在每100ml紫杉醇纳米混悬液中含有以下组分紫杉醇O. 17g， 二甲基甲酰胺7ml，稳定剂0.85g，助稳定剂0. 05g，等渗调节剂2.0g，其余为水。所述的稳定剂为PE-PEG2000，所述助稳定剂为Transcuto1， 所述等渗调节剂为甘油。 制备方法1. 药物溶液的配制将PE-PEG2000加到二甲基甲酰胺中，搅拌溶解，再加 入紫杉醇，加热并搅拌(6(TC， 500rpm)，至药物完全溶解，继续搅拌15min， 放冷，0.22Mra膜过滤，备用。2. 稳fe剂溶液的配制把甘油加入水中，搅拌溶解，再加入Transcutol， 搅拌或超声至溶解。0.22Mm膜过滤，备用。3. 稳定剂替代溶液的配制将PE-PEG2000与甘油一同加入水中，其余同 "稳定剂溶液的配制"，但总量为200ml。4. 微沉淀的制备将过滤好的药物溶液在搅拌条件下(400 rpm)以2ml/min 的速度注入稳定剂溶液，同时保持稳定剂溶液的温度在0°C - l(TC范围内。药 液加完后，维持同样的条件继续搅拌30min，最后产品本发明称为"预混悬液"。5. 高压匀质过程用高压均质机，将预混悬液加入均质机加料斗中，缓慢 增加均质压力到操作压力1200bar，保持5(TC以下，预混悬液均质15次，得纳 米混悬液，用5ml安瓿取2ml样品测粒径，冷却其余样品至l(TC以下。6. 洗涤和替换把上述纳米混悬液在13000rpm的转速下，离心30min，并 保持混悬液温度在l(TC以下，测定上清液体积并弃去，用新鲜的替代液替换， 用药勺将沉淀物定量转移到适当的容器中，用高速分散匀质机重新分散沉淀， 分散速度为12000rpm。上述得到的混悬液，再一次经过洗涤和替换操作。7. 第二次高压均质均质条件及过程同"5.高压匀质过程"。8. 分装用5ml安瓿取最后产品2ml测粒径，其余样品冷却至rC以下。 向混悬液中充氮气10min，但其要经过0. 22Wn膜过滤。粒径测定结果满意后(平 均粒径为50 - 200nm)，将每10ml混悬液分装于西林瓶中，备用。9. 冻干将样品在-2(TC下预冻2h，快速冷冻到-4(TC/24h，然后在-25°C 下冻干24h，封装即可。 、实施例3羟基喜树碱纳米混悬液的制备本发明在每100ml羟基喜树碱纳米混悬液中含有以下组分羟基喜树碱O. lg， 二甲基亚酰胺10ml，稳定剂1.0g，助稳定剂0.05g，等渗调节剂2. Og，其余为水。所述的稳定剂为PVP K30，所述助稳定剂为mPEG-DSPE，所述等渗调节剂为甘露醇。1. 药物溶液的配制将羟基喜树碱加到二甲基亚酰胺中，加热并搅拌(70 °C， 500 rpm)，至药物完全溶解，继续搅拌15min，放冷，0. 22Wn膜过滤，备 用。2. 稳定剂溶液的配制把甘露醇加入水中，搅拌溶解，再加入PVP K30 188， 搅拌或超声至溶解，最后加入mPEG-DSPE，，并超声溶解。0. 22陶膜过滤，备 用。3. 稳定剂替代溶液的配制方法同"稳定剂溶液的配制"，但总量为200ml。4. 微沉淀的制备将过滤好的药物溶液在搅拌条件下(600 rpm)以2ml/min 的速度注入稳定剂溶液，同时保持稳定剂溶液的温度在0°C - l(TC范围内。药液加完后，维持同样的条件继续搅拌30min，最后产品本发明称为"预混悬液"。5. 高压匀质过程用高压均质机，将预混悬液加入均质机加料斗中，缓慢 增加均质压力到操作压力1000bar，预混悬液均质20次，得纳米混悬液，用5ml 安瓿取2ml样品测粒径，冷却其余样品至l(TC以下。6. 洗涤和替换把上述纳米混悬液在8000rpm的转速下，离心30min，并 保持混悬液温度在l(TC以下，测定上清液体积并弃去，用新鲜的替代液替换， 用药勺将沉淀物定量转移到适当的容器中，用高速分散匀质机重新分散沉淀， 分散速度为8000rpm。上述得到的混悬液，再一次经过洗涤和替换操作。7. 第二次高压均质均质条件及过程同"5.高压匀质过程"。8. 分装用5ml安瓿取最后产品2ml测粒径，其余样品冷却至rC以下。 向混悬液中充氮气10min，但其要经过0. 22陶膜过滤。粒径测定结果满意后(平 均粒径为70 - 600nm)，将每2ml混悬液分装于西林瓶中，备用。9. 冻千将样品在-2(TC下预冻3h，快速冷冻到-4(TC/24h，然后在-25°C 下冻干24h，封装即可。实施例4多西他赛纳米混悬液的制备本发明在每100ml多西他赛纳纳米混悬液中含有以下组分多西他赛纳2g，乙醇10ml，稳定剂1. 2 g，助稳定剂0. lg，等渗调节剂2. Og，其余为水。所述的稳定剂为卵磷脂，所述助稳定剂为mPEG-DSPE，所述等渗调节剂为聚乙二醇。1.药物溶液的配制将多西他赛加到乙醇中，加热并搅拌(6(TC，500 rpm)， 至药物完全溶解，继续搅拌15min，放冷，0.22to膜过滤，备用。'2.稳定剂溶液的配制此溶液分为两部分来配制。 一部分是把聚乙二醇加 入水巾，搅拌溶解，再加入mPEG-DSPE，搅拌或超声至溶解，调pH值至8.0士 0.5，用0.22刚膜过滤。另一部分是将卵磷脂通过超声或薄膜分散法分散于水 中，再将以上两部分混合在一起，备用。3. 稳定剂替代溶液的配制方法同"稳定剂溶液的配制"，但总量为200ml。4. 微沉淀的制备将过滤好的药物溶液在搅拌条件下(1000 rpm)以 3ml/min的速度注入稳定剂溶液，同时保持稳定剂溶液的温度在0°C - l(TC范 围内。药液加完后，维持同样的条件继续搅拌30min，最后产品本发明成为"预 混悬液"。、5. 高压匀质过程用高压均质机，将预混悬液加入均质机加料斗中，缓慢 增加均质压力到操作压力800bar，预混悬液均质25次，得纳米混悬液，用5ml 安瓿取2ml样品测粒径，冷却其余样品至l(TC以下。6. 洗涤和替换把上述纳米混悬液在12000rpm的转速卜_，离心30min，并 保持混悬液温度在l(TC以下，测定上清液体积并弃去，用新鲜的替代液替换， 用药勺将沉淀物定量转移到适当的容器中，用高速分散匀质机重新分散沉淀， 分散速度为8000rpm。上述得到的混悬液，再--次经过洗涤和替换操作。7. 第二次高压均质均质条件及过程同"5.卨压匀质过程"。8. 分装用5ml安瓿取最后产品2ml测粒径，其余样品冷却至1"C以下。 向混悬液中充氮气10min，但其要经过0. 22刚膜过滤。粒径测定结果满意后(平均粒径为80 - 800nm)，将每10ml混悬液分装于西林瓶中，备用。9.冻干将样品在-20。C下预冻2h，快速冷冻到-40。C/24h，然后在-25°C 下冻干24h，封装即可。对于伊曲康唑纳米混悬液，其载药量为l%(w/v)，常用剂量下静注体积为 25ml，最大耐受量为300mg/kg，给药频率为1次/2天，4。C储存24个月稳定保 持稳定；絷杉醇纳米混悬液，其载药量为0. 17%(w/v)，最高有效剂量为60mg/kg， 4"C储存16个月稳定保持稳定；羟基喜树碱纳米混悬液，其载药量为0. 1%，最 大耐受量为15mg/kg， 4"C储存18个月稳定保持稳定；多西他赛纳米混悬液，其 载药量为2%，最大耐受量为10mg/kg， 4"C储存12个月稳定保持稳定。
权利要求
1、难溶性药物纳米粒的制备方法，其特征在于包括如下步骤1)药物溶液的配制将药物加到良溶剂中，60℃，500rpm条件下加热并搅拌，至药物完全溶解，继续搅拌15min，放冷，0.22μm膜过滤，备用；2)稳定剂溶液的配制把等渗调节剂加入水中，搅拌溶解，再加入稳定剂，搅拌或超声至溶解，最后加入助稳定剂，并超声溶解，0.22μm膜过滤，备用；或把等渗调节剂加入水中，搅拌溶解，再加入助稳定剂，搅拌或超声至溶解；0.22μm膜过滤，备用；或把溶液分为两部分来配制；一部分是把等渗调节剂加入水中，搅拌溶解，再加入助稳定剂，搅拌或超声至溶解，调pH值至8.0±0.5，用0.22μm膜过滤；另一部分是将稳定剂通过超声或薄膜分散法分散于水中，再将以上两部分混合在一起，备用；3)稳定剂替代溶液的配制方法同稳定剂溶液的配制，但总量为200ml；或将稳定剂与等渗调节剂一同加入水中，其余同稳定剂溶液的配制，但总量为200ml；4)微沉淀的制备将过滤好的药物溶液在搅拌条件下以1-3ml/min的速度注入稳定剂溶液，同时保持稳定剂溶液的温度在0℃-10℃范围内，药液加完后，维持同样的条件继续搅拌30min，制成预混悬液；5)高压匀质过程用高压均质机，将预混悬液加入均质机加料斗中，缓慢增加均质压力到操作压力600-1200bar，保持50℃以下，预混悬液均质15-25次，得纳米混悬液，用5ml安瓿取2ml样品测粒径，冷却其余样品至10℃以下；6)洗涤和替换 把上述纳米混悬液在8000-13000rpm的转速下，离心30min，并保持混悬液温度在10℃以下，测定上清液体积并弃去，用新鲜的替代液替换，用药勺将沉淀物定量转移到适当的容器中，用高速分散匀质机重新分散沉淀，分散速度为8000-12000rpm，上述得到的混悬液，再一次经过洗涤和替换操作；7)第二次高压均质均质条件及过程同5)；8)分装用5ml安瓿取最后产品2ml测粒径，其余样品冷却至1℃以下，向混悬液中充氮气10min，但其要经过0.22μm膜过滤，测粒径后将每10ml混悬液分装于分装于西林瓶中，备用；9)冻干将样品在-20℃下预冻2h，快速冷冻到-40℃/24h，然后在-25℃下冻干24h，封装即可。
2. 根据权利要求1所述的难溶性药物纳米粒的制备方法，其特征在于 良溶剂选自N-甲基吡咯烷酮、2-吡咯烷酮、二甲基乙酰胺、乳酸、二甲基亚砜、 甲醇、乙醇、异丙醇、丙醇、甘油、丙二醇、乙二醇、丁二醇、丙酮、二甲基 甲酰胺、聚乙二醇、聚乙二醇酯、聚丙二醇等中的一种或一种以上的混合物； 稳定剂选自羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、甲基纤维素、盐酸精氨酸、十二烷基硫酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、维生素ETPGS、吐温80、泊洛沙姆188、普 朗尼克127、卵磷脂、羟基卵磷脂、大豆卵磷脂、大豆磷脂、胆固醇、胆酸钠、 去氧胆酸钠、Transcutol中的一种或一种以上的混合物；等渗调节剂选自葡 萄糖、甘油、氯化钠、山梨醇、甘露醇、木糖醇、聚乙二醇、1，2-丙二醇中的一种或一种以上的混合物。
3、 根据权利要求l所述的难溶性药物纳米粒的制备方法，其特征在于稳 定剂可以跟药物一起加入到良溶剂中，也可以加入到非良溶剂中，或者将不同的稳定剂分别加入到良溶剂和非良溶剂中；药物-稳定剂质量比范围为20:1 -2:1。
4、 根据权利要求1所述的难溶性药物纳米粒的制备方法，其特征在于 预混悬液的制备中，药物溶液加入到稳定剂溶液中的形态可以是细流和液滴形 式，速度控制在lml/min -10ml/min范围内。
5、 根据权利要求1所述的难溶性药物纳米粒的制备方法，其特征在于 预混悬液的制备中，稳定剂溶液应控制温度在(TC -l(TC内，且搅拌速度应控 制在200rpm -5000rpm。
6、 根据权利要求1所述的难溶性药物纳米粒的制备方法，其特征在于 高压匀质过程中，可以选择超声、高速分散匀质、高压匀质中的一种或一种以上的联合方法。
7、 根据权。利要求1所述的难溶性药物纳米粒的制备方法，其特征在于 将混悬液用离心、超滤、透析、喷雾干燥、冷冻干燥中的一种或一种以上的联 合方法除去良溶剂，最后在制备成各种剂型。
8、 根据权利要求书7所述的难溶性药物纳米粒的制备方法，其特征在于 所述的剂型为注射剂、冻干粉针剂、片剂、丸剂、胶囊剂、凝胶剂、粘膜黏附 剂。
全文摘要
本发明涉及医药技术领域，涉及难溶性药物的纳米粒的制备方法。在此方法中，包括以下步骤(1)将药物溶于第一溶剂(良溶剂)中形成溶液，(2)把溶液与第二溶剂(非良溶剂)混合形成预混悬液，(3)对预混悬液施加能量以形成平均有效粒径小于2μm纳米粒。本发明采用微沉淀和匀质联合技术，将药物以纯的纳米结晶悬浮于非良溶剂(一般为水)中，解决了药物在水中难溶，油中亦难溶而导致很难制成溶液剂的问题，与相应的静脉输注的注射液和片剂、胶囊等口服制剂相比，其不良反应降低，毒副作用减小，生物利用度提高，且有缓释作用，方便患者使用。
文档编号A61K47/30GK101322682SQ200810012538
公开日2008年12月17日 申请日期2008年7月29日 优先权日2008年7月29日
发明者何仲贵, 锋 刘, 刘晓红, 进 孙, 王永军, 蒲晓辉 申请人:沈阳药大制剂新技术有限公司