新型调节剂及使用方法与流程

文档序号:11093807阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种分离的CD46调节剂。

2.根据权利要求1所述的分离的CD46调节剂,其中所述CD46调节剂包含CD46拮抗剂。

3.根据权利要求1所述的分离的CD46调节剂,其中所述CD46调节剂包含抗体或其免疫反应性片段。

4.根据权利要求3所述的分离的CD46调节剂,其中所述抗体或其免疫反应性片段包含单克隆抗体。

5.根据权利要求4所述的分离的CD46调节剂,其中所述单克隆抗体选自嵌合抗体、人源化抗体和人抗体。

6.根据权利要求4所述的分离的CD46调节剂,其中所述单克隆抗体包含具有三个互补决定区的轻链可变区和具有三个互补决定区的重链可变区,其中所述重链和轻链互补决定区包含图11B中所示的互补决定区。

7.根据权利要求6所述的分离的CD46调节剂,其中所述单克隆抗体是人源化抗体。

8.根据权利要求4所述的分离的CD46调节剂,其中所述单克隆抗体包含轻链可变区和重链可变区,其中所述轻链可变区包含与选自SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:29、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:37、SEQ ID NO:41、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:61、SEQ ID NO:65、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:77、SEQ ID NO:81和SEQ ID NO:85中所示氨基酸序列的氨基酸序列具有至少60%同一性的氨基酸序列,并且其中所述重链可变区包含与选自SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:35、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:55、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:67、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:75、SEQ ID NO:79和SEQ ID NO:83中所示氨基酸序列的氨基酸序列具有自身60%同一性的氨基酸序列。

9.一种核酸,所述核酸编码根据权利要求8所述的氨基酸重链可变区或氨基酸轻链可变区。

10.一种载体,所述载体包含根据权利要求9所述的核酸。

11.一种人源化抗体,所述抗体衍生自根据权利要求8所述的单克隆抗体。

12.根据权利要求1所述的分离的CD46调节剂,所述调节剂包含来自CD46变体A的氨基酸序列或其片段。

13.根据权利要求12所述的分离的CD46调节剂,其中所述CD46调节剂还包含免疫球蛋白恒定区的至少一部分。

14.根据权利要求1所述的分离的CD46调节剂,其中所述调节剂在施用给受试者后降低肿瘤起始细胞的出现率。

15.根据权利要求14所述的分离的CD46调节剂,其中所述出现率的降低是使用对已知用于富集肿瘤起始细胞的肿瘤细胞表面标记物的流式细胞术分析或对已知用于富集肿瘤起始细胞的肿瘤细胞表面标记物的免疫化学检测来测定。

16.根据权利要求14所述的分离的CD46调节剂,其中所述出现率的降低是使用体外或体内有限稀释分析来测定。

17.根据权利要求16所述的分离的CD46调节剂,其中所述出现率的降低是使用体内有限稀释分析来测定的,所述体内有限稀释分析包括将活的人肿瘤细胞移植进免疫能力降低的小鼠中。

18.根据权利要求17所述的分离的CD46调节剂,其中所述出现率的降低是使用体内有限稀释分析来测定的,所述体内有限稀释分析包括用泊松分布统计对肿瘤起始细胞出现率进行定量。

19.根据权利要求16所述的分离的CD46调节剂,其中所述出现率的降低是使用体外有限稀释分析来测定的,所述体外有限稀释分析包括将活的人肿瘤细胞有限稀释沉积进体外集落支持条件中。

20.根据权利要求19所述的分离的CD46调节剂,其中所述出现率的降低是使用体外有限稀释分析来测定的,所述体外有限稀释分析包括用泊松分布统计对肿瘤起始细胞出现率进行定量。

21.根据权利要求14所述的分离的CD46调节剂,其中所述肿瘤起始细胞包含肿瘤永续细胞。

22.一种治疗CD46相关障碍的方法,所述方法包括施用治疗有效量的CD46调节剂给有需要的受试者。

23.根据权利要求22所述的方法,其中所述CD46调节剂包含CD46拮抗剂。

24.根据权利要求22所述的方法,其中所述CD46调节剂包含抗体或其免疫反应性片段。

25.根据权利要求24所述的方法,其中所述抗体或其免疫反应性片段包含单克隆抗体。

26.根据权利要求25所述的方法,其中所述单克隆抗体选自嵌合抗体、人源化抗体和人抗体。

27.根据权利要求25所述的方法,其中所述单克隆抗体包含具有三个互补决定区的轻链可变区和具有三个互补决定区的重链可变区,其中所述重链和轻链互补决定区包含图11B中所示的互补决定区。

28.根据权利要求25所述的方法,其中所述单克隆抗体包含轻链可变区和重链可变区,其中所述轻链可变区包含与选自SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:29、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:37、SEQ ID NO:41、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:61、SEQ ID NO:65、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:77、SEQ ID NO:81和SEQ ID NO:85中所示氨基酸序列的氨基酸序列具有至少60%同一性的氨基酸序列,并且其中所述重链可变区包含与选自SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:35、SEQ ID NO:39、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:55、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:67、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:75、SEQ ID NO:79和SEQ ID NO:83中所示氨基酸序列的氨基酸序列具有自身60%同一性的氨基酸序列。

29.根据权利要求25所述的方法,其中所述单克隆抗体包含泛CD46抗体。

30.根据权利要求25所述的方法,其中所述单克隆抗体与一种或多种CD46剪接变体免疫特异性缔合。

31.根据权利要求30所述的方法,其中所述一种或多种CD46剪接变体包含选自CD46D、CD46F和CD46J的剪接变体。

32.根据权利要求22所述的方法,其中所述过度增殖障碍包含赘生性障碍。

33.根据权利要求32所述的方法,其中所述赘生性障碍包含实体瘤。

34.根据权利要求32所述的方法,其中所述赘生性障碍包含肾上腺癌、膀胱癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、肾癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、结肠直肠癌、胰腺癌、前列腺癌或乳腺癌。

35.根据权利要求22所述的方法,所述方法还包括降低肿瘤起始细胞在所述受试者中的出现率的步骤。

36.根据权利要求35所述的方法,其中所述出现率的降低是使用对已知用于富集肿瘤起始细胞的肿瘤细胞表面标记物的流式细胞术分析来测定的。

37.根据权利要求35所述的方法,其中所述出现率的降低是使用对已知用于富集肿瘤起始细胞的肿瘤细胞表面标记物的免疫化学检测来测定。

38.根据权利要求35所述的方法,其中所述出现率的降低是使用体外或体内有限稀释分析来测定。

39.根据权利要求38所述的方法,其中所述出现率的降低是使用体内有限稀释分析来测定的,所述体内有限稀释分析包括将活的人肿瘤细胞移植进免疫能力降低的小鼠中。

40.根据权利要求39所述的方法,其中所述出现率的降低是使用体内有限稀释分析来测定的,所述体内有限稀释分析包括用泊松分布统计对肿瘤起始细胞出现率进行定量。

41.根据权利要求38所述的方法,其中所述出现率的降低是使用体外有限稀释分析来测定的,所述体外有限稀释分析包括将活的人肿瘤细胞有限稀释沉积进体外集落支持条件中。

42.根据权利要求41所述的方法,其中所述出现率的降低是使用体外有限稀释分析来测定的,所述体外有限稀释分析包括用泊松分布统计对肿瘤起始细胞出现率进行定量。

43.根据权利要求22所述的方法,所述方法还包括施用抗癌剂的步骤。

44.根据权利要求22所述的方法,其中所述CD46调节剂包含CD46变体A或其片段。

45.根据权利要求44所述的方法,其中所述CD46调节剂还包含免疫球蛋白恒定区或其片段。

46.根据权利要求45所述的方法,其中所述CD46调节剂包含融合蛋白。

47.根据权利要求22所述的方法,所述方法还包含施用第二CD46调节剂的步骤,其中所述第二CD46调节剂与所述CD46调节剂不同。

48.一种在有需要的受试者中降低肿瘤起始细胞的出现率的方法,所述方法包括施用CD46调节剂给所述受试者的步骤。

49.根据权利要求48所述的方法,其中所述肿瘤起始细胞包含肿瘤永续细胞。

50.根据权利要求49所述的方法,其中所述肿瘤永续细胞包含一种或多种标记物。

51.根据权利要求48所述的方法,其中所述CD46调节剂包含CD46拮抗剂。

52.根据权利要求48所述的方法,其中所述CD46调节剂包含抗体。

53.根据权利要求52所述的方法,其中所述抗体包含单克隆抗体。

54.根据权利要求48所述的方法,其中所述受试者患有选自肾上腺癌、膀胱癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、肾癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、结肠直肠癌、胰腺癌、前列腺癌和乳腺癌的赘生性障碍。

55.根据权利要求48所述的方法,其中所述肿瘤起始细胞的出现率降低至少10%。

56.根据权利要求48所述的方法,其中所述出现率的降低是使用对已知用于富集肿瘤起始细胞的肿瘤细胞表面标记物的流式细胞术分析来测定的。

57.根据权利要求48所述的方法,其中所述出现率的降低是使用对已知用于富集肿瘤起始细胞的肿瘤细胞表面标记物的免疫化学检测来测定。

58.根据权利要求48所述的方法,其中所述出现率的降低是使用体外或体内有限稀释分析来测定。

59.根据权利要求58所述的方法,其中所述出现率的降低是使用体内有限稀释分析来测定的,所述体内有限稀释分析包括将活的人肿瘤细胞移植进免疫能力降低的小鼠中。

60.根据权利要求59所述的方法,其中所述出现率的降低是使用体内有限稀释分析来测定的,所述体内有限稀释分析包括用泊松分布统计对肿瘤起始细胞出现率进行定量。

61.根据权利要求58所述的方法,其中所述出现率的降低是使用体外有限稀释分析来测定的,所述体外有限稀释分析包括将活的人肿瘤细胞有限稀释沉积进体外集落支持条件中。

62.根据权利要求61所述的方法,其中所述出现率的降低是使用体外有限稀释分析来测定的,所述体外有限稀释分析包括用泊松分布统计对肿瘤起始细胞出现率进行定量。

63.一种敏化受试者中的肿瘤以便用抗癌剂治疗的方法,所述方法包括施用CD46调节剂给所述受试者的步骤。

64.根据权利要求63所述的方法,其中所述CD46调节剂是抗体。

65.根据权利要求63所述的方法,其中所述肿瘤是实体瘤。

66.根据权利要求63所述的方法,其中所述抗癌剂包含化学治疗剂。

67.根据权利要求63所述的方法,其中所述抗癌剂包含生物剂。

68.一种在有需要的受试者中诊断过度增殖障碍的方法,所述方法包括如下步骤:

从所述受试者获得组织样品;

使所述组织样品与至少一种CD46调节剂接触;以及

检测或定量与所述样品缔合的所述CD46调节剂。

69.根据权利要求68所述的方法,其中所述CD46调节剂包含单克隆抗体。

70.根据权利要求69所述的方法,其中所述抗体与报告分子有效缔合。

71.一种可用于诊断或治疗CD46相关障碍的制品,所述制品包括含有CD46调节剂的容器和关于使用所述CD46调节剂治疗或诊断所述CD46相关障碍的说明书。

72.根据权利要求71所述的制品,其中所述CD46调节剂是单克隆抗体。

73.根据权利要求72所述的制品,其中所述容器包含可读板。

74.一种治疗患有包含实体瘤的赘生性障碍的受试者的方法,其中所述方法包括施用治疗有效量的与一种或多种CD46剪接变体免疫特异性缔合的CD46调节剂的步骤。

75.根据权利要求74所述的方法,其中所述一种或多种CD46剪接变体包含选自CD46D、CD46F和CD46J的剪接变体。

76.根据权利要求74所述的方法,其中所述CD46调节剂包含拮抗剂。

77.根据权利要求74所述的方法,其中所述CD46调节剂包含抗体。

78.根据权利要求77所述的方法,其中所述抗体包含单克隆抗体。

79.根据权利要求74所述的方法,其中所述赘生性障碍选自肾上腺癌、膀胱癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、肾癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、结肠直肠癌、胰腺癌、前列腺癌和乳腺癌。

80.一种治疗患有赘生性障碍的受试者的方法,所述方法包括施用治疗有效量的至少一种与细胞毒性剂缔合的CD46调节剂。

81.根据权利要求80所述的方法,其中所述CD46调节剂与所述细胞毒性剂缀合。

82.根据权利要求81所述的方法,其中所述CD46调节剂包含抗体。

83.根据权利要求82所述的方法,其中所述抗体包含单克隆抗体。

84.根据权利要求80所述的方法,其中所述赘生性障碍选自肾上腺癌、膀胱癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、肾癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、结肠直肠癌、胰腺癌、前列腺癌和乳腺癌。

85.一种对肿瘤起始细胞群体进行鉴别、分离、分区或富集的方法,所述方法包括使所述肿瘤起始细胞与CD46调节剂接触的步骤。

86.根据权利要求82所述的方法,其中所述CD46调节剂包含抗体。

87.根据权利要求83所述的方法,其中所述抗体包含单克隆抗体。

88.根据权利要求82所述的方法,所述方法还包括将所述肿瘤起始细胞进行流式细胞术分析的步骤。

89.根据权利要求85所述的方法,其中所述流式细胞术分析包括FACS。

90.一种耗尽患有过度增殖障碍的患者中的肿瘤起始细胞的方法,所述方法包括施用CD46调节剂的步骤。

91.根据权利要求90所述的方法,其中所述CD46调节剂包含单克隆抗体。

92.根据权利要求91所述的方法,其中所述单克隆抗体与细胞毒性剂缔合。

93.根据权利要求92所述的方法,其中所述单克隆抗体是泛CD46抗体。

94.根据权利要求92所述的方法,其中所述单克隆抗体与单种CD46剪接变体免疫特异性缔合。

95.根据权利要求94所述的方法,其中所述单种CD46剪接变体包含选自CD46D、CD46F和CD46J的剪接变体。

96.一种包含人源化抗体的CD46调节剂,其中所述抗体包含实质上如SEQ ID NO:199中所示的重链可变区氨基酸序列和实质上如SEQID NO:201中所示的轻链可变区氨基酸序列。

97.一种组合物,所述组合物包含hSC1.N71抗体和可药用载体。

98.一种包含人源化抗体的CD46调节剂,其中所述抗体包含实质上如SEQ ID NO:203中所示的重链可变区氨基酸序列和实质上如SEQ ID NO:205中所示的轻链可变区氨基酸序列。

99.一种组合物,所述组合物包含hSC1.N149抗体和可药用载体。

100.一种在有需要的受试者中抑制或预防转移的方法,所述方法包括施用药学有效量的CD46调节剂的步骤。

101.根据权利要求100所述的方法,其中所述受试者在施用所述CD46调节剂之前或之后进行减积手术。

102.根据权利要求101所述的方法,其中所述减积手术包括施用至少一种抗癌剂。

103.根据权利要求100所述的方法,其中所述受试者在施用CD46调节剂时处于好转期。

104.一种在有需要的受试者中进行维持疗法的方法,所述方法包括施用药学有效量的CD46调节剂的步骤。

105.根据权利要求104所述的方法,其中所述受试者在施用CD46调节剂之前受过赘生性障碍治疗。

106.根据权利要求104所述的方法,其中所述受试者在施用所述CD46调节剂时无所述赘生性障碍的症状。

107.根据权利要求105所述的方法,其中所述CD46调节剂在所述受试者受过所述赘生性障碍治疗之后超过六个月施用。

108.根据权利要求105所述的方法,其中所述CD46调节剂包含单克隆抗体。

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