本公开涉及局部给予制剂的领域，如眼用制剂，和这种制剂的使用方法。
发明背景
本文提供的信息和引用的参考文献仅仅是为了协助读者理解而提供，而非承认任一参考文献或信息是本发明的现有技术。
美国专利申请号US2010/0310462和US2009/0092665公开了眼用药物递送系统，其具有包含维生素E TPGS的纳米胶束。
曲伏前列素(Travoprost)涉及包括HCO-40和前列腺素类似物作为活性成分的用于青光眼或眼高压的制剂。参见万维网dailymed.nlm.nih.gov/dailymed/lookup.cfm？setid＝338e7ff4-0d91-4208-a45d-bfa2be52334d。活性成分以0.004％存在。该制剂包括丙二醇，并且不包括纳米胶束。曲伏前列素中存在0.5％的HCO-40。参见万维网ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/EPAR_-_Product_Information/human/000665/W C500038389.pdf。
技术实现要素：
本公开涉及局部制剂，如适于眼睛给予活性成分如布林唑胺(brinzolamide)、拉坦前列素(latanoprost)、溴莫尼定(brimonidine)、波生坦(bosentan)、或其任意两种或更多种的混合物(或其药学上可接受的盐、前药或变体)的制剂。在某些方面和实施方式中，本公开的制剂可包括聚氧乙烯(polyoxyl)脂质或脂肪酸和/或聚烷氧基化醇，并且可包括纳米胶束。
在本文描述的某些方面和实施方式中，本文描述的制剂可具有某些在本公开之前不能预料到的出人意料的特征和优势。例如，本公开的制剂可能够支持活性成分如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意两种或更多种的混合物(或其药学上可接受的盐、前药或变体)的剂量出人意料地高于很多现有技术制剂和/或产生出人意料地较高眼组织浓度。用于本文所述制剂的活性成分或用剂的剂量可基于各种标准来选择，包括制剂可支持的量、各种治疗应用的期望剂量等。关于这点，在一些实施方式中，活性剂(如用于眼部给予)可以是制剂的至少约0.05wt％、或至少约0.08wt％、或至少约0.09wt％、或至少约0.1wt％、或至少约0.15wt％、或至少约0.2wt％、或至少约0.3wt％、或至少约0.4wt％、或至少约0.5wt％、或至少约0.6wt％、或至少约0.7wt％、或至少约0.8wt％、或至少约0.9wt％、或至少约1.0wt％、或至少约1.5wt％、或至少约2wt％、或至少约3wt％、或至少约4wt％、或至少约5wt％、或0.05和5wt％之间、或0.05和0.5wt％之间、或0.05和0.2wt％之间、或0.08和0.12wt％之间、或0.1和0.5wt％之间、或0.5和1wt％之间、或0.5和1.5wt％之间、或1和5wt％之间、或2和4wt％之间、或4和6wt％之间。
在一些实施方式中，制剂具有包埋效率相对增加的纳米胶束；在这种实施方式中，活性剂(如用于眼部给予的布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、或波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体))可以是制剂的至少约0.05wt％、或至少约0.08wt％、或至少约0.09wt％、或至少约0.1wt％、或至少约0.15wt％；或至少约0.2wt％、或至少约0.3wt％、或至少约0.4wt％、或至少约0.5wt％、或至少约0.6wt％、或至少约0.7wt％、或至少约0.8wt％、或至少约0.9wt％、或至少约1.0wt％、或至少约1.5wt％、或至少约2wt％、或至少约3wt％、或至少约4wt％、或至少约5wt％、或0.05和5wt％之间、或0.05和0.5wt％之间、或0.05和0.2wt％之间、或0.08和0.12wt％之间、或0.1和0.5wt％之间、或0.5和1wt％之间、或0.5和1.5wt％之间、或1和5wt％之间、或2和4wt％之间、或4和6wt％之间，并且存在于制剂的纳米胶束中。
在某些方面和实施方式中，本公开的制剂出人意料地有效溶解和/或递送活性成分(如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、或波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体))，而无需在眼用制剂被包含时可能是刺激物的有机溶剂(如丙二醇)。
在一些实施方式中，本公开的制剂在高温(例如，约40℃以上的温度)下出人意料地稳定。在一些方面和实施方式中，本文描述的一些制剂的纳米胶束属性允许改善的眼组织分布。在某些方面和实施方式中，本文描述的制剂特别适于前眼递送、或后眼递送、或前眼和后眼递送。此外，本公开的某些方面和实施方式的制剂可具有出人意料的优势：可适于促进具有不同尺寸或性质的活性剂的递送；例如，在包括聚氧乙烯蓖麻油的制剂的某些实施方式中，HCO-60可用于具有相对小分子尺寸的活性剂，而HCO-80和/或HCO-100可用于相对较大尺寸的活性剂。
因此，第一方面提供眼用制剂，其包括活性剂如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意两种或更多种的混合物(或其药学上可接受的盐、前药或变体)、聚氧乙烯脂质或脂肪酸和聚烷氧基化醇。在一些实施方式中，制剂包括纳米胶束。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质或脂肪酸是聚氧乙烯蓖麻油。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质或脂肪酸是选自HCO-40、HCO-60、HCO-80或HCO-100的一种或多种。在一些实施方式中，存在的聚氧乙烯脂质或脂肪酸(如聚氧乙烯蓖麻油，如HCO-40、HCO-60、HCO-80或HCO-100)为制剂的按重量计1和6％之间；或2和6％之间；或2和6％之间；或3和6％之间；或4和6％之间；或2和5％之间；或3和5％之间；或3和5％之间；或2和6％之间；或约4％；或大于0.7％；或大于1％、或大于1.5％；或大于2％；或大于3％；或大于4％。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-60。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-80。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-100。在一些实施方式中，制剂包括聚烷氧基化醇，该聚烷氧基化醇是辛基酚聚醚(octoxynol)-40。在一些实施方式中，制剂包括聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)，存在的聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)为制剂的按重量计0.002和4％之间；或0.005和3％之间；或0.005和2％之间；或0.005和1％之间；或0.005和0.5％之间；或0.005和0.1％之间；或0.005和0.05％之间；或0.008和0.02％之间；或约0.01％。
如本文所用，术语“聚氧乙烯脂质或脂肪酸(polyoxyl lipid or fatty acid)”指代脂质或脂肪酸和聚氧乙烯二醇的单酯和二酯。聚氧乙烯脂质或脂肪酸可如本领域公知根据氧乙烯单元的平均聚合物长度(例如，40、60、80、100)来编号(“n”)。术语“n≥40聚氧乙烯脂质”意为聚氧乙烯脂质或脂肪酸的平均氧乙烯聚合物长度等于或大于40个单元。硬脂酸酯氢化蓖麻油和蓖麻油是常规可作为聚氧乙烯脂质或脂肪酸使用的常见脂质/脂肪酸，然而，要理解任何脂质或脂肪酸可被聚氧化，以形成本文考虑的聚氧乙烯脂质或脂肪酸。聚氧乙烯脂质或脂肪酸的实例非限制地包括HCO-40、HCO-60、HCO-80、HCO-100、聚氧乙烯40硬脂酸酯、聚氧乙烯35蓖麻油、及类似物。
在本文描述的任一种组合物和方法的一些实施方式中，聚氧乙烯脂质或脂肪酸的氧乙烯单元的平均聚合物长度在活性相对较大的成分中较长，而在活性相对较小的成分中较短；例如，在活性成分是布林唑胺的一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-60，而在活性成分是波生坦(大于布林唑胺)的一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-80或HCO-100。
如本文所用，术语″胶束″或“纳米胶束”指代表面活性剂分子的聚集物(或簇团)。胶束仅在表面活性剂浓度大于临界胶束浓度(CMC)时形成。表面活性剂是两性化学剂，意味着其包含疏水和亲水基团。胶束可以不同形状存在，包括球形、圆柱形和圆盘形。包括至少两种不同分子种类的胶束是混合胶束。在一些实施方式中，本公开的眼用组合物包括澄清的混合胶束水溶液。
第二方面，提供眼用制剂，其包括活性剂，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意两种或更多种的混合物(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；和n≥40聚氧乙烯脂质或脂肪酸。在一些实施方式中，制剂包括纳米胶束。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质或脂肪酸是聚氧乙烯蓖麻油。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质或脂肪酸是选自HCO-40、HCO-60、HCO-80或HCO-100的一种或多种。在一些实施方式中，存在的聚氧乙烯脂质或脂肪酸(如聚氧乙烯蓖麻油，如HCO-40、HCO-60、HCO-80或HCO-100)为制剂的按重量计0.5和2％之间、或0.7和2％之间、或1和6％之间、或2和6％之间、或2和6％之间、或3和6％之间、或4和6％之间、或2和5％之间、或3和5％之间、或3和5％之间、或2和6％之间、或约4％、或大于0.7％、或大于1％、或大于1.5％、或大于2％、或大于3％、或大于4％。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-60。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-80。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-100。
在一些实施方式中，制剂进一步包括聚烷氧基化醇。在一些实施方式中，制剂进一步包括聚烷氧基化醇，其为辛基酚聚醚-40。在一些实施方式中，制剂包括聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)，存在的聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)为制剂的按重量计0.002和4％之间、或0.005和3％之间、或0.005和2％之间、或0.005和1％之间、或0.005和0.5％之间、或0.005和0.1％之间、或0.005和0.05％之间、或0.008和0.02％之间、或0.01和0.1％之间、或0.02和0.08％之间、或0.005和0.08％之间、或约0.05％、或约0.01％。
第三方面，提供眼用制剂，其包括活性成分，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意两种或更多种的混合物(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；和聚氧乙烯脂质或脂肪酸；其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸的存在量等于或大于所述制剂的1wt％。在类似方面，提供眼用制剂，其包括活性成分，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意两种或更多种的混合物；和聚氧乙烯脂质或脂肪酸；其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸的存在量等于或大于所述制剂的0.05wt％。在一些实施方式中，制剂包括纳米胶束。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质或脂肪酸是聚氧乙烯蓖麻油。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质或脂肪酸是选自HCO-40、HCO-60、HCO-80或HCO-100的一种或多种。在一些实施方式中，存在的聚氧乙烯脂质或脂肪酸(如聚氧乙烯蓖麻油，如HCO-60、HCO-80或HCO-100)为制剂的按重量计0.5和2％之间、或0.7和2％之间、或1和6％之间、或2和6％之间、或2和6％之间、或3和6％之间、或4和6％之间、或2和5％之间、或3和5％之间、或3和5％之间、或2和6％之间、或约4％、或大于1.5％、或大于2％、或大于3％、或大于4％。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-40。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-60。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-80。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-100。
在一些实施方式中，制剂进一步包括聚烷氧基化醇。在一些实施方式中，制剂进一步包括聚烷氧基化醇，其为辛基酚聚醚-40。在一些实施方式中，制剂包括聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)，存在的聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)为制剂的按重量计0.002和4％之间、或0.005和3％之间、或0.005和2％之间、或0.005和1％之间、或0.005和0.5％之间、或0.005和0.1％之间、或0.005和0.05％之间、或0.008和0.02％之间、或0.01和0.1％之间、或0.02和0.08％之间、或0.005和0.08％之间、或约0.05％、或约0.01％。
第四方面，提供眼用制剂，其包括活性剂，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意两种或更多种的混合物(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；和聚氧乙烯脂质或脂肪酸；其中所述制剂包括纳米胶束。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质或脂肪酸是聚氧乙烯蓖麻油。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质或脂肪酸是选自HCO-40、HCO-60、HCO-80或HCO-100的一种或多种。在一些实施方式中，存在的聚氧乙烯脂质或脂肪酸(如聚氧乙烯蓖麻油，如HCO-40、HCO-60、HCO-80或HCO-100)为制剂的按重量计0.5和2％之间、或0.7和2％之间、或1和6％之间、或2和6％之间、或2和6％之间、或3和6％之间、或4和6％之间、或2和5％之间、或3和5％之间、或3和5％之间、或2和6％之间、或约4％、或大于0.7％、或大于1％、或大于1.5％、或大于2％、或大于3％、或大于4％。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-40。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-60。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-80。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-100。
在一些实施方式中，制剂进一步包括聚烷氧基化醇。在一些实施方式中，制剂进一步包括聚烷氧基化醇，其为辛基酚聚醚-40。在一些实施方式中，制剂包括聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)，存在的聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)为制剂的按重量计0.002和4％之间、或0.005和3％之间、或0.005和2％之间、或0.005和1％之间、或0.005和0.5％之间、或0.005和0.1％之间、或0.005和0.05％之间、或0.008和0.02％之间、或0.01和0.1％之间、或0.02和0.08％之间、或0.005和0.08％之间、或约0.05％、或约0.01％。
在进一步方面，提供眼用制剂，其包括活性剂，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意两种或更多种的混合物(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1-5wt％的选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一种或多种；和约0.002-4wt％的辛基酚聚醚-40。
另一方面，提供眼用制剂，其包括活性剂，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意两种或更多种的混合物(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1-5wt％的选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一种或多种；和约0.005-3wt％的辛基酚聚醚-40。
再一方面，提供眼用制剂，其包括活性剂，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意两种或更多种的混合物(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1-5wt％的选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一种或多种；和约0.005-2wt％的辛基酚聚醚-40。
一方面，提供眼用制剂，其包括活性剂，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意两种或更多种的混合物(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1-5wt％的选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一种或多种；和约0.005-1wt％的辛基酚聚醚-40。
在进一步方面，提供眼用制剂，其包括活性剂，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意两种或更多种的混合物(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；约4wt％的HCO-60和约0.01wt％的辛基酚聚醚-40。
另一方面，提供眼用制剂，其包括活性剂，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意两种或更多种的混合物(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；0.7-1.5wt％的选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一种或多种；和约0.002-4wt％的辛基酚聚醚-40。
另一方面，提供眼用制剂，其包括活性剂，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意两种或更多种的混合物(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；0.7-1.5wt％的选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一种或多种；和约0.005-3wt％的辛基酚聚醚-40。
再一方面，提供眼用制剂，其包括活性剂，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意两种或更多种的混合物(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；0.7-1.5wt％的选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一种或多种；和约0.005-2wt％的辛基酚聚醚-40。
一方面，提供眼用制剂，其包括活性剂，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意两种或更多种的混合物(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；0.7-1.5wt％的选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一种或多种；和约0.05wt％的辛基酚聚醚-40。
在进一步方面，提供眼用制剂，其包括活性剂，如布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、波生坦、或其任意两种或更多种的混合物(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；约1wt％的HCO-60；和约0.05wt％的辛基酚聚醚-40。
在本文描述的任一方面和实施方式的不同实施方式中，制剂包括纳米胶束。
在本文描述的方面和实施方式的一些实施方式中，制剂包括聚氧乙烯脂质或脂肪酸。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质或脂肪酸是聚氧乙烯蓖麻油。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质或脂肪酸是选自HCO-40、HCO-60、HCO-80或HCO-100的一种或多种。在一些实施方式中，存在的聚氧乙烯脂质或脂肪酸(如聚氧乙烯蓖麻油，如HCO-60、HCO-80或HCO-100)为制剂的按重量计0.5和2％之间、或0.7和2％之间、或1和6％之间、或2和6％之间、或2和6％之间、或3和6％之间、或4和6％之间、或2和5％之间、或3和5％之间、或3和5％之间、或2和6％之间、或约4％、或大于0.7％、或大于1％、或大于1.5％、或大于2％、或大于3％、或大于4％。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-40。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-60。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-80。在一些实施方式中，聚氧乙烯脂质是HCO-100。
在本文公开的方面和实施方式的一些实施方式中，制剂包括聚烷氧基化醇。在一些实施方式中，制剂包括聚烷氧基化醇，其为辛基酚聚醚-40。在一些实施方式中，制剂包括聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)，存在的聚烷氧基化醇(如辛基酚聚醚-40)为制剂的按重量计0.002和4％之间、或0.005和3％之间、或0.005和2％之间、或0.005和1％之间、或0.005和0.5％之间、或0.005和0.1％之间、或0.005和0.05％之间、或0.008和0.02％之间、或0.01和0.1％之间、或0.02和0.08％之间、或0.005和0.08％之间、或约0.05％、或约0.01％。
在一些实施方式中，活性成分是碳酸脱水酶抑制剂，如布林唑胺、醋甲唑胺(methazolamide)、多佐胺(dorzolamide)、托吡酯(topiramate)、石榴鞣质(punicalin)、安石榴苷(punicalagin)、石榴皮亭B(granatin B)、加拉巴酸二内酯(gallagyldilactone)、木麻黄鞣宁(casuarinin)、赤芍素(pedunculagin)、特里马素I(tellimagrandin I)及类似物、以及其药学上可接受的盐、前药或变体。在一些实施方式中，碳酸脱水酶抑制剂是布林唑胺，其具有结构：
在一些实施方式中，活性剂是类前列腺素(prostaniod)，如拉坦前列素，其具有结构：
拉坦前列素也以品牌名称Xalatan(由Pfizer生产)为名。
在一些实施方式中，活性剂是α2肾上腺素能激动剂，如溴莫尼定，其具有结构：
溴莫尼定可作为如下使用：滴眼液，品牌名称Alphagan和Alphagan-P；和凝胶，品牌名称Mirvaso。
在一些实施方式中，活性成分是内皮素受体拮抗剂，如波生坦(属于无手性中心的高度取代型嘧啶衍生物类别)、安立生坦(ambrisentan)、西他生坦(sitaxsentan)、及类似物。在一些实施方式中，内皮素受体拮抗剂是波生坦，其具有如下结构：
如本文所用，术语“药学上可接受的盐”包括根据在本文所述化合物上找到的具体取代基利用相对无毒的酸或碱而制备的活性化合物的盐。当本发明的化合物包含相对酸性的官能团时，可通过使这种化合物的中性形式与足量期望的碱接触(纯净或在适当的惰性溶剂中)获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐的实例包括钠盐、钾盐、钙盐、铵盐、有机胺盐、或镁盐、或类似盐。当本发明的化合物包含相对碱性的官能团时，可通过使这种化合物的中性形式与足量期望的酸接触(纯净或在适当的惰性溶剂中)获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括衍生自诸如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸、一氢碳酸、磷酸、一氢磷酸、二氢磷酸、硫酸、一氢硫酸、氢碘酸、或亚磷酸及类似物的无机酸的那些盐、以及衍生自诸如乙酸、丙酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富马酸、乳酸、扁桃酸、苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸、草酸、甲磺酸、及类似物的相对无毒的有机酸的盐。还包括氨基酸盐，如精氨酸盐及类似物；和诸如葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸及类似物的有机酸的盐(参见，例如，Berge等，“Pharmaceutical Salts”，Journal of Pharmaceutical Science，1977，66，1-19)。本发明的某些具体化合物包含碱性和酸性官能团，其允许化合物转化成碱加成盐或酸加成盐。
因此，本发明实践应用考虑的化合物可作为盐(如与药学上可接受的酸一起)存在。本发明包括这种盐。这种盐的实例包括盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、马来酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、酒石酸盐(例如、(+)-酒石酸盐、(-)-酒石酸盐、或其混合物，包括消旋混合物)、琥珀酸盐、苯甲酸盐、和与氨基酸如谷氨酸的盐。这些盐可通过本领域技术人员已知的方法制备。
除盐形式外，本公开还提供前药形式的化合物。术语“前药”及类似术语在通常和习惯意义上指代在生理条件下容易发生化学变化以提供本公开的化合物的化合物。另外，前药可在离体环境中通过化学或生物化学方法转化成本公开的化合物。
如本文所用，术语“药学上可接受的赋形剂”、“药学上可接受的载体”及类似术语在通常和习惯意义上指代有助于向对象给予和对象吸收活性剂并且可被包含本发明的组合物中而不对患者引起显著不良毒理作用的物质。术语“不良毒理作用”及类似术语在通常和习惯意义上指代如医疗或兽医学从业者判断的或本领域已知的、候选赋形剂不应被使用的象征。除非有相反的说明，术语“药物”、“活性剂”、“活性成分”、“治疗活性剂”、“治疗剂”和类似术语同义使用。药学上可接受的赋形剂的非限制性实例包括水、NaCl、生理盐水溶液、乳酸化Ringer’s、正蔗糖(normal sucrose)、正葡萄糖(normal glucose)、粘合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、包衣、甜味剂、调味剂、药学上可接受的盐的溶液(例如，Ringer’s溶液)、醇、油、明胶、碳水化合物如乳糖、直链淀粉或淀粉、脂肪酸酯、羟基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、和着色剂、及类似物。这种制剂可被灭菌，并且如需与下列混合：与本发明化合物无不利反应的辅助剂，如润滑剂、保存剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、影响渗透压的盐、缓冲剂、着色物、和/或芳香物及类似物。本领域技术人员将知道，其它药物赋形剂可用于本发明。
本公开进一步涉及治疗或预防眼部疾病或障碍——例如通过局部给予本文描述的制剂。
通过本公开的组合物或方法的任一种治疗的患者或对象可意为人或非人动物。在实施方式中，本公开提供治疗对其有需要的人类患者的眼部疾病的方法。在实施方式中，本公开提供治疗对其有需要的人类患者的炎性眼部疾病的方法。在另一实施方式中，本公开提供治疗对其有需要的兽医学患者的眼部疾病的方法，该兽医学患者包括但不限于狗、马、猫类、兔、沙鼠、仓鼠、啮齿动物、鸟、水生哺乳动物、牛、猪、骆驼科、和其它动物学动物。
在本文公开的组合物和方法的一些实施方式中，活性剂包括两种或更多种不同的活性成分(或其药学上可接受的盐、前药或变体)的组合。在一些实施方式中，活性剂包括碳酸脱水酶抑制剂(如布林唑胺)和至少一种第二活性剂——如PCT公开号WO 2014/032026(其全部内容通过引用并入本文)描述的那些。在一些实施方式中，活性剂包括内皮素受体拮抗剂(如波生坦)和至少一种第二活性剂——如PCT公开号WO 2014/032026(其全部内容通过引用并入本文)描述的那些。
在一些实施方式中，活性剂包括碳酸脱水酶抑制剂和内皮素受体拮抗剂。在一些实施方式中，活性剂包括碳酸脱水酶抑制剂和消退素(resolvin)。在一些实施方式中，活性剂包括内皮素受体拮抗剂和消退素。在一些实施方式中，活性剂包括碳酸脱水酶抑制剂和类前列腺素。在一些实施方式中，活性剂包括内皮素受体拮抗剂和类前列腺素。在一些实施方式中，活性剂包括碳酸脱水酶抑制剂和α2肾上腺素能激动剂。在一些实施方式中，活性剂包括内皮素受体拮抗剂和α2肾上腺素能激动剂。
术语″治疗″指代：防止疾病、障碍或状况在可易患疾病、障碍和/或状况但还未被诊断患有该疾病、障碍和/或状况的细胞、组织、系统、动物或人中发生；稳定化疾病、障碍或状况，即，遏制其发展；和/或缓解疾病、障碍或状况的一种或多种症状，即，导致疾病、障碍和/或状况消退。
如本文所用，“预防”障碍或状况的治疗剂指代在统计样本中，使经治疗的样本中障碍或状况的发生相对于未治疗对照样本减少，或使障碍或状况的一种或多种症状相对于未治疗对照样本发作延迟或严重程度降低的化合物。
如本文所用，术语″眼部疾病″、″眼部状况″、″眼疾病″和″眼状况″指代眼睛疾病/状况，其可以威胁视力，导致眼睛不适，和可发出全身性健康问题信号。
如本文所用，术语″前段疾病″指代所有感染眼睛的眼表面、前房、虹膜和睫状体和晶状体的障碍。眼表面由角膜、结膜、眼睑、泪腺和睑板腺、和互连神经构成。
如本文所用，术语″后段眼疾病″和″眼后疾病″指代所有感染眼睛后段的障碍。后眼疾病是原发性感染后眼部位如脉络膜或巩膜、玻璃体、玻璃体腔、视网膜、视神经和血管以及后眼部位的血管化或神经支配神经的疾病。
因此，一方面，提供治疗或预防眼部疾病或状况的方法，包括局部给予本文公开的任何方面或实施方式的制剂。在一些实施方式中，眼部疾病是前段疾病。在一些实施方式中，眼部疾病是后段疾病。在一些实施方式中，眼部疾病是选自原发性开角型青光眼、原发性闭角型青光眼、眼高压、炎性青光眼、药物诱发的青光眼、糖尿病性视网膜病(DR)、视神经炎、球后视神经炎、和黄斑皱褶的一种或多种。在一个实施方式中，眼部疾病是原发性开角型青光眼。在一个实施方式中，眼部疾病是原发性闭角型青光眼。在一个实施方式中，眼部疾病是视神经炎。在一个实施方式中，眼部疾病是糖尿病性视网膜病。
具体实施方式
活性剂
根据本文提供的方法和组合物的不同方面和实施方式，活性剂可以是任何能够影响生物学过程的用剂(例如，布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、或波生坦)。活性剂(术语活性成分与术语活性剂在本文中互换使用)包括药物、激素、细胞因子、毒素、治疗剂、维生素及类似物。在一些实施方式中，根据本文公开的方面和实施方式的活性剂是能够或被批准用于治疗或预防疾病或状况的用剂，例如，在一些实施方式中，活性剂能够或被批准用于治疗或预防眼部疾病或状况。
在一些实施方式中，活性剂是碳酸脱水酶抑制剂，如布林唑胺、醋甲唑胺、多佐胺、托吡酯、石榴鞣质、安石榴苷、石榴皮亭B、加拉巴酸二内酯、木麻黄鞣宁、赤芍素、特里马素I、及类似物、以及其药学上可接受的盐、前药或变体。
在一些实施方式中，活性剂是内皮素受体拮抗剂，其属于无手性中心的高度取代型嘧啶衍生物类别。示例性内皮素受体拮抗剂包括波生坦、安立生坦、西他生坦、及类似物、以及其药学上可接受的盐、前药或变体。
在一些实施方式中，活性剂是类前列腺素，如拉坦前列素、曲伏前列素、他氟前列腺素(tafluprost)、unaprostone、比马前列素(bimatoprost)、及类似物、以及其药学上可接受的盐、前药或变体。
在一些实施方式中，活性剂是α2肾上腺素能激动剂，如安普乐定(apraclonidine)、溴莫尼定、可乐定(clonidine)、地托咪定(detomidine)、右旋美托咪啶(dexmedetomidine)、fadolmidine、胍那苄(guanabenz)、胍法新(guanfacine)、洛非西定(lofexidine)、美托咪定(medetomidine)、甲基苯丙胺(methamphetamine)、米伐西醇(mivazerol)、利美尼定(rilmenidine)、罗米非定(romifidine)、他利克索(talipexole)、替扎尼定(tizanidine)、托洛尼定(tolonidine)、赛拉嗪(xylazine)、赛洛唑啉(xylometazoline)、及类似物、以及其药学上可接受的盐、前药或变体。
在本文公开的组合物和方法的一些实施方式中，活性剂包括两种或更多种不同活性成分的组合。在一些实施方式中，活性剂包括碳酸脱水酶抑制剂(如布林唑胺)和至少一种第二活性剂——如PCT公开号WO 2014/032026(其全部内容通过引用并入本文)描述的那些。在一些实施方式中，活性剂包括内皮素受体拮抗剂(如波生坦)和至少一种第二活性剂——如PCT公开号WO 2014/032026(其全部内容通过引用并入本文)描述的那些。
在一些实施方式中，活性剂包括碳酸脱水酶抑制剂和内皮素受体拮抗剂。在一些实施方式中，活性剂包括碳酸脱水酶抑制剂和类前列腺素。在一些实施方式中，活性剂包括内皮素受体拮抗剂和类前列腺素。在一些实施方式中，活性剂包括碳酸脱水酶抑制剂和α2肾上腺素能激动剂。在一些实施方式中，活性剂包括内皮素受体拮抗剂和α2肾上腺素能激动剂。在一些实施方式中，活性剂包括碳酸脱水酶抑制剂和β-肾上腺素能受体拮抗剂。在一些实施方式中，活性剂包括内皮素受体拮抗剂和β-肾上腺素能受体拮抗剂。
眼部疾病
在不同方面和实施方式中，本文公开的制剂可用于治疗或预防眼部疾病或障碍。在此考虑的眼部疾病和障碍包括前段疾病和后段疾病。在某些实施方式中可用本文公开的制剂治疗的示例性眼部疾病包括下列。
开角型青光眼是带有特征性获得性视神经纤维损失的慢性和进行性多因素视神经病。这种损失在存在前房开角、特征性视野异常、和对于眼睛持续健康而言过高眼内压的情况·下产生。
闭角型青光眼由眼内压快速或突然增加引起。
糖尿病可以多种方式影响眼睛。糖尿病性视网膜病(DR)是眼睛后方(视网膜)的感光组织血管损伤导致的糖尿病并发症。最初，糖尿病性视网膜病可不引起症状或仅引起轻度视觉问题。然而，最终，糖尿病性视网膜病可导致失明。糖尿病性黄斑水肿(DME)是糖尿病中流体在黄斑内从血管泄露造成的视网膜肿胀。
增生性玻璃体视网膜病(PVR)是眼睛内瘢痕组织形成。″增生性″是因为细胞增殖，而″玻璃体视网膜病″是因为问题涉及玻璃体和视网膜。在PVR中，瘢痕组织在收缩的视网膜上成片形成。这种显著收缩将视网膜拉向眼睛中心，并使视网膜严重分离和变形。PVR在前部和后部皆可发生，伴随视网膜前部和圆周皱褶。
视神经炎在视神经发炎和髓鞘损伤或破坏时发生。在眼睛后方视神经所在区域发生的神经损坏被称为球后视神经炎，这是另一有时用于视神经炎的术语。
也被称为黄斑皱褶，视网膜前膜是在黄斑上形成的瘢痕组织样膜。其一般进展缓慢，并且通过引起模糊和变形影响中央视觉。随其进展，黄斑上的膜拉动可导致肿胀。
其它制剂成分
本公开的组合物还可包含其它组分，如但不限于，添加剂、佐剂、缓冲剂、张力剂(tonicity agents)、生物粘附聚合物、和保存剂。在局部给予眼睛的任何本公开组合物中，混合物优选在约pH 5至约pH 8下配制。此pH范围可通过向组合物添加缓冲剂来实现，如实施例所述。在实施方式中，制剂中组合物的pH范围为约pH 6.6至约pH 7.0。应理解，本公开的组合物可通过任意常见缓冲剂系统来缓冲，如磷酸盐、硼酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、碳酸盐和硼酸盐-多元醇复合物，其中按照公知技术将pH和同渗质量摩尔浓度调节至适当的生理值。本公开的混合胶束组合物在缓冲水溶液中是稳定的。也就是说，缓冲剂和任何其它组分之间不存在导致组合物不稳定的不利相互作用。
张力剂包括例如甘露醇、氯化钠、木糖醇等。这些张力剂可用于调节组合物的同渗质量摩尔浓度。一方面，制剂的同渗质量摩尔浓度被调节到约250至约350mOsmol/kg的范围内。在优选方面，制剂的同渗质量摩尔浓度被调节到约280至约300mOsmol/kg之间。
添加剂，如糖、甘油和其它糖醇，可被包含在本公开的组合物中。可添加药物添加剂以增加组合物中其它成分的效力或效能。例如，为提高神经钙蛋白抑制剂或mTOR抑制剂的稳定性，调节组合物的同渗质量摩尔浓度，调节组合物的粘度，或因其他理由如实现药物递送，可添加药物添加剂至本公开的组合物。本公开的药物添加剂的非限制性实例包括糖，如，海藻糖、甘露糖、D-半乳糖、和乳糖。在实施方式中，糖可在水合薄膜前被掺入组合物(即，内部地)。在另一实施方式中，糖可在水合步骤过程中被掺入组合物(即，外部地)(参见实施例17)。在实施方式中，本公开的澄清混合胶束水溶液包括添加剂，如糖。
在实施方式中，本公开的组合物进一步包括一种或多种生物粘附聚合物。生物粘附指代某些合成和生物大分子和水合胶体粘附至生物组织的能力。生物粘附是复杂现象，部分取决于聚合物的性质、生物组织、和周围环境。已发现若干因素有助于聚合物的生物粘附能力：能够形成氢桥的官能团(--OH，COOH)的存在，阴离子电荷的存在和强度，聚合物链与粘膜层相互穿透的充足弹性，和高分子量。生物粘附系统已被用于牙科、骨科、眼科、和外科应用。然而，最近出现了对生物粘附材料在其它领域如软组织系人工置换、和用于生物活性剂局部释放的受控释放系统中的应用的明显关注。这种应用包括用于药物在口腔或鼻腔中释放和用于肠道或直肠给予的系统。
在实施方式中，本公开的组合物包括至少一种生物粘附聚合物。生物粘附聚合物可增强组合物粘度，并从而增加在眼中的停留时间。本公开的生物粘附聚合物包括，例如，羧基聚合物，如Carbopol.RTM.(卡波姆(carbomers))、Noveon.RTM.(聚卡波非(polycarbophils))；纤维素衍生物，包括烷基和羟基烷基纤维素，如甲基纤维素、羟基丙基纤维素、羧基甲基纤维素；胶，如刺槐豆(locust beam)、黄原胶(xanthan)、琼脂糖、刺梧桐树胶(karaya)、瓜尔胶；和其它聚合物，包括但不限于聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、Pluronic.RTM.(泊洛沙姆)、黄蓍胶(tragacanth)、和透明质酸；提供封闭药物至眼的持续和受控递送的相变聚合物(例如，海藻酸、角叉菜胶(例如、麒麟菜属(Eucheuma))、黄原胶和刺槐豆胶混合物、果胶、乙酸邻苯二甲酸纤维素、烷基羟基烷基纤维素和其衍生物、羟基烷基化聚丙烯酸酸和其衍生物、泊洛沙姆和其衍生物、等。这些聚合物的物理特征可被环境因素变化介导，如离子强度、pH、或温度——单独或与其它因子组合。在实施方式中，组合物中存在的任选的一种或多种生物粘附聚合物为约0.01wt％至约10wt％/体积，优选约0.1至约5wt％/体积。在实施方式中，本公开的组合物进一步包括至少一种亲水聚合物赋形剂，该选自亲水聚合物赋形剂，例如，PVP-K-30、PVP-K-90、HPMC、HEC、和聚卡波非。在实施方式中，聚合物赋形剂选自PVP-K-90、PVP-K-30或HPMC。在实施方式中，该聚合物赋形剂选自PVP-K-90或PVP-K-30。
在实施方式中，如果需要保存剂，组合物可任选地与多种公知保存剂中的人一种一起保存，该保存剂包括苄基醇——有/无EDTA、苯扎氯铵、氯己定、Cosmocil.RTM.CQ、或Dowicil.RTM.200。在某些实施方式中，可期望本文描述的制剂不包含任何保存剂。关于这点，在一些实施方式中，在单用途容器中包含的制剂中，保存剂可以不是必须或期望的。在其它实施方式中，包含保存剂可以是有利的，如在制剂被包含在多用途容器中的某些实施方式中。
眼用组合物可作为生物相容性澄清混合胶束水溶液被局部给予眼。组合物具有掺入和/或封装在胶束中的药物，该胶束分散在含水介质中。
示例性实施方式的非限制性列举
除本公开其它部分描述和提供方面和实施方式外，还具体考虑下列具体实施方式的非限制性列举。
1.眼用制剂，包括活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)、聚氧乙烯脂质或脂肪酸和聚烷氧基化醇。
2.眼用制剂，包括活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)和n≥40聚氧乙烯脂质或脂肪酸。
3.眼用制剂，包括活性成分，该活性成分选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)和聚氧乙烯脂质或脂肪酸；其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸的存在量等于或大于所述制剂的1wt％。
4.眼用制剂，包括活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)和聚氧乙烯脂质或脂肪酸；其中所述制剂包括纳米胶束。
5.眼用制剂，包括活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1-5wt％的选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一种或多种；和约0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40。
6.眼用制剂，包括大于0.2wt％的活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1-5wt％的选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一种或多种；和约0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40。
7.眼用制剂，包括大于0.5wt％的活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1-5wt％的选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一种或多种；和约0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40。
8.眼用制剂，包括活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1.5-4wt％的一种或多种聚氧乙烯脂质，该一种或多种聚氧乙烯脂质选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100；和约0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40。
9.眼用制剂，包括大于0.2wt％的活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1.5-4wt％的聚氧乙烯脂质或脂肪酸；和约0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40。
10.眼用制剂，包括活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1.5-4wt％的聚氧乙烯脂质或脂肪酸；和约0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40；其中制剂包括纳米胶束。
11.眼用制剂，包括大于0.2wt％的疏水活性剂，该疏水活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1.5-4wt％的聚氧乙烯脂质或脂肪酸；和约0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40；其中制剂包括纳米胶束。
12.眼用制剂，包括活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)，约4wt％的选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一种或多种；和约0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40。
13.眼用制剂，包括活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；约4wt％的HCO-60；和约0.01-0.1wt％的辛基酚聚醚-40。
14.眼用制剂，包括活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1-5wt％的选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一种或多种；和约0.01wt％的辛基酚聚醚-40。
15.眼用制剂，包括大于0.2wt％的活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1-5wt％的选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一种或多种；和约0.01wt％的辛基酚聚醚-40。
16.眼用制剂，包括大于0.5wt％的活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1-5wt％的选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一种或多种；和约0.01wt％的辛基酚聚醚-40。
17.眼用制剂，包括活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1.5-4wt％的一种或多种聚氧乙烯脂质，该聚氧乙烯脂质选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100；和约0.01wt％的辛基酚聚醚-40。
18.眼用制剂，包括大于0.2wt％的活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1.5-4wt％的聚氧乙烯脂质或脂肪酸；和约0.01wt％的辛基酚聚醚-40。
19.眼用制剂，包括活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1.5-4wt％的聚氧乙烯脂质或脂肪酸；和约0.01wt％的辛基酚聚醚-40；其中制剂包括纳米胶束。
20.眼用制剂，包括疏水活性剂，该疏水活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；1.5-4wt％的聚氧乙烯脂质或脂肪酸；和约0.01wt％的辛基酚聚醚-40；其中制剂包括纳米胶束。
21.眼用制剂，包括活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；约4wt％的选自HCO-40、HCO-60、HCO-80和HCO-100的一种或多种；和约0.01wt％的辛基酚聚醚-40。
22.眼用制剂，包括大于0.2wt％的活性剂，该活性剂选自布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦(或其药学上可接受的盐、前药或变体)；约4wt％的HCO-60；和约0.01wt％的辛基酚聚醚-40。
23.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸在所述制剂的按重量计0.5和6％之间。
24.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸在所述制剂的按重量计0.5和2％之间。
25.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸在所述制剂的按重量计0.5和3％之间。
26.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸在所述制剂的按重量计0.5和4％之间。
27.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸在所述制剂的按重量计0.5和5％之间。
28.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸在所述制剂的按重量计1和6％之间。
29.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸在所述制剂的按重量计1和2％之间。
30.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸在所述制剂的按重量计1和3％之间。
31.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或腊肪酸在所述制剂的按重量计1和4％之间。
32.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸在所述制剂的按重量计1和5％之间。
33.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸在所述制剂的按重量计1和6％之间。
34.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸在所述制剂的按重量计2和6％之间。
35.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸在所述制剂的按重量计3和6％之间。
36.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸在所述制剂的按重量计4和6％之间。
37.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸在所述制剂的按重量计2和5％之间。
38.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸在所述制剂的按重量计3和5％之间。
39.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸为所述制剂的按重量计约4％。
40.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸大于所述制剂的按重量计约0.7％。
41.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸大于所述制剂的按重量计约1％。
42.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸大于所述制剂的按重量计约1.5％。
43.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸大于所述制剂的按重量计约2％。
44.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸大于所述制剂的按重量计约3％。
45.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，在所述制剂的按重量计0.002和4％之间。
46.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，在所述制剂的按重量计0.005和3％之间。
47.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，在所述制剂的按重量计0.005和2％之间。
48.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，在所述制剂的按重量计0.005和1％之间。
49.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，在所述制剂的按重量计0.005和0.5％之间。
50.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，在所述制剂的按重量计0.005和0.1％之间。
51.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，在所述制剂的按重量计0.005和0.05％之间。
52.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，在所述制剂的按重量计0.008和0.02％之间。
53.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚烷氧基化醇，若存在，为所述制剂的按重量计约0.01％。
54.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述活性剂在所述制剂中的存在量大于按重量计0.2％。
55.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述活性剂在所述制剂中的存在量大于按重量计0.3％。
56.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述活性剂在所述制剂中的存在量大于按重量计0.4％。
57.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述活性剂在所述制剂中的存在量大于按重量计0.5％。
58.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述活性剂在所述制剂中的存在量大于按重量计0.6％。
59.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述活性剂在所述制剂中的存在量大于按重量计0.7％。
60.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述活性剂在所述制剂中的存在量大于按重量计0.8％。
61.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述活性剂在所述制剂中的存在量大于按重量计0.9％。
62.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述活性剂在所述制剂中的存在量大于按重量计1％。
63.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述活性剂在所述制剂中的存在量大于按重量计1.5％。
64.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述活性剂在所述制剂中的存在量大于按重量计2％。
65.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述活性剂在所述制剂中的存在量大于按重量计3％。
66.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述活性剂在所述制剂中的存在量大于按重量计4％。
67.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸是聚氧乙烯蓖麻油。
68.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸是选自HCO-60、HCO-80或HCO-100的一种或多种。
69.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述聚氧乙烯脂质或脂肪酸是HCO-60。
70.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述活性剂是布林唑胺、或其药学上可接受的盐。
71.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述活性剂是波生坦、或其药学上可接受的盐。
72.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述活性剂包括两种不同用剂的组合。
73.前述实施方式中任一个的制剂，其中活性剂包括碳酸脱水酶抑制剂和/或属于无手性中心的高度取代型嘧啶衍生物类别的内皮素受体拮抗剂中的至少一种，和选自类前列腺素、α2肾上腺素能激动剂、消退素或消退素样化合物、类固醇(如皮质类固醇)、环孢素A(cyclosporine A)、和voclosporin的至少一种另外的活性剂。
74.前述实施方式中任一个的制剂，其中活性剂进一步包括类前列腺素和/或α2肾上腺素能激动剂。
75.前述实施方式中任一个的制剂，其中活性剂包括碳酸脱水酶抑制剂。
76.前述实施方式中任一个的制剂，其中活性剂包括属于无手性中心的高度取代型嘧啶衍生物类别的内皮素受体拮抗剂。
77.前述实施方式中任一个的制剂，其中活性剂进一步包括类前列腺素、α2肾上腺素能激动剂、和/或皮质类固醇。
78.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述制剂不包括保存剂。
79.前述实施方式中任一个的制剂，其中所述制剂不包括带有/不带有EDTA的苄基醇、苯扎氯铵、氯己定、Cosmocil.RTM.CQ、或Dowicil.RTM.200。
80.治疗或预防眼部疾病或状况的方法，所述方法包括局部给予前述实施方式中任一个的制剂。
81.治疗或预防眼部疾病或状况的方法，所述方法包括局部给予前述实施方式中任一个的制剂；其中所述疾病是前段疾病。
82.治疗或预防眼部疾病或状况的方法，所述方法包括局部给予前述实施方式中任一个的制剂；其中所述疾病是后段疾病。
83.治疗或预防眼部疾病或状况的方法，所述方法包括局部给予前述实施方式中任一个的制剂；其中所述疾病是选自开角型青光眼、闭角型青光眼、糖尿病性视网膜病(DR)、糖尿病性黄斑水肿(DME)、视神经炎和球后视神经炎的一种或多种。
84.治疗或预防眼部疾病或状况的方法，所述方法包括局部给予前述实施方式中任一个的制剂；其中所述疾病是干眼综合征。
下文实施例的提供进一步示例本发明的方面。这些实施例是非限制性的，不应被解释为限制本发明的任何方面。
实施例1
利用透析法制备混合纳米胶束制剂
以不同比例的聚合物和药物通过透析法制备布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦的混合纳米胶束制剂。实验设计软件JMP 9.0用于设计实验和分析结果。将准确称量重量的两种聚合物(即，聚氧乙烯氢化蓖麻油-60(HCO-60)和辛基酚聚醚-40(Oc-40))溶解在300微升体积的丙二醇中。将80微升包含PG中的布林唑胺或波生坦的丙二醇、或80mg布林唑胺或波生坦添加至此聚合物混合物，并涡旋混合，获得澄清均质溶液。混合物体积用丙二醇补足(500微升)。将溶液涡旋混合，获得均质溶液。将500微升体积蒸馏去离子水添加至此混合物，获得1000微升(1毫升)总体积。水向有机溶剂中药物-聚合物混合物的添加将自发产生胶束，从而将药物活性剂包埋在混合纳米胶束的疏水核中。
将混合物转移至透析袋(分子量截止值(molecular weight cut off)1000)并转移至包含1升蒸馏去离子水的烧杯。通过覆以铝箔保护烧杯和其内容物隔绝阳光，并将其保持在室温、缓慢恒定搅拌下。混合物透析进行24h时间，以从混合物去除水溶性有机溶剂丙二醇。透析室中的水在预定时间点：1h、2h、4h、6h、12h和24h更换。在透析结束时(24h)，将透析袋的内容物小心转移至15-mL离心管，并使制剂在水浴中进行声处理(时间范围0min至5min)。最终体积用2X磷酸盐缓冲盐水补足，并将制剂的pH调节至6.5±0.1。用0.22微米尼龙过滤器过滤所得制剂，以去除任何外来颗粒物。
将制备的制剂进行各种测试，如包埋效率、负载效率、混合纳米胶束尺寸和多分散指数。
混合纳米胶束尺寸和多分散指数：制剂尺寸和多分散指数利用Zetadizer，Malvern Instruments，NJ来确定。简言之，将大约1ml各制剂转移至比色皿，并置于仪器中。利用激光束确定混合纳米胶束尺寸。
包埋效率：为确定制剂的包埋效率，所有制备的制剂进行包埋效率测试。简言之，将制剂涡旋混合均匀，并将1mL转移至新备的(1.5mL)eppendorf管。将各制剂冻干，以在eppendorf管底部获得固体。将所得固体悬浮于1mL有机溶剂(二乙醚)以生成反胶束，并使药物释放到外部有机溶剂中。将有机溶剂在高速真空中蒸发过夜。将所得反胶束重悬浮于1mL的2-丙醇(考虑稀释因素)，并进一步稀释，以利用HPLC确定各胶束制剂中包埋的布林唑胺和波生坦浓度。利用下列公式计算制剂的包埋效率(其中MNF＝混合纳米胶束制剂)：
通过HPLC法药物定量：布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦的体外分析通过如下进行：反相高效液相色谱(RP-HPLC)法——利用Shimadzu HPLC泵(Shimadzu，Shimadzu Scientific instruments，Columbia，MD)、Alcott自动进样器(model 718AL)、Shimadzu UV/可见光检测器(Shimadzu，SPD-20A/20AV，USA)、在40±1℃下恒温的ODS柱(5μm，150x 4.6mim)和Hewlett Packard HPLC积分器(Hewlett Packard，Palo Alto，CA)。流动相由甲醇(MeOH)、水和三氟乙酸(TFA)(70∶30∶0.05％v/v)组成，设置在0.5mL/min流速。检测波长设置在272nm。样本托盘温度保持在4℃。通过在2-丙醇中由原液制成适当的稀释液，制备布林唑胺和波生坦的校准曲线(0.5至5μg/mL)。将10μl注入体积注入HPLC柱以分析。所有制备的标准品和样本在分析之前和期间储存在4℃。
实施例2
利用乙酸乙酯溶剂蒸发法制备混合纳米胶束制剂
通过溶剂蒸发法以如下两个步骤制备封装布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦的混合纳米胶束制剂：1)制备碱性制剂；和2)再水合。第一步，将布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、或波生坦、HCO-60和辛基酚聚醚-40分别溶解在0.3mL乙酸乙酯中。将这三种溶液在15-mL离心管中混合在一起。将所得混合物进行涡旋，以获得均质溶液。利用高速真空去除乙酸乙酯溶剂，以获得固体薄膜。将剩余物维持在室温高度真空下过夜，以去除剩余有机溶剂。
第二步，将所得薄膜利用1mL双蒸去离子水通过涡旋溶液而水合。将再水合制剂悬浮于2X磷酸盐缓冲溶液中(pH 6.5)。将其通过0.2μm尼龙过滤膜过滤，以去除未包埋的药物聚集物和其它外来颗粒。在下文描述的胶束瓦解和布林唑胺和/或波生坦在稀释剂(2-丙醇)中溶解后，通过RP-HPLC确定布林唑胺和/或波生坦的包埋。
按照实施例1描述的方法，将制备的制剂进行各种测试，如包埋效率、负载效率、混合纳米胶束尺寸和多分散指数。
按照包埋效率方法确定负载到MNF中的药物的重量分数。如上所述利用Malvernzetasizer确定制剂的尺寸和多分散指数。制剂表观澄清，并且具有小尺寸和窄尺寸分布。
实施例3
利用熔体法制备混合纳米胶束制剂
称重200毫克氢化蓖麻油-60(HCO-60)(4wt％)，并将其转移至10mL圆底烧瓶(RBF)。圆底烧瓶的颈部用铝箔封闭，用石蜡膜密封，并将其转移至设置在40℃的水浴。圆底烧瓶在水浴中留置过夜，以液化/熔融HCO-60。第二天，将10微升辛基酚聚醚-40稀释100倍，并使其在水浴中在40℃平衡1h。类似地，使布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦在水浴中在40℃平衡1h。向HCO-60熔体添加40℃的50μL 100倍稀释的辛基酚聚醚-40(0.01wt％)。向上述混合物添加40℃的～20μL布林唑和/或波生坦并搅拌。向此混合物缓慢添加在40℃平衡的蒸馏去离子水(大约2mL)并搅拌。将圆底烧瓶的颈部用铝箔封闭并用石蜡膜密封。将溶液在设置在40℃的水浴中搅拌过夜，隔绝阳光(覆以铝箔)。第二天，从水浴取出如上获得的40℃溶液，并使其冷却至室温并观察澄清度。将2毫升磷酸盐缓冲剂(2X)添加至如上制备的溶液(磷酸盐缓冲剂提前制备，并且pH调节至5.5)。将制剂的体积用2X磷酸缓冲盐水补足至5mL。将制备的制剂利用0.2μm尼龙过滤器过滤并储存在4℃。
制备的制剂按照实施例1描述的方法进行各种测试，如包埋效率、负载效率、混合纳米胶束尺寸和多分散指数。
实施例4
利用第二熔体法制备混合纳米胶束制剂
封装布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦的MNF的制备可分成两步。例如，封装0.4wt％布林唑胺和/或波生坦的3.0wt％HCO-40或HCO-60MNF的产生描述如下。第1步，使HCO-40或HCO-60，150mg，在水浴中恒温在40℃，以熔融和产生澄清稠质粘性液体。向此熔体聚合物添加恒温在40℃的布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦(～20mg)，并混合以实现均质分布。使混合物达到室温，生成带有HCO-40的浅黄色粘性液体和带有HCO-60的蜡状固体。进一步，为固化HCO-40粘性液体，将混合物储存在4℃(在冷冻机中)。
第2步，使丸粒和/或粘性液体在自然条件下达到室温。使丸粒和/或粘性液体在40℃水浴中恒温，并在恒定搅拌下重悬浮于2.0mL蒸馏水(恒温在40℃)中。这导致0.4wt％布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦MNF的澄清水溶液自发产生。使此水溶液在自然条件下达到室温。将溶液pH调节至5.5，并用包含辛基酚聚醚-40(0.01wt％)和PVP-K-90(1.2wt％)的2X磷酸缓冲盐水(pH 5.5)补足体积。将制剂通过0.2μm尼龙过滤器过滤，以去除任何外来物质和获得澄清均质的水制剂。
1H NMR定性研究：为确定外部含水环境中不存在游离药物，进行定性研究。定性质子核磁共振(NMR)研究利用Varian 400MHz NMR进行。利用氘代氯仿和水作为溶剂系统重悬浮制剂，并进行NMR研究。
结果：在40℃下添加至HCO-40或HCO-60的化合物可用于包埋布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦。在较高温度下，聚合物和药物混合物保持处于粘性液体状态。当允许达到室温时，在自然条件下，HCO-60混合物固化并产生蜡状固体。这种蜡状固体在恒温在40℃时有助于在蒸馏水中重悬浮制剂，从而自发产生布林唑胺和/或波生坦MNF。HCO-40粘性液体获得类似的观察和结果。混合物粘度呈现在较低温度(4℃)下提高。因此，其如稠质粘性液体一般呈现粘着于容器壁。在允许恢复室温后，粘度呈现降低，并且混合物保留其流回(flow back)。
利用HCO-60与布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦的混合物所产生的蜡状固体可有助于通过惰性气体表面覆层保护药物和防止药物降解。其它聚合物(HCO-40)在高至大约3.0wt％使用时不导致在室温下或在低温冷藏条件(4℃)下产生蜡状固体。
定性质子NMR研究显示，在水相(D2O)中重悬浮制剂自发地产生混合纳米胶束，水溶液中无显著游离药物峰。如果药物不被包埋在混合纳米胶束的核中，则油将作为单独的油相漂浮在表面。而另一方面，在有机溶剂如氘代氯仿(CDCl3)中重悬浮相同制剂显示药物对应的特征峰和聚合物峰。这表明药物没有被封装在胶束核中，并且在有机溶剂中存在时游离可利用。
结论。这些研究显示，聚合物HCO-60可用于利用热熔体法包埋布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦。HCO-40在较高重量百分比(3.0wt％)下在本文描述的条件下不生成蜡状固体。另一方面，HCO-60在2.0wt％下产生蜡状固体。这种方法具有独有的优势：是一种容易并且快速的方法，在制备MNF时避免使用有机溶剂。而且，制备方法容易且快速。在第1阶段产生的蜡状固体可有助于防止药物降解，并且有助于药物通过惰性气体覆层在室温下停留在蜡状固体状态。定性质子NMR研究显示，药物在重悬浮于水溶液时不游离可利用。另一方面，当相同制剂重悬浮于有机溶剂CDCl3时，药物峰清楚显著，表明药物因形成而存在于外部有机溶剂环境中。
实施例5
制备混合纳米胶束布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦制剂
通过溶剂蒸发法以如下两个步骤制备布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦的MNF制剂：1.制备碱性制剂；和2.再水合。第一步，将布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦、HCO-40和辛基酚聚醚-40分别溶解在0.5mL等份乙醇中。将这三种溶液在圆底烧瓶中混合在一起。搅拌所得混合物，获得均质溶液。通过高速真空蒸发过夜，去除乙醇溶剂，获得固体薄膜。
第二步，将所得薄膜用2.0mL双蒸去离子水水合，并在搅拌下重悬浮过夜。再水合的制剂进行pH调节，并用2X磷酸盐缓冲溶液补足体积(pH 6.8)。进一步将制剂通过0.2μm尼龙过滤膜过滤，以去除未包埋的药物聚集物和其它外来颗粒。
表征制剂的外观、尺寸和多分散指数。发现制剂澄清并且具有极小尺寸和窄多分散指数。
水法。布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦的MNF制剂还可通过水法来制备。在圆底烧瓶中将1mL双蒸去离子水加热至60℃。在搅拌下维持此热水。将HCO-40添加至该热水，并在恒定搅拌下使其溶解。然后将辛基酚聚醚-40添加至此混合物并使其溶解。在单独的容器中，通过手动振荡几分钟，将磷酸盐、氯化钠和布林唑胺和/或波生坦掺混。在搅拌条件下，将磷酸盐/布林唑胺/波生坦/氯化钠掺混物添加至HCO-40和辛基酚聚醚-40的溶液以分散药物。使此混合物在搅拌的同时冷却至室温，并检查药物的完全溶解。利用剩余1mL双蒸去离子水单独制备PVP K 90溶液。将此PVP K 90溶液添加至聚合物/表面活性剂/药物/磷酸盐/氯化钠溶液。加水补足最终体积。然后，将制剂通过0.2μm尼龙膜过滤，以去除药物聚集物和其它外来颗粒。
实施例6
制剂在兔中的局部耐受性
健康年轻成年新西兰白兔(3-4Kg)用于研究本制剂(例如，实施例1-5的制剂)的局部耐受性。将一滴(大约30.mu.L)盐水置于兔子的一只眼睛，并将一滴制剂置于另一只眼睛。兽医学眼科医生利用手持式裂隙灯和间接检眼镜检查每只动物的两眼。根据结膜充血、肿胀和出血(discharge)、房水闪光(aqueous flare)、虹膜光反射和受累、角膜混浊严重程度和面积、翳、荧光素检查和晶状体不透明度，将对照和测试眼睛定级——利用Hackett/McDonald评分系统(参见，例如，Hackett，R.B.和McDonald，T.O.Ophthalmic Toxicology and Assessing Ocular Irritation.Dermatoxicology，5.sup.th Edition.Ed.F.N.Marzulli和H.I，Maibach.Washington，D.C.：Hemisphere Publishing Corporation.1996；299-305和557-566.)。
在荧光素检查中，大约一滴0.9％氯化钠，USP，施加于荧光素浸渍条的端部，然后施加于左眼和右眼的上巩膜(一个荧光素浸渍条用于一只动物)。在大约15秒暴露后，用0.9％氯化钠，USP，从每只眼轻轻洗去荧光素染料。然后利用带有钴蓝过滤光源的裂隙灯检查眼睛。关于晶状体检查，将大约一滴短效散瞳溶液溶液滴注到每只眼睛上以扩大瞳孔。在可接受的扩大发生后，利用裂隙灯生物显微镜检查每只眼睛的晶状体。
借助裂隙灯生物显微镜观察晶状体，并通过直接和反向照明辨别晶状体不透明位置。将晶状体不透明位置(一处或多处)任意分成如下晶状体区域，从前囊开始：
前囊下，
前皮层核后皮层，
后囊下，和
后囊。
晶状体在眼评价过程中进行常规评价，并定级为0(正常)或1(异常)。描述晶状体不透明的存在和标注位置。
实施例7
本公开混合胶束制剂中0.05wt％、0.2wt％和0.5wt％制剂的眼组织分布
在眼应用后评估本公开(眼溶液)(例如，实施例1-5的制剂)的暂时分布和潜在积累——作为重复用药、性别差异和潜在黑色素结合的函数。此评估通过确定新西兰白兔(NZW)和荷兰束带兔(Dutch Belted rabbit)(DB)的眼组织、眼泪和血液中的活性成分浓度来进行。
NZW兔用于单次用药(SD)和7天重复用药(RD)研究。DB兔也用于单次用药研究。动物未经治疗(对照)或被给予单次或每日局部眼剂量7天(混合胶束制剂中0.05wt％、0.2wt％或0.5wt％，给予单眼或双眼)。评估血液和眼组织浓度。
药物浓集在眼前(角膜、结膜、巩膜)和眼后(视网膜、视神经)组织处，而在眼睛中间(房水和玻璃体液)最少，表明药物通过被动运输以外的机制穿过眼睛运输。眼睛后方实现的高药物水平使得本公开组合物的局部给予对于治疗眼后疾病(例如，涉及视神经的视网膜疾病，如青光眼)可行。本公开的组合物实现极高水平——特别是在目标组织，如泪腺中。
实施例8
混合纳米胶束制剂用于治疗干眼的应用
经1个月至1年或更长的时间，将根据实施例1-5的混合纳米胶束制剂以0.05％和0.2％之间的浓度b.i.d.给予患有干眼的患者。
实施例9
混合纳米胶束制剂用于治疗糖尿病性视网膜病的应用
经1个月至1年或更长的时间，将根据实施例1-5的混合纳米胶束制剂以0.2wt％至0.5wt％之间的浓度b.i.d.给予患有增生性糖尿病性视网膜病的患者。
实施例10
布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦混合纳米胶束制剂的耐受性和眼组织分布
在兔中进行研究，测试布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和波生坦的纳米胶束制剂相对于其安慰剂和平衡盐水溶液(BSS)的耐受性和眼组织分布。健康新西兰雌性白兔(2-3kg)用于本研究。制备具有0.1％布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、或波生坦的布林唑胺、拉坦前列素、溴莫尼定、和/或波生坦研究药物，基本如本文实施例所述。下表显示活性制剂和安慰剂的制剂组成。
表
制剂组合物
4x/天以两小时间隔o.d.施用一滴(大约35μL)研究药物5天。向对侧眼施加一滴BSS。
评价的耐受性参数是：物理检查(驯化研究释放(acclimation study release))；存活率(每日)；临床观察(每日)；Hackett-McDonald眼刺激评分(每只兔子的用药前基线数据，然后每天用药前[在第一次日剂(daily dose)前]，和然后最后一个日剂后30min)；眼内压(IOP)，每只兔子用药前基线数据和然后每日晚间检查后30分钟；视网膜电图(ERG)，每只兔子用药前(研究前)基线数据和然后最后一次治疗后1小时；和安乐死时的眼组织学病理。
平均累积Hackett-McDonald眼刺激评分证明，贯穿研究始终、治疗前和治疗后检查时间BSS治疗的左眼和环孢素治疗的右眼均为非常小的评分。在经治疗剂、安慰剂和BSS治疗的眼睛中观察到小于2的平均累积炎性评分。这些临床评分代表轻度结膜充血(发红)和肿胀。然而，小组之间平均累积Hackett-McDonald眼刺激评分无显著差异，表明在HCO-40、HCO-40安慰剂、和BSS中局部施用0.1％治疗剂不带来刺激差异。
经BSS、HCO-40、或治疗剂治疗眼睛中观察不到IOP变化。在测试品治疗5天后在ERG上观察不到视网膜功能的毒理学变化。在任一小组的眼睛前段(结膜/角膜/虹膜)或后段(玻璃体/视网膜)在组织学上观察不到毒理学或炎性变化。
选择的眼组织(房水、玻璃体液、结膜、角膜、虹膜-睫状体、晶状体、视网膜/脉络膜、和巩膜)的样本在第5天最后一剂后1小时从所有接受伴随HCO-40(OD)和BSS(OS)的0.1％治疗剂的兔子和一只接受安慰剂HCO-40制剂(OD)和BSS(OS)的兔子(21号)采集。通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析样本的治疗剂。内标是d4-布林唑胺、d4-拉坦前列素、d4-溴莫尼定、或d4-波生坦。治疗剂的已建立分析范围对于全血是0.100-100ng/mL，对于房水和玻璃体液是2.00-2000ng/mL。固体组织的分析范围是0.125-30ng(低范围)和1.00-2500ng(高范围)。固体组织分析结果通过组织分析量校准转化成ng/g。
在重复给予0.1％治疗剂-HCO-40制剂后，在角膜中观察到被治疗眼睛中的最高平均治疗剂浓度，然后是结膜、巩膜、虹膜-睫状体、和房水。在晶状体、视网膜/脉络膜、和玻璃体液中观察到最低治疗剂浓度。经BSS治疗的对侧眼睛中的治疗剂浓度相当低，表明最低限度的全身性药物转移。
在此观察到的0.1％治疗剂制剂的眼组织浓度总体上高于在Allergan 0.2％3H环孢素A制剂对兔重复药剂给予(bid，7天)后的Cmax值(参见Acheampong AA，Shackleton M，Tang-Liu D，Ding S，Stern ME，Decker R Distribution of cyclosporin A in ocular tissues after topical administration to albino rabbits and beagle dogs；Current Eye Research 18(2)；1999；pp91-103)。
实施例11
治疗剂混合纳米胶束制剂的耐受性和眼组织分布
在兔中进行研究，测试治疗剂的两种纳米胶束制剂相对于匹配的安慰剂和平衡盐水溶液(BSS)的耐受性和眼组织分布。健康新西兰雌性白兔(2-3kg)用于本研究。4x/天以两小时间隔o.d.施用一滴(大约35μL)研究药物5天。向对侧眼睛施用一滴BSS。
评价的耐受性参数是：物理检查(驯化研究释放)；存活率(每日)；临床观察(每日)；Hackett-McDonald眼刺激评分(每只兔子的用药前基线数据，然后每天用药前[在第一次日剂(daily dose)前]，和然后最后一个日剂后30min)；眼内压(IOP)，每只兔子用药前基线数据和然后每日晚间检查后30分钟；视网膜电图(ERG)，每只兔子的用药前(研究前)基线数据和然后最后一次治疗后1小时；和安乐死时的眼组织学病理。
累积Hackett-McDonald眼刺激评分证明，贯穿研究始终、治疗前和治疗后检查时间BSS治疗的左眼和测试品治疗的右眼均为非常小的平均值。小组之间平均累积Hackett-McDonald眼刺激评分无显著差异。所有小组中观察到的眼刺激被解读为最低限度的和暂时的。
经BSS或测试品治疗的眼睛中观察不到IOP变化。测试品治疗5天后在ERG上观察不到视网膜功能的毒理学变化。在任一小组的眼睛的前段(结膜/角膜/虹膜)或后段(玻璃体/视网膜)在组织学上观察不到毒理学或炎性变化。
通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析选定眼流体/组织(房水、玻璃体液、结膜、角膜、虹膜-睫状体、晶状体、视网膜/脉络膜、和巩膜)(从分别在治疗剂(HCO-60中0.15wt％、HCO-40中0.1wt％)治疗小组中的两只兔子采集、和从每个匹配安慰剂小组中的一只兔子采集)的治疗剂。Warfarin-d5和5-HAD用作房水和玻璃体液中治疗剂分析的内标。关于其它眼组织(固体组织)，warfarin-d5和苯基乙酸-d5(PAA-d5)分别用作布林唑胺和波生坦的内标。固体组织的分析范围是0.125-100ng。固体组织分析结果通过组织分析量校准转化成ng/g。
巩膜和结膜中仅观察到零星的相对低浓度的治疗剂。治疗剂在大部分眼组织中检测不到或在分析定量限值以下。
在此示例性描述的本发明可在缺少本文没有具体公开的任何一个或多个元素、一个或多个限制的情况下实践。已采用的术语和表述作为描述而非限制术语使用，并且这种术语和表述的使用不意图排除所示和所述特征或其部分的任何等同形式，而是认为在本发明主张范围内可以进行各种改动。因此，应理解，虽然本发明通过优选实施方式和任选特征具·体地进行了公开，但本领域技术人员可采取本文公开思路的改动和变型，并且认为这种改动和变型处于所附权利要求限定的本发明的范围之内。
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在此示例性描述的本发明可在缺少本文未具体公开的任何一个或多个元素、一个或多个限制的情况下适当地实践。因此，例如，术语“包括”、“含有”、“包含”等应被无限制地广义阅读。另外，本文使用的术语和表述作为描述而非限制术语使用，并且这种术语和表述的使用不意图排除所示和所述特征或其部分的任何等同形式，而是认为在本发明主张范围内可以进行各种改动。因此，应理解，虽然本发明通过优选实施方式和任选特征具体地进行了公开，但本领域技术人员可采取各处公开的实施的本发明的改动和变型，并且认为这种改动和变型处于本发明的范围之内。
在此发明已被宽泛和概括地描述。落入上位公开的每个较窄物种和下位分组也构成本发明一部分。这包括具有从该种属去除任何主题的条件或否定限制的本发明的上位描述，而不论本文是否具体记载了该切除的材料。
另外，在以马库什组描述本发明的特征或方面时，本领域技术人员将理解本发明因而以该马库什组的单个成员或子组被描述。
所附权利要求提出其它实施方式。