本申请要求2016年4月1日提交的美国临时专利申请号62/317,258的权益,该临时专利申请通过引用整体并入本文。
序列表
本申请包含序列表,该序列表已经以ascii格式电子提交,并且通过引用整体并入本文。2017年3月30日创建的所述ascii拷贝命名为k-1031_02_sl.txt,大小为414,963字节。
发明背景
人类癌症就其本质而言是由已经经历了遗传或表观遗传转化而变成异常癌细胞的正常细胞组成。此时,癌细胞开始表达与正常细胞表达的蛋白质和其他抗原不同的蛋白质和其他抗原。这些异常的肿瘤抗原可以被身体的先天免疫系统用于特异性靶向和杀死癌细胞。然而,癌细胞采用各种机制来阻止免疫细胞如t和b淋巴细胞成功靶向癌细胞。
目前的疗法t细胞疗法依赖于经富集或经修饰的人t细胞来靶向并杀死患者中的癌细胞。为了增加t细胞靶向和杀死特定癌细胞的能力,已经开发了方法来工程化改造t细胞以表达将t细胞导向特定靶癌细胞的构建体。嵌合抗原受体(car)和工程化t细胞受体(tcr),其包含能够与特定肿瘤抗原相互作用的结合结构域,允许t细胞靶向并杀死表达特定肿瘤抗原的癌细胞。
存在对用于靶向和杀死癌细胞的改进的car和tcr的需求。
发明概述
本发明通过提供包含表达特异性靶向并杀死癌细胞的抗原受体(car)或t细胞受体(tcr)的经基因工程化改造的免疫细胞的组合物和方法解决了该需求。
car可以包含例如,(i)抗原特异性组分(“抗原结合分子”),(ii)一个或多个共刺激结构域(其包括铰链结构域),和(iii)一个或多个活化结构域。每个结构域可以是异种的,也就是说,由衍生自不同蛋白质链的序列组成。表达car的免疫细胞(例如t细胞)可以用于各种疗法,包括癌症疗法。
如下文(包括实施例部分)更详细描述的,与包含包括完整铰链结构域(“chd”)的共刺激结构域的car相比,包含包括截短铰链结构域(“thd”)的共刺激结构域的car提供了出乎意料的优越性质。可以将编码此类car的多核苷酸转导到t细胞中,而car在t细胞例如患者自身的t细胞中得到表达。当将经转导的t细胞移植回患者时,car指导t细胞识别并结合存在于癌细胞表面上的表位,从而允许癌细胞而不是非癌细胞的结合。该结合导致t细胞中细胞溶解机制的活化,其特异性杀死结合的癌细胞。在本发明之前,包含thd的car优于包含chd的car不为人所知。因此,本发明满足了对用于治疗癌症的新型和改进疗法存在的未满足的需求。
本发明的一方面是编码嵌合抗原受体(car)或t细胞受体(tcr)的分离的多核苷酸,其包含(i)抗原结合分子,(ii)共刺激结构域,和(iii)活化结构域。所述共刺激结构域可以包含细胞外结构域、跨膜结构域和细胞内结构域,其中所述细胞外结构域包含截短铰链结构域,所述截短铰链结构域基本上由以下各项组成或由以下各项组成:(i)与seqidno:1的氨基酸123至152至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列,和任选地(ii)一至六个氨基酸。
在一些实施方案中,所述一至六个氨基酸为异源的氨基酸。
在一些实施方案中,所述截短铰链结构域基本上由以下组成或由以下组成:与seqidno:1的氨基酸123至152至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中,所述氨基酸序列由以下核苷酸序列编码:与seqidno:2至少约60%,至少约70%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列。
在一些实施方案中,所述跨膜结构域为以下各项的跨膜结构域:4-1bb/cd137、t细胞受体的alpha链、t细胞受体的beta链、cd3epsilon、cd4、cd5、cd8alpha、cd9、cd16、cd19、cd22、cd33、cd37、cd45、cd64、cd80、cd86、cd134、cd137、cd154或t细胞受体的zeta链,或它们的任何组合。
在一些实施方案中,所述跨膜结构域包含与seqidno:5至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中,所述跨膜结构域由以下核苷酸序列编码:与seqidno:4至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列。
在一些实施方案中,所述细胞内结构域包含以下各项的信号传导区:4-1bb/cd137、活化性nk细胞受体、b7-h3、baffr、blame(slamf8)、btla、cd100(sema4d)、cd103、cd160(by55)、cd18、cd19、cd19a、cd2、cd247、cd27、cd276(b7-h3)、cd29、cd3delta、cd3epsilon、cd3gamma、cd30、cd4、cd40、cd49a、cd49d、cd49f、cd69、cd7、cd84、cd8alpha、cd8beta、cd96(tactile)、cd11a、cd11b、cd11c、cd11d、cds、ceacam1、crtam、细胞因子受体、dap-10、dnam1(cd226)、fcgamma受体、gads、gitr、hvem(lightr)、ia4、icam-1、icam-1、igalpha(cd79a)、il2rbeta、il2rgamma、il7ralpha、免疫球蛋白样蛋白质、诱导性t细胞共刺激分子(icos)、整合素、itga4、itga4、itga6、itgad、itgae、itgal、itgam、itgax、itgb2、itgb7、itgbl、kirds2、lat、lfa-1、lfa-1、与cd83特异性结合的配体、light、light(肿瘤坏死因子超家族成员14;tnfsf14)、ltbr、ly9(cd229)、淋巴细胞功能相关抗原-1(lfa-1(cd1la/cd18)、mhci类分子、nkg2c、nkg2d、nkp30、nkp44、nkp46、nkp80(klrf1)、ox-40、pag/cbp、程序性死亡-1(pd-1)、psgl1、selplg(cd162)、信号传导淋巴细胞活化分子(slam蛋白)、slam(slamf1;cd150;ipo-3)、slamf4(cd244;2b4)、slamf6(ntb-a;lyl08)、slamf7、slp-76、tnf受体蛋白、tnfr2、toll配体受体、trance/rankl、vla1或vla-6,或它们的组合。
在一些实施方案中,所述细胞内结构域包含4-1bb/cd137信号传导区。
在一些实施方案中,所述细胞内结构域包含与seqidno:7至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中,所述细胞内结构域包含由以下核苷酸序列编码的氨基酸序列:与seqidno:6至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列。
在一些实施方案中,所述抗原结合分子包含重链可变区(vh)和轻链可变区(vl),其中所述vh包含3个互补决定区(cdr)并且所述vl包含3个cdr。
在一些实施方案中,所述抗原结合分子特异性结合选自由以下各项组成的组的抗原:5t4、甲胎蛋白、b细胞成熟抗原(bcma)、ca-125、癌胚抗原、cd19、cd20、cd22、cd23、cd30、cd33、cd56、cd123、cd138、c-met、cspg4、c型凝集素样分子1(cll-1)、egfrviii、上皮肿瘤抗原、erbb2、flt3、叶酸结合蛋白、gd2、gd3、结合的her1-her2、结合的her2-her3、her2/neu、herv-k、hiv-1包膜糖蛋白gp41、hiv-1包膜糖蛋白gpl20、il-llralpha、kappa链、lambda链、黑色素瘤相关抗原、间皮素、muc-1、突变的p53、突变的ras、前列腺特异性抗原、ror1或vegfr2,或它们的组合。
在一些实施方案中,所述抗原结合分子特异性结合bcma、cll-1或flt3。
在一些实施方案中,所述活化结构域包含与seqidno:9或seqidno:251至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中,所述活化结构域由以下核苷酸序列编码:与seqidno:8至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列。
在一些实施方案中,所述car或tcr进一步包含前导肽。
在一些实施方案中,所述前导肽包含与seqidno:11至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中,所述前导肽由以下核苷酸序列编码:与seqidno:10至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列。
本发明的另一方面是包含上述方面或实施方案的多核苷酸的载体。
在一些实施方案中,所述载体为腺病毒载体、腺病毒相关载体、dna载体、慢病毒载体、质粒、逆转录病毒载体或rna载体,或它们的任何组合。
而本发明的另一方面是由上述方面或实施方案的多核苷酸或上述方面或实施方案的载体编码的多肽。
在另一方面,本发明是包含上述方面或实施方案的多核苷酸、上述方面或实施方案的载体,或上述方面或实施方案的多肽,或它们的任何组合的细胞。
在一些实施方案中,所述细胞为t细胞。
在一些实施方案中,所述t细胞为同种异体t细胞、自体t细胞、工程化自体t细胞(eacttm)或肿瘤浸润淋巴细胞(til)。
在一些实施方案中,所述t细胞为cd4+t细胞。
在一些实施方案中,所述t细胞为cd8+t细胞。
在一些实施方案中,所述t细胞为体外细胞。
在一些实施方案中,所述t细胞为自体t细胞。
本发明的一个方面是包含上述方面或实施方案的多核苷酸、包含上述方面或实施方案的载体、包含上述方面或实施方案的多肽或包含上述方面或实施方案的细胞的组合物。
在一些实施方案中,所述组合物经配制以递送至受试者,任选地,所述组合物包含至少一种药学上可接受的赋形剂。
本发明的另一方面是制备表达car或tcr的细胞的方法,所述方法包含在适合的条件下用上述方面或实施方案的多核苷酸转导细胞。
在一些实施方案中,所述方法进一步包含分离所述细胞。
而本发明的另一方面是诱导针对肿瘤的免疫力的方法,所述方法包含向受试者施用有效量的细胞,所述细胞包含上述方面或实施方案的多核苷酸、包含上述方面或实施方案的载体,或上述方面或实施方案的多肽,或它们的任何组合。
在另一方面,本发明是治疗有需要的受试者中癌症的方法,所述方法包含向受试者施用上述方面或实施方案的多核苷酸、上述方面或实施方案的载体、上述方面或实施方案的多肽、上述方面或实施方案的细胞或上述方面或实施方案的组合物。
在一些实施方案中,所述癌症为血液学癌症。
在一些实施方案中,所述癌症为白细胞的癌症。
在一些实施方案中,所述癌症为浆细胞的癌症。
在一些实施方案中,所述癌症为白血病、淋巴瘤或骨髓瘤。
在一些实施方案中,所述癌症为急性淋巴母细胞白血病(all)(包括非t细胞all)、急性髓样白血病、b细胞幼淋巴细胞白血病、b细胞急性淋巴细胞白血病(“ball”)、母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤、伯基特淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病(cll)、慢性髓细胞性白血病(cml)、慢性髓样白血病、慢性或急性白血病、弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)、滤泡性淋巴瘤(fl)、毛细胞白血病、霍奇金病、恶性淋巴细胞增生性疾病、malt淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、边缘区淋巴瘤、意义不明的单克隆丙种球蛋白病(mgus)、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常和骨髓增生异常综合征、非霍奇金淋巴瘤(nhl)、浆细胞增生性疾病(包括无症状性骨髓瘤(郁积型多发性骨髓瘤或惰性骨髓瘤))、浆母细胞性淋巴瘤、浆细胞样树突状细胞肿瘤、浆细胞瘤(包括浆细胞恶液质;单发性骨髓瘤;单发性浆细胞瘤;髓外浆细胞瘤;和多发性浆细胞瘤)、poems综合征(也称为crow-fukase综合征;takatsuki病;和pep综合征)、原发性纵隔大b细胞淋巴瘤(pmbc)、小细胞或大细胞滤泡性淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤(smzl)、系统性淀粉样蛋白轻链淀粉样变、t细胞急性淋巴细胞白血病(“tall”)、t细胞淋巴瘤、转化滤泡性淋巴瘤或瓦氏巨球蛋白血症,或它们的组合。
一般而言,本发明涉及工程化自体细胞疗法(engineeredautologouscelltherapy),缩写为“eacttm”,也称为过继细胞转移。eacttm是一种过程,通过该过程收集患者自身的t细胞并随后进行基因工程化改造以识别和靶向在一种或多种特定癌细胞的细胞表面上表达的一种或多种抗原。可以将t细胞工程化改造以表达例如car或tcr。将car阳性(car+)t细胞工程化改造以表达car。car可以包含,例如对特定肿瘤抗原具有特异性的细胞外单链可变片段(scfv),其直接或间接地与包含至少一个共刺激结构域的细胞内信号传导部分连接,共刺激结构域直接或间接地与至少一个活化结构域连接;组分可以按任何顺序排列。共刺激结构域可以衍生自本领域已知的共刺激蛋白质例如seqidno:1,并且活化结构域可以衍生自例如cd3-zeta的任何形式。在一些实施方案中,将car设计为具有两个、三个、四个或更多个共刺激结构域。在一些实施方案中,将car进行工程化改造使得共刺激结构域以单独的多肽链形式表达。cart细胞疗法和构建体的实例描述于美国专利公开号2013/0287748、2014/0227237、2014/0099309和2014/0050708;国际专利公开号wo2012033885、wo2012079000、wo2014127261、wo2014186469、wo2015080981、w02015142675、wo2016044745和wo2016090369;以及sadelainetal,cancerdiscovery,3:388-398(2013),其每一个通过引用整体并入本文。
本文描述的任何方面或实施方案可以与本文公开的任何其他方面或实施方案组合。虽然已经结合本发明的详细描述描述了本发明,但是前面的描述旨在说明而不是限制本发明的范围,本发明的范围由所附权利要求的范围限定。其他方面、优点和修改在以下权利要求的范围内。
本文提及的专利和科学文献建立了本领域技术人员可获得的知识。本文引用的所有美国专利和公开或未公开的美国专利申请通过引用并入本文。本文引用的所有公开的外国专利和专利申请在此通过引用并入本文。本文引用的所有其他公开的参考文献、词典、文件、手稿和科学文献在此通过引用并入本文。
根据附图和以下详细说明,包括实施例和权利要求,本发明的其他特征和优点将显而易见。
附图说明
从以下结合附图的详细描述中将更清楚地领会以上和进一步的特征。然而,附图仅用于说明目的而不是为了限制。
图1a显示了具有seqidno:1的氨基酸序列的共刺激蛋白质。标记了共刺激蛋白质的铰链结构域(实线下划线)、跨膜结构域(点下划线)和信号传导结构域(短线下划线)。用粗体表示新的截短铰链结构域(“thd”)。图1b和1c提供了具有seqidno:1的氨基酸序列的共刺激蛋白质的细胞外结构域的带状示意图。图1b显示了seqidno:1的氨基酸序列内的区域的实例,其用于在car的背景中获得铰链区的一个实施方案,即含有seqidno:1的氨基酸114至152的区域(本文称为完整铰链结构域或“chd”;用黑色和深灰色标记)。图1c显示了含有seqidno:1的氨基酸123至152的thd(用黑色标记)。在图1b中,用深灰色标记并圈出从图1c排除的铰链区的部分。
图2a-2h显示了本文公开的八个实例结合分子的clutstalw(2.83)多序列比对。图2a显示了包含vh结构域的实例抗cll-1结合分子的序列比对。显示了cdr和框架区fr,如通过chothia编号所确定的(图2a)。图2b是提供图2a中所示的每个vh和cdr的seqidno的表格。图2c显示了包含vl结构域的实例抗cll-1结合分子的序列比对。显示了cdr和fr,如通过chothia编号所确定的(图2c)。图2d是提供图2c中所示的每个vh和cdr序列的seqidno的表格。图2e显示了包含vh结构域的实例抗bcma结合分子的序列比对。显示了互补决定区(cdr)和框架区(fr),如通过chothia编号所确定的(图2e)。图2f是提供图2e中所示的每个vh和cdr的seqidno的表格。图2g显示了包含vl结构域的实例抗bcma结合分子的序列比对。显示了cdr和fr,如通过chothia编号所确定的(图2g)。图2h是提供图2g中所示的每个vh和cdr序列的seqidno的表格。
图3描绘了用编码各种car的mrna电穿孔的原代人t细胞中的car表达。显示了从具有完整铰链结构域(“chd”)的car获得的数据并显示了从具有截短铰链结构域(“thd”)的car获得的数据。
图4a-4x显示了通过与所示靶细胞系共培养16小时后电穿孔的抗flt3cart细胞的ifnγ、il-2和tnfα产生。图4a-4b、4g-4h、4m-4n和4s-4t分别显示了与namalwa、eol-1、hl60和mv4;11靶细胞共培养后的ifnγ产生。图4c-4d、4i-4j、4o-4p和4u-4v分别显示了与namalwa、eol-1、hl60和mv4;11靶细胞共培养后的il-2产生。图4e-4f、4k-4l、4q-4r和4w-4x分别显示了与namalwa、eol-1、hl60和mv4;11靶细胞共培养后的tnfα产生。
图5a-5h显示了共培养16小时后电穿孔的抗flt3cart细胞对namalwa(图5a-5b)、eol1(图5c-5d)、hl60(图5e-5f)和mv4;11(图5g-5h)靶细胞系的细胞溶解活性。
图6a-6b描绘了来自两个健康供体的慢病毒转导的原代人t细胞中的car表达。
图7a-7f显示了在与所示靶细胞系共培养16小时后,来自两个健康供体的慢病毒转导的cart细胞的ifnγ(图7a-7b)、tnfα(图7c-7d)和il-2(图7e-7f)产生。
图8a-8d显示了与namalwa(图8a)、eol1(图8b)、mv4;11(图8c)和hl60(图8d)靶细胞系共培养16、40、64、88或112小时的来自表达抗flt3car构建体的两个健康供体随时间的平均细胞溶解活性。
图9a-9b描绘了在与cd3-cd28珠子或所示靶细胞系共培养5天后,来自两个健康供体的cfse标记的慢病毒转导的cart细胞的增殖。
图10a-10d描绘了用于体内研究的慢病毒转导的原代人t细胞中的car表达。图10e-10f显示了一式两份实施的在异种模型中静脉内注射对照(模拟品)或抗flt3cart细胞(10e3-chd、10e3-thd或8b5-thd)后,经标记的急性髓样白血病(aml)细胞的测量的生物发光成像的图示。图10g提供了图10e中各个数据点的p值。图10h-10k显示了小鼠的存活曲线,所述小鼠注射了模拟品或10e3-chd(图10h)、模拟品或10e3-thd(图10i)、模拟品或8b5-thd(图10j),或10e3-thd或8b5-thd(图10k)cart细胞。
图11a-11b显示了在mrna电穿孔后6小时由蛋白质l测定的cll-1car表达。
图12a-12c显示了来自mrna电穿孔后24小时的来自不同cll-1car-t细胞构建体的细胞因子释放测定的结果。如所示,显示了与namalwa、mv4;11、u937、hl60和eol-1细胞共培养的对照(单独的靶物、模拟品、gfp和cd19cart细胞)和抗cll-1cart细胞(24c1_hl-thd、24c1_hl_chd、24c8_hl-chd和24c8_hl_thd)的il-2(图12a)、ifnγ(图12b)和tnfα(图12c)产生水平。
图13a-13e显示了mrna电穿孔后24小时的不同的cll-1car-t细胞构建体的细胞溶解活性。将用对照构建体(模拟品、gfp和cd19car)或抗cll-1car构建体(24c8_hl-chd和24c8_hl_thd)电穿孔的t细胞与namalwa(图13a)、mv;411(图13b)、eol-1(图13c)、hl-60(图13d)和u937靶细胞共培养,并测定了每个靶细胞系的特异性溶解的百分比。
图14a-14c显示了来自与不同的细胞系共培养16小时后的来自不同的经转导的抗cll-1cart细胞的细胞因子释放测定的结果。如所示,显示了对于与namalwa、hl-60或mv4;11靶细胞共培养的对照(单独的靶物和模拟品)和经转导的抗cll-1cart细胞(10e3_thd和24c1_lh_thd)的ifnγ(图14a)、il-2(图14b)和tnfα(图14c)产生水平。
图15a-15c显示了来自与namalwa(图15a)、mv4;11(图15b)或hl-60(图15c)靶细胞共培养16小时和40小时后的抗cll-1cart细胞(c1_24c1_lh_thd)的细胞溶解活性。
图16a-16f显示了在与eol-1(黑色)、nci-h929(浅灰色)或mm1s(灰色)靶细胞系共培养16小时后,来自两个健康供体的慢病毒转导的cart细胞的ifnγ、tnfα和il-2产生。图16a和16b显示了来自第一供体(图16a)和第二供体(图16b)的慢病毒转导的cart细胞中的ifnγ(pg/ml;y轴)产生。图16c和16d显示了来自第一供体(图16c)和第二供体(图16d)的慢病毒转导的cart细胞中的tnfα(pg/ml;y轴)产生。图16e和16f显示了来自第一供体(图16e)和第二供体(图16f)的慢病毒转导的cart细胞中的il-2产生(pg/ml;y轴)。
图17a-17f显示了与eol1(图17a和17b)、nci-h929(图17c和17d)或mm1s(图17e和17f)靶细胞共培养16小时、40小时、64小时、88小时或112小时的来自表达所示的car的两个健康供体随时间的平均细胞溶解活性(作为剩余活的靶细胞的百分比;y轴)。图17a和17b显示了与eol1靶细胞共培养16小时、40小时、64小时、88小时或112小时的来自第一供体(图17a)和第二供体(图17b)的经转导的cart细胞的平均细胞溶解活性。图17c和17d显示了与nci-h929靶细胞共培养16小时、40小时、64小时、88小时或112小时的来自第一供体(图17c)和第二供体(图17d)的经转导的cart细胞的平均细胞溶解活性。图17e和17f显示了与mm1s靶细胞共培养16小时、40小时、64小时、88小时或112小时的来自第一供体(图17e)和第二供体(图17f)的经转导的cart细胞的平均细胞溶解活性。
图18a和18b显示了在与cd3-cd28珠子(顶行)、eol-1(第二行)、nci-h929(第三行)或mm1s(底行)靶细胞系共培养6天后,来自第一健康供体(图18a)和第二健康供体(图18b)的cfse标记的慢病毒转导的cart细胞的增殖。
图19a和图19b是显示本发明的嵌合抗原受体(car)的热稳定性的图。图19a:在磷酸缓冲盐(pbs)溶液中,包含具有截短铰链结构域(“thd”)的细胞外结构域的car相对于包含具有完整铰链结构域(“chd”)的细胞外结构域的car,具有更高的解链温度。图19b:在存在50mmnacl的情况下,包含具有thd的细胞外结构域的car相对于包含具有chd的细胞外结构域的car,具有更高的解链温度。
发明详述
本发明涉及包含新的截短铰链结构域(“thd”)的新的多肽和编码其的多核苷酸。本发明的一些方面涉及编码包含本文所公开的thd的嵌合抗原受体(car)或t细胞受体(tcr)的多核苷酸。本发明也提供了包含此类多核苷酸的载体(例如病毒载体)和包含此类载体的组合物。本发明进一步提供了编码此类car或tcr的多核苷酸和包含此类多核苷酸的组合物。本发明另外提供了包含此类多核苷酸的和/或用此类病毒载体转导的工程化细胞(例如t细胞)以及包含此类工程化细胞的组合物。本发明提供了包括多个工程化t细胞的组合物(例如药物组合物)。本发明提供了用于制备此类工程化t细胞和组合物的方法以及此类工程化t细胞和组合物的用途(例如在治疗黑色素瘤中)。并且,本发明提供了诱导针对肿瘤的免疫力的方法,所述方法包含向受试者施用有效量的包含本发明的多核苷酸、载体或多肽的细胞。本发明的其他方面涉及包含car或tcr的细胞及其在t细胞疗法例如自体细胞疗法(eacttm))中用于治疗患有癌症的患者的用途。
定义
为了更容易理解本发明,首先在下面定义某些术语。在整个说明书中阐述了对以下术语和其他术语的附加定义。
如在本说明书和所附权利要求中所使用的,单数形式“一个”、“一种”和“所述”包括复数指示物,除非上下文另有明确规定。
除非在上下文中明确说明或显而易见,否则如本文所用,术语“或”应当理解为包含性的并且涵盖“或”和“和”两者。
本文使用的术语“和/或”视为具有或不具有另一个的两个指定特征或组件中的每一个的具体公开。因此,如在短语例如“a和/或b”中所使用的术语“和/或”旨在包括a和b;a或b;a(单独);和b(单独)。同样地,如在短语例如“a、b和/或c”中所使用的术语“和/或”旨在涵盖以下方面的每一个:a、b和c;a、b或c;a或c;a或b;b或c;a和c;a和b;b和c;a(单独);b(单独);和c(单独)。
如本文所使用的术语“例如(e.g.)”和“即(i.e.)”仅作为实例使用,而没有意图限制,并且不应当诠释为仅涉及在说明书中明确列举的那些项目。
术语“或更多”、“至少”、“超过”等,例如“至少一个”应当理解为包括但不限于至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149或150、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、2000、3000、4000、5000或超过所述值。还包括其间任何更大的数字或分数。
相反地,术语“不超过”包括小于所述值的每个值。例如,“不超过100个核苷酸”包括100、99、98、97、96、95、94、93、92、91、90、89、88、87、86、85、84、83、82、81、80、79、78、77、76、75、74、73、72、71、70、69、68、67、66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48、47、46、45、44、43、42、41、40、39、38、37、36、35、34、33、32、31、30、29、28、27、26、25、24、23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1和0个核苷酸。还包括其间任何更小的数字或分数。
术语“多个”、“至少两个”、“两个或更多个”、“至少第二个”等应当理解为包括但不限于至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149或150、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、2000、3000、4000、5000或更多。还包括其间任何更大的数字或分数。
在整个说明书中,词语“包含(comprising)”或变形将理解为暗指包括所述要素、整数或步骤,或要素、整数或步骤的组,但不排除任何其他要素、整数或步骤,或要素、整数或步骤的组。应当理解的是,在本文中无论何处用语言“包含”描述方面,还提供了以“由......组成”和/或“基本上由......组成”描述的其他类似方面。
除非明确说明或从上下文中显而易见,如本文所用,术语“约”是指如本领域普通技术人员测定的特定值或组成的可接受误差范围内的值或组成,其将部分取决于如何测量或测定值或组成,即测量系统的局限性。例如,“约”或“基本上由.......组成”可以表示按本领域实践的1个内或超过1个标准偏差。“约”或“基本上由......组成”可以表示高达10%的范围(即±10%)。因此,“约”可以理解为在10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%、0.5%、0.1%、0.05%、0.01%或0.001%内大于或小于所述值。例如,约5mg可以包括4.5mg和5.5mg之间的任何量。此外,特别是关于生物系统或过程,该术语可以表示高达一个数量级或高达5倍的值。当在本公开中提供特定值或组成时,除非另有说明,否则应当假定“约”或“基本上由......组成”的含义在该特定值或组成的可接受的误差范围内。
如文本所述,除非另有说明,否则任何浓度范围、百分比范围、比率范围或整数范围应当理解为包括所叙述范围内的任何整数的值,并且在适当时包括其分数(例如整数的十分之一和百分之一)。
使用其国际单位制(si)接受的形式提供本文所使用的单位、前缀和符号。数字范围包括定义范围的数字。
除非另外定义,否则本文所使用的所有技术和科学术语具有与本公开所涉及领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。例如,juo,“theconcisedictionaryofbiomedicineandmolecularbiology”,2nded.,(2001),crcpress;“thedictionaryofcell&molecularbiology”,5thed.,(2013),academicpress;和“theoxforddictionaryofbiochemistryandmolecularbiology”,cammacketal.eds.,2nded,(2006),oxforduniversitypress为本领域技术人员提供了用于本公开中使用的许多术语的通用词典。
“施用”是指使用本领域技术人员已知的任何各种方法和递送系统将药剂物理导入受试者。本文公开的制剂的例示性施用途径包括静脉内、肌肉内、皮下、腹膜内、脊柱或其他肠胃外施用途径,例如通过注射或输液。本文所使用的短语“肠胃外施用”表示除肠内和局部施用外的施用方式,通常通过注射以及包括但不限于静脉内、肌肉内、动脉内、鞘内、淋巴管内、病灶内、囊内、眶内、心内、皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内、硬膜外和胸骨内注射和输液,以及体内电穿孔。在一些实施方案中,经由非肠胃外途径例如口服施用制剂。其他非肠胃外途径包括局部、表皮或粘膜施用途径,例如鼻内、阴道、直肠、舌下或局部。也可以实施施用,例如,一次,多次,和/或在一个或多个长时期。
术语“抗体”(ab)包括但不限于,特异性结合抗原的糖蛋白免疫球蛋白。通常,抗体可以包含通过二硫键相互连接的至少两条重(h)链和两条轻(l)链,或其抗原结合分子。每条h链包含重链可变区(本文缩写为vh)和重链恒定区。重链恒定区包含三个恒定结构域,ch1、ch2和ch3。每条轻链包含轻链可变区(本文缩写为vl)和轻链恒定区。轻链恒定区包含一个恒定结构域,cl。vh和vl区域可以进一步细分为高变的区域,称为互补决定区(cdr),散步着更保守的区域,称为框架区(fr)。每个vh和vl包含三个cdr和四个fr,以下列顺序从氨基末端到羧基末端排列:fr1、cdr1、fr2、cdr2、fr3、cdr3和fr4。重链和轻链的可变区含有与抗原相互作用的结合结构域。ab的恒定区可以介导免疫球蛋白与宿主组织或因子的结合,包括免疫系统的各种细胞(例如效应细胞)和经典补体系统的第一组分(c1q)。
抗体可以包括例如,单克隆抗体、重组产生的抗体、单特异性抗体、多特异性抗体(包括双特异性抗体)、人抗体、工程化抗体、人源化抗体、嵌合抗体、免疫球蛋白、合成抗体、包含两个重链和两个轻链分子的四聚体抗体、抗体轻链单体、抗体重链单体、抗体轻链二聚体、抗体重链二聚体、抗体轻链-抗体重链对、胞内抗体、抗体融合物(本文有时称为“抗体缀合物”)、异缀合抗体、单结构域抗体、单价抗体、单链抗体或单链fv(scfv)、骆驼源化抗体、亲和体、fab片段、f(ab’)2片段、二硫键连接的fv(sdfv)、抗独特型(抗id)抗体(包括例如,抗-抗id抗体)、微抗体、结构域抗体、合成抗体(本文有时称为“抗体模拟物”)和以上任何的抗原结合片段。在某些实施方案中,本文所述的抗体是指多克隆抗体群。
免疫球蛋白可以衍生自任何公知的同种型,包括但不限于iga、分泌型iga、igg、ige和igm。igg亚类也是本领域技术人员熟知的并且包括但不限于人igg1、igg2、igg3和igg4。“同种型”是指由重链恒定区基因编码的ab类或亚类(例如,igm或igg1)。术语“抗体”包括,举例来说,天然存在的和非天然存在的ab两者;单克隆和多克隆ab;嵌合和人源化ab;人或非人ab;完全合成的ab;和单链ab。非人ab可通过重组方法人源化以降低其在人体内的免疫原性。在没有明确说明的情况下,除非上下文另有说明,否则术语“抗体”还包括抗原结合片段或任何前述免疫球蛋白的抗原结合部分,并且包括单价和二价片段,以及单链ab。
“抗原结合分子”、“抗原结合部分”或“抗体片段”是指包含从该分子所源于的抗体的抗原结合部分(例如,cdr)的任何分子。抗原结合分子可以包括抗原互补决定区(cdr)。抗体片段的实例包括但不限于,从抗原结合分子形成的fab、fab′、f(ab′)2和fv片段、dab、线性抗体、scfv抗体和多特异性抗体。肽体(即,包含肽结合结构域的fc融合分子)是适合的抗原结合分子的另一个实例。在一些实施方案中,抗原结合分子结合肿瘤细胞上的抗原。在一些实施方案中,抗原结合分子结合参与过度增殖性疾病的细胞上的抗原或结合病毒或细菌抗原。在某些实施方案中,抗原结合分子结合bcma、cll-1或flt3。在进一步的实施方案中,抗原结合分子是特异性结合抗原的抗体片段,包括其一个或多个的互补决定区(cdr)。在进一步的实施方案中,抗原结合分子是单链可变片段(scfv)。在一些实施方案中,抗原结合分子包含高亲和性多聚体(avimer)或由高亲和性多聚体组成。
如本文所用,术语“可变区”或“可变结构域”可互换使用,并且在本领域中常见。可变区通常是指抗体的一部分,通常是轻链或重链的一部分,通常是成熟重链中约氨基末端110至120个氨基酸和成熟轻链中约90至115个氨基酸,其在抗体之间的序列差别很大,并且用于特定抗体对其特定抗原的结合和特异性。序列的可变性集中在称为互补决定区(cdr)的那些区域中,而可变结构域中更高度保守的区域称为框架区(fr)。不希望受任何特定机制或理论的束缚,认为轻链和重链的cdr主要负责抗体与抗原的相互作用和特异性。在某些实施方案中,可变区为人可变区。在某些实施方案中,可变区包含啮齿动物或鼠cdr和人框架区(fr)。在特定实施方案中,可变区为灵长类动物(例如非人灵长类动物)可变区。在某些实施方案中,可变区包含啮齿动物或鼠cdr和灵长类动物(例如非人灵长类动物)框架区(fr)。
术语“vl”和“vl结构域”可互换使用以指抗体或其抗原结合分子的轻链可变区。
术语“vh”和“vh结构域”可互换使用以指抗体或其抗原结合分子的重链可变区。
通常使用cdr的许多定义:kabat编号、chothia编号、abm编号或contact编号。abm定义是oxfordmolecular的abm抗体建模软件使用的两者之间的折衷。contact定义基于对可用复杂晶体结构的分析。
表1:cdr编号
术语“kabat编号”和类似术语在本领域中是公认的,并且是指在抗体的重链和轻链可变区或其抗原结合分子中氨基酸残基的编号系统。在某些方面,抗体的cdr可以根据kabat编号系统确定(参见例如kabatea&wutt(1971)annnyacadsci190:382-391和kabateaetal.,(1991)sequencesofproteinsofimmunologicalinterest,fifthedition,u.s.departmentofhealthandhumanservices,nihpublicationno.91-3242)。使用kabat编号系统,抗体重链分子内的cdr通常存在于氨基酸位置31至35(其在35之后任选地可以包括一个或两个额外的氨基酸(在kabat编号方案中称为35a和35b))(cdr1)、氨基酸位置50至65(cdr2)和氨基酸位置95至102(cdr3)。使用kabat编号系统,抗体轻链分子内的cdr通常存在于氨基酸位置24至34(cdr1)、氨基酸位置50至56(cdr2)和氨基酸位置89至97(cdr3)。在具体的实施方案中,本文所述抗体的cdr已根据kabat编号方案确定。
在某些方面,抗体的cdr可以根据chothia编号方案确定,其是指免疫球蛋白结构环的位置(参见例如chothiac&leskam,(1987),jmolbiol196:901-917;al-lazikanibetal.,(1997)jmolbiol273:927-948;chothiacetal.,(1992)jmolbiol227:799-817;tramontanoaetal.,(1990)jmolbiol215(1):175-82;和美国专利号7,709,226)。通常,当使用kabat编号惯例时,chothiacdr-h1环存在于重链氨基酸26至32、33或34,chothiacdr-h2环存在于重链氨基酸52至56,并且chothiacdr-h3环存在于重链氨基酸95至102,而chothiacdr-l1环存在于轻链氨基酸24至34,chothiacdr-l2环存在于轻链氨基酸50至56,并且chothiacdr-l3环存在于轻链氨基酸89至97。当使用kabat编号惯例编号时,chothiacdr-hi环的末端在h32和h34之间变化,取决于环的长度(这是因为kabat编号方案将插入放置在h35a和h35b;如果35a和35b都不存在,则环结束于32;如果仅存在35a,则环结束于33;如果35a和35b两者都存在,则环结束于34)。在具体的实施方案中,本文所述抗体的cdr已根据chothia编号方案确定。
如本文所用,术语“恒定区”和“恒定结构域”是可互换的并且具有本领域常见的含义。恒定区是抗体部分,例如轻链和/或重链的羧基末端部分,其不直接参与抗体与抗原的结合,但可以表现出各种效应器功能,例如与fc受体的相互作用。免疫球蛋白分子的恒定区通常相对于免疫球蛋白可变结构域具有更保守的氨基酸序列。
如本文所用,当用于提及抗体时,术语“重链”基于恒定结构域的氨基酸序列可以指任何不同类型,例如alpha(α)、delta(δ)、epsilon(ε)、gamma(γ)和mu(μ),其分别产生iga、igd、ige、igg和igm类抗体,包括igg的亚类,例如igg1、igg2、igg3和igg4。
如本文所用,当用于提及抗体时,术语“轻链”基于恒定结构域的氨基酸序列可以指任何不同类型,例如kappa(κ)或lambda(λ)。轻链氨基酸序列是本领域中公知的。在具体的实施方案中,轻链为人轻链。
“结合亲和力”通常是指分子(例如抗体)的单一结合位点与其结合配偶体(例如抗原)之间的非共价相互作用的总和的强度。除非另有说明,如本文所用,“结合亲和力”是指内在结合亲和力,其反映结合对的成员(例如,抗体和抗原)之间的1∶1相互作用。分子x对其配偶体y的亲和力通常可以由解离常数(kd)表示。亲和力可以以本领域已知的多种方式测量和/或表达,包括但不限于平衡解离常数(kd)和平衡缔合常数(ka)。kd由koff/kon的商计算,而ka由kon/koff的商计算。kon是指例如抗体与抗原的结合速率常数,而koff是指例如抗体与抗原的解离。kon和koff可以通过本领域普通技术人员已知的技术例如
如本文所用,“保守氨基酸取代”是指氨基酸残基被具有相似侧链的氨基酸残基取代的氨基酸取代。本领域已经定义了具有侧链的氨基酸残基家族。这些家族包括具有以下侧链的氨基酸:碱性侧链(例如赖氨酸、精氨酸、组氨酸),酸性侧链(例如天冬氨酸、谷氨酸),不带电荷的极性侧链(例如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、色氨酸),非极性侧链(例如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸),beta分支侧链(例如苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸)和芳香族侧链(例如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)。在某些实施方案中,可以用具有相似侧链的氨基酸残基取代抗体或其抗原结合分子的cdr内或框架区内的一个或多个氨基酸残基。
如本文所用,术语“异源”表示来自除天然存在的序列之外的任何来源。例如,作为具有seqidno:1的氨基酸序列的共刺激蛋白质(例如相应的人共刺激蛋白质)的一部分所包括的异源序列是不作为野生型人共刺激蛋白质天然存在(即不与之对齐)的氨基酸。例如,异源核苷酸序列是指野生型人共刺激蛋白质编码序列以外的核苷酸序列。
如本文所用,术语“表位”是本领域的术语并且是指抗体可以特异性结合的抗原的局部区域。表位可以是例如多肽的连续氨基酸(线性或连续表位)或者表位可以例如来自多肽或多个多肽的两个或更多个非连续区域(构象、非线性、不连续的或非连续的表位)。在某些实施方案中,可以通过例如核磁共振波谱法(nmr波谱法)、x射线衍射晶体学研究、elisa测定、氢/氘交换与质谱联用(例如液相色谱电喷雾质谱法)、基于阵列的寡肽扫描测定和/或诱变作图(例如定点诱变作图)测定抗体结合的表位。对于x射线晶体学,可以使用本领域任何已知方法完成结晶(例如,giegéretal.,(1994)actacrystallogrdbiolcrystallogr50(pt4):339-350;mcphersona(1990)eurjbiochem189:1-23;chayenne(1997)structure5:1269-1274;mcphersona(1976)jbiolchem251:6300-6303)。抗体:抗原晶体可以使用公知的x射线衍射技术进行研究,并且可以使用计算机软件例如x-plor(yaleuniversity,1992,由molecularsimulations,inc.行销;参见例如methenzymol(1985)volumes114&115,edswyckoffhwetal.,;u.s.2004/0014194)和buster(bricogneg(1993)actacrystallogrdbiolcrystallogr49(pt1):37-60;bricogneg(1997)methenzymol276a:361-423,edcartercw;roversipetal.,(2000)actacrystallogrdbiolcrystallogr56(pt10):1316-1323)进行精制。可以使用本领域技术人员已知的任何方法完成诱变作图研究。关于诱变技术,包括丙氨酸扫描诱变技术的描述,参见例如champemetal.,(1995)jbiolchem270:1388-1394和cunninghambc&wellsja(1989)science244:1081-1085。
如本文所用,如果抗原与第一结合分子、抗体或其抗原结合分子之间的相互作用阻断、限制、抑制或以其他方式降低参考结合分子、参考抗体或其抗原结合分子与抗原相互作用的能力,则抗原结合分子、抗体或其抗原结合分子与参考抗体或其抗原结合分子“交叉竞争”。交叉竞争可以是完全的,例如结合分子与抗原的结合完全阻断了参考结合分子结合抗原的能力,或者其可以是部分的,例如结合分子与抗原的结合降低了参考结合分子结合抗原的能力。在某些实施方案中,与参考抗原结合分子交叉竞争的抗原结合分子结合与参考抗原结合分子相同或重叠的表位。许多类型的竞争性结合测定可以用于确定一种抗原结合分子是否与另一种竞争,例如:固相直接或间接放射免疫测定(ria);固相直接或间接酶免疫测定(eia);夹心法竞争分析(stahlietal.,1983,methodsinenzymology9:242-253);固相直接生物素-抗生物素蛋白eia(kirklandetal.,1986,j.immunol.137:3614-3619);固相直接标记分析、固相直接标记夹心法分析(harlowandlane,1988,antibodies,alaboratorymanual,coldspringharborpress);使用1-125标记的固相直接标记ria(moreletal.,1988,molec.immunol.25:7-15);固相直接生物素-抗生物素蛋白eia(cheung,etal.,1990,virology176:546-552);以及直接标记ria(moldenhaueretal.,1990,scand.j.immunol.32:77-82)。
如本文所用,术语“免疫特异性结合”、“免疫特异性识别”、“特异性结合”和“特异性识别”在抗体的背景下是类似的术语并且是指结合抗原(例如表位或免疫复合物)的分子,因为本领域技术人员理解此类结合。例如,特异性结合抗原的分子可以与其他肽或多肽结合,通常具有较低的亲和力,如通过例如免疫测定、
在另一个实施方案中,特异性结合抗原的分子以约1x10-7m的解离常数(kd)结合。在一些实施方案中,当kd为约1x10-9m至约5x10-9m时,抗原结合分子以“高亲和力”特异性结合抗原。在一些实施方案中,当kd为1x10-10m至约5x10-10m时,抗原结合分子以“非常高的亲和力”特异性结合抗原。在一个实施方案中,抗原结合分子具有10-9m的kd。在一个实施方案中,解离速率小于约1x10-5。在其他实施方案中,抗原结合分子以约1x10-7m至约1x10-13m之间的kd与人bcma结合。在又一个实施方案中,抗原结合分子以约1x10-10m至约5x10-10m的kd与人bcma结合。
在具体的实施方案中,本文提供的是抗体或其抗原结合分子,该抗体或其抗原结合分子以比另一种靶抗原(例如非人bcma或非人cll-1)更高的亲和力与靶人抗原(例如人bcma或人cll-1)结合。在某些实施方案中,本文提供的是抗体或其抗原结合分子,该抗体或其抗原结合分子以比另一种靶抗原高5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%或更高的亲和力与靶人抗原(例如人bcma或人cll-1)结合,如通过例如放射免疫测定、表面等离激元共振或动力学排除测定法测量的。在具体的实施方案中,本文所述的与靶人抗原结合的抗体或其抗原结合分子将以少于10%、15%或20%的抗体或其抗原结合分子与人抗原的结合,与另一种靶抗原结合,如通过例如放射免疫测定、表面等离激元共振或动力学排除测定法测量的。
“抗原”是指引发免疫应答或能够被抗体或抗原结合分子结合的任何分子。免疫应答可以牵涉抗体产生或特异性免疫活性细胞的活化或这两者。本领域技术人员将容易理解任何大分子(包括几乎所有蛋白质或肽)均可以充当抗原。抗原可以内源性表达,即由基因组dna表达或可以重组表达。抗原可以对某些组织,例如癌细胞是特异性的或者其可以广泛地表达。此外,较大分子的片段可以起抗原作用。在一个实施方案中,抗原为肿瘤抗原。在一个具体的实施方案中,抗原为bcma、flt3或cll-1的全部或片段。
术语“中和”是指结合配体并防止或降低该配体的生物效应的抗原结合分子、scfv、抗体或其片段。在一些实施方案中,抗原结合分子、scfv、抗体或其片段直接阻断配体上的结合位点或者通过间接方式改变配体的结合能力(例如配体的结构或能量改变)。在一些实施方案中,抗原结合分子、scfv、抗体或其片段防止与其结合的蛋白质行使生物学功能。
如本文所用,术语“bcma”指b细胞成熟抗原,其可以包括但不限于天然bcma、bcma的同种型或bcma的种间bcma同系物。bcma(也称为tnfrsf17、cd269及tnfrsf13a)为肿瘤坏死因子(tnf)-受体超家族的成员。bcma在多发性骨髓瘤细胞的表面上表达,然而在健康组织中则高度局限于浆细胞及成熟b细胞的亚类。人bcma(hbcma)的氨基酸序列提供于ncbi登录号q02223.2(gi:313104029)中。如本文所用,bcma包括人bcma和非人bcma同系物,及其变体、片段或翻译后经修饰的形式,包括但不限于bcma的n-及o-连接的糖基化形式。bcma蛋白可以进一步包括包含bcma的细胞外结构域的全部或一部分(例如hbcma的氨基酸1-54的全部或一部分)的片段。
如本文所用,术语“cll-1”是指c型凝集素样分子1,其可以包括但不限于天然cll-1、cll-1的同种型或cll-1的种间cll-1同系物。cll-1(也称为c型凝集素结构域家族12成员a、clec12a、树突状细胞相关凝集素2、dcal-2、髓样抑制性c型凝集素样受体和micl)是调节信号级联反应并介导靶map激酶的酪氨酸磷酸化的细胞表面受体。例如在急性髓样白血病(aml)细胞中观察到cll-1表达。人cll-1(hcll-1)的氨基酸序列提供于uniprotkb/swiss-prot登录号q5qgz9.3(gi:308153619)。如本文所用,cll-1包括人cll-1和非人cll-1同系物,及其变体、片段或翻译后经修饰的形式,包括但不限于cll-1的n-及o-连接的糖基化形式。
如本文所用,术语“flt3”是指fms样酪氨酸激酶3(flt-3),其可以包括但不限于天然flt3、flt3的同种型或flt3的种间flt3同系物。flt3(也称为分化抗原群135(cd135)、受体型酪氨酸蛋白激酶flt3、fms相关酪氨酸激酶3、干细胞酪氨酸激酶1、fl细胞因子受体、生长因子受体酪氨酸激酶iii型、stk1或胎肝激酶2(flk2))是属于受体酪氨酸激酶iii类的细胞因子受体。cd135是细胞因子flt3配体(flt3l)的受体。flt3在各种造血祖细胞的表面上和急性髓样白血病(aml)细胞的表面上表达。人flt3(hflt3)的氨基酸序列提供于uniprotkb/swiss-prot登录号p36888(gi:156630887)。如本文所用,flt3包括人flt3和非人flt3同系物,及其变体、片段或翻译后经修饰的形式,包括但不限于flt3的n-及o-连接的糖基化形式。
术语“自体”是指源自其稍后重新导入到其中的同一个体的任何物质。例如,本文所述的工程化自体细胞疗法(eacttm)的方法牵涉从患者收集淋巴细胞,然后将其工程化改造以表达例如car构建体,然后再施用回同一患者。
术语“同种异体”是指源自一个个体然后被导入相同物种的另一个个体的任何物质,例如同种异体t细胞移植。
术语“转导”和“经转导的”是指一种过程,通过该过程将外源dna经由病毒载体导入到细胞中(参见jonesetal.、“genetics:principlesandanalysis,”boston:jones&bartlettpubl.(1998))。在一些实施方案中,载体为逆转录病毒载体、dna载体、rna载体、腺病毒载体、杆状病毒载体、eb病毒载体、乳多空病毒载体、牛痘病毒载体、单纯疱疹病毒载体、腺病毒相关载体、慢病毒载体或它们的任何组合。
如本文所用,术语“截短的”是指少于整体的任何事物。例如,截短铰链结构域(或者在本文中称为“thd”)氨基酸序列可以包括比全长或完整铰链结构域(“chd”)短的任何氨基酸序列。在一些实施方案中,thd基本上由以下组成或者由以下组成:seqidno:1的氨基酸118-152、119-152、120-152、121-152、122-152、123-152、124-152、125-152、126-152、127-152、128-152、129-152或130-152。在一个实施方案中,thd基本上由seqidno:3组成或者由seqidno:3组成,其由seqidno:1的氨基酸123至152组成。
“癌症”是指一大组各种疾病,其特征为异常细胞在体内不受控制的生长。不受调节的细胞分裂和生长导致形成入侵相邻组织且也可以通过淋巴系统或血流转移到身体远程部分的恶性肿瘤。“癌症”或“癌症组织”可以包括肿瘤。可以通过本发明的方法治疗的癌症的实例包括但不限于免疫系统的癌症,包括淋巴瘤、白血病、骨髓瘤及其他白细胞恶性肿瘤。在一些实施方案中,本发明的方法可以用于缩小例如源自下组的肿瘤的肿瘤大小:骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头或颈癌、皮肤或眼内恶性黑色素瘤、子宫癌、卵巢癌、直肠癌、肛门区癌、胃癌、睾丸癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、阴道癌、外阴癌、多发性骨髓瘤、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤(nhl)、原发性纵隔大b细胞淋巴瘤(pmbc)、弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)、滤泡性淋巴瘤(fl)、转化滤泡性淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤(smzl)、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌症、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、慢性或急性白血病、急性髓样白血病、慢性髓样白血病、急性淋巴母细胞白血病(all)(包括非t细胞all)、慢性淋巴细胞白血病(cll)、儿童实体瘤、淋巴细胞性淋巴瘤、膀胱癌、肾或输尿管癌、肾盂癌、中枢神经系统(cns)肿瘤、原发性cns淋巴瘤、肿瘤血管生成、脊柱轴肿瘤、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西氏肉瘤、表皮样癌、鳞状细胞癌、t细胞淋巴瘤、由环境诱发的癌症(包括由石棉诱发的那些)、其他b细胞恶性肿瘤以及所述癌症的组合。在一个具体的实施方案中,癌症为多发性骨髓瘤。特定癌症可以对化学疗法或放射疗法有响应或者癌症可以是难治性的。难治性癌症是指不易于通过外科手术干预的癌症,并且癌症或是最初对化学疗法或放射疗法无响应,或是癌症随时间变成无响应。
如本文所用,“抗肿瘤效应”是指可以呈现为肿瘤体积缩小、肿瘤细胞数目减少、肿瘤细胞增殖减少、转移的数目减少、总体或无进展存活期增加、期望寿命增加或各种与肿瘤相关的生理症状改善的生物效应。抗肿瘤效应也可以指肿瘤发生的预防,例如疫苗。
如本文所用,“细胞因子”是指响应与特定抗原的接触由一种细胞释放的非抗体蛋白质,其中细胞因子与第二细胞相互作用以介导在第二细胞中的应答。细胞因子可以由细胞内源性表达或对受试者施用。细胞因子可以由免疫细胞(包括巨噬细胞、b强胞、t细胞和肥大细胞)释放以传播免疫应答。细胞因子可以诱导受体细胞中的各种应答。细胞因子可以包括稳态细胞因子、趋化因子、促炎细胞因子、效应器和急性期蛋白质。例如,稳态细胞因子(包括白细胞介素(il)7和il-15)促进免疫细胞存活和增殖,而促炎细胞因子可以促进炎症应答。稳态细胞因子的实例包括但不限于il-2、il-4、il-5、il-7、il-10、il-12p40、il-12p70、il-15及干扰素(ifn)gamma。促炎细胞因子的实例包括但不限于il-1a、il-1b、il-6、il-13、il-17a、肿瘤坏死因子(tnf)-alpha、tnf-beta、成纤维细胞生长因子(fgf)2、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(gm-csf)、可溶性细胞间黏附分子1(sicam-1)、可溶性血管黏附分子1(svcam-1)、血管内皮生长因子(vegf)、vegf-c、vegf-d以及胎盘生长因子(plgf)。效应器的实例包括但不限于颗粒酶a、颗粒酶b、可溶性fas配体(sfasl)以及穿孔蛋白(perforin)。急性期蛋白质的实例包括但不限于c反应蛋白(crp)及血清淀粉样蛋白a(saa)。
“趋化因子”是介导细胞趋化作用或定向运动的一类细胞因子。趋化因子的实例包括但不限于il-8、il-16、嗜酸性粒细胞趋化因子、嗜酸性粒细胞趋化因子-3、巨噬细胞衍生的趋化因子(mdc或ccl22)、单核细胞趋化蛋白1(mcp-1或ccl2)、mcp-4、巨噬细胞炎症蛋白1α(mip-1α、mip-1a)、mip-1β(mip-1b)、gamma-诱导蛋白10(ip-10)以及胸腺和活化调节的趋化因子(tarc或ccl17)。
治疗剂(例如工程化cart细胞)的“治疗有效量”、“有效剂量”、“有效量”或“治疗有效剂量”是当单独使用或与另一治疗剂组合使用时保护受试者免于疾病发作或者促进疾病消退的任何量,所述疾病消退的证据为疾病症状的严重性降低、疾病无症状期的频率和持续期间增加或防止由于疾病折磨导致的损伤或残疾。可以使用熟练从业人员已知的各种方法评估治疗剂促进疾病消退的能力,例如在临床试验期间在人受试者中评估、在用于预测在人体中的效力的动物模型系统中评估或通过在体外分析中测定试剂的活性评估。
如本文所用,术语“淋巴细胞”包括自然杀伤(nk)细胞、t细胞或b细胞。nk细胞是代表固有免疫系统的主要组分的一类细胞毒性(cytotoxic)(细胞毒性(celltoxic))淋巴细胞。nk细胞排斥肿瘤以及病毒感染的细胞。其通过细胞凋亡或程序性细胞死亡的过程发挥作用。由于其不需要活化来杀死细胞,因而称为“自然杀伤”。t细胞在细胞介导的免疫(无抗体参与)中发挥主要作用。它的t细胞受体(tcr)将自身与其他淋巴细胞类型区分开来。胸腺(免疫系统的专门器官)主要负责t细胞的成熟。有六种类型的t细胞,即:辅助性t细胞(例如cd4+细胞)、细胞毒性t细胞(也称为tc、细胞毒性t淋巴细胞、ctl、t杀伤细胞、溶细胞性t细胞、cd8+t细胞或杀伤t细胞)、记忆t细胞((i)干细胞样记忆tscm细胞(如初始细胞)为cd45ro-、ccr7+、cd45ra+、cd62l+(l选择素)、cd27+、cd28+以及il-7rα+,但它们也表达大量的cd95、il-2rβ、cxcr3以及lfa-1,并且显示许多记忆细胞独特的功能属性;(ii)中央记忆tcm细胞表达l-选择素和ccr7,它们分泌il-2,但不分泌ifnγ或il-4,以及(iii)效应记忆tem细胞,然而,不表达l-选择蛋白或ccr7,但产生效应细胞因子,如ifnγ和il-4)、调节性t细胞(treg、抑制性t细胞或cd4+cd25+调节性t细胞)、自然杀伤t细胞(nkt)以及gammadeltat细胞。另一方面,b细胞在体液免疫中发挥主要作用(有抗体参与)。其生成抗体和抗原并执行抗原呈递细胞(apc)的作用,并且在通过抗原相互作用的活化后转变成记忆b细胞。在哺乳动物中,未成熟的b细胞在骨髓中形成,该处为b细胞名字的来源。
术语“经基因工程化改造的”或“经工程化改造的”是指修饰细胞的基因组的方法,包括但不限于删除编码或非编码区或其部分,或插入编码区或其部分。在一些实施方案中,经修饰的细胞为淋巴细胞(例如t细胞),其可以从患者或供体取得。细胞可以经修饰以表达外源构建体,例如掺入到细胞的基因组中的嵌合抗原受体(car)或t细胞受体(tcr)。
“免疫应答”是指免疫系统的细胞(例如t淋巴细胞、b淋巴细胞、自然杀伤(nk)细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、树突状细胞以及中性粒细胞)和由这些细胞中的任一种或肝脏产生的可溶性大分子(包括ab、细胞因子和补体)的作用,该作用导致选择性靶向、结合、损害、破坏和/或排除脊椎动物体内的入侵病原体、被病原体感染的细胞或组织、癌细胞或其他异常细胞,或者在自身免疫或病理性炎症的情况下,正常的人细胞或组织。
术语“免疫疗法”是指患有疾病或处于感染疾病或疾病复发的风险的受试者的治疗,该治疗通过包含诱导、增强、抑制或以其他方式修饰免疫应答的方法进行。免疫疗法的实例包括但不限于t细胞疗法。t细胞疗法可以包括过继性t细胞疗法、肿瘤浸润淋巴细胞(til)免疫疗法、自体细胞疗法、工程化自体细胞疗法(eacttm)以及同种异体t细胞移植。然而,本领域技术人员将认为本文所公开的调理方法将增强任何移植的t细胞疗法的有效性。t细胞疗法的实例描述于美国专利公开号2014/0154228和2002/0006409、美国专利号5,728,388以及国际公开号wo2008/081035中。
免疫疗法的t细胞可以来自本领域已知的任何来源。例如,t细胞可以在体外从造血干细胞群分化,或者可以从受试者获得t细胞。t细胞可以从例如外周血单核细胞(pbmc)、骨髓、淋巴结组织、脐带血、胸腺组织、来自感染部位的组织、腹水、胸腔积液、脾组织以及肿瘤获得。此外,t细胞可以源自本领域中可获得的一个或多个t细胞系。t细胞也可以使用本领域技术人员已知的任何数目的技术(例如ficolltm分离和/或单采术(apheresis))从受试者收集的血液单位取得。分离用于t细胞疗法的t细胞的另外的方法公开于美国专利公开号2013/0287748,其通过引用整体并入本文。
术语“工程化自体细胞疗法”(其可缩写为“eacttm”,也称为过继细胞转移)是收集患者自身的t细胞,随后将其经遗传改变以识别并靶向一种或多种在一种或多种特定的肿瘤细胞或恶性肿瘤的细胞表面上表达的抗原的过程。t细胞可以经工程化改造以表达例如嵌合抗原受体(car)或t细胞受体(tcr)。car阳性(+)t细胞经工程化改造以表达对特定肿瘤抗原具有特异性的细胞外单链可变片段(scfv),其连接到包含至少一个共刺激结构域和至少一个活化结构域的细胞内信号传导部分。共刺激结构域可以源自天然存在的共刺激结构域,例如具有seqidno:1的氨基酸序列或其变体(例如具有截短铰链结构域(“thd”)的变体)的,而活化结构域可以源自例如cd3-zeta。在某些实施方案中,car设计成具有两个、三个、四个或更多个共刺激结构域。carscfv可以设计成靶向例如cd19,该cd19是由b细胞谱系(包括所有正常b细胞和b细胞恶性肿瘤,包括但不限于nhl、cll和非t细胞all)的细胞表达的跨膜蛋白。在一些实施方案中,car经工程化改造从而使共刺激结构域以单独的多肽链形式表达。实例cart细胞疗法和构建体描述于美国专利公开号2013/0287748、2014/0227237、2014/0099309以及2014/0050708中,这些参考文献通过引用整体并入本文。
如本文所用,“患者”包括任何患有癌症(例如淋巴瘤或白血病)的人。本文中,术语“受试者”和“患者”可互换使用。
如本文所用,术语“体外细胞”是指在体外培养的任何细胞。特别地,体外细胞可以包括t细胞。
术语“肽”、“多肽”和“蛋白质”可互换使用并且是指通过肽键共价连接的由氨基酸残基组成的化合物。蛋白质或肽含有至少两个氨基酸并且可以包含蛋白质或肽的序列的氨基酸的最大数量没有限制。多肽包括任何包含两个或更多个通过肽键彼此连接的氨基酸的肽或蛋白质。如本文所用,该术语是指短链(其在本领域中也通常称为例如肽、寡肽和寡聚体)和较长的链(其在本领域中通常称为蛋白质,其具有许多类型)两者。“多肽”包括例如生物活性片段、基本上同源的多肽、寡肽、同源二聚体、异源二聚体、多肽的变体、经修饰的多肽、衍生物、类似物、融合蛋白等。多肽包括天然的肽、重组的肽、合成的肽或它们的组合。
如本文所用,“刺激”是指由刺激分子与其关联配体的结合所诱发的初级应答,其中结合介导信号转导事件。“刺激分子”是指t细胞上的分子,例如与存在于抗原呈递细胞上的关联刺激配体特异性结合的t细胞受体(tcr)/cd3复合物。“刺激配体”是指当存在于抗原呈递细胞(例如apc、树突状细胞、b细胞等)上时可以与t细胞上的刺激分子特异性结合,从而介导t细胞的初级应答(包括但不限于活化、启动免疫应答、增殖等)的配体。刺激配体包括但不限于抗cd3抗体(例如okt3)、装载有肽的mhci类分子、超激动性抗cd2抗体以及超激动性抗cd28抗体。
如本文所用,“共刺激信号”是指与初级信号(例如tcr/cd3连接)组合时导致t细胞应答(例如但不限于增殖和/或关键分子的上调或下调)的信号。
如本文所用,“共刺激配体”包括与t细胞上的关联共刺激分子特异性结合的抗原呈递细胞上的分子。共刺激配体的结合提供介导t细胞应答(包括但不限于增殖、活化、分化等)的信号。共刺激配体诱导除了由刺激分子提供的初级信号(例如由t细胞受体(tcr)/cd3复合物与装载有肽的主要组织相容性复合体(mhc)分子的结合提供)外的信号。共刺激配体可以包括但不限于,3/tr6、4-1bb配体、结合toll配体受体的激动剂或抗体、b7-1(cd80)、b7-2(cd86)、cd30配体、cd40、cd7、cd70、cd83、疱疹病毒侵入介质(hvem),人白细胞抗原g(hla-g)、ilt4、免疫球蛋白样转录物(ilt)3、诱导性共刺激配体(icos-l)、细胞内黏附分子(icam)、特异性结合b7-h3的配体、淋巴毒素beta受体、mhci类链相关蛋白a(mica)、mhci类链相关蛋白b(micb)、ox40配体、pd-l2或程序性死亡(pd)ll。共刺激配体包括但不限于,与存在于t细胞上的共刺激分子特异性结合的抗体,该存在于t细胞上的共刺激分子例如但不限于4-1bb、b7-h3、cd2、cd27、cd28、cd30、cd40、cd7、icos、与cd83特异性结合的配体、淋巴细胞功能相关抗原-1(lfa-1)、自然杀伤细胞受体c(nkg2c)、ox40、pd-1或肿瘤坏死因子超家族成员14(tnfsf14或light)。
“共刺激分子”是在t细胞上特异性结合共刺激配体,从而介导t细胞的共刺激反应(例如但不限于增殖)的关联结合配偶体。共刺激分子包括但不限于4-1bb/cd137、b7-h3、baffr、blame(slamf8)、btla、cd33、cd45、cd100(sema4d)、cd103、cd134、cd137、cd154、cd16、cd160(by55)、cd18、cd19、cd19a、cd2、cd22、cd247、cd27、cd276(b7-h3)、cd28、cd29、cd3(alpha;beta;delta;epsilon;gamma;zeta)、cd30、cd37、cd4、cd4、cd40、cd49a、cd49d、cd49f、cd5、cd64、cd69、cd7、cd80、cd83配体、cd84、cd86、cd8alpha、cd8beta、cd9、cd96(tactile)、cdl-la、cdl-lb、cdl-lc、cdl-ld、cds、ceacam1、crtam、dap-10、dnam1(cd226)、fcgamma受体、gads、gitr、hvem(lightr)、ia4、icam-1、icam-1、icos、igalpha(cd79a)、il2rbeta、il2rgamma、il7ralpha、整合素、itga4、itga4、itga6、itgad、itgae、itgal、itgam、itgax、itgb2、itgb7、itgbl、kirds2、lat、lfa-1、lfa-1、light、light(肿瘤坏死因子超家族成员14;tnfsf14)、ltbr、ly9(cd229)、淋巴细胞功能相关抗原-1(lfa-1(cdlla/cd18)、mhci类分子、nkg2c、nkg2d、nkp30、nkp44、nkp46、nkp80(klrf1)、ox40、pag/cbp、pd-1、psgl1、selplg(cd162)、信号传导淋巴细胞活化分子,slam(slamf1;cd150;ipo-3)、slamf4(cd244;2b4)、slamf6(ntb-a;ly108)、slamf7、slp-76、tnf、tnfr、tnfr2、toll配体受体、trance/rankl、vla1或vla-6,或它们的片段、截短或组合。
本文中,术语“减少”和“降低”可互换使用并且表示小于原来的任何变化。“减少”和“降低”是相对的术语,需要在测量前和测量后间进行比较。“减少”和“降低”包括完全耗竭。
受试者的“治疗”或“处理”是指在受试者上进行任何类型的干预或过程,或对该受试者施用活性剂以达到逆转、减轻、改善、抑制、减缓或预防症状、并发症或病症或与疾病相关的生化指标的发作、进展、发展、严重或复发的目的。在一个实施方案中,“治疗”或“处理”包括部分缓解。在另一个实施方案中,“治疗”或“处理”包括完全缓解。
为了计算同一性百分比,相比较的序列通常以能使该序列间产生最大匹配的方式比对。可以用于测定同一性百分比的计算机程序的一个实例为gcg程序包,其包括gap(devereuxetal.,1984,nucl.acidres.12:387;geneticscomputergroup,universityofwisconsin,madison,wis.)。计算机算法gap用于比对要测定的序列同一性百分比的两个多肽或多核苷酸。比对序列以使其各自的氨基酸或核苷酸最佳匹配(如通过算法测定的“匹配跨距(matchedspan)”)。在某些实施方案中,算法也使用标准比较矩阵(参见dayhoffetal.,1978,atlasofproteinsequenceandstructure5:345-352,用于pam250比较矩阵;henikoffetal.,1992,proc.natl.acad.sci.u.s.a.89:10915-10919,用于blosum62比较矩阵)。
本发明的各种方面进一步详细描述于下列小节中。
i.嵌合抗原受体和t细胞受体
嵌合抗原受体(car或car-t)和t细胞受体(tcr)是经基因工程化改造的受体。这些工程化受体可以根据本领域已知的技术容易地插入到并且被免疫细胞(包括t细胞)表达。使用car,可以设定单一受体以识别特定抗原,并且当与该抗原结合时,活化免疫细胞以攻击并破坏携带该抗原的细胞。当这些抗原存在于肿瘤细胞上,表达car的免疫细胞可以靶向并杀死肿瘤细胞。
本发明的一个方面涉及编码包含共刺激结构域的嵌合抗原受体(car)或t细胞受体(tcr)的多核苷酸,该共刺激结构域包含含有截短铰链结构域(“thd”)的新的细胞外结构域,以及包含共刺激结构域的工程化t细胞,该共刺激结构域包含新的thd。共刺激结构域可以进一步包含跨膜结构域和/或细胞内结构域。在一些实施方案中,由本发明的多核苷酸编码的car或tcr进一步包含与靶抗原特异性结合的抗原结合分子。在一些实施方案中,由该多核苷酸编码的car或tcr进一步包含活化结构域。在一个具体的实施方案中,由该多核苷酸编码的car或tcr包含(i)与靶抗原特异性结合的抗原结合分子,(ii)包含细胞外结构域、跨膜结构域和细胞内结构域的共刺激结构域,以及(iii)活化结构域,其中细胞外结构域包含本文所述的thd(例如seqidno:3)、基本上由本文所述的thd(例如seqidno:3)组成或由本文所述的thd(例如seqidno:3)组成。
在一些实施方案中,根据本发明的car的定向包含与共刺激结构域和活化结构域串联的抗原结合结构域(例如scfv)。共刺激结构域可以包含一个或多个细胞外部分、跨膜部分和细胞内部分。在其他实施方案中,多个共刺激结构域可以串联利用。
i.a.共刺激结构域
嵌合抗原受体整合共刺激(信号传导)结构域以提高其效力。参见美国专利号7,741,465和6,319,494,以及krauseetal.andfinneyetal.(supra),songetal.,blood119:696-706(2012);kalosetal.,scitransl.med.3:95(2011);porteretal.,n.engl.j.med.365:725-33(2011),和grossetal.,annu.rev.pharmacol.toxicol.56:59-83(2016)。具有seqidno:1的氨基酸序列的共刺激蛋白质是在t细胞上天然存在的共刺激蛋白质。该共刺激蛋白质的完整天然氨基酸序列描述于ncbi参考序列:np_006130.1。参见图1a。该共刺激蛋白质的完整天然核酸序列描述于ncbi参考序列:nm_006139.1。
新的细胞外结构域:本公开显示共刺激蛋白质的包含截短铰链结构域(“thd”)的新的细胞外结构域可以改善car或tcr的一个或多个性质。在一些实施方案中,thd结构域是完整铰链结构域(“chd”)的截短版本。在某些实施方案中,编码thd的分离的多核苷酸包含(i)与seqidno:1的氨基酸123至152至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列,其中thd结构域不含有seqidno:1的氨基酸1至122。
在其他实施方案中,thd基本上由以下组成或者由以下组成:与seqidno:1的氨基酸123至152至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列。在其他实施方案中,thd基本上由以下核苷酸序列编码的氨基酸序列组成,或者由以下核苷酸序列编码的氨基酸序列组成:与seqidno:3至少约60%,至少约70%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列。
在一些实施方案中,编码thd的分离的多核苷酸基本上由以下各项组成或者由以下各项组成:(i)与seqidno:1的氨基酸123至152至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列,和(ii)任选地±一个氨基酸、±两个氨基酸、±三个氨基酸、±四个氨基酸、±五个氨基酸或±六个氨基酸。在一些实施方案中,编码thd的分离的多核苷酸基本上由以下各项组成或者由以下各项组成:(i)与seqidno:1的氨基酸123至152至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列,和(ii)任选地一或两个氨基酸、一至三个氨基酸、一至四个氨基酸、一至五个氨基酸或一至六个氨基酸。可以从thd中的氨基酸序列添加或缺失的一至六个氨基酸可以在n-末端处、c-末端处或n-末端和c-末端两者。
在一些实施方案中,编码thd的分离的多核苷酸基本上由以下各项组成或者由以下各项组成:(i)与seqidno:1的氨基酸123至152至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列,和(ii)另外一个n-末端氨基酸,另外两个n-末端氨基酸,另外三个n-末端氨基酸,另外四个n-末端氨基酸,另外五个n-末端氨基酸或另外六个n-末端氨基酸。
在一些实施方案中,另外的氨基酸可以是n-末端氨基酸。在一些实施方案中,另外的氨基酸可以是异源的。在其他实施方案中,另外的氨基酸是天然存在的共刺激蛋白质序列的一部分。
在一些实施方案中,thd基本上由以下组成或者由以下组成:与seqidno:1的氨基酸123至152、seqidno:1的氨基酸122至152、seqidno:1的氨基酸121至152、seqidno:1的氨基酸120至152、seqidno:1的氨基酸119至152、seqidno:1的氨基酸118至152或seqidno:1的氨基酸117至152至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列。
在其他实施方案中,thd基本上由以下组成或者由以下组成:与seqidno:1的氨基酸124至152、seqidno:1的氨基酸125至152、seqidno:1的氨基酸126至152、seqidno:1的氨基酸127至152、seqidno:1的氨基酸128至152、seqidno:1的氨基酸129至152或seqidno:1的氨基酸130至152至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中,thd不包含seqidno:1的氨基酸1-116。在一些实施方案中,thd不包含seqidno:1的氨基酸1-117。在一些实施方案中,thd不包含seqidno:1的氨基酸1-118。在一些实施方案中,thd不包含seqidno:1的氨基酸1-119。在一些实施方案中,thd不包含seqidno:1的氨基酸1-120。在一些实施方案中,thd不包含seqidno:1的氨基酸1-121。在一些实施方案中,thd不包含seqidno:1的氨基酸1-122。在一些实施方案中,thd不包含seqidno:1的氨基酸1-123。在一些实施方案中,thd不包含seqidno:1的氨基酸1-124。在一些实施方案中,thd不包含seqidno:1的氨基酸1-125。在一些实施方案中,thd不包含seqidno:1的氨基酸1-126。在一些实施方案中,thd不包含seqidno:1的氨基酸1-127。在一些实施方案中,thd不包含seqidno:1的氨基酸1-128。在一些实施方案中,thd不包含seqidno:1的氨基酸1-129。
thd的相应氨基酸序列如seqidno.3ldneksngtiihvkgkhlcpsplfpgpskp中所示。编码thd的细胞外部分的核苷酸序列如
在某些实施方案中,编码car或tcr中的共刺激结构域的多核苷酸包含与seqidno:3至少约60%,至少约70%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列,其中该核苷酸序列编码thd并且其中该car或tcr不包含seqidno:1的氨基酸1-122。
在一个具体的实施方案中,thd基本上由以下组成或者由以下组成:与seqidno:3的氨基酸序列至少约70%,至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列。在具体的实施方案中,编码thd的多核苷酸基本上由以下组成或者由以下组成:与seqidno:2的核苷酸序列至少约60%,至少约65%,至少约70%,至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列。
在一些实施方案中,thd进一步包含免疫球蛋白家族的成员(例如igg1、igg2、igg3、igg4、iga、igd、ige、igm或它们的片段)的一些或全部。
在一些实施方案中,thd衍生自人完整铰链结构域(“chd”),例如衍生自具有seqidno:1的氨基酸序列的共刺激蛋白质。在其他实施方案中,thd衍生自啮齿动物、鼠或灵长类动物(例如非人灵长类动物)的共刺激蛋白质的chd。在一些实施方案中,thd衍生自嵌合共刺激蛋白质的chd。
跨膜结构域:用于本发明的car或tcr的共刺激结构域可以进一步包含跨膜结构域和/或细胞内信号传导结构域。该跨膜结构域可以设计成与car的细胞外结构域融合。类似地,其可以与car的细胞内结构域融合。在一个实施方案中,使用天然与car中的结构域之一相关的跨膜结构域。在一些情况下,跨膜结构域可以经过选择或通过氨基酸取代进行修饰以避免此类结构域与相同或不同的表面膜蛋白的跨膜结构域结合以使其与受体复合物的其他成员的相互作用最小化。跨膜结构域可以源自天然来源或来自合成来源。当来源为天然来源时,结构域可以源自任何膜结合蛋白或跨膜蛋白。本发明中特定用途的跨膜区可以衍生自(即包含)4-1bb/cd137、活化性nk细胞受体、免疫球蛋白蛋白质、b7-h3、baffr、blame(slamf8)、btla、cd100(sema4d)、cd103、cd160(by55)、cd18、cd19、cd19a、cd2、cd247、cd27、cd276(b7-h3)、cd28、cd29、cd3delta、cd3epsilon、cd3gamma、cd30、cd4、cd40、cd49a、cd49d、cd49f、cd69、cd7、cd84、cd8alpha、cd8beta、cd96(tactile)、cd11a、cd11b、cd11c、cd11d、cds、ceacam1、crtam、细胞因子受体、dap-10、dnam1(cd226)、fcgamma受体、gads、gitr、hvem(lightr)、ia4、icam-1、icam-1、igalpha(cd79a)、il-2rbeta、il-2rgamma、il-7ralpha、诱导性t细胞共刺激分子(icos)、整合素、itga4、itga4、itga6、itgad、itgae、itgal、itgam、itgax、itgb2、itgb7、itgb1、kirds2、lat、lfa-1、lfa-1、与cd83特异性结合的配体、light、light、ltbr、ly9(cd229)、淋巴细胞功能相关抗原-1(lfa-1;cdl-la/cd18)、mhcclass1molecule、nkg2c、nkg2d、nkp30、nkp44、nkp46、nkp80(klrf1)、ox-40、pag/cbp、程序性死亡-1(pd-1)、psgl1、selplg(cd162)、信号传导淋巴细胞活化分子(slam蛋白)、slam(slamf1;cd150;ipo-3)、slamf4(cd244;2b4)、slamf6(ntb-a;lyl08)、slamf7、slp-76、tnf受体蛋白、tnfr2、tnfsf14、toll配体受体、trance/rankl、vla1或vla-6,或它们的片段、截短或组合。
任选地,短接头可以形成任何或一些car的细胞外、跨膜和细胞内结构域之间的连接。
在一个具体的实施方案中,共刺激蛋白质的跨膜结构域的核苷酸序列如
在一个实施方案中,编码共刺激结构域内的跨膜结构域的多核苷酸包含与seqidno:4的核苷酸序列至少约60%,至少约65%,至少约70%,至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列。
共刺激蛋白质的跨膜结构域的氨基酸序列如seqidno.5:fwvlvvvggvlacysllvtvafiifwv中所示。
在一个具体的实施方案中,共刺激结构域内的跨膜结构域包含与seqidno:5的氨基酸序列至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列。
在另一个实施方案中,跨膜结构域衍生自(即包含)cd8。在一个实施方案中,cd8细胞外结构域和跨膜结构域的核苷酸序列如
在一些实施方案中,编码共刺激结构域内的跨膜结构域的多核苷酸包含与cd8跨膜结构域的核苷酸序列至少约60%,至少约65%,至少约70%,至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列。
cd8细胞外结构域和跨膜结构域的氨基酸序列如
在一个具体的实施方案中,共刺激结构域内的跨膜结构域包含与cd8跨膜结构域的氨基酸序列至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列。
细胞内(信号传导)结构域:本发明的工程化t细胞的细胞内(信号传导)结构域可以对活化结构域提供信号传导,该活化结构域然后活化免疫细胞的至少一个正常效应器功能。t细胞的效应器功能可以是例如细胞溶解活性或辅助活性,包括分泌细胞因子。
在某些实施方案中,适合的细胞内信号传导结构域包括(即包含)但不限于,4-1bb/cd137、活化性nk细胞受体、免疫球蛋白蛋白质、b7-h3、baffr、blame(slamf8)、btla、cd100(sema4d)、cd103、cd160(by55)、cd18、cd19、cd19a、cd2、cd247、cd27、cd276(b7-h3)、cd28、cd29、cd3delta、cd3epsilon、cd3gamma、cd30、cd4、cd40、cd49a、cd49d、cd49f、cd69、cd7、cd84、cd8alpha、cd8beta、cd96(tactile)、cd11a、cd11b、cd11c、cd11d、cds、ceacam1、crtam、细胞因子受体、dap-10、dnam1(cd226)、fcgamma受体、gads、gitr、hvem(lightr)、ia4、icam-1、icam-1、igalpha(cd79a)、il-2rbeta、il-2rgamma、il-7ralpha、诱导性t细胞共刺激分子(icos)、整合素、itga4、itga4、itga6、itgad、itgae、itgal、itgam、itgax、itgb2、itgb7、itgb1、kirds2、lat、lfa-1、lfa-1、与cd83特异性结合的配体、light、light、ltbr、ly9(cd229),lyl08)、淋巴细胞功能相关抗原-1(lfa-1;cdl-la/cd18)、mhc1类分子、nkg2c、nkg2d、nkp30、nkp44、nkp46、nkp80(klrf1)、ox-40、pag/cbp、程序性死亡-1(pd-1)、psgl1、selplg(cd162)、信号传导淋巴细胞活化分子(slam蛋白)、slam(slamf1;cd150;ipo-3)、slamf4(cd244;2b4)、slamf6(ntb-a、slamf7、slp-76、tnf受体蛋白、tnfr2、tnfsf14、toll配体受体、trance/rankl、vla1或vla-6,或它们的片段、截短或组合。
编码细胞内信号传导结构域的核苷酸序列的实例如
在一个实施方案中,编码共刺激结构域内的细胞内信号传导结构域的多核苷酸包含与seqidno:6的核苷酸序列至少约60%,至少约65%,至少约70%,至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列。
细胞内信号传导结构域的实例如seqidno.7:rskrsrllhsdymnmtprrpgptrkhyqpyapprdfaayrs中所示。
在一个具体的实施方案中,共刺激结构域内的细胞内信号传导结构域包含与seqidno:7的氨基酸序列至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中,共刺激结构域包含、基本上由以下各项组成或者由以下各项组成:细胞外thd,以及共刺激蛋白质的跨膜和细胞内结构域。例如,编码共刺激结构域的核苷酸序列如
在一些实施方案中,编码共刺激结构域的多核苷酸包含、基本上由以下组成或者由以下组成:与seqidno:240的核苷酸序列至少约60%,至少约65%,至少约70%,至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列,其中该共刺激结构域不包含seqidno:1的氨基酸1至122、seqidno:1的氨基酸1至121、seqidno:1的氨基酸1至120、seqidno:1的氨基酸1至119、seqidno:1的氨基酸1至118或seqidno:1的氨基酸1至118。
共刺激结构域的相应氨基酸序列如
在一些实施方案中,共刺激结构域包含、基本上由以下组成或者由以下组成:与seqidno:241的氨基酸序列至少约70%,至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列,其中该共刺激结构域不包含seqidno:1的氨基酸1至122、seqidno:1的氨基酸1至121、seqidno:1的氨基酸1至120、seqidno:1的氨基酸1至119、seqidno:1的氨基酸1至118或seqidno:1的氨基酸1至118。
i.b.活化结构域
cd3是天然t细胞上的t细胞受体的元件,并且已经显示为car中的重要的细胞内活化元件。在一个实施方案中,cd3为cd3zeta,其核苷酸序列如
在一些实施方案中,编码活化结构域的多核苷酸包含与seqidno:8的核苷酸序列至少约60%,至少约65%,至少约70%,至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列。
细胞内cd3zeta的相应氨基酸如
在一些实施方案中,活化结构域包含与seqidno:9的氨基酸序列至少约70%,至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列。
在一些实施方案中,活化结构域包含与以下氨基酸序列至少约70%,至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的氨基酸序列:
i.c.抗原结合分子
可以通过掺入与靶抗原相互作周的抗原结合分子来工程化改造car以结合抗原(例如细胞表面抗原)。在一些实施方案中,抗原结合分子是其抗体片段,例如一个或多个单链抗体片段(“scfv”)。scfv是具有连接在一起的抗体的重链和轻链的可变区的单链抗体片段。参见美国专利号7,741,465和6,319,494,以及eshharetal.,cancerimmunolimmunotherapy(1997)45:131-136。scfv保留亲本抗体与靶抗原特异性相互作用的能力。scfv在嵌合抗原受体中有用,因为它们可以经工程化改造以与其他car组分一起作为单链的一部分表达。同上。还参见krauseetal.,j.exp.med.,volume188,no.4,1998(619-626);finneyetal.,journalofimmunology,1998,161:2791-2797。应当领会,抗原结合分子通常包含在car的细胞外部分中,使得它能够识别并结合感兴趣的抗原。具有对超过一个感兴趣的抗原的特异性的双特异性和多特异性car考虑在本发明的范围内。
在一些实施方案中,多核苷酸编码包含本发明的thd和特异性结合靶抗原的抗原结合分子的car或tcr。在一些实施方案中,靶抗原为肿瘤抗原。在一些实施方案中,抗原选自肿瘤相关表面抗原,例如5t4、甲胎蛋白(afp)、b7-1(cd80)、b7-2(cd86)、bcma、b-人绒毛膜促性腺素、ca-125、癌胚抗原(cea)、癌胚抗原(cea)、cd123、cd133、cd138、cd19、cd20、cd22、cd23、cd24、cd25、cd30、cd33、cd34、cd4、cd40、cd44、cd56、cd8、cll-1、c-met、cmv特异性抗原、cspg4、ctla-4、二涎酸神经节苷脂gd2(disialogangliosidegd2)、导管上皮黏蛋白(ductal-epithelialmucine)、ebv特异性抗原、egfr变体iii(egfrviii)、elf2m、内皮联蛋白、肝配蛋白b2、表皮生长因子受体(egfr)、上皮细胞黏附分子(epcam)、上皮肿瘤抗原、erbb2(her2/neu)、成纤维细胞相关蛋白(fap)、flt3、叶酸结合蛋白、gd2、gd3、神经胶质瘤相关抗原、鞘糖脂、gp36、hbv特异性抗原、hcv特异性抗原、her1-her2、结合的her2-her3、herv-k、高分子量-黑色素瘤相关抗原(hmw-maa)、hiv-1包膜糖蛋白gp41、hpv特异性抗原、人端粒酶逆转录酶、igfi受体、igf-ii、il-11ralpha、il-13r-a2、流感病毒特异性抗原;cd38、胰岛素生长因子(igfl)-l、肠羧基酯酶、kappa链、laga-la、lambda链、拉沙病毒特异性抗原、凝集素反应性afp、谱系特异性或组织特异性抗原例如cd3、mage、mage-a1、主要组织相容性复合体(mhc)分子、呈递肿瘤特异性肽表位的主要组织相容性复合体(mhc)分子、m-csf、黑色素瘤相关抗原、间皮素、间皮素、mn-caix、muc-1、muthsp70-2、突变的p53、突变的p53、突变的ras、中性粒细胞弹性蛋白酶、nkg2d、nkp30、ny-eso-1、p53、pap、prostase、prostase特异性抗原(psa)、前列腺癌肿瘤抗原-1(pcta-1)、前列腺特异性抗原、prostein、psma、rage-1、ror1、ru1、ru2(as)、表面黏附分子、存活和端粒酶、tag-72、纤连蛋白的额外结构域(extradomain)a(eda)和额外结构域b(edb)和生腱蛋白c的al结构域(tncal)、甲状腺球蛋白、肿瘤基质抗原、血管内皮生长因子受体-2(vegfr2)、病毒特异性表面抗原例如hiv特异性抗原(例如hivgpl20)、以及这些表面标志物的任何衍生物或变体。在某些实施方案中,抗原结合分子特异性结合bcma。在其他实施方案中,抗原结合分子特异性结合cll-1。在其他实施方案中,抗原结合分子特异性结合flt3。
在一些实施方案中,抗原结合分子特异性结合bcma。在某些实施方案中,抗原结合分子包含(a)包含选自seqidno:13-20的氨基酸序列的vhcdr1;(b)包含选自seqidno:21-28的氨基酸序列的vhcdr2;(c)包含选自seqidno:29-36的氨基酸序列的vhcdr3;(d)包含选自seqidno:37-44的氨基酸序列的vlcdr1;(e)包含选自seqidno:45-52的氨基酸序列的vlcdr2;和/或(f)包含选自seqidno:53-60的氨基酸序列的vlcdr3。
在一个实施方案中,抗原结合分子包含(a)包含seqidno:13的氨基酸的vhcdr1;(b)包含seqidno:21的氨基酸序列的vhcdr2;(c)包含seqidno:29的氨基酸序列的vhcdr3;(d)包含seqidno:37的氨基酸序列的vlcdr1;(e)包含seqidno:45的氨基酸序列的vlcdr2;和/或(f)包含seqidno:53的氨基酸序列的vlcdr3。
在另一个实施方案中,抗原结合分子包含(a)包含seqidno:14的氨基酸的vhcdr1;(b)包含seqidno:22的氨基酸序列的vhcdr2;(c)包含seqidno:30的氨基酸序列的vhcdr3;(d)包含seqidno:38的氨基酸序列的vlcdr1;(e)包含seqidno:46的氨基酸序列的vlcdr2;和/或(f)包含seqidno:54的氨基酸序列的vlcdr3。
在另一个实施方案中,抗原结合分子包含(a)包含seqidno:15的氨基酸的vhcdr1;(b)包含seqidno:23的氨基酸序列的vhcdr2;(c)包含seqidno:31的氨基酸序列的vhcdr3;(d)包含seqidno:39的氨基酸序列的vlcdr1;(e)包含seqidno:47的氨基酸序列的vlcdr2;和/或(f)包含seqidno:55的氨基酸序列的vlcdr3。
在另一个实施方案中,抗原结合分子包含(a)包含seqidno:16的氨基酸的vhcdr1;(b)包含seqidno:24的氨基酸序列的vhcdr2;(c)包含seqidno:32的氨基酸序列的vhcdr3;(d)包含seqidno:40的氨基酸序列的vlcdr1;(e)包含seqidno:48的氨基酸序列的vlcdr2;和/或(f)包含seqidno:56的氨基酸序列的vlcdr3。
在另一个实施方案中,抗原结合分子包含(a)包含seqidno:17的氨基酸的vhcdr1;(b)包含seqidno:25的氨基酸序列的vhcdr2;(c)包含seqidno:33的氨基酸序列的vhcdr3;(d)包含seqidno:41的氨基酸序列的vlcdr1;(e)包含seqidno:49的氨基酸序列的vlcdr2;和/或(f)包含seqidno:57的氨基酸序列的vlcdr3。
在另一个实施方案中,抗原结合分子包含(a)包含seqidno:18的氨基酸的vhcdr1;(b)包含seqidno:26的氨基酸序列的vhcdr2;(c)包含seqidno:34的氨基酸序列的vhcdr3;(d)包含seqidno:42的氨基酸序列的vlcdr1;(e)包含seqidno:50的氨基酸序列的vlcdr2;和/或(f)包含seqidno:58的氨基酸序列的vlcdr3。
在另一个实施方案中,抗原结合分子包含(a)包含seqidno:19的氨基酸的vhcdr1;(b)包含seqidno:27的氨基酸序列的vhcdr2;(c)包含seqidno:35的氨基酸序列的vhcdr3;(d)包含seqidno:43的氨基酸序列的vlcdr1;(e)包含seqidno:51的氨基酸序列的vlcdr2;和/或(f)包含seqidno:59的氨基酸序列的vlcdr3。
在另一个实施方案中,抗原结合分子包含(a)包含seqidno:20的氨基酸的vhcdr1;(b)包含seqidno:28的氨基酸序列的vhcdr2;(c)包含seqidno:36的氨基酸序列的vhcdr3;(d)包含seqidno:44的氨基酸序列的vlcdr1;(e)包含seqidno:52的氨基酸序列的vlcdr2;和/或(f)包含seqidno:60的氨基酸序列的vlcdr3。
在某些实施方案中,抗原结合分子包含vh和vl,所述vh包含选自由seqidno:77-84组成的组的氨基酸序列,和所述vl包含选自由seqidno:85-92组成的组的氨基酸序列。在一个实施方案中,抗原结合分子包含vh和vl,所述vh包含seqidno:77的氨基酸序列和所述vl包含seqidno:85的氨基酸序列。在另一个实施方案中,抗原结合分子包含vh和vl,所述vh包含seqidno:78的氨基酸序列和所述vl包含seqidno:86的氨基酸序列。在另一个实施方案中,抗原结合分子包含vh和vl,所述vh包含seqidno:79的氨基酸序列和所述vl包含seqidno:87的氨基酸序列。在另一个实施方案中,抗原结合分子包含vh和vl,所述vh包含seqidno:80的氨基酸序列和所述vl包含seqidno:88的氨基酸序列。在另一个实施方案中,抗原结合分子包含vh和vl,所述vh包含seqidno:81的氨基酸序列和所述vl包含seqidno:89的氨基酸序列。在另一个实施方案中,抗原结合分子包含vh和vl,所述vh包含seqidno:82的氨基酸序列和所述vl包含seqidno:90的氨基酸序列。在另一个实施方案中,抗原结合分子包含vh和vl,所述vh包含seqidno:83的氨基酸序列和所述vl包含seqidno:91的氨基酸序列。在另一个实施方案中,抗原结合分子包含vh和vl,所述vh包含seqidno:84的氨基酸序列和所述vl包含seqidno:92的氨基酸序列。
在一个具体的实施方案中,本发明的多核苷酸包含与选自由seqidno:61-68组成的组的核苷酸序列至少约70%,至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列。在另一个实施方案中,本发明的多核苷酸包含与选自由seqidno:69-76组成的组的核苷酸序列至少约70%,至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列。
其他已知抗bcma抗体或其抗原结合分子可以用作包含本发明的thd的car或tcr的抗原结合分子。此类bcma抗体或其抗原结合分子的非限制性实例包括描述于2015年10月22日公开的wo2015158671a1和2016年1月28日公开的wo2016014565a2的抗体或抗原结合分子。
在一些实施方案中,抗原结合分子特异性结合cll-1。在某些实施方案中,抗原结合分子包含(a)包含选自seqidno:93-96的氨基酸序列的vhcdr1;(b)包含选自seqidno:97-100的氨基酸序列的vhcdr2;(c)包含选自seqidno:101-104的氨基酸序列的vhcdr3;(d)包含选自seqidno:105-108的氨基酸序列的vlcdr1;(e)包含选自seqidno:109-112的氨基酸序列的vlcdr2;和/或(f)包含选自seqidno:113-116的氨基酸序列的vlcdr3。
在一个实施方案中,抗原结合分子包含(a)包含seqidno:93的氨基酸的vhcdr1;(b)包含seqidno:97的氨基酸序列的vhcdr2;(c)包含seqidno:101的氨基酸序列的vhcdr3;(d)包含seqidno:105的氨基酸序列的vlcdr1;(e)包含seqidno:109的氨基酸序列的vlcdr2;和/或(f)包含seqidno:113的氨基酸序列的vlcdr3。
在一个实施方案中,抗原结合分子包含(a)包含seqidno:94的氨基酸的vhcdr1;(b)包含seqidno:98的氨基酸序列的vhcdr2;(c)包含seqidno:102的氨基酸序列的vhcdr3;(d)包含seqidno:106的氨基酸序列的vlcdr1;(e)包含seqidno:110的氨基酸序列的vlcdr2;和/或(f)包含seqidno:114的氨基酸序列的vlcdr3。
在一个实施方案中,抗原结合分子包含(a)包含seqidno:95的氨基酸的vhcdr1;(b)包含seqidno:99的氨基酸序列的vhcdr2;(c)包含seqidno:103的氨基酸序列的vhcdr3;(d)包含seqidno:107的氨基酸序列的vlcdr1;(e)包含seqidno:111的氨基酸序列的vlcdr2;和/或(f)包含seqidno:115的氨基酸序列的vlcdr3。
在一个实施方案中,抗原结合分子包含(a)包含seqidno:96的氨基酸的vhcdr1;(b)包含seqidno:100的氨基酸序列的vhcdr2;(c)包含seqidno:104的氨基酸序列的vhcdr3;(d)包含seqidno:108的氨基酸序列的vlcdr1;(e)包含seqidno:112的氨基酸序列的vlcdr2;和/或(f)包含seqidno:116的氨基酸序列的vlcdr3。
在某些实施方案中,抗原结合分子包含vh和vl,所述vh包含选自由seqidno:125-128组成的组的氨基酸序列和所述vl包含选自由seqidno:129-132组成的组的氨基酸序列。在一个实施方案中,抗原结合分子包含vh和vl,所述vh包含seqidno:125的氨基酸序列和所述vl包含seqidno:129的氨基酸序列。在另一个实施方案中,抗原结合分子包含vh和vl,所述vh包含seqidno:126的氨基酸序列和所述vl包含seqidno:130的氨基酸序列。在另一个实施方案中,抗原结合分子包含vh和vl,所述vh包含seqidno:127的氨基酸序列和所述vl包含seqidno:131的氨基酸序列。在另一个实施方案中,抗原结合分子包含vh和vl,所述vh包含seqidno:128的氨基酸序列和所述vl包含seqidno:132的氨基酸序列。
在一个具体的实施方案中,本发明的多核苷酸包含与选自由seqidno:117-120组成的组的核苷酸序列至少约70%,至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列。在另一个实施方案中,本发明的多核苷酸包含与选自由seqidno:121-124组成的组的核苷酸序列至少约70%,至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或约100%相同的核苷酸序列。
抗cll-1抗体或其抗原结合分子的其他实例包括描述于2016年1月28日公开的wo2016014535和2016年2月25日公开的us2016/0051651a1的抗体或抗原结合分子。
由本发明的多核苷酸编码的抗原结合分子可以为单链或双链。在一些实施方案中,抗原结合分子为单链。在某些实施方案中,抗原结合分子选自由以下各项组成的组:scfv、fab、fab′、fv、f(ab′)2、dab或它们的任何组合。在一个具体的实施方案中,抗原结合分子包含scfv。
在某些实施方案中,抗原结合分子包含单链,其中重链可变区和轻链可变区通过接头连接。在一些实施方案中,vh位于接头的n末端而vl位于接头的c末端。在其他实施方案中,vl位于接头的n末端而vh位于接头的c末端。在一些实施方案中,接头包含至少约5个,至少约8个,至少约10个,至少约13个,至少约15个,至少约18个,至少约20个,至少约25个,至少约30个,至少约35个,至少约40个,至少约45个,至少约50个,至少约60个,至少约70个,至少约80个,至少约90个或至少约100个氨基酸。在一些实施方案中,接头包含至少约18个氨基酸。在某些实施方案中,接头包含与氨基酸序列gstsgsgkpgsgegstkg(seqidno:12)或氨基酸序列ggggsggggsggggs(seqidno:237)至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或100%相同的氨基酸序列。在一个实施方案中,接头为whitlow接头。在某些实施方案中,结合分子包含单链,其中重链可变区和轻链可变区通过接头连接,其中接头包含seqidno:12的氨基酸序列。
在一些实施方案中,抗原结合分子以小于1x10-6m、小于1x10-7m、小于1x10-8m或小于1x10-9m的kd结合靶抗原(例如人bcma、人flt3或人cll-1)。在一个具体的实施方案中,抗原结合分子以小于1x10-7m的kd结合靶抗原(例如人bcma、人flt3或人cll-1)。在另一个实施方案中,抗原结合分子以小于1x10-8m的kd结合靶抗原(例如人bcma、人flt3或人cll-1)。在一些实施方案中,抗原结合分子以约1x10-7m、约2x10-7m、约3x10-7m、约4x10-7m、约5x10-7m、约6x10-7m、约7x10-7m、约8x10-7m、约9x10-7m、约1x10-8m、约2x10-8m、约3x10-8m、约4x10-8m、约5x10-8m、约6x10-8m、约7x10-8m、约8x10-8m、约9x10-8m、约1x10-9m、约2x10-9m、约3x10-9m、约4x10-9m、约5x10-9m、约6x10-9m、约7x10-9m、约8x10-9m、约9x10-9m、约1x10-10m或约5x10-10m的kd结合靶抗原(例如人bcma、人flt3或人cll-1)。在某些实施方案中,kd计算为koff/kon的商,并且如通过例如
在一些实施方案中,抗原结合分子以小于1x10-4m-1s-1、小于2x10-4m-1s-1、小于3x10-4m-1s-1、小于4x10-4m-1s-1、小于5x10-4m-1s-1、小于6x10-4m-1s-1、小于7x10-4m-1s-1、小于8x10-4m-1s-1、小于9x10-4m-1s-1、小于1x10-5m-1s-1、小于2x10-5m-1s-1、小于3x10-5m-1s-1、小于4x10-5m-1s-1、小于5x10-5m-1s-1、小于6x10-5m-1s-1、小于7x10-5m-1s-1、小于8x10-5m-1s-1、小于9x10-5m-1s-1、小于1x10-6m-1s-1、小于2x10-6m-1s-1、小于3x10-6m-1s-1、小于4x10-6m-1s-1、小于5x10-6m-1s-1、小于6x10-6m-1s-1、小于7x10-6m-1s-1、小于8x10-6m-1s-1、小于9x10-6m-1s-1或小于1x10-7m-1s-1的结合速率(kon)结合靶抗原(例如人bcma、人flt3或人cll-1)。在某些实施方案中,如通过例如
在一些实施方案中,抗原结合分子以小于1x10-2s-1、小于2x10-2s-1、小于3x10-2s-1、小于4x10-2s-1、小于5x10-2s-1、小于6x10-2s-1、小于7x10-2s-1、小于8x10-2s-1、小于9x10-2s-1、小于1x10-3s-1、小于2x10-3s-1、小于3x10-3s-1、小于4x10-3s-1、小于5x10-3s-1、小于6x10-3s-1、小于7x10-3s-1、小于8x10-3s-1、小于9x10-3s-1、小于1x10-4s-1、小于2x10-4s-1、小于3x10-4s-1、小于4x10-4s-1、小于5x10-4s-1、小于6x10-4s-1、小于7x10-4s-1、小于8x10-4s-1、小于9x10-4s-1、小于1x10-4s-1或小于5x10-4s-1的解离速率(koff)结合靶抗原(例如人bcma、人flt3或人cll-1)。在某些实施方案中,如通过例如
在一些实施方案中,多核苷酸编码tcr,其中tcr进一步包含第四互补决定区(cd4)。在某些实施方案中,多核苷酸编码tcr,其中tcr进一步包含恒定区。在一些实施方案中,恒定区选自以下各项的恒定区:igg1、igg2、igg3、igg4、iga、igd、ige和igm。
i.d.开关结构域(switchdomain)
应当领会,通过用自杀基因转导免疫细胞(含有一种或多种car或tcr)可以使不良事件最小化。也可以需要将诱导性“开(on)”或“加速器”开关掺入到免疫细胞中。适合的技术包括在用本发明的car构建体转导细胞之前、之后或同时使用诱导性胱天蛋白酶-9(美国申请2011/0286980)或胸苷激酶。导入自杀基因和/或“开”开关的另外的方法包括talens、锌指、rnai、sirna、shrna、反义技术和本领域已知的其他技术。
根据本发明,另外的开-关或其他类型的控制开关技术可以并入本文。这些技术可以采用二聚化结构域和任选此类结构域二聚化的活化剂。这些技术包括例如,wuetal.,science2014350(6258)描述的在某些细胞中利用fkbp/rapalog二聚化系统的那些,其内容通过引用整体并入本文。另外的二聚化对可以包括环孢霉素-a/亲环素受体、雌激素/雌激素受体(任选地使用他莫昔芬)、糖皮质激素/糖皮质激素受体、四环素/四环素受体、维生素d/维生素d受体。二聚化技术的其他实例可以在例如wo2014/127261、wo2015/090229、us2014/0286987、us2015/0266973、us2016/0046700、美国专利号8,486,693、us2014/0171649和us2012/0130076中找到,其内容进一步通过引用整体并入本文。
i.e.前导肽
在一些实施方案中,本发明的多核苷酸编码的car或tcr可以进一步包含前导肽(本文中也称为“信号肽”)。在某些实施方案中,前导肽包含与氨基酸序列malpvtalllplalllhaarp(seqidno:11)至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或100%相同的氨基酸序列。在一些实施方案中,前导肽包含seqidno:11的氨基酸序列。
在一些实施方案中,本发明的多核苷酸编码car或tcr,其中car或tcr包含前导肽(p)、抗原结合分子(b)、共刺激蛋白质的细胞外结构域(e)、跨膜结构域(t)、共刺激区(c)和活化结构域(a),其中car根据如下配置:p-b-e-t-c-a。在一些实施方案中,抗原结合分子包含vh和vl,其中car根据如下配置:p-vh-vl-e-t-c-a或p-vl-vh-e-t-c-a。在一些实施方案中,vh和vl通过接头(l)连接,其中car根据如下配置(从n-末端至c-末端):p-vh-l-vl-e-t-c-a或p-vh-l-vl-e-t-c-a。
在一些实施方案中,本发明的多核苷酸编码car,其中car包含与选自表2的氨基酸序列至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或100%相同的氨基酸序列。在某些实施方案中,本发明的多核苷酸编码car,其中car包含选自表2的氨基酸序列。
表2实例car序列
在一些实施方案中,本发明的多核苷酸编码car,其中car包含与选自由以下各项组成的组的氨基酸序列至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或100%相同的氨基酸序列:seqidno:134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154、156、158、160、162、164、166、168、178、180、190、192、202、204、214、216、226和228。在某些实施方案中,car包含选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:seqidno:134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154、156、158、160、162、164、166、168、178、180、190、192、202、204、214、216、226和228。
在一些实施方案中,本发明的多核苷酸包含与选自由以下各项组成的组的核苷酸序列至少约50%,至少约60%,至少约65%,至少约70%,至少约75%,至少约80%,至少约85%,至少约90%,至少约95%,至少约96%,至少约97%,至少约98%,至少约99%或100%相同的核苷酸序列:seqidno:133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159、161、163、165、167、177、179、189、191、201、203、213、215、225和227。在某些实施方案中,多核苷酸包含选自由以下各项组成的组的核苷酸序列:seqidno:133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159、161、163、165、167、177、179、189、191、201、203、213、215、225和227。
ii.载体、细胞和药物组合物
在某些方面,本文提供了包含本发明的多核苷酸的载体。在一些实施方案中,本发明涉及载体或一组载体,其如上所述,包含编码car或tcr的多核苷酸,该car或tcr包含截短铰链结构域(“thd”)。
本领域已知的任何载体可以适于本发明。在一些实施方案中,载体为病毒载体。在一些实施方案中,载体为逆转录病毒载体、dna载体、鼠白血病病毒载体、sfg载体、质粒、rna载体、腺病毒载体、杆状病毒载体、eb病毒载体、乳多空病毒载体、牛痘病毒载体、单纯疱疹病毒载体、腺病毒相关载体(aav)、慢病毒载体或它们的任何组合。
在实施方案中,本发明的内容中可以采用的载体为pgar并且具有如下编码序列:
pgar载体图谱如下所示:
适合的另外的例示性载体包括例如,pbabe-puro、pbabe-neolargetcdna、pbabe-hygro-htert、pmko.1gfp、mscv-ires-gfp、pmscvpig(puroiresgfp空质粒)、pmscv-loxp-dsred-loxp-egfp-puro-wpre、mscvires荧光素酶、pmig、mdh1-pgk-gfp_2.0、ttrmpvir、pmscv-ires-mcherryfp、pretroxgfpt2acre、prxtn、plncexp和plxin-luc。
在其他方面,本文提供了包含本发明的多核苷酸或载体的细胞。在一些实施方案中,本发明涉及细胞,例如体外细胞,其包含编码包含本文所述的tcd的car或tcr的多核苷酸。在其他实施方案中,本发明涉及细胞,例如体外细胞,其包含由包含本文所述的tcd的car或tcr编码的多肽。
对于本发明的多核苷酸、载体或多肽,任何细胞可以用作宿主细胞。在一些实施方案中,细胞可以为原核细胞、真菌细胞、酵母细胞或高等真核细胞例如哺乳动物细胞。适合的原核细胞包括但不限于,真细菌,例如革兰氏阴性或革兰氏阳性生物体,例如,肠杆菌科细菌(enterobactehaceae)例如
埃希氏菌(escherichia),例如大肠杆菌(e.coli);肠杆菌(enterobacter);欧文氏菌(erwinia);克雷伯氏菌(klebsiella);变形杆菌(proteus);沙门氏菌(salmonella),例如鼠伤寒沙门氏菌(salmonellatyphimurium);沙雷氏菌(serratia),例如褪色沙雷氏菌(serratiamarcescans)和志贺氏菌(shigella);芽孢杆菌(bacilli)例如枯草芽孢杆菌(b.subtilis)和地衣芽孢杆菌(b.licheniformis);假单胞菌(pseudomonas)例如铜绿假单胞菌(p.aeruginosa);和链霉菌(streptomyces)。在一些实施方案中,细胞为人细胞。在一些实施方案中,细胞为免疫细胞。在一些实施方案中,免疫细胞选自由以下各项组成的组:t细胞、b细胞、肿瘤浸润淋巴细胞(til)、tcr表达细胞、自然杀伤(nk)细胞、树突状细胞、粒细胞、先天淋巴样细胞、巨核细胞、单核细胞、巨噬细胞、血小板、胸腺细胞和髓样细胞。在一个实施方案中,免疫细胞为t细胞。在另一个实施方案中,免疫细胞为nk细胞。在某些实施方案中,t细胞为肿瘤浸润淋巴细胞(til)、自体t细胞、工程化自体t细胞(eacttm)、同种异体t细胞、异源t细胞,或它们的任何组合。
可以通过本领域已知的任何来源获得本发明的细胞。例如,t细胞可以在体外从造血干细胞群分化,或者可以从受试者获得t细胞。t细胞可以从例如外周血单核细胞、骨髓、淋巴结组织、脐带血、胸腺组织、来自感染部位的组织、腹水、胸腔积液、脾组织以及肿瘤获得。此外,t细胞可以源自本领域中可获得的一个或多个t细胞系。t细胞也可以使用本领域技术人员已知的任何数目的技术(例如ficolltm分离和/或单采术(apheresis))从受试者收集的血液单位取得。在某些实施方案中,通过单采术收集的细胞经清洗以去除血浆部分,并且放置于适当的缓冲液或介质中以进行后续处理。在一些实施方案中,用pbs清洗细胞。如应当领会的,可以例如通过使用半自动无逆流离心机(例如cobetm2991细胞处理器,baxtercytomatetm等)来使用清洗步骤。在一些实施方案中,将经清洗的细胞重悬于一种或多种生物相容性缓冲液,或含有或不含有缓冲液的其他盐溶液中。在某些实施方案中,除去单采样品中不需要的成分。分离用于t细胞疗法的t细胞的另外的方法公开于美国专利公开号2013/0287748,其通过引用整体并入本文。
在某些实施方案中,通过溶解红细胞和消耗单核细胞(例如经由percolltm梯度,通过使用离心来分离)从pbmc分离t细胞。在一些实施方案中,t细胞的特定亚群,例如cd4+、cd8+、cd28+、cd45ra+和cd45ro+t细胞可以通过本领域中已知的正或负选择技术进一步分离。例如,通过负选择进行的t细胞群富集可以使用针对经负选择的细胞所特有的表面标志物的抗体组合来完成。在一些实施方案中,可以使用细胞分选和/或经由负磁性免疫黏附或流式细胞术(其使用针对存在于经负选择的细胞上的细胞表面标志物的单克隆抗体混合物)进行选择。例如,为了通过负选择来富集cd4+细胞,单克隆抗体混合物通常包括针对cd8、cd11b、cd14、cd16、cd20和hla-dr的抗体。在某些实施方案中,使用流式细胞术和细胞分选来分离用于本发明中的感兴趣的细胞群。
在一些实施方案中,pbmc直接用于使用如本文所述的方法的免疫细胞的遗传修饰(例如car或tcr)。在某些实施方案中,分离pbmc后,可以进一步分离出t淋巴细胞,并在遗传修饰和/或扩增前或后将细胞毒性和辅助性t淋巴细胞两者分选成初始t细胞、记忆t细胞和效应t细胞亚群。
在一些实施方案中,通过鉴别与cd8+细胞的初始细胞、中央记忆细胞和效应细胞类型中每种相关联的细胞表面抗原来将cd8+细胞进一步分选成初始细胞、中央记忆细胞及效应细胞。在一些实施方案中,中央记忆t细胞的表型标志物的表达包括ccr7、cd3、cd28、cd45ro、cd62l和cd127并且为颗粒酶b阴性。在一些实施方案中,中央记忆t细胞为cd8+、cd45ro+和cd62l+t细胞。在一些实施方案中,效应t细胞为ccr7、cd28、cd62l和cd127阴性并且为颗粒酶b和穿孔蛋白阳性。在某些实施方案中,将cd4+t细胞进一步分选成亚群。例如,可以通过鉴别具有细胞表面抗原的细胞群将cd4+t辅助性细胞分选为初始细胞、中央记忆细胞和效应细胞。
在一些实施方案中,免疫细胞例如t细胞在分离后使用已知的方法进行遗传修饰,或者免疫细胞在经遗传修饰前在体外活化和扩增(或者,在祖细胞的情况下分化)。在另一个实施方案中,免疫细胞例如t细胞以本文所述的嵌合抗原受体进行遗传修饰(例如用包含一个或多个编码car的核苷酸序列的病毒载体转导),并然后在体外活化和/或扩增。用于活化和扩增t细胞的方法为本领域所已知并描述于例如美国专利号6,905,874;6,867,041;和6,797,514;以及pct公开号wo2012/079000,其内容通过引用整体并入本文。一般而言,此类方法包括将pbmc或分离的t细胞在具有适当的细胞因子(例如il-2)的培养基中与刺激剂和共刺激剂(例如抗cd3和抗cd28抗体,通常黏附在珠或其他表面)接触。黏附在相同珠上的抗cd3和抗cd28抗体充当“替代”抗原呈递细胞(apc)。一种实例为
在某些实施方案中,从供体受试者获得t细胞。在一些实施方案中,供体受试者为患有癌症或肿瘤的人类患者。在其他实施方案中,供体受试者为未患有癌症或肿瘤的人类患者。
本发明的其他方面涉及包含本文所述的多核苷酸、本文所述的载体、本文所述的多肽或本文所述的体外细胞的组合物。在一些实施方案中,组合物包含药学上可接受的载体、稀释剂、增溶剂、乳化剂、防腐剂和/或佐剂。在一些实施方案中,组合物包含赋形剂。在一个实施方案中,组合物包含编码包含本文所述的截短铰链结构域(“thd”)的car或tcr的多核苷酸。在另一个实施方案中,组合物包含含有由本发明的多核苷酸编码的tcd的car或tcr。在另一个实施方案中,组合物包含含有car或tcr(其包含本文所述的tcd)的t细胞。
在其他实施方案中,组合物经选择以用于肠胃外递送、用于吸入或用于通过消化道递送,例如口服。制备此类药学上可接受的组合物在本领域技术人员的能力内。在某些实施方案中,缓冲液用于将该组合物维持在生理ph或稍低的ph,通常在约5至约8的ph范围内。在某些实施方案中,当考虑肠胃外施用时,组合物为无热原、肠胃外可接受的水溶液形式,其包含在药学上可接受的媒介物中的具有或不具有另外的治疗剂的本文所述的组合物。在某些实施方案中,用于肠胃外注射的媒介物为无菌蒸馏水,其中将本文所述的组合物(具有或不具有至少一种另外的治疗剂)配制成经适当保存的无菌的等张溶液。在某些实施方案中,制备牵涉具有提供产品受控或持续释放的聚合化合物(例如聚乳酸或聚乙醇酸)、珠或脂质体的所需分子的制剂,然后该制剂经由贮存注射(depotinjection)来递送。在某些实施方案中,使用可植入的药物递送装置来导入所需分子。
iii.本发明的方法
本发明的另一方面涉及制造表达car或tcr的细胞的方法,其包含在适合的条件下用本文所公开的多核苷酸转导细胞。在一些实施方案中,如本文所公开的,方法包含用编码car或tcr的多核苷酸转导细胞。在一些实施方案中,方法包含用包含编码car或tcr的多核苷酸的载体转导细胞。
本发明的另一方面涉及诱导针对肿瘤的免疫的方法,其包含对受试者施用有效量的细胞,该细胞包含本文所述的多核苷酸、本文所述的载体或本文所述的car或tcr。在一个实施方案中,方法包含对受试者施用有效量的细胞,该细胞包含编码本文所公开的car或tcr的多核苷酸。在另一个实施方案中,方法包含对受试者施用有效量的包含载体的细胞,该载体包含编码本文所公开的car或tcr的多核苷酸。在另一个实施方案中,方法包含对受试者施用有效量的细胞,该细胞包含由本文所公开的多核苷酸编码的car或tcr。
本发明的另一方面涉及诱导受试者中免疫应答的方法,其包含施用有效量的本申请的经工程化改造的免疫细胞。在一些实施方案中,免疫应答为t细胞介导的免疫应答。在一些实施方案中,t细胞介导的免疫应答针对一种或多种靶细胞。在一些实施方案中,经工程化改造的免疫细胞包含car或tcr,其中car或tcr包含本公开中所述的thd。在一些实施方案中,靶细胞为肿瘤细胞。
本发明的另一方面涉及用于治疗或预防恶性肿瘤的方法,所述方法包含对有此需要的受试者施用有效量的至少一种免疫细胞,其中免疫细胞包含至少一种car或tcr,并且其中该car或tcr包含本文所述的thd。
本发明的另一方面涉及治疗有此需要的受试者中癌症的方法,其包含对受试者施用本文所公开的多核苷酸、载体、car或tcr、细胞或组合物。在一个实施方案中,方法包含施用编码car或tcr的多核苷酸。在另一个实施方案中,方法包含施用包含编码car或tcr的多核苷酸的载体。在另一个实施方案中,方法包含施用由本文所公开的多核苷酸编码的car或tcr。在另一个实施方案中,方法包含施用包含编码car或tcr的多核苷酸或包含编码car或tcr的多核苷酸的载体的细胞。
在一些实施方案中,治疗有此需要的受试者中癌症的方法包含t细胞疗法。在一个实施方案中,本发明的t细胞疗法为工程化自体细胞疗法(eacttm)。根据该实施方案,方法可以包括从患者收集血细胞。然后,分离的血细胞(例如t细胞)可以经工程化改造以表达本发明的car或tcr。在一个具体的实施方案中,将cart细胞或tcrt细胞施用于患者。在一些实施方案中,cart细胞或tcrt细胞治疗患者中的肿瘤或癌症。在一个实施方案中,cart细胞或tcrt细胞缩小肿瘤或癌症的尺寸。
在一些实施方案中,从患者获得用于t细胞疗法中的供体t细胞(例如用于自体t细胞疗法)。在其他实施方案中,从非患者的受试者获得用于t细胞疗法中的供体t细胞。
t细胞可以以治疗有效量施用。例如,t细胞的治疗有效量可以为至少约104个细胞、至少约105个细胞、至少约106个细胞、至少约107个细胞、至少约108个细胞、至少约109个细胞或至少约1010个细胞。在另一个实施方案中,t细胞的治疗有效量为约104个细胞、约105个细胞、约106个细胞、约107个细胞或约108个细胞。在一个具体的实施方案中,cart细胞或tcrt细胞的治疗有效量为约2x106个细胞/kg、约3x106个细胞/kg、约4x106个细胞/kg、约5x106个细胞/kg、约6x106个细胞/kg、约7x106个细胞/kg、约8x106个细胞/kg、约9x106个细胞/kg、约1x107个细胞/kg、约2x107个细胞/kg、约3x107个细胞/kg、约4x107个细胞/kg、约5x107个细胞/kg、约6x107个细胞/kg、约7x107个细胞/kg、约8x107个细胞/kg、或约9x107个细胞/kg。
iv.癌症治疗
本发明的方法可以用于治疗受试者中的癌症、缩小肿瘤尺寸、杀死肿瘤细胞、防止肿瘤细胞增殖、防止肿瘤生长、从患者消除肿瘤、防止肿瘤复发、防止肿瘤转移、诱导患者缓解或它们的任何组合。在某些实施方案中,方法诱导完整响应。在其他实施方案中,方法引起部分响应。
可以治疗的癌症包括未血管化、基本上尚未血管化或血管化的肿瘤。癌症也可以包括实体瘤或非实体瘤。在一些实施方案中,癌症为血液学癌症。在一些实施方案中,癌症为白细胞的癌症。在其他实施方案中,癌症为浆细胞的癌症。在一些实施方案中,癌症为白血病、淋巴瘤或骨髓瘤。在某些实施方案中,癌症为急性淋巴母细胞白血病(all)(包括非t细胞all)、急性淋巴细胞白血病(all)和噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(hlh)、b细胞幼淋巴细胞白血病、b细胞急性淋巴细胞白血病(“ball”)、母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤、伯基特淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病(cll)、慢性髓细胞性白血病(cml)、慢性髓样白血病(cml)、慢性或急性肉芽肿病、慢性或急性白血病、弥漫性大b细胞淋巴瘤、弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)、滤泡性淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤(fl)、毛细胞白血病、噬血细胞综合征(巨噬细胞活化综合征(mas)、霍奇金病、大细胞肉芽肿、白细胞黏附缺陷、恶性淋巴细胞增生性疾病、malt淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、边缘区淋巴瘤、意义不明的单克隆丙种球蛋白病(mgus)、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常和骨髓增生异常综合征(mds)、髓样疾病包括但不限于急性髓样白血病(aml)、非霍奇金淋巴瘤(nhl)、浆细胞增生性疾病(例如无症状性骨髓瘤(冒烟型多发性骨髓瘤或惰性骨髓瘤)、浆母细胞性淋巴瘤、浆细胞样树突状细胞肿瘤、浆细胞瘤(例如浆细胞恶液质;单发性骨髓瘤;单发性浆细胞瘤;髓外浆细胞瘤;和多发性浆细胞瘤)、poems综合征(克罗-深濑综合征;takatsuki病;pep综合征)、原发性纵隔大b细胞淋巴瘤(pmbc)、小细胞或大细胞滤泡性淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤(smzl)、系统性淀粉样蛋白轻链淀粉样变、t细胞急性淋巴细胞白血病(“tall”)、t细胞淋巴瘤、转化滤泡性淋巴瘤或瓦氏巨球蛋白血症,或它们的组合。
在一个实施方案中,癌症为骨髓瘤。在一个具体的实施方案中,癌症为多发性骨髓瘤。在另一个实施方案中,癌症为白血病。在一个实施方案中,癌症为急性髓样白血病。
在一些实施方案中,方法进一步包含施用化疗剂。在某些实施方案中,选择的化疗剂是淋巴消减(预调理)化疗剂。有益的预调理治疗方案以及相关的有益生物标志物描述于美国临时专利申请62/262,143和62/167,750,其通过引用整体并入本文。这些描述了例如调理需要t细胞疗法的患者的方法,包含对患者施用规定的有益剂量的环磷酰胺(200mg/m2/天-2000mg/m2/天)和规定剂量的氟达拉滨(20mg/m2/天-900mg/m2/天)。一种此类剂量方案牵涉治疗患者,包含每天对患者施用约500mg/m2/天的环磷酰胺和约60mg/m2/天的氟达拉滨,持续3天,然后对患者施用治疗有效量的工程化t细胞。
在其他实施方案中,抗原结合分子,转导的(或以其他方式工程化的)细胞(例如car或tcr)和化疗剂各自以有效治疗受试者的疾病或状况的量施用。
在某些实施方案中,包含本文所公开的表达car和/或tcr的免疫效应细胞的组合物可以与任何数目的化疗剂联合施用。化疗剂的实例包括烷化剂类(alkylatingagents),诸如塞替派(thiotepa)和环磷酰胺(cyclophosphamide)(cytoxantm);磺酸烷基酯类(alkylsulfonates),诸如白消安(busulfan)、英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan);氮丙啶类(aziridines),诸如苯佐替派(benzodepa)、卡波醌(carboquone)、美妥替派(meturedepa)和乌瑞替派(uredepa);乙撑亚胺类(ethylenimines)和甲基蜜胺类(methylamelamines),包括六甲蜜胺(altretamine)、三乙撑蜜胺(triethylenemelamine)、三乙撑磷酰胺(trietylenephosphoramide)、三乙撑硫代磷酰胺(triethylenethiophosphaoramide)和三羟甲蜜胺(trimethylolomelamineresume);氮芥类(nitrogenmustards),诸如苯丁酸氮芥(chlorambucil)、萘氮芥(chlornaphazine)、胆磷酰胺(cholophosphamide)、雌莫司汀(estramustine)、异环磷酰胺(ifosfamide)、双氯乙基甲胺(mechlorethamine)、盐酸氧氮芥(mechlorethamineoxidehydrochloride)、美法仑(melphalan)、新氮芥(novembichin)、苯芥胆甾醇(phenesterine)、泼尼莫司汀(prednimustine)、曲磷胺(trofosfamide)、尿嘧啶氮芥(uracilmustard);亚硝脲类(nitrosoureas),诸如卡莫司汀(carmustine)、氯脲菌素(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(lomustine)、尼莫司汀(nimustine)、雷莫司汀(ranimustine);抗生素类,诸如阿克拉霉素(aclacinomycin)、放线菌素(actinomycin)、氨茴霉素(anthramycin)、偶氮丝氨酸(azaserine)、博来霉素(bleomycin)、放线菌素c(cactinomycin)、加利车霉素(calicheamicin)、carabicin、洋红霉素(carminomycin)、嗜癌霉素(carzinophilin)、色霉素(chromomycin)、放线菌素d(dactinomycin)、柔红霉素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6-二氮-5-氧-l-正亮氨酸、多柔比星(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、伊达比星(idarubicin)、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素类(mitomycins)、霉酚酸(mycophenolicacid)、诺拉霉素(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycin)、培洛霉素(peplomycin)、泊非霉素(potfiromycin)、嘌呤霉素(puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑菌素(streptonigrin)、链佐星(streptozocin)、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、净司他丁(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin);抗代谢物类,诸如甲氨蝶呤、和5-氟尿嘧啶(5-fu);叶酸类似物,诸如二甲叶酸(denopterin)、甲氨蝶呤、蝶酰三谷氨酸(pteropterin)、三甲曲沙(trimetrexate);嘌呤类似物,诸如氟达拉滨(fludarabine)、6-巯基嘌呤(mercaptopurine)、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鸟嘌呤(thioguanine);嘧啶类似物,诸如安西他滨(ancitabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、6-氮尿苷、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、双脱氧尿苷(dideoxyuridine)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、依诺他滨(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)、5-fu;雄激素类,诸如卡鲁睾酮(calusterone)、丙酸屈他雄酮(dromostanolonepropionate)、表硫雄醇(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)、睾内酯(testolactone);抗肾上腺类,诸如氨鲁米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛司坦(trilostane);叶酸补充剂,诸如亚叶酸(folinicacid);醋葡醛内酯(aceglatone);醛磷酰胺糖苷(aldophosphamideglycoside);氨基乙酰丙酸(aminolevulinicacid);安吖啶(amsacrine);曲布赛(bestrabucil);比生群(bisantrene);依达曲沙(edatraxate);地磷酰胺(defosfamide);地美可辛(demecolcine);地吖醌(diaziquone);elfornithine;依利醋铵(elliptiniumacetate);依托格鲁(etoglucid);硝酸镓;羟脲(hydroxyurea);香菇多糖(lentinan);氯尼达明(lonidamine);米托胍腙(mitoguazone);米托蒽醌(mitoxantrone);莫哌达醇(mopidamol);二胺硝吖啶(nitracrine);鬼臼酸(podophyllinicacid);蛋氨氮芥(phenamet);吡柔比星(pirarubicin);洛索蒽醌(losoxantrone);2-乙基酰肼(ethylhydrazide);丙卡巴肼(procarbazine);
在一些实施方案中,在施用工程化细胞或核酸同时或之后一周内施用化疗剂。在其他实施方案中,在施用工程化细胞或核酸后1至4周或1周至1个月,1周至2个月,1周至3个月,1周至6个月,1周至9个月或1周至12个月施用化疗剂。在一些实施方案中,在施用细胞或核酸之前至少1个月施用化疗剂。在一些实施方案中,该方法还包含施用两种或更多种化疗剂。
多种另外的治疗剂可以与本文所述的组合物联合使用。例如,潜在有用的另外的治疗剂包括pd-1抑制剂,例如纳武单抗(nivolumab)
适合于与本发明组合使用的另外的治疗剂包括但不限于伊布替尼(ibrutinib)
在另外的实施方案中,与消炎剂一起施用包含含有car和/或tcr的免疫细胞的组合物。消炎剂或药物可以包括但不限于类固醇和糖皮质激素(包括倍他米松(betamethasone)、布地奈德(budesonide)、地塞米松(dexamethasone)、乙酸氢化可的松、氢化可的松、氢化可的松、甲泼尼龙(methylprednisolone)、泼尼松龙(prednisolone)、泼尼松(prednisone)、曲安西龙(triamcinolone))、非类固醇类消炎药(nsaids),包括阿司匹林(aspirin)、布洛芬(ibuprofen)、萘普生(naproxen)、甲氨蝶呤、柳氮磺胺吡啶、来氟米特(leflunomide)、抗tnf药物、环磷酰胺和麦考酚酯(mycophenolate)。例示性的nsaid包括布洛芬、萘普生、萘普生钠、cox-2抑制剂和唾液酸化物(sialylate)。例示性镇痛剂包括扑热息痛(acetaminophen)、羟考酮(oxycodone)、曲马多或盐酸丙氧芬(tramadolofproporxyphenehydrochloride)。例示性糖皮质激素包括可的松、地塞米松、氢化可的松、甲泼尼龙、泼尼松龙或泼尼松。例示性生物反应调节剂包括针对细胞表面标志物(例如cd4,cd5等)的分子、细胞因子抑制剂如tnf拮抗剂,(例如依那西普(etanercept)
在某些实施方案中,与细胞因子联合施用本文所述的组合物。如本文所用,“细胞因子”意指由一种细胞群释放的、作为细胞间介质对另一种细胞起作用的蛋白质。细胞因子的实例是淋巴因子、单核因子和传统的多肽激素。细胞因子中包括生长激素,如人生长激素,n-甲硫氨酰人生长激素和牛生长激素;甲状旁腺激素;甲状腺素;胰岛素;胰岛素原;松弛素;松弛素原;糖蛋白激素,如促卵泡激素(fsh)、促甲状腺激素(tsh)和黄体生成素(lh);肝生长因子(hgf);成纤维细胞生长因子(fgf);催乳素;胎盘催乳激素;缪勒管抑制物质(mullerian-inhibitingsubstance);小鼠促性腺激素相关肽;抑制素;激活素;血管内皮生长因子;整合素;血小板生成素(tpo);神经生长因子(ngf)如ngf-beta;血小板生长因子;转化生长因子(tgf)如tgf-alpha和tgf-beta;胰岛素样生长因子-i和-ii;促红细胞生成素(epo);骨诱导因子;干扰素如干扰素-alpha,beta和-gamma;集落刺激因子(csf),如巨噬细胞-csf(m-csf);粒细胞-巨噬细胞-csf(gm-csf);和粒细胞-csf(g-csf);白细胞介素(il),如il-1、il-1α、il-2、il-3、il-4、il-5、il-6、il-7、il-8、il-9、il-10、il-11、il-12;il-15,肿瘤坏死因子如tnf-alpha或tnf-beta;和其他多肽因子,包括lif和kit配体(kl)。如本文所用,术语细胞因子包括来自天然来源或来自重组细胞培养物的蛋白质,以及天然序列细胞因子的生物活性等同物。
本说明书中所提及的所有出版物、专利及专利申请以引用方式并入本文,其程度如同个别出版物、专利或专利申请各自被具体且单独地指明以引用方式并入本发明中。然而,本文的参考文献的引用不应被解释为承认该参考文献为本发明的现有技术。任何以引用方式被并入的参考文献中所提供的任何定义或术语与本文所提供的术语和讨论不同时,以本发明的术语和定义为准。
实施例
实施例1
通过用ecori和bamhi(neb)过夜消化10μgdna,使编码t7启动子、car构建体和beta珠蛋白稳定序列的质粒线性化。然后将dna用蛋白酶k(thermofisher,600u/ml)于50℃消化2小时,用苯酚/氯仿纯化,并通过添加乙酸钠和两倍体积的乙醇沉淀。然后将沉淀干燥,重悬于不含rna酶/dna酶的水中并使用nanodrop定量。然后按照制造商的说明使用mmessagemmachinet7ultra(thermofisher)将1μg的线性dna用于体外转录。进一步按照制造商的说明使用megaclearkit(thermofisher)纯化rna并使用nanodrop定量。使用琼脂糖凝胶上的迁移率评估mrna完整性。根据制造商的说明书,使用ficoll-paque密度离心从健康的供体leukopak(hemacare)中分离pbmc。使用在r10培养基中的okt3(50ng/ml,miltenyibiotec)+il-2(300iu/ml,
用编码抗flt3car的质粒电穿孔t细胞,所述flt3car包含10e3、2e7、8b5、4e9或11f11抗flt3结合分子以及选自全长铰链结构域(完整铰链结构域或“chd”)或截短铰链结构域(“thd”)的铰链结构域。然后将经电穿孔的抗flt3cart细胞与namalwa(flt3阴性)、eol1(flt3阳性)、hl60(flt3阳性)或mv4;11(flt3阳性)靶细胞以1∶1e∶t比率在r10培养基中共培养。共培养后16小时,通过lumihex(emdmillipore)分析来自namalwa(图4a-4f)、eol1(图4g-4l)、hl60(图4m-4r)和mv4;11(图4s-4x)的上清液的ifnγ(图4a、4b、4g、4h、4m、4n、4s和4t)、il-2(图4c、4d、4i、4j、4o、4p、4u和4v)和tnfα(图4e、4f、4k、4l、4q、4r、4w和4x)的产量。
通过cd3阴性细胞的碘化丙啶(pi)摄取的流式细胞术分析来评估靶细胞生存力。共培养后16小时,将经电穿孔的抗flt3cart细胞与namalwa(图5a-5b)、eol1(图5c-5d)、hl60(图5e-5f)和mv4;11(图5g-5h)靶细胞共培养。
实施例2
将含有不同的car构建体的第三代慢病毒转移载体连同virapower慢病毒包装混合物(lifetechnologies)一起使用以生成该慢病毒上清液。简言之,通过将15μg的dna和22.5μl的聚乙烯亚胺(polyethileneimine)(polysciences,1mg/ml)在600μl的optimem培养基中混合以生成转染混合物。将混合物于室温温育5分钟。同时,以胰蛋白酶处理293t细胞(atcc),计数,并将总计10x106个细胞与转染混合物一起铺在t75烧瓶中。转染三天后,收集上清液并通过0.45μm过滤器过滤,再储存于-80℃直至使用。根据制造商的说明,使用ficoll-paque密度离心从健康的供体leukopak(hemacare)分离pbmc。使用在r10培养基中的okt3(50ng/ml,miltenyibiotec)+il-2(300iu/ml,
用编码抗flt3cart细胞的慢病毒转导来自两个健康供体的t细胞,所述flt3car包含10e3、8b5或11f11结合分子以及选自完整铰链结构域(“chd”)、截短铰链结构域(“thd”)和cd8铰链结构域的铰链结构域。将经转导的t细胞与靶细胞以1∶1e∶t比率在r10培养基中共培养。共培养后16小时,通过luminex(emdmillipore)分析上清液的ifnγ(图7a-7b)、tnfα(图7c-7d)和il-2(图7e-7f)的产生。
通过cd3阴性细胞的碘化丙啶(pi)摄取的流式细胞术分析来评估靶细胞生存力。测量与namalwa(图8a)、eol1(图8b)、mv4;11(图8c)和hl60(图8d)靶细胞共培养的经慢病毒转导的cart细胞(来自两个健康供体)的平均细胞溶解活性。
为了评估响应表达flt3的靶细胞的cart细胞增殖,在与靶细胞以1∶1e∶t比率在r10培养基中共培养前用cfse标记t细胞。五天后,通过cfse稀释的流式细胞术分析来评估t细胞增殖。flt3cart细胞的增殖显示于图9a-9b中。
实施例3
为了检测体内抗白血病活性,生成flt3cart细胞以用于人aml的异种模型。用于人aml的异种模型的各种效应系的car表达显示于图10a-10d中。将荧光素酶标记的mv4;11细胞(2x106个细胞/动物)静脉内注射到5至6周龄的雌性nsg小鼠中。6天后,静脉内注射200μlpbs中的6x106个t细胞(~50%car+),使用生物发光成像每周测量动物的肿瘤负荷(图10e-10g)。通过注射对照(模拟品)或表达10e3-chd(图10h)、10e3-thd(图10i)或8b5-thd(图10j)的cart细胞实施存活分析。
实施例4
用编码抗cll-1car构建体24c8_hl-chdcar(包含共刺激蛋白质的完整铰链结构域)和24c8_hl-thdcar(包含共刺激蛋白质的截短铰链结构域)的质粒电穿孔t细胞。经电穿孔的t细胞的抗cll-1表达显示于图11a-11d。然后在mrna电穿孔6小时后将抗cll-1cart细胞与靶namalwa(atcc;cll-1阴性)、u937(atcc;cll-1阳性)、hl-60(atcc;cll-1阳性)、eol-1(sigma;cll-1阳性)、kg1a(atcc;cll-1阳性)和mv4;11(atcc;cll-1阳性)细胞以1∶1e∶t比率在r10培养基中培养。共培养后16小时,根据制造商的说明,通过luminex(emdmillipore)分析上清液的il-2(图12a)、ifnγ(图12b)和tnfα(图12c)的产量。
通过碘化丙啶(pi)摄取的流式细胞术分析来评估靶细胞生存力。将经电穿孔的抗cll-1cart细胞与namalwa(图13a)、mv4;11(图13b)、eol-1(图13c)、hl-60(图13d)或u937(图13e)靶细胞共培养16小时。正如所料,相对于对照,与抗cll-1cart细胞共培养的namalwa细胞显示靶细胞生存力几乎没有变化(图13a)。然而,相对于对照,在与24c8_hl-chd和24c8_hl-thdt细胞共培养的mv;411细胞中观察到增加的细胞溶解活性,其中在24c8_hl-thdt细胞共培养中观察到更大的靶细胞细胞溶解活性(图13b)。此外,相对于对照,在与24c8_hl-chd和24c8_hl-thdt细胞共培养的eol-1细胞中观察到增加的细胞溶解活性(图13c)。相对于对照,在与24c8_hl-chd和24c8_hl-thdt细胞共培养的hl-60细胞中观察到增加的细胞溶解活性(图13d)。相对于对照,在与24c8_hl-chd和24c8_hl-thdt细胞共培养的u937细胞中观察到增加的细胞溶解活性,其中在24c8_hl-thdt细胞共培养中观察到更大的靶细胞细胞溶解活性(图13e)。
实施例5
在t细胞刺激12天后,将用包含抗cll-1car构建体(具有共刺激蛋白质的截短铰链结构域(“thd”),10e3_thd或24c1_lh_thd)的慢病毒载体转导的t细胞与namalwa、u937、hl-60、eol-1、kg1a和mv4;11靶细胞以1∶1e∶t比率在r10培养基中共培养。共培养后16小时,根据制造商的说明,如图所示,通过luminex(emdmillipore)分析上清液的效应10e3_thdcart细胞和24c1_lh_thdcart细胞与靶namalwa、hl-60或mva;11细胞的共培养物中细胞因子ifnγ(图14a)、il-2(图14b)和tnfα(图14c)的产生。
通过碘化丙啶(pi)摄取的流式细胞术分析来评估靶细胞生存力。将经转导的效应24c1_lh_thdcart细胞与namalwa、u937、hl-60、eol-1、kg1a或mv4;11靶细胞共培养16小时或40小时。与模拟品对照相比,namalwa靶细胞与经转导的c1_24c1_lh_thdcart细胞的共培养物在16小时和40小时对活的namalwa靶细胞的百分比没有影响(图15a)。然而,与模拟品对照相比,与mv4;11(图15b)或hl-60(图15c)靶细胞共培养的c1_24c1_lh_thdcart细胞在16小时和40小时两者都导致较低百分比的活的靶细胞。
实施例6
在t细胞刺激12天后,将用包含共刺激蛋白质的截短铰链结构域(“thd”)的抗bcmacar构建体转导的cart细胞与靶细胞以1∶1效应细胞比靶细胞(e∶t)的比率在r10培养基中培养。经测试的细胞系包括eol-1(sigma;bcma阴性)、nci-h929(molecularimaging;bcma阳性)和mm1s(molecularimaging;bcma阳性)。共培养后16小时,根据制造商的说明,通过luminex(emdmillipore)分析上清液的细胞因子ifnγ(图16a-16b)、tnfα(图16c-16d)和il-2(图16e-16f)的产生。对于在两个供体(图16a-16b)中测试的每种抗bcmacart细胞,在nci-h929和mm1s靶细胞共培养物的上清液中观察到ifnγ(图16a-16b)、tnfα(图16c-16d)和il-2(图16e-16f);然而,对于ir阴性对照t细胞(图16a),仅在eol-1靶细胞共培养物的上清液中观察到高于背景的ifnγ(图16a-16b)、tnfα(图16c-16d)和il-2(图16e-16f)。
通过cd3阴性细胞的碘化丙啶(pi)摄取的流式细胞术分析来评估靶细胞生存力。将抗bcmacart细胞与eol1(图17a-17b)、nci-h929(图17c-17d)或mm1s(图17e-17f)靶细胞共培养16小时、40小时、64小时、88小时或112小时。在抗bcmacart细胞的任何时间段,在eol-1共培养物中观察到很少的细胞溶解活性(图17a-17b)。然而,抗bcmacart细胞与nci-h929或mm1s靶细胞的共培养导致对于每种抗bcmacart细胞测量的每个时间点的活的靶细胞的百分比降低。
为了检测增殖,在与eol-1、nci-h929或mm1s靶细胞以1∶1e∶t比率在r10培养基中共培养之前,用羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(cfse)标记抗bcmacart细胞。五天后,通过cfse稀释的流式细胞术分析来评估t细胞增殖(图18a-18b)。
实施例7
增强的稳定性是蛋白质的期望性质。这通常通过在各种条件下测定蛋白质的解链温度来评估。具有较高解链温度的蛋白质通常稳定较长时间。当car具有更高的热稳定性时,其可以在细胞的表面上较长时间地具有功能活性。
使用bio-radc1000热循环仪,cfx96实时系统测量具有较长铰链结构域,即完整铰链结构域(“chd”)的car细胞外结构域(ecd)的热稳定性和具有截短铰链结构域(“thd”)的carecd的热稳定性。使用荧光染料syproorange(invitrogen)监测蛋白质的解折叠,该荧光染料与疏水氨基酸结合,随着蛋白质解折叠,疏水氨基酸变为溶剂暴露。设定温度梯度为25℃至95℃,增量为1℃/1分钟。每个样品含有10μm重组carecd蛋白质和5xsyproorange(molecularprobestmsyprotmorange蛋白质凝胶染色(dmso中5,000x浓缩液))。在含有或不含有50mmnacl的pbs中实施测定。
如图19a和图19b中所示,具有thd的car的ecd与具有chd(例如包括ievmypppy(seqidno:250)基序)的car的ecd相比,显示增强的热稳定性。在该实施例中描述的这些方法是用于测试编码car的mrna和car本身的稳定性的有用方法,因为一旦用编码car的mrna转导t细胞,经转导的t细胞将表达car而单个mrna或蛋白质的稳定性将不易评估。
序列表
<110>凯德药业股份有限公司
<120>嵌合抗原和t细胞受体及使用的方法
<130>k-1031.02
<150>us62/317,258
<151>2016-04-01
<160>251
<170>patentinversion3.5
<210>1
<211>220
<212>prt
<213>人
<400>1
metleuargleuleuleualaleuasnleupheproserileglnval
151015
thrglyasnlysileleuvallysglnserprometleuvalalatyr
202530
aspasnalavalasnleusercyslystyrsertyrasnleupheser
354045
argglupheargalaserleuhislysglyleuaspseralavalglu
505560
valcysvalvaltyrglyasntyrserglnglnleuglnvaltyrser
65707580
lysthrglypheasncysaspglylysleuglyasngluservalthr
859095
phetyrleuglnasnleutyrvalasnglnthraspiletyrphecys
100105110
lysilegluvalmettyrproproprotyrleuaspasnglulysser
115120125
asnglythrileilehisvallysglylyshisleucysproserpro
130135140
leupheproglyproserlysprophetrpvalleuvalvalvalgly
145150155160
glyvalleualacystyrserleuleuvalthrvalalapheileile
165170175
phetrpvalargserlysargserargleuleuhisserasptyrmet
180185190
asnmetthrproargargproglyprothrarglyshistyrglnpro
195200205
tyralaproproargaspphealaalatyrargser
210215220
<210>2
<211>90
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>铰链结构域
<400>2
cttgataatgaaaagtcaaacggaacaatcattcacgtgaagggcaagcacctctgtccg60
tcacccttgttccctggtccatccaagcca90
<210>3
<211>30
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>铰链结构域
<400>3
leuaspasnglulysserasnglythrileilehisvallysglylys
151015
hisleucysproserproleupheproglyproserlyspro
202530
<210>4
<211>81
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>tm结构域
<400>4
ttctgggtgttggtcgtagtgggtggagtcctcgcttgttactctctgctcgtcaccgtg60
gcttttataatcttctgggtt81
<210>5
<211>27
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>tm结构域
<400>5
phetrpvalleuvalvalvalglyglyvalleualacystyrserleu
151015
leuvalthrvalalapheileilephetrpval
2025
<210>6
<211>123
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>信号传导/共刺激结构域
<400>6
agatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccct60
ggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcgg120
agc123
<210>7
<211>41
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>信号传导/共刺激结构域
<400>7
argserlysargserargleuleuhisserasptyrmetasnmetthr
151015
proargargproglyprothrarglyshistyrglnprotyralapro
202530
proargaspphealaalatyrargser
3540
<210>8
<211>336
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>cd3z活化结构域
<400>8
agggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactg60
tataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcagagga120
cgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctataat180
gagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagagcgg240
agaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggatact300
tatgacgctctccacatgcaagccctgccacctagg336
<210>9
<211>112
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>cd3z活化结构域
<400>9
argvallyspheserargseralaaspalaproalatyrglnglngly
151015
glnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyr
202530
aspvalleuasplysargargglyargaspproglumetglyglylys
354045
proargarglysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlys
505560
asplysmetalaglualatyrsergluileglymetlysglygluarg
65707580
argargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthrala
859095
thrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
100105110
<210>10
<211>63
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>信号(前导)肽
<400>10
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccg63
<210>11
<211>21
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>信号(前导)肽
<400>11
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargpro
20
<210>12
<211>18
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>接头
<400>12
glyserthrserglyserglylysproglyserglygluglyserthr
151015
lysgly
<210>13
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr1
<400>13
glyphethrphesersertyr
15
<210>14
<211>6
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr1
<400>14
phethrphesersertyr
15
<210>15
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr1
<400>15
glytyrthrphethrsertyr
15
<210>16
<211>9
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr1
<400>16
glyglyserilesersersersertyr
15
<210>17
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr1
<400>17
glyphethrphesersertyr
15
<210>18
<211>10
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr1
<400>18
glyphethrphesersertyrglymethis
1510
<210>19
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr1
<400>19
glyglythrphesersertyr
15
<210>20
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr1
<400>20
glyphethrphesersertyr
15
<210>21
<211>6
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr2
<400>21
serglyserglyglyser
15
<210>22
<211>15
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr2
<400>22
sertyraspglyserasnlystyrtyralaaspservallysgly
151015
<210>23
<211>6
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr2
<400>23
asnproglyglyglyser
15
<210>24
<211>5
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr2
<400>24
sertyrserglyser
15
<210>25
<211>6
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr2
<400>25
serserserserserthr
15
<210>26
<211>6
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr2
<400>26
sertyraspglyserasn
15
<210>27
<211>6
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr2
<400>27
ileproilepheglythr
15
<210>28
<211>6
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr2
<400>28
sertyraspglyserasn
15
<210>29
<211>9
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr3
<400>29
alaglumetglyalavalpheaspile
15
<210>30
<211>13
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr3
<400>30
aspglythrtyrleuglyglyleutrptyrpheaspleu
1510
<210>31
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr3
<400>31
glusertrpprometaspval
15
<210>32
<211>12
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr3
<400>32
glyargglytyralathrserleualapheaspile
1510
<210>33
<211>10
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr3
<400>33
glyserglngluhisleuilepheasptyr
1510
<210>34
<211>13
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr3
<400>34
thraspphetrpserglyserproproglyleuasptyr
1510
<210>35
<211>17
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr3
<400>35
thrproglutyrserserseriletrphistyrtyrtyrglymetasp
151015
val
<210>36
<211>14
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr3
<400>36
glyproleuglngluproprotyrasptyrglymetaspval
1510
<210>37
<211>11
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr1
<400>37
argalaserglnservalserargtyrleuala
1510
<210>38
<211>16
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr1
<400>38
argserserglnserleuleuhisserasnglytyrasntyrleuasp
151015
<210>39
<211>11
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr1
<400>39
argalaserglnservalserserasnleuala
1510
<210>40
<211>11
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr1
<400>40
argalaserglnservalsersertyrleuala
1510
<210>41
<211>11
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr1
<400>41
argalaserglnservalserargtyrleuala
1510
<210>42
<211>11
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr1
<400>42
argalaserglnglyilesersertrpleuala
1510
<210>43
<211>17
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr1
<400>43
lysserserglnservalleutyrserserasnasnlysasntyrleu
151015
ala
<210>44
<211>11
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr1
<400>44
argalaserglnservalserserasnleuala
1510
<210>45
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr2
<400>45
aspalaserasnargalathr
15
<210>46
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr2
<400>46
leuglyserasnargalaser
15
<210>47
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr2
<400>47
glyalaserthrargalathr
15
<210>48
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr2
<400>48
aspalaserasnargalathr
15
<210>49
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr2
<400>49
aspalaserasnargalathr
15
<210>50
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr2
<400>50
glyalaserserleuglnser
15
<210>51
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr2
<400>51
trpalaserthrarggluser
15
<210>52
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr2
<400>52
seralaserthrargalathr
15
<210>53
<211>9
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr3
<400>53
glnglnargilesertrpprophethr
15
<210>54
<211>9
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr3
<400>54
metglnglyleuglyleuproleuthr
15
<210>55
<211>8
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr3
<400>55
glnglntyralaalatyrprothr
15
<210>56
<211>9
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr3
<400>56
glnglnarghisvaltrpproprothr
15
<210>57
<211>9
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr3
<400>57
glnglnargphetyrtyrprotrpthr
15
<210>58
<211>9
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr3
<400>58
glnglniletyrthrpheprophethr
15
<210>59
<211>9
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr3
<400>59
glnglnphealahisthrprophethr
15
<210>60
<211>9
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr3
<400>60
glnglnhishisvaltrpproleuthr
15
<210>61
<211>354
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vhdna
<400>61
gaggtgcagctgttggagtctgggggaggcttggtacagcctggggggtccctgagactc60
tcctgtgcagcctctggattcacctttagcagctatgccatgagctgggtccgccaggct120
ccagggaaggggctggagtgggtctcagctattagtggtagtggtggtagcacatactac180
gcagactccgtgaagggccggttcaccatctccagagacaattccaagaacacgctgtat240
ctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggcggtgtactactgcgcaagagccgag300
atgggagccgtattcgacatatggggtcagggtacaatggtcaccgtctcctca354
<210>62
<211>366
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vhdna
<400>62
caggtgcagctggtggagtctgggggaggcgtggtccagcctgggaggtccctgagactc60
tcctgtgcagcgtctggattcaccttcagtagctatggcatgcactgggtccgccaggct120
ccaggcaaggggctggagtgggtggcagttatatcgtatgatggaagtaataaatactat180
gcagactccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaattccaagaacacgctgtat240
ctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggcggtgtactactgcgccagagacggt300
acttatctaggtggtctctggtacttcgacttatgggggagaggtaccttggtcaccgtc360
tcctca366
<210>63
<211>348
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vhdna
<400>63
caggtgcagctggtgcagtctggggctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtt60
tcctgcaaggcatctggatacaccttcaccagctactatatgcactgggtgcgacaggcc120
cctggacaagggcttgagtggatgggaataatcaaccctggtggtggtagcacaagctac180
gcacagaagttccagggcagagtcaccatgaccagggacacgtccacgagcacagtctac240
atggagctgagcagcctgagatctgaggacacggcggtgtactactgcgccagagagagt300
tggccaatggacgtatggggccagggaacaactgtcaccgtctcctca348
<210>64
<211>366
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vhdna
<400>64
cagctgcagctgcaggagtcgggcccaggactggtgaagccttcggagaccctgtccctc60
acctgcactgtctctggtggctccatcagcagtagtagttactactggggctggatccgc120
cagcccccagggaaggggctggagtggattgggagtatctcctatagtgggagcacctac180
tacaacccgtccctcaagagtcgagtcaccatatccgtagacacgtccaagaaccagttc240
tccctgaagctgagttctgtgaccgccgcagacacggcggtgtactactgcgccagaggc300
aggggatatgcaaccagcttagccttcgatatctggggtcagggtacaatggtcaccgtc360
tcctca366
<210>65
<211>357
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vhdna
<400>65
gaggtgcagctggtggagtctgggggaggcttggtacagcctggggggtccctgagactc60
tcctgtgcagcctctggattcaccttcagtagctatagcatgaactgggtccgccaggct120
ccagggaaggggctggagtgggtttcaaccattagtagtagtagtagtaccatatactac180
gcagactctgtgaagggccgattcaccatctccagagacaatgccaagaactcactgtat240
ctgcaaatgaacagcctgagagctgaggacacggcggtgtactactgcgccagaggttct300
caggagcacctgattttcgattattggggacagggtacattggtcaccgtctcctca357
<210>66
<211>366
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vhdna
<400>66
caggtgcagctggtggagtctgggggaggcgtggtccagcctgggaggtccctgagactc60
tcctgtgcagcgtctggattcaccttcagtagctatggcatgcactgggtccgccaggct120
ccaggcaaggggctggagtgggtggcagttatatcgtatgatggaagtaataaatactat180
gcagactccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaattccaagaacacgctgtat240
ctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggcggtgtactactgcgccagaactgac300
ttctggagcggatcccctccaggcttagattactggggacagggtacattggtcaccgtc360
tcctca366
<210>67
<211>378
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vhdna
<400>67
caggtgcagctggtgcagtctggggctgaggtgaagaagcctgggtcctcggtgaaggtc60
tcctgcaaggcttctggaggcaccttcagcagctatgctatcagctgggtgcgacaggcc120
cctggacaagggcttgagtggatgggagggatcatccctatctttggtacagcaaactac180
gcacagaagttccagggcagagtcacgattaccgcggacgaatccacgagcacagcctac240
atggagctgagcagcctgagatctgaggacacggcggtgtactactgcgccagaactcct300
gaatactcctccagcatatggcactattactacggcatggacgtatggggccagggaaca360
actgtcaccgtctcctca378
<210>68
<211>369
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vhdna
<400>68
caggtgcagctggtggagtctgggggaggcgtggtccagcctgggaggtccctgagactc60
tcctgtgcagcgtctggattcaccttcagtagctatggcatgcactgggtccgccaggct120
ccaggcaaggggctggagtgggtggcagttatatcgtatgatggaagtaataaatactat180
gcagactccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaattccaagaacacgctgtat240
ctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggcggtgtactactgcgtcaaggggccg300
ttgcaggagccgccatacgattatggaatggacgtatggggccagggaacaactgtcacc360
gtctcctca369
<210>69
<211>321
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vldna
<400>69
gaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccacc60
ctctcctgcagggccagtcagagtgttagcaggtacttagcctggtaccaacagaaacct120
ggccaggctcccaggctcctcatctatgatgcatccaacagggccactggcatcccagcc180
aggttcagtggcagtgggtctgggacagacttcactctcaccatcagcagcctagagcct240
gaagattttgcagtttattactgtcagcagagaatctcctggcctttcacttttggcgga300
gggaccaaggttgagatcaaa321
<210>70
<211>336
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vldna
<400>70
gatattgtgatgactcagtctccactctccctgcccgtcacccctggagagccggcctcc60
atctcctgcaggtctagtcagagcctcctgcatagtaatggatacaactatttggattgg120
tacctgcagaagccagggcagtctccacagctcctgatctatttgggttctaatcgggcc180
tccggggtccctgacaggttcagtggcagtggatcaggcacagattttacactgaaaatc240
agcagagtggaggctgaggatgttggggtttattactgcatgcagggactcggcctccct300
ctcacttttggcggagggaccaaggttgagatcaaa336
<210>71
<211>318
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vldna
<400>71
gaaatagtgatgacgcagtctccagccaccctgtctgtgtctccaggggaaagagccacc60
ctctcctgcagggccagtcagagtgttagcagcaacttagcctggtaccagcagaaacct120
ggccaggctcccaggctcctcatctatggtgcatccaccagggccactggtatcccagcc180
aggttcagtggcagtgggtctgggacagagttcactctcaccatcagcagcctgcagtct240
gaagattttgcagtttattactgtcagcagtacgccgcctaccctacttttggcggaggg300
accaaggttgagatcaaa318
<210>72
<211>321
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vldna
<400>72
gaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccacc60
ctctcctgcagggccagtcagagtgttagcagctacttagcctggtaccaacagaaacct120
ggccaggctcccaggctcctcatctatgatgcatccaacagggccactggcatcccagcc180
aggttcagtggcagtgggtctgggacagacttcactctcaccatcagcagcctagagcct240
gaagattttgcagtttattactgtcagcagagacacgtctggcctcctacttttggcgga300
gggaccaaggttgagatcaaa321
<210>73
<211>321
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vldna
<400>73
gaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccacc60
ctctcctgcagggccagtcagagtgttagcaggtacttagcctggtaccaacagaaacct120
ggccaggctcccaggctcctcatctatgatgcatccaacagggccactggcatcccagcc180
aggttcagtggcagtgggtctgggacagacttcactctcaccatcagcagcctagagcct240
gaagattttgcagtttattactgtcagcagagattctactacccttggacttttggcgga300
gggaccaaggttgagatcaaa321
<210>74
<211>321
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vldna
<400>74
gacatccagttgacccagtctccatcttccgtgtctgcatctgtaggagacagagtcacc60
atcacttgtcgggcgagtcagggtattagcagctggttagcctggtatcagcagaaacca120
gggaaagcccctaagctcctgatctatggtgcatccagtttgcaaagtggggtcccatca180
aggttcagcggcagtggatctgggacagatttcactctcaccatcagcagcctgcagcct240
gaagattttgcaacttattactgtcagcagatatacaccttccctttcacttttggcgga300
gggaccaaggttgagatcaaa321
<210>75
<211>339
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vldna
<400>75
gacatcgtgatgacccagtctccagactccctggctgtgtctctgggcgagagggccacc60
atcaactgcaagtccagccagagtgttttatacagctccaacaataagaactacttagct120
tggtaccagcagaaaccaggacagcctcctaagctgctcatttactgggcatctacccgg180
gaatccggggtccctgaccgattcagtggcagcgggtctgggacagatttcactctcacc240
atcagcagcctgcaggctgaagatgtggcagtttattactgtcagcagttcgcccacact300
cctttcacttttggcggagggaccaaggttgagatcaaa339
<210>76
<211>321
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vldna
<400>76
gaaatagtgatgacgcagtctccagccaccctgtctgtgtctccaggggaaagagccacc60
ctctcctgcagggccagtcagagtgttagcagcaacttagcctggtaccagcagaaacct120
ggccaggctcccaggctcctcatctatagcgcatccaccagggccactggtatcccagcc180
aggttcagtggcagtgggtctgggacagagttcactctcaccatcagcagcctgcagtct240
gaagattttgcagtttattactgtcagcagcaccacgtctggcctctcacttttggcgga300
gggaccaaggttgagatcaaa321
<210>77
<211>118
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vh蛋白质
<400>77
gluvalglnleuleugluserglyglyglyleuvalglnproglygly
151015
serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr
202530
alametsertrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval
354045
seralaileserglyserglyglyserthrtyrtyralaaspserval
505560
lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyr
65707580
leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys
859095
alaargalaglumetglyalavalpheaspiletrpglyglnglythr
100105110
metvalthrvalserser
115
<210>78
<211>122
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vh蛋白质
<400>78
glnvalglnleuvalgluserglyglyglyvalvalglnproglyarg
151015
serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr
202530
glymethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval
354045
alavalilesertyraspglyserasnlystyrtyralaaspserval
505560
lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyr
65707580
leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys
859095
alaargaspglythrtyrleuglyglyleutrptyrpheaspleutrp
100105110
glyargglythrleuvalthrvalserser
115120
<210>79
<211>116
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vh蛋白质
<400>79
glnvalglnleuvalglnserglyalagluvallyslysproglyala
151015
servallysvalsercyslysalaserglytyrthrphethrsertyr
202530
tyrmethistrpvalargglnalaproglyglnglyleuglutrpmet
354045
glyileileasnproglyglyglyserthrsertyralaglnlysphe
505560
glnglyargvalthrmetthrargaspthrserthrserthrvaltyr
65707580
metgluleuserserleuargsergluaspthralavaltyrtyrcys
859095
alaargglusertrpprometaspvaltrpglyglnglythrthrval
100105110
thrvalserser
115
<210>80
<211>122
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vh蛋白质
<400>80
glnleuglnleuglngluserglyproglyleuvallysproserglu
151015
thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserileserserser
202530
sertyrtyrtrpglytrpileargglnproproglylysglyleuglu
354045
trpileglyserilesertyrserglyserthrtyrtyrasnproser
505560
leulysserargvalthrileservalaspthrserlysasnglnphe
65707580
serleulysleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyr
859095
cysalaargglyargglytyralathrserleualapheaspiletrp
100105110
glyglnglythrmetvalthrvalserser
115120
<210>81
<211>119
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vh蛋白质
<400>81
gluvalglnleuvalgluserglyglyglyleuvalglnproglygly
151015
serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr
202530
sermetasntrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval
354045
serthrileserserserserserthriletyrtyralaaspserval
505560
lysglyargphethrileserargaspasnalalysasnserleutyr
65707580
leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys
859095
alaargglyserglngluhisleuilepheasptyrtrpglyglngly
100105110
thrleuvalthrvalserser
115
<210>82
<211>122
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vh蛋白质
<400>82
glnvalglnleuvalgluserglyglyglyvalvalglnproglyarg
151015
serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr
202530
glymethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval
354045
alavalilesertyraspglyserasnlystyrtyralaaspserval
505560
lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyr
65707580
leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys
859095
alaargthraspphetrpserglyserproproglyleuasptyrtrp
100105110
glyglnglythrleuvalthrvalserser
115120
<210>83
<211>126
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vh蛋白质
<400>83
glnvalglnleuvalglnserglyalagluvallyslysproglyser
151015
servallysvalsercyslysalaserglyglythrphesersertyr
202530
alailesertrpvalargglnalaproglyglnglyleuglutrpmet
354045
glyglyileileproilepheglythralaasntyralaglnlysphe
505560
glnglyargvalthrilethralaaspgluserthrserthralatyr
65707580
metgluleuserserleuargsergluaspthralavaltyrtyrcys
859095
alaargthrproglutyrserserseriletrphistyrtyrtyrgly
100105110
metaspvaltrpglyglnglythrthrvalthrvalserser
115120125
<210>84
<211>123
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vh蛋白质
<400>84
glnvalglnleuvalgluserglyglyglyvalvalglnproglyarg
151015
serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr
202530
glymethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval
354045
alavalilesertyraspglyserasnlystyrtyralaaspserval
505560
lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyr
65707580
leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys
859095
vallysglyproleuglngluproprotyrasptyrglymetaspval
100105110
trpglyglnglythrthrvalthrvalserser
115120
<210>85
<211>107
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vl蛋白质
<400>85
gluilevalleuthrglnserproalathrleuserleuserprogly
151015
gluargalathrleusercysargalaserglnservalserargtyr
202530
leualatrptyrglnglnlysproglyglnalaproargleuleuile
354045
tyraspalaserasnargalathrglyileproalaargphesergly
505560
serglyserglythraspphethrleuthrileserserleuglupro
65707580
gluaspphealavaltyrtyrcysglnglnargilesertrpprophe
859095
thrpheglyglyglythrlysvalgluilelys
100105
<210>86
<211>112
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vl蛋白质
<400>86
aspilevalmetthrglnserproleuserleuprovalthrprogly
151015
gluproalaserilesercysargserserglnserleuleuhisser
202530
asnglytyrasntyrleuasptrptyrleuglnlysproglyglnser
354045
proglnleuleuiletyrleuglyserasnargalaserglyvalpro
505560
aspargpheserglyserglyserglythraspphethrleulysile
65707580
serargvalglualagluaspvalglyvaltyrtyrcysmetglngly
859095
leuglyleuproleuthrpheglyglyglythrlysvalgluilelys
100105110
<210>87
<211>106
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vl蛋白质
<400>87
gluilevalmetthrglnserproalathrleuservalserprogly
151015
gluargalathrleusercysargalaserglnservalserserasn
202530
leualatrptyrglnglnlysproglyglnalaproargleuleuile
354045
tyrglyalaserthrargalathrglyileproalaargphesergly
505560
serglyserglythrgluphethrleuthrileserserleuglnser
65707580
gluaspphealavaltyrtyrcysglnglntyralaalatyrprothr
859095
pheglyglyglythrlysvalgluilelys
100105
<210>88
<211>107
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vl蛋白质
<400>88
gluilevalleuthrglnserproalathrleuserleuserprogly
151015
gluargalathrleusercysargalaserglnservalsersertyr
202530
leualatrptyrglnglnlysproglyglnalaproargleuleuile
354045
tyraspalaserasnargalathrglyileproalaargphesergly
505560
serglyserglythraspphethrleuthrileserserleuglupro
65707580
gluaspphealavaltyrtyrcysglnglnarghisvaltrppropro
859095
thrpheglyglyglythrlysvalgluilelys
100105
<210>89
<211>107
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vl蛋白质
<400>89
gluilevalleuthrglnserproalathrleuserleuserprogly
151015
gluargalathrleusercysargalaserglnservalserargtyr
202530
leualatrptyrglnglnlysproglyglnalaproargleuleuile
354045
tyraspalaserasnargalathrglyileproalaargphesergly
505560
serglyserglythraspphethrleuthrileserserleuglupro
65707580
gluaspphealavaltyrtyrcysglnglnargphetyrtyrprotrp
859095
thrpheglyglyglythrlysvalgluilelys
100105
<210>90
<211>107
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vl蛋白质
<400>90
aspileglnleuthrglnserproserservalseralaservalgly
151015
aspargvalthrilethrcysargalaserglnglyilesersertrp
202530
leualatrptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuile
354045
tyrglyalaserserleuglnserglyvalproserargphesergly
505560
serglyserglythraspphethrleuthrileserserleuglnpro
65707580
gluaspphealathrtyrtyrcysglnglniletyrthrpheprophe
859095
thrpheglyglyglythrlysvalgluilelys
100105
<210>91
<211>113
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vl蛋白质
<400>91
aspilevalmetthrglnserproaspserleualavalserleugly
151015
gluargalathrileasncyslysserserglnservalleutyrser
202530
serasnasnlysasntyrleualatrptyrglnglnlysproglygln
354045
proprolysleuleuiletyrtrpalaserthrarggluserglyval
505560
proaspargpheserglyserglyserglythraspphethrleuthr
65707580
ileserserleuglnalagluaspvalalavaltyrtyrcysglngln
859095
phealahisthrprophethrpheglyglyglythrlysvalgluile
100105110
lys
<210>92
<211>107
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vl蛋白质
<400>92
gluilevalmetthrglnserproalathrleuservalserprogly
151015
gluargalathrleusercysargalaserglnservalserserasn
202530
leualatrptyrglnglnlysproglyglnalaproargleuleuile
354045
tyrseralaserthrargalathrglyileproalaargphesergly
505560
serglyserglythrgluphethrleuthrileserserleuglnser
65707580
gluaspphealavaltyrtyrcysglnglnhishisvaltrpproleu
859095
thrpheglyglyglythrlysvalgluilelys
100105
<210>93
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr1
<400>93
glyglyserilesersertyr
15
<210>94
<211>9
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr1
<400>94
glyglyserileserserglyglyphe
15
<210>95
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr1
<400>95
glytyrthrleuthrgluleu
15
<210>96
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr1
<400>96
glyphethrphesersertyr
15
<210>97
<211>5
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr2
<400>97
tyrtyrserglyser
15
<210>98
<211>5
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr2
<400>98
hishisserglyser
15
<210>99
<211>6
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr2
<400>99
aspprogluaspglyglu
15
<210>100
<211>6
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr2
<400>100
sertyraspglyserasp
15
<210>101
<211>14
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr3
<400>101
leuvaltyrcysglyglyaspcystyrserglypheasptyr
1510
<210>102
<211>14
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr3
<400>102
leuvaltyrcysglyglyaspcystyrserglypheasptyr
1510
<210>103
<211>12
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr3
<400>103
gluserargglyileglytrpprotyrpheasptyr
1510
<210>104
<211>8
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhcdr3
<400>104
gluargtyrserglyargasptyr
15
<210>105
<211>11
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr1
<400>105
glnalaserglnaspileasnasnpheleuasn
1510
<210>106
<211>11
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr1
<400>106
glnalaserglnaspileasnasnpheleuasn
1510
<210>107
<211>11
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr1
<400>107
argalaserglnserilesersertyrleuasn
1510
<210>108
<211>11
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr1
<400>108
argalaserglnservalserserleuleuthr
1510
<210>109
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr2
<400>109
aspalaserasnleugluthr
15
<210>110
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr2
<400>110
aspalaserasnleugluthr
15
<210>111
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr2
<400>111
glyalaserserleulysser
15
<210>112
<211>7
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr2
<400>112
glyalaserthrargalathr
15
<210>113
<211>9
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr3
<400>113
glnglntyrglyasnleuprophethr
15
<210>114
<211>9
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr3
<400>114
glnglntyrglyasnleuprophethr
15
<210>115
<211>9
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr3
<400>115
glnglnsertyrserthrproilethr
15
<210>116
<211>9
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlcdr3
<400>116
glnglntyraspthrtrpprophethr
15
<210>117
<211>366
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vhdna
<400>117
caggtgcagctgcaggaatccggaccggggctggtgaagcccagcgagactctgagtctc60
acgtgtacagtttctggaggtagcattagctcctactattggtcatggataaggcagccc120
cccgggaagggattggaatggatcggctatatttactacagtgggagcaccaattacaac180
ccctcactgaagtctagagttacaatcagcgttgacacctcaaagaatcagttcagtttg240
aaattgtctagcgtcacagcagctgatacagccgtctattattgtgtttctctggtctat300
tgcggtggggattgttacagtggctttgactattgggggcagggtactctggttacagtt360
tcttcc366
<210>118
<211>372
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vhdna
<400>118
caggtacagctgcaggaatctgggcccggacttgtcaagccaagtcagacactttctctt60
acatgtaccgtgagcggcggaagtataagcagtggaggcttttactggtcttggatacgg120
cagcacccaggcaaaggcttggagtggattggatacattcatcattcaggatctacacac180
tataatccatcccttaagtcccgggtcaccattagcattgatacgtctaagaatctgttc240
agtctcaggctgtcctccgtcactgctgccgacacagccgtgtactactgcgcctccttg300
gtttactgcggaggcgactgttatagcggctttgattattgggggcaggggaccctcgta360
accgtgagctct372
<210>119
<211>363
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vhdna
<400>119
caggtccaactggtgcagtccggagccgaagtcaagaaaccaggtgcctccgttaaagtg60
agttgcaaagtctctggatacactctgaccgagctctctatgcactgggtccggcaggcc120
cccggcaagggattggaatggatgggcgggttcgatcctgaggacggagagactatctac180
gctcaaaaattccagggacgagtgactgtgaccgaagacactagtaccgacactgcctac240
atggaactttcctctctgcgatcagaagataccgcagtgtactactgtgctactgaatct300
aggggcattggatggccctacttcgattactggggtcagggaactctggtgactgtctcc360
agc363
<210>120
<211>351
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vhdna
<400>120
caggtccagttggtcgaaagtggcggtggtgtagtgcagccgggccgcagtttgaggctt60
tcctgtgcggcttcaggctttactttttccagctatggaatgcactgggtgcggcaggcc120
cccggcaaaggacttgagtgggtggccgtcatttcttatgacggatcagataagtactac180
gtggacagcgtcaagggcagattcaccatctctagggacaacagtaaaaatagactctac240
ctccagatgaatagcctcagagctgaagacacggccgtctactattgtgctcgggagcgg300
tatagtggcagagactactgggggcagggcacactcgttacagtgagtagc351
<210>121
<211>324
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vldna
<400>121
gacatccagttgacacagagcccgagttccttgtccgcctccgtcggggatagagtgtca60
tttacctgtcaggcctctcaggatattaataactttctgaattggtatcagcaaaagccc120
ggaaaggcacccaagctgttgatttacgacgccagtaacctggagacaggcgtgccctcc180
cggtttagtggtagcggaagcggtacggattttacctttactatcagctctctccaaccc240
gaagacattgcaacctactattgtcaacaatatggaaacctgccttttacatttggcggc300
ggcaccaaggtggagattaagcgg324
<210>122
<211>324
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vldna
<400>122
gatatccagctcactcaaagcccctctagtctctctgcctcagtgggggatcgggtcagt60
tttacttgtcaagcttcacaggatatcaacaacttccttaattggtatcagcagaagcca120
ggaaaagcacccaagctgctcatctatgatgcctcaaatttggagacgggtgttcccagt180
cgattctctgggtcagggtccgggaccgactttacgtttacgatctcctctctgcagccc240
gaagacatcgccacatactattgtcaacagtacggcaacttgcctttcacatttgggggc300
gggactaaggttgaaatcaagagg324
<210>123
<211>324
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vldna
<400>123
gatattcagatgactcaatctccttcttctctgtccgcttccgtgggcgatagagtgacc60
attacttgtagggcgtcccagtcaatctccagttatttgaattggtatcagcagaagccc120
gggaaagcacctaagctgttgatcagcggggcttctagcctgaagagtggggtaccttca180
cggttcagcggaagcggaagcggaaccgatttcaccctgactatcagcagcctgccacct240
gaggactttgcaacttactactgccaacagtcatacagcactccgatcactttcggccag300
ggcacccggctcgaaatcaagcgc324
<210>124
<211>324
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>vldna
<400>124
gagattgttatgacccagagtcctgcgaccctctcagtcagccccggggagcgcgcaact60
ttgtcttgcagagctagtcagtccgtgtcctctcttctgacatggtaccagcaaaagccc120
gggcaggctccgcgccttttgatctttggggcttcaacaagagccactgggattcccgca180
cgattctctggctccgggagcggtactggtttcaccctgacgattagcagtctccagagc240
gaggacttcgccgtatactactgccagcagtacgatacgtggccattcacttttggacca300
gggactaaagtggattttaagcgc324
<210>125
<211>122
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhaa
<400>125
glnvalglnleuglngluserglyproglyleuvallysproserglu
151015
thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserilesersertyr
202530
tyrtrpsertrpileargglnproproglylysglyleuglutrpile
354045
glytyriletyrtyrserglyserthrasntyrasnproserleulys
505560
serargvalthrileservalaspthrserlysasnglnpheserleu
65707580
lysleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyrcysval
859095
serleuvaltyrcysglyglyaspcystyrserglypheasptyrtrp
100105110
glyglnglythrleuvalthrvalserser
115120
<210>126
<211>124
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhaa
<400>126
glnvalglnleuglngluserglyproglyleuvallysprosergln
151015
thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserilesersergly
202530
glyphetyrtrpsertrpileargglnhisproglylysglyleuglu
354045
trpileglytyrilehishisserglyserthrhistyrasnproser
505560
leulysserargvalthrileserileaspthrserlysasnleuphe
65707580
serleuargleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyr
859095
cysalaserleuvaltyrcysglyglyaspcystyrserglypheasp
100105110
tyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserser
115120
<210>127
<211>121
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhaa
<400>127
glnvalglnleuvalglnserglyalagluvallyslysproglyala
151015
servallysvalsercyslysvalserglytyrthrleuthrgluleu
202530
sermethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpmet
354045
glyglypheaspprogluaspglygluthriletyralaglnlysphe
505560
glnglyargvalthrvalthrgluaspthrserthraspthralatyr
65707580
metgluleuserserleuargsergluaspthralavaltyrtyrcys
859095
alathrgluserargglyileglytrpprotyrpheasptyrtrpgly
100105110
glnglythrleuvalthrvalserser
115120
<210>128
<211>117
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vhaa
<400>128
glnvalglnleuvalgluserglyglyglyvalvalglnproglyarg
151015
serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr
202530
glymethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval
354045
alavalilesertyraspglyserasplystyrtyrvalaspserval
505560
lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnargleutyr
65707580
leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys
859095
alaarggluargtyrserglyargasptyrtrpglyglnglythrleu
100105110
valthrvalserser
115
<210>129
<211>108
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlaa
<400>129
aspileglnleuthrglnserproserserleuseralaservalgly
151015
aspargvalserphethrcysglnalaserglnaspileasnasnphe
202530
leuasntrptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuile
354045
tyraspalaserasnleugluthrglyvalproserargphesergly
505560
serglyserglythraspphethrphethrileserserleuglnpro
65707580
gluaspilealathrtyrtyrcysglnglntyrglyasnleuprophe
859095
thrpheglyglyglythrlysvalgluilelysarg
100105
<210>130
<211>108
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlaa
<400>130
aspileglnleuthrglnserproserserleuseralaservalgly
151015
aspargvalserphethrcysglnalaserglnaspileasnasnphe
202530
leuasntrptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuile
354045
tyraspalaserasnleugluthrglyvalproserargphesergly
505560
serglyserglythraspphethrphethrileserserleuglnpro
65707580
gluaspilealathrtyrtyrcysglnglntyrglyasnleuprophe
859095
thrpheglyglyglythrlysvalgluilelysarg
100105
<210>131
<211>108
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlaa
<400>131
aspileglnmetthrglnserproserserleuseralaservalgly
151015
aspargvalthrilethrcysargalaserglnserilesersertyr
202530
leuasntrptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuile
354045
serglyalaserserleulysserglyvalproserargphesergly
505560
serglyserglythraspphethrleuthrileserserleupropro
65707580
gluaspphealathrtyrtyrcysglnglnsertyrserthrproile
859095
thrpheglyglnglythrargleugluilelysarg
100105
<210>132
<211>108
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>vlaa
<400>132
gluilevalmetthrglnserproalathrleuservalserprogly
151015
gluargalathrleusercysargalaserglnservalserserleu
202530
leuthrtrptyrglnglnlysproglyglnalaproargleuleuile
354045
pheglyalaserthrargalathrglyileproalaargphesergly
505560
serglyserglythrglyphethrleuthrileserserleuglnser
65707580
gluaspphealavaltyrtyrcysglnglntyraspthrtrpprophe
859095
thrpheglyproglythrlysvalaspphelysarg
100105
<210>133
<211>1437
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>fs-21495cardnahxl
<400>133
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccggaggtgcagctgttggagtctgggggaggcttggtacagcctggggggtccctgaga120
ctctcctgtgcagcctctggattcacctttagcagctatgccatgagctgggtccgccag180
gctccagggaaggggctggagtgggtctcagctattagtggtagtggtggtagcacatac240
tacgcagactccgtgaagggccggttcaccatctccagagacaattccaagaacacgctg300
tatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggcggtgtactactgcgcaagagcc360
gagatgggagccgtattcgacatatggggtcagggtacaatggtcaccgtctcctcaggg420
tctacatccggctccgggaagcccggaagtggcgaaggtagtacaaagggggaaattgtg480
ttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctctcctgc540
agggccagtcagagtgttagcaggtacttagcctggtaccaacagaaacctggccaggct600
cccaggctcctcatctatgatgcatccaacagggccactggcatcccagccaggttcagt660
ggcagtgggtctgggacagacttcactctcaccatcagcagcctagagcctgaagatttt720
gcagtttattactgtcagcagagaatctcctggcctttcacttttggcggagggaccaag780
gttgagatcaaacgggccgctgcccttgataatgaaaagtcaaacggaacaatcattcac840
gtgaagggcaagcacctctgtccgtcacccttgttccctggtccatccaagccattctgg900
gtgttggtcgtagtgggtggagtcctcgcttgttactctctgctcgtcaccgtggctttt960
ataatcttctgggttagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatg1020
actccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagat1080
ttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcag1140
cagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgtt1200
ttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccc1260
caggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaata1320
ggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagc1380
actgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1437
<210>134
<211>478
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>fs-21495carhxl
<400>134
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargprogluvalglnleuleugluserglyglyglyleu
202530
valglnproglyglyserleuargleusercysalaalaserglyphe
354045
thrphesersertyralametsertrpvalargglnalaproglylys
505560
glyleuglutrpvalseralaileserglyserglyglyserthrtyr
65707580
tyralaaspservallysglyargphethrileserargaspasnser
859095
lysasnthrleutyrleuglnmetasnserleuargalagluaspthr
100105110
alavaltyrtyrcysalaargalaglumetglyalavalpheaspile
115120125
trpglyglnglythrmetvalthrvalserserglyserthrsergly
130135140
serglylysproglyserglygluglyserthrlysglygluileval
145150155160
leuthrglnserproalathrleuserleuserproglygluargala
165170175
thrleusercysargalaserglnservalserargtyrleualatrp
180185190
tyrglnglnlysproglyglnalaproargleuleuiletyraspala
195200205
serasnargalathrglyileproalaargpheserglyserglyser
210215220
glythraspphethrleuthrileserserleugluprogluaspphe
225230235240
alavaltyrtyrcysglnglnargilesertrpprophethrphegly
245250255
glyglythrlysvalgluilelysargalaalaalaleuaspasnglu
260265270
lysserasnglythrileilehisvallysglylyshisleucyspro
275280285
serproleupheproglyproserlysprophetrpvalleuvalval
290295300
valglyglyvalleualacystyrserleuleuvalthrvalalaphe
305310315320
ileilephetrpvalargserlysargserargleuleuhisserasp
325330335
tyrmetasnmetthrproargargproglyprothrarglyshistyr
340345350
glnprotyralaproproargaspphealaalatyrargserargval
355360365
lyspheserargseralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasn
370375380
glnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyraspval
385390395400
leuasplysargargglyargaspproglumetglyglylysproarg
405410415
arglysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasplys
420425430
metalaglualatyrsergluileglymetlysglygluargargarg
435440445
glylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathrlys
450455460
aspthrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
465470475
<210>135
<211>1437
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>fs-21495cardnalxh
<400>135
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccggaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagcc120
accctctcctgcagggccagtcagagtgttagcaggtacttagcctggtaccaacagaaa180
cctggccaggctcccaggctcctcatctatgatgcatccaacagggccactggcatccca240
gccaggttcagtggcagtgggtctgggacagacttcactctcaccatcagcagcctagag300
cctgaagattttgcagtttattactgtcagcagagaatctcctggcctttcacttttggc360
ggagggaccaaggttgagatcaaacgggggtctacatccggctccgggaagcccggaagt420
ggcgaaggtagtacaaagggggaggtgcagctgttggagtctgggggaggcttggtacag480
cctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcacctttagcagctatgcc540
atgagctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcagctattagtggt600
agtggtggtagcacatactacgcagactccgtgaagggccggttcaccatctccagagac660
aattccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggcggtg720
tactactgcgcaagagccgagatgggagccgtattcgacatatggggtcagggtacaatg780
gtcaccgtctcctcagccgctgcccttgataatgaaaagtcaaacggaacaatcattcac840
gtgaagggcaagcacctctgtccgtcacccttgttccctggtccatccaagccattctgg900
gtgttggtcgtagtgggtggagtcctcgcttgttactctctgctcgtcaccgtggctttt960
ataatcttctgggttagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatg1020
actccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagat1080
ttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcag1140
cagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgtt1200
ttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccc1260
caggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaata1320
ggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagc1380
actgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1437
<210>136
<211>478
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>fs-21495carlxh
<400>136
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargprogluilevalleuthrglnserproalathrleu
202530
serleuserproglygluargalathrleusercysargalasergln
354045
servalserargtyrleualatrptyrglnglnlysproglyglnala
505560
proargleuleuiletyraspalaserasnargalathrglyilepro
65707580
alaargpheserglyserglyserglythraspphethrleuthrile
859095
serserleugluprogluaspphealavaltyrtyrcysglnglnarg
100105110
ilesertrpprophethrpheglyglyglythrlysvalgluilelys
115120125
argglyserthrserglyserglylysproglyserglygluglyser
130135140
thrlysglygluvalglnleuleugluserglyglyglyleuvalgln
145150155160
proglyglyserleuargleusercysalaalaserglyphethrphe
165170175
sersertyralametsertrpvalargglnalaproglylysglyleu
180185190
glutrpvalseralaileserglyserglyglyserthrtyrtyrala
195200205
aspservallysglyargphethrileserargaspasnserlysasn
210215220
thrleutyrleuglnmetasnserleuargalagluaspthralaval
225230235240
tyrtyrcysalaargalaglumetglyalavalpheaspiletrpgly
245250255
glnglythrmetvalthrvalserseralaalaalaleuaspasnglu
260265270
lysserasnglythrileilehisvallysglylyshisleucyspro
275280285
serproleupheproglyproserlysprophetrpvalleuvalval
290295300
valglyglyvalleualacystyrserleuleuvalthrvalalaphe
305310315320
ileilephetrpvalargserlysargserargleuleuhisserasp
325330335
tyrmetasnmetthrproargargproglyprothrarglyshistyr
340345350
glnprotyralaproproargaspphealaalatyrargserargval
355360365
lyspheserargseralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasn
370375380
glnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyraspval
385390395400
leuasplysargargglyargaspproglumetglyglylysproarg
405410415
arglysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasplys
420425430
metalaglualatyrsergluileglymetlysglygluargargarg
435440445
glylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathrlys
450455460
aspthrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
465470475
<210>137
<211>1464
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>pc-21497cardnahxl
<400>137
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtgcagctggtggagtctgggggaggcgtggtccagcctgggaggtccctgaga120
ctctcctgtgcagcgtctggattcaccttcagtagctatggcatgcactgggtccgccag180
gctccaggcaaggggctggagtgggtggcagttatatcgtatgatggaagtaataaatac240
tatgcagactccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaattccaagaacacgctg300
tatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggcggtgtactactgcgccagagac360
ggtacttatctaggtggtctctggtacttcgacttatgggggagaggtaccttggtcacc420
gtctcctcagggtctacatccggctccgggaagcccggaagtggcgaaggtagtacaaag480
ggggatattgtgatgactcagtctccactctccctgcccgtcacccctggagagccggcc540
tccatctcctgcaggtctagtcagagcctcctgcatagtaatggatacaactatttggat600
tggtacctgcagaagccagggcagtctccacagctcctgatctatttgggttctaatcgg660
gcctccggggtccctgacaggttcagtggcagtggatcaggcacagattttacactgaaa720
atcagcagagtggaggctgaggatgttggggtttattactgcatgcagggactcggcctc780
cctctcacttttggcggagggaccaaggttgagatcaaacgggccgctgcccttgataat840
gaaaagtcaaacggaacaatcattcacgtgaagggcaagcacctctgtccgtcacccttg900
ttccctggtccatccaagccattctgggtgttggtcgtagtgggtggagtcctcgcttgt960
tactctctgctcgtcaccgtggcttttataatcttctgggttagatccaaaagaagccgc1020
ctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacac1080
taccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttcc1140
agatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaac1200
ctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatg1260
ggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggat1320
aagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaaggg1380
cacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccac1440
atgcaagccctgccacctaggtaa1464
<210>138
<211>487
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>pc-21497carhxl
<400>138
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalglnleuvalgluserglyglyglyval
202530
valglnproglyargserleuargleusercysalaalaserglyphe
354045
thrphesersertyrglymethistrpvalargglnalaproglylys
505560
glyleuglutrpvalalavalilesertyraspglyserasnlystyr
65707580
tyralaaspservallysglyargphethrileserargaspasnser
859095
lysasnthrleutyrleuglnmetasnserleuargalagluaspthr
100105110
alavaltyrtyrcysalaargaspglythrtyrleuglyglyleutrp
115120125
tyrpheaspleutrpglyargglythrleuvalthrvalsersergly
130135140
serthrserglyserglylysproglyserglygluglyserthrlys
145150155160
glyaspilevalmetthrglnserproleuserleuprovalthrpro
165170175
glygluproalaserilesercysargserserglnserleuleuhis
180185190
serasnglytyrasntyrleuasptrptyrleuglnlysproglygln
195200205
serproglnleuleuiletyrleuglyserasnargalaserglyval
210215220
proaspargpheserglyserglyserglythraspphethrleulys
225230235240
ileserargvalglualagluaspvalglyvaltyrtyrcysmetgln
245250255
glyleuglyleuproleuthrpheglyglyglythrlysvalgluile
260265270
lysargalaalaalaleuaspasnglulysserasnglythrileile
275280285
hisvallysglylyshisleucysproserproleupheproglypro
290295300
serlysprophetrpvalleuvalvalvalglyglyvalleualacys
305310315320
tyrserleuleuvalthrvalalapheileilephetrpvalargser
325330335
lysargserargleuleuhisserasptyrmetasnmetthrproarg
340345350
argproglyprothrarglyshistyrglnprotyralaproproarg
355360365
aspphealaalatyrargserargvallyspheserargseralaasp
370375380
alaproalatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasngluleuasn
385390395400
leuglyargarggluglutyraspvalleuasplysargargglyarg
405410415
aspproglumetglyglylysproargarglysasnproglnglugly
420425430
leutyrasngluleuglnlysasplysmetalaglualatyrserglu
435440445
ileglymetlysglygluargargargglylysglyhisaspglyleu
450455460
tyrglnglyleuserthralathrlysaspthrtyraspalaleuhis
465470475480
metglnalaleuproproarg
485
<210>139
<211>1464
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>pc-21497cardnalxh
<400>139
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccggatattgtgatgactcagtctccactctccctgcccgtcacccctggagagccggcc120
tccatctcctgcaggtctagtcagagcctcctgcatagtaatggatacaactatttggat180
tggtacctgcagaagccagggcagtctccacagctcctgatctatttgggttctaatcgg240
gcctccggggtccctgacaggttcagtggcagtggatcaggcacagattttacactgaaa300
atcagcagagtggaggctgaggatgttggggtttattactgcatgcagggactcggcctc360
cctctcacttttggcggagggaccaaggttgagatcaaacgggggtctacatccggctcc420
gggaagcccggaagtggcgaaggtagtacaaaggggcaggtgcagctggtggagtctggg480
ggaggcgtggtccagcctgggaggtccctgagactctcctgtgcagcgtctggattcacc540
ttcagtagctatggcatgcactgggtccgccaggctccaggcaaggggctggagtgggtg600
gcagttatatcgtatgatggaagtaataaatactatgcagactccgtgaagggccgattc660
accatctccagagacaattccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgagagcc720
gaggacacggcggtgtactactgcgccagagacggtacttatctaggtggtctctggtac780
ttcgacttatgggggagaggtaccttggtcaccgtctcctcagccgctgcccttgataat840
gaaaagtcaaacggaacaatcattcacgtgaagggcaagcacctctgtccgtcacccttg900
ttccctggtccatccaagccattctgggtgttggtcgtagtgggtggagtcctcgcttgt960
tactctctgctcgtcaccgtggcttttataatcttctgggttagatccaaaagaagccgc1020
ctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacac1080
taccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttcc1140
agatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaac1200
ctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatg1260
ggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggat1320
aagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaaggg1380
cacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccac1440
atgcaagccctgccacctaggtaa1464
<210>140
<211>487
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>pc-21497carhxl
<400>140
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproaspilevalmetthrglnserproleuserleu
202530
provalthrproglygluproalaserilesercysargsersergln
354045
serleuleuhisserasnglytyrasntyrleuasptrptyrleugln
505560
lysproglyglnserproglnleuleuiletyrleuglyserasnarg
65707580
alaserglyvalproaspargpheserglyserglyserglythrasp
859095
phethrleulysileserargvalglualagluaspvalglyvaltyr
100105110
tyrcysmetglnglyleuglyleuproleuthrpheglyglyglythr
115120125
lysvalgluilelysargglyserthrserglyserglylysprogly
130135140
serglygluglyserthrlysglyglnvalglnleuvalglusergly
145150155160
glyglyvalvalglnproglyargserleuargleusercysalaala
165170175
serglyphethrphesersertyrglymethistrpvalargglnala
180185190
proglylysglyleuglutrpvalalavalilesertyraspglyser
195200205
asnlystyrtyralaaspservallysglyargphethrileserarg
210215220
aspasnserlysasnthrleutyrleuglnmetasnserleuargala
225230235240
gluaspthralavaltyrtyrcysalaargaspglythrtyrleugly
245250255
glyleutrptyrpheaspleutrpglyargglythrleuvalthrval
260265270
serseralaalaalaleuaspasnglulysserasnglythrileile
275280285
hisvallysglylyshisleucysproserproleupheproglypro
290295300
serlysprophetrpvalleuvalvalvalglyglyvalleualacys
305310315320
tyrserleuleuvalthrvalalapheileilephetrpvalargser
325330335
lysargserargleuleuhisserasptyrmetasnmetthrproarg
340345350
argproglyprothrarglyshistyrglnprotyralaproproarg
355360365
aspphealaalatyrargserargvallyspheserargseralaasp
370375380
alaproalatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasngluleuasn
385390395400
leuglyargarggluglutyraspvalleuasplysargargglyarg
405410415
aspproglumetglyglylysproargarglysasnproglnglugly
420425430
leutyrasngluleuglnlysasplysmetalaglualatyrserglu
435440445
ileglymetlysglygluargargargglylysglyhisaspglyleu
450455460
tyrglnglyleuserthralathrlysaspthrtyraspalaleuhis
465470475480
metglnalaleuproproarg
485
<210>141
<211>1428
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>aj-21508cardnahxl
<400>141
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtgcagctggtgcagtctggggctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaag120
gtttcctgcaaggcatctggatacaccttcaccagctactatatgcactgggtgcgacag180
gcccctggacaagggcttgagtggatgggaataatcaaccctggtggtggtagcacaagc240
tacgcacagaagttccagggcagagtcaccatgaccagggacacgtccacgagcacagtc300
tacatggagctgagcagcctgagatctgaggacacggcggtgtactactgcgccagagag360
agttggccaatggacgtatggggccagggaacaactgtcaccgtctcctcagggtctaca420
tccggctccgggaagcccggaagtggcgaaggtagtacaaagggggaaatagtgatgacg480
cagtctccagccaccctgtctgtgtctccaggggaaagagccaccctctcctgcagggcc540
agtcagagtgttagcagcaacttagcctggtaccagcagaaacctggccaggctcccagg600
ctcctcatctatggtgcatccaccagggccactggtatcccagccaggttcagtggcagt660
gggtctgggacagagttcactctcaccatcagcagcctgcagtctgaagattttgcagtt720
tattactgtcagcagtacgccgcctaccctacttttggcggagggaccaaggttgagatc780
aaacgggccgctgcccttgataatgaaaagtcaaacggaacaatcattcacgtgaagggc840
aagcacctctgtccgtcacccttgttccctggtccatccaagccattctgggtgttggtc900
gtagtgggtggagtcctcgcttgttactctctgctcgtcaccgtggcttttataatcttc960
tgggttagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgc1020
cgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcc1080
tatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccag1140
aaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaag1200
cgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggt1260
ctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaa1320
ggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacg1380
aaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1428
<210>142
<211>475
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>aj-21508carhxl
<400>142
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalglnleuvalglnserglyalagluval
202530
lyslysproglyalaservallysvalsercyslysalaserglytyr
354045
thrphethrsertyrtyrmethistrpvalargglnalaproglygln
505560
glyleuglutrpmetglyileileasnproglyglyglyserthrser
65707580
tyralaglnlyspheglnglyargvalthrmetthrargaspthrser
859095
thrserthrvaltyrmetgluleuserserleuargsergluaspthr
100105110
alavaltyrtyrcysalaargglusertrpprometaspvaltrpgly
115120125
glnglythrthrvalthrvalserserglyserthrserglysergly
130135140
lysproglyserglygluglyserthrlysglygluilevalmetthr
145150155160
glnserproalathrleuservalserproglygluargalathrleu
165170175
sercysargalaserglnservalserserasnleualatrptyrgln
180185190
glnlysproglyglnalaproargleuleuiletyrglyalaserthr
195200205
argalathrglyileproalaargpheserglyserglyserglythr
210215220
gluphethrleuthrileserserleuglnsergluaspphealaval
225230235240
tyrtyrcysglnglntyralaalatyrprothrpheglyglyglythr
245250255
lysvalgluilelysargalaalaalaleuaspasnglulysserasn
260265270
glythrileilehisvallysglylyshisleucysproserproleu
275280285
pheproglyproserlysprophetrpvalleuvalvalvalglygly
290295300
valleualacystyrserleuleuvalthrvalalapheileilephe
305310315320
trpvalargserlysargserargleuleuhisserasptyrmetasn
325330335
metthrproargargproglyprothrarglyshistyrglnprotyr
340345350
alaproproargaspphealaalatyrargserargvallyspheser
355360365
argseralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasnglnleutyr
370375380
asngluleuasnleuglyargarggluglutyraspvalleuasplys
385390395400
argargglyargaspproglumetglyglylysproargarglysasn
405410415
proglngluglyleutyrasngluleuglnlysasplysmetalaglu
420425430
alatyrsergluileglymetlysglygluargargargglylysgly
435440445
hisaspglyleutyrglnglyleuserthralathrlysaspthrtyr
450455460
aspalaleuhismetglnalaleuproproarg
465470475
<210>143
<211>1428
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>aj-21508cardnalxh
<400>143
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccggaaatagtgatgacgcagtctccagccaccctgtctgtgtctccaggggaaagagcc120
accctctcctgcagggccagtcagagtgttagcagcaacttagcctggtaccagcagaaa180
cctggccaggctcccaggctcctcatctatggtgcatccaccagggccactggtatccca240
gccaggttcagtggcagtgggtctgggacagagttcactctcaccatcagcagcctgcag300
tctgaagattttgcagtttattactgtcagcagtacgccgcctaccctacttttggcgga360
gggaccaaggttgagatcaaacgggggtctacatccggctccgggaagcccggaagtggc420
gaaggtagtacaaaggggcaggtgcagctggtgcagtctggggctgaggtgaagaagcct480
ggggcctcagtgaaggtttcctgcaaggcatctggatacaccttcaccagctactatatg540
cactgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggaataatcaaccctggt600
ggtggtagcacaagctacgcacagaagttccagggcagagtcaccatgaccagggacacg660
tccacgagcacagtctacatggagctgagcagcctgagatctgaggacacggcggtgtac720
tactgcgccagagagagttggccaatggacgtatggggccagggaacaactgtcaccgtc780
tcctcagccgctgcccttgataatgaaaagtcaaacggaacaatcattcacgtgaagggc840
aagcacctctgtccgtcacccttgttccctggtccatccaagccattctgggtgttggtc900
gtagtgggtggagtcctcgcttgttactctctgctcgtcaccgtggcttttataatcttc960
tgggttagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgc1020
cgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcc1080
tatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccag1140
aaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaag1200
cgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggt1260
ctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaa1320
ggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacg1380
aaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1428
<210>144
<211>475
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>aj-21508carlxh
<400>144
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargprogluilevalmetthrglnserproalathrleu
202530
servalserproglygluargalathrleusercysargalasergln
354045
servalserserasnleualatrptyrglnglnlysproglyglnala
505560
proargleuleuiletyrglyalaserthrargalathrglyilepro
65707580
alaargpheserglyserglyserglythrgluphethrleuthrile
859095
serserleuglnsergluaspphealavaltyrtyrcysglnglntyr
100105110
alaalatyrprothrpheglyglyglythrlysvalgluilelysarg
115120125
glyserthrserglyserglylysproglyserglygluglyserthr
130135140
lysglyglnvalglnleuvalglnserglyalagluvallyslyspro
145150155160
glyalaservallysvalsercyslysalaserglytyrthrphethr
165170175
sertyrtyrmethistrpvalargglnalaproglyglnglyleuglu
180185190
trpmetglyileileasnproglyglyglyserthrsertyralagln
195200205
lyspheglnglyargvalthrmetthrargaspthrserthrserthr
210215220
valtyrmetgluleuserserleuargsergluaspthralavaltyr
225230235240
tyrcysalaargglusertrpprometaspvaltrpglyglnglythr
245250255
thrvalthrvalserseralaalaalaleuaspasnglulysserasn
260265270
glythrileilehisvallysglylyshisleucysproserproleu
275280285
pheproglyproserlysprophetrpvalleuvalvalvalglygly
290295300
valleualacystyrserleuleuvalthrvalalapheileilephe
305310315320
trpvalargserlysargserargleuleuhisserasptyrmetasn
325330335
metthrproargargproglyprothrarglyshistyrglnprotyr
340345350
alaproproargaspphealaalatyrargserargvallyspheser
355360365
argseralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasnglnleutyr
370375380
asngluleuasnleuglyargarggluglutyraspvalleuasplys
385390395400
argargglyargaspproglumetglyglylysproargarglysasn
405410415
proglngluglyleutyrasngluleuglnlysasplysmetalaglu
420425430
alatyrsergluileglymetlysglygluargargargglylysgly
435440445
hisaspglyleutyrglnglyleuserthralathrlysaspthrtyr
450455460
aspalaleuhismetglnalaleuproproarg
465470475
<210>145
<211>1449
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>nm-21517cardnahxl
<400>145
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcagctgcagctgcaggagtcgggcccaggactggtgaagccttcggagaccctgtcc120
ctcacctgcactgtctctggtggctccatcagcagtagtagttactactggggctggatc180
cgccagcccccagggaaggggctggagtggattgggagtatctcctatagtgggagcacc240
tactacaacccgtccctcaagagtcgagtcaccatatccgtagacacgtccaagaaccag300
ttctccctgaagctgagttctgtgaccgccgcagacacggcggtgtactactgcgccaga360
ggcaggggatatgcaaccagcttagccttcgatatctggggtcagggtacaatggtcacc420
gtctcctcagggtctacatccggctccgggaagcccggaagtggcgaaggtagtacaaag480
ggggaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagcc540
accctctcctgcagggccagtcagagtgttagcagctacttagcctggtaccaacagaaa600
cctggccaggctcccaggctcctcatctatgatgcatccaacagggccactggcatccca660
gccaggttcagtggcagtgggtctgggacagacttcactctcaccatcagcagcctagag720
cctgaagattttgcagtttattactgtcagcagagacacgtctggcctcctacttttggc780
ggagggaccaaggttgagatcaaacgggccgctgcccttgataatgaaaagtcaaacgga840
acaatcattcacgtgaagggcaagcacctctgtccgtcacccttgttccctggtccatcc900
aagccattctgggtgttggtcgtagtgggtggagtcctcgcttgttactctctgctcgtc960
accgtggcttttataatcttctgggttagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgat1020
tacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgca1080
ccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgca1140
ccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaa1200
gagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaaga1260
cgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcc1320
tattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtac1380
cagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgcca1440
cctaggtaa1449
<210>146
<211>482
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>nm-21517carhxl
<400>146
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnleuglnleuglngluserglyproglyleu
202530
vallysprosergluthrleuserleuthrcysthrvalserglygly
354045
serilesersersersertyrtyrtrpglytrpileargglnpropro
505560
glylysglyleuglutrpileglyserilesertyrserglyserthr
65707580
tyrtyrasnproserleulysserargvalthrileservalaspthr
859095
serlysasnglnpheserleulysleuserservalthralaalaasp
100105110
thralavaltyrtyrcysalaargglyargglytyralathrserleu
115120125
alapheaspiletrpglyglnglythrmetvalthrvalsersergly
130135140
serthrserglyserglylysproglyserglygluglyserthrlys
145150155160
glygluilevalleuthrglnserproalathrleuserleuserpro
165170175
glygluargalathrleusercysargalaserglnservalserser
180185190
tyrleualatrptyrglnglnlysproglyglnalaproargleuleu
195200205
iletyraspalaserasnargalathrglyileproalaargpheser
210215220
glyserglyserglythraspphethrleuthrileserserleuglu
225230235240
progluaspphealavaltyrtyrcysglnglnarghisvaltrppro
245250255
prothrpheglyglyglythrlysvalgluilelysargalaalaala
260265270
leuaspasnglulysserasnglythrileilehisvallysglylys
275280285
hisleucysproserproleupheproglyproserlysprophetrp
290295300
valleuvalvalvalglyglyvalleualacystyrserleuleuval
305310315320
thrvalalapheileilephetrpvalargserlysargserargleu
325330335
leuhisserasptyrmetasnmetthrproargargproglyprothr
340345350
arglyshistyrglnprotyralaproproargaspphealaalatyr
355360365
argserargvallyspheserargseralaaspalaproalatyrgln
370375380
glnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargargglu
385390395400
glutyraspvalleuasplysargargglyargaspproglumetgly
405410415
glylysproargarglysasnproglngluglyleutyrasngluleu
420425430
glnlysasplysmetalaglualatyrsergluileglymetlysgly
435440445
gluargargargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuser
450455460
thralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleupro
465470475480
proarg
<210>147
<211>1449
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>nm-21517cardnalxh
<400>147
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccggaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagcc120
accctctcctgcagggccagtcagagtgttagcagctacttagcctggtaccaacagaaa180
cctggccaggctcccaggctcctcatctatgatgcatccaacagggccactggcatccca240
gccaggttcagtggcagtgggtctgggacagacttcactctcaccatcagcagcctagag300
cctgaagattttgcagtttattactgtcagcagagacacgtctggcctcctacttttggc360
ggagggaccaaggttgagatcaaacgggggtctacatccggctccgggaagcccggaagt420
ggcgaaggtagtacaaaggggcagctgcagctgcaggagtcgggcccaggactggtgaag480
ccttcggagaccctgtccctcacctgcactgtctctggtggctccatcagcagtagtagt540
tactactggggctggatccgccagcccccagggaaggggctggagtggattgggagtatc600
tcctatagtgggagcacctactacaacccgtccctcaagagtcgagtcaccatatccgta660
gacacgtccaagaaccagttctccctgaagctgagttctgtgaccgccgcagacacggcg720
gtgtactactgcgccagaggcaggggatatgcaaccagcttagccttcgatatctggggt780
cagggtacaatggtcaccgtctcctcagccgctgcccttgataatgaaaagtcaaacgga840
acaatcattcacgtgaagggcaagcacctctgtccgtcacccttgttccctggtccatcc900
aagccattctgggtgttggtcgtagtgggtggagtcctcgcttgttactctctgctcgtc960
accgtggcttttataatcttctgggttagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgat1020
tacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgca1080
ccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgca1140
ccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaa1200
gagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaaga1260
cgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcc1320
tattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtac1380
cagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgcca1440
cctaggtaa1449
<210>148
<211>482
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>nm-21517carlxh
<400>148
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargprogluilevalleuthrglnserproalathrleu
202530
serleuserproglygluargalathrleusercysargalasergln
354045
servalsersertyrleualatrptyrglnglnlysproglyglnala
505560
proargleuleuiletyraspalaserasnargalathrglyilepro
65707580
alaargpheserglyserglyserglythraspphethrleuthrile
859095
serserleugluprogluaspphealavaltyrtyrcysglnglnarg
100105110
hisvaltrpproprothrpheglyglyglythrlysvalgluilelys
115120125
argglyserthrserglyserglylysproglyserglygluglyser
130135140
thrlysglyglnleuglnleuglngluserglyproglyleuvallys
145150155160
prosergluthrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserile
165170175
sersersersertyrtyrtrpglytrpileargglnproproglylys
180185190
glyleuglutrpileglyserilesertyrserglyserthrtyrtyr
195200205
asnproserleulysserargvalthrileservalaspthrserlys
210215220
asnglnpheserleulysleuserservalthralaalaaspthrala
225230235240
valtyrtyrcysalaargglyargglytyralathrserleualaphe
245250255
aspiletrpglyglnglythrmetvalthrvalserseralaalaala
260265270
leuaspasnglulysserasnglythrileilehisvallysglylys
275280285
hisleucysproserproleupheproglyproserlysprophetrp
290295300
valleuvalvalvalglyglyvalleualacystyrserleuleuval
305310315320
thrvalalapheileilephetrpvalargserlysargserargleu
325330335
leuhisserasptyrmetasnmetthrproargargproglyprothr
340345350
arglyshistyrglnprotyralaproproargaspphealaalatyr
355360365
argserargvallyspheserargseralaaspalaproalatyrgln
370375380
glnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargargglu
385390395400
glutyraspvalleuasplysargargglyargaspproglumetgly
405410415
glylysproargarglysasnproglngluglyleutyrasngluleu
420425430
glnlysasplysmetalaglualatyrsergluileglymetlysgly
435440445
gluargargargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuser
450455460
thralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleupro
465470475480
proarg
<210>149
<211>1440
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>ts-21522cardnahxl
<400>149
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccggaggtgcagctggtggagtctgggggaggcttggtacagcctggggggtccctgaga120
ctctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtagctatagcatgaactgggtccgccag180
gctccagggaaggggctggagtgggtttcaaccattagtagtagtagtagtaccatatac240
tacgcagactctgtgaagggccgattcaccatctccagagacaatgccaagaactcactg300
tatctgcaaatgaacagcctgagagctgaggacacggcggtgtactactgcgccagaggt360
tctcaggagcacctgattttcgattattggggacagggtacattggtcaccgtctcctca420
gggtctacatccggctccgggaagcccggaagtggcgaaggtagtacaaagggggaaatt480
gtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctctcc540
tgcagggccagtcagagtgttagcaggtacttagcctggtaccaacagaaacctggccag600
gctcccaggctcctcatctatgatgcatccaacagggccactggcatcccagccaggttc660
agtggcagtgggtctgggacagacttcactctcaccatcagcagcctagagcctgaagat720
tttgcagtttattactgtcagcagagattctactacccttggacttttggcggagggacc780
aaggttgagatcaaacgggccgctgcccttgataatgaaaagtcaaacggaacaatcatt840
cacgtgaagggcaagcacctctgtccgtcacccttgttccctggtccatccaagccattc900
tgggtgttggtcgtagtgggtggagtcctcgcttgttactctctgctcgtcaccgtggct960
tttataatcttctgggttagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaat1020
atgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctaga1080
gatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtat1140
cagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgac1200
gttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaac1260
ccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaa1320
ataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactc1380
agcactgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1440
<210>150
<211>479
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>ts-21522carhxl
<400>150
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargprogluvalglnleuvalgluserglyglyglyleu
202530
valglnproglyglyserleuargleusercysalaalaserglyphe
354045
thrphesersertyrsermetasntrpvalargglnalaproglylys
505560
glyleuglutrpvalserthrileserserserserserthriletyr
65707580
tyralaaspservallysglyargphethrileserargaspasnala
859095
lysasnserleutyrleuglnmetasnserleuargalagluaspthr
100105110
alavaltyrtyrcysalaargglyserglngluhisleuilepheasp
115120125
tyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserserglyserthrser
130135140
glyserglylysproglyserglygluglyserthrlysglygluile
145150155160
valleuthrglnserproalathrleuserleuserproglygluarg
165170175
alathrleusercysargalaserglnservalserargtyrleuala
180185190
trptyrglnglnlysproglyglnalaproargleuleuiletyrasp
195200205
alaserasnargalathrglyileproalaargpheserglysergly
210215220
serglythraspphethrleuthrileserserleugluprogluasp
225230235240
phealavaltyrtyrcysglnglnargphetyrtyrprotrpthrphe
245250255
glyglyglythrlysvalgluilelysargalaalaalaleuaspasn
260265270
glulysserasnglythrileilehisvallysglylyshisleucys
275280285
proserproleupheproglyproserlysprophetrpvalleuval
290295300
valvalglyglyvalleualacystyrserleuleuvalthrvalala
305310315320
pheileilephetrpvalargserlysargserargleuleuhisser
325330335
asptyrmetasnmetthrproargargproglyprothrarglyshis
340345350
tyrglnprotyralaproproargaspphealaalatyrargserarg
355360365
vallyspheserargseralaaspalaproalatyrglnglnglygln
370375380
asnglnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyrasp
385390395400
valleuasplysargargglyargaspproglumetglyglylyspro
405410415
argarglysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasp
420425430
lysmetalaglualatyrsergluileglymetlysglygluargarg
435440445
argglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathr
450455460
lysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
465470475
<210>151
<211>1440
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>ts-21522cardnalxh
<400>151
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccggaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagcc120
accctctcctgcagggccagtcagagtgttagcaggtacttagcctggtaccaacagaaa180
cctggccaggctcccaggctcctcatctatgatgcatccaacagggccactggcatccca240
gccaggttcagtggcagtgggtctgggacagacttcactctcaccatcagcagcctagag300
cctgaagattttgcagtttattactgtcagcagagattctactacccttggacttttggc360
ggagggaccaaggttgagatcaaacgggggtctacatccggctccgggaagcccggaagt420
ggcgaaggtagtacaaagggggaggtgcagctggtggagtctgggggaggcttggtacag480
cctggggggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcaccttcagtagctatagc540
atgaactgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtttcaaccattagtagt600
agtagtagtaccatatactacgcagactctgtgaagggccgattcaccatctccagagac660
aatgccaagaactcactgtatctgcaaatgaacagcctgagagctgaggacacggcggtg720
tactactgcgccagaggttctcaggagcacctgattttcgattattggggacagggtaca780
ttggtcaccgtctcctcagccgctgcccttgataatgaaaagtcaaacggaacaatcatt840
cacgtgaagggcaagcacctctgtccgtcacccttgttccctggtccatccaagccattc900
tgggtgttggtcgtagtgggtggagtcctcgcttgttactctctgctcgtcaccgtggct960
tttataatcttctgggttagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaat1020
atgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctaga1080
gatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtat1140
cagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgac1200
gttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaac1260
ccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaa1320
ataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactc1380
agcactgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1440
<210>152
<211>479
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>ts-21522carlxh
<400>152
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargprogluilevalleuthrglnserproalathrleu
202530
serleuserproglygluargalathrleusercysargalasergln
354045
servalserargtyrleualatrptyrglnglnlysproglyglnala
505560
proargleuleuiletyraspalaserasnargalathrglyilepro
65707580
alaargpheserglyserglyserglythraspphethrleuthrile
859095
serserleugluprogluaspphealavaltyrtyrcysglnglnarg
100105110
phetyrtyrprotrpthrpheglyglyglythrlysvalgluilelys
115120125
argglyserthrserglyserglylysproglyserglygluglyser
130135140
thrlysglygluvalglnleuvalgluserglyglyglyleuvalgln
145150155160
proglyglyserleuargleusercysalaalaserglyphethrphe
165170175
sersertyrsermetasntrpvalargglnalaproglylysglyleu
180185190
glutrpvalserthrileserserserserserthriletyrtyrala
195200205
aspservallysglyargphethrileserargaspasnalalysasn
210215220
serleutyrleuglnmetasnserleuargalagluaspthralaval
225230235240
tyrtyrcysalaargglyserglngluhisleuilepheasptyrtrp
245250255
glyglnglythrleuvalthrvalserseralaalaalaleuaspasn
260265270
glulysserasnglythrileilehisvallysglylyshisleucys
275280285
proserproleupheproglyproserlysprophetrpvalleuval
290295300
valvalglyglyvalleualacystyrserleuleuvalthrvalala
305310315320
pheileilephetrpvalargserlysargserargleuleuhisser
325330335
asptyrmetasnmetthrproargargproglyprothrarglyshis
340345350
tyrglnprotyralaproproargaspphealaalatyrargserarg
355360365
vallyspheserargseralaaspalaproalatyrglnglnglygln
370375380
asnglnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyrasp
385390395400
valleuasplysargargglyargaspproglumetglyglylyspro
405410415
argarglysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasp
420425430
lysmetalaglualatyrsergluileglymetlysglygluargarg
435440445
argglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathr
450455460
lysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
465470475
<210>153
<211>1449
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>ry-21527cardnahxl
<400>153
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtgcagctggtggagtctgggggaggcgtggtccagcctgggaggtccctgaga120
ctctcctgtgcagcgtctggattcaccttcagtagctatggcatgcactgggtccgccag180
gctccaggcaaggggctggagtgggtggcagttatatcgtatgatggaagtaataaatac240
tatgcagactccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaattccaagaacacgctg300
tatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggcggtgtactactgcgccagaact360
gacttctggagcggatcccctccaggcttagattactggggacagggtacattggtcacc420
gtctcctcagggtctacatccggctccgggaagcccggaagtggcgaaggtagtacaaag480
ggggacatccagttgacccagtctccatcttccgtgtctgcatctgtaggagacagagtc540
accatcacttgtcgggcgagtcagggtattagcagctggttagcctggtatcagcagaaa600
ccagggaaagcccctaagctcctgatctatggtgcatccagtttgcaaagtggggtccca660
tcaaggttcagcggcagtggatctgggacagatttcactctcaccatcagcagcctgcag720
cctgaagattttgcaacttattactgtcagcagatatacaccttccctttcacttttggc780
ggagggaccaaggttgagatcaaacgggccgctgcccttgataatgaaaagtcaaacgga840
acaatcattcacgtgaagggcaagcacctctgtccgtcacccttgttccctggtccatcc900
aagccattctgggtgttggtcgtagtgggtggagtcctcgcttgttactctctgctcgtc960
accgtggcttttataatcttctgggttagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgat1020
tacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgca1080
ccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgca1140
ccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaa1200
gagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaaga1260
cgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcc1320
tattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtac1380
cagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgcca1440
cctaggtaa1449
<210>154
<211>482
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>ry-21527carhxl
<400>154
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalglnleuvalgluserglyglyglyval
202530
valglnproglyargserleuargleusercysalaalaserglyphe
354045
thrphesersertyrglymethistrpvalargglnalaproglylys
505560
glyleuglutrpvalalavalilesertyraspglyserasnlystyr
65707580
tyralaaspservallysglyargphethrileserargaspasnser
859095
lysasnthrleutyrleuglnmetasnserleuargalagluaspthr
100105110
alavaltyrtyrcysalaargthraspphetrpserglyserpropro
115120125
glyleuasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalsersergly
130135140
serthrserglyserglylysproglyserglygluglyserthrlys
145150155160
glyaspileglnleuthrglnserproserservalseralaserval
165170175
glyaspargvalthrilethrcysargalaserglnglyileserser
180185190
trpleualatrptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleu
195200205
iletyrglyalaserserleuglnserglyvalproserargpheser
210215220
glyserglyserglythraspphethrleuthrileserserleugln
225230235240
progluaspphealathrtyrtyrcysglnglniletyrthrphepro
245250255
phethrpheglyglyglythrlysvalgluilelysargalaalaala
260265270
leuaspasnglulysserasnglythrileilehisvallysglylys
275280285
hisleucysproserproleupheproglyproserlysprophetrp
290295300
valleuvalvalvalglyglyvalleualacystyrserleuleuval
305310315320
thrvalalapheileilephetrpvalargserlysargserargleu
325330335
leuhisserasptyrmetasnmetthrproargargproglyprothr
340345350
arglyshistyrglnprotyralaproproargaspphealaalatyr
355360365
argserargvallyspheserargseralaaspalaproalatyrgln
370375380
glnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargargglu
385390395400
glutyraspvalleuasplysargargglyargaspproglumetgly
405410415
glylysproargarglysasnproglngluglyleutyrasngluleu
420425430
glnlysasplysmetalaglualatyrsergluileglymetlysgly
435440445
gluargargargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuser
450455460
thralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleupro
465470475480
proarg
<210>155
<211>1449
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>ry-21527cardnalxh
<400>155
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccggacatccagttgacccagtctccatcttccgtgtctgcatctgtaggagacagagtc120
accatcacttgtcgggcgagtcagggtattagcagctggttagcctggtatcagcagaaa180
ccagggaaagcccctaagctcctgatctatggtgcatccagtttgcaaagtggggtccca240
tcaaggttcagcggcagtggatctgggacagatttcactctcaccatcagcagcctgcag300
cctgaagattttgcaacttattactgtcagcagatatacaccttccctttcacttttggc360
ggagggaccaaggttgagatcaaacgggggtctacatccggctccgggaagcccggaagt420
ggcgaaggtagtacaaaggggcaggtgcagctggtggagtctgggggaggcgtggtccag480
cctgggaggtccctgagactctcctgtgcagcgtctggattcaccttcagtagctatggc540
atgcactgggtccgccaggctccaggcaaggggctggagtgggtggcagttatatcgtat600
gatggaagtaataaatactatgcagactccgtgaagggccgattcaccatctccagagac660
aattccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggcggtg720
tactactgcgccagaactgacttctggagcggatcccctccaggcttagattactgggga780
cagggtacattggtcaccgtctcctcagccgctgcccttgataatgaaaagtcaaacgga840
acaatcattcacgtgaagggcaagcacctctgtccgtcacccttgttccctggtccatcc900
aagccattctgggtgttggtcgtagtgggtggagtcctcgcttgttactctctgctcgtc960
accgtggcttttataatcttctgggttagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgat1020
tacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgca1080
ccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgca1140
ccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaa1200
gagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaaga1260
cgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcc1320
tattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtac1380
cagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgcca1440
cctaggtaa1449
<210>156
<211>482
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>ry-21527carlxh
<400>156
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproaspileglnleuthrglnserproserserval
202530
seralaservalglyaspargvalthrilethrcysargalasergln
354045
glyilesersertrpleualatrptyrglnglnlysproglylysala
505560
prolysleuleuiletyrglyalaserserleuglnserglyvalpro
65707580
serargpheserglyserglyserglythraspphethrleuthrile
859095
serserleuglnprogluaspphealathrtyrtyrcysglnglnile
100105110
tyrthrpheprophethrpheglyglyglythrlysvalgluilelys
115120125
argglyserthrserglyserglylysproglyserglygluglyser
130135140
thrlysglyglnvalglnleuvalgluserglyglyglyvalvalgln
145150155160
proglyargserleuargleusercysalaalaserglyphethrphe
165170175
sersertyrglymethistrpvalargglnalaproglylysglyleu
180185190
glutrpvalalavalilesertyraspglyserasnlystyrtyrala
195200205
aspservallysglyargphethrileserargaspasnserlysasn
210215220
thrleutyrleuglnmetasnserleuargalagluaspthralaval
225230235240
tyrtyrcysalaargthraspphetrpserglyserproproglyleu
245250255
asptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserseralaalaala
260265270
leuaspasnglulysserasnglythrileilehisvallysglylys
275280285
hisleucysproserproleupheproglyproserlysprophetrp
290295300
valleuvalvalvalglyglyvalleualacystyrserleuleuval
305310315320
thrvalalapheileilephetrpvalargserlysargserargleu
325330335
leuhisserasptyrmetasnmetthrproargargproglyprothr
340345350
arglyshistyrglnprotyralaproproargaspphealaalatyr
355360365
argserargvallyspheserargseralaaspalaproalatyrgln
370375380
glnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargargglu
385390395400
glutyraspvalleuasplysargargglyargaspproglumetgly
405410415
glylysproargarglysasnproglngluglyleutyrasngluleu
420425430
glnlysasplysmetalaglualatyrsergluileglymetlysgly
435440445
gluargargargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuser
450455460
thralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleupro
465470475480
proarg
<210>157
<211>1479
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>pp-21528cardnahxl
<400>157
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtgcagctggtgcagtctggggctgaggtgaagaagcctgggtcctcggtgaag120
gtctcctgcaaggcttctggaggcaccttcagcagctatgctatcagctgggtgcgacag180
gcccctggacaagggcttgagtggatgggagggatcatccctatctttggtacagcaaac240
tacgcacagaagttccagggcagagtcacgattaccgcggacgaatccacgagcacagcc300
tacatggagctgagcagcctgagatctgaggacacggcggtgtactactgcgccagaact360
cctgaatactcctccagcatatggcactattactacggcatggacgtatggggccaggga420
acaactgtcaccgtctcctcagggtctacatccggctccgggaagcccggaagtggcgaa480
ggtagtacaaagggggacatcgtgatgacccagtctccagactccctggctgtgtctctg540
ggcgagagggccaccatcaactgcaagtccagccagagtgttttatacagctccaacaat600
aagaactacttagcttggtaccagcagaaaccaggacagcctcctaagctgctcatttac660
tgggcatctacccgggaatccggggtccctgaccgattcagtggcagcgggtctgggaca720
gatttcactctcaccatcagcagcctgcaggctgaagatgtggcagtttattactgtcag780
cagttcgcccacactcctttcacttttggcggagggaccaaggttgagatcaaacgggcc840
gctgcccttgataatgaaaagtcaaacggaacaatcattcacgtgaagggcaagcacctc900
tgtccgtcacccttgttccctggtccatccaagccattctgggtgttggtcgtagtgggt960
ggagtcctcgcttgttactctctgctcgtcaccgtggcttttataatcttctgggttaga1020
tccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggc1080
cccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagc1140
agggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactg1200
tataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcagagga1260
cgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctataat1320
gagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagagcgg1380
agaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggatact1440
tatgacgctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1479
<210>158
<211>492
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>pp-21528carhxl
<400>158
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalglnleuvalglnserglyalagluval
202530
lyslysproglyserservallysvalsercyslysalaserglygly
354045
thrphesersertyralailesertrpvalargglnalaproglygln
505560
glyleuglutrpmetglyglyileileproilepheglythralaasn
65707580
tyralaglnlyspheglnglyargvalthrilethralaaspgluser
859095
thrserthralatyrmetgluleuserserleuargsergluaspthr
100105110
alavaltyrtyrcysalaargthrproglutyrserserseriletrp
115120125
histyrtyrtyrglymetaspvaltrpglyglnglythrthrvalthr
130135140
valserserglyserthrserglyserglylysproglyserglyglu
145150155160
glyserthrlysglyaspilevalmetthrglnserproaspserleu
165170175
alavalserleuglygluargalathrileasncyslyssersergln
180185190
servalleutyrserserasnasnlysasntyrleualatrptyrgln
195200205
glnlysproglyglnproprolysleuleuiletyrtrpalaserthr
210215220
arggluserglyvalproaspargpheserglyserglyserglythr
225230235240
aspphethrleuthrileserserleuglnalagluaspvalalaval
245250255
tyrtyrcysglnglnphealahisthrprophethrpheglyglygly
260265270
thrlysvalgluilelysargalaalaalaleuaspasnglulysser
275280285
asnglythrileilehisvallysglylyshisleucysproserpro
290295300
leupheproglyproserlysprophetrpvalleuvalvalvalgly
305310315320
glyvalleualacystyrserleuleuvalthrvalalapheileile
325330335
phetrpvalargserlysargserargleuleuhisserasptyrmet
340345350
asnmetthrproargargproglyprothrarglyshistyrglnpro
355360365
tyralaproproargaspphealaalatyrargserargvallysphe
370375380
serargseralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasnglnleu
385390395400
tyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyraspvalleuasp
405410415
lysargargglyargaspproglumetglyglylysproargarglys
420425430
asnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasplysmetala
435440445
glualatyrsergluileglymetlysglygluargargargglylys
450455460
glyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathrlysaspthr
465470475480
tyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
485490
<210>159
<211>1479
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>pp-21528cardnalxh
<400>159
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccggacatcgtgatgacccagtctccagactccctggctgtgtctctgggcgagagggcc120
accatcaactgcaagtccagccagagtgttttatacagctccaacaataagaactactta180
gcttggtaccagcagaaaccaggacagcctcctaagctgctcatttactgggcatctacc240
cgggaatccggggtccctgaccgattcagtggcagcgggtctgggacagatttcactctc300
accatcagcagcctgcaggctgaagatgtggcagtttattactgtcagcagttcgcccac360
actcctttcacttttggcggagggaccaaggttgagatcaaacgggggtctacatccggc420
tccgggaagcccggaagtggcgaaggtagtacaaaggggcaggtgcagctggtgcagtct480
ggggctgaggtgaagaagcctgggtcctcggtgaaggtctcctgcaaggcttctggaggc540
accttcagcagctatgctatcagctgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtgg600
atgggagggatcatccctatctttggtacagcaaactacgcacagaagttccagggcaga660
gtcacgattaccgcggacgaatccacgagcacagcctacatggagctgagcagcctgaga720
tctgaggacacggcggtgtactactgcgccagaactcctgaatactcctccagcatatgg780
cactattactacggcatggacgtatggggccagggaacaactgtcaccgtctcctcagcc840
gctgcccttgataatgaaaagtcaaacggaacaatcattcacgtgaagggcaagcacctc900
tgtccgtcacccttgttccctggtccatccaagccattctgggtgttggtcgtagtgggt960
ggagtcctcgcttgttactctctgctcgtcaccgtggcttttataatcttctgggttaga1020
tccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggc1080
cccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagc1140
agggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactg1200
tataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcagagga1260
cgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctataat1320
gagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagagcgg1380
agaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggatact1440
tatgacgctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1479
<210>160
<211>492
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>pp-21528carlxh
<400>160
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproaspilevalmetthrglnserproaspserleu
202530
alavalserleuglygluargalathrileasncyslyssersergln
354045
servalleutyrserserasnasnlysasntyrleualatrptyrgln
505560
glnlysproglyglnproprolysleuleuiletyrtrpalaserthr
65707580
arggluserglyvalproaspargpheserglyserglyserglythr
859095
aspphethrleuthrileserserleuglnalagluaspvalalaval
100105110
tyrtyrcysglnglnphealahisthrprophethrpheglyglygly
115120125
thrlysvalgluilelysargglyserthrserglyserglylyspro
130135140
glyserglygluglyserthrlysglyglnvalglnleuvalglnser
145150155160
glyalagluvallyslysproglyserservallysvalsercyslys
165170175
alaserglyglythrphesersertyralailesertrpvalarggln
180185190
alaproglyglnglyleuglutrpmetglyglyileileproilephe
195200205
glythralaasntyralaglnlyspheglnglyargvalthrilethr
210215220
alaaspgluserthrserthralatyrmetgluleuserserleuarg
225230235240
sergluaspthralavaltyrtyrcysalaargthrproglutyrser
245250255
serseriletrphistyrtyrtyrglymetaspvaltrpglyglngly
260265270
thrthrvalthrvalserseralaalaalaleuaspasnglulysser
275280285
asnglythrileilehisvallysglylyshisleucysproserpro
290295300
leupheproglyproserlysprophetrpvalleuvalvalvalgly
305310315320
glyvalleualacystyrserleuleuvalthrvalalapheileile
325330335
phetrpvalargserlysargserargleuleuhisserasptyrmet
340345350
asnmetthrproargargproglyprothrarglyshistyrglnpro
355360365
tyralaproproargaspphealaalatyrargserargvallysphe
370375380
serargseralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasnglnleu
385390395400
tyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyraspvalleuasp
405410415
lysargargglyargaspproglumetglyglylysproargarglys
420425430
asnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasplysmetala
435440445
glualatyrsergluileglymetlysglygluargargargglylys
450455460
glyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathrlysaspthr
465470475480
tyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
485490
<210>161
<211>1452
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>rd-21530cardnahxl
<400>161
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtgcagctggtggagtctgggggaggcgtggtccagcctgggaggtccctgaga120
ctctcctgtgcagcgtctggattcaccttcagtagctatggcatgcactgggtccgccag180
gctccaggcaaggggctggagtgggtggcagttatatcgtatgatggaagtaataaatac240
tatgcagactccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaattccaagaacacgctg300
tatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggcggtgtactactgcgtcaagggg360
ccgttgcaggagccgccatacgattatggaatggacgtatggggccagggaacaactgtc420
accgtctcctcagggtctacatccggctccgggaagcccggaagtggcgaaggtagtaca480
aagggggaaatagtgatgacgcagtctccagccaccctgtctgtgtctccaggggaaaga540
gccaccctctcctgcagggccagtcagagtgttagcagcaacttagcctggtaccagcag600
aaacctggccaggctcccaggctcctcatctatagcgcatccaccagggccactggtatc660
ccagccaggttcagtggcagtgggtctgggacagagttcactctcaccatcagcagcctg720
cagtctgaagattttgcagtttattactgtcagcagcaccacgtctggcctctcactttt780
ggcggagggaccaaggttgagatcaaacgggccgctgcccttgataatgaaaagtcaaac840
ggaacaatcattcacgtgaagggcaagcacctctgtccgtcacccttgttccctggtcca900
tccaagccattctgggtgttggtcgtagtgggtggagtcctcgcttgttactctctgctc960
gtcaccgtggcttttataatcttctgggttagatccaaaagaagccgcctgctccatagc1020
gattacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttac1080
gcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagat1140
gcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagg1200
gaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaacca1260
agacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaa1320
gcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttg1380
taccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctg1440
ccacctaggtaa1452
<210>162
<211>483
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>rd-21530carhxl
<400>162
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalglnleuvalgluserglyglyglyval
202530
valglnproglyargserleuargleusercysalaalaserglyphe
354045
thrphesersertyrglymethistrpvalargglnalaproglylys
505560
glyleuglutrpvalalavalilesertyraspglyserasnlystyr
65707580
tyralaaspservallysglyargphethrileserargaspasnser
859095
lysasnthrleutyrleuglnmetasnserleuargalagluaspthr
100105110
alavaltyrtyrcysvallysglyproleuglngluproprotyrasp
115120125
tyrglymetaspvaltrpglyglnglythrthrvalthrvalserser
130135140
glyserthrserglyserglylysproglyserglygluglyserthr
145150155160
lysglygluilevalmetthrglnserproalathrleuservalser
165170175
proglygluargalathrleusercysargalaserglnservalser
180185190
serasnleualatrptyrglnglnlysproglyglnalaproargleu
195200205
leuiletyrseralaserthrargalathrglyileproalaargphe
210215220
serglyserglyserglythrgluphethrleuthrileserserleu
225230235240
glnsergluaspphealavaltyrtyrcysglnglnhishisvaltrp
245250255
proleuthrpheglyglyglythrlysvalgluilelysargalaala
260265270
alaleuaspasnglulysserasnglythrileilehisvallysgly
275280285
lyshisleucysproserproleupheproglyproserlysprophe
290295300
trpvalleuvalvalvalglyglyvalleualacystyrserleuleu
305310315320
valthrvalalapheileilephetrpvalargserlysargserarg
325330335
leuleuhisserasptyrmetasnmetthrproargargproglypro
340345350
thrarglyshistyrglnprotyralaproproargaspphealaala
355360365
tyrargserargvallyspheserargseralaaspalaproalatyr
370375380
glnglnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargarg
385390395400
gluglutyraspvalleuasplysargargglyargaspproglumet
405410415
glyglylysproargarglysasnproglngluglyleutyrasnglu
420425430
leuglnlysasplysmetalaglualatyrsergluileglymetlys
435440445
glygluargargargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleu
450455460
serthralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleu
465470475480
proproarg
<210>163
<211>1452
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>rd-21530cardnalxh
<400>163
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccggaaatagtgatgacgcagtctccagccaccctgtctgtgtctccaggggaaagagcc120
accctctcctgcagggccagtcagagtgttagcagcaacttagcctggtaccagcagaaa180
cctggccaggctcccaggctcctcatctatagcgcatccaccagggccactggtatccca240
gccaggttcagtggcagtgggtctgggacagagttcactctcaccatcagcagcctgcag300
tctgaagattttgcagtttattactgtcagcagcaccacgtctggcctctcacttttggc360
ggagggaccaaggttgagatcaaacgggggtctacatccggctccgggaagcccggaagt420
ggcgaaggtagtacaaaggggcaggtgcagctggtggagtctgggggaggcgtggtccag480
cctgggaggtccctgagactctcctgtgcagcgtctggattcaccttcagtagctatggc540
atgcactgggtccgccaggctccaggcaaggggctggagtgggtggcagttatatcgtat600
gatggaagtaataaatactatgcagactccgtgaagggccgattcaccatctccagagac660
aattccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggcggtg720
tactactgcgtcaaggggccgttgcaggagccgccatacgattatggaatggacgtatgg780
ggccagggaacaactgtcaccgtctcctcagccgctgcccttgataatgaaaagtcaaac840
ggaacaatcattcacgtgaagggcaagcacctctgtccgtcacccttgttccctggtcca900
tccaagccattctgggtgttggtcgtagtgggtggagtcctcgcttgttactctctgctc960
gtcaccgtggcttttataatcttctgggttagatccaaaagaagccgcctgctccatagc1020
gattacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttac1080
gcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagat1140
gcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagg1200
gaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaacca1260
agacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaa1320
gcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttg1380
taccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctg1440
ccacctaggtaa1452
<210>164
<211>483
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>rd-21530carlxh
<400>164
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargprogluilevalmetthrglnserproalathrleu
202530
servalserproglygluargalathrleusercysargalasergln
354045
servalserserasnleualatrptyrglnglnlysproglyglnala
505560
proargleuleuiletyrseralaserthrargalathrglyilepro
65707580
alaargpheserglyserglyserglythrgluphethrleuthrile
859095
serserleuglnsergluaspphealavaltyrtyrcysglnglnhis
100105110
hisvaltrpproleuthrpheglyglyglythrlysvalgluilelys
115120125
argglyserthrserglyserglylysproglyserglygluglyser
130135140
thrlysglyglnvalglnleuvalgluserglyglyglyvalvalgln
145150155160
proglyargserleuargleusercysalaalaserglyphethrphe
165170175
sersertyrglymethistrpvalargglnalaproglylysglyleu
180185190
glutrpvalalavalilesertyraspglyserasnlystyrtyrala
195200205
aspservallysglyargphethrileserargaspasnserlysasn
210215220
thrleutyrleuglnmetasnserleuargalagluaspthralaval
225230235240
tyrtyrcysvallysglyproleuglngluproprotyrasptyrgly
245250255
metaspvaltrpglyglnglythrthrvalthrvalserseralaala
260265270
alaleuaspasnglulysserasnglythrileilehisvallysgly
275280285
lyshisleucysproserproleupheproglyproserlysprophe
290295300
trpvalleuvalvalvalglyglyvalleualacystyrserleuleu
305310315320
valthrvalalapheileilephetrpvalargserlysargserarg
325330335
leuleuhisserasptyrmetasnmetthrproargargproglypro
340345350
thrarglyshistyrglnprotyralaproproargaspphealaala
355360365
tyrargserargvallyspheserargseralaaspalaproalatyr
370375380
glnglnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargarg
385390395400
gluglutyraspvalleuasplysargargglyargaspproglumet
405410415
glyglylysproargarglysasnproglngluglyleutyrasnglu
420425430
leuglnlysasplysmetalaglualatyrsergluileglymetlys
435440445
glygluargargargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleu
450455460
serthralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleu
465470475480
proproarg
<210>165
<211>1440
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>165
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtccaactgcaagaaagcggacccggactggtgaagccttctgagacacttagt120
ctgacgtgcacggtcagtggcggctccatctcctcctattattggtcatggatacgacaa180
cccccaggtaagggcctggaatggattggctatatctactattcaggaagcacgaactac240
aatcccagcctgaagtcccgagtgacaatttcagtagataccagtaaaaaccagttcagt300
cttaaactgtcaagcgtgacagctgccgacaccgctgtgtattactgcgtctcactggtg360
tattgtggaggggattgttatagcgggttcgattattggggacagggaaccctggtgact420
gtatcttccggcggcggcggctcagggggtggcggtagtggcggtgggggttccgatatt480
caactgacacaatcccccagctcactcagcgccagcgtgggggacagggttagctttacc540
tgtcaagcctctcaggatataaataactttctgaactggtatcaacagaagcctgggaag600
gcgcccaaactcctgatctatgatgcgtccaacctggaaactggcgtgccttcacgcttt660
agcggctctggcagtggtacagacttcacttttaccatctcttcacttcagccggaggac720
atcgccacatattactgtcaacagtacggaaacttgccctttacttttggaggcggcacc780
aaagttgaaatcaaaagggccgctgccctggataacgaaaagagcaatgggactataata840
catgttaaaggaaaacacctgtgtccatctcccctgttccctggaccgtcaaagccattt900
tgggtgctcgtggttgtcggtggcgttctcgcctgttatagcttgctggtgacagtagcc960
ttcattatcttttgggtgagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaat1020
atgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctaga1080
gatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtat1140
cagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgac1200
gttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaac1260
ccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaa1320
ataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactc1380
agcactgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1440
<210>166
<211>479
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>166
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalglnleuglngluserglyproglyleu
202530
vallysprosergluthrleuserleuthrcysthrvalserglygly
354045
serilesersertyrtyrtrpsertrpileargglnproproglylys
505560
glyleuglutrpileglytyriletyrtyrserglyserthrasntyr
65707580
asnproserleulysserargvalthrileservalaspthrserlys
859095
asnglnpheserleulysleuserservalthralaalaaspthrala
100105110
valtyrtyrcysvalserleuvaltyrcysglyglyaspcystyrser
115120125
glypheasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalsersergly
130135140
glyglyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyseraspile
145150155160
glnleuthrglnserproserserleuseralaservalglyasparg
165170175
valserphethrcysglnalaserglnaspileasnasnpheleuasn
180185190
trptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuiletyrasp
195200205
alaserasnleugluthrglyvalproserargpheserglysergly
210215220
serglythraspphethrphethrileserserleuglnprogluasp
225230235240
ilealathrtyrtyrcysglnglntyrglyasnleuprophethrphe
245250255
glyglyglythrlysvalgluilelysargalaalaalaleuaspasn
260265270
glulysserasnglythrileilehisvallysglylyshisleucys
275280285
proserproleupheproglyproserlysprophetrpvalleuval
290295300
valvalglyglyvalleualacystyrserleuleuvalthrvalala
305310315320
pheileilephetrpvalargserlysargserargleuleuhisser
325330335
asptyrmetasnmetthrproargargproglyprothrarglyshis
340345350
tyrglnprotyralaproproargaspphealaalatyrargserarg
355360365
vallyspheserargseralaaspalaproalatyrglnglnglygln
370375380
asnglnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyrasp
385390395400
valleuasplysargargglyargaspproglumetglyglylyspro
405410415
argarglysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasp
420425430
lysmetalaglualatyrsergluileglymetlysglygluargarg
435440445
argglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathr
450455460
lysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
465470475
<210>167
<211>1374
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>167
caggtccaactgcaagaaagcggacccggactggtgaagccttctgagacacttagtctg60
acgtgcacggtcagtggcggctccatctcctcctattattggtcatggatacgacaaccc120
ccaggtaagggcctggaatggattggctatatctactattcaggaagcacgaactacaat180
cccagcctgaagtcccgagtgacaatttcagtagataccagtaaaaaccagttcagtctt240
aaactgtcaagcgtgacagctgccgacaccgctgtgtattactgcgtctcactggtgtat300
tgtggaggggattgttatagcgggttcgattattggggacagggaaccctggtgactgta360
tcttccggcggcggcggctcagggggtggcggtagtggcggtgggggttccgatattcaa420
ctgacacaatcccccagctcactcagcgccagcgtgggggacagggttagctttacctgt480
caagcctctcaggatataaataactttctgaactggtatcaacagaagcctgggaaggcg540
cccaaactcctgatctatgatgcgtccaacctggaaactggcgtgccttcacgctttagc600
ggctctggcagtggtacagacttcacttttaccatctcttcacttcagccggaggacatc660
gccacatattactgtcaacagtacggaaacttgccctttacttttggaggcggcaccaaa720
gttgaaatcaaaagggccgctgccctggataacgaaaagagcaatgggactataatacat780
gttaaaggaaaacacctgtgtccatctcccctgttccctggaccgtcaaagccattttgg840
gtgctcgtggttgtcggtggcgttctcgcctgttatagcttgctggtgacagtagccttc900
attatcttttgggtgagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatg960
actccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagat1020
ttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcag1080
cagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgtt1140
ttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccc1200
caggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaata1260
ggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagc1320
actgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctagg1374
<210>168
<211>458
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>168
glnvalglnleuglngluserglyproglyleuvallysproserglu
151015
thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserilesersertyr
202530
tyrtrpsertrpileargglnproproglylysglyleuglutrpile
354045
glytyriletyrtyrserglyserthrasntyrasnproserleulys
505560
serargvalthrileservalaspthrserlysasnglnpheserleu
65707580
lysleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyrcysval
859095
serleuvaltyrcysglyglyaspcystyrserglypheasptyrtrp
100105110
glyglnglythrleuvalthrvalserserglyglyglyglysergly
115120125
glyglyglyserglyglyglyglyseraspileglnleuthrglnser
130135140
proserserleuseralaservalglyaspargvalserphethrcys
145150155160
glnalaserglnaspileasnasnpheleuasntrptyrglnglnlys
165170175
proglylysalaprolysleuleuiletyraspalaserasnleuglu
180185190
thrglyvalproserargpheserglyserglyserglythraspphe
195200205
thrphethrileserserleuglnprogluaspilealathrtyrtyr
210215220
cysglnglntyrglyasnleuprophethrpheglyglyglythrlys
225230235240
valgluilelysargalaalaalaleuaspasnglulysserasngly
245250255
thrileilehisvallysglylyshisleucysproserproleuphe
260265270
proglyproserlysprophetrpvalleuvalvalvalglyglyval
275280285
leualacystyrserleuleuvalthrvalalapheileilephetrp
290295300
valargserlysargserargleuleuhisserasptyrmetasnmet
305310315320
thrproargargproglyprothrarglyshistyrglnprotyrala
325330335
proproargaspphealaalatyrargserargvallyspheserarg
340345350
seralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasn
355360365
gluleuasnleuglyargarggluglutyraspvalleuasplysarg
370375380
argglyargaspproglumetglyglylysproargarglysasnpro
385390395400
glngluglyleutyrasngluleuglnlysasplysmetalagluala
405410415
tyrsergluileglymetlysglygluargargargglylysglyhis
420425430
aspglyleutyrglnglyleuserthralathrlysaspthrtyrasp
435440445
alaleuhismetglnalaleuproproarg
450455
<210>169
<211>1467
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>169
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtgcagctgcaggaatccggaccggggctggtgaagcccagcgagactctgagt120
ctcacgtgtacagtttctggaggtagcattagctcctactattggtcatggataaggcag180
ccccccgggaagggattggaatggatcggctatatttactacagtgggagcaccaattac240
aacccctcactgaagtctagagttacaatcagcgttgacacctcaaagaatcagttcagt300
ttgaaattgtctagcgtcacagcagctgatacagccgtctattattgtgtttctctggtc360
tattgcggtggggattgttacagtggctttgactattgggggcagggtactctggttaca420
gtttcttccggggggggaggctctgggggcggaggctcaggtggtggaggcagcgacatc480
cagttgacacagagcccgagttccttgtccgcctccgtcggggatagagtgtcatttacc540
tgtcaggcctctcaggatattaataactttctgaattggtatcagcaaaagcccggaaag600
gcacccaagctgttgatttacgacgccagtaacctggagacaggcgtgccctcccggttt660
agtggtagcggaagcggtacggattttacctttactatcagctctctccaacccgaagac720
attgcaacctactattgtcaacaatatggaaacctgccttttacatttggcggcggcacc780
aaggtggagattaagcgggcggcagctattgaggtgatgtatccaccgccttacctggat840
aacgaaaagagtaacggtaccatcattcacgtgaaaggtaaacacctgtgtccttctccc900
ctcttccccgggccatcaaagcccttctgggttcttgtggtcgtgggaggcgtgcttgct960
tgttattctctgctcgttaccgtggcgtttatcattttttgggttagatccaaaagaagc1020
cgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaa1080
cactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttt1140
tccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctc1200
aacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgag1260
atgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaag1320
gataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaa1380
gggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctc1440
cacatgcaagccctgccacctaggtaa1467
<210>170
<211>488
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>170
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalglnleuglngluserglyproglyleu
202530
vallysprosergluthrleuserleuthrcysthrvalserglygly
354045
serilesersertyrtyrtrpsertrpileargglnproproglylys
505560
glyleuglutrpileglytyriletyrtyrserglyserthrasntyr
65707580
asnproserleulysserargvalthrileservalaspthrserlys
859095
asnglnpheserleulysleuserservalthralaalaaspthrala
100105110
valtyrtyrcysvalserleuvaltyrcysglyglyaspcystyrser
115120125
glypheasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalsersergly
130135140
glyglyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyseraspile
145150155160
glnleuthrglnserproserserleuseralaservalglyasparg
165170175
valserphethrcysglnalaserglnaspileasnasnpheleuasn
180185190
trptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuiletyrasp
195200205
alaserasnleugluthrglyvalproserargpheserglysergly
210215220
serglythraspphethrphethrileserserleuglnprogluasp
225230235240
ilealathrtyrtyrcysglnglntyrglyasnleuprophethrphe
245250255
glyglyglythrlysvalgluilelysargalaalaalailegluval
260265270
mettyrproproprotyrleuaspasnglulysserasnglythrile
275280285
ilehisvallysglylyshisleucysproserproleupheprogly
290295300
proserlysprophetrpvalleuvalvalvalglyglyvalleuala
305310315320
cystyrserleuleuvalthrvalalapheileilephetrpvalarg
325330335
serlysargserargleuleuhisserasptyrmetasnmetthrpro
340345350
argargproglyprothrarglyshistyrglnprotyralapropro
355360365
argaspphealaalatyrargserargvallyspheserargserala
370375380
aspalaproalatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasngluleu
385390395400
asnleuglyargarggluglutyraspvalleuasplysargarggly
405410415
argaspproglumetglyglylysproargarglysasnproglnglu
420425430
glyleutyrasngluleuglnlysasplysmetalaglualatyrser
435440445
gluileglymetlysglygluargargargglylysglyhisaspgly
450455460
leutyrglnglyleuserthralathrlysaspthrtyraspalaleu
465470475480
hismetglnalaleuproproarg
485
<210>171
<211>1401
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>171
caggtgcagctgcaggaatccggaccggggctggtgaagcccagcgagactctgagtctc60
acgtgtacagtttctggaggtagcattagctcctactattggtcatggataaggcagccc120
cccgggaagggattggaatggatcggctatatttactacagtgggagcaccaattacaac180
ccctcactgaagtctagagttacaatcagcgttgacacctcaaagaatcagttcagtttg240
aaattgtctagcgtcacagcagctgatacagccgtctattattgtgtttctctggtctat300
tgcggtggggattgttacagtggctttgactattgggggcagggtactctggttacagtt360
tcttccggggggggaggctctgggggcggaggctcaggtggtggaggcagcgacatccag420
ttgacacagagcccgagttccttgtccgcctccgtcggggatagagtgtcatttacctgt480
caggcctctcaggatattaataactttctgaattggtatcagcaaaagcccggaaaggca540
cccaagctgttgatttacgacgccagtaacctggagacaggcgtgccctcccggtttagt600
ggtagcggaagcggtacggattttacctttactatcagctctctccaacccgaagacatt660
gcaacctactattgtcaacaatatggaaacctgccttttacatttggcggcggcaccaag720
gtggagattaagcgggcggcagctattgaggtgatgtatccaccgccttacctggataac780
gaaaagagtaacggtaccatcattcacgtgaaaggtaaacacctgtgtccttctcccctc840
ttccccgggccatcaaagcccttctgggttcttgtggtcgtgggaggcgtgcttgcttgt900
tattctctgctcgttaccgtggcgtttatcattttttgggttagatccaaaagaagccgc960
ctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacac1020
taccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttcc1080
agatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaac1140
ctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatg1200
ggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggat1260
aagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaaggg1320
cacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccac1380
atgcaagccctgccacctagg1401
<210>172
<211>467
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>172
glnvalglnleuglngluserglyproglyleuvallysproserglu
151015
thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserilesersertyr
202530
tyrtrpsertrpileargglnproproglylysglyleuglutrpile
354045
glytyriletyrtyrserglyserthrasntyrasnproserleulys
505560
serargvalthrileservalaspthrserlysasnglnpheserleu
65707580
lysleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyrcysval
859095
serleuvaltyrcysglyglyaspcystyrserglypheasptyrtrp
100105110
glyglnglythrleuvalthrvalserserglyglyglyglysergly
115120125
glyglyglyserglyglyglyglyseraspileglnleuthrglnser
130135140
proserserleuseralaservalglyaspargvalserphethrcys
145150155160
glnalaserglnaspileasnasnpheleuasntrptyrglnglnlys
165170175
proglylysalaprolysleuleuiletyraspalaserasnleuglu
180185190
thrglyvalproserargpheserglyserglyserglythraspphe
195200205
thrphethrileserserleuglnprogluaspilealathrtyrtyr
210215220
cysglnglntyrglyasnleuprophethrpheglyglyglythrlys
225230235240
valgluilelysargalaalaalailegluvalmettyrpropropro
245250255
tyrleuaspasnglulysserasnglythrileilehisvallysgly
260265270
lyshisleucysproserproleupheproglyproserlysprophe
275280285
trpvalleuvalvalvalglyglyvalleualacystyrserleuleu
290295300
valthrvalalapheileilephetrpvalargserlysargserarg
305310315320
leuleuhisserasptyrmetasnmetthrproargargproglypro
325330335
thrarglyshistyrglnprotyralaproproargaspphealaala
340345350
tyrargserargvallyspheserargseralaaspalaproalatyr
355360365
glnglnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargarg
370375380
gluglutyraspvalleuasplysargargglyargaspproglumet
385390395400
glyglylysproargarglysasnproglngluglyleutyrasnglu
405410415
leuglnlysasplysmetalaglualatyrsergluileglymetlys
420425430
glygluargargargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleu
435440445
serthralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleu
450455460
proproarg
465
<210>173
<211>1548
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>173
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtgcaattgcaagagtccggccccggactcgttaaacccagtgagacgcttagc120
ctgacctgtaccgtctcagggggcagcatctcctcttattactggagctggatcaggcag180
cctccaggaaaaggccttgaatggattgggtacatctactactctggctcaacaaattat240
aatccatccctgaagtcccgcgtgactatctctgtggacaccagcaagaatcagttttca300
ctgaagttgtctagtgttaccgcggccgacaccgccgtatactactgtgtgtctcttgtg360
tactgtggcggcgactgctattccgggttcgactactggggccaagggactctggtaacc420
gtgtcctcaggcggcggcgggtcaggaggaggcggcagtggaggtggcggctccgacatc480
cagctgacacaatcaccatcttccctttcagcttcagtcggggacagagtgtccttcaca540
tgccaggccagccaggatatcaataacttcctgaactggtaccaacagaaacccggaaag600
gctccaaagctcctgatctatgatgcttccaacctggagaccggcgtgccctccaggttc660
agtggttcaggatcaggcactgactttacgttcaccatatccagtcttcagcccgaagac720
attgcaacctattactgccaacaatacgggaaccttccctttacattcggaggcggcacc780
aaggtggaaatcaaaagggctgcagcattgagcaactcaataatgtattttagtcacttt840
gtaccagtgttcttgccggctaagcctactaccacacccgctccacggccacctacccca900
gctcctaccatcgcttcacagcctctgtccctgcgcccagaggcttgccgaccggccgca960
gggggcgctgttcataccagaggactggatttcgcctgcgatatctatatctgggcaccc1020
ctggccggaacctgcggcgtactcctgctgtccctggtcatcacgctctattgtaatcac1080
aggaacagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgc1140
cgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcc1200
tatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccag1260
aaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaag1320
cgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggt1380
ctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaa1440
ggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacg1500
aaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1548
<210>174
<211>515
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>174
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalglnleuglngluserglyproglyleu
202530
vallysprosergluthrleuserleuthrcysthrvalserglygly
354045
serilesersertyrtyrtrpsertrpileargglnproproglylys
505560
glyleuglutrpileglytyriletyrtyrserglyserthrasntyr
65707580
asnproserleulysserargvalthrileservalaspthrserlys
859095
asnglnpheserleulysleuserservalthralaalaaspthrala
100105110
valtyrtyrcysvalserleuvaltyrcysglyglyaspcystyrser
115120125
glypheasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalsersergly
130135140
glyglyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyseraspile
145150155160
glnleuthrglnserproserserleuseralaservalglyasparg
165170175
valserphethrcysglnalaserglnaspileasnasnpheleuasn
180185190
trptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuiletyrasp
195200205
alaserasnleugluthrglyvalproserargpheserglysergly
210215220
serglythraspphethrphethrileserserleuglnprogluasp
225230235240
ilealathrtyrtyrcysglnglntyrglyasnleuprophethrphe
245250255
glyglyglythrlysvalgluilelysargalaalaalaleuserasn
260265270
serilemettyrpheserhisphevalprovalpheleuproalalys
275280285
prothrthrthrproalaproargproprothrproalaprothrile
290295300
alaserglnproleuserleuargproglualacysargproalaala
305310315320
glyglyalavalhisthrargglyleuaspphealacysaspiletyr
325330335
iletrpalaproleualaglythrcysglyvalleuleuleuserleu
340345350
valilethrleutyrcysasnhisargasnargserlysargserarg
355360365
leuleuhisserasptyrmetasnmetthrproargargproglypro
370375380
thrarglyshistyrglnprotyralaproproargaspphealaala
385390395400
tyrargserargvallyspheserargseralaaspalaproalatyr
405410415
glnglnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargarg
420425430
gluglutyraspvalleuasplysargargglyargaspproglumet
435440445
glyglylysproargarglysasnproglngluglyleutyrasnglu
450455460
leuglnlysasplysmetalaglualatyrsergluileglymetlys
465470475480
glygluargargargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleu
485490495
serthralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleu
500505510
proproarg
515
<210>175
<211>1482
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>175
caggtgcaattgcaagagtccggccccggactcgttaaacccagtgagacgcttagcctg60
acctgtaccgtctcagggggcagcatctcctcttattactggagctggatcaggcagcct120
ccaggaaaaggccttgaatggattgggtacatctactactctggctcaacaaattataat180
ccatccctgaagtcccgcgtgactatctctgtggacaccagcaagaatcagttttcactg240
aagttgtctagtgttaccgcggccgacaccgccgtatactactgtgtgtctcttgtgtac300
tgtggcggcgactgctattccgggttcgactactggggccaagggactctggtaaccgtg360
tcctcaggcggcggcgggtcaggaggaggcggcagtggaggtggcggctccgacatccag420
ctgacacaatcaccatcttccctttcagcttcagtcggggacagagtgtccttcacatgc480
caggccagccaggatatcaataacttcctgaactggtaccaacagaaacccggaaaggct540
ccaaagctcctgatctatgatgcttccaacctggagaccggcgtgccctccaggttcagt600
ggttcaggatcaggcactgactttacgttcaccatatccagtcttcagcccgaagacatt660
gcaacctattactgccaacaatacgggaaccttccctttacattcggaggcggcaccaag720
gtggaaatcaaaagggctgcagcattgagcaactcaataatgtattttagtcactttgta780
ccagtgttcttgccggctaagcctactaccacacccgctccacggccacctaccccagct840
cctaccatcgcttcacagcctctgtccctgcgcccagaggcttgccgaccggccgcaggg900
ggcgctgttcataccagaggactggatttcgcctgcgatatctatatctgggcacccctg960
gccggaacctgcggcgtactcctgctgtccctggtcatcacgctctattgtaatcacagg1020
aacagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgc1080
cctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctat1140
cggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaac1200
caactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgc1260
agaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctc1320
tataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaagga1380
gagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaag1440
gatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctagg1482
<210>176
<211>494
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>176
glnvalglnleuglngluserglyproglyleuvallysproserglu
151015
thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserilesersertyr
202530
tyrtrpsertrpileargglnproproglylysglyleuglutrpile
354045
glytyriletyrtyrserglyserthrasntyrasnproserleulys
505560
serargvalthrileservalaspthrserlysasnglnpheserleu
65707580
lysleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyrcysval
859095
serleuvaltyrcysglyglyaspcystyrserglypheasptyrtrp
100105110
glyglnglythrleuvalthrvalserserglyglyglyglysergly
115120125
glyglyglyserglyglyglyglyseraspileglnleuthrglnser
130135140
proserserleuseralaservalglyaspargvalserphethrcys
145150155160
glnalaserglnaspileasnasnpheleuasntrptyrglnglnlys
165170175
proglylysalaprolysleuleuiletyraspalaserasnleuglu
180185190
thrglyvalproserargpheserglyserglyserglythraspphe
195200205
thrphethrileserserleuglnprogluaspilealathrtyrtyr
210215220
cysglnglntyrglyasnleuprophethrpheglyglyglythrlys
225230235240
valgluilelysargalaalaalaleuserasnserilemettyrphe
245250255
serhisphevalprovalpheleuproalalysprothrthrthrpro
260265270
alaproargproprothrproalaprothrilealaserglnproleu
275280285
serleuargproglualacysargproalaalaglyglyalavalhis
290295300
thrargglyleuaspphealacysaspiletyriletrpalaproleu
305310315320
alaglythrcysglyvalleuleuleuserleuvalilethrleutyr
325330335
cysasnhisargasnargserlysargserargleuleuhisserasp
340345350
tyrmetasnmetthrproargargproglyprothrarglyshistyr
355360365
glnprotyralaproproargaspphealaalatyrargserargval
370375380
lyspheserargseralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasn
385390395400
glnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyraspval
405410415
leuasplysargargglyargaspproglumetglyglylysproarg
420425430
arglysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasplys
435440445
metalaglualatyrsergluileglymetlysglygluargargarg
450455460
glylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathrlys
465470475480
aspthrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
485490
<210>177
<211>1440
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>177
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccggatatccagctcacgcaatccccctcaagcttgagtgcctccgtgggcgaccgggtg120
tccttcacatgtcaggcaagccaagacataaataatttcctgaattggtaccaacaaaaa180
cccggcaaggctcccaaactcctgatttatgatgcctccaatctggagaccggggtccct240
tctagattcagcggaagtggcagcggcacagactttacatttactatctcttctctgcaa300
ccagaggacatcgccacatactattgccagcaatacggcaatctgcccttcaccttcgga360
ggcggaaccaaggtagaaattaaaaggggcggtggaggctccggaggggggggctctggc420
ggagggggctcccaagtacaattgcaggagtcagggcctggactcgtgaagccttcagaa480
actttgtcactgacatgtacagtgtccggcggaagcatttccagttactattggtcctgg540
attagacagccacccggcaaaggactggaatggattggatatatctactactctggatct600
acaaactataatcccagcctcaaatccagggtcactattagtgtggatacatcaaagaat660
cagttctccttgaagctgagctcagtcactgctgccgacaccgcagtgtactattgtgtg720
agcctggtctactgcggcggagattgctacagcggtttcgattactggggccagggcacc780
ctggttaccgttagttccgcggctgctcttgataacgagaagtccaacggtacgattatc840
cacgttaagggtaagcacctttgccctagcccgctgttcccaggccccagtaagcccttt900
tgggtcctcgttgtggtaggtggggtactcgcctgctactccctgctcgtcactgtcgca960
ttcatcatcttctgggtcagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaat1020
atgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctaga1080
gatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtat1140
cagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgac1200
gttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaac1260
ccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaa1320
ataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactc1380
agcactgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1440
<210>178
<211>479
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>178
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproaspileglnleuthrglnserproserserleu
202530
seralaservalglyaspargvalserphethrcysglnalasergln
354045
aspileasnasnpheleuasntrptyrglnglnlysproglylysala
505560
prolysleuleuiletyraspalaserasnleugluthrglyvalpro
65707580
serargpheserglyserglyserglythraspphethrphethrile
859095
serserleuglnprogluaspilealathrtyrtyrcysglnglntyr
100105110
glyasnleuprophethrpheglyglyglythrlysvalgluilelys
115120125
argglyglyglyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyser
130135140
glnvalglnleuglngluserglyproglyleuvallysproserglu
145150155160
thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserilesersertyr
165170175
tyrtrpsertrpileargglnproproglylysglyleuglutrpile
180185190
glytyriletyrtyrserglyserthrasntyrasnproserleulys
195200205
serargvalthrileservalaspthrserlysasnglnpheserleu
210215220
lysleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyrcysval
225230235240
serleuvaltyrcysglyglyaspcystyrserglypheasptyrtrp
245250255
glyglnglythrleuvalthrvalserseralaalaalaleuaspasn
260265270
glulysserasnglythrileilehisvallysglylyshisleucys
275280285
proserproleupheproglyproserlysprophetrpvalleuval
290295300
valvalglyglyvalleualacystyrserleuleuvalthrvalala
305310315320
pheileilephetrpvalargserlysargserargleuleuhisser
325330335
asptyrmetasnmetthrproargargproglyprothrarglyshis
340345350
tyrglnprotyralaproproargaspphealaalatyrargserarg
355360365
vallyspheserargseralaaspalaproalatyrglnglnglygln
370375380
asnglnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyrasp
385390395400
valleuasplysargargglyargaspproglumetglyglylyspro
405410415
argarglysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasp
420425430
lysmetalaglualatyrsergluileglymetlysglygluargarg
435440445
argglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathr
450455460
lysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
465470475
<210>179
<211>1374
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>179
gatatccagctcacgcaatccccctcaagcttgagtgcctccgtgggcgaccgggtgtcc60
ttcacatgtcaggcaagccaagacataaataatttcctgaattggtaccaacaaaaaccc120
ggcaaggctcccaaactcctgatttatgatgcctccaatctggagaccggggtcccttct180
agattcagcggaagtggcagcggcacagactttacatttactatctcttctctgcaacca240
gaggacatcgccacatactattgccagcaatacggcaatctgcccttcaccttcggaggc300
ggaaccaaggtagaaattaaaaggggcggtggaggctccggaggggggggctctggcgga360
gggggctcccaagtacaattgcaggagtcagggcctggactcgtgaagccttcagaaact420
ttgtcactgacatgtacagtgtccggcggaagcatttccagttactattggtcctggatt480
agacagccacccggcaaaggactggaatggattggatatatctactactctggatctaca540
aactataatcccagcctcaaatccagggtcactattagtgtggatacatcaaagaatcag600
ttctccttgaagctgagctcagtcactgctgccgacaccgcagtgtactattgtgtgagc660
ctggtctactgcggcggagattgctacagcggtttcgattactggggccagggcaccctg720
gttaccgttagttccgcggctgctcttgataacgagaagtccaacggtacgattatccac780
gttaagggtaagcacctttgccctagcccgctgttcccaggccccagtaagcccttttgg840
gtcctcgttgtggtaggtggggtactcgcctgctactccctgctcgtcactgtcgcattc900
atcatcttctgggtcagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatg960
actccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagat1020
ttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcag1080
cagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgtt1140
ttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccc1200
caggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaata1260
ggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagc1320
actgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctagg1374
<210>180
<211>458
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>180
aspileglnleuthrglnserproserserleuseralaservalgly
151015
aspargvalserphethrcysglnalaserglnaspileasnasnphe
202530
leuasntrptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuile
354045
tyraspalaserasnleugluthrglyvalproserargphesergly
505560
serglyserglythraspphethrphethrileserserleuglnpro
65707580
gluaspilealathrtyrtyrcysglnglntyrglyasnleuprophe
859095
thrpheglyglyglythrlysvalgluilelysargglyglyglygly
100105110
serglyglyglyglyserglyglyglyglyserglnvalglnleugln
115120125
gluserglyproglyleuvallysprosergluthrleuserleuthr
130135140
cysthrvalserglyglyserilesersertyrtyrtrpsertrpile
145150155160
argglnproproglylysglyleuglutrpileglytyriletyrtyr
165170175
serglyserthrasntyrasnproserleulysserargvalthrile
180185190
servalaspthrserlysasnglnpheserleulysleuserserval
195200205
thralaalaaspthralavaltyrtyrcysvalserleuvaltyrcys
210215220
glyglyaspcystyrserglypheasptyrtrpglyglnglythrleu
225230235240
valthrvalserseralaalaalaleuaspasnglulysserasngly
245250255
thrileilehisvallysglylyshisleucysproserproleuphe
260265270
proglyproserlysprophetrpvalleuvalvalvalglyglyval
275280285
leualacystyrserleuleuvalthrvalalapheileilephetrp
290295300
valargserlysargserargleuleuhisserasptyrmetasnmet
305310315320
thrproargargproglyprothrarglyshistyrglnprotyrala
325330335
proproargaspphealaalatyrargserargvallyspheserarg
340345350
seralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasn
355360365
gluleuasnleuglyargarggluglutyraspvalleuasplysarg
370375380
argglyargaspproglumetglyglylysproargarglysasnpro
385390395400
glngluglyleutyrasngluleuglnlysasplysmetalagluala
405410415
tyrsergluileglymetlysglygluargargargglylysglyhis
420425430
aspglyleutyrglnglyleuserthralathrlysaspthrtyrasp
435440445
alaleuhismetglnalaleuproproarg
450455
<210>181
<211>1467
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>181
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccggatatccagctgacccagtctccatcctctttgagtgcctccgtgggtgaccgcgtc120
tctttcacttgccaagccagccaagacatcaacaactttctgaattggtaccagcagaaa180
ccaggcaaagcaccaaagctcctcatctacgacgcctccaacctggaaaccggggtgccc240
agcaggtttagcgggagcggttctggcacggattttacgttcaccatctcctctctgcag300
cccgaggatatagctacttattactgtcagcagtacgggaatctgccatttacttttggg360
ggtggaactaaggtggaaatcaaaaggggcggcgggggaagcgggggcgggggctcaggt420
ggcggagggagccaggtgcaactccaggaaagtggcccaggattggtgaagcccagcgag480
accctttcccttacttgtactgttagcggaggcagcataagcagctactattggtcctgg540
atcagacagccaccagggaaagggcttgaatggattggctacatttactattccgggtcc600
accaactacaacccatccctcaagtcccgcgtgacaatttccgtcgacacaagcaagaac660
cagttctccctgaaacttagtagcgtcactgctgcagatacagcagtgtactattgtgtc720
agccttgtctactgtggcggcgactgctacagtggctttgattactggggacagggcacg780
ctcgtgacagtgtccagcgctgcggctatcgaggtaatgtatccgccaccgtatctggac840
aacgagaagtctaatgggacaatcattcacgtgaaggggaagcacctgtgtccatccccc900
ctgtttccgggtcccagtaaacccttctgggtgcttgttgtcgttggcggggtgctggcc960
tgctattccctgctggtgaccgtcgcgtttattattttctgggttagatccaaaagaagc1020
cgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaa1080
cactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttt1140
tccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctc1200
aacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgag1260
atgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaag1320
gataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaa1380
gggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctc1440
cacatgcaagccctgccacctaggtaa1467
<210>182
<211>488
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>182
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproaspileglnleuthrglnserproserserleu
202530
seralaservalglyaspargvalserphethrcysglnalasergln
354045
aspileasnasnpheleuasntrptyrglnglnlysproglylysala
505560
prolysleuleuiletyraspalaserasnleugluthrglyvalpro
65707580
serargpheserglyserglyserglythraspphethrphethrile
859095
serserleuglnprogluaspilealathrtyrtyrcysglnglntyr
100105110
glyasnleuprophethrpheglyglyglythrlysvalgluilelys
115120125
argglyglyglyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyser
130135140
glnvalglnleuglngluserglyproglyleuvallysproserglu
145150155160
thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserilesersertyr
165170175
tyrtrpsertrpileargglnproproglylysglyleuglutrpile
180185190
glytyriletyrtyrserglyserthrasntyrasnproserleulys
195200205
serargvalthrileservalaspthrserlysasnglnpheserleu
210215220
lysleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyrcysval
225230235240
serleuvaltyrcysglyglyaspcystyrserglypheasptyrtrp
245250255
glyglnglythrleuvalthrvalserseralaalaalailegluval
260265270
mettyrproproprotyrleuaspasnglulysserasnglythrile
275280285
ilehisvallysglylyshisleucysproserproleupheprogly
290295300
proserlysprophetrpvalleuvalvalvalglyglyvalleuala
305310315320
cystyrserleuleuvalthrvalalapheileilephetrpvalarg
325330335
serlysargserargleuleuhisserasptyrmetasnmetthrpro
340345350
argargproglyprothrarglyshistyrglnprotyralapropro
355360365
argaspphealaalatyrargserargvallyspheserargserala
370375380
aspalaproalatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasngluleu
385390395400
asnleuglyargarggluglutyraspvalleuasplysargarggly
405410415
argaspproglumetglyglylysproargarglysasnproglnglu
420425430
glyleutyrasngluleuglnlysasplysmetalaglualatyrser
435440445
gluileglymetlysglygluargargargglylysglyhisaspgly
450455460
leutyrglnglyleuserthralathrlysaspthrtyraspalaleu
465470475480
hismetglnalaleuproproarg
485
<210>183
<211>1401
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>183
gatatccagctgacccagtctccatcctctttgagtgcctccgtgggtgaccgcgtctct60
ttcacttgccaagccagccaagacatcaacaactttctgaattggtaccagcagaaacca120
ggcaaagcaccaaagctcctcatctacgacgcctccaacctggaaaccggggtgcccagc180
aggtttagcgggagcggttctggcacggattttacgttcaccatctcctctctgcagccc240
gaggatatagctacttattactgtcagcagtacgggaatctgccatttacttttgggggt300
ggaactaaggtggaaatcaaaaggggcggcgggggaagcgggggcgggggctcaggtggc360
ggagggagccaggtgcaactccaggaaagtggcccaggattggtgaagcccagcgagacc420
ctttcccttacttgtactgttagcggaggcagcataagcagctactattggtcctggatc480
agacagccaccagggaaagggcttgaatggattggctacatttactattccgggtccacc540
aactacaacccatccctcaagtcccgcgtgacaatttccgtcgacacaagcaagaaccag600
ttctccctgaaacttagtagcgtcactgctgcagatacagcagtgtactattgtgtcagc660
cttgtctactgtggcggcgactgctacagtggctttgattactggggacagggcacgctc720
gtgacagtgtccagcgctgcggctatcgaggtaatgtatccgccaccgtatctggacaac780
gagaagtctaatgggacaatcattcacgtgaaggggaagcacctgtgtccatcccccctg840
tttccgggtcccagtaaacccttctgggtgcttgttgtcgttggcggggtgctggcctgc900
tattccctgctggtgaccgtcgcgtttattattttctgggttagatccaaaagaagccgc960
ctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacac1020
taccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttcc1080
agatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaac1140
ctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatg1200
ggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggat1260
aagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaaggg1320
cacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccac1380
atgcaagccctgccacctagg1401
<210>184
<211>467
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>184
aspileglnleuthrglnserproserserleuseralaservalgly
151015
aspargvalserphethrcysglnalaserglnaspileasnasnphe
202530
leuasntrptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuile
354045
tyraspalaserasnleugluthrglyvalproserargphesergly
505560
serglyserglythraspphethrphethrileserserleuglnpro
65707580
gluaspilealathrtyrtyrcysglnglntyrglyasnleuprophe
859095
thrpheglyglyglythrlysvalgluilelysargglyglyglygly
100105110
serglyglyglyglyserglyglyglyglyserglnvalglnleugln
115120125
gluserglyproglyleuvallysprosergluthrleuserleuthr
130135140
cysthrvalserglyglyserilesersertyrtyrtrpsertrpile
145150155160
argglnproproglylysglyleuglutrpileglytyriletyrtyr
165170175
serglyserthrasntyrasnproserleulysserargvalthrile
180185190
servalaspthrserlysasnglnpheserleulysleuserserval
195200205
thralaalaaspthralavaltyrtyrcysvalserleuvaltyrcys
210215220
glyglyaspcystyrserglypheasptyrtrpglyglnglythrleu
225230235240
valthrvalserseralaalaalailegluvalmettyrpropropro
245250255
tyrleuaspasnglulysserasnglythrileilehisvallysgly
260265270
lyshisleucysproserproleupheproglyproserlysprophe
275280285
trpvalleuvalvalvalglyglyvalleualacystyrserleuleu
290295300
valthrvalalapheileilephetrpvalargserlysargserarg
305310315320
leuleuhisserasptyrmetasnmetthrproargargproglypro
325330335
thrarglyshistyrglnprotyralaproproargaspphealaala
340345350
tyrargserargvallyspheserargseralaaspalaproalatyr
355360365
glnglnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargarg
370375380
gluglutyraspvalleuasplysargargglyargaspproglumet
385390395400
glyglylysproargarglysasnproglngluglyleutyrasnglu
405410415
leuglnlysasplysmetalaglualatyrsergluileglymetlys
420425430
glygluargargargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleu
435440445
serthralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleu
450455460
proproarg
465
<210>185
<211>1548
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>185
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccggacattcaattgacccagtcccctagcagtctctcagcaagtgtgggagatagggtg120
tcattcacctgtcaggcttcacaggacatcaacaacttcctcaattggtatcagcagaag180
ccagggaaggcaccaaagctgctcatatatgacgcttcaaaccttgaaaccggagtacct240
agccgcttcagcggaagcggatcagggactgacttcacttttaccatctcttcactgcag300
cccgaagacatcgccacatactactgccagcagtacggaaacttgccttttacatttggg360
ggcggcaccaaagtggagattaagcgagggggaggcggctcaggaggcggtggctccgga420
ggcgggggttcccaggtccagctccaggaatccggcccaggtctggttaagcccagtgaa480
actttgtccctcacgtgtactgtgagcggtggttcaatctcctcatactattggtcttgg540
atacggcaacctcctggaaagggcctcgagtggatcggctatatctactatagtggctcc600
actaattacaacccttccctcaagtccagagtcaccatttccgtggacacatctaagaac660
cagttcagtctgaagttgtccagcgttacagccgcagacacagccgtttattactgtgtg720
tctcttgtttactgcgggggagactgttatagcggcttcgattactggggccagggcacc780
ttggtcacagtctcttccgcggccgccctctctaacagtattatgtacttttctcatttt840
gtacccgtgttccttcccgctaagccaactactaccccggccccacggccgcctacccct900
gcacccacaatagccagtcagcctttgagcctgagacctgaggcttgtcggccggctgct960
gggggtgcagtgcacacacgaggtcttgattttgcttgcgacatatacatctgggcccct1020
ctggccgggacctgtggggtgctgcttctgagcttggtcatcacgctctattgcaaccat1080
cgcaacagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgc1140
cgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcc1200
tatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccag1260
aaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaag1320
cgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggt1380
ctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaa1440
ggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacg1500
aaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1548
<210>186
<211>515
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>186
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproaspileglnleuthrglnserproserserleu
202530
seralaservalglyaspargvalserphethrcysglnalasergln
354045
aspileasnasnpheleuasntrptyrglnglnlysproglylysala
505560
prolysleuleuiletyraspalaserasnleugluthrglyvalpro
65707580
serargpheserglyserglyserglythraspphethrphethrile
859095
serserleuglnprogluaspilealathrtyrtyrcysglnglntyr
100105110
glyasnleuprophethrpheglyglyglythrlysvalgluilelys
115120125
argglyglyglyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyser
130135140
glnvalglnleuglngluserglyproglyleuvallysproserglu
145150155160
thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserilesersertyr
165170175
tyrtrpsertrpileargglnproproglylysglyleuglutrpile
180185190
glytyriletyrtyrserglyserthrasntyrasnproserleulys
195200205
serargvalthrileservalaspthrserlysasnglnpheserleu
210215220
lysleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyrcysval
225230235240
serleuvaltyrcysglyglyaspcystyrserglypheasptyrtrp
245250255
glyglnglythrleuvalthrvalserseralaalaalaleuserasn
260265270
serilemettyrpheserhisphevalprovalpheleuproalalys
275280285
prothrthrthrproalaproargproprothrproalaprothrile
290295300
alaserglnproleuserleuargproglualacysargproalaala
305310315320
glyglyalavalhisthrargglyleuaspphealacysaspiletyr
325330335
iletrpalaproleualaglythrcysglyvalleuleuleuserleu
340345350
valilethrleutyrcysasnhisargasnargserlysargserarg
355360365
leuleuhisserasptyrmetasnmetthrproargargproglypro
370375380
thrarglyshistyrglnprotyralaproproargaspphealaala
385390395400
tyrargserargvallyspheserargseralaaspalaproalatyr
405410415
glnglnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargarg
420425430
gluglutyraspvalleuasplysargargglyargaspproglumet
435440445
glyglylysproargarglysasnproglngluglyleutyrasnglu
450455460
leuglnlysasplysmetalaglualatyrsergluileglymetlys
465470475480
glygluargargargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleu
485490495
serthralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleu
500505510
proproarg
515
<210>187
<211>1482
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>187
gacattcaattgacccagtcccctagcagtctctcagcaagtgtgggagatagggtgtca60
ttcacctgtcaggcttcacaggacatcaacaacttcctcaattggtatcagcagaagcca120
gggaaggcaccaaagctgctcatatatgacgcttcaaaccttgaaaccggagtacctagc180
cgcttcagcggaagcggatcagggactgacttcacttttaccatctcttcactgcagccc240
gaagacatcgccacatactactgccagcagtacggaaacttgccttttacatttgggggc300
ggcaccaaagtggagattaagcgagggggaggcggctcaggaggcggtggctccggaggc360
gggggttcccaggtccagctccaggaatccggcccaggtctggttaagcccagtgaaact420
ttgtccctcacgtgtactgtgagcggtggttcaatctcctcatactattggtcttggata480
cggcaacctcctggaaagggcctcgagtggatcggctatatctactatagtggctccact540
aattacaacccttccctcaagtccagagtcaccatttccgtggacacatctaagaaccag600
ttcagtctgaagttgtccagcgttacagccgcagacacagccgtttattactgtgtgtct660
cttgtttactgcgggggagactgttatagcggcttcgattactggggccagggcaccttg720
gtcacagtctcttccgcggccgccctctctaacagtattatgtacttttctcattttgta780
cccgtgttccttcccgctaagccaactactaccccggccccacggccgcctacccctgca840
cccacaatagccagtcagcctttgagcctgagacctgaggcttgtcggccggctgctggg900
ggtgcagtgcacacacgaggtcttgattttgcttgcgacatatacatctgggcccctctg960
gccgggacctgtggggtgctgcttctgagcttggtcatcacgctctattgcaaccatcgc1020
aacagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgc1080
cctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctat1140
cggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaac1200
caactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgc1260
agaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctc1320
tataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaagga1380
gagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaag1440
gatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctagg1482
<210>188
<211>494
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>188
aspileglnleuthrglnserproserserleuseralaservalgly
151015
aspargvalserphethrcysglnalaserglnaspileasnasnphe
202530
leuasntrptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuile
354045
tyraspalaserasnleugluthrglyvalproserargphesergly
505560
serglyserglythraspphethrphethrileserserleuglnpro
65707580
gluaspilealathrtyrtyrcysglnglntyrglyasnleuprophe
859095
thrpheglyglyglythrlysvalgluilelysargglyglyglygly
100105110
serglyglyglyglyserglyglyglyglyserglnvalglnleugln
115120125
gluserglyproglyleuvallysprosergluthrleuserleuthr
130135140
cysthrvalserglyglyserilesersertyrtyrtrpsertrpile
145150155160
argglnproproglylysglyleuglutrpileglytyriletyrtyr
165170175
serglyserthrasntyrasnproserleulysserargvalthrile
180185190
servalaspthrserlysasnglnpheserleulysleuserserval
195200205
thralaalaaspthralavaltyrtyrcysvalserleuvaltyrcys
210215220
glyglyaspcystyrserglypheasptyrtrpglyglnglythrleu
225230235240
valthrvalserseralaalaalaleuserasnserilemettyrphe
245250255
serhisphevalprovalpheleuproalalysprothrthrthrpro
260265270
alaproargproprothrproalaprothrilealaserglnproleu
275280285
serleuargproglualacysargproalaalaglyglyalavalhis
290295300
thrargglyleuaspphealacysaspiletyriletrpalaproleu
305310315320
alaglythrcysglyvalleuleuleuserleuvalilethrleutyr
325330335
cysasnhisargasnargserlysargserargleuleuhisserasp
340345350
tyrmetasnmetthrproargargproglyprothrarglyshistyr
355360365
glnprotyralaproproargaspphealaalatyrargserargval
370375380
lyspheserargseralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasn
385390395400
glnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyraspval
405410415
leuasplysargargglyargaspproglumetglyglylysproarg
420425430
arglysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasplys
435440445
metalaglualatyrsergluileglymetlysglygluargargarg
450455460
glylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathrlys
465470475480
aspthrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
485490
<210>189
<211>1446
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>189
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtacagctgcaggaatctgggcccggacttgtcaagccaagtcagacactttct120
cttacatgtaccgtgagcggcggaagtataagcagtggaggcttttactggtcttggata180
cggcagcacccaggcaaaggcttggagtggattggatacattcatcattcaggatctaca240
cactataatccatcccttaagtcccgggtcaccattagcattgatacgtctaagaatctg300
ttcagtctcaggctgtcctccgtcactgctgccgacacagccgtgtactactgcgcctcc360
ttggtttactgcggaggcgactgttatagcggctttgattattgggggcaggggaccctc420
gtaaccgtgagctctggagggggtgggagcgggggaggaggttcaggggggggcggctcc480
gatatccagctcactcaaagcccctctagtctctctgcctcagtgggggatcgggtcagt540
tttacttgtcaagcttcacaggatatcaacaacttccttaattggtatcagcagaagcca600
ggaaaagcacccaagctgctcatctatgatgcctcaaatttggagacgggtgttcccagt660
cgattctctgggtcagggtccgggaccgactttacgtttacgatctcctctctgcagccc720
gaagacatcgccacatactattgtcaacagtacggcaacttgcctttcacatttgggggc780
gggactaaggttgaaatcaagagggccgctgcactggacaatgagaagtccaacggcacc840
atcatccacgtgaagggcaagcacctgtgccctagtcctctgttcccaggcccatccaaa900
cctttttgggttcttgttgtggtcgggggggtgctggcctgctattctctgctggtcacg960
gtggccttcataattttctgggttagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattac1020
atgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcacca1080
cctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcacca1140
gcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagag1200
tatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacga1260
aaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctat1320
tctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccag1380
ggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacct1440
aggtaa1446
<210>190
<211>481
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>190
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalglnleuglngluserglyproglyleu
202530
vallysproserglnthrleuserleuthrcysthrvalserglygly
354045
serileserserglyglyphetyrtrpsertrpileargglnhispro
505560
glylysglyleuglutrpileglytyrilehishisserglyserthr
65707580
histyrasnproserleulysserargvalthrileserileaspthr
859095
serlysasnleupheserleuargleuserservalthralaalaasp
100105110
thralavaltyrtyrcysalaserleuvaltyrcysglyglyaspcys
115120125
tyrserglypheasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalser
130135140
serglyglyglyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyser
145150155160
aspileglnleuthrglnserproserserleuseralaservalgly
165170175
aspargvalserphethrcysglnalaserglnaspileasnasnphe
180185190
leuasntrptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuile
195200205
tyraspalaserasnleugluthrglyvalproserargphesergly
210215220
serglyserglythraspphethrphethrileserserleuglnpro
225230235240
gluaspilealathrtyrtyrcysglnglntyrglyasnleuprophe
245250255
thrpheglyglyglythrlysvalgluilelysargalaalaalaleu
260265270
aspasnglulysserasnglythrileilehisvallysglylyshis
275280285
leucysproserproleupheproglyproserlysprophetrpval
290295300
leuvalvalvalglyglyvalleualacystyrserleuleuvalthr
305310315320
valalapheileilephetrpvalargserlysargserargleuleu
325330335
hisserasptyrmetasnmetthrproargargproglyprothrarg
340345350
lyshistyrglnprotyralaproproargaspphealaalatyrarg
355360365
serargvallyspheserargseralaaspalaproalatyrglngln
370375380
glyglnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglu
385390395400
tyraspvalleuasplysargargglyargaspproglumetglygly
405410415
lysproargarglysasnproglngluglyleutyrasngluleugln
420425430
lysasplysmetalaglualatyrsergluileglymetlysglyglu
435440445
argargargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthr
450455460
alathrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleupropro
465470475480
arg
<210>191
<211>1380
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>191
caggtacagctgcaggaatctgggcccggacttgtcaagccaagtcagacactttctctt60
acatgtaccgtgagcggcggaagtataagcagtggaggcttttactggtcttggatacgg120
cagcacccaggcaaaggcttggagtggattggatacattcatcattcaggatctacacac180
tataatccatcccttaagtcccgggtcaccattagcattgatacgtctaagaatctgttc240
agtctcaggctgtcctccgtcactgctgccgacacagccgtgtactactgcgcctccttg300
gtttactgcggaggcgactgttatagcggctttgattattgggggcaggggaccctcgta360
accgtgagctctggagggggtgggagcgggggaggaggttcaggggggggcggctccgat420
atccagctcactcaaagcccctctagtctctctgcctcagtgggggatcgggtcagtttt480
acttgtcaagcttcacaggatatcaacaacttccttaattggtatcagcagaagccagga540
aaagcacccaagctgctcatctatgatgcctcaaatttggagacgggtgttcccagtcga600
ttctctgggtcagggtccgggaccgactttacgtttacgatctcctctctgcagcccgaa660
gacatcgccacatactattgtcaacagtacggcaacttgcctttcacatttgggggcggg720
actaaggttgaaatcaagagggccgctgcactggacaatgagaagtccaacggcaccatc780
atccacgtgaagggcaagcacctgtgccctagtcctctgttcccaggcccatccaaacct840
ttttgggttcttgttgtggtcgggggggtgctggcctgctattctctgctggtcacggtg900
gccttcataattttctgggttagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatg960
aatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacct1020
agagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcg1080
tatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtat1140
gacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaa1200
aacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattct1260
gaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccaggga1320
ctcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctagg1380
<210>192
<211>460
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>192
glnvalglnleuglngluserglyproglyleuvallysprosergln
151015
thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserilesersergly
202530
glyphetyrtrpsertrpileargglnhisproglylysglyleuglu
354045
trpileglytyrilehishisserglyserthrhistyrasnproser
505560
leulysserargvalthrileserileaspthrserlysasnleuphe
65707580
serleuargleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyr
859095
cysalaserleuvaltyrcysglyglyaspcystyrserglypheasp
100105110
tyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserserglyglyglygly
115120125
serglyglyglyglyserglyglyglyglyseraspileglnleuthr
130135140
glnserproserserleuseralaservalglyaspargvalserphe
145150155160
thrcysglnalaserglnaspileasnasnpheleuasntrptyrgln
165170175
glnlysproglylysalaprolysleuleuiletyraspalaserasn
180185190
leugluthrglyvalproserargpheserglyserglyserglythr
195200205
aspphethrphethrileserserleuglnprogluaspilealathr
210215220
tyrtyrcysglnglntyrglyasnleuprophethrpheglyglygly
225230235240
thrlysvalgluilelysargalaalaalaleuaspasnglulysser
245250255
asnglythrileilehisvallysglylyshisleucysproserpro
260265270
leupheproglyproserlysprophetrpvalleuvalvalvalgly
275280285
glyvalleualacystyrserleuleuvalthrvalalapheileile
290295300
phetrpvalargserlysargserargleuleuhisserasptyrmet
305310315320
asnmetthrproargargproglyprothrarglyshistyrglnpro
325330335
tyralaproproargaspphealaalatyrargserargvallysphe
340345350
serargseralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasnglnleu
355360365
tyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyraspvalleuasp
370375380
lysargargglyargaspproglumetglyglylysproargarglys
385390395400
asnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasplysmetala
405410415
glualatyrsergluileglymetlysglygluargargargglylys
420425430
glyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathrlysaspthr
435440445
tyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
450455460
<210>193
<211>1473
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>193
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtgcagctgcaggaaagcggtccgggacttgtcaagccgtcccaaacgctgagt120
ctgacgtgtactgtctctggtggctctatttcttccgggggcttttattggtcttggatc180
agacaacaccctggcaaagggctggagtggatagggtatattcaccactctgggtccact240
cactacaacccatcattgaaatccagagtgactatctcaatcgacacatccaagaacctt300
ttcagcctgaggttgtcatcagttaccgccgctgacaccgcggtgtattattgcgcctct360
ctcgtgtactgcggtggcgattgttatagtggctttgactactgggggcaggggacattg420
gttaccgtttcaagtggaggcggtgggtctggcgggggcggtagcggaggtggggggagc480
gacatacagcttacgcagagcccctccagcctttcagcctccgtgggggatagggtgtcc540
tttacctgccaggcttcccaggacataaacaacttcctcaattggtatcagcaaaagccc600
gggaaagcaccaaagctgctcatctacgatgccagcaacctggaaaccggagtgccgtct660
cgcttctctggaagtggcagtgggaccgatttcacttttacaatctcaagtttgcagcca720
gaagacattgcaacatactactgtcaacagtacggcaatctcccctttacatttgggggg780
ggaactaaagtggagattaagcgcgctgcagccattgaagttatgtatccgcccccgtat840
ctggataacgagaaatctaatggtaccataatacatgtgaaggggaagcacctctgtcca900
tcaccgctgttccccggcccttcaaaacctttctgggtactcgttgtcgtgggtggagtt960
ctggcctgctatagtctgctggtgaccgtggcgtttatcatcttctgggtaagatccaaa1020
agaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggccccaca1080
aggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtg1140
aagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataac1200
gagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggac1260
cctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctg1320
cagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaagg1380
ggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgac1440
gctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1473
<210>194
<211>490
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>194
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalglnleuglngluserglyproglyleu
202530
vallysproserglnthrleuserleuthrcysthrvalserglygly
354045
serileserserglyglyphetyrtrpsertrpileargglnhispro
505560
glylysglyleuglutrpileglytyrilehishisserglyserthr
65707580
histyrasnproserleulysserargvalthrileserileaspthr
859095
serlysasnleupheserleuargleuserservalthralaalaasp
100105110
thralavaltyrtyrcysalaserleuvaltyrcysglyglyaspcys
115120125
tyrserglypheasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalser
130135140
serglyglyglyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyser
145150155160
aspileglnleuthrglnserproserserleuseralaservalgly
165170175
aspargvalserphethrcysglnalaserglnaspileasnasnphe
180185190
leuasntrptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuile
195200205
tyraspalaserasnleugluthrglyvalproserargphesergly
210215220
serglyserglythraspphethrphethrileserserleuglnpro
225230235240
gluaspilealathrtyrtyrcysglnglntyrglyasnleuprophe
245250255
thrpheglyglyglythrlysvalgluilelysargalaalaalaile
260265270
gluvalmettyrproproprotyrleuaspasnglulysserasngly
275280285
thrileilehisvallysglylyshisleucysproserproleuphe
290295300
proglyproserlysprophetrpvalleuvalvalvalglyglyval
305310315320
leualacystyrserleuleuvalthrvalalapheileilephetrp
325330335
valargserlysargserargleuleuhisserasptyrmetasnmet
340345350
thrproargargproglyprothrarglyshistyrglnprotyrala
355360365
proproargaspphealaalatyrargserargvallyspheserarg
370375380
seralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasn
385390395400
gluleuasnleuglyargarggluglutyraspvalleuasplysarg
405410415
argglyargaspproglumetglyglylysproargarglysasnpro
420425430
glngluglyleutyrasngluleuglnlysasplysmetalagluala
435440445
tyrsergluileglymetlysglygluargargargglylysglyhis
450455460
aspglyleutyrglnglyleuserthralathrlysaspthrtyrasp
465470475480
alaleuhismetglnalaleuproproarg
485490
<210>195
<211>1407
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>195
caggtgcagctgcaggaaagcggtccgggacttgtcaagccgtcccaaacgctgagtctg60
acgtgtactgtctctggtggctctatttcttccgggggcttttattggtcttggatcaga120
caacaccctggcaaagggctggagtggatagggtatattcaccactctgggtccactcac180
tacaacccatcattgaaatccagagtgactatctcaatcgacacatccaagaaccttttc240
agcctgaggttgtcatcagttaccgccgctgacaccgcggtgtattattgcgcctctctc300
gtgtactgcggtggcgattgttatagtggctttgactactgggggcaggggacattggtt360
accgtttcaagtggaggcggtgggtctggcgggggcggtagcggaggtggggggagcgac420
atacagcttacgcagagcccctccagcctttcagcctccgtgggggatagggtgtccttt480
acctgccaggcttcccaggacataaacaacttcctcaattggtatcagcaaaagcccggg540
aaagcaccaaagctgctcatctacgatgccagcaacctggaaaccggagtgccgtctcgc600
ttctctggaagtggcagtgggaccgatttcacttttacaatctcaagtttgcagccagaa660
gacattgcaacatactactgtcaacagtacggcaatctcccctttacatttgggggggga720
actaaagtggagattaagcgcgctgcagccattgaagttatgtatccgcccccgtatctg780
gataacgagaaatctaatggtaccataatacatgtgaaggggaagcacctctgtccatca840
ccgctgttccccggcccttcaaaacctttctgggtactcgttgtcgtgggtggagttctg900
gcctgctatagtctgctggtgaccgtggcgtttatcatcttctgggtaagatccaaaaga960
agccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaagg1020
aaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaag1080
ttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgag1140
ctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccct1200
gagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcag1260
aaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaagggga1320
aaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgct1380
ctccacatgcaagccctgccacctagg1407
<210>196
<211>469
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>196
glnvalglnleuglngluserglyproglyleuvallysprosergln
151015
thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserilesersergly
202530
glyphetyrtrpsertrpileargglnhisproglylysglyleuglu
354045
trpileglytyrilehishisserglyserthrhistyrasnproser
505560
leulysserargvalthrileserileaspthrserlysasnleuphe
65707580
serleuargleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyr
859095
cysalaserleuvaltyrcysglyglyaspcystyrserglypheasp
100105110
tyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserserglyglyglygly
115120125
serglyglyglyglyserglyglyglyglyseraspileglnleuthr
130135140
glnserproserserleuseralaservalglyaspargvalserphe
145150155160
thrcysglnalaserglnaspileasnasnpheleuasntrptyrgln
165170175
glnlysproglylysalaprolysleuleuiletyraspalaserasn
180185190
leugluthrglyvalproserargpheserglyserglyserglythr
195200205
aspphethrphethrileserserleuglnprogluaspilealathr
210215220
tyrtyrcysglnglntyrglyasnleuprophethrpheglyglygly
225230235240
thrlysvalgluilelysargalaalaalailegluvalmettyrpro
245250255
proprotyrleuaspasnglulysserasnglythrileilehisval
260265270
lysglylyshisleucysproserproleupheproglyproserlys
275280285
prophetrpvalleuvalvalvalglyglyvalleualacystyrser
290295300
leuleuvalthrvalalapheileilephetrpvalargserlysarg
305310315320
serargleuleuhisserasptyrmetasnmetthrproargargpro
325330335
glyprothrarglyshistyrglnprotyralaproproargaspphe
340345350
alaalatyrargserargvallyspheserargseralaaspalapro
355360365
alatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleugly
370375380
argarggluglutyraspvalleuasplysargargglyargasppro
385390395400
glumetglyglylysproargarglysasnproglngluglyleutyr
405410415
asngluleuglnlysasplysmetalaglualatyrsergluilegly
420425430
metlysglygluargargargglylysglyhisaspglyleutyrgln
435440445
glyleuserthralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetgln
450455460
alaleuproproarg
465
<210>197
<211>1554
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>197
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtgcagttgcaggaaagcgggcctggccttgtgaaaccaagccagacactgagc120
ctgacatgcactgtgtccggcgggtccatatcttccgggggtttttattggtcctggata180
cgccagcatcccgggaaaggacttgaatggattggatatatccaccattccggaagcacc240
cactacaatccaagccttaaatcccgggtgacaatctccatcgacacctcaaagaatctt300
ttttccctgcggttgtcttcagtaactgccgccgataccgctgtgtactactgtgccagc360
ctcgtctattgcggcggagattgttattctgggttcgattattggggtcaaggcacactg420
gtaactgtcagcagcggaggcggcggttccgggggcgggggcagtggagggggcggatct480
gacattcagcttacgcagtccccatcttcacttagcgccagcgttggcgatcgggtcagc540
ttcacgtgtcaagcaagtcaggatatcaacaactttcttaactggtaccagcagaagcca600
ggcaaggcacccaagttgctgatttacgatgcttctaacctcgagacgggagtgcctagc660
cgcttctccgggagcggcagcggcacagactttacctttacgatttccagtctgcagcca720
gaggatatagcaacttattactgtcagcagtatggcaacctcccttttaccttcggtggt780
ggcacaaaggtcgagattaaaagagccgcagcgttgtccaactccataatgtatttttct840
cattttgtgcccgtctttctgcctgccaaacctaccaccacccccgccccacgaccacct900
actccagcccccaccatcgcctcccagcccctcagcctgaggccagaggcttgtcgccct960
gctgcggggggcgctgtccataccagaggactcgacttcgcctgcgatatttatatatgg1020
gcccccctcgccggcacctgcggagtcttgctcctgagccttgtgatcacgctttattgt1080
aaccatcggaatagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgact1140
ccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttc1200
gctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcag1260
ggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttg1320
gacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccag1380
gagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggc1440
atgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcact1500
gctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1554
<210>198
<211>517
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>198
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalglnleuglngluserglyproglyleu
202530
vallysproserglnthrleuserleuthrcysthrvalserglygly
354045
serileserserglyglyphetyrtrpsertrpileargglnhispro
505560
glylysglyleuglutrpileglytyrilehishisserglyserthr
65707580
histyrasnproserleulysserargvalthrileserileaspthr
859095
serlysasnleupheserleuargleuserservalthralaalaasp
100105110
thralavaltyrtyrcysalaserleuvaltyrcysglyglyaspcys
115120125
tyrserglypheasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalser
130135140
serglyglyglyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyser
145150155160
aspileglnleuthrglnserproserserleuseralaservalgly
165170175
aspargvalserphethrcysglnalaserglnaspileasnasnphe
180185190
leuasntrptyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuile
195200205
tyraspalaserasnleugluthrglyvalproserargphesergly
210215220
serglyserglythraspphethrphethrileserserleuglnpro
225230235240
gluaspilealathrtyrtyrcysglnglntyrglyasnleuprophe
245250255
thrpheglyglyglythrlysvalgluilelysargalaalaalaleu
260265270
serasnserilemettyrpheserhisphevalprovalpheleupro
275280285
alalysprothrthrthrproalaproargproprothrproalapro
290295300
thrilealaserglnproleuserleuargproglualacysargpro
305310315320
alaalaglyglyalavalhisthrargglyleuaspphealacysasp
325330335
iletyriletrpalaproleualaglythrcysglyvalleuleuleu
340345350
serleuvalilethrleutyrcysasnhisargasnargserlysarg
355360365
serargleuleuhisserasptyrmetasnmetthrproargargpro
370375380
glyprothrarglyshistyrglnprotyralaproproargaspphe
385390395400
alaalatyrargserargvallyspheserargseralaaspalapro
405410415
alatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleugly
420425430
argarggluglutyraspvalleuasplysargargglyargasppro
435440445
glumetglyglylysproargarglysasnproglngluglyleutyr
450455460
asngluleuglnlysasplysmetalaglualatyrsergluilegly
465470475480
metlysglygluargargargglylysglyhisaspglyleutyrgln
485490495
glyleuserthralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetgln
500505510
alaleuproproarg
515
<210>199
<211>1488
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>199
caggtgcagttgcaggaaagcgggcctggccttgtgaaaccaagccagacactgagcctg60
acatgcactgtgtccggcgggtccatatcttccgggggtttttattggtcctggatacgc120
cagcatcccgggaaaggacttgaatggattggatatatccaccattccggaagcacccac180
tacaatccaagccttaaatcccgggtgacaatctccatcgacacctcaaagaatcttttt240
tccctgcggttgtcttcagtaactgccgccgataccgctgtgtactactgtgccagcctc300
gtctattgcggcggagattgttattctgggttcgattattggggtcaaggcacactggta360
actgtcagcagcggaggcggcggttccgggggcgggggcagtggagggggcggatctgac420
attcagcttacgcagtccccatcttcacttagcgccagcgttggcgatcgggtcagcttc480
acgtgtcaagcaagtcaggatatcaacaactttcttaactggtaccagcagaagccaggc540
aaggcacccaagttgctgatttacgatgcttctaacctcgagacgggagtgcctagccgc600
ttctccgggagcggcagcggcacagactttacctttacgatttccagtctgcagccagag660
gatatagcaacttattactgtcagcagtatggcaacctcccttttaccttcggtggtggc720
acaaaggtcgagattaaaagagccgcagcgttgtccaactccataatgtatttttctcat780
tttgtgcccgtctttctgcctgccaaacctaccaccacccccgccccacgaccacctact840
ccagcccccaccatcgcctcccagcccctcagcctgaggccagaggcttgtcgccctgct900
gcggggggcgctgtccataccagaggactcgacttcgcctgcgatatttatatatgggcc960
cccctcgccggcacctgcggagtcttgctcctgagccttgtgatcacgctttattgtaac1020
catcggaatagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactcca1080
cgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgct1140
gcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggc1200
cagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggac1260
aagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggag1320
ggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatg1380
aaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgct1440
acgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctagg1488
<210>200
<211>496
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>200
glnvalglnleuglngluserglyproglyleuvallysprosergln
151015
thrleuserleuthrcysthrvalserglyglyserilesersergly
202530
glyphetyrtrpsertrpileargglnhisproglylysglyleuglu
354045
trpileglytyrilehishisserglyserthrhistyrasnproser
505560
leulysserargvalthrileserileaspthrserlysasnleuphe
65707580
serleuargleuserservalthralaalaaspthralavaltyrtyr
859095
cysalaserleuvaltyrcysglyglyaspcystyrserglypheasp
100105110
tyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserserglyglyglygly
115120125
serglyglyglyglyserglyglyglyglyseraspileglnleuthr
130135140
glnserproserserleuseralaservalglyaspargvalserphe
145150155160
thrcysglnalaserglnaspileasnasnpheleuasntrptyrgln
165170175
glnlysproglylysalaprolysleuleuiletyraspalaserasn
180185190
leugluthrglyvalproserargpheserglyserglyserglythr
195200205
aspphethrphethrileserserleuglnprogluaspilealathr
210215220
tyrtyrcysglnglntyrglyasnleuprophethrpheglyglygly
225230235240
thrlysvalgluilelysargalaalaalaleuserasnserilemet
245250255
tyrpheserhisphevalprovalpheleuproalalysprothrthr
260265270
thrproalaproargproprothrproalaprothrilealasergln
275280285
proleuserleuargproglualacysargproalaalaglyglyala
290295300
valhisthrargglyleuaspphealacysaspiletyriletrpala
305310315320
proleualaglythrcysglyvalleuleuleuserleuvalilethr
325330335
leutyrcysasnhisargasnargserlysargserargleuleuhis
340345350
serasptyrmetasnmetthrproargargproglyprothrarglys
355360365
histyrglnprotyralaproproargaspphealaalatyrargser
370375380
argvallyspheserargseralaaspalaproalatyrglnglngly
385390395400
glnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyr
405410415
aspvalleuasplysargargglyargaspproglumetglyglylys
420425430
proargarglysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlys
435440445
asplysmetalaglualatyrsergluileglymetlysglygluarg
450455460
argargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthrala
465470475480
thrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
485490495
<210>201
<211>1437
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>201
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtccaactggtgcagtccggagccgaagtcaagaaaccaggtgcctccgttaaa120
gtgagttgcaaagtctctggatacactctgaccgagctctctatgcactgggtccggcag180
gcccccggcaagggattggaatggatgggcgggttcgatcctgaggacggagagactatc240
tacgctcaaaaattccagggacgagtgactgtgaccgaagacactagtaccgacactgcc300
tacatggaactttcctctctgcgatcagaagataccgcagtgtactactgtgctactgaa360
tctaggggcattggatggccctacttcgattactggggtcagggaactctggtgactgtc420
tccagcggtggaggtggcagcggtggtggcggaagcggggggggcggctctgatattcag480
atgactcaatctccttcttctctgtccgcttccgtgggcgatagagtgaccattacttgt540
agggcgtcccagtcaatctccagttatttgaattggtatcagcagaagcccgggaaagca600
cctaagctgttgatcagcggggcttctagcctgaagagtggggtaccttcacggttcagc660
ggaagcggaagcggaaccgatttcaccctgactatcagcagcctgccacctgaggacttt720
gcaacttactactgccaacagtcatacagcactccgatcactttcggccagggcacccgg780
ctcgaaatcaagcgcgctgctgctttggacaatgagaagtcaaacggcaccatcatacat840
gttaaaggtaaacatctgtgtccctccccgctgttccccggcccttccaaaccgttctgg900
gttctggtggtggtcggaggcgtactcgcttgctatagtctgctggtaactgtcgccttc960
atcatcttttgggtgagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatg1020
actccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagat1080
ttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcag1140
cagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgtt1200
ttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccc1260
caggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaata1320
ggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagc1380
actgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1437
<210>202
<211>478
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>202
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalglnleuvalglnserglyalagluval
202530
lyslysproglyalaservallysvalsercyslysvalserglytyr
354045
thrleuthrgluleusermethistrpvalargglnalaproglylys
505560
glyleuglutrpmetglyglypheaspprogluaspglygluthrile
65707580
tyralaglnlyspheglnglyargvalthrvalthrgluaspthrser
859095
thraspthralatyrmetgluleuserserleuargsergluaspthr
100105110
alavaltyrtyrcysalathrgluserargglyileglytrpprotyr
115120125
pheasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserserglygly
130135140
glyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyseraspilegln
145150155160
metthrglnserproserserleuseralaservalglyaspargval
165170175
thrilethrcysargalaserglnserilesersertyrleuasntrp
180185190
tyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuileserglyala
195200205
serserleulysserglyvalproserargpheserglyserglyser
210215220
glythraspphethrleuthrileserserleuproprogluaspphe
225230235240
alathrtyrtyrcysglnglnsertyrserthrproilethrphegly
245250255
glnglythrargleugluilelysargalaalaalaleuaspasnglu
260265270
lysserasnglythrileilehisvallysglylyshisleucyspro
275280285
serproleupheproglyproserlysprophetrpvalleuvalval
290295300
valglyglyvalleualacystyrserleuleuvalthrvalalaphe
305310315320
ileilephetrpvalargserlysargserargleuleuhisserasp
325330335
tyrmetasnmetthrproargargproglyprothrarglyshistyr
340345350
glnprotyralaproproargaspphealaalatyrargserargval
355360365
lyspheserargseralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasn
370375380
glnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyraspval
385390395400
leuasplysargargglyargaspproglumetglyglylysproarg
405410415
arglysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasplys
420425430
metalaglualatyrsergluileglymetlysglygluargargarg
435440445
glylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathrlys
450455460
aspthrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
465470475
<210>203
<211>1371
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>203
caggtccaactggtgcagtccggagccgaagtcaagaaaccaggtgcctccgttaaagtg60
agttgcaaagtctctggatacactctgaccgagctctctatgcactgggtccggcaggcc120
cccggcaagggattggaatggatgggcgggttcgatcctgaggacggagagactatctac180
gctcaaaaattccagggacgagtgactgtgaccgaagacactagtaccgacactgcctac240
atggaactttcctctctgcgatcagaagataccgcagtgtactactgtgctactgaatct300
aggggcattggatggccctacttcgattactggggtcagggaactctggtgactgtctcc360
agcggtggaggtggcagcggtggtggcggaagcggggggggcggctctgatattcagatg420
actcaatctccttcttctctgtccgcttccgtgggcgatagagtgaccattacttgtagg480
gcgtcccagtcaatctccagttatttgaattggtatcagcagaagcccgggaaagcacct540
aagctgttgatcagcggggcttctagcctgaagagtggggtaccttcacggttcagcgga600
agcggaagcggaaccgatttcaccctgactatcagcagcctgccacctgaggactttgca660
acttactactgccaacagtcatacagcactccgatcactttcggccagggcacccggctc720
gaaatcaagcgcgctgctgctttggacaatgagaagtcaaacggcaccatcatacatgtt780
aaaggtaaacatctgtgtccctccccgctgttccccggcccttccaaaccgttctgggtt840
ctggtggtggtcggaggcgtactcgcttgctatagtctgctggtaactgtcgccttcatc900
atcttttgggtgagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgact960
ccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttc1020
gctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcag1080
ggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttg1140
gacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccag1200
gagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggc1260
atgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcact1320
gctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctagg1371
<210>204
<211>457
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>204
glnvalglnleuvalglnserglyalagluvallyslysproglyala
151015
servallysvalsercyslysvalserglytyrthrleuthrgluleu
202530
sermethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpmet
354045
glyglypheaspprogluaspglygluthriletyralaglnlysphe
505560
glnglyargvalthrvalthrgluaspthrserthraspthralatyr
65707580
metgluleuserserleuargsergluaspthralavaltyrtyrcys
859095
alathrgluserargglyileglytrpprotyrpheasptyrtrpgly
100105110
glnglythrleuvalthrvalserserglyglyglyglyserglygly
115120125
glyglyserglyglyglyglyseraspileglnmetthrglnserpro
130135140
serserleuseralaservalglyaspargvalthrilethrcysarg
145150155160
alaserglnserilesersertyrleuasntrptyrglnglnlyspro
165170175
glylysalaprolysleuleuileserglyalaserserleulysser
180185190
glyvalproserargpheserglyserglyserglythraspphethr
195200205
leuthrileserserleuproprogluaspphealathrtyrtyrcys
210215220
glnglnsertyrserthrproilethrpheglyglnglythrargleu
225230235240
gluilelysargalaalaalaleuaspasnglulysserasnglythr
245250255
ileilehisvallysglylyshisleucysproserproleuphepro
260265270
glyproserlysprophetrpvalleuvalvalvalglyglyvalleu
275280285
alacystyrserleuleuvalthrvalalapheileilephetrpval
290295300
argserlysargserargleuleuhisserasptyrmetasnmetthr
305310315320
proargargproglyprothrarglyshistyrglnprotyralapro
325330335
proargaspphealaalatyrargserargvallyspheserargser
340345350
alaaspalaproalatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasnglu
355360365
leuasnleuglyargarggluglutyraspvalleuasplysargarg
370375380
glyargaspproglumetglyglylysproargarglysasnprogln
385390395400
gluglyleutyrasngluleuglnlysasplysmetalaglualatyr
405410415
sergluileglymetlysglygluargargargglylysglyhisasp
420425430
glyleutyrglnglyleuserthralathrlysaspthrtyraspala
435440445
leuhismetglnalaleuproproarg
450455
<210>205
<211>1464
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>205
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtgcagcttgtgcagagcggggccgaggtgaagaagcccggggccagcgtcaaa120
gtgtcctgtaaggtcagcggttacaccctcaccgagctgagcatgcactgggtacggcag180
gctcccggcaaaggtcttgagtggatgggtggatttgatccagaagatggagagactatc240
tacgcccagaagttccagggccgggtcaccgtaacagaagacacctcaactgacaccgct300
tacatggagctgagttcactgcggtccgaggacacggccgtgtattattgtgccaccgag360
agccgcggaatcggatggccttacttcgactactggggacagggtacacttgttacagta420
tcatccgggggtggcggctctggtgggggcggctccggagggggtggatcagatatccaa480
atgactcaaagtccaagttccctgtctgcctcagtcggagatagagtcaccataacctgc540
agggcaagtcagtccatctcctcctatctgaactggtaccaacagaaacctggaaaggcg600
cctaagctcctgatctccggagcctcatctttgaaatccggtgtcccatctcgcttcagt660
ggctctggaagcggtacagattttactttgaccattagcagcctcccaccggaagacttt720
gctacatattactgccagcagtcttactcaaccccaatcaccttcgggcaaggcaccaga780
ctcgaaataaaaagagcagctgctatcgaggttatgtacccaccgccgtacttggataac840
gaaaaaagcaatgggaccatcattcatgtgaagggtaagcacctttgccctagcccactg900
tttcctggcccgagtaaacccttttgggtacttgtggtcgtcggcggcgtgctggcctgc960
tactcactcctggttaccgtcgcattcatcatcttttgggtgagatccaaaagaagccgc1020
ctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacac1080
taccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttcc1140
agatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaac1200
ctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatg1260
ggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggat1320
aagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaaggg1380
cacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccac1440
atgcaagccctgccacctaggtaa1464
<210>206
<211>487
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>206
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalglnleuvalglnserglyalagluval
202530
lyslysproglyalaservallysvalsercyslysvalserglytyr
354045
thrleuthrgluleusermethistrpvalargglnalaproglylys
505560
glyleuglutrpmetglyglypheaspprogluaspglygluthrile
65707580
tyralaglnlyspheglnglyargvalthrvalthrgluaspthrser
859095
thraspthralatyrmetgluleuserserleuargsergluaspthr
100105110
alavaltyrtyrcysalathrgluserargglyileglytrpprotyr
115120125
pheasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserserglygly
130135140
glyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyseraspilegln
145150155160
metthrglnserproserserleuseralaservalglyaspargval
165170175
thrilethrcysargalaserglnserilesersertyrleuasntrp
180185190
tyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuileserglyala
195200205
serserleulysserglyvalproserargpheserglyserglyser
210215220
glythraspphethrleuthrileserserleuproprogluaspphe
225230235240
alathrtyrtyrcysglnglnsertyrserthrproilethrphegly
245250255
glnglythrargleugluilelysargalaalaalailegluvalmet
260265270
tyrproproprotyrleuaspasnglulysserasnglythrileile
275280285
hisvallysglylyshisleucysproserproleupheproglypro
290295300
serlysprophetrpvalleuvalvalvalglyglyvalleualacys
305310315320
tyrserleuleuvalthrvalalapheileilephetrpvalargser
325330335
lysargserargleuleuhisserasptyrmetasnmetthrproarg
340345350
argproglyprothrarglyshistyrglnprotyralaproproarg
355360365
aspphealaalatyrargserargvallyspheserargseralaasp
370375380
alaproalatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasngluleuasn
385390395400
leuglyargarggluglutyraspvalleuasplysargargglyarg
405410415
aspproglumetglyglylysproargarglysasnproglnglugly
420425430
leutyrasngluleuglnlysasplysmetalaglualatyrserglu
435440445
ileglymetlysglygluargargargglylysglyhisaspglyleu
450455460
tyrglnglyleuserthralathrlysaspthrtyraspalaleuhis
465470475480
metglnalaleuproproarg
485
<210>207
<211>1398
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>207
caggtgcagcttgtgcagagcggggccgaggtgaagaagcccggggccagcgtcaaagtg60
tcctgtaaggtcagcggttacaccctcaccgagctgagcatgcactgggtacggcaggct120
cccggcaaaggtcttgagtggatgggtggatttgatccagaagatggagagactatctac180
gcccagaagttccagggccgggtcaccgtaacagaagacacctcaactgacaccgcttac240
atggagctgagttcactgcggtccgaggacacggccgtgtattattgtgccaccgagagc300
cgcggaatcggatggccttacttcgactactggggacagggtacacttgttacagtatca360
tccgggggtggcggctctggtgggggcggctccggagggggtggatcagatatccaaatg420
actcaaagtccaagttccctgtctgcctcagtcggagatagagtcaccataacctgcagg480
gcaagtcagtccatctcctcctatctgaactggtaccaacagaaacctggaaaggcgcct540
aagctcctgatctccggagcctcatctttgaaatccggtgtcccatctcgcttcagtggc600
tctggaagcggtacagattttactttgaccattagcagcctcccaccggaagactttgct660
acatattactgccagcagtcttactcaaccccaatcaccttcgggcaaggcaccagactc720
gaaataaaaagagcagctgctatcgaggttatgtacccaccgccgtacttggataacgaa780
aaaagcaatgggaccatcattcatgtgaagggtaagcacctttgccctagcccactgttt840
cctggcccgagtaaacccttttgggtacttgtggtcgtcggcggcgtgctggcctgctac900
tcactcctggttaccgtcgcattcatcatcttttgggtgagatccaaaagaagccgcctg960
ctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactac1020
cagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccaga1080
tctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctg1140
ggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggt1200
ggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggataag1260
atggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcac1320
gacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccacatg1380
caagccctgccacctagg1398
<210>208
<211>466
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>208
glnvalglnleuvalglnserglyalagluvallyslysproglyala
151015
servallysvalsercyslysvalserglytyrthrleuthrgluleu
202530
sermethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpmet
354045
glyglypheaspprogluaspglygluthriletyralaglnlysphe
505560
glnglyargvalthrvalthrgluaspthrserthraspthralatyr
65707580
metgluleuserserleuargsergluaspthralavaltyrtyrcys
859095
alathrgluserargglyileglytrpprotyrpheasptyrtrpgly
100105110
glnglythrleuvalthrvalserserglyglyglyglyserglygly
115120125
glyglyserglyglyglyglyseraspileglnmetthrglnserpro
130135140
serserleuseralaservalglyaspargvalthrilethrcysarg
145150155160
alaserglnserilesersertyrleuasntrptyrglnglnlyspro
165170175
glylysalaprolysleuleuileserglyalaserserleulysser
180185190
glyvalproserargpheserglyserglyserglythraspphethr
195200205
leuthrileserserleuproprogluaspphealathrtyrtyrcys
210215220
glnglnsertyrserthrproilethrpheglyglnglythrargleu
225230235240
gluilelysargalaalaalailegluvalmettyrproproprotyr
245250255
leuaspasnglulysserasnglythrileilehisvallysglylys
260265270
hisleucysproserproleupheproglyproserlysprophetrp
275280285
valleuvalvalvalglyglyvalleualacystyrserleuleuval
290295300
thrvalalapheileilephetrpvalargserlysargserargleu
305310315320
leuhisserasptyrmetasnmetthrproargargproglyprothr
325330335
arglyshistyrglnprotyralaproproargaspphealaalatyr
340345350
argserargvallyspheserargseralaaspalaproalatyrgln
355360365
glnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargargglu
370375380
glutyraspvalleuasplysargargglyargaspproglumetgly
385390395400
glylysproargarglysasnproglngluglyleutyrasngluleu
405410415
glnlysasplysmetalaglualatyrsergluileglymetlysgly
420425430
gluargargargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuser
435440445
thralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleupro
450455460
proarg
465
<210>209
<211>1545
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>209
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtgcagttggtgcaaagcggcgcagaagttaagaaacctggggcgtcagttaag120
gtgtcttgcaaagtatctggctataccctcactgagctgtccatgcattgggtaaggcag180
gctcctggaaaggggctcgaatggatgggaggatttgaccctgaagacggagagaccatc240
tacgcccagaaattccagggtagagtaacagtgactgaggacactagcactgacacagcg300
tacatggagctgagttctctgagaagtgaggacacagccgtttactactgcgctaccgag360
tccagaggtattggctggccatacttcgactattggggtcagggcaccctggttacagtg420
agttcaggaggcgggggctctggggggggcggttccggaggggggggctcagatatacag480
atgacgcagagtccatcaagtctctcagccagcgtgggagatcgcgtgactattacttgc540
cgcgccagccagagtattagctcctatctgaattggtaccagcaaaagcccgggaaggcc600
cctaagcttctgatttctggcgcctcctctttgaagtcaggtgtgccaagcagatttagc660
gggtctggaagtggcactgactttacacttactatctccagcctgcccccagaggatttt720
gccacatattactgtcagcaaagctactctactccaatcactttcggccagggcacaaga780
ttggagattaagagggctgccgcactttcaaattccatcatgtatttcagccattttgtg840
cctgtttttcttccggccaaacctacaaccactcccgccccacgcccacctactcccgcc900
cctaccattgcctcccagcctctgtctcttagacctgaggcttgtagacctgctgccggc960
ggagccgtgcacactcgcggtctggacttcgcctgcgacatctatatctgggcccctctg1020
gccggcacctgcggcgttctccttctctcactcgtaatcacactctattgcaatcacagg1080
aacagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgc1140
cctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctat1200
cggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaac1260
caactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgc1320
agaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctc1380
tataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaagga1440
gagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaag1500
gatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1545
<210>210
<211>514
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>210
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalglnleuvalglnserglyalagluval
202530
lyslysproglyalaservallysvalsercyslysvalserglytyr
354045
thrleuthrgluleusermethistrpvalargglnalaproglylys
505560
glyleuglutrpmetglyglypheaspprogluaspglygluthrile
65707580
tyralaglnlyspheglnglyargvalthrvalthrgluaspthrser
859095
thraspthralatyrmetgluleuserserleuargsergluaspthr
100105110
alavaltyrtyrcysalathrgluserargglyileglytrpprotyr
115120125
pheasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserserglygly
130135140
glyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyseraspilegln
145150155160
metthrglnserproserserleuseralaservalglyaspargval
165170175
thrilethrcysargalaserglnserilesersertyrleuasntrp
180185190
tyrglnglnlysproglylysalaprolysleuleuileserglyala
195200205
serserleulysserglyvalproserargpheserglyserglyser
210215220
glythraspphethrleuthrileserserleuproprogluaspphe
225230235240
alathrtyrtyrcysglnglnsertyrserthrproilethrphegly
245250255
glnglythrargleugluilelysargalaalaalaleuserasnser
260265270
ilemettyrpheserhisphevalprovalpheleuproalalyspro
275280285
thrthrthrproalaproargproprothrproalaprothrileala
290295300
serglnproleuserleuargproglualacysargproalaalagly
305310315320
glyalavalhisthrargglyleuaspphealacysaspiletyrile
325330335
trpalaproleualaglythrcysglyvalleuleuleuserleuval
340345350
ilethrleutyrcysasnhisargasnargserlysargserargleu
355360365
leuhisserasptyrmetasnmetthrproargargproglyprothr
370375380
arglyshistyrglnprotyralaproproargaspphealaalatyr
385390395400
argserargvallyspheserargseralaaspalaproalatyrgln
405410415
glnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargargglu
420425430
glutyraspvalleuasplysargargglyargaspproglumetgly
435440445
glylysproargarglysasnproglngluglyleutyrasngluleu
450455460
glnlysasplysmetalaglualatyrsergluileglymetlysgly
465470475480
gluargargargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuser
485490495
thralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleupro
500505510
proarg
<210>211
<211>1479
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>211
caggtgcagttggtgcaaagcggcgcagaagttaagaaacctggggcgtcagttaaggtg60
tcttgcaaagtatctggctataccctcactgagctgtccatgcattgggtaaggcaggct120
cctggaaaggggctcgaatggatgggaggatttgaccctgaagacggagagaccatctac180
gcccagaaattccagggtagagtaacagtgactgaggacactagcactgacacagcgtac240
atggagctgagttctctgagaagtgaggacacagccgtttactactgcgctaccgagtcc300
agaggtattggctggccatacttcgactattggggtcagggcaccctggttacagtgagt360
tcaggaggcgggggctctggggggggcggttccggaggggggggctcagatatacagatg420
acgcagagtccatcaagtctctcagccagcgtgggagatcgcgtgactattacttgccgc480
gccagccagagtattagctcctatctgaattggtaccagcaaaagcccgggaaggcccct540
aagcttctgatttctggcgcctcctctttgaagtcaggtgtgccaagcagatttagcggg600
tctggaagtggcactgactttacacttactatctccagcctgcccccagaggattttgcc660
acatattactgtcagcaaagctactctactccaatcactttcggccagggcacaagattg720
gagattaagagggctgccgcactttcaaattccatcatgtatttcagccattttgtgcct780
gtttttcttccggccaaacctacaaccactcccgccccacgcccacctactcccgcccct840
accattgcctcccagcctctgtctcttagacctgaggcttgtagacctgctgccggcgga900
gccgtgcacactcgcggtctggacttcgcctgcgacatctatatctgggcccctctggcc960
ggcacctgcggcgttctccttctctcactcgtaatcacactctattgcaatcacaggaac1020
agatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccct1080
ggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcgg1140
agcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaa1200
ctgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcaga1260
ggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctat1320
aatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagag1380
cggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggat1440
acttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctagg1479
<210>212
<211>493
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>212
glnvalglnleuvalglnserglyalagluvallyslysproglyala
151015
servallysvalsercyslysvalserglytyrthrleuthrgluleu
202530
sermethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpmet
354045
glyglypheaspprogluaspglygluthriletyralaglnlysphe
505560
glnglyargvalthrvalthrgluaspthrserthraspthralatyr
65707580
metgluleuserserleuargsergluaspthralavaltyrtyrcys
859095
alathrgluserargglyileglytrpprotyrpheasptyrtrpgly
100105110
glnglythrleuvalthrvalserserglyglyglyglyserglygly
115120125
glyglyserglyglyglyglyseraspileglnmetthrglnserpro
130135140
serserleuseralaservalglyaspargvalthrilethrcysarg
145150155160
alaserglnserilesersertyrleuasntrptyrglnglnlyspro
165170175
glylysalaprolysleuleuileserglyalaserserleulysser
180185190
glyvalproserargpheserglyserglyserglythraspphethr
195200205
leuthrileserserleuproprogluaspphealathrtyrtyrcys
210215220
glnglnsertyrserthrproilethrpheglyglnglythrargleu
225230235240
gluilelysargalaalaalaleuserasnserilemettyrpheser
245250255
hisphevalprovalpheleuproalalysprothrthrthrproala
260265270
proargproprothrproalaprothrilealaserglnproleuser
275280285
leuargproglualacysargproalaalaglyglyalavalhisthr
290295300
argglyleuaspphealacysaspiletyriletrpalaproleuala
305310315320
glythrcysglyvalleuleuleuserleuvalilethrleutyrcys
325330335
asnhisargasnargserlysargserargleuleuhisserasptyr
340345350
metasnmetthrproargargproglyprothrarglyshistyrgln
355360365
protyralaproproargaspphealaalatyrargserargvallys
370375380
pheserargseralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasngln
385390395400
leutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyraspvalleu
405410415
asplysargargglyargaspproglumetglyglylysproargarg
420425430
lysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasplysmet
435440445
alaglualatyrsergluileglymetlysglygluargargarggly
450455460
lysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathrlysasp
465470475480
thrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
485490
<210>213
<211>1425
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>213
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtccagttggtcgaaagtggcggtggtgtagtgcagccgggccgcagtttgagg120
ctttcctgtgcggcttcaggctttactttttccagctatggaatgcactgggtgcggcag180
gcccccggcaaaggacttgagtgggtggccgtcatttcttatgacggatcagataagtac240
tacgtggacagcgtcaagggcagattcaccatctctagggacaacagtaaaaatagactc300
tacctccagatgaatagcctcagagctgaagacacggccgtctactattgtgctcgggag360
cggtatagtggcagagactactgggggcagggcacactcgttacagtgagtagcggcgga420
ggagggagtgggggcggtggctccggtggaggaggttctgagattgttatgacccagagt480
cctgcgaccctctcagtcagccccggggagcgcgcaactttgtcttgcagagctagtcag540
tccgtgtcctctcttctgacatggtaccagcaaaagcccgggcaggctccgcgccttttg600
atctttggggcttcaacaagagccactgggattcccgcacgattctctggctccgggagc660
ggtactggtttcaccctgacgattagcagtctccagagcgaggacttcgccgtatactac720
tgccagcagtacgatacgtggccattcacttttggaccagggactaaagtggattttaag780
cgcgccgccgctctcgataacgaaaagtcaaatggcaccataatccacgtcaaaggcaag840
cacctgtgcccttccccgctcttccccggacccagtaaaccattttgggtgctggttgtt900
gtggggggcgtgctggcctgctatagccttttggtcactgtagccttcattattttttgg960
gtcagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgc1020
cctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctat1080
cggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaac1140
caactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgc1200
agaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctc1260
tataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaagga1320
gagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaag1380
gatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1425
<210>214
<211>474
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>214
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalglnleuvalgluserglyglyglyval
202530
valglnproglyargserleuargleusercysalaalaserglyphe
354045
thrphesersertyrglymethistrpvalargglnalaproglylys
505560
glyleuglutrpvalalavalilesertyraspglyserasplystyr
65707580
tyrvalaspservallysglyargphethrileserargaspasnser
859095
lysasnargleutyrleuglnmetasnserleuargalagluaspthr
100105110
alavaltyrtyrcysalaarggluargtyrserglyargasptyrtrp
115120125
glyglnglythrleuvalthrvalserserglyglyglyglysergly
130135140
glyglyglyserglyglyglyglysergluilevalmetthrglnser
145150155160
proalathrleuservalserproglygluargalathrleusercys
165170175
argalaserglnservalserserleuleuthrtrptyrglnglnlys
180185190
proglyglnalaproargleuleuilepheglyalaserthrargala
195200205
thrglyileproalaargpheserglyserglyserglythrglyphe
210215220
thrleuthrileserserleuglnsergluaspphealavaltyrtyr
225230235240
cysglnglntyraspthrtrpprophethrpheglyproglythrlys
245250255
valaspphelysargalaalaalaleuaspasnglulysserasngly
260265270
thrileilehisvallysglylyshisleucysproserproleuphe
275280285
proglyproserlysprophetrpvalleuvalvalvalglyglyval
290295300
leualacystyrserleuleuvalthrvalalapheileilephetrp
305310315320
valargserlysargserargleuleuhisserasptyrmetasnmet
325330335
thrproargargproglyprothrarglyshistyrglnprotyrala
340345350
proproargaspphealaalatyrargserargvallyspheserarg
355360365
seralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasn
370375380
gluleuasnleuglyargarggluglutyraspvalleuasplysarg
385390395400
argglyargaspproglumetglyglylysproargarglysasnpro
405410415
glngluglyleutyrasngluleuglnlysasplysmetalagluala
420425430
tyrsergluileglymetlysglygluargargargglylysglyhis
435440445
aspglyleutyrglnglyleuserthralathrlysaspthrtyrasp
450455460
alaleuhismetglnalaleuproproarg
465470
<210>215
<211>1359
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>215
caggtccagttggtcgaaagtggcggtggtgtagtgcagccgggccgcagtttgaggctt60
tcctgtgcggcttcaggctttactttttccagctatggaatgcactgggtgcggcaggcc120
cccggcaaaggacttgagtgggtggccgtcatttcttatgacggatcagataagtactac180
gtggacagcgtcaagggcagattcaccatctctagggacaacagtaaaaatagactctac240
ctccagatgaatagcctcagagctgaagacacggccgtctactattgtgctcgggagcgg300
tatagtggcagagactactgggggcagggcacactcgttacagtgagtagcggcggagga360
gggagtgggggcggtggctccggtggaggaggttctgagattgttatgacccagagtcct420
gcgaccctctcagtcagccccggggagcgcgcaactttgtcttgcagagctagtcagtcc480
gtgtcctctcttctgacatggtaccagcaaaagcccgggcaggctccgcgccttttgatc540
tttggggcttcaacaagagccactgggattcccgcacgattctctggctccgggagcggt600
actggtttcaccctgacgattagcagtctccagagcgaggacttcgccgtatactactgc660
cagcagtacgatacgtggccattcacttttggaccagggactaaagtggattttaagcgc720
gccgccgctctcgataacgaaaagtcaaatggcaccataatccacgtcaaaggcaagcac780
ctgtgcccttccccgctcttccccggacccagtaaaccattttgggtgctggttgttgtg840
gggggcgtgctggcctgctatagccttttggtcactgtagccttcattattttttgggtc900
agatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccct960
ggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcgg1020
agcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaa1080
ctgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcaga1140
ggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctat1200
aatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagag1260
cggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggat1320
acttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctagg1359
<210>216
<211>453
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>216
glnvalglnleuvalgluserglyglyglyvalvalglnproglyarg
151015
serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr
202530
glymethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval
354045
alavalilesertyraspglyserasplystyrtyrvalaspserval
505560
lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnargleutyr
65707580
leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys
859095
alaarggluargtyrserglyargasptyrtrpglyglnglythrleu
100105110
valthrvalserserglyglyglyglyserglyglyglyglysergly
115120125
glyglyglysergluilevalmetthrglnserproalathrleuser
130135140
valserproglygluargalathrleusercysargalaserglnser
145150155160
valserserleuleuthrtrptyrglnglnlysproglyglnalapro
165170175
argleuleuilepheglyalaserthrargalathrglyileproala
180185190
argpheserglyserglyserglythrglyphethrleuthrileser
195200205
serleuglnsergluaspphealavaltyrtyrcysglnglntyrasp
210215220
thrtrpprophethrpheglyproglythrlysvalaspphelysarg
225230235240
alaalaalaleuaspasnglulysserasnglythrileilehisval
245250255
lysglylyshisleucysproserproleupheproglyproserlys
260265270
prophetrpvalleuvalvalvalglyglyvalleualacystyrser
275280285
leuleuvalthrvalalapheileilephetrpvalargserlysarg
290295300
serargleuleuhisserasptyrmetasnmetthrproargargpro
305310315320
glyprothrarglyshistyrglnprotyralaproproargaspphe
325330335
alaalatyrargserargvallyspheserargseralaaspalapro
340345350
alatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleugly
355360365
argarggluglutyraspvalleuasplysargargglyargasppro
370375380
glumetglyglylysproargarglysasnproglngluglyleutyr
385390395400
asngluleuglnlysasplysmetalaglualatyrsergluilegly
405410415
metlysglygluargargargglylysglyhisaspglyleutyrgln
420425430
glyleuserthralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetgln
435440445
alaleuproproarg
450
<210>217
<211>1452
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>217
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtgcagctcgtggagtctggcggcggcgtggtccagcccggccggtccctgcgc120
ctgtcctgcgccgccagcgggtttactttttcctcctacggcatgcactgggtgcgccag180
gctcccggcaagggcctcgagtgggtcgccgtgatctcatacgatgggtcagacaaatac240
tatgtcgattctgttaaagggcggtttaccatttcaagagataactctaagaataggctg300
tatttgcagatgaacagcctgagggctgaagataccgcagtgtactattgcgctagggag360
cggtatagtggccgcgattactggggacagggtacactggtgaccgtgagctctgggggt420
ggcggaagcgggggtggcggaagcggcggagggggtagtgaaattgtgatgacccagtct480
ccggctacactttcagtctcccctggggagagagctacactgtcatgcagagcgtcccag540
tccgtctcttctctccttacctggtatcagcagaagcccggccaggctcctcgactgctg600
atcttcggtgcctccacaagggcgaccgggattccagcccgcttctcaggttctgggagc660
ggaactggtttcactttgacaatcagttcactgcagtcagaggatttcgccgtgtactac720
tgccagcaatacgacacatggccattcactttcggacccggtaccaaagtcgatttcaag780
agagccgcggccatcgaggttatgtacccaccaccatatctggacaatgaaaaaagcaat840
ggaaccattatccatgtgaagggtaaacacctctgccctagcccacttttccctggccca900
tcaaagcccttctgggtcttggtggtcgtggggggtgtgctggcctgttacagccttctg960
gtgacggttgctttcattatcttctgggttagatccaaaagaagccgcctgctccatagc1020
gattacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttac1080
gcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagat1140
gcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagg1200
gaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaacca1260
agacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaa1320
gcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttg1380
taccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctg1440
ccacctaggtaa1452
<210>218
<211>483
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>218
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalglnleuvalgluserglyglyglyval
202530
valglnproglyargserleuargleusercysalaalaserglyphe
354045
thrphesersertyrglymethistrpvalargglnalaproglylys
505560
glyleuglutrpvalalavalilesertyraspglyserasplystyr
65707580
tyrvalaspservallysglyargphethrileserargaspasnser
859095
lysasnargleutyrleuglnmetasnserleuargalagluaspthr
100105110
alavaltyrtyrcysalaarggluargtyrserglyargasptyrtrp
115120125
glyglnglythrleuvalthrvalserserglyglyglyglysergly
130135140
glyglyglyserglyglyglyglysergluilevalmetthrglnser
145150155160
proalathrleuservalserproglygluargalathrleusercys
165170175
argalaserglnservalserserleuleuthrtrptyrglnglnlys
180185190
proglyglnalaproargleuleuilepheglyalaserthrargala
195200205
thrglyileproalaargpheserglyserglyserglythrglyphe
210215220
thrleuthrileserserleuglnsergluaspphealavaltyrtyr
225230235240
cysglnglntyraspthrtrpprophethrpheglyproglythrlys
245250255
valaspphelysargalaalaalailegluvalmettyrpropropro
260265270
tyrleuaspasnglulysserasnglythrileilehisvallysgly
275280285
lyshisleucysproserproleupheproglyproserlysprophe
290295300
trpvalleuvalvalvalglyglyvalleualacystyrserleuleu
305310315320
valthrvalalapheileilephetrpvalargserlysargserarg
325330335
leuleuhisserasptyrmetasnmetthrproargargproglypro
340345350
thrarglyshistyrglnprotyralaproproargaspphealaala
355360365
tyrargserargvallyspheserargseralaaspalaproalatyr
370375380
glnglnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargarg
385390395400
gluglutyraspvalleuasplysargargglyargaspproglumet
405410415
glyglylysproargarglysasnproglngluglyleutyrasnglu
420425430
leuglnlysasplysmetalaglualatyrsergluileglymetlys
435440445
glygluargargargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleu
450455460
serthralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleu
465470475480
proproarg
<210>219
<211>1386
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>219
caggtgcagctcgtggagtctggcggcggcgtggtccagcccggccggtccctgcgcctg60
tcctgcgccgccagcgggtttactttttcctcctacggcatgcactgggtgcgccaggct120
cccggcaagggcctcgagtgggtcgccgtgatctcatacgatgggtcagacaaatactat180
gtcgattctgttaaagggcggtttaccatttcaagagataactctaagaataggctgtat240
ttgcagatgaacagcctgagggctgaagataccgcagtgtactattgcgctagggagcgg300
tatagtggccgcgattactggggacagggtacactggtgaccgtgagctctgggggtggc360
ggaagcgggggtggcggaagcggcggagggggtagtgaaattgtgatgacccagtctccg420
gctacactttcagtctcccctggggagagagctacactgtcatgcagagcgtcccagtcc480
gtctcttctctccttacctggtatcagcagaagcccggccaggctcctcgactgctgatc540
ttcggtgcctccacaagggcgaccgggattccagcccgcttctcaggttctgggagcgga600
actggtttcactttgacaatcagttcactgcagtcagaggatttcgccgtgtactactgc660
cagcaatacgacacatggccattcactttcggacccggtaccaaagtcgatttcaagaga720
gccgcggccatcgaggttatgtacccaccaccatatctggacaatgaaaaaagcaatgga780
accattatccatgtgaagggtaaacacctctgccctagcccacttttccctggcccatca840
aagcccttctgggtcttggtggtcgtggggggtgtgctggcctgttacagccttctggtg900
acggttgctttcattatcttctgggttagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgat960
tacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgca1020
ccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgca1080
ccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaa1140
gagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaaga1200
cgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcc1260
tattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtac1320
cagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgcca1380
cctagg1386
<210>220
<211>462
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>220
glnvalglnleuvalgluserglyglyglyvalvalglnproglyarg
151015
serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr
202530
glymethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval
354045
alavalilesertyraspglyserasplystyrtyrvalaspserval
505560
lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnargleutyr
65707580
leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys
859095
alaarggluargtyrserglyargasptyrtrpglyglnglythrleu
100105110
valthrvalserserglyglyglyglyserglyglyglyglysergly
115120125
glyglyglysergluilevalmetthrglnserproalathrleuser
130135140
valserproglygluargalathrleusercysargalaserglnser
145150155160
valserserleuleuthrtrptyrglnglnlysproglyglnalapro
165170175
argleuleuilepheglyalaserthrargalathrglyileproala
180185190
argpheserglyserglyserglythrglyphethrleuthrileser
195200205
serleuglnsergluaspphealavaltyrtyrcysglnglntyrasp
210215220
thrtrpprophethrpheglyproglythrlysvalaspphelysarg
225230235240
alaalaalailegluvalmettyrproproprotyrleuaspasnglu
245250255
lysserasnglythrileilehisvallysglylyshisleucyspro
260265270
serproleupheproglyproserlysprophetrpvalleuvalval
275280285
valglyglyvalleualacystyrserleuleuvalthrvalalaphe
290295300
ileilephetrpvalargserlysargserargleuleuhisserasp
305310315320
tyrmetasnmetthrproargargproglyprothrarglyshistyr
325330335
glnprotyralaproproargaspphealaalatyrargserargval
340345350
lyspheserargseralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasn
355360365
glnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyraspval
370375380
leuasplysargargglyargaspproglumetglyglylysproarg
385390395400
arglysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasplys
405410415
metalaglualatyrsergluileglymetlysglygluargargarg
420425430
glylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathrlys
435440445
aspthrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
450455460
<210>221
<211>1533
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>221
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtgcagttggttgaatcaggagggggtgtggtgcaacccggtcggtcactgcgc120
ctcagttgtgctgcttccgggtttactttcagctcatatgggatgcactgggtacggcag180
gctccaggtaaaggcttggaatgggtggcggtgatcagctatgacggctctgacaaatat240
tatgtggactccgtgaaaggcagattcaccatcagtcgagacaactcaaagaatagactc300
tacttgcagatgaatagcctccgggccgaagatactgcagtctattattgcgcccgggag360
cgctacagtggaagagactattgggggcaaggaactcttgtcacagtctcatctggcggc420
ggcggcagcggtgggggcggatctggcgggggcggcagcgaaatcgttatgactcagagt480
cctgccacactgagcgttagccctggtgagagagcaacacttagctgcagagctagtcag540
agtgtttccagtcttttgacatggtaccaacagaagcccggtcaagctccacgactgctc600
atcttcggtgcatccacccgcgcaaccgggatacccgcccggttttccggttctggaagt660
ggcacaggattcacgctcaccatttcttctctgcagtctgaagactttgccgtgtattac720
tgccagcagtacgatacctggccctttacctttggcccaggtactaaagtggattttaaa780
cgagctgctgcactttccaatagtattatgtacttttcacattttgtgcccgtgttcctg840
cctgcgaagcctacgacaaccccagcccctaggccgcccacaccggccccaactattgcc900
tcccagccattgtctctgagacccgaagcttgcagacctgctgctggaggcgccgttcac960
acccgaggattggatttcgcatgtgacatttacatctgggcccctttggccggaacctgc1020
ggtgtgctgctgctgtcactcgtgattacactttactgcaaccaccgaaacagatccaaa1080
agaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggccccaca1140
aggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtg1200
aagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataac1260
gagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggac1320
cctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctg1380
cagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaagg1440
ggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgac1500
gctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1533
<210>222
<211>510
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>222
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalglnleuvalgluserglyglyglyval
202530
valglnproglyargserleuargleusercysalaalaserglyphe
354045
thrphesersertyrglymethistrpvalargglnalaproglylys
505560
glyleuglutrpvalalavalilesertyraspglyserasplystyr
65707580
tyrvalaspservallysglyargphethrileserargaspasnser
859095
lysasnargleutyrleuglnmetasnserleuargalagluaspthr
100105110
alavaltyrtyrcysalaarggluargtyrserglyargasptyrtrp
115120125
glyglnglythrleuvalthrvalserserglyglyglyglysergly
130135140
glyglyglyserglyglyglyglysergluilevalmetthrglnser
145150155160
proalathrleuservalserproglygluargalathrleusercys
165170175
argalaserglnservalserserleuleuthrtrptyrglnglnlys
180185190
proglyglnalaproargleuleuilepheglyalaserthrargala
195200205
thrglyileproalaargpheserglyserglyserglythrglyphe
210215220
thrleuthrileserserleuglnsergluaspphealavaltyrtyr
225230235240
cysglnglntyraspthrtrpprophethrpheglyproglythrlys
245250255
valaspphelysargalaalaalaleuserasnserilemettyrphe
260265270
serhisphevalprovalpheleuproalalysprothrthrthrpro
275280285
alaproargproprothrproalaprothrilealaserglnproleu
290295300
serleuargproglualacysargproalaalaglyglyalavalhis
305310315320
thrargglyleuaspphealacysaspiletyriletrpalaproleu
325330335
alaglythrcysglyvalleuleuleuserleuvalilethrleutyr
340345350
cysasnhisargasnargserlysargserargleuleuhisserasp
355360365
tyrmetasnmetthrproargargproglyprothrarglyshistyr
370375380
glnprotyralaproproargaspphealaalatyrargserargval
385390395400
lyspheserargseralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasn
405410415
glnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyraspval
420425430
leuasplysargargglyargaspproglumetglyglylysproarg
435440445
arglysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasplys
450455460
metalaglualatyrsergluileglymetlysglygluargargarg
465470475480
glylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathrlys
485490495
aspthrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
500505510
<210>223
<211>1467
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>223
caggtgcagttggttgaatcaggagggggtgtggtgcaacccggtcggtcactgcgcctc60
agttgtgctgcttccgggtttactttcagctcatatgggatgcactgggtacggcaggct120
ccaggtaaaggcttggaatgggtggcggtgatcagctatgacggctctgacaaatattat180
gtggactccgtgaaaggcagattcaccatcagtcgagacaactcaaagaatagactctac240
ttgcagatgaatagcctccgggccgaagatactgcagtctattattgcgcccgggagcgc300
tacagtggaagagactattgggggcaaggaactcttgtcacagtctcatctggcggcggc360
ggcagcggtgggggcggatctggcgggggcggcagcgaaatcgttatgactcagagtcct420
gccacactgagcgttagccctggtgagagagcaacacttagctgcagagctagtcagagt480
gtttccagtcttttgacatggtaccaacagaagcccggtcaagctccacgactgctcatc540
ttcggtgcatccacccgcgcaaccgggatacccgcccggttttccggttctggaagtggc600
acaggattcacgctcaccatttcttctctgcagtctgaagactttgccgtgtattactgc660
cagcagtacgatacctggccctttacctttggcccaggtactaaagtggattttaaacga720
gctgctgcactttccaatagtattatgtacttttcacattttgtgcccgtgttcctgcct780
gcgaagcctacgacaaccccagcccctaggccgcccacaccggccccaactattgcctcc840
cagccattgtctctgagacccgaagcttgcagacctgctgctggaggcgccgttcacacc900
cgaggattggatttcgcatgtgacatttacatctgggcccctttggccggaacctgcggt960
gtgctgctgctgtcactcgtgattacactttactgcaaccaccgaaacagatccaaaaga1020
agccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaagg1080
aaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaag1140
ttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgag1200
ctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccct1260
gagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcag1320
aaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaagggga1380
aaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgct1440
ctccacatgcaagccctgccacctagg1467
<210>224
<211>489
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>224
glnvalglnleuvalgluserglyglyglyvalvalglnproglyarg
151015
serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr
202530
glymethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval
354045
alavalilesertyraspglyserasplystyrtyrvalaspserval
505560
lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnargleutyr
65707580
leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys
859095
alaarggluargtyrserglyargasptyrtrpglyglnglythrleu
100105110
valthrvalserserglyglyglyglyserglyglyglyglysergly
115120125
glyglyglysergluilevalmetthrglnserproalathrleuser
130135140
valserproglygluargalathrleusercysargalaserglnser
145150155160
valserserleuleuthrtrptyrglnglnlysproglyglnalapro
165170175
argleuleuilepheglyalaserthrargalathrglyileproala
180185190
argpheserglyserglyserglythrglyphethrleuthrileser
195200205
serleuglnsergluaspphealavaltyrtyrcysglnglntyrasp
210215220
thrtrpprophethrpheglyproglythrlysvalaspphelysarg
225230235240
alaalaalaleuserasnserilemettyrpheserhisphevalpro
245250255
valpheleuproalalysprothrthrthrproalaproargpropro
260265270
thrproalaprothrilealaserglnproleuserleuargproglu
275280285
alacysargproalaalaglyglyalavalhisthrargglyleuasp
290295300
phealacysaspiletyriletrpalaproleualaglythrcysgly
305310315320
valleuleuleuserleuvalilethrleutyrcysasnhisargasn
325330335
argserlysargserargleuleuhisserasptyrmetasnmetthr
340345350
proargargproglyprothrarglyshistyrglnprotyralapro
355360365
proargaspphealaalatyrargserargvallyspheserargser
370375380
alaaspalaproalatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasnglu
385390395400
leuasnleuglyargarggluglutyraspvalleuasplysargarg
405410415
glyargaspproglumetglyglylysproargarglysasnprogln
420425430
gluglyleutyrasngluleuglnlysasplysmetalaglualatyr
435440445
sergluileglymetlysglygluargargargglylysglyhisasp
450455460
glyleutyrglnglyleuserthralathrlysaspthrtyraspala
465470475480
leuhismetglnalaleuproproarg
485
<210>225
<211>1425
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>225
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccggagattgtgatgacccagtcccctgctaccctgtccgtcagtccgggcgagagagcc120
accttgtcatgccgggccagccagtccgtcagcagtctcctgacttggtatcagcaaaaa180
ccagggcaggcaccgcggcttttgatttttggtgcaagcacacgcgccactggcattcca240
gctaggttttctggaagtggatctgggacaggcttcactctgacaatcagtagcctgcag300
agtgaggactttgctgtttactactgtcaacagtacgacacctggccattcacattcggg360
cccggcaccaaggtcgacttcaagaggggcggtggaggttcaggtggtggcgggtcaggc420
ggcggtgggtctcaggttcaactggtggaatcaggtggcggcgttgtccaaccggggcga480
tcacttcgactttcctgtgctgcctcaggctttactttttcatcctatgggatgcactgg540
gttcggcaggctcccggaaaaggactcgagtgggttgcagtgatctcttacgatggctca600
gacaagtattatgtggactcagtcaaggggagattcacaataagccgagacaactccaaa660
aaccggctttatctccagatgaacagccttagagcggaagataccgcggtatactactgt720
gcccgcgagaggtattccggcagagactactggggacagggcacactggtcaccgtgagt780
tctgccgcagcgctcgataacgaaaagagcaacggaaccattatccacgttaagggcaag840
cacctgtgccccagtcccctcttcccaggaccatctaaacccttctgggttctggtagta900
gttggaggggtccttgcatgttactcccttttggtcaccgtcgccttcattattttctgg960
gtgagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgc1020
cctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctat1080
cggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaac1140
caactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgc1200
agaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctc1260
tataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaagga1320
gagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaag1380
gatacttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1425
<210>226
<211>474
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>226
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargprogluilevalmetthrglnserproalathrleu
202530
servalserproglygluargalathrleusercysargalasergln
354045
servalserserleuleuthrtrptyrglnglnlysproglyglnala
505560
proargleuleuilepheglyalaserthrargalathrglyilepro
65707580
alaargpheserglyserglyserglythrglyphethrleuthrile
859095
serserleuglnsergluaspphealavaltyrtyrcysglnglntyr
100105110
aspthrtrpprophethrpheglyproglythrlysvalaspphelys
115120125
argglyglyglyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyser
130135140
glnvalglnleuvalgluserglyglyglyvalvalglnproglyarg
145150155160
serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr
165170175
glymethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval
180185190
alavalilesertyraspglyserasplystyrtyrvalaspserval
195200205
lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnargleutyr
210215220
leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys
225230235240
alaarggluargtyrserglyargasptyrtrpglyglnglythrleu
245250255
valthrvalserseralaalaalaleuaspasnglulysserasngly
260265270
thrileilehisvallysglylyshisleucysproserproleuphe
275280285
proglyproserlysprophetrpvalleuvalvalvalglyglyval
290295300
leualacystyrserleuleuvalthrvalalapheileilephetrp
305310315320
valargserlysargserargleuleuhisserasptyrmetasnmet
325330335
thrproargargproglyprothrarglyshistyrglnprotyrala
340345350
proproargaspphealaalatyrargserargvallyspheserarg
355360365
seralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasn
370375380
gluleuasnleuglyargarggluglutyraspvalleuasplysarg
385390395400
argglyargaspproglumetglyglylysproargarglysasnpro
405410415
glngluglyleutyrasngluleuglnlysasplysmetalagluala
420425430
tyrsergluileglymetlysglygluargargargglylysglyhis
435440445
aspglyleutyrglnglyleuserthralathrlysaspthrtyrasp
450455460
alaleuhismetglnalaleuproproarg
465470
<210>227
<211>1359
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>227
gagattgtgatgacccagtcccctgctaccctgtccgtcagtccgggcgagagagccacc60
ttgtcatgccgggccagccagtccgtcagcagtctcctgacttggtatcagcaaaaacca120
gggcaggcaccgcggcttttgatttttggtgcaagcacacgcgccactggcattccagct180
aggttttctggaagtggatctgggacaggcttcactctgacaatcagtagcctgcagagt240
gaggactttgctgtttactactgtcaacagtacgacacctggccattcacattcgggccc300
ggcaccaaggtcgacttcaagaggggcggtggaggttcaggtggtggcgggtcaggcggc360
ggtgggtctcaggttcaactggtggaatcaggtggcggcgttgtccaaccggggcgatca420
cttcgactttcctgtgctgcctcaggctttactttttcatcctatgggatgcactgggtt480
cggcaggctcccggaaaaggactcgagtgggttgcagtgatctcttacgatggctcagac540
aagtattatgtggactcagtcaaggggagattcacaataagccgagacaactccaaaaac600
cggctttatctccagatgaacagccttagagcggaagataccgcggtatactactgtgcc660
cgcgagaggtattccggcagagactactggggacagggcacactggtcaccgtgagttct720
gccgcagcgctcgataacgaaaagagcaacggaaccattatccacgttaagggcaagcac780
ctgtgccccagtcccctcttcccaggaccatctaaacccttctgggttctggtagtagtt840
ggaggggtccttgcatgttactcccttttggtcaccgtcgccttcattattttctgggtg900
agatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccct960
ggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcgg1020
agcagggtgaagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaa1080
ctgtataacgagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcaga1140
ggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctat1200
aatgagctgcagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagag1260
cggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggat1320
acttatgacgctctccacatgcaagccctgccacctagg1359
<210>228
<211>453
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>228
gluilevalmetthrglnserproalathrleuservalserprogly
151015
gluargalathrleusercysargalaserglnservalserserleu
202530
leuthrtrptyrglnglnlysproglyglnalaproargleuleuile
354045
pheglyalaserthrargalathrglyileproalaargphesergly
505560
serglyserglythrglyphethrleuthrileserserleuglnser
65707580
gluaspphealavaltyrtyrcysglnglntyraspthrtrpprophe
859095
thrpheglyproglythrlysvalaspphelysargglyglyglygly
100105110
serglyglyglyglyserglyglyglyglyserglnvalglnleuval
115120125
gluserglyglyglyvalvalglnproglyargserleuargleuser
130135140
cysalaalaserglyphethrphesersertyrglymethistrpval
145150155160
argglnalaproglylysglyleuglutrpvalalavalilesertyr
165170175
aspglyserasplystyrtyrvalaspservallysglyargphethr
180185190
ileserargaspasnserlysasnargleutyrleuglnmetasnser
195200205
leuargalagluaspthralavaltyrtyrcysalaarggluargtyr
210215220
serglyargasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserser
225230235240
alaalaalaleuaspasnglulysserasnglythrileilehisval
245250255
lysglylyshisleucysproserproleupheproglyproserlys
260265270
prophetrpvalleuvalvalvalglyglyvalleualacystyrser
275280285
leuleuvalthrvalalapheileilephetrpvalargserlysarg
290295300
serargleuleuhisserasptyrmetasnmetthrproargargpro
305310315320
glyprothrarglyshistyrglnprotyralaproproargaspphe
325330335
alaalatyrargserargvallyspheserargseralaaspalapro
340345350
alatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleugly
355360365
argarggluglutyraspvalleuasplysargargglyargasppro
370375380
glumetglyglylysproargarglysasnproglngluglyleutyr
385390395400
asngluleuglnlysasplysmetalaglualatyrsergluilegly
405410415
metlysglygluargargargglylysglyhisaspglyleutyrgln
420425430
glyleuserthralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetgln
435440445
alaleuproproarg
450
<210>229
<211>1452
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>229
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccggagatcgtcatgacacagagtccagctaccctgagcgtgtcccctggagagagagcc120
accctgtcctgtagggctagtcagagtgtgtccagcctcctcacctggtatcaacagaag180
cctggtcaagctccccggctgcttatcttcggggccagcacgcgagccacaggcatcccg240
gccagattctctggctctggcagtggcaccgggttcactctcacgatctcatccctgcag300
tcagaggatttcgctgtgtattactgtcagcagtacgatacatggcccttcaccttcggc360
ccgggcacaaaagtagatttcaagcgcggcggcgggggtagtgggggcgggggatcagga420
ggagggggctcccaagtacagctggttgagagcggcggcggggtggttcagcccgggcgc480
agcctcaggctgagttgcgcagcatcaggattcacattcagttcttatggaatgcattgg540
gtcagacaggctcccgggaagggccttgaatgggtggcagtcattagctacgacggaagc600
gataagtactatgtggactcagttaaagggagatttactatcagccgcgacaattccaaa660
aacagattgtatttgcagatgaactccctcagggcggaggacactgctgtatattactgc720
gcacgagagagatactccggccgagactattggggccaaggaacattggtaactgtgagc780
tccgccgcagctattgaggtcatgtaccccccaccttatctcgataatgagaagagtaat840
gggactataattcacgtaaagggcaaacacctgtgcccttccccgctgtttccaggtcca900
agtaagccgttctgggtcctggttgtggtgggaggggtgctggcctgctattctctgttg960
gttaccgtggcctttatcattttctgggtgagatccaaaagaagccgcctgctccatagc1020
gattacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttac1080
gcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagat1140
gcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagg1200
gaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaacca1260
agacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaa1320
gcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttg1380
taccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctg1440
ccacctaggtaa1452
<210>230
<211>483
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>230
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargprogluilevalmetthrglnserproalathrleu
202530
servalserproglygluargalathrleusercysargalasergln
354045
servalserserleuleuthrtrptyrglnglnlysproglyglnala
505560
proargleuleuilepheglyalaserthrargalathrglyilepro
65707580
alaargpheserglyserglyserglythrglyphethrleuthrile
859095
serserleuglnsergluaspphealavaltyrtyrcysglnglntyr
100105110
aspthrtrpprophethrpheglyproglythrlysvalaspphelys
115120125
argglyglyglyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyser
130135140
glnvalglnleuvalgluserglyglyglyvalvalglnproglyarg
145150155160
serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr
165170175
glymethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval
180185190
alavalilesertyraspglyserasplystyrtyrvalaspserval
195200205
lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnargleutyr
210215220
leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys
225230235240
alaarggluargtyrserglyargasptyrtrpglyglnglythrleu
245250255
valthrvalserseralaalaalailegluvalmettyrpropropro
260265270
tyrleuaspasnglulysserasnglythrileilehisvallysgly
275280285
lyshisleucysproserproleupheproglyproserlysprophe
290295300
trpvalleuvalvalvalglyglyvalleualacystyrserleuleu
305310315320
valthrvalalapheileilephetrpvalargserlysargserarg
325330335
leuleuhisserasptyrmetasnmetthrproargargproglypro
340345350
thrarglyshistyrglnprotyralaproproargaspphealaala
355360365
tyrargserargvallyspheserargseralaaspalaproalatyr
370375380
glnglnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargarg
385390395400
gluglutyraspvalleuasplysargargglyargaspproglumet
405410415
glyglylysproargarglysasnproglngluglyleutyrasnglu
420425430
leuglnlysasplysmetalaglualatyrsergluileglymetlys
435440445
glygluargargargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleu
450455460
serthralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleu
465470475480
proproarg
<210>231
<211>1386
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>231
gagatcgtcatgacacagagtccagctaccctgagcgtgtcccctggagagagagccacc60
ctgtcctgtagggctagtcagagtgtgtccagcctcctcacctggtatcaacagaagcct120
ggtcaagctccccggctgcttatcttcggggccagcacgcgagccacaggcatcccggcc180
agattctctggctctggcagtggcaccgggttcactctcacgatctcatccctgcagtca240
gaggatttcgctgtgtattactgtcagcagtacgatacatggcccttcaccttcggcccg300
ggcacaaaagtagatttcaagcgcggcggcgggggtagtgggggcgggggatcaggagga360
gggggctcccaagtacagctggttgagagcggcggcggggtggttcagcccgggcgcagc420
ctcaggctgagttgcgcagcatcaggattcacattcagttcttatggaatgcattgggtc480
agacaggctcccgggaagggccttgaatgggtggcagtcattagctacgacggaagcgat540
aagtactatgtggactcagttaaagggagatttactatcagccgcgacaattccaaaaac600
agattgtatttgcagatgaactccctcagggcggaggacactgctgtatattactgcgca660
cgagagagatactccggccgagactattggggccaaggaacattggtaactgtgagctcc720
gccgcagctattgaggtcatgtaccccccaccttatctcgataatgagaagagtaatggg780
actataattcacgtaaagggcaaacacctgtgcccttccccgctgtttccaggtccaagt840
aagccgttctgggtcctggttgtggtgggaggggtgctggcctgctattctctgttggtt900
accgtggcctttatcattttctgggtgagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgat960
tacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgca1020
ccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaagttttccagatctgcagatgca1080
ccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgagctcaacctgggacgcagggaa1140
gagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccctgagatgggtggcaaaccaaga1200
cgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcagaaggataagatggctgaagcc1260
tattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaaggggaaaagggcacgacggtttgtac1320
cagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgctctccacatgcaagccctgcca1380
cctagg1386
<210>232
<211>462
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>232
gluilevalmetthrglnserproalathrleuservalserprogly
151015
gluargalathrleusercysargalaserglnservalserserleu
202530
leuthrtrptyrglnglnlysproglyglnalaproargleuleuile
354045
pheglyalaserthrargalathrglyileproalaargphesergly
505560
serglyserglythrglyphethrleuthrileserserleuglnser
65707580
gluaspphealavaltyrtyrcysglnglntyraspthrtrpprophe
859095
thrpheglyproglythrlysvalaspphelysargglyglyglygly
100105110
serglyglyglyglyserglyglyglyglyserglnvalglnleuval
115120125
gluserglyglyglyvalvalglnproglyargserleuargleuser
130135140
cysalaalaserglyphethrphesersertyrglymethistrpval
145150155160
argglnalaproglylysglyleuglutrpvalalavalilesertyr
165170175
aspglyserasplystyrtyrvalaspservallysglyargphethr
180185190
ileserargaspasnserlysasnargleutyrleuglnmetasnser
195200205
leuargalagluaspthralavaltyrtyrcysalaarggluargtyr
210215220
serglyargasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserser
225230235240
alaalaalailegluvalmettyrproproprotyrleuaspasnglu
245250255
lysserasnglythrileilehisvallysglylyshisleucyspro
260265270
serproleupheproglyproserlysprophetrpvalleuvalval
275280285
valglyglyvalleualacystyrserleuleuvalthrvalalaphe
290295300
ileilephetrpvalargserlysargserargleuleuhisserasp
305310315320
tyrmetasnmetthrproargargproglyprothrarglyshistyr
325330335
glnprotyralaproproargaspphealaalatyrargserargval
340345350
lyspheserargseralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasn
355360365
glnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyraspval
370375380
leuasplysargargglyargaspproglumetglyglylysproarg
385390395400
arglysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasplys
405410415
metalaglualatyrsergluileglymetlysglygluargargarg
420425430
glylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathrlys
435440445
aspthrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
450455460
<210>233
<211>1533
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>233
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccggaaatagtgatgactcagtccccggccaccctcagcgtgtcccccggggagcgagcg120
accctgtcatgcagggcttcccagagtgtcagctccctgctcacttggtatcagcaaaag180
ccggggcaggctccccgcctcctcatcttcggggcatcaactagggccaccggcattcct240
gcaagattttccgggtctggcagcggcaccggcttcacccttaccattagctctctgcag300
tctgaggacttcgccgtttactattgtcagcagtatgatacttggccctttaccttcggt360
cccggaactaaggtggacttcaagcgcggggggggtggatctggaggtggtggctccggg420
ggcggtggaagccaggtccagttggttgagagcggcggcggagtggtgcagcccgggagg480
tccttgcggctgagctgtgcagcctccggttttactttttctagctatggaatgcattgg540
gtaagacaggctcccggaaaaggcctcgagtgggtggcggtcattagctatgatggatct600
gataaatactatgtggactcagttaaggggcgcttcacaatctcaagagacaatagcaaa660
aatagactgtacctgcagatgaatagtctgcgcgccgaggacactgccgtgtactactgc720
gcccgcgagagatacagcggacgggattactggggccagggtaccctcgtaacggtgtcc780
tccgctgccgcccttagcaacagcattatgtacttttctcatttcgtgccagtctttctc840
ccagcaaagcccaccactaccccggcccccaggccgcctactcctgcccccactatcgcg900
tctcagcctctctccttgcggcccgaggcctgccggccagccgcagggggcgccgtacat960
actcggggtttggatttcgcttgcgacatatatatttgggcccccctcgccggcacatgt1020
ggagtgctgctcctgagtctcgttataaccctctattgcaaccatagaaacagatccaaa1080
agaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggccccaca1140
aggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtg1200
aagttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataac1260
gagctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggac1320
cctgagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctg1380
cagaaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaagg1440
ggaaaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgac1500
gctctccacatgcaagccctgccacctaggtaa1533
<210>234
<211>510
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>234
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargprogluilevalmetthrglnserproalathrleu
202530
servalserproglygluargalathrleusercysargalasergln
354045
servalserserleuleuthrtrptyrglnglnlysproglyglnala
505560
proargleuleuilepheglyalaserthrargalathrglyilepro
65707580
alaargpheserglyserglyserglythrglyphethrleuthrile
859095
serserleuglnsergluaspphealavaltyrtyrcysglnglntyr
100105110
aspthrtrpprophethrpheglyproglythrlysvalaspphelys
115120125
argglyglyglyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyser
130135140
glnvalglnleuvalgluserglyglyglyvalvalglnproglyarg
145150155160
serleuargleusercysalaalaserglyphethrphesersertyr
165170175
glymethistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpval
180185190
alavalilesertyraspglyserasplystyrtyrvalaspserval
195200205
lysglyargphethrileserargaspasnserlysasnargleutyr
210215220
leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys
225230235240
alaarggluargtyrserglyargasptyrtrpglyglnglythrleu
245250255
valthrvalserseralaalaalaleuserasnserilemettyrphe
260265270
serhisphevalprovalpheleuproalalysprothrthrthrpro
275280285
alaproargproprothrproalaprothrilealaserglnproleu
290295300
serleuargproglualacysargproalaalaglyglyalavalhis
305310315320
thrargglyleuaspphealacysaspiletyriletrpalaproleu
325330335
alaglythrcysglyvalleuleuleuserleuvalilethrleutyr
340345350
cysasnhisargasnargserlysargserargleuleuhisserasp
355360365
tyrmetasnmetthrproargargproglyprothrarglyshistyr
370375380
glnprotyralaproproargaspphealaalatyrargserargval
385390395400
lyspheserargseralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasn
405410415
glnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyraspval
420425430
leuasplysargargglyargaspproglumetglyglylysproarg
435440445
arglysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasplys
450455460
metalaglualatyrsergluileglymetlysglygluargargarg
465470475480
glylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathrlys
485490495
aspthrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
500505510
<210>235
<211>1467
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>235
gaaatagtgatgactcagtccccggccaccctcagcgtgtcccccggggagcgagcgacc60
ctgtcatgcagggcttcccagagtgtcagctccctgctcacttggtatcagcaaaagccg120
gggcaggctccccgcctcctcatcttcggggcatcaactagggccaccggcattcctgca180
agattttccgggtctggcagcggcaccggcttcacccttaccattagctctctgcagtct240
gaggacttcgccgtttactattgtcagcagtatgatacttggccctttaccttcggtccc300
ggaactaaggtggacttcaagcgcggggggggtggatctggaggtggtggctccgggggc360
ggtggaagccaggtccagttggttgagagcggcggcggagtggtgcagcccgggaggtcc420
ttgcggctgagctgtgcagcctccggttttactttttctagctatggaatgcattgggta480
agacaggctcccggaaaaggcctcgagtgggtggcggtcattagctatgatggatctgat540
aaatactatgtggactcagttaaggggcgcttcacaatctcaagagacaatagcaaaaat600
agactgtacctgcagatgaatagtctgcgcgccgaggacactgccgtgtactactgcgcc660
cgcgagagatacagcggacgggattactggggccagggtaccctcgtaacggtgtcctcc720
gctgccgcccttagcaacagcattatgtacttttctcatttcgtgccagtctttctccca780
gcaaagcccaccactaccccggcccccaggccgcctactcctgcccccactatcgcgtct840
cagcctctctccttgcggcccgaggcctgccggccagccgcagggggcgccgtacatact900
cggggtttggatttcgcttgcgacatatatatttgggcccccctcgccggcacatgtgga960
gtgctgctcctgagtctcgttataaccctctattgcaaccatagaaacagatccaaaaga1020
agccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaagg1080
aaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagcagggtgaag1140
ttttccagatctgcagatgcaccagcgtatcagcagggccagaaccaactgtataacgag1200
ctcaacctgggacgcagggaagagtatgacgttttggacaagcgcagaggacgggaccct1260
gagatgggtggcaaaccaagacgaaaaaacccccaggagggtctctataatgagctgcag1320
aaggataagatggctgaagcctattctgaaataggcatgaaaggagagcggagaagggga1380
aaagggcacgacggtttgtaccagggactcagcactgctacgaaggatacttatgacgct1440
ctccacatgcaagccctgccacctagg1467
<210>236
<211>489
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>抗cll-1car构建体
<400>236
gluilevalmetthrglnserproalathrleuservalserprogly
151015
gluargalathrleusercysargalaserglnservalserserleu
202530
leuthrtrptyrglnglnlysproglyglnalaproargleuleuile
354045
pheglyalaserthrargalathrglyileproalaargphesergly
505560
serglyserglythrglyphethrleuthrileserserleuglnser
65707580
gluaspphealavaltyrtyrcysglnglntyraspthrtrpprophe
859095
thrpheglyproglythrlysvalaspphelysargglyglyglygly
100105110
serglyglyglyglyserglyglyglyglyserglnvalglnleuval
115120125
gluserglyglyglyvalvalglnproglyargserleuargleuser
130135140
cysalaalaserglyphethrphesersertyrglymethistrpval
145150155160
argglnalaproglylysglyleuglutrpvalalavalilesertyr
165170175
aspglyserasplystyrtyrvalaspservallysglyargphethr
180185190
ileserargaspasnserlysasnargleutyrleuglnmetasnser
195200205
leuargalagluaspthralavaltyrtyrcysalaarggluargtyr
210215220
serglyargasptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserser
225230235240
alaalaalaleuserasnserilemettyrpheserhisphevalpro
245250255
valpheleuproalalysprothrthrthrproalaproargpropro
260265270
thrproalaprothrilealaserglnproleuserleuargproglu
275280285
alacysargproalaalaglyglyalavalhisthrargglyleuasp
290295300
phealacysaspiletyriletrpalaproleualaglythrcysgly
305310315320
valleuleuleuserleuvalilethrleutyrcysasnhisargasn
325330335
argserlysargserargleuleuhisserasptyrmetasnmetthr
340345350
proargargproglyprothrarglyshistyrglnprotyralapro
355360365
proargaspphealaalatyrargserargvallyspheserargser
370375380
alaaspalaproalatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasnglu
385390395400
leuasnleuglyargarggluglutyraspvalleuasplysargarg
405410415
glyargaspproglumetglyglylysproargarglysasnprogln
420425430
gluglyleutyrasngluleuglnlysasplysmetalaglualatyr
435440445
sergluileglymetlysglygluargargargglylysglyhisasp
450455460
glyleutyrglnglyleuserthralathrlysaspthrtyraspala
465470475480
leuhismetglnalaleuproproarg
485
<210>237
<211>15
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>scfvg4s接头
<400>237
glyglyglyglyserglyglyglyglyserglyglyglyglyser
151015
<210>238
<211>288
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>cd8细胞外和跨膜结构域
<400>238
gctgcagcattgagcaactcaataatgtattttagtcactttgtaccagtgttcttgccg60
gctaagcctactaccacacccgctccacggccacctaccccagctcctaccatcgcttca120
cagcctctgtccctgcgcccagaggcttgccgaccggccgcagggggcgctgttcatacc180
agaggactggatttcgcctgcgatatctatatctgggcacccctggccggaacctgcggc240
gtactcctgctgtccctggtcatcacgctctattgtaatcacaggaac288
<210>239
<211>96
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>cd8细胞外和跨膜结构域
<400>239
alaalaalaleuserasnserilemettyrpheserhisphevalpro
151015
valpheleuproalalysprothrthrthrproalaproargpropro
202530
thrproalaprothrilealaserglnproleuserleuargproglu
354045
alacysargproalaalaglyglyalavalhisthrargglyleuasp
505560
phealacysaspiletyriletrpalaproleualaglythrcysgly
65707580
valleuleuleuserleuvalilethrleutyrcysasnhisargasn
859095
<210>240
<211>294
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>细胞外和细胞内结构域
<400>240
cttgataatgaaaagtcaaacggaacaatcattcacgtgaagggcaagcacctctgtccg60
tcacccttgttccctggtccatccaagccattctgggtgttggtcgtagtgggtggagtc120
ctcgcttgttactctctgctcgtcaccgtggcttttataatcttctgggttagatccaaa180
agaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggccccaca240
aggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagc294
<210>241
<211>98
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>细胞外和细胞内结构域
<400>241
leuaspasnglulysserasnglythrileilehisvallysglylys
151015
hisleucysproserproleupheproglyproserlysprophetrp
202530
valleuvalvalvalglyglyvalleualacystyrserleuleuval
354045
thrvalalapheileilephetrpvalargserlysargserargleu
505560
leuhisserasptyrmetasnmetthrproargargproglyprothr
65707580
arglyshistyrglnprotyralaproproargaspphealaalatyr
859095
argser
<210>242
<211>1482
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>10e3_chd_dna
<400>242
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaggtgaccctcaaagagtctggacccgtgctcgtaaaacctacggagaccctgaca120
ctcacctgcacagtctccggcttcagcctcatcaatgccaggatgggagtttcctggatc180
aggcaaccgcccggaaaggccctggaatggctcgcacatattttcagtaacgctgaaaaa240
agctatcggacttctctgaaaagtcggctcacgattagtaaggacacatccaagagccaa300
gtggtgcttacgatgactaacatggaccctgtggatactgcaacctattactgtgctcga360
atccctggttatggcggaaatggggactaccactactacggtatggatgtctggggccaa420
gggaccacggttactgtttcaagcggagggggagggagtgggggtggcggatctggcgga480
ggaggcagcgatatccagatgacgcagtcccctagttcactttccgcatccctgggggat540
cgggttaccattacatgccgcgcgtcacagggtatccggaatgatctgggatggtaccag600
cagaagccgggaaaggctcctaagcgcctcatctacgccagctccaccctgcagagtgga660
gtgccctcccggttttcaggcagtggctccggtacggagtttactcttacaattagcagc720
ctgcagccagaagattttgcaacttactactgtttgcagcataataatttcccctggacc780
tttggtcagggcaccaaggtggagatcaaaagagcagccgccatcgaagtaatgtatccc840
cccccgtaccttgacaatgagaagtcaaatggaaccattatccatgttaagggcaaacac900
ctctgcccttctccactgttccctggccctagtaagccgttttgggtgctggtggtagtc960
ggtggggtgctggcttgttactctcttctcgtgaccgtcgcctttataatcttttgggtc1020
agatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccct1080
ggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcgg1140
agccgagtgaaattttctagatcagctgatgctcccgcctatcagcagggacagaatcaa1200
ctttacaatgagctgaacctgggtcgcagagaagagtacgacgttttggacaaacgccgg1260
ggccgagatcctgagatgggggggaagccgagaaggaagaatcctcaagaaggcctgtac1320
aacgagcttcaaaaagacaaaatggctgaggcgtactctgagatcggcatgaagggcgag1380
cggagacgaggcaagggtcacgatggcttgtatcagggcctgagtacagccacaaaggac1440
acctatgacgccctccacatgcaggcactgcccccacgctag1482
<210>243
<211>493
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>10e3_chd_aa
<400>243
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalthrleulysgluserglyprovalleu
202530
vallysprothrgluthrleuthrleuthrcysthrvalserglyphe
354045
serleuileasnalaargmetglyvalsertrpileargglnpropro
505560
glylysalaleuglutrpleualahisilepheserasnalaglulys
65707580
sertyrargthrserleulysserargleuthrileserlysaspthr
859095
serlysserglnvalvalleuthrmetthrasnmetaspprovalasp
100105110
thralathrtyrtyrcysalaargileproglytyrglyglyasngly
115120125
asptyrhistyrtyrglymetaspvaltrpglyglnglythrthrval
130135140
thrvalserserglyglyglyglyserglyglyglyglyserglygly
145150155160
glyglyseraspileglnmetthrglnserproserserleuserala
165170175
serleuglyaspargvalthrilethrcysargalaserglnglyile
180185190
argasnaspleuglytrptyrglnglnlysproglylysalaprolys
195200205
argleuiletyralaserserthrleuglnserglyvalproserarg
210215220
pheserglyserglyserglythrgluphethrleuthrileserser
225230235240
leuglnprogluaspphealathrtyrtyrcysleuglnhisasnasn
245250255
pheprotrpthrpheglyglnglythrlysvalgluilelysargala
260265270
alaalailegluvalmettyrproproprotyrleuaspasnglulys
275280285
serasnglythrileilehisvallysglylyshisleucysproser
290295300
proleupheproglyproserlysprophetrpvalleuvalvalval
305310315320
glyglyvalleualacystyrserleuleuvalthrvalalapheile
325330335
ilephetrpvalargserlysargserargleuleuhisserasptyr
340345350
metasnmetthrproargargproglyprothrarglyshistyrgln
355360365
protyralaproproargaspphealaalatyrargserargvallys
370375380
pheserargseralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasngln
385390395400
leutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyraspvalleu
405410415
asplysargargglyargaspproglumetglyglylysproargarg
420425430
lysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasplysmet
435440445
alaglualatyrsergluileglymetlysglygluargargarggly
450455460
lysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathrlysasp
465470475480
thrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
485490
<210>244
<211>1455
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>10e3_thd_dna
<400>244
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcaagttactttgaaggagtctggacctgtactggtgaagccaaccgagacactgaca120
ctcacgtgtacagtgagtggtttttccttgatcaacgcaaggatgggcgtcagctggatc180
aggcaaccccctggcaaggctctggaatggctcgctcacatattcagcaatgccgaaaaa240
agctaccggacaagcctgaaatcccgcctgactatttccaaggacacttctaagtctcag300
gtggtgctgaccatgaccaacatggacccggtggacaccgccacctattactgcgcaaga360
atccctgggtatggtgggaatggtgactaccattattatgggatggatgtgtgggggcaa420
ggcacaaccgtaacggtctcaagcggtgggggaggctcagggggcggaggctccggaggt480
ggcggctccgacattcagatgacccaaagcccgtccagcctgtccgccagcctgggagat540
agagtgacaatcacgtgtagagcttcccaagggataagaaatgatctcgggtggtatcag600
cagaagcccggcaaagcccccaaaaggcttatatatgctagtagtacactgcagtctgga660
gttccttcccgattttcaggtagcggctccggtacagagttcaccctcacgataagctca720
ctccagcctgaggatttcgcaacgtactactgcctccagcacaacaattttccctggact780
ttcggccagggcaccaaggtggagatcaagagggccgctgcccttgataatgaaaagtca840
aacggaacaatcattcacgtgaagggcaagcacctctgtccgtcacccttgttccctggt900
ccatccaagccattctgggtgttggtcgtagtgggtggagtcctcgcttgttactctctg960
ctcgtcaccgtggcttttataatcttctgggttagatccaaaagaagccgcctgctccat1020
agcgattacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagcct1080
tacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagccgagtgaaattttctagatcagct1140
gatgctcccgcctatcagcagggacagaatcaactttacaatgagctgaacctgggtcgc1200
agagaagagtacgacgttttggacaaacgccggggccgagatcctgagatgggggggaag1260
ccgagaaggaagaatcctcaagaaggcctgtacaacgagcttcaaaaagacaaaatggct1320
gaggcgtactctgagatcggcatgaagggcgagcggagacgaggcaagggtcacgatggc1380
ttgtatcagggcctgagtacagccacaaaggacacctatgacgccctccacatgcaggca1440
ctgcccccacgctag1455
<210>245
<211>484
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>10e3_thd_aa
<400>245
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnvalthrleulysgluserglyprovalleu
202530
vallysprothrgluthrleuthrleuthrcysthrvalserglyphe
354045
serleuileasnalaargmetglyvalsertrpileargglnpropro
505560
glylysalaleuglutrpleualahisilepheserasnalaglulys
65707580
sertyrargthrserleulysserargleuthrileserlysaspthr
859095
serlysserglnvalvalleuthrmetthrasnmetaspprovalasp
100105110
thralathrtyrtyrcysalaargileproglytyrglyglyasngly
115120125
asptyrhistyrtyrglymetaspvaltrpglyglnglythrthrval
130135140
thrvalserserglyglyglyglyserglyglyglyglyserglygly
145150155160
glyglyseraspileglnmetthrglnserproserserleuserala
165170175
serleuglyaspargvalthrilethrcysargalaserglnglyile
180185190
argasnaspleuglytrptyrglnglnlysproglylysalaprolys
195200205
argleuiletyralaserserthrleuglnserglyvalproserarg
210215220
pheserglyserglyserglythrgluphethrleuthrileserser
225230235240
leuglnprogluaspphealathrtyrtyrcysleuglnhisasnasn
245250255
pheprotrpthrpheglyglnglythrlysvalgluilelysargala
260265270
alaalaleuaspasnglulysserasnglythrileilehisvallys
275280285
glylyshisleucysproserproleupheproglyproserlyspro
290295300
phetrpvalleuvalvalvalglyglyvalleualacystyrserleu
305310315320
leuvalthrvalalapheileilephetrpvalargserlysargser
325330335
argleuleuhisserasptyrmetasnmetthrproargargprogly
340345350
prothrarglyshistyrglnprotyralaproproargasppheala
355360365
alatyrargserargvallyspheserargseralaaspalaproala
370375380
tyrglnglnglyglnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyarg
385390395400
arggluglutyraspvalleuasplysargargglyargaspproglu
405410415
metglyglylysproargarglysasnproglngluglyleutyrasn
420425430
gluleuglnlysasplysmetalaglualatyrsergluileglymet
435440445
lysglygluargargargglylysglyhisaspglyleutyrglngly
450455460
leuserthralathrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnala
465470475480
leuproproarg
<210>246
<211>1464
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>8b5_chd_dna
<400>246
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcagatccagttggtggaatcagggggcggtgtggtgcagccgggtaggagcctgaga120
ctgtcatgcgtggcgtctggcttcacattcaagaactacggcatgcactgggtgcgacag180
gcccccggaaagggtttggagtgggtcgccgtgatctggtacgacggatctaatgagtat240
tacggagatcctgtgaagggaaggttcaccatctcccgcgacaatagcaaaaatatgctc300
tacctgcaaatgaactcactcagggcggatgatacggcggtctactattgcgctcgctca360
gggattgctgtggccggcgcattcgattactggggacagggtaccctggtgacagtatca420
agcggaggcggcggctctggcggcggcggatctggcggggggggaagtgagattgtgttg480
acacagtctcccgataccctgtcactgtcacccggcgagaaggcaacgctgagttgcaga540
gcaagccagtcagtctcctcttcttttctggcctggtatcagcaaaaaccaggtcaggca600
ccatctctcctgatttacgttgccagcagacgggcggctggcattcccgacaggttctct660
ggaagcggatctgggaccgattttaccctgacaattagccgcttggagcccgaagacttt720
ggtatgttttactgccagcactacggaaggacacctttcacatttggcccgggcacgaaa780
gtcgatataaaacgcgcagccgccattgaagtaatgtacccaccaccttatttggacaat840
gaaaagtccaatggtaccattattcacgtcaagggaaagcatctctgtccaagccctctg900
ttccccggcccctccaaaccattctgggtgctggtggtcgtcggcggagttctggcctgc960
tattctctgctcgtgactgttgcattcatcattttctgggtgagatccaaaagaagccgc1020
ctgctccatagcgattacatgaatatgactccacgccgccctggccccacaaggaaacac1080
taccagccttacgcaccacctagagatttcgctgcctatcggagccgagtgaaattttct1140
agatcagctgatgctcccgcctatcagcagggacagaatcaactttacaatgagctgaac1200
ctgggtcgcagagaagagtacgacgttttggacaaacgccggggccgagatcctgagatg1260
ggggggaagccgagaaggaagaatcctcaagaaggcctgtacaacgagcttcaaaaagac1320
aaaatggctgaggcgtactctgagatcggcatgaagggcgagcggagacgaggcaagggt1380
cacgatggcttgtatcagggcctgagtacagccacaaaggacacctatgacgccctccac1440
atgcaggcactgcccccacgctag1464
<210>247
<211>487
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>8b5_chd_aa
<400>247
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnileglnleuvalgluserglyglyglyval
202530
valglnproglyargserleuargleusercysvalalaserglyphe
354045
thrphelysasntyrglymethistrpvalargglnalaproglylys
505560
glyleuglutrpvalalavaliletrptyraspglyserasnglutyr
65707580
tyrglyaspprovallysglyargphethrileserargaspasnser
859095
lysasnmetleutyrleuglnmetasnserleuargalaaspaspthr
100105110
alavaltyrtyrcysalaargserglyilealavalalaglyalaphe
115120125
asptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserserglyglygly
130135140
glyserglyglyglyglyserglyglyglyglysergluilevalleu
145150155160
thrglnserproaspthrleuserleuserproglyglulysalathr
165170175
leusercysargalaserglnservalserserserpheleualatrp
180185190
tyrglnglnlysproglyglnalaproserleuleuiletyrvalala
195200205
serargargalaalaglyileproaspargpheserglyserglyser
210215220
glythraspphethrleuthrileserargleugluprogluaspphe
225230235240
glymetphetyrcysglnhistyrglyargthrprophethrphegly
245250255
proglythrlysvalaspilelysargalaalaalailegluvalmet
260265270
tyrproproprotyrleuaspasnglulysserasnglythrileile
275280285
hisvallysglylyshisleucysproserproleupheproglypro
290295300
serlysprophetrpvalleuvalvalvalglyglyvalleualacys
305310315320
tyrserleuleuvalthrvalalapheileilephetrpvalargser
325330335
lysargserargleuleuhisserasptyrmetasnmetthrproarg
340345350
argproglyprothrarglyshistyrglnprotyralaproproarg
355360365
aspphealaalatyrargserargvallyspheserargseralaasp
370375380
alaproalatyrglnglnglyglnasnglnleutyrasngluleuasn
385390395400
leuglyargarggluglutyraspvalleuasplysargargglyarg
405410415
aspproglumetglyglylysproargarglysasnproglnglugly
420425430
leutyrasngluleuglnlysasplysmetalaglualatyrserglu
435440445
ileglymetlysglygluargargargglylysglyhisaspglyleu
450455460
tyrglnglyleuserthralathrlysaspthrtyraspalaleuhis
465470475480
metglnalaleuproproarg
485
<210>248
<211>1437
<212>dna
<213>人工序列
<220>
<223>8b5_thd_dna
<400>248
atggcactccccgtaactgctctgctgctgccgttggcattgctcctgcacgccgcacgc60
ccgcagattcagctcgtggagtcaggtggtggcgtggttcagcccggacggtccctgcga120
ctctcttgtgtggcaagcggatttacctttaagaactatggcatgcactgggtgaggcag180
gcccctggaaaaggactggagtgggttgctgtgatctggtacgacgggtccaacgaatat240
tatggcgatcctgtgaagggacggtttacaatctcacgcgataactcaaagaacatgctg300
tacctgcaaatgaactctctgcgcgctgatgacactgccgtgtattattgcgctcggagt360
ggtatcgccgtcgcaggagcatttgattattgggggcaagggaccctcgtgacagtgagt420
tccggagggggaggttctggtggaggcggctctggtgggggaggcagcgagatcgttctg480
acccagtctcctgacacactgtcactgtcccctggtgaaaaggccacactgtcttgtaga540
gcgtcccagagcgtttccagttccttccttgcatggtatcaacaaaaacccgggcaggct600
ccaagcttgctgatctacgtggccagccgccgggccgcaggcatccctgataggtttagc660
ggttctgggagcgggacggacttcaccttgacaatatcacggctggaacccgaagacttc720
ggaatgttttattgccagcactacggaagaactccattcacctttggcccgggaacgaag780
gtagacatcaagagagcagcagccctcgacaacgagaaatccaatggaaccattatccat840
gtgaaggggaaacatctctgcccttcaccattgttccctggacccagcaagcctttttgg900
gttctggtcgtggtggggggcgtcctggcttgttactccctcctcgttacagtcgccttc960
ataatcttttgggttagatccaaaagaagccgcctgctccatagcgattacatgaatatg1020
actccacgccgccctggccccacaaggaaacactaccagccttacgcaccacctagagat1080
ttcgctgcctatcggagccgagtgaaattttctagatcagctgatgctcccgcctatcag1140
cagggacagaatcaactttacaatgagctgaacctgggtcgcagagaagagtacgacgtt1200
ttggacaaacgccggggccgagatcctgagatgggggggaagccgagaaggaagaatcct1260
caagaaggcctgtacaacgagcttcaaaaagacaaaatggctgaggcgtactctgagatc1320
ggcatgaagggcgagcggagacgaggcaagggtcacgatggcttgtatcagggcctgagt1380
acagccacaaaggacacctatgacgccctccacatgcaggcactgcccccacgctag1437
<210>249
<211>478
<212>prt
<213>人工序列
<220>
<223>8b5_thd_aa
<400>249
metalaleuprovalthralaleuleuleuproleualaleuleuleu
151015
hisalaalaargproglnileglnleuvalgluserglyglyglyval
202530
valglnproglyargserleuargleusercysvalalaserglyphe
354045
thrphelysasntyrglymethistrpvalargglnalaproglylys
505560
glyleuglutrpvalalavaliletrptyraspglyserasnglutyr
65707580
tyrglyaspprovallysglyargphethrileserargaspasnser
859095
lysasnmetleutyrleuglnmetasnserleuargalaaspaspthr
100105110
alavaltyrtyrcysalaargserglyilealavalalaglyalaphe
115120125
asptyrtrpglyglnglythrleuvalthrvalserserglyglygly
130135140
glyserglyglyglyglyserglyglyglyglysergluilevalleu
145150155160
thrglnserproaspthrleuserleuserproglyglulysalathr
165170175
leusercysargalaserglnservalserserserpheleualatrp
180185190
tyrglnglnlysproglyglnalaproserleuleuiletyrvalala
195200205
serargargalaalaglyileproaspargpheserglyserglyser
210215220
glythraspphethrleuthrileserargleugluprogluaspphe
225230235240
glymetphetyrcysglnhistyrglyargthrprophethrphegly
245250255
proglythrlysvalaspilelysargalaalaalaleuaspasnglu
260265270
lysserasnglythrileilehisvallysglylyshisleucyspro
275280285
serproleupheproglyproserlysprophetrpvalleuvalval
290295300
valglyglyvalleualacystyrserleuleuvalthrvalalaphe
305310315320
ileilephetrpvalargserlysargserargleuleuhisserasp
325330335
tyrmetasnmetthrproargargproglyprothrarglyshistyr
340345350
glnprotyralaproproargaspphealaalatyrargserargval
355360365
lyspheserargseralaaspalaproalatyrglnglnglyglnasn
370375380
glnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyraspval
385390395400
leuasplysargargglyargaspproglumetglyglylysproarg
405410415
arglysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlysasplys
420425430
metalaglualatyrsergluileglymetlysglygluargargarg
435440445
glylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthralathrlys
450455460
aspthrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
465470475
<210>250
<211>9
<212>prt
<213>人
<400>250
ilegluvalmettyrproproprotyr
15
<210>251
<211>112
<212>prt
<213>人
<400>251
argvallyspheserargseralaaspalaproalatyrlysglngly
151015
glnasnglnleutyrasngluleuasnleuglyargarggluglutyr
202530
aspvalleuasplysargargglyargaspproglumetglyglylys
354045
proargarglysasnproglngluglyleutyrasngluleuglnlys
505560
asplysmetalaglualatyrsergluileglymetlysglygluarg
65707580
argargglylysglyhisaspglyleutyrglnglyleuserthrala
859095
thrlysaspthrtyraspalaleuhismetglnalaleuproproarg
100105110