专利名称：一种硒化甘露低聚糖的制备方法
技术领域：
本发明属于有机硒制备领域，具体涉及一种硒化甘露低聚糖的制备方法。
背景技术：
硒(Selenium，Se)是人体必需的微量元素，是谷胱甘肽过氧化物酶的主要活性成 分，它可以直接或间接地清除体内氧自由基，可抑制脂氧化或过氧化，还可以提高和调节免 疫功能。人体缺硒会造成致命的缺硒综合症，如克山病、糖尿病、心血管疾病、白内障、肿瘤、 衰老等。但如果摄入的硒过量也会引起脱发、脱甲等中毒综合症。补硒剂可以是无机硒、有 机硒、生物活性硒。亚硒酸钠在预防大骨节病及降低肝癌发病率方面取得了良好效果，然 而亚硒酸钠直接使用毒性较大，给药量不易控制，有效吸收差。近年来，采取植物喷洒或对 土壤施用无机硒以增加人体及牲畜有机硒来源的应用已有报道，但是获得的有机硒含量不 高，且生物效应不明确。一种有机硒化合物_富硒酵母已有制剂，但产品组分不稳定，含硒 量也不高。因此无毒可利用性好的新型有机硒很有必要研究开发。甘露低聚糖(Marmo-oligosaccharides)又称甘露寡聚糖，是唯一能结合肠道中 外源性病菌的新型功能性低聚糖，它是甘露聚糖类物质的酶降解产物，广泛存在于魔芋粉、 瓜儿豆胶、田菁胶及多种微生物细胞壁内。它具有低热量、稳定、安全无毒等良好的理化性 质，具有降血脂、降血糖、调节肠胃和增强免疫等重要保健功能和抗氧化、清除自由基等重 要生理功能。专利CN101104644A公开了一种多糖亚硒酸酯的制法及其应用，该法是将糊精、右 旋糖酐、阿拉伯糖基木糖与氟氧化硒加入到吡啶中，加热反应0. 1 100小时，得到一种 多糖亚硒酸酯，该法反应时间长，而且氟氧化硒不容易合成；专利200410071808. 6公开了 一种硒化多糖及其制备方法，该法是先合成亚硒酸，将亚硒酸还原成硒酸，并将硒酸根导 入多糖中，产物中硒含量为3mg 200mg/g ；专利CN1284509A公开了壳聚糖亚硒酸盐及其 制备方法，该法是将壳聚糖的胺基与加入的亚硒酸反应，产物中硒含量为0 26% ；专利 CN101654486A公开了一种硒化黄芪多糖的制备方法，该方法将黄芪多糖加入到吡啶中，然 后添加含硒试剂SeOCl2反应一段时间，再用无水乙醇洗涤，沉淀离心，真空冷冻干燥，最终 得到浅粉色硒化黄芪多糖，产物中硒含量为15950 μ g/g，但该法制备过程复杂，制备条件苛 刻，且-SeOCl2的毒性非常大。专利CN1560088A公开了一种硒化葡甘露聚糖的制备方法， 在一种Se6+溶液中加入乙醇和盐酸，制成硒化反应液，然后加入葡甘露聚糖，制成硒化葡甘 露聚糖，产物中硒含量为125. 4-197. 3mg/Kg。
发明内容
本发明要解决的技术问题是针对现有技术存在的缺点与不足，本发明公开了一 种简便、可靠的硒化甘露低聚糖的制备方法，所制备的硒化甘露低聚糖具有较高的保健作用。针对上述技术问题，本发明提出了如下的技术方案
1)用去离子水分别配制0. lg/mL的亚硒酸溶液及质量浓度为20%的甘露低聚糖 溶液；2)将甘露低聚糖溶液置于振荡水槽中，并向其中按每克甘露低聚糖干粉加入
0-4ml体积浓度为10%的HNO3溶液，然后向甘露低聚糖溶液中缓慢滴加亚硒酸溶液，并 于30-80°C下振荡反应4-12小时得溶液A，亚硒酸溶液与甘露低聚糖溶液的体积比为
1-10 5 ；3)在反应后的溶液中加入足量的lmol/L的FeCl3溶液，用pH = 10的NH3-NH4Cl 缓冲液将溶液pH调至6 7，形成红棕色沉淀，放置过夜；4)将放置过夜后的混合液在3500r/min的下离心分离，取上清液，弃去红棕色沉 淀；5)在该上清液中加入上清液2 3倍体积的无水乙醇，置于4°C冰箱中沉析出硒 化产物，于4000r/min的条件下离心分离，取沉淀，弃去上清液；6)然后对沉淀物用无水乙醇洗涤两次，离心取沉淀物；在50°C以下通风干燥，经 粉碎得到淡黄色硒化甘露低聚糖。本发明的有益效果体现在本发明所述硒化甘露低聚糖的制备方法将甘露低聚糖 与硒结合，简便可靠、稳定性好，反应产物硒化甘露低聚糖仍然保持低聚糖的基本构型，既 能避免无机硒对人和动物使用后产生的毒性作用，又能使结合在甘露低聚糖上的硒缓慢释 放，延长硒在体内的停留时间，根据本发明所述方法制备的硒化甘露低聚糖既保留了甘露 低聚糖的生物学功能，又可发挥微量元素硒的生理活性，同时，其功能相对于甘露低聚糖和 硒均有所提升，通过实验证明，硒化甘露低聚糖较甘露低聚糖对超氧阴离子和羟自由基的 清除效率均有所提高，尤其是对羟自由基的清除效率提高非常明显。硒化甘露低聚糖具有以下功能解毒排毒硒具有拮抗铅、汞、镉等重金属元素和降解黄曲霉毒素，清除体内代谢 废物的功能；甘露低聚糖具有吸附黄曲霉毒素的功能，也能快速清理肠道垃圾。硒化甘露低 聚糖可将解毒与排毒功能有机结合，加快体内毒素、废物的排泄。防癌抗癌硒和甘露低聚糖均能提高机体免疫功能，都具有抗氧化、清除自由基、 促进体内毒素及代谢废物排出、保护细胞膜完整性及抗突变作用、降低致癌物活性、降低抗 癌药物的毒副作用等功效，故硒化甘露低聚糖具有良好的防癌抗癌作用。降脂降糖甘露低聚糖有明显的降脂降糖作用，硒具有类似胰岛素的作用，硒化甘 露低聚糖是良好的降糖产品。它可在结肠内发酵产生丙酸盐，加速糖酵解；发挥类似胰岛素 的作用，加速糖代谢；影响肠道激素水平，调节糖类和脂肪的吸收平衡。抗衰老硒化甘露低聚糖可以增强机体谷胱甘肽过氧化酶及体内20多种含硒酶 和蛋白质的活性，使体内细胞、组织免受过氧化损伤并保持机体的生理活性，同时可以及时 排出体内毒素和代谢废物。因此具有明显的延缓衰老的作用。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明做进一步说明。实施例1 1)用去离子水分别配制0. lg/mL的亚硒酸溶液及质量浓度为20%的甘露低聚糖溶液；2)将甘露低聚糖溶液置于振荡水槽中，然后向甘露低聚糖溶液中缓慢滴加亚硒 酸溶液，并于50°C下振荡反应9小时得溶液A，亚硒酸溶液与甘露低聚糖溶液的体积比为 1:5;3)在反应后的溶液中加入足量的lmol/L的FeCl3溶液，用pH = 10的NH3-NH4Cl 缓冲液将溶液pH调至6 7，形成红棕色沉淀，放置过夜；4)将放置过夜后的混合液在3500r/min的下离心分离，取上清液，弃去红棕色沉 淀；5)在该上清液中加入上清液2倍体积的无水乙醇，置于4°C冰箱中沉析出硒化产 物，于4000r/min的条件下离心分离，取沉淀，弃去上清液；6)然后对沉淀物用无水乙醇洗涤两次，离心取沉淀物；在50°C以下通风干燥，经 粉碎得到淡黄色硒化甘露低聚糖。实施例2 1)用去离子水分别配制0. lg/mL的亚硒酸溶液及质量浓度为20%的甘露低聚糖 溶液；2)将甘露低聚糖溶液置于振荡水槽中，并向其中按每克甘露低聚糖干粉加入Iml 体积浓度为10%的HNO3溶液，然后向甘露低聚糖溶液中缓慢滴加亚硒酸溶液，并于30°C下 振荡反应12小时得溶液A，亚硒酸溶液与甘露低聚糖溶液的体积比为4 5 ；3)在反应后的溶液中加入足量的lmol/L的FeCl3溶液，用pH = 10的NH3-NH4Cl 缓冲液将溶液pH调至6 7，形成红棕色沉淀，放置过夜；4)将放置过夜后的混合液在3500r/min的下离心分离，取上清液，弃去红棕色沉 淀；5)在该上清液中加入上清液2. 8倍体积的无水乙醇，置于4°C冰箱中沉析出硒化 产物，于4000r/min的条件下离心分离，取沉淀，弃去上清液；6)然后对沉淀物用无水乙醇洗涤两次，离心取沉淀物；在50°C以下通风干燥，经 粉碎得到淡黄色硒化甘露低聚糖。实施例3 1)用去离子水分别配制0. lg/mL的亚硒酸溶液及质量浓度为20%的甘露低聚糖 溶液；2)将甘露低聚糖溶液置于振荡水槽中，并向其中按每克甘露低聚糖干粉加入2ml 体积浓度为10%的HNO3溶液，然后向甘露低聚糖溶液中缓慢滴加亚硒酸溶液，并于60°C下 振荡反应7小时得溶液A，亚硒酸溶液与甘露低聚糖溶液的体积比为7 5 ；3)在反应后的溶液中加入足量的lmol/L的FeCl3溶液，用pH = 10的NH3-NH4Cl 缓冲液将溶液pH调至6 7，形成红棕色沉淀，放置过夜；4)将放置过夜后的混合液在3500r/min的下离心分离，取上清液，弃去红棕色沉 淀；5)在该上清液中加入上清液2. 3倍体积的无水乙醇，置于4°C冰箱中沉析出硒化 产物，于4000r/min的条件下离心分离，取沉淀，弃去上清液；6)然后对沉淀物用无水乙醇洗涤两次，离心取沉淀物；在50°C以下通风干燥，经粉碎得到淡黄色硒化甘露低聚糖。实施例4:1)用去离子水分别配制0. lg/mL的亚硒酸溶液及质量浓度为20%的甘露低聚糖 溶液；2)将甘露低聚糖溶液置于振荡水槽中，并向其中按每克甘露低聚糖干粉加入4ml 体积浓度为10%的HNO3溶液，然后向甘露低聚糖溶液中缓慢滴加亚硒酸溶液，并于80°C下 振荡反应4小时得溶液A，亚硒酸溶液与甘露低聚糖溶液的体积比为10 5 ；3)在反应后的溶液中加入足量的lmol/L的FeCl3溶液，用pH = 10的NH3-NH4Cl 缓冲液将溶液pH调至6 7，形成红棕色沉淀，放置过夜；4)将放置过夜后的混合液在3500r/min的下离心分离，取上清液，弃去红棕色沉 淀；5)在该上清液中加入上清液3倍体积的无水乙醇，置于4°C冰箱中沉析出硒化产 物，于4000r/min的条件下离心分离，取沉淀，弃去上清液；6)然后对沉淀物用无水乙醇洗涤两次，离心取沉淀物；在50°C以下通风干燥，经 粉碎得到淡黄色硒化甘露低聚糖。所得硒化甘露低聚糖产物中硒含量为0. 8-4. 5mg/g,经过紫外扫描和红外扫描分 析表明，硒化甘露低聚糖仍然保持低聚糖的基本构型，其中的硒元素以两种形式存在，一是 与羟基发生酯化反应形成硒酯结构，二是在糖醚键处开环形成了 C-Se-H结构。
权利要求
一种硒化甘露低聚糖的制备方法，其特征在于包括以下步骤1)用去离子水分别配制0.1g/mL的亚硒酸溶液及质量浓度为20％的甘露低聚糖溶液；2)将甘露低聚糖溶液置于振荡水槽中，并向其中按每克甘露低聚糖干粉加入0 4ml体积浓度为10％的HNO3溶液，然后向甘露低聚糖溶液中缓慢滴加亚硒酸溶液，并于30 80℃下振荡反应4 12小时得溶液A，亚硒酸溶液与甘露低聚糖溶液的体积比为1 10∶5；3)在反应后的溶液中加入足量的1mol/L的FeCl3溶液，用pH＝10的NH3 NH4Cl缓冲液将溶液pH调至6～7，形成红棕色沉淀，放置过夜；4)将放置过夜后的混合液在3500r/min的下离心分离，取上清液，弃去红棕色沉淀；5)在该上清液中加入上清液2～3倍体积的无水乙醇，置于4℃冰箱中沉析出硒化产物，于4000r/min的条件下离心分离，取沉淀，弃去上清液；6)然后对沉淀物用无水乙醇洗涤两次，离心取沉淀物；在50℃以下通风干燥，经粉碎得到淡黄色硒化甘露低聚糖。
全文摘要
本发明是一种硒化甘露低聚糖的制备方法。它是用甘露低聚糖和亚硒酸在一定条件下反应所得，产物中硒含量为0.8～4.5mg/g。在酸性环境下，将亚硒酸溶液滴加到甘露低聚糖溶液中，在一定温度下反应；然后加入FeCl3溶液，去除未反应的亚硒酸；再加入乙醇，使硒化甘露低聚糖沉析出来，经过二次洗涤后低温烘干即可得到产物。产物经过紫外扫描和红外扫描分析表明，硒化甘露低聚糖仍然保持低聚糖的基本构型，硒可能有两种存在形式，一是与羟基发生酯化反应形成硒酯结构，二是在糖醚键处开环形成了C-Se-H结构。
文档编号A61P35/00GK101941994SQ201010259989
公开日2011年1月12日 申请日期2010年8月23日 优先权日2010年8月23日
发明者李鑫, 毛跟年, 瞿建波, 许牡丹, 郭倩 申请人:陕西科技大学