专利名称：非甾体类抗炎药物在制备预防和治疗糖尿病脑病药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及非留体类抗炎药物的新用途，特别涉及非留体类抗炎药物预防和治疗糖尿病脑病药物中的应用。
背景技术：
糖尿病脑病(diabeticencephalopathy, DE)是指糖尿病(diabetes mellitus, DM)久病患者渐进发生的以智能减退和大脑神经生理及结构改变为主要特征的精神功能紊乱性疾病，是糖尿病在中枢神经系统中最常见的并发症。在糖尿病状态下，脑的结构改变主要是大脑皮质及皮质萎缩，功能改变主要是认知功能损害，大量的研究报道肯定了糖尿病引起认知功能障碍的事实。在2006年，专门术语糖尿病认知功能障碍 (diabetes-associated cognitive decline, DACD)的提出进一步增强了人们对这种功能紊乱的认识，并成为糖尿病脑病研究的焦点。据估计全世界现有约3. 47亿成年人罹患糖尿病，其中40%生活在中国和印度。广泛的流行病学调查研究以及基于流行病学调查的前瞻性研究表明糖尿病是与年龄相关的认知功能下降和痴呆的一个危险因素，相对于非糖尿病患者，认知功能下降的速度在糖尿病患者中增加了1. 5-2. O倍；同样地，对于最常见的中枢神经系统退行性疾病阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)的发病率，DM患者是非 DM患者的1. 5-4. O倍。多数研究结果表明，糖尿病脑病是一种大脑加速老化的过程，因而国外学者de la Monte SM研究组提出AD是III型DM的观点。因此，糖尿病脑病正在成为本世纪全世界医药界重要的研究课题之一。
某些非留体类抗炎药物(non-steroidalant1-1nflammatory drugs, NSAIDs)如布洛芬(ibuprofen，IB)、吲哚美辛等，具有解热、镇痛、抗炎和改善血管病变等活性，但未见有关于糖尿病脑病治疗的文献报道
发明内容
发明目的本发明的目的在于提供非甾体类抗炎药物的新用途。
技术方案 非甾体类抗炎药物在制备预防和治疗糖尿病脑病药物中的应用。所述的非留体类抗炎药物为布洛芬。
有益效果以上药理试验结果表明本发明具有以下优点(I)本发明发现了非甾体类抗炎药物新的药理作用以及新的医药用途，开拓了一个新的应用领域。
(2)本发明表明布洛芬防治糖尿病脑病药理效果好、作用强，预示着在临床上有良好的应用前景。
(3)在Morris水迷宫试验中，布洛芬可显著降低DM大鼠的逃避潜伏期、增加在平台所在象限停留时间的百分比，说明布洛芬具有明显改善DM大鼠的学习和记忆能力。
(4)本发明表明布洛芬能够减轻DM对海马CAl和CA3区锥体神经元的损伤，表明布洛芬对DM大鼠中枢神经元的凋亡与坏死有一定的抑制作用。
(5)本发明表明布洛芬可显著增加DM大鼠脑内PPARy的蛋白表达和mRNA水平， 说明布洛芬能够激活PPAR Y受体，具有促进其信号转导的作用。
(6)本发明表明布洛芬具有显著降低DM大鼠大脑皮质中AGEs水平，说明布洛芬可明显抑制蛋白糖化作用介导的损害。
(7)本发明表明布洛芬具有显著降低DM大鼠大脑皮质中BACEl活性、表达及mRNA 水平的作用，提示出布洛芬可明显降低脑内神经细胞毒剂Αβ的生成及其对中枢神经系统的损伤。
(8)布洛芬显著降低DM大鼠大脑皮质中C0X-2和iNOS水平，表明布洛芬具有强大的抗炎作用。
(9)布洛芬显著增加血清中SOD活性和GSH水平，表明布洛芬能够增强机体抗氧化系统的功能。
图1布洛芬(IB)对DM大鼠大脑切片中PPARy蛋白表达免疫组织化学(IHC)研究(X100)。A:正常组(Normal)，B:糖尿病模型组(DM)，C:布洛芬组(DM+IB)图2布洛芬(IB)对DM大鼠脑内海马神经元凋亡与坏死的影响。光镜下观察三组大鼠石蜡切片(3 μ m) HE染色后海马部位CAl区和CA3区锥体细胞的凋亡与坏死(X 400倍)。
具体实施方式
实施例1 :布洛芬对DM大鼠认知功能的影响 I材料与方法1.1实验动物雄性SD品系大鼠，8-9周龄，190-220g,由徐州医学院实验动物中心提供。
1. 2药品与试剂布洛芬购自武汉华怡达科技有限公司(纯度>99%), STZ购自美国Sigma-Aldrich公司， 葡萄糖测试盒购自南京建成生物工程研究所。
1. 3 方法1.3.1模型建立雄性SD大鼠禁食不禁水12 h以上，按60 mg/kg 一次性腹腔注射STZ (临用前溶于O.1 mol/L柠檬酸钠缓冲 液，pH 4. 4)进行造模，造模7天后，眶静脉丛取血约0.2 ml, 250C >3000 rpm离心10 min，分离血清。用葡萄糖试剂盒检测非空腹血糖(nFBG)， 取nFBG值大于300 mg/dl (16.7 mmol/L)的大鼠作为成功的糖尿病大鼠。
1.3.2分组及给药将造模成功的糖尿病大鼠按照血糖值随机分为2组，分别为糖尿病模型组(DM)和布洛芬组(DM+IB )，每组10只大鼠。另设一组正常对照组(Normal)，每组10只大鼠。布洛芬组按40 mg/kg灌胃(按10 ml/kg体积)给予布洛芬(用1% CMC-Na制成混悬液)，每天一次，连续8周。Normal组给予同体积蒸懼水,DM组给予同体积1% CMC-Na。 每周监测一次体重，调整给药体积，每月监测一次非空腹血糖。
1. 3. 3指标测定给药7周后，各组大鼠进行Morris水迷宫测试，观察学习、记忆功能，记录大鼠的逃避潜伏期、平台穿越次数以及在平台所在象限停留时间的百分比。之后， 各组大鼠股静脉取血，分离血清，低温保存，备用；即刻处死，取脑，分离海马和皮质，-SO0C 保存。
1.4统计学处理所有结果用mean±SD表示，多组间比较采用单因素方差分析， 两组间比较采用t检验进行统计学分析，P〈0. 05表示差异有统计学意义。
2 结果2.1布洛芬对DM大鼠学习、记忆功能的影响在Morris水迷宫测试中，与正常组大鼠比较，在4天的训练中DM大鼠的逃避潜伏期 (P〈0.01)均显著增加，平台穿越次数(P〈0. 05)以及在平台所在象限的停留时间的百分 (P<0.01)比显著减少；在训练的第2、3、4天布洛芬均显著(均P〈0.01)降低DM大鼠的逃避潜伏期，结果见表I。布洛芬可显著增加DM大鼠在平台所在象限的停留时间的百分比 (P〈0. 01)，对于平台穿越次数，布洛芬表现出明显增加的趋势，结果见表2。
表I布洛芬对DM大鼠学习功能的影响
权利要求
1.非留体类抗炎药物在制备预防和治疗糖尿病脑病药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的非留体类抗炎药物在制备预防和治疗糖尿病脑病药物中的应用，其特征在于所述的非留体类抗炎药物为布洛芬。
全文摘要
本发明涉及非甾体类抗炎药物新的药理作用，即对糖尿病脑病的预防和治疗作用。非甾体类抗炎药物(布洛芬)明显改善糖尿病引起的认知功能损害，显著增加脑内过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的蛋白表达及mRNA水平，显著降低大脑皮质贝塔淀粉样肽前体蛋白β-位裂解酶1(BACE1)活性、蛋白表达及mRNA水平，晚期糖基化终末化产物(AGEs)水平，环加氧酶2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达，显著增加血清中超氧化物歧化酶(SOD)还原型谷胱甘肽(GSH)水平等作用。非甾体类抗炎药物可用于糖尿病脑病等糖尿病并发症的预防和治疗。
文档编号A61P3/10GK103040799SQ20131002190
公开日2013年4月17日 申请日期2013年1月22日 优先权日2013年1月22日
发明者印晓星, 刘耀武, 朱霞, 鲁茜, 张帆 申请人:徐州医学院