本发明属于医药领域，具体而言，本发明涉及nsaid缓释纳米颗粒及其制备方法。
背景技术：
某些非甾体抗炎药作为药用已经100多年。非甾体抗炎药用于缓解类风湿性关节炎和骨关节炎的迹象和症状，缓解中轻度疼痛，退烧和治疗月经疼痛。它们是世界上使用最广泛的药物。然而，使用非甾体抗炎药会产生许多副作用，最主要的是胃肠道不适如消化不良，胃灼热、呕吐、胃与十二指肠出血，胃溃疡和胃炎。非甾体抗炎药引发的胃与十二指肠出血往往是无痛的，但是会引起大便出血和持续的缺铁性贫血。透皮给药系统可帮助避免药物直接损伤胃肠道，以及避免药物在胃肠道及肝脏中由于“首过”效应引起的药物失活。通过使用皮肤渗透促进剂的传统透皮给药剂型存在许多局限性。首先，药物穿透皮肤的速度很慢(以μg/cm2/h为计量单位)。其次，大量的皮肤渗透促进剂进入宿主体内可能会导致非常严重的副作用。
因此，有待进一步对非甾体抗炎药的新剂型进行开发研究，降低药物副作用以及辅材对患者的伤害。
技术实现要素：
本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出nsaid缓释纳米颗粒及其制备方法，该nsaid缓释纳米颗粒具有良好的生物相容性和显著的缓释效果。
根据本发明的一个方面，本发明提出了一种nsaid缓释纳米颗粒，包含：活性组分和载体，其中活性组分为nsaid；载体为plga纳米颗粒，活性组分装载在载体内。根据本发明实施例的nsaid缓释纳米颗粒注射液形式给药，其可以在第一天内出现爆发式释放，到有效血药浓度，之后便缓慢持续释放，在给药的第15-50天药物释放达到100％。因此，该nsaid缓释纳米颗粒具有起效快、持续时间长的优点。并且是目前市场上的任何nsaid剂型都无法达到的缓释效果。
根据本发明的具体实施例，通常药物被包封在聚合物材料内可以保护药物的活性成分免受环境降解，并且药物被包封还可以降低某些材料的令人不愉快的味道，药物的包封还具有减少所给药的总药物量和相关副作用。
根据本发明的具体实施例，nsaid基本都是短效药物，半衰期较短，没有能够在人体内长效作用的，更不会达到15天甚至是50天的长效作用。本发明的nsaid缓释纳米颗粒可以将nsaid短效药包封在纳米颗粒内，从而使得nsaid得到缓慢释放的效果，具体缓释时间可以达到15-50天，具体地根据实际需要可以控制缓释时间为一个月左右。因此，本发明的nsaid缓释纳米颗粒有效地将nsaid短效药物做成了长效缓释的效果，并且该效果是目前任何剂型的nsaid都无法到的。
根据本发明的具体实施例，nsaid缓释纳米颗粒以plga作为辅材。plga(聚(d，l-丙交酯-共-乙交酯))是丙交酯和乙交酯的聚合产物。
聚(d，l-丙交酯-共-乙交酯)(plga)是丙交酯和乙交酯的聚合产物。共聚的机理如下反应式所示：
乙交酯
丙交酯
n：乳酸单位数
m：乙醇酸的单位数
x：乳酸/乙醇酸基团数
plga可经历生物降解以形成乳酸和乙醇酸单体，其通过克雷伯斯循环从体内消除。乳酸的1-(+)形式在体内自然产生和代谢；乳酸盐是在所有生命形式的碳水化合物代谢中发现的中间体或最终产物。乳酸盐被氧化成丙酮酸盐，其被转化成葡萄糖或分解成二氧化碳和水。乙醇酸是氨基酸甘氨酸降解中的生理中间产物，并通过氧化羧化作用转化为二氧化碳。因此plga可被生物降解至正常的生理成分，而且降解发生所需的唯一条件似乎是水性环境的存在。由于plga(丙交酯/乙交酯基聚合物)的优异的生物相容性和生物再吸收性，因此以其作为nsaid纳米颗粒的辅材，可以显著提高nsaid生物相容性和药物的可吸收性。
根据本发明的实施例，发明人以plga作为辅材，将nsaid封装在plga纳米颗粒内，得到了nsaid纳米颗粒。发明人意外地发现，该nsaid纳米颗粒具有良好的缓释效果。进而消除多次给药或者注射相关的不适的可能性，提高患者用药依从性。
所述nsaid为吲哚美辛、酮洛芬、氟比洛芬、苯氧基布洛芬、萘普生、萘丁美酮、吡罗昔康、保泰松、双氯灭痛、芬洛芬、酮基布洛芬、酮咯酸、四氯芬那酸、舒林酸、托美丁中的至少一种，通过将上述几种非甾体类抗炎药与plga纳米颗粒结合可以得到具有良好的生物相容性和缓释效果的nsaid缓释纳米颗粒。
优选地，所述nsaid为吲哚美辛、酮洛芬、氟比洛芬、苯氧基布洛芬中的至少一种。通过将上述几种非甾体类抗炎药与plga纳米颗粒结合可以得到具有良好的生物相容性和缓释效果的nsaid缓释纳米颗粒。
根据本发明的具体示例，将吲哚美辛与plga纳米颗粒结合得到的吲哚美辛缓释纳米颗粒在第一天呈20-30％的爆发式释放，并且在后续的表现出缓慢释放的效果，最终在第23天基本释放完全。根据本发明的具体示例，将酮洛芬与plga纳米颗粒结合得到的酮洛芬缓释纳米颗粒在第一天呈45-55％的爆发式释放，并且在后续表现出缓慢释放的效果，最终在第23天基本释放完全。
根据本发明具体实施例nsaid缓释纳米颗粒，nsaid缓释纳米颗粒具体可以以注射液形式给药。并且发明人发现，通过直接静脉注射给药，nsaid缓释纳米颗粒的缓释效果最佳。发明人分析如果口服给药，nsaid缓释纳米颗粒可能会受到胃肠道酸碱环境影响，纳米颗粒可能会被直接破坏，进而无法达到包封和长效缓释的效果。
根据本发明具体实施例nsaid缓释纳米颗粒，通过以注射液形式给药，其缓释时间可以达到15-50天。该缓释效果是目前其他剂型的nsaid缓释药物无法达到的。
根据本发明的具体实施例，nsaid缓释纳米颗粒中，若nsaid为吲哚美辛，其吲哚美辛的装载量可以达到为3-25重量％。若nsaid为酮洛芬，其酮洛芬的装载量为2-25重量％。由此可以满足不同用药时间需要的载药量。
根据本发明的具体示例，吲哚美辛的装载量优选为3-15重量％，酮洛芬的装载量优选为2-15重量％。发明人发现，若装载量过小，缓慢释放时的无法达到有效的血药浓度，进而影响药效；若装载量过大，plga纳米颗粒的包封效果会受到影响，进而使得包封不完全或者包封强度低，进而可能给出现爆发式大释放，而无法达到长时间的缓释效果。由此，通过控制吲哚美辛的装载量为3-15重量％，酮洛芬的装载量为2-15重量％，可以有效维持nsaid缓释纳米颗粒的缓释时间为15-50天。
根据本发明的第二方面，本发明还提出了一种制备前面所述nsaid缓释纳米颗粒的方法。根据本发明具体实施例的制备nsaid缓释纳米颗粒的方法包括：
(1)将nsaid溶解于plga的乙酸乙酯溶液中，以便得到混合物；
(2)向所述混合物中加入pva水溶液并进行搅拌，以便得到装载有所述nsaid的o/w乳液；
(3)将所述装载有nsaid的o/w乳液进行超声处理；
(4)向经过所述超声处理的o/w乳液中加入pva水溶液，以便对所述o/w乳液进行稀释；
(5)对所述o/w乳液进行快速蒸发处理，以便除去所述o/w乳液中的溶剂；
(6)对除去所述溶剂的o/w乳液进行离心处理，以便分离得到颗粒；
(7)将所述颗粒进行冷冻干燥处理，以便获得所述nsaid缓释纳米颗粒。
根据本发明的具体实施例，通过上述方法采用单一乳液技术将nsaid包封到plga纳米颗粒中，得到的nsaid缓释纳米颗粒具有良好的生物相容性，因此，可以通过静脉注射，对身体无影响，另外，nsaid缓释纳米颗粒还具有良好的缓释效果，药物可以达到23-24天长效缓释效果，是目前其他任何nsaid缓释药物无法达到的长效缓释效果。
根据本发明的具体实施例，通过上述方法制备得到的nsaid缓释纳米颗粒，若nsaid为吲哚美辛，其吲哚美辛的装载量可以达到为3-25重量％。若nsaid为酮洛芬，其酮洛芬的装载量为2-25重量％。由此可以满足不同用药时间需要的载药量。
根据本发明的具体示例，将吲哚美辛与plga纳米颗粒结合得到的吲哚美辛缓释纳米颗粒在第一天呈20-30％的爆发式释放，并且在后续的表现出缓慢释放的效果，最终在第23天基本释放完全。根据本发明的具体示例，将酮洛芬与plga纳米颗粒结合得到的酮洛芬缓释纳米颗粒在第一天呈45-55％的爆发式释放，并且在后续表现出缓慢释放的效果，最终在第23天基本释放完全。
根据本发明的具体实施例，在步骤(1)中，所述nsaid与所述plga的质量比为1：1-1：10。由此可以进一步提高nsaid的包封效果，使得包封率和释放达到平衡。发明人发现，lga用量少，会造成包封率不够。plga用量过多，则造成药物释放不完全。根据本发明的具体示例，将nsaid与plga的质量比为控制为1：2-1：7。可以使得nsaid缓释纳米颗粒达到15-50天的缓释长效效果。
根据本发明的具体实施例，步骤(1)中，所述plga的乙酸乙酯溶液的浓度为30-200发明人发现，通过采用乙酸乙酯作为plga的溶剂并配置成浓度为0-200mg/ml，可以进一步提高plga纳米颗粒的效率。
根据本发明的具体实施例，步骤(2)中，所述pva加入量与所述plga质量比为1:1到1:10。由此可以使得plga可以顺利制备成纳米颗粒，并同时将nsaid包封在纳米颗粒内。
根据本发明的具体实施例，步骤(2)中，所述pva水溶液的浓度为2-20mg/ml。发明人发现，通过选择浓度为2-20mg/ml的pva水溶液，可以进一步提高plga的乳化效果，并得到纳米级别的颗粒。
根据本发明的具体实施例，步骤(4)中，所述pva水溶液的浓度为1-15mg/ml。由此通过采用浓度为1-15mg/ml的pva水溶液对o/w乳液进行稀释，可以有效达到稀释的效果，提高纳米颗粒的均一化和分散度。
根据本发明的具体实施例，步骤(3)中，所述超声处理是冰浴中进行的。由此可以有效防止超声振动使温度升高对纳米颗粒造成影响。
根据本发明的第三方面，本发明还提出了一种制备前面所述nsaid缓释纳米颗粒的方法，根据本发明具体实施例的制备nsaid缓释纳米颗粒的方法包括：将40mg的nsaid溶解于2ml浓度为100mg/ml的plga乙酸乙酯溶液中；加入4ml浓度为10mg/ml的pva水溶液，以便得到装载有所述nsaid的o/w乳液；将所述o/w乳液在冰上超声处理；加入90ml浓度为3mg/ml的pva水溶液对所述o/w乳液进行稀释；通过蒸发快速除去所述o/w乳液中的溶剂；通过离心处理半小时分离得到颗粒；并在相同的离心速度和处理时间下用水洗涤三次；并通过冷冻干燥收集得到所述nsaid缓释纳米颗粒。
由此，通过上述方法可以有效地制备得到具有良好缓释效果的nsaid缓释纳米颗粒，其中当nsaid为吲哚美辛和酮洛芬时。其中吲哚美辛的装载量可以达到为3-25重量％，优选，3-15重量％，酮洛芬的装载量为2-25重量％，2-15重量％。nsaid缓释纳米颗粒注射液形式给药，其可以在第一天内出现爆发式释放，到有效血药浓度，之后便缓慢持续释放，在给药的第15-50天药物释放达到100％。因此，该nsaid缓释纳米颗粒具有起效快、持续时间长的优点。并且是目前任何剂型的nsaid都无法到的缓释效果。
附图说明
图1是装载吲哚美辛的plga纳米颗粒的sem图。
图2是装载吲哚美辛的plga纳米颗粒的粒径分布。
图3是装载酮洛芬的plga纳米颗粒的sem图。
图4是装载酮洛芬的plga纳米颗粒的粒径分布。
图5是装载吲哚美辛的plga纳米颗粒的dsc图。
图6是装载酮洛芬的plga纳米颗粒的dsc图。
图7为在37℃下，在pbs缓冲液(ph＝7.4)中从plga缓释纳米颗粒释放的吲哚美辛和酮洛芬的量。
图8为在37℃下，在pbs缓冲液(ph＝7.4)中从plga缓释纳米颗粒释放的吲哚美辛和酮洛芬的百分比。
图9为吲哚美辛和酮洛芬百分比(％)从plga纳米颗粒释放的模型拟合。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
实施例1制备nsaid缓释纳米颗粒(吲哚美辛)
1材料和设备
1.1聚合物，蛋白质和一般材料
1.2溶剂
1.3设备
2具体制备步骤：
通过单一乳液技术制备负载nsaid(吲哚美辛)的plga纳米颗粒。将40mgnsaid溶解于2mlplga(rg504)的乙酸乙酯(100mg/ml)溶液中。然后加入4mlpva水溶液(1％w/v)，将所得的o/w乳液在冰上超声处理。用90mlpva溶液(0.3％w/v)稀释乳剂，并通过旋转蒸发快速除去溶剂。最后，通过在10,000g(beckman，modelj2-21离心机)离心半小时来分离颗粒，并在相同的离心速度和处理时间下用水洗涤三次。通过冷冻干燥收集干燥颗粒。
旋转蒸发：
旋转蒸发器由真空系统、旋转蒸发烧瓶、和具有冷凝物收集瓶的冷凝器组成。因为降低压力降低了溶剂的沸点，这允许在不过度加热的情况下除去溶剂，所以该系统起作用。洗涤后的颗粒用蒸发烧瓶重新悬浮于去离子水中。将烧瓶置于蒸发器上后，使用真空泵(75mmhg)在40℃下蒸发溶剂。、
冷冻干燥工艺：
冷冻干燥是将液体冷冻然后通过升华脱水的技术。这种处理提供了样品形式的完全保留并且不产生化学损伤。将冷冻干燥瓶(virtis，usa)中的样品溶液或悬浮液在液氮中冷冻。然后将冷冻的样品连接到发生冷冻干燥过程的真空室(virtis，usa)，48小时后收集干粉。真空设定小于100mtone。
通过将超声处理时间增加至10分钟并将功率增加至4瓦以保持其他参数相同来制备负载蛋白质(hsa，ova)的plga纳米颗粒。
实施例2制备nsaid缓释纳米颗粒(酮洛芬)
具体制备方法同实施例1，不同在于将吲哚美辛替换为酮洛芬。
实施例3表征一般评价方法
1、纳米颗粒的表征
激光衍射分析：使用malvernmastersizer2000测定粒径，连接hydroμp样品分散单元。5-10mg微粒被分散在1ml去离子水中并在加入样品之前超声处理5分钟。将样品加入到mastersizer测量池中，并且通过malvernmastersizer2000软件控制测量过程。粒径被作为粒径分布(按体积)作图，并计算跨度值。跨度是体积分布相对于中值直径的宽度的度量，并且计算为(d90％-d10％)/d50％。d90％，d50％和d10％分别是在累积颗粒的90％，50％和10％体积分布下测定的颗粒直径。一式三份测量样品。
光散射分析
粒径也通过malvernzetasizernanozs测定。将纳米颗粒分散在去离子水(1mg/ml)中，并在测量前超声处理5分钟。然后将样品转移到一次性聚苯乙烯试管中，将试管插入zetasizer细胞中。测量过程由malvernzetasizernanozs软件控制。粒径表示为z-平均直径，其是基于散射光强度的平均直径和多分散性，其是粒度分布的宽度。
2、形态
通过扫描电子显微镜(sem)测定颗粒形态。样品被连接到金属短柱上，通过等离子包金，在hitachis43000扫描电子显微镜下观察。
3、热性能
每种非晶物质或复合材料可以以玻璃化转变温度(tg)为特征，其是可影响物理稳定性的关键物理性质。当聚合物冷却至低于该温度时，其变得硬且脆，如玻璃；当其在tg以上使用时，其变得柔软和柔韧。dsc的重要应用是确定药物物质与制剂中使用的聚合物之间可能的相互作用。通过监测在升高的温度下热容量的变化，检测药物是否物理分散在聚合物中或在样品中保持结晶是可能的。
通过差示扫描量热法(dsc)测量聚合物和颗粒的热性质。使用具有冷却冷却系统(labplantrp-100)的mettlertoledodsc821e进行测量。使用氮气作为吹扫气体。在整个研究中使用顶部穿孔的铝盘，样品重量在5-10mg之间变化。dsc系统由mettlertoledostare软件(版本6.10)控制。样品通过dsc在25℃至200℃的范围内以10℃/分钟的加热速率表征。将玻璃化转变温度定义为转变的中点，并且将熔点报告为吸热过程的开始。
4、nsaid负载测定
在制备nsaid(吲哚美辛或酮洛芬)包封的plga纳米颗粒期间收集的上清液用于测定nsaid(吲哚美辛或酮洛芬)对plga颗粒的负载。使用uv分光光度计(uv-1700分光光度计，shimadzu，usa)在318nm(puebla等，2005)测定吲哚美辛和在260nm测定酮洛芬浓度(gabor等，1999)。
实施例4评价表面形貌和粒度分布
参照实施例3中形态和纳米颗粒的表征一般方法，分别对实施例1和2中制备得到的nsaid缓释纳米颗粒进行表征：
通过扫描电子显微镜(sem)分别测定实施例1和2中制备得到的nsaid缓释纳米颗粒颗粒形态。具体地，样品被连接到金属短柱上，通过等离子包金，在hitachis43000扫描电子显微镜下观察。结果分别见图1和图4。
负载有吲哚美辛的plga缓释纳米颗粒的sem图如图1所示，粒度分布如图2所示。负载有酮洛芬的plga缓释纳米颗粒的sem图如图3所示，粒度分布如图4所示。
从sem图片我们可以看到，负载吲哚美辛和酮洛芬的plga缓释纳米颗粒都是具有光滑表面的球形。
实施例5差示扫描量热法(dsc)
对实施例1制备得到的负载吲哚美辛的plga纳米颗粒进行热性能分析。并将其与(b)无药物plga纳米颗粒，(c)纯plga聚合物，(d)吲哚美辛和plga的物理混合物的热特性进行对比。结果如图5所示。玻璃化转变温度(tg)值列于表1中。
表1聚合物和吲哚美辛plga颗粒的玻璃化转变温度(tg)。
结论：负载吲哚美辛的plganps的tg为50.62℃，低于在54.39℃出现的无药物plga纳米颗粒的tg。在负载吲哚美辛的plga颗粒的dsc曲线中没有观察到药物熔解峰，表明药物分子分散在plga颗粒内。无药物plga纳米颗粒的tg为54.39℃低于纯plga聚合物的tg为56.71℃。这种减少可能是由制造过程引起的。当聚合物状态从硬态变为橡胶态时，确定玻璃化转变温度。它表明聚合物的分子链容易移动。制造过程和具有另一分子的分子分散将影响聚合物链的构象，并因此降低tg温度。
对实施例2制备得到的负载酮洛芬的plga纳米颗粒进行热性能分析。并将其与(b)无药物plga纳米颗粒，(c)酮洛芬和plga的物理混合物，(d)纯plga聚合物，的热特性进行对比。结果如图6所示。玻璃化转变温度(tg)值列于表2中。
表2plga和酮洛芬-plga颗粒的玻璃化转变温度(tg)
结论：加载酮洛芬的plganp的tg为47.93℃，低于在54.39℃观察到的不含药物的plga纳米颗粒的tg，并且在含酮洛芬的plga颗粒的dsc曲线中没有可观察到的药物熔融峰，表明药物分子分散在plga颗粒中。无药物plga纳米颗粒的tg温度低于纯plga聚合物。这种减少可能是由制造过程引起的，包括plga的溶解和溶剂的蒸发。plga和酮洛芬的物理混合物的dsc曲线在93.78℃具有另一个峰(图6)，表明酮洛芬的物理存在。酮洛芬的熔点为92-95℃。
实施例6plga颗粒的nsaid释放研究
将5mg负载吲哚美辛或酮洛芬的plga颗粒悬浮在20mlpbs缓冲液(ph＝7.4)的锥形瓶中。将烧瓶在37℃下在65rpm的水浴中振荡。在不同的时间间隔，将1.5ml的样品体积转移并在13,000rpm离心15分钟。为了保证下沉条件，选择载药颗粒的量，使得颗粒的吲哚美辛或酮洛芬含量低于吲哚美辛(3.46mg/ml，horiike和matsuzawa，1995)或酮洛芬(9.68mg)的溶解度的10％mg/ml，mollo1999)在pbs缓冲液(ph＝7.4)中。
取出1ml量的上清液，并通过uv光谱(吲哚美辛在318nm；酮洛芬在260nm；uv-1700分光光度计，shimadzu，usa)测量。向剩余的0.5ml样品中加入1ml新鲜pbs缓冲液。通过涡旋剧烈搅拌1.5ml悬浮液并在烧瓶中更换。一式三份测量样品。
1、负载吲哚美辛和酮洛芬的plga纳米颗粒
吲哚美辛和酮洛芬是两种非甾体抗炎药(nsaid)，分别具有357.79和254.28da的分子量和低水溶性。吲哚美辛和酮洛芬分别通过实施例1和2制备得到，物理性质示列于表3中。
表3负载吲哚美辛和酮洛芬的plga纳米颗粒的性质
(样品代表三次测定的平均值±标准偏差)
与不含药物的plga纳米颗粒相比，吲哚美辛和酮洛芬不显著影响颗粒的尺寸。在plga纳米颗粒中吲哚美辛和酮洛芬的负载量分别为6.52±0.06％和4.02±0.03％w/v。
酮洛芬的药物包封率(％)低于吲哚美辛。酮洛芬和吲哚美辛的ee％分别为40.2±0.3％和65.2±0.6％(p<0.05)，这可能与酮洛芬的较高的水溶性有关。酮洛芬在25℃下具有0.5mg/ml的溶解度，并且吲哚美辛几乎不溶于水。吲哚美辛没有药物泄漏到外部水性介质的问题，导致纳米颗粒中药物含量的改善。barichell及其合作者(1999)评估了乳剂技术在一系列药物方面相对于平均直径为160-170nm的plga(75:2510kda)纳米颗粒中的药物包封的相对优点和缺点。理论药物负载为3.3％w/w。
2、从plga纳米颗粒释放吲哚美辛和酮洛芬的研究
在吸收条件下，将负载吲哚美辛和酮洛芬的plga纳米颗粒分散在pbs缓冲液(ph＝7.4)中。药物释放量和百分比(％)释放曲线分别显示于图7和图8中。
图7为在37℃下，在pbs缓冲液(ph＝7.4)中从plganp释放的吲哚美辛和酮洛芬的量。
图8为在37℃下，在pbs缓冲液(ph＝7.4)中从plganp释放的吲哚美辛和酮洛芬的百分比。
从图7和图8，我们可以看到两种药物在第一天显示初始爆发释放，随后是持续释放。酮洛芬纳米颗粒在24小时后得到42.2％的爆发释放值，吲哚美辛在相同时间段内释放值为26.3％。大多数药物在25天内释放。
puebla及其同事(2005)指出，未溶解的药物在聚合物基质内的包封导致快速释放。在他们的工作中，通过溶剂蒸发将吲哚美辛包封在plga(rg503,50：50，mw＝34,000da)中，以获得用于类风湿性关节炎中关节内施用的可生物降解的吲哚美辛微球。在药物负载为7.29％w/w并且平均粒度为约5μm的情况下，制备的吲哚美辛微球在开始的24小时内显示出21.19±0.42％的初始爆发，随后是持续释放直至第16天，当大多数吲哚美辛已经释放。释放介质是ph＝7.4的pbs缓冲液(吸收条件)。
gabor和同事(1999)报道了来自plga微球的酮洛芬的双相释放曲线。当使用聚合物plgarg502(50:50，mw＝12,000da)制备微球体并且用3.9％w/w的装载量包封酮洛芬时，酮洛芬的释放在24小时结束时具有40％的第一次爆发，然后持续释放，在第19天结束时，释放大部分酮洛芬。这些微球的中值粒径为43.7μm。当使用plgarg503(50:50，mw＝34,000da)时，在类似的酮洛芬负载量和微球尺寸下，在24小时结束时首次释放51％的酮洛芬，然后持续和完全释放直到测量结束(第19天)。第一次爆发释放随药物含量和增加的固有粘度(gabor等人，1999)而增加。特性粘度随聚合物分子量增加。
将吲哚美辛和酮洛芬在23天内的释放比率拟合到方程式1.7(图9)。
方程1.7假设有两个释放过程。第一个释放过程是表面释放；第二个释放过程是降解控制的。
与爆裂释放和降解控制释放相关的参数在表4中进行估计和总结。
表4载有吲哚美辛和酮洛芬的plga纳米颗粒的释放参数
(样品代表三次测定的平均值±标准偏差)
在这个模型中的fb和kb表示在爆发期释放的药物的分数和释放常数。在本研究中，当加载酮洛芬时，估计的fb和kb分别为0.493±0.036和2.33±0.42，均高于从负载吲哚美辛的纳米颗粒估计的值(表4)。从方程1.5，我们可以看到包封的药物的溶解度对爆裂释放常数kb具有影响。较高的药物溶解度导致较高的kb。这可能有助于解释酮洛芬呈现更高爆发释放的原因。
kb＝dacs/wlfbh1方程1.5
d和cs分别是药物的扩散系数和溶解度。a是可用于溶解的药物的表面。wl是压坯中药物的总量，h1是表观水分扩散边界层厚度。
在先前由西格尔和同事(2006)报道的工作，具有不同的水溶解度的不同的药物被分别装入plga(50:5063kda)的粒料。载药量为20％，并研究了药物溶解度的对药物释放的影响。为了制造丸粒，聚合物和药物溶解在丙酮中并在真空下蒸发该混合物。体外药物释放研究在37℃下在pbs缓冲液(ph＝7.4)中进行。氟哌啶醇在水中的溶解度为0.13mg/ml。当将其装载到plga丸剂中时，在第一孵育天时释放不超过1％的药物。当装载布洛芬时，在水中的溶解度为0.47mg/ml，在第一天有10％的药物从plga丸剂释放(siegel等人，2006)。
图9为吲哚美辛和酮洛芬百分比(％)从plga纳米颗粒释放的模型拟合。
图9表明，来自plga纳米颗粒的吲哚美辛和酮洛芬的释放曲线可以适合模型(方程1.7)，具有初始快速释放阶段，然后是较慢的聚合物降解控释。
结论：
通过单一乳液技术将吲哚美辛和酮洛芬包封到plga纳米颗粒中。酮洛芬的药物包封率低于吲哚美辛。酮洛芬和吲哚美辛的ee％分别为40.2±0.3％和65.2±0.6％。比较了来自plga纳米颗粒的吲哚美辛和酮洛芬的释放曲线。两种药物在23天完全释放，酮洛芬表现出更高的爆发释放，kb值为2.33，而吲哚美辛的kb值为1.76。从方程式1.6，我们可以看到包封的药物的溶解度对爆裂释放常数kb具有影响。较高的药物溶解度导致较高的kb值。这可能有助于解释为什么酮洛芬具有比吲哚美辛更高的爆发释放速率常数和释放比率。
χ是药物释放百分比对应的时间t,k是速率常数，tmax是达到最大释放速率的时间。k和tmax的值是和药物的装量和聚合物的组分是相关的
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。