一种含有海参多肽的抗衰老化妆品基质及其制备方法与流程

本发明涉及一种功能性护肤品，属于化妆品技术领域，具体涉及一种含有海参多肽的抗衰老化妆品基质及其制备方法。

背景技术：

随着年龄的增长以及环境污染和生活压力的加大，人们的皮肤衰老越来越明显，变得干燥、缺乏弹性、产生皱纹并且颜色暗沉。抗衰老美容护肤也越来越受到人们的重视。

使用化妆品抑制皮肤老化最有效的方式之一是向化妆品中添加各种抗衰老成分。最近，各种活性肽成分已经被应用于化妆品产品中。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种采用天然原料，用生物技术制备，抗衰老效果显著的护肤基质。

本发明的另一目的是提供一种海参多肽的水解制备方法，该方法的应用环境温和，水解效率高，水解产物分子量小，抗氧化作用显著；所述海参多肽是经胶原酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶等水解得到的。

本发明的再一目的是提供上述护肤基质的制备方法。

本发明的目的及解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。依据本发明提出的一种抗衰老化妆品基质，由以下重量百分比的组分组成：

40-50％的海参多肽水解液；

5-15％的灵芝多糖；

5-15％的人参根提取物；

20-50％的去离子水；所述基质中海参多肽水解液、灵芝多糖、人参根提取物以及水各组分的重量之和为100％。

本发明的抗衰老化妆品基质，所述海参多肽通过以下工序得到：

将海参原料清洗粉碎，用胶原酶和多种蛋白酶的复合酶系水解制备海参活性肽；再用膜分离的方法，富集其中分子量在5kDa以下的小肽；得到的小分子海参多肽透皮吸收好，胶原蛋白含量高，能为皮肤提供营养。

多酶复配水解制备海参多肽的方法，可表述如下：

1)先将新鲜海参用自来水清洗，除去海参体内泥沙，用绞肉机绞成海参泥；

2)加入与海参泥原料等重的超纯水，加温至40-60℃；

3)添加700U/g-2500U/g的由中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胶原酶组成的复合酶体系，在40-60℃下酶解处理1-5h；

4)升温至110℃-125℃下保温5min-30min，灭酶灭菌；

5)5000-12000rpm的速度离心，去除残渣；

6)对离心上清用5000Da的超滤膜分离，保留分子量5000Da以下的产品。

复合酶体系的构成：中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胶原酶，按其酶活比例0.4：0.6：1组合成复合酶系。经复合酶系水解得到的海参水解液，其水解率高达78％以上。

灵芝多糖除了可以作为保湿剂为皮肤提供润滑和保护以外，还由于其对巨噬细胞的免疫增强作用，具有一定的消炎抗敏功效。

5％-15％的人参根提取液具促进表皮成纤维细胞的活性，可以增加弹性蛋白的生成量，从而增加细胞活性，减少皮肤的衰老。

所述含有海参多肽的抗衰老护肤基质的制备方法，包括以下步骤：

1)开启搅拌，在室温条件下，将5％-15％的灵芝多糖缓慢加入20％-50％的水中，室温搅拌；

将40％-50％的海参多肽水解液和5％-15％的人参根提取液加入步骤1)所得溶液中，搅拌，低速均质，出料，得到具有抗衰老作用的化妆品基质。

步骤1)中所述搅拌速度为800-1000rpm；所述恒温搅拌的时间为30-60min。

步骤2)中所述搅拌速度为800-1000rpm；所述低速均质的均质速度为1000-1500rpm。

所述含有海参多肽的化妆品基质应用于制备包含基质的化妆品。

所述包含基质的化妆品含有上述海参多肽的抗衰老护肤基质，其中所述护肤基质在该化妆品中的重量百分比为5％-20％。

所述化妆品为护肤类化妆品，包括乳液、眼部精华素、化妆水以及精华液。

所述化妆品为功能性化妆品，包括抗皱护肤品、保湿护肤品、美白护肤品、祛痘护肤品以及抗汗护肤品。

本发明经过试验筛选了三种保湿、抗衰老成分作为主功效成分，通过各成分间的相互作用即协同增效作用，最大限度的发挥功效。产生这种增效作用的机理初步推测为这些物质间的共价键、氢键以及疏水作用共同作用的结果。

另外，由于本发明的活性成分可以被肌肤降解透皮吸收，可以为肌肤供给营养，具有长效的去皱效果。

附图说明

图1是海参多肽水解的SDS-PAGE；图中1为参加反应的可溶性海参蛋白底物，2为经过降解的海参小肽产物。

图2是海参水解小肽的分子量分布。

图3是海参蛋白水解前后的抗氧化性对比柱状统计图。

具体实施方式

海参是一种传统海产珍品，营养价值高，生理活性丰富。现已发现海参中含有多种生理活性物质可用于开发功效性的护肤品、保健品与药品，如海参多肽、海参多糖、海参皂苷、脂肪酸等。

灵芝属于真菌类担子菌纲多孔菌目多孔菌科植物，两千多年前已记载在汉朝的《神农本草经》。灵芝可用于治疗多种疾病,如高血压、支气管炎、关节炎、神经衰弱、慢性肝炎、肾炎、胃溃疡、免疫紊乱、癌症等。灵芝多糖具有调节人体免疫系统及治疗癌症的功能，并具有特异性免疫增强作用，可以活化巨噬细胞的细胞吞噬能力、提高机体的免疫调节功能。

人参根提取液中富含人参多糖及人参皂苷，具促进表皮成纤维细胞的活性，可以增加弹性蛋白的生成量，从而增加细胞活性，减少皮肤的衰老。

随着美容化妆品行业的发展，天然来源的产品由于使用安全、效果明显等优点而得到欢迎。利用生物技术水解制备海参活性肽，复配灵芝、人参等天然提取物，可以达到较好的抗衰老效果，并且相对温和，少刺激。

本发明的一种抗衰老化妆品基质，包含40-50％的海参多肽水解液；5-15％的灵芝多糖；5-15％的人参根提取物；20-50％的去离子水；所述基质中海参多肽水解液、灵芝多糖、人参根提取物以及水各组分的重量百分比之和为100％。

将本发明的抗衰老化妆品基质添加到化妆品中，其在化妆品中的重量含量为5％-20％。

下面通过具体较佳实施例结合附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1

一种海参多肽的水解制备方法，具体步骤为：

1)先将新鲜海参用自来水清洗，除去海参体内泥沙，用绞肉机绞成海参泥；

2)加入与海参泥原料等重的超纯水，加温至50℃；

3)添加1000U/g的复合酶系，该复合酶系由中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胶原酶以酶活比0.4：0.6：1组成。在50℃下酶解处理2h；

4)升温至121℃下保温20min，灭酶灭菌；

5)5000-12000rpm的速度离心，去除残渣；

6)用SDS-PAGE分析水解前后可溶性海参多肽的分子量对比，见附图1所示。

图1的结果表明，在2h内海参多肽可以被复合蛋白酶快速的降解，并且其降解产物的分子量较小，呈连续分布的状态。

7)用液相-质谱联用的方法，进一步研究海参水解肽的分子量分布，见附图2所示。经研究发现，海参多肽水解后的产物成分比较复杂，主要吸收峰集中在一起。再经质谱分析后发现，海参水解肽的分子量主要分布在300-1000Da之间，这符合生物活性小肽的分子量特征，更有利于机体的吸收。

8)对离心上清用5000Da的超滤膜分离，保留分子量5000Da以下的产品。

9)利用ORAC法测定海参小肽的抗氧化性能力，并将未降解的可溶性海参蛋白作为对照。见附图3所示。

酶解后，其抗氧化性有了明显的提高，这更有力的支持了水解海参多肽的应用前景，证明其在对延缓衰老等方面的效果。

实施例2

一种含有海参多肽的抗衰老化妆品基质的制备方法，具体步骤为：

1)开启搅拌(转速为800rpm)，在温室条件下，将10％的灵芝多糖(市售产品)缓慢加入30％的去离子水中，恒温搅拌20min，得到灵芝多糖水溶液；

2)将50％的海参多肽水解液、10％的人参根提取物次加入灵芝多糖水溶液，搅拌10min后，再低速均质(均质速度为1500rpm)3min，出料，得到具有抗衰老作用的护肤基质。

实施例3

一种包含护肤基质的眼部精华素，按质量百分比计，由以下的组分组成：

A组分：卵磷脂(乳化剂)1.0％、澳洲坚果籽油1.5％、小麦胚芽油0.5％、16/18醇0.5％；

B组分：AVC(丙烯酸聚合物)0.5％、尼泊金甲酯0.1％、双丙甘醇5％，去离子水77.6％；

C组分：苹果籽提取物2.0％，蘑菇葡聚糖1.0％，苯氧乙醇0.3％；

D组分：上述实施例2的护肤基质10％。

实施例4

一种包含护肤基质的眼部精华素的制备方法：

1)将实施例3中的A组分加入油相锅，开启搅拌，转速为1000rpm，并升温至80℃，保温10min，得到油相混合液；

2)将实施例3中的B组分加入水相锅，开启搅拌，转速为600rpm，并升温至85℃，保温15min，得到水相混合液；

3)将水相混合液吸入乳化锅后，开启乳化锅搅拌，搅拌转速为60rpm，通过控制真空阀门缓慢将油相混合液吸入乳化锅，然后保持真空(真空度为-0.05Mpa)和搅拌速度不变，开启均质，均质的时间为5min，均质的转速为3000rpm；

4)均质完成后，开启降温水降温至40℃，加入实施例3中的C组分搅拌5min，搅拌转速60rpm，开启均质，均质的时间为1min，均质的转速为1500rpm；然后加入D组分，搅拌15min，转速为40rpm，出料，得到包含护肤基质的眼部精华素。

对比例1

对比例1的护肤基质，由以下按重量份数计的组分组成：10％的灵芝多糖，80％去离子水，10％的人参根提取物；其制备方法同实施例2中护肤基质的制备方法；

一种包含护肤基质的眼部精华素(即包含护肤基质的化妆品)，由以下按质量百分比计的组分组成：各组分以及含量同实施例3中包含基质的眼部精华素；其制备方法同实施例4中眼部精华素的制备方法。

一种包含护肤基质的眼部精华素试用效果试验：

受试人群：70名成年女性志愿者，年龄在45-55周岁之间；

试验方法：在眼周区(包括下眼睑黑眼圈区域和眼角鱼尾纹区域)使用实施例4制备的眼部精华素以及对比例1制备的眼部精华素(用量约为1/4黄豆大小)；15min后以及持续使用4周后，用FOITS方法(皮肤快速光学成像法)，测量肌肤纹理变化，以评估眼角鱼尾纹区皱纹和细纹的深度和长度减少程度，其测试结果如下表1所示。

表1含有海参多肽抗衰老基质的眼部精华的试用效果试验

从实验结果可以看出，一种含有海参多肽的抗衰老眼部精华(实验例4)，在减少平均表面皱纹及平均皱纹体积方面，15min的数据显示，实施例4和对比例1均有一定即时抗皱效果，两者效果差距不明显(尤其是表面皱纹减少量)。而4周以后，实施例4的长效抗皱效果显现，不论是表面皱纹还是皱纹体积，相比对比例1均有明显降低。

在成分方面，实施例4相比对比例1仅多了5％的海参多肽水解液，其余成分相同。这说明，海参多肽水解液具有一定的抗衰老效果，如长时间使用，抗皱效果显著。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，故凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰,均仍属于本发明技术方案的范围内。