本申请是分案申请，其母案是发明名称为“对苯二酚法尼基类化合物的应用”的发明专利申请，其申请号为201510578951.1，申请日为2015年09月11日，其优选权为201510217149.x，优先权日2015年04月30日；201510294277.4，优先权日2015月06月02日。本发明涉及化合物应用领域，具体涉及对苯二酚法尼基类化合物的应用。
背景技术：
：随着社会的发展，人们生活水平的不断提高和饮食结构的调整，饮食呈富余化趋势，导致代谢类疾病的发病率不断提高，其中以高血糖以及高血脂最引人关注，目前全世界糖尿病人数为2亿人左右，并以惊人的速度每年递增。中国糖尿病人数为4千万，占世界糖尿病人群总数的1/5。另外，因血脂升高导致的动脉粥样硬化、冠心病等心血管疾病发病率逐年升高，并有年轻化趋势。降血糖、降血脂药物已经成为药物研究的重点之一。近年来，羟甲戊二酰辅酶a还原酶抑制剂类药物开发成功，是降血脂药物研究的突破性进展。这类药物可以竞争性的抑制胆固醇合成过程中的限速酶hmg-coa还原酶，从而降低体内内源性合成的胆固醇水平，是目前治疗高胆固醇血症中疗效良好的药物。α-葡萄糖苷酶是一组位于小肠绒毛膜刷状缘上的水解酶，包括α-淀粉酶、麦芽糖酶、异麦芽糖酶、蔗糖酶、乳糖酶、海藻糖酶等。主要参与人体内碳水化合物的消化和吸收。α-葡萄糖苷酶抑制剂通过竞争性或非竞争性抑制小肠刷状缘上的α-葡萄糖苷酶，延迟寡糖或多糖转化成可吸收单糖的过程，从而有效抑制糖尿病人餐后血糖升高幅度，使血糖平稳且缓慢地维持在一定的水平，是治疗单纯饮食控制无效的2型糖尿病患者的一线降糖药物。目前市场上使用的α-葡萄糖苷酶抑制剂类药物主要为阿卡波糖、伏格列波糖、米格列醇等，但是值得注意的是，目前使用的这些抑制剂都带来了不同程度上的毒副作用，如胃肠道副作用、荨麻疹、肝功能障碍、心血管系统风险等。因此，发掘新的更安全强效的可用于预防或治疗高血糖以及高血脂的药物是必要和紧迫的。糖尿病患者中ii型糖尿病占了大多数。胰岛素抵抗是ii型糖尿病发病的关键因素，蛋白酪氨酸磷酯酶1b(ptp1b)在胰岛素抵抗的形成中起到关键的作用。研究证实ptp1b作为胰岛素信号通路的负调节因子，可以将被激活的胰岛素受体或其底物的酪氨酸残基去磷酸化，从而终止胰岛素信号通路，引起机体对胰岛素的抵抗，形成机体胰岛素相对缺乏进而发展为ii型糖尿病。在动物研究中显示，ptp1b基因敲除小鼠在糖耐量和胰岛素耐量试验中表现出对胰岛素敏感度的显著提高。因而ptp1b抑制剂可作为一种新型的ii型糖尿病治疗药物而发挥重要的作用。非酒精性脂肪肝是一种无过量饮酒史的肝实质细胞出现脂变为特征的临床病理综合征，近年来，发病率不断上升，肥胖、糖尿病人脂肪肝的患病率更高。不少学者认为这是隐源性肝硬化或非活动性小结节性肝硬化的前期病变，因此已成为全球普遍关注的医学问题和社会问题。其治疗基本原则是及早治疗，防止并发症。目前医学上并无治疗非酒精性脂肪肝的有效手段，药物治疗尚停留在探索阶段，如胰岛素增敏剂、抗氧化剂等，但这些药物的效果差强人意，因此，研究安全有效的治疗非酒精性脂肪肝的药物是当前一项诱人且有挑战性的任务。肿瘤目前是严重危害的人类健康的疾病之一。肿瘤起因于生理失控的细胞增殖影响了人体的正常生理条件，从而产生了严重的病理反应，经常导致死亡。在目前众多的治疗方法中，化疗药物可以随血液循环到达全身各部，故而化学疗法(包括免疫疗法)在原发癌、继发转移癌和白血病的治疗中发挥着不可代替的作用。由于传统化疗药物的毒性、副作用和耐药性的不断出现，使得抗肿瘤化疗疗效降低或疗效失效，因此，寻找新型抗肿瘤药物，已经迫在眉睫。核受体(nuclearreceptor)是一类分布于胞浆或细胞核内的细胞内受体,本质上都是受配体调控的转录因子,均在核内启动信号传导并影响基因转录。根据结构与功能不同,可以将核受体分为两类:1类固醇激素受体；2非类固醇激素受体(甲状腺素受体)。此类受体位于核内,多以同源或异源二聚体的形式与dna或其它蛋白质结合,配体入核与受体结合后,激活受体调节基因转录。视黄醇类受体(retinoidxreceptor,rxr)属于非类固醇受体类，rxr分为α,β和γ三种亚型,其中以rxrα最为重要,广泛分布在生物体肝脏、肾脏、脾脏、胎盘和表皮细胞中。rxr能和非类固醇激素核受体超家族中的许多成员形成异源二聚体，在调控大量核激素信号途径中扮演着重要的角色,参与代谢、生长、发育、分化、死亡和免疫等几乎所有的生理过程的调节,其异常与人体的许多疾病如癌症、心血管疾病、糖尿病和痴呆症密切相关。由于rxr对信号传导通路的调控作用可被特定的rxr配体调节,又由于选择性作用rxr信号传导通路的配体化合物,在降低由于与其它受体相互作用引起的毒副作用方面具有明显的优势,因此rxr是筛选抗肿瘤药物的一个理想的分子靶点。技术实现要素：本发明提供了一种对苯二酚法尼基类化合物及其药用盐作为α-葡萄糖苷酶或hmg-coa还原酶抑制剂、或制备治疗和/或预防ii型糖尿病或高血脂症的药物，或制备具有降血糖及降血脂作用的食品或功能保健品的应用，通过本发明的对苯二酚法尼基类化合物及其药用盐制备的抑制剂、药物、食品或保健品无毒副作用，治疗效果显著。为此，本发明的第一方面，提供对苯二酚法尼基类化合物及其药用盐在如下(1)至(14)任一项中的应用：(1)作为α-葡萄糖苷酶抑制剂；(2)制备治疗和/或预防ii型糖尿病的药物；(3)制备抑制α-葡萄糖苷酶的药物；(4)作为hmg-coa还原酶抑制剂；(5)制备治疗和/或预防高血脂症的药物；(6)制备抑制hmg-coa还原酶的药物；(7)制备具有降血糖及降血脂作用的药物或功能保健品；(8)制备具有治疗或预防非酒精性脂肪肝的药物或功能保健品；(9)制备具有二型糖尿病并非酒精性脂肪肝的药物或功能性保健品；(10)制备预防和/或治疗癌症或抑制肿瘤细胞增殖的药物或功能性保健品；(11)作为rxrα受体结合抑制剂；(12)制备作为rxrα受体结合抑制剂的药物；(13)作为蛋白酪氨酸磷酸酶1b抑制剂；(14)制备作为蛋白酪氨酸磷酸酶1b抑制剂的药物。所述对苯二酚法尼基类化合物为如下式1至式17中任一所示的化合物：本发明的第二方面，提供一种组合物在如下(1)至(14)任一项中的应用，所述组合物包含至少一种以上所述式1至式17中所示的化合物或其药用盐：(1)作为α-葡萄糖苷酶抑制剂；(2)制备治疗和/或预防ii型糖尿病的药物；(3)制备抑制α-葡萄糖苷酶的药物；(4)作为hmg-coa还原酶抑制剂；(5)制备治疗和/或预防高血脂症的药物；(6)制备抑制hmg-coa还原酶的药物；(7)制备具有降血糖及降血脂作用的药物或功能保健品；(8)制备具有治疗或预防非酒精性脂肪肝的药物或功能保健品；(9)制备具有二型糖尿病并非酒精性脂肪肝的药物或功能性保健品；(10)制备预防和/或治疗癌症或抑制肿瘤细胞增殖的药物或功能性保健品；(11)作为rxrα受体结合抑制剂；(12)制备作为rxrα受体结合抑制剂的药物；(13)作为蛋白酪氨酸磷酸酶1b抑制剂；(14)制备作为蛋白酪氨酸磷酸酶1b抑制剂的药物。本发明还提供了一种具有降血糖作用的组合物，所述组合物包括权利要求2中式3中所示的化合物与二甲双胍。在上述技术方案中，所述抑制剂或药物为注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、丸剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂或喷剂。在上述技术方案中，所述药物或功能保健品为口服液、茶饮、含片、胶囊、饮品或泡腾片。在上述技术方案中，所述药物或功能保健品用于日常保健、预防糖尿病、高血脂症和非酒精性脂肪肝，或在糖尿病、高血脂症和非酒精性脂肪肝的治疗过程中/后起辅助作用。在上述技术方案中，所述抑制剂或药物包括一种或以上药学上可接受的辅料。在上述技术方案中，所述辅料包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂和缓释剂。在上述技术方案中，所述药物通过口服、胃肠内给药、注射、喷射、物理或化学介导等方法给药，或是被其他物质混合或包裹后给药。在上述技术方案中，所述癌症为肝癌、肺癌、直肠癌、宫颈癌、白血病、胃癌、前列腺癌或乳腺癌；所述肿瘤细胞为肝癌细胞、肺癌细胞、直肠癌细胞、宫颈癌细胞、白血病细胞、胃癌细胞、前列腺癌细胞或乳腺癌细胞；进一步地，为人肝癌细胞、人前列腺癌细胞、人肺癌细胞、人结直肠癌细胞、人宫颈癌细胞、人白血病细胞、人胃癌细胞或人乳腺癌细胞。所述人肝癌细胞具体为hepg2细胞；所述人前列腺癌细胞具体为pc-3细胞；所述人肺癌细胞具体为a549细胞；所述人结直肠癌细胞具体为hct-15细胞；所述人宫颈癌细胞具体为hela细胞；所述人白血病细胞具体为k-562细胞；所述人胃癌细胞具体为sgc-7901细胞；所述人乳腺癌细胞具体为mcf7细胞。本发明提供的对苯二酚法尼基类化合物及其药用盐可作为α-葡萄糖苷酶或hmg-coa还原酶抑制剂、或制备治疗和/或预防ii型糖尿病或高血脂症的药物，或制备具有降血糖及降血脂作用的药物或功能保健品，或制备预防和/或治疗癌症或抑制肿瘤细胞增殖的药物或功能保健品，或制备具有治疗或预防非酒精性脂肪肝的药物或功能保健品，或作为rxrα受体结合抑制剂，或制备作为rxrα受体结合抑制剂的药物，或作为蛋白酪氨酸磷酸酶1b抑制剂，或制备作为蛋白酪氨酸磷酸酶1b抑制剂的药物的应用；实验证明，本发明提供的对苯二酚法尼基类化合物可有效抑制α-葡萄糖苷酶、hmg-coa还原酶及蛋白酪氨酸磷酸酶1b，并且在降低血糖和血脂及非酒精性脂肪肝的治疗和预防方面也有显著效果，本发明的对苯二酚法尼基类化合物还可作为rxrα受体结合抑制剂，对预防和/或治疗癌症或抑制肿瘤细胞增殖也有明显效果。附图说明图1a为实施例9提供的正常对照组小鼠肝脏组织切片显微照片；图1b为模型对照组kkay小鼠肝脏组织切片显微照片；图1c为化合物3(10mg/kg)给药组kkay小鼠肝脏组织切片显微照片；图1d为为化合物3(20mg/kg)给药组kkay小鼠肝脏组织切片显微照片；图1e为化合物4(10mg/kg)给药组kkay小鼠肝脏组织切片显微照片；图1f为化合物4(20mg/kg)给药组kkay小鼠肝脏组织切片显微照片；图2a为实施例10提供的正常对照组wister大鼠肝组织切片显微照片(he:20×)；图2b为模型组wister大鼠肝组织切片显微照片；图2c为化合物3给药(10mg/kg)wister大鼠肝组织切片显微照片；图2d为化合物3给药(20mg/kg)wister大鼠肝组织切片显微照片；图2e为化合物4给药(10mg/kg)wister大鼠肝组织切片显微照片；图2f为化合物4给药(20mg/kg)wister大鼠肝组织切片显微照片。具体实施方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。灵芝子实体购自北京同仁堂药店。α-葡萄糖苷酶：购买自sigma公司(货号为g5003)；hmg-coa：购买自sigma公司(货号为24895729)；nadph:购买自sigma公司(货号为10107824001)4-硝基苯-α-d-吡喃葡萄糖苷：购买自百灵威科技有限公司(货号为270305)；葡萄糖测定试剂盒(货号为e1010)：购买自普利莱基因技术有限公司；链脲霉素：购买自百灵威科技有限公司(货号为m02540)。wistar雄性大鼠(spf级)：北京维通利华实验动物技术有限公司。人肝癌细胞hepg2购自atcc，产品目录号为hb-8065。人前列腺癌细胞pc3购自atcc，产品目录号为crl-1435。人肺癌细胞a549购自atcc，产品目录号为ccl-185。人结直肠癌细胞hct-15购自atcc，产品目录号为ccl-225。人宫颈癌细胞hela购自atcc，产品目录号为ccl-2。人白血病k562细胞购自中山医科大学实验动物中心。人胃癌细胞sgc-7901购自atcc，产品目录号为sgc-7901。人乳腺癌细胞mcf-7购自atcc，产品目录号为hcc1428。实施例1、式1-17所示化合物的制备(1)制备灵芝的提取物将灵芝子实体剪碎，称重5000克。用15l体积百分含量95％乙醇的水溶液回流提取3次，每次1小时。合并提取液，减压浓缩干燥得到170克提取物。进一步将提取物用蒸馏水600ml溶解，用等体积的正己烷萃取三次，弃去有机相。再用等体积乙酸乙酯萃取水相三次，弃去水相，合并乙酸乙酯萃取液。用旋转蒸发仪(re-52aa,购自上海亚荣生化仪器厂)蒸干乙酸乙酯获得浸膏54g，记作lz-e。(2)化合物的制备将步骤(1)制备的lz-e通过硅胶柱色谱分离，以正己烷:乙酸乙酯体系(正己烷:乙酸乙酯的体积比为1:0，50:1，30:1，20:1，15:1，10:1，4:1，2:1)，二氯甲烷:甲醇体系(二氯甲烷:甲醇的体积比为1:0,100:1,50:1,30:1,10:1,5:1)依次进行梯度洗脱，每个梯度洗3个保留体积，每个体积500ml。根据薄层层析色谱行为分析,在正己烷:乙酸乙酯(体积比为1:0)体系得到馏分gl-e1；在正己烷:乙酸乙酯(体积比为50:1)中得到馏分gl-e2～gl-e6；在正己烷:乙酸乙酯(体积比为30:1)中得到馏分gl-e7,gl-e8；在正己烷:乙酸乙酯(体积比为20:1)中得到馏分gl-e9；在正己烷:乙酸乙酯(体积比为10:1)中得到馏分gl-e11,gl-e12,gl-e13；在正己烷:乙酸乙酯(体积比为4:1)中得到馏分gl-e14,gl-e15,gl-e16；在正己烷:乙酸乙酯(体积比为2:1)中得到馏分gl-e17；在二氯甲烷:甲醇(体积比为1:0)中得到馏分gl-e18；在二氯甲烷:甲醇(体积比为100:1)中得到馏分gl-e19；在二氯甲烷:甲醇(体积比为50:1)中得到馏分gl-e20；在二氯甲烷:甲醇(体积比为30:1)中得到馏分gl-e21；在二氯甲烷:甲醇(体积比为10:1,5:1,1:0)中得到馏分gl-e22。共得到22个馏分,将各馏分冷冻干燥。通过薄层色谱分析发现gl-e16中活性物质含量较高，因此对该馏分利用ods反相硅胶柱进一步分离。用体积百分含量为10％，20％，30％，40％，50％，70％，90％的甲醇水溶液依次进行洗脱,每个洗脱体系洗3个保留体积，每个保留体积为500ml。根据薄层层析色谱行为，照射254nm紫外灯判断不同馏分，在体积百分含量为10％的甲醇水溶液中得到馏分gl-e16-1；在体积百分含量为20％的甲醇水溶液系统中得到馏分gl-e16-2～gl-e16-4；在体积百分含量为30％的甲醇水溶液系统中得到馏分gl-e16-5～gl-e16-10；在体积百分含量为40％的甲醇水溶液系统中得到馏分11-14；在体积百分含量为50％的甲醇水溶液系统中得到馏分gl-e16-15～gl-e16-18；在体积百分含量为70％，90％的甲醇水溶液系统中得到馏分gl-e16-19，gl-e16-23；共得到23个子馏分，将各个馏分冷冻干燥。通过薄层色谱分析发现gl-e16-14中活性物质含量较高，因此对gl-e16-14馏分进一步进行hplc分离。以体积百分含量56％乙腈的酸水(此处的酸水为体积百分含量为0.01％三氟乙酸的水溶液)溶液为洗脱剂进行hplc制备，流速为2ml/min，收集24.1min的色谱峰，得到式1所示化合物；收集25.3min的色谱峰，进一步利用手性柱拆分，以体积百分含量52％乙腈的酸水溶液为洗脱剂进行hplc制备，收集34.1min，35.8min的色谱峰，分别得到式3，式4所示的化合物；收集30min,31.2min，31.5min的色谱峰，分别得到式5、式16、式17所示化合物。对gl1-e16-16以体积百分含量60％乙腈的酸水(此处的酸水为体积百分含量为0.01％三氟乙酸的水溶液)溶液为洗脱剂进行hplc制备，流速为2ml/min，收集16.1min的色谱峰，得到式6所示化合物；收集18.2min的色谱峰，得到式7所示化合物；收集29.1min，29.6min的色谱峰，分别得到式8、式12所示化合物。对gl-e16-17以体积百分含量57％乙腈酸水(此处的酸水为体积百分含量为0.01％三氟乙酸的水溶液)溶液为洗脱剂进行hplc制备，流速为2ml/min，分别收集23，24.1的色谱峰得到式13、式14所示化合物。对gl-e16-29以体积百分含量50％乙腈的酸水(此处的酸水为体积百分含量为0.01％三氟乙酸的水溶液)溶液为洗脱剂进行hplc制备，流速为2ml/min，收集9.4min的色谱峰，得到式15所示化合物。通过薄层色谱分析发现gl-e16-5中活性物质含量较高，因此对gl-e16-5馏分进一步进行hplc分离。以体积百分含量40％乙腈的酸水(此处的酸水为体积百分含量为0.01％三氟乙酸的水溶液)溶液为洗脱剂进行hplc制备，流速为2ml/min，收集18.2min的色谱峰，得到式2所示化合物；收集19.9min的色谱峰，得到式9所示化合物；收集20.5min,22min的色谱峰，分别得到式10，式11所示化合物。上述薄层色谱的条件如下：薄层板：青岛海洋薄层板公司。薄层条件展开体系：氯仿：甲醇＝20：1，2ml；温度25℃上述hplc色谱条件如下：以色谱纯的甲醇将样品配制为10mg/ml的溶液，上样量为15ul每次，色谱柱为kromasil10×250mmc18半制备柱，柱温为25℃，210nm波长进行检测。实施例2、式3和式4所示化合物的合成合成路线参见文献yajima,a.；urao,s.；katsuta,r.；nukada,t.eur.j.org.chem.2014,731-738。2，5-二(甲氧基甲氧基)苯甲醛(1)：向冷却至0℃的2，5-二羟基苯甲醛(400mg，2.90mmol)，碳酸钾(4.09g，29.0mmol)的丙酮溶液(60ml)中加入氯甲基甲醚(689ul，8.70mmol)，在室温状态下搅拌10小时。用水(60ml)稀释随后用乙酸乙酯(60ml)萃取三次，合并有机层用水与盐水萃取，硫酸钠干燥。真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，3：1)得到无色油状物2，5-二(甲氧基甲氧基)苯甲醛(1)(642mg，98％)。(e)-3-[2,5-二(甲氧基甲氧基)苯]丙烯乙酸酯(2)：向冷却至0℃的氢化钠(60％，19.2mg，400umol)的无水四氢呋喃溶液(3ml)中加入膦酰基乙酸三乙酯(82.4ul，400umol)。体系在室温状态下搅拌30分钟。随后向反应液中滴加2，5-二(甲氧基甲氧基)苯甲醛(1)(45.2mg，200umol)的四氢呋喃(2ml)溶液，0℃搅拌1小时。用饱和氯化铵溶液(5ml)稀释随后用乙醚(10ml)萃取三次，合并有机层用水与盐水萃取，硫酸钠干燥。真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，2：1)得到无色油状物(e)-3-[2,5-二(甲氧基甲氧基)苯]丙烯乙酸酯(2)(58.0mg，96％)。(e)-3-[2,5-二(甲氧基甲氧基)苯]丙-2-烯-1-醇(3)：向冷却至-78℃的(e)-3-[2,5-二(甲氧基甲氧基)苯]丙烯乙酸酯(2)(400mg，2.90mmol)的无水二氯甲烷溶液(2ml)中加入dibal-h(1,0m的正己烷溶液，588ul，588umol)。体系在0℃状态下搅拌1小时。随后加入饱和酒石酸钾钠水溶液(5ml)并继续搅拌1小时。体系用乙醚(20ml)萃取三次，合并有机层用水与盐水萃取，硫酸钠干燥。真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，6：1)得到无色油状物(e)-3-[2,5-二(甲氧基甲氧基)苯]丙-2-烯-1-醇(3)(642mg，98％)。(e)-2-{3'-[2”,5”-二(甲氧基甲氧基)苯]丙-2-烯硫代}-1，3-苯并噻唑(4)：向冷却至0℃的(e)-3-[2,5-二(甲氧基甲氧基)苯]丙-2-烯-1-醇(3)(1.50g，5.89mmol)，三苯基膦(1.59g，5.89mmol)，2-巯基苯并噻唑(1.01g，5.89mmol)的无水thf溶液(20ml)中加入偶氮二甲酸二乙酯(40％的甲苯溶液，2.32ml，5.89mmol)。体系在室温状态下搅拌10小时。用饱和碳酸氢钠水溶液(30ml)稀释随后用乙酸乙酯(60ml)萃取三次，合并有机层用水与盐水萃取，硫酸钠干燥。真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，20：1)得到黄色油状物(e)-2-{3'-[2”,5”-二(甲氧基甲氧基)苯]丙-2-烯硫代}-1，3-苯并噻唑(4)(2.12g，89％)。(1'r,2's)-2-{3'-[2”,5”-二(甲氧基甲氧基)苯]-2',3’-二羟基丙-2-烯硫代}-1，3-苯并噻唑(5)：向冷却至0℃的e)-2-{3'-[2”,5”-二(甲氧基甲氧基)苯]丙-2-烯硫代}-1，3-苯并噻唑(4)的叔丁醇/水溶液(1：1，40ml)中加入甲烷磺酰胺(35.2mg，370umol)，ad-mix-α(5.20g)。体系在室温状态下搅拌12小时，反应体系用饱和亚硫酸钠溶液(20ml)淬灭，搅拌30分钟，用乙酸乙酯(60ml)萃取三次，合并有机层用水与盐水萃取，硫酸钠干燥。真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，1：1)得到白色固体(1'r,2's)-2-{3'-[2”,5”-二(甲氧基甲氧基)苯]-2',3’-二羟基丙-2-烯硫代}-1，3-苯并噻唑(5)(1.38g，85％)。(1's,2'r)-5:向冷却至0℃的e)-2-{3'-[2”,5”-二(甲氧基甲氧基)苯]丙-2-烯硫代}-1，3-苯并噻唑(4)叔丁醇/水溶液(1：1，40ml)中加入甲烷磺酰胺(35.2mg，370umol)，ad-mix-β(5.20g)。体系在室温状态下搅拌12小时，反应体系用饱和亚硫酸钠溶液(20ml)淬灭，搅拌30分钟，用乙酸乙酯(60ml)萃取三次，合并有机层用水与盐水萃取，硫酸钠干燥。真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，1：1)得到白色固体(1's,2'r)-5(1.21g，82％)。(1'r,2's)-2-{3'-[2”,5”-二(甲氧基甲氧基)苯]-2',3’-二羟基丙-2-烯砜代}-1，3-苯并噻唑(6)：向冷却至-78℃的(1'r,2's)-2-{3'-[2”,5”-二(甲氧基甲氧基)苯]-2',3’-二羟基丙-2-烯硫代}-1，3-苯并噻唑(5)(500mg，1.14mmol)的二氯甲烷溶液(10ml)中加入3-氯过氧苯甲酸(70％，570mg，2.28mmol)。体系在-78℃状态下搅拌1小时。用饱和碳酸氢钠溶液(10ml)稀释随后用二氯甲烷(30ml)萃取三次，合并有机层用水与盐水萃取，硫酸钠干燥。真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，1：1)得到无色油状物(1'r,2's)-2-{3'-[2”,5”-二(甲氧基甲氧基)苯]-2',3’-二羟基丙-2-烯砜代}-1，3-苯并噻唑(6)(535mg，92％)。(1's,2'r)-6：向冷却至-78℃的(1's,2'r)-5(500mg，1.14mmol)的二氯甲烷溶液(10ml)中加入3-氯过氧苯甲酸(70％，570mg，2.28mmol)。体系在-78℃状态下搅拌1小时。用饱和碳酸氢钠溶液(10ml)稀释随后用二氯甲烷(30ml)萃取三次，合并有机层用水与盐水萃取，硫酸钠干燥。真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，1：1)得到无色油状物(1's,2'r)-6(510mg，88％)。r-1-[2',5'-二(甲氧基甲氧基)苯]丙-2-烯-醇(7)：向冷却至0℃的(1'r,2's)-6(100mg，213umol)的无水二氯甲烷溶液(10ml)中加入dbu(63.7ul，426umol)。体系在0℃状态下搅拌1小时，真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，4：1)得到无色油状物r-1-[2',5'-二(甲氧基甲氧基)苯]丙-2-烯-醇(7)(67.7mg，80％)。s-7：向冷却至0℃的(1's,2'r)-6(100mg，213umol)的无水二氯甲烷溶液(10ml)中加入dbu(63.7ul，426umol)。体系在0℃状态下搅拌1小时，真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，4：1)得到无色油状物s-7(70mg，83％)。(e)-6，10-二甲基-2-甲基烯十一-5，9-二烯醇(b):向香叶醇(4g，32.4mmol)的四氯化碳溶液(50ml)中加入三苯基膦(10.2g，38.9mmol)。体系在加热回流状态下搅拌1小时，随后冷却至0℃，加入20ml正己烷溶液，搅拌5min，过滤，滤液真空浓缩得到香叶醇氯代物。向冷却至-78℃的四甲基乙二胺(tmeda，19.5ml，130mmol)中滴加正丁基锂(2.68m的正己烷溶液，48.5ml，130mmol)，形成白色沉淀物，搅拌10分钟后，滴加2-甲基烯丙醇(6.82ml，81.0mmol)，无水乙醚(80ml)。体系在室温状态下搅拌22小时。当体系中出现暗橙色胶状物时，冷却至-78℃并加入10ml香叶醇氯代物的乙醚溶液。体系在室温状态下搅拌1小时。将温度降至0℃并用1nhcl(100ml)稀释随后用乙醚(200ml)萃取三次，合并有机层用水与盐水萃取，硫酸钠干燥。真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，10：1)得到无色油状物(e)-6，10-二甲基-2-甲基烯十一-5，9-二烯醇(b)(4.81mg，90％)。(e)-6，10-二甲基-2-甲基烯十一-5，9-二烯醛(c):向(e)-6，10-二甲基-2-甲基烯十一-5，9-二烯醇(b)(3.95g，90％)的正己烷溶液(10ml)中加入活化的二氧化锰(14.4g，162mmol)。体系在室温下搅拌6小时，过滤后真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，10：1)得到无色油状物(e)-6，10-二甲基-2-甲基烯十一-5，9-二烯醛(c)(5.01g，75％)。(e)-6，10-二甲基-2-甲基烯十一-5，9-二烯酸(d):向冷却至0℃的(e)-6，10-二甲基-2-甲基烯十一-5，9-二烯醛(c)(850mg，4.12mmol)，2-甲基-2-丁烯(4.90ml，41.2mmol)的叔丁醇(20ml)，水(10ml)混合溶液中中加入磷酸二氢钠(2.54g，20.9mmol)的水溶液(5ml)以及次氯酸钠(80％，1.14g，12.4mmol)。体系在室温状态下搅拌1小时。用盐水(30ml)稀释随后用二氯甲烷(30ml)萃取三次，合并有机层用水与盐水萃取，硫酸钠干燥。真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，10：1)得到无色油状物(e)-6，10-二甲基-2-甲基烯十一-5，9-二烯酸(d)(760mg，83％)。(1'r,5e)-1'-[2”,5”--二(甲氧基甲氧基)苯]丙-2-烯-1-基-6，10-二甲基-2-甲基烯十一-5，9-二烯酯(e)：向冷却至0℃的(e)-6，10-二甲基-2-甲基烯十一-5，9-二烯酸(d)(35.1mg，158umol)的甲苯溶液中加入二异丙胺(110ul，631umol)，2,4,6-三氯苯甲酰氯(100ul，631umol)，4-(二甲氨基)吡啶(154mg，1.26mmol)。随后加入r-7(40.1mg，124umol)的甲苯溶液，用2ml甲苯稀释。体系在室温状态下搅拌8小时。用苯(10ml).饱和碳酸氢钠水溶液(15ml)稀释随后用乙酸乙酯(30ml)萃取三次，合并有机层用水与盐水萃取，硫酸钠干燥。真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，10：1)得到无色油状物(1'r,5e)-1'-[2”,5”-二(甲氧基甲氧基)苯]丙-2-烯-1-基-6，10-二甲基-2-甲基烯十一-5，9-二烯酯(e)(67.0mg，92％)。1's-e：向冷却至0℃的(e)-6，10-二甲基-2-甲基烯十一-5，9-二烯酸(d)(35.1mg，158umol)的甲苯溶液中加入二异丙胺(110ul，631umol)，2,4,6-三氯苯甲酰氯(100ul，631umol)，4-(二甲氨基)吡啶(154mg，1.26mmol)。随后加入s-7(40.1mg，124umol)的甲苯溶液，用2ml甲苯稀释。体系在室温状态下搅拌8小时。用苯(10ml).饱和碳酸氢钠水溶液(15ml)稀释随后用乙酸乙酯(30ml)萃取三次，合并有机层用水与盐水萃取，硫酸钠干燥。真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，10：1)得到无色油状物1's-e(69.0mg，93％)。(1'r)-5-[2”,5”--二(甲氧基甲氧基)苯]-3-(4”,8”-二甲基十-3”，7”-二烯-1”-基)-2(5h)-呋喃酮(f)：将室温下的的1'r-e(15.1mg，32.9umol)，grubbs1代催化剂(1.4mg，1.6umol)的脱气二氯甲烷溶液(2ml)搅拌5小时，随后再次加入，grubbs1代催化剂(1.4mg，1.6umol)并搅拌3小时。真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，10：1)得到无色油状物(5r,3e”)-f(11.0mg，80％)。(1's)-f：将室温下的的1's-e(15.1mg，32.9umol)，grubbs1代催化剂(1.4mg，1.6umol)的脱气二氯甲烷溶液(2ml)搅拌5小时，随后再次加入，grubbs1代催化剂(1.4mg，1.6umol)并搅拌3小时。真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，10：1)得到无色油状物(1'r)-5-[2”,5”--二(甲氧基甲氧基)苯]-3-(4”,8”-二甲基十-3”，7”-二烯-1”-基)-2(5h)-呋喃酮(f)(12.0mg，83％)。lz-1(式3)：:将室温下的的1'r,-f(15.9mg，36.9umol)的乙醇溶液(1ml)中加入对甲基苯磺酸(12.7mg，73.9umol)，体系在室温状态下搅拌18小时。用盐水(2ml)稀释随后用二氯甲烷(5ml)萃取三次，合并有机层用水与盐水萃取，硫酸钠干燥。真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，3：1)得到黄色油状物lz-1(10.7mg，85％)。lz-2(式4)：:将室温下的的1's-f(15.9mg，36.9umol)的乙醇溶液(1ml)中加入对甲基苯磺酸(12.7mg，73.9umol)，体系在室温状态下搅拌18小时。用盐水(2ml)稀释随后用二氯甲烷(5ml)萃取三次，合并有机层用水与盐水萃取，硫酸钠干燥。真空浓缩后浸膏利用硅胶柱层析(正己烷/乙酸乙酯，3：1)得到黄色油状物lz-2(10.6mg，88％)。式16，17所示化合物的制备与上述方法相近，具体操作方法参见文献yajima,a.；urao,s.；katsuta,r.；nukada,t.eur.j.org.chem.2014,731-738实施例3、式1-17所示化合物的结构确认对制备得到的17个化合物分别进行核磁共振、红外、质谱检测，确定各化合物的结构。其中所使用的核磁共振仪为brukermercury-500和brukermercury-600兆赫(布鲁克光谱仪器公司)，红外色谱仪为nicoletis5ft-ir(美国尼高力仪器有限公司)，质谱仪为brukerapexiii7.0t和apexiift-icr(布鲁克光谱仪器公司)。经确认，这17个化合物均为已知化合物，具有共同的对苯二酚法尼基结构。各化合物的nmr的碳谱和氢谱确认数据如表1～8所示。化合物1：[(e)-2-(5-羟基苯并呋喃-2-基)-6,10-二甲基正十四烷-5,9-香叶酸](e)-2-(5-hydroxybenzofuran-2-yl)-6,10-dimethylundeca-5,9-dienoicacid化合物2：[(2z,5e)-2-(2-(2,5-二羟基苯基)-2-氧代亚乙基)-6,10-二甲基正十四烷-5,9-香叶酸](2z,5e)-2-(2-(2,5-dihydroxyphenyl)-2-oxoethylidene)-6,10-dimethylundeca-5,9-dienoicacid化合物3：[(r,e)-5-(2,5-二羟基苯基)-3-(4,8-二甲基正壬烷-3,7-二烯-1-基)呋喃-2(5h)-酮](r,e)-5-(2,5-dihydroxyphenyl)-3-(4,8-dimethylnona-3,7-dien-1-yl)furan-2(5h)-one化合物4：[(s,e)-5-(2,5-二羟基苯基)-3-(4,8-二甲基正壬烷-3,7-二烯-1-基)呋喃-2(5h)-酮](r,e)-5-(2,5-dihydroxyphenyl)-3-(4,8-dimethylnona-3,7-dien-1-yl)furan-2(5h)-one化合物4的nmr数据与化合物3相同，通过旋光值的不同将两个化合物区分。化合物5：[(e)-5-(2,5-二羟基苯基)-3-(4,8-二甲基正壬烷-3,7-二烯-1-基)-5-甲氧基呋喃-2(5h)-酮](e)-5-(2,5-dihydroxyphenyl)-3-(4,8-dimethylnona-3,7-dien-1-yl)-5-methoxyfuran-2(5h)-one化合物6：[(2z,5e)-2-(2-(2,5-二甲基苯及)亚乙基)-6,10-二甲基正十四烷-5,9-香叶酸](2z,5e)-2-(2-(2,5-dihydroxyphenyl)ethylidene)-6,10-dimethylundeca-5,9-dienoicacid化合物7：[(2z,5e,9e)-2-(2-(2,5-二甲基苯基)-2-氧代亚乙基)-11-羟基-6,10-二甲基正十四烷-5,9-香叶酸](2z,5e,9e)-2-(2-(2,5-dihydroxyphenyl)-2-oxoethylidene)-11-hydroxy-6,10-dimethylundeca-5,9-dienoicacid化合物8：[(e)-2-(2-(2,5-二羟基苯基)-2-氧代乙基)-6,10-二甲基正十四烷-5,9-香叶酸](e)-2-(2-(2,5-dihydroxyphenyl)-2-oxoethyl)-6,10-dimethylundeca-5,9-dienoicacid表1化合物1-8nmr1h谱数据(500mhz)表2化合物1-8nmr13c谱数据(125mhz)化合物9：[(2z,5e,9e)-(2r,3s,6r)-2,3-二羟基-2-甲基-6-((5r,10s,13r,14r,17r)-4,4,10,13,14-五甲基-3-氧代-2,3,4,5,6,10,12,13,14,15,16,17-十二氢-1h-环戊[a]菲-17-基)庚基2-(2-(2,5-二羟基苯基)-2-氧代亚乙基)-11-羟基-6,10-二甲基正十四烷-5,9-二烯酸乙酯](2z,5e,9e)-(2r,3s,6r)-2,3-dihydroxy-2-methyl-6-((5r,10s,13r,14r,17r)-4,4,10,13,14-pentamethyl-3-oxo-2,3,4,5,6,10,12,13,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)heptyl-2-(2-(2,5-dihydroxyphenyl)-2-oxoethylidene)-11-hydroxy-6,10-dimethylundeca-5,9-dienoate化合物10：[(2z,5e,9e)-(2r,3s,6r)-1,2-二羟基-2-甲基-6-((5r,10s,13r,14r,17r)-4,4,10,13,14-五甲基-3-氧代-2,3,4,5,6,10,12,13,14,15,16,17-十二氢-1h-环戊[a]菲-17-基)庚-3-基2-(2-(2,5-二羟基苯基)亚乙基)-11-羟基-6,10-二甲基正十四烷-5,9-二烯酸乙酯](2z,5e,9e)-(2r,3s,6r)-1,2-dihydroxy-2-methyl-6-((5r,10s,13r,14r,17r)-4,4,10,13,14-pentamethyl-3-oxo-2,3,4,5,6,10,12,13,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)heptan-3-yl2-(2-(2,5-dihydroxyphenyl)ethylidene)-11-hydroxy-6,10-dimethylundeca-5,9-dienoate化合物11：[(2z,5e,9e)-(2r,3s,6r)-1,2-二羟基-2-甲基-6-((5r,10s,13r,14r,17r)-4,4,10,13,14-五甲基-3-氧代-2,3,4,5,6,10,12,13,14,15,16,17-十二氢-1h-环戊[a]菲-17-基)庚-3-基2-(2-(2,5-二羟基苯基)-2-氧代亚乙基)-11-羟基-6,10-二甲基正十四烷-5,9-二烯酸乙酯](2z,5e,9e)-(2r,3s,6r)-1,2-dihydroxy-2-methyl-6-((5r,10s,13r,14r,17r)-4,4,10,13,14-pentamethyl-3-oxo-2,3,4,5,6,10,12,13,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)heptan-3-yl-2-(2-(2,5-dihydroxyphenyl)-2-oxoethylidene)-11-hydroxy-6,10-dimethylundeca-5,9-dienoate表3化合物9-11nmr1h,13c谱数据化合物12：[(2z,5e)-(3s,6r)-2,3-二羟基-2-甲基-6-((5r,10s,13r,14r,17r)-4,4,10,13,14-五甲基-3,7-二氧代-2,3,4,5,6,7,10,11,12,13,14,15,16,17-十四氢-1h-环戊[a]菲-17-基)庚基2-(2-(2,5-二羟苯基)亚乙基)-6,10-二甲基十一-5,9-二烯酸酯]([(2z,5e)-(3s,6r)-2,3-dihydroxy-2-methyl-6-((5r,10s,13r,14r,17r)-4,4,10,13,14-pentamethyl-3,7-dioxo-2,3,4,5,6,7,10,11,12,13,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)heptyl-2-(2-(2,5-dihydroxyphenyl)ethylidene)-6,10-dimethylundeca-5,9-dienoate])化合物13：[(2z,5e)-(2s,3s,6r)-1,2-二羟基-2-甲基-6-((5r,10s,13r,14r,17r)-4,4,10,13,14-五甲基-3-氧代-2,3,4,5,6,10,12,13,14,15,16,17-十二氢-1h-环戊[a]菲-17-基)庚-3-基2-(2-(2,5-二羟基苯基)亚乙基)-6,10-二甲基十一-5,9-二烯酸酯]([(2z,5e)-(2s,3s,6r)-1,2-dihydroxy-2-methyl-6-((5r,10s,13r,14r,17r)-4,4,10,13,14-pentamethyl-3-oxo-2,3,4,5,6,10,12,13,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)heptan-3-yl2-(2-(2,5-dihydroxyphenyl)ethylidene)-6,10-dimethylundeca-5,9-dienoate])化合物14：[(2e,5e)-(3s,6r)-1,2-二羟基-2-甲基-6-((5r,10s,13r,14r,17r)-4,4,10,13,14-五甲基-3-氧代-2,3,4,5,6,10,12,13,14,15,16,17-十二氢-1h-环戊[a]菲-17-基)庚-3-基2-(2-(2,5-二羟苯基)亚乙基)-6,10-二甲基十一-5,9-二烯酸酯]([(2e,5e)-(3s,6r)-1,2-dihydroxy-2-methyl-6-((5r,10s,13r,14r,17r)-4,4,10,13,14-pentamethyl-3-oxo-2,3,4,5,6,10,12,13,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)heptan-3-yl2-(2-(2,5-dihydroxyphenyl)ethylidene)-6,10-dimethylundeca-5,9-dienoate])化合物15：[(2z,5e)-(3s,6r)-2,3-二羟基-2-甲基-6-((5r,10s,13r,14r,17r)-4,4,10,13,14-五甲基-3-氧代-2,3,4,5,6,10,12,13,14,15,16,17-十二氢-1h-环戊[a]菲-17-基)庚基2-(2-(2,5-二羟基苯基)亚乙基)-6,10-二甲基十一-5,9-二烯酸酯]([(2z,5e)-(3s,6r)-2,3-dihydroxy-2-methyl-6-((5r,10s,13r,14r,17r)-4,4,10,13,14-pentamethyl-3-oxo-2,3,4,5,6,10,12,13,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)heptyl2-(2-(2,5-dihydroxyphenyl)ethylidene)-6,10-dimethylundeca-5,9-dienoate])表4化合物12-15的1hnmr数据.a测试500mhzcdcl3,δhppm,jhz.,其中，m峰代表多重峰或重叠峰表5化合物12-15的13cnmr数据.a化合物16:(r)-[5-(2,5-二羟基苯基)-3-(4-甲基正戊烷-3-烯-1-基)呋喃-2(5h)-酮](r)-5-(2,5-dihydroxyphenyl)-3-(4-methylpent-3-en-1-yl)furan-2(5h)-one化合物17:(s)-[5-(2,5-二羟基苯基)-3-(4-甲基正戊烷-3-烯-1-基)呋喃-2(5h)-酮](s)-5-(2,5-dihydroxyphenyl)-3-(4-methylpent-3-en-1-yl)furan-2(5h)-one化合物17的nmr数据与化合物16相同，通过旋光值的不同将两个化合物区分。表6化合物16的1h,13cnmr数据(cd3cocd3)本发明化合物1-17的理化性质如下：化合物1黄色油状物，(c0.1,meoh)；uv(meoh)λmaxnm(logε)226(4.60),300(4.4)；ir(neat)νmax3320,2961,2952,2925,2850,2840,1702,1622,1588,1441,1368,1374,1236,856,615cm-1；positivehrtofmsm/z[m+h]+343.3221(计算值c21h26o4,343.3225)。化合物2黄色油状物，(c0.1,meoh)；uv(meoh)λmaxnm(logε)216(4.10),ir(neat)νmax3440,3076,2961,2920,2855,1700,1619,1448,1425,1375,1365,1230,856,736,623cm-1；positivehrtofmsm/z[m+h]+359.2812(计算值c21h26o5,359.2813)。化合物3黄色油状物，(c0.1,meoh)；uv(meoh)λmaxnm(logε)211(4.10),297(3.00)；ir(neat)νmax2923,2923,1752,1622,1588,1441,1368,1236,942，856,612cm-1；positivehrtofmsm/z[m+h]+343.1875(计算值c21h26o4,343.1831)。化合物4黄色油状物，(c0.1,meoh)；uv(meoh)λmaxnm(logε)213(4.10),299(3.23)；ir(neat)νmax2923,1752,1622,1588,1441,1368,1236,942，856,612cm-1；positivehrtofmsm/z[m+h]+343.1873(计算值c21h26o4,343.1831)。化合物5黄色油状，(c0.1,meoh)；uv(meoh)λmaxnm(logε)260(4.10),201(2.00)；ir(neat)νmax3425,2980,2840,1730,1641,1618,1429,1360,856,742，612cm-1；positivehrtofmsm/z[m+h]+373.3241(计算值c22h28o5,373.3241)。化合物6黄色油状，(c0.1,meoh)；uv(meoh)λmaxnm(logε)225(4.04),260(1.98)；ir(neat)νmax3319,2925,2840,1723,1620,1413,1369,1364,866,754,623cm-1；positivehrtofmsm/z[m+h]+345.2551(计算值c21h28o4,345.2550)。化合物7黄色胶状，(c0.1,meoh)；uv(meoh)λmaxnm(logε)225(4.10),300(2.00)；ir(neat)νmax3272,2968,2845,2342,1725,1622,1588,1372,1236,836,612cm-1；positivehrtofmsm/z[m+h]+375.2142(计算值c22h30o5,375.2140)。化合物8黄色胶状，(c0.1,meoh)；uv(meoh)λmaxnm(logε)200(3.50),280(2.40)；ir(neat)νmax3310,2979,2855,2832,1701,1639,1579,1440,1390,1360,620cm-1；positivehrtofmsm/z[m+h]+361.1918(计算值c21h28o5,361.1920)。化合物9黄色粉末，(c0.1,meoh)；uv(meoh)λmaxnm(logε)246(3.50),254(2.10)；367(3.50)；ir(neat)νmax3450,2939,2855,2832,1701,1639,1480,1440,1390,1300,870,725,620cm-1；positivehrtofmsm/z[m+h]+829.6038(计算值c51h73o9,829.6038)。化合物10黄色粉末，(c0.1,meoh)；uv(meoh)λmaxnm(logε)246(3.50),254(2.10)；367(3.50)；ir(neat)νmax3310,2979,2960,2920,2855,2825,1700,1639,1574,1430,1380,1360,870,724,618cm-1；positivehrtofmsm/z[m+h]+815.2263(计算值c51h75o8,815.2263)。化合物11黄色粉末，(c0.1,meoh)；uv(meoh)λmaxnm(logε)246(3.50),254(2.10)；367(3.50)；ir(neat)νmax3325,2980,2948,2910,2845,2835,1702,1619,1557,1424,1378,1360,870,724,620cm-1；positivehrtofmsm/z[m+h]+829.6038(计算值c51h73o9,829.6038)。化合物12淡黄无定型粉末，(c0.1,meoh)；uv(meoh)λmaxnm(logε)200(3.50),254(3.40),377(2.00)；ir(neat)νmax3452,2925,2849,1719,1700,1635,1460,1423,1345,1301,1234,1190,1128,1023,1000,649cm-1；positivehrtofmsm/z[m+h]+815.5456(计算值c51h74o8,815.5456)。化合物13淡黄无定型粉末，(c0.1,meoh)；uv(meoh)λmaxnm(logε)245(3.60),254(3.51),377(1.99)；ir(neat)νmax3452,2925,2820,1725,1725,1630,1460,1423,1345,1301,1234,1190,1128,1023,1000,654cm-1；positivehrtofmsm/z[m+h]+799.5510(计算值c51h74o7,799.5507)。化合物14淡黄无定型粉末，(c0.1,meoh)；uv(meoh)λmaxnm(logε)248(4.12),254(3.99),377(2.10)；ir(neat)νmax3380,2930,2860,1725,1704,1642,1440,1403,1348,1301,1239,1167,1018,1000,745,649cm-1；positivehrtofmsm/z[m+h]+799.5508(计算值c51h74o7,799.5507)。化合物15淡黄无定型粉末，(c0.1,meoh)；uv(meoh)λmaxnm(logε)247(3.50),254(3.40),377(2.10)；ir(neat)νmax3451,2915,2823,1792,1730,1645,1449,1420,1342,1300,1232,1192,1112,1024,998,644cm-1；positivehrtofmsm/z[m+h]+799.5505(计算值c51h74o7,799.5507)。化合物16黄色油状物，(c0.1,meoh)；uv(meoh)λmaxnm(logε)211(4.10),297(3.00)；ir(neat)νmax2985,2923,1752,1614,1507,1456,1377,1297,869，814，742,578cm-1；positivehrtofmsm/z[m+h]+275.1281(计算值c21h26o4,275.1281)。化合物17黄色油状物，(c0.1,meoh)；uv(meoh)λmaxnm(logε)215(4.15),297(3.00)；ir(neat)νmax2999,2911,1753,1614,1507,1456,1377,1297,742,578cm-1；positivehrtofmsm/z[m+h]+275.1283(计算值c21h26o4,275.1281)。实施例4、式1-17所示化合物的体外抑制α-葡萄糖苷酶活性试验供试样品溶液：实施例3所述的17个化合物，准确称取各化合物，用dmso配制成20mm，供活性测试(终浓度分别为25.0μm、12.5μm、6.3μm、3.1μm、1.6μm、0.8μm，配制时溶于少量dmso后，用蒸馏水稀释至相应浓度，控制dmso的最终体积分数<0.1％)；阿卡波糖作为阳性对照(终浓度分别为4000μm、1000μm、250μm、62.5μm，配制时溶于少量dmso后，用蒸馏水稀释至相应浓度，控制dmso的最终体积分数<0.1％)。取25μl不同浓度的以上供试样品溶液，加入25μlα-葡萄糖苷酶水溶液(浓度为0.2u/ml)及175μl磷酸盐缓冲溶液(50mm，ph7.0)。混合溶液于室温放置10min后加入25μl4-硝基苯-α-d-吡喃葡萄糖苷水溶液(浓度为2.5mm)，37℃恒温孵育30min，5000rpm离心5min，取上清150μl至96孔板中，在波长405nm处测定吸光值。实验同时设置空白组：使用25μl的磷酸盐缓冲液(50mm，ph7.0)代替供试样品溶液；空白对照组：使用25μl的磷酸盐缓冲液(50mm，ph7.0)代替供试样品溶液，同时25μl的磷酸盐缓冲液(50mm，ph7.0)代替α-葡萄糖苷酶水溶液；样品对照组：使用25μl的磷酸盐缓冲液(50mm，ph7.0)代替α-葡萄糖苷酶水溶液。上述每个实验组均重复三次，结果取平均值。使用下述公式计算样品对α-葡萄糖苷酶的抑制率：抑制率(％)＝[1-(样品组吸光值-样品对照组吸光值)/(空白组吸光值-空白对照组吸光值)]×100％对实验数据统计分析，使用计算各供试样品的ic50值，结果如表7所示。ic50＝[cl(ih-50)+ch(50-il)]/(ih-il)cl：低浓度值；ch：高浓度值；ih：高浓度下的抑制率；il：低浓度下的抑制率。可见，所示化合物均有强α-葡萄糖苷酶抑制活性，其活性强于阳性对照药阿卡波糖可以作为α-葡萄糖苷酶抑制剂治疗和/或预防ii型糖尿病。表7式1-17所示化合物的α-葡萄糖苷酶抑制活性检测结果实施例5、式1-17所示化合物的体外抑制hmg-coa还原酶活性试验供试样品溶液：实施例3所述的17个化合物，准确称取各化合物，用dmso配制成20mm，供活性测试(终浓度分别为25.0μm、12.5μm、6.3μm、3.1μm、1.6μm、0.8μm，配制时溶于少量dmso后，用蒸馏水稀释至相应浓度，控制dmso的最终体积分数<0.1％)；阿伐他丁作为阳性对照(终浓度分别为4000μm、1000μm、250μm、62.5μm，配制时溶于少量dmso后，用蒸馏水稀释至相应浓度，控制dmso的最终体积分数<0.1％)。取25μl不同浓度的以上供试样品溶液，加入20μlhmg-coa还原酶水溶液(浓度为0.2u/ml)，20μlnadph水溶液(浓度为0.2u/ml)及10μl磷酸盐缓冲溶液(50mm，ph7.0)。混合溶液于室温放置10min后加入20μlhmg-coa，37℃恒温孵育30min，5000rpm离心5min，取上清150μl至96孔板中，在波长550nm处测定吸光值。上述每个实验组均重复三次，结果取平均值。使用下述公式计算样品对hmg-coa还原酶的抑制率：抑制率(％)＝[1-(样品组吸光值-样品对照组吸光值)/(空白组吸光值-空白对照组吸光值)]×100％对实验数据统计分析，计算各供试样品的ic50值结果如表8所示。可见，所示化合物均有强mhg-coa还原酶抑制活性，其活性强于阳性对照药阿托伐他丁，可以制备抑制hmg-coa还原酶的药物或功能保健品，用于治疗和/或预防高血脂症。表8式1-17所示化合物的hmg-coa还原酶抑制活性检测结果实施例6、式1-17所示化合物的体外抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1b(ptp-1b)活性试验对硝基苯基磷酸二钠盐(pnpp)是碱性磷酸酶的可溶性底物，在蛋白酪氨酸磷酸酶1b的催化下，它脱去一个磷酸根，生成黄色可溶产物对硝基苯酚，该产物在405nm处有光吸收，以阳性药物矾酸钠为对照，加入系列浓度的提取物，利用酶标仪检测405nm处光吸收的降低可以检测该化合物对蛋白酪氨酸磷酸酶1b活性的抑制。buffer为ph8.0，50mmtris,150mm氯化钠。实施例3所述的17个化合物，准确称取各化合物，用dmso配制成20mm，供活性测试(终浓度分别为25.0μm、12.5μm、6.3μm、3.1μm、1.6μm、0.8μm，配制时溶于少量dmso后，用蒸馏水稀释至相应浓度，控制dmso的最终体积分数<0.1％)；阿伐他丁作为阳性对照(终浓度分别为4000μm、1000μm、250μm、62.5μm，配制时溶于少量dmso后，用蒸馏水稀释至相应浓度，控制dmso的最终体积分数<0.1％)。实验步骤：在96孔板中依次加入以下试剂，不同组别的配比如下：测试组：50ul化合物溶液+50ul浓度170ug/ml的ptp-1b溶液阳性对照组：50ul矾酸钠溶液+50ul浓度170ug/ml的ptp-1b溶液空白组：50ulbuffer+50ul浓度170ug/ml的ptp-1b溶液背景组：50ul化合物溶液+100ulbuffer将加完试剂的96孔板在室温放置10min使化合物和酶充分反应，之后加入50ul1mmpnpp溶液作为底物，在37℃恒温箱中反应30分钟，在每孔加入50ul3mnaoh终止反应，测定各孔在405nm的光密度。对实验数据统计分析，计算各供试样品的ic50值结果如表9所示。可见，所示化合物均有一定的ptp-1b酶抑制活性，可以制备蛋白酪氨酸磷酸酶1b抑制剂，用于治疗和/或预防ii型糖尿病。表9式1-17所示化合物的ptp-1b酶抑制活性检测结果实施例7、式1-17所示化合物对喂食高脂饲料大鼠的血脂影响材料：被测样品溶液为实施例3所述的17个化合物(式1-17)。准确称取各样品，用0.5％cmc-na配制成10mg/ml溶液，供活性测试。大鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司，温度20-24摄氏度，恒湿50-60％，光照12小时(8:00-20:00)，隔音，自由摄食、饮水，适应环境一周后进行实验。血清总胆固醇tc试剂盒(批号20131112)，低密度脂蛋白ldl-c试剂盒(批号20140114)，高密度脂蛋白hdl-c试剂盒(批号20140413)，甘油三酯tg试剂盒(批号20131226)，超氧化物歧化酶sod试剂盒(批号20140213)，谷草转氨酶ast试剂盒(批号20131006)购自南京建成生物工程研究所。方法：取雄性健康sd大鼠，200±20g，大鼠适应性饲养一周后进行实验，随机分为19组，每组8只。对照组给予普通饲料，其他组给予高脂饲料(高脂饲料为普通饲料中加入1％胆固醇、0.2％猪胆盐、10％猪油、10％蛋黄粉)。饲养3周后，各组大鼠分别灌胃给与1ml的10mg/ml提取物溶液(相当于50mg/kg)，连续10天，对照组和模型组给予等量的生理盐水。末次给药后，取血，4摄氏度3000rpm离心，测定血清总胆固醇tc，低密度脂蛋白ldl-c，甘油三酯tg。结果：与对照组和模型组比较，这些化合物可以显著改善大鼠血脂情况，对大鼠血清alt也有很好的逆转作用，提示可以保护高血脂造成的肝损伤和脂肪肝，推测是通过提高机体sod酶来实现的，结果见表10。表10式1-17所示化合物对喂食高脂饲料大鼠的血脂影响实施例8、式1-17所示化合物对正常小鼠血糖的活性研究材料：被测样品溶液为实施例3所述的17个化合物(1-17)。准确称取各样品，用0.5％cmc-na配制成配制10mg/ml溶液，供活性测试。spf小鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司，温度20-24摄氏度，恒湿50-60％，光照12小时(8:00-20:00)，隔音，自由摄食、饮水，适应环境一周后进行实验。血糖测定试剂盒(批号20140403)购自南京建成生物工程研究所。方法：取雄性spf级昆明种小鼠，20±2g，适应性饲养一周后进行实验，随机分为18组，每组12只。各组分别灌胃给与0.1ml的10mg/ml提取物溶液(相当于50mg/kg)，连续10天，对照组给予等量的生理盐水。末次给药后禁食10小时，眼眶取血，按血糖测定试剂盒操作测定血糖。结果：与对照组比较，17个化合物组小鼠的血糖值没有统计学差异，说明这17个化合物对正常小鼠血糖没有影响，见表11。表11式1-17所示化合物的对正常小鼠血糖的影响实施例9、式1-17所示化合物对四氧嘧啶性高血糖小鼠血糖的活性研究材料：被测样品溶液为实施例3所述的17个化合物(1-17)。准确称取各样品，用0.5％cmc-na配制10mg/ml溶液，供活性测试。spf小鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司，温度20-24摄氏度，恒湿50-60％，光照12小时(8:00-20:00)，隔音，自由摄食、饮水，适应环境一周后进行实验。血糖测定试剂盒(批号20140403)购自南京建成生物工程研究所。方法：取250只雄性spf级昆明种小鼠，20±2g，适应性饲养一周后进行实验。随机取出10只作为对照组，其他240只按照体重220mg/kg腹腔注射四氧嘧啶造模，72小时后，眼眶取血测定血糖，选择血糖在8.8-20mmol/l的小鼠进行后续试验。本实验中入选的小鼠有172只，按血糖水平随机分为模型组和给药组。各给药组分别灌胃给与0.1ml的10mg/ml提取物溶液(相当于50mg/kg)，连续10天，对照组和模型组给予等量的生理盐水。末次给药后禁食10小时，眼眶取血，按血糖测定试剂盒操作测定血糖。结果：表12可以看出，给药前除正常对照组外，其他小鼠血糖值大幅上升，提示四氧嘧啶造模成功。给药后，各组均有所降低，说明对苯二酚法尼基类化合物能够显著降低高血糖小鼠的血糖值，可用于治疗糖尿病和糖尿病并发症。表12式1-17所示化合物对四氧嘧啶性高血糖小鼠血糖的影响分组给药前血糖给药后血糖分组给药前血糖给药后血糖对照组4.964.88模型组15.3415.19914.428.57114.505.111015.034.63214.766.271115.214.90315.087.951215.115.21415.057.981315.196.21515.347.831414.805.23615.126.321514.905.32715.077.421614.956.49815.007.321714.986.50实施例10、式3和式4所示化合物对高血糖小鼠kkay血糖材料：被测样品溶液为实施例2所述的化合物3和化合物4。准确称取化合物3和4，用0.5％cmc-na配制5mg/ml溶液，供活性测试。kkay小鼠购自中国医学科学院北京协和医学院动物研究所，温度20-24摄氏度，恒湿50-60％，光照12小时(8:00-20:00)，隔音，自由摄食、饮水，适应环境一周后进行实验。血糖仪为德国罗氏公司产品。方法：雄性c57小鼠6-8周，体重20-22g，10只，作为正常对照组(1)，雄性kkay小鼠6-8周，体重28-32g，测定空腹血糖，依据血糖值和体重情况平均分组：(2)模型对照组，(3)化合物3给药1mg/kg，(4)化合物3给药5mg/kg(5)化合物3给药10mg/kg，(6)化合物3给药20mg/kg，(7)化合物4给药1mg/kg，(8)化合物4给药5mg/kg(9)化合物4给药10mg/kg，(10)化合物4给药20mg/kg，(11)二甲双胍8g/kg；(12)化合物32.5mg/kg+二甲双胍4g/kg(13)化合物35mg/kg+二甲双胍4g/kg，(14)化合物42.5mg/kg+二甲双胍4g/kg(15)化合物45mg/kg+二甲双胍4g/kg，每组8只，连续给药3周。模型对照组给予等量的0.5％cmc-na。二甲双胍是目前临床上首选的降糖药物，主要通过降低肝糖输出，减少肠道对糖的吸收，增加外周血糖的摄取和利用，达到提高胰岛素的敏感性的作用，但二甲双胍对肝、肾都具有损伤作用；而本发明的化合物3在实施例5中可以看到，对ptp1-b具有较强的抑制作用而引起的胰岛素增敏，因此我们考虑将两种药物合用，提高胰岛素增敏作用，另外还能保护肝、肾等不受损伤。测定指标：1)药物对血糖的影响：给3药第1天：动物禁食2小时后取血(0时)，测空腹血糖值，灌胃给予化合物，给药后30min尾尖取血测血糖值。2)对体重和血糖的影响：给药第2天、5天、8天、11天、14天、17天、20天称量体重并记录，给药后尾尖取血测血糖值(见表13)。3)葡萄糖耐量实验(ogtt)：给药第12天测葡萄糖耐量：动物禁食12小时取血(0时)给药，给药并口服葡萄糖(2.0g/kg),分别30，60，120分钟尾尖取血测血糖值(见表14)。4)末次给药后，麻醉处死，取血，4摄氏度3000rpm离心，测定血清总胆固醇tc，低密度脂蛋白ldl-c，甘油三酯tg。5)末次给药后，取肝脏，并于福尔马林中固定，组织切片观察。实验结果表明式3和式4所示化合物对高血糖小鼠的血糖有显著作用,对体重影响不大,对于糖负荷小鼠也有显著降低作用(表13和表14)。与二甲双胍联用后，效果更为显著，且可以对二甲双胍的肝损伤有报告作用，可以用于制备治疗ii型糖尿病的药物或与二甲双胍合用治疗ii型糖尿病或在治疗过程中/后起辅助作用。表13式3和式4所示化合物对高血糖小鼠kkay血糖的影响表14式3和式4所示化合物对高血糖小鼠kkay糖耐量的影响与对照组和模型组比较，这些化合物可以显著改善大鼠血脂情况，对大鼠血清alt也有很好的逆转作用，提示可以保护高血脂造成的肝损伤，推测是通过提高机体sod酶来实现的，结果见表15。表15式3和式4所示化合物对高血糖小鼠kkay的血脂和肝功能影响分组tcmg/dlldl-cmg/dlhdl-cmg/dltgmg/dlsodu/laltu/lastu/l11315322.33105.060.246.121997924.16283.292.4134.731326422.43285.0172.156.241346422.43104.2472.863.551316422.53274.1167.160.861255322.13104.5261.260.571346422.13255.1272.556.581346922.33124.2571.263.691356922.53314.1262.560.6101235422.43124.3461.560.6111767223.15783.789.6137.5121666522.74503.880.5110.1131526922.54424.1277.497.4141666322.44633.585.4100.6151587122.74124.176.187.7图1显示，结合解剖时对肝脏大体的肉眼观察和组织病理切片的he染色发现，模型组小鼠肝细胞内均有大量大小不等的脂肪空泡，形成脂肪肝。而化合物3和化合物4组小鼠肝细胞内的脂肪空泡基本消失，结果表明化合物3和4的不同剂量组均可以有效治疗由于糖尿病并发的非酒精性脂肪肝症状。实施例11、式3和式4所示化合物对非酒精性脂肪肝的影响材料：准确称取实施例2所制备的式3和式4所示的两个化合物，用0.5％cmc-na配制5mg/ml溶液，供活性测试。雄性spf级wister大鼠60只，体重180-220g，购自维通利华实验动物中心。温度20-24摄氏度，恒湿50-60％，光照12小时(8:00-20:00)，隔音，自由摄食、饮水，适应环境一周后进行实验。血清总胆固醇tc试剂盒(批号20131112)，低密度脂蛋白ldl-c试剂盒(批号20140114)，高密度脂蛋白hdl-c试剂盒(批号20140413)，甘油三酯tg试剂盒(批号20131226)，谷草转氨酶alt试剂盒(批号20131006)购自南京建成生物工程研究所。方法：雄性spf级wister大鼠随机分组：(1)正常组(2)模型对照组(3)式3所示化合物给药10mg/kg，(4)式3所示化合物给药20mg/kg(5)式4所示化合物给药10mg/kg，(6)式4所示化合物给药20mg/kg每组10只。正常组大鼠标准饲料喂养，其余组大鼠每天喂食胆碱缺乏饲料(高脂饲料)，检测大鼠摄食量及体重。胆碱缺乏饲料喂养会诱发肝脏细胞变性、肝炎及肝损伤，同时血脂水平升高并诱发胰岛素抵抗，是常用的啮齿类动物脂肪肝的造模方法。高脂饮食喂养8周后，给药组开始给药，连续给药4周。正常组和模型对照组给予等量的0.5％cmc-na。给药四周后，麻醉处死大鼠，取肝组织和血。测定指标：1)肝脏指数。2)测定血清总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白及甘油三酯含量。3)测定谷丙转氨酶含量。4)肝脏组织切片：末次给药后，麻醉处死，冰上取肝脏，并迅速放入福尔马林中固定，准备组织切片。实验结果，与正常对照组比较，模型组肝指数显著升高，给予化合物3和4后能显著降低脂肪肝大鼠的肝指数。同时模型组的tc、ldl-c、tg均显著升高，hdl-c显著降低，提示本模型造成明显的血脂紊乱，与模型组相比，给予化合物3和4后可降低非酒精性脂肪肝大鼠的血脂，同时还能改善肝功能，降低血浆alt的含量。表16式3和式4所示化合物对非酒精性脂肪肝的影响结合解剖时对肝脏大体的肉眼观察和组织病理切片的he染色发现(图2)，模型组大鼠肝细胞内均有大量大小不等的脂肪空泡，形成脂肪肝。而化合物3和4组大鼠肝细胞内的脂肪空泡基本消失。结果表明化合物3和化合物4的不同剂量组均可以有效防治由于肥胖引起的的非酒精性脂肪肝症状。实施例11、小鼠急性毒性试验1.实验材料雄性正常昆明种小鼠，170只，体重20-22克，购自北京维通利华实验动物有限公司。2.实验方法1)化合物的配制称化合物1-17各2g，用0.5％cmc-na配制至10ml，浓度为0.2g/ml。2)动物分组与给药将正常小鼠适应性饲养3-5天后，实验前一天晚6点禁食，自由饮水。实验时，将小鼠按体重随机分组，每组10只，灌胃给药，每10g小鼠体重给0.25ml，即给药剂量为5g/kg。正常对照组给0.5％cmc-na，每10g小鼠体重给0.25ml3)评价指标给药后观察动物的一般状况，如外观、行为、对刺激的反应、分泌物及排泄物，记录异常现象发生时间。观察有无死亡发生，记录死亡发生时间，尸检，观察有无异常现象。在急性毒性试验中，灌胃大、小鼠的毒性分级依据ld50分为五级：ld50<1mg/kg为极毒，ld50在1-50mg/kg之间为剧毒，ld50在51-500mg/kg为中等毒，ld50在501-5000mg/kg之间为低毒，大于5000mg/kg为实际无毒。3.实验结果给药后均未发现明显异常现象，化合物3，4，6组部分小鼠体重减轻，给药第5天2，4，5，7，10组均有一只小鼠死亡，尸检，未发现明显的异常现象。第12天1，13组有一只小鼠死亡，尸检，未发现明显异常现象。第29天后将小鼠脱颈处死，尸检，均未发现明显异常现象。实施例12化合物1-17的抗肿瘤作用测试用肿瘤细胞：人肝癌细胞hepg2，人前列腺癌细胞pc3用含体积百分含量10％的胎牛血清的dmem培养液培养，人肺癌细胞a549、人结直肠癌细胞hct-15、人宫颈癌细胞hela、人白血病细胞k562、人胃癌细胞sgc-7901、人乳腺癌细胞mcf-7用含体积百分含量10％的胎牛血清的rpmi1640培养液分别培养。上述细胞的培养条件均为37℃、5％co2培养箱中常规培养，隔天传代。被测样品溶液：实施例3所述的17个化合物。准确称取各样品，用dmso(二甲基亚砜)配制成200mm溶液(制备时溶于少量dmso后，再用蒸馏水稀释至相应浓度，控制dmso的最终体积百分含量<1％)，用dmem培养基进行2倍梯度稀释，共8个浓度，供活性测试。阳性对照溶液：五氟尿嘧啶(5-fu)是以抗代谢物而起作用，在细胞内转化为有效的氟尿嘧啶脱氧核苷酸后，通过阻断脱氧核糖尿苷酸受细胞内胸苷酸合成酶转化为胸苷酸，而干扰dna的合成。五氟尿嘧啶同样可以干扰rna的合成。静脉用药后，氟尿嘧啶广泛分布于体液中，并在4小时内从血中消失。五氟尿嘧啶是最早的抗癌药物，抗瘤谱广泛，临床用于结肠癌、直肠癌、胃癌、乳腺癌、卵巢癌、绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、头颈部鳞癌、皮肤癌、肝癌、膀胱癌等。五氟尿嘧啶配制成2mm水溶液(制备时溶于少量dmso后，再用蒸馏水稀释至相应浓度，控制dmso的最终体积百分含量<1％)，用dmem培养基溶液进行2倍梯度稀释，共8个浓度。采用细胞增殖抑制活性测试方法(mtt法)测试样品的抗肿瘤细胞增殖活性，其原理是，活细胞线粒体中脱氢酶能够代谢还原黄色的溴化3-(4,5-二甲基噻唑)-2,5-二苯基四氮唑为蓝紫色的不溶于水的甲臜(formazan)，甲臜的量可通过酶标仪测定其吸光度求得。由于甲臜的量与活细胞数成正比，所以可根据吸光度计算得出活细胞的数目，从而获得药物抑制或杀伤肿瘤细胞的能力。取对数生长期的上述各种测试用肿瘤细胞(人肝癌细胞hepg2、人前列腺癌细胞pc3、人肺癌细胞a549、人结直肠癌细胞hct-15、人宫颈癌细胞hela、人白血病k562细胞、人胃癌细胞sgc-7901、人乳腺癌细胞mcf-7)，分别用胰酶消化，制成每毫升含1×105个细胞的单细胞悬液，接种于96孔板内(每孔200μl)，每组设3个平行孔。在37℃下经过24小时后加入2ul上述不同浓度的被测样品溶液，作为给药组，培养48小时。同时设空白对照组(2uldmso替代上述的被测样品溶液)和阳性对照组(2ul不同浓度的五氟尿嘧啶溶液替代上述的被测样品溶液)。然后在各组中加入20μl含mtt的rpmi-1640溶液(mtt终浓度为5mg/l)再培养4小时，移出150μl培养液后加入150μldmso溶解甲臜，在540nm处测定其吸收度，计算抑制率(％)。抑制率(％)(i)＝(1-给药组od值/空白对照组od值)×100％。计算ic50值：ic50＝[cl(ih-50)+ch(50-il)]/(ih-il)cl：低浓度值；ch：高浓度值；ih：高浓度下的抑制率；il：低浓度下的抑制率。结果如表17所示。表17表17表明，17个化合物对于多种肿瘤细胞都有一定程度的抗肿瘤活性，其活性强于阳性对照组的五氟尿嘧啶。这些化合物可以用于肿瘤治疗或治疗过程中/后的辅助药物。实施例13化合物1-17的rxrα受体结合抑制剂作用实验原理：在一定条件下,放射性同位素标记的配体[3h]-9-cis-ra与gst偶联的rxrα-lbd蛋白结合可形成配体-受体复合物,用glutathionesepharose4bbead吸附rxrα-lbd后,用液闪仪测定与受体结合的[3h]-9-cis-ra的含量,若在同一体系中存在着可与[3h]-9-cis-ra竞争结合rxrα-lbd的配体,则与rxrα-lbd结合的[3h]-9-cis-ra含量降低,cpm(countsperminute)值变低。该实验可直接区分化合物是否与rxrα受体有高亲和力,方法简便、快捷、易于操作并且容易实现高通量筛选。实验方法：供试品的配制：将供试品和阳性对照药9-顺视黄酸(9-cis-ra,sigma公司产品)用dmso或dd-h2o配成20mg/ml储存液,临用前用tegd(ph7.4,100mmtris,1.5mmedta,10％甘油,1/1000dtt)缓冲液稀释成所需的浓度。活性的测定：在100μl反应体系中,加入2μgrxrα-lbd蛋白及饱和浓度的[3h]-9-cis-ra(15nmol/l)以及不同浓度的药物,测定非特异性结合量。另管加200倍[3h]-9-cis-ra量的9-cis-ra(相当于药物),置4℃避光反应14小时；加50％glutathionesepharose4bbead3μl,室温反复混合反应30分钟；将beads点在gf/c膜上,用冰冷洗脱缓冲液抽滤,每次5ml,共4次,烘干膜；将膜放入1ml闪烁液中,液闪仪测定cpm值。药物对rxrα配体受体竞争结合的抑制率％＝(cpmcontrol–cpmdrug)/(cpmcontrol–cpmnsb)×100％cpmcontrol＝对照组cpm值；cpmdrug＝样品组cpm值；cpmnsb＝9-cis-ra组cpm值实验结果：样品在50μg/ml浓度下与[3h]-9-cis-ra联合使用时,对rxrα配体受体竞争结合的影响结果见表18。实验结果表明,化合物1-17具有一定的rxrα受体结合抑制剂的活性。因此，这些化合物可以作为rxra受体抑制剂用于肿瘤治疗。表18化合物1-17rxrα受体结合抑制剂活性结果化合物抑制率％化合物抑制率％190.11076.4282.31160.3380.11276.5478.51380.2579.31478.0685.31576.9785.11678.2875.21780.1980.3当前第1页12