本发明涉及溶菌酶医用领域，具体为一种溶菌酶制剂、制备方法及应用。
背景技术：
溶菌酶又称胞壁质酶或n-乙酰胞壁质聚糖水解酶，是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。主要通过破坏细胞壁中的n-乙酰胞壁酸和n-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。
萝卜溶酶菌是从十字花科萝卜叶中提取的一种耐酸性耐热性均优于hewl的溶酶菌，其对白色葡萄球菌等3种g+菌，大肠杆菌等6种g-菌，以及酵母、毛霉等5种真菌均有不同程度的抑制作用，且原料成本低廉。
口腔溃疡俗称“口疮”，是一种常见的发生于口腔黏膜的溃疡性损伤病症，多见于唇内侧、舌头、舌腹、颊黏膜、前庭沟、软腭等部位，这些部位的黏膜缺乏角质化层或角化较差。舌头溃疡指发生于舌头、舌腹部位的口腔溃疡。口腔溃疡发作时疼痛剧烈，局部灼痛明显，严重者还会影响饮食、说话，对日常生活造成极大不便；可并发口臭、慢性咽炎、便秘、头痛、头晕、恶心、乏力、烦躁、发热、淋巴结肿大等全身症状；目前口腔溃疡一般都是通过口含杜米芬含片或氯已定含片等含片，也可以散敷冰硼散和西瓜霜散等。
上述现有的治疗方案，在治疗时存在着一些缺陷，如含片在口腔内滞留时间短，使用药效维持时间短，最终导致治疗的时间长，增加病人的痛苦，散剂的缺点是给药后难以定位。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种溶菌酶制剂、制备方法及应用，以解决上述问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
本发明提供了一种溶菌酶制剂，溶菌酶制剂的有效成分包含有：
优选的，溶菌酶制剂的有效成分还包含有：
一种溶菌酶制剂的制备方法，该方法包括以下步骤：
1)萝卜溶菌酶的制备，取成熟新鲜的萝卜叶片剪碎，加入1-1.5倍于材料的0.066mol/l，ph6.2的磷酸钠缓冲液，捣碎机匀浆，通过140目的尼龙布过滤，将滤液于4000r/min离心10min，收集上清液，即得粗酶液，将210ml粗酶液于4℃下与辅助制剂混合并缓慢搅拌2h，装入层析柱，用0.1mol/lhac洗脱，分部收集酶活性部分，然后将其对缓冲液透析即制得精制的萝卜溶菌酶；
2)将明胶10-30份、羧甲基纤维素钠15-30份、聚乙烯醇10-15份、甲硝锉5-15份、普鲁卡因0.1-0.2份和冰片0.5-2份研磨成细粉，通过200目的筛网筛分，在按薄荷油0.5-2份以及由步骤1)制取的萝卜溶菌酶25-40份加入到细粉中，并通过搅拌机充分的混合均匀，制成具有粘性的液体制剂。
优选的，在步骤2)中，还包括将金银花17-23份、肉桂17-23份、西红花10-20份、山药8-10份和黄芪8-10份磨成细粉，一并进行混合。
优选的，在步骤1)中，所述辅助制剂为用0.066mol/l磷酸钠缓冲液充分平衡、吸干的蟹壳脱氨几丁质25mg。
优选的，将具有粘性的液体制剂加入液体石蜡20-35份，将混合液调成软硬适中的胶体制剂，液体石蜡接触到口腔中的水份时，会迅速膨胀，吸附在患区，粘附力强，从而延长药物在口腔中的滞留时间，提高疗效。
一种溶菌酶制剂的应用，包括两种应用方法，
一种是将由上述方法制备的制成具有粘性的液体制剂灌装到雾化喷瓶中，对口腔内部进行喷雾；能够将液态制剂均匀的喷洒在口腔内部，有口腔溃疡时可以治疗口腔溃疡，在没患有口腔溃疡时，喷洒在口腔内部时，金银花、肉桂、西红花、山药和黄芪等草药可以强健口腔内膜，预防口腔溃疡，其主要应用与预防。
另一种将由上述方法制备的软硬适中的胶体制剂直接涂抹到口腔溃疡处，能够将胶体制剂集中到口腔溃疡处，为了防止舌头舔到胶体制剂，还可以在涂好胶体制剂后，在其表面贴上一层隔水膜。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明所述的一种溶菌酶制剂、制备方法及应用，通过萝卜溶菌酶、明胶、羧甲基纤维素钠、聚乙烯醇和薄荷油等原料的混合，能够有效的治疗口腔溃疡，且治疗口腔溃疡的效果较杜米芬含片有很大的提升，能够比杜米芬含片更快的使溃疡伤口愈合，通过将混合液调成软硬适中的胶体制剂，液体石蜡接触到口腔中的水份时，会迅速膨胀，吸附在患区，粘附力强，从而延长药物在口腔中的滞留时间，提高疗效，能够比杜米芬含片更快的使溃疡伤口愈合，且与具有粘性的液体制剂的治疗效果接近，但是胶体状溶菌酶制剂的用量降低，能够节约治疗的成本。
具体实施例
下面将结合本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
1)萝卜溶菌酶的制备，取成熟新鲜的萝卜叶片剪碎，加入1倍于材料的0.066mol/l，ph6.2的磷酸钠缓冲液，捣碎机匀浆，通过140目的尼龙布过滤，将滤液于4000r/min离心10min，收集上清液，即得粗酶液，用0.066mol/l磷酸钠缓冲液充分平衡、吸干的蟹壳脱氨几丁质25mg与210ml粗酶液于4℃下混合并缓慢搅拌2h，装入层析柱，用0.1mol/lhac洗脱，分部收集酶活性部分，然后将其对缓冲液透析即制得精制的萝卜溶菌酶；
2)将明胶20份、羧甲基纤维素钠20份、聚乙烯醇15份、甲硝锉5份、普鲁卡因0.1份和冰片2份研磨成细粉，通过200目的筛网筛分，在按薄荷油2份以及由步骤1)制取的萝卜溶菌酶40份加入到细粉中，并通过搅拌机充分的混合均匀，制成具有粘性的液体制剂，将具有粘性的液体制剂灌装到雾化喷瓶中，对口腔内部进行喷雾。
找10名口腔溃疡程度相近的口腔溃疡患者，对其中4名口腔溃疡患者口腔内部进行喷雾，作为实验组1，4名口腔溃疡患者将杜米芬含片含在嘴中，作为实验组2，剩下2名作为对照组，每小时观察一次，贯穿口腔溃疡患者伤口愈合的时间，其结果如表1所示：
表1
由表1可知，本发明所述的溶菌酶制剂能够有效的治疗口腔溃疡，且治疗口腔溃疡的效果较杜米芬含片有很大的提升，能够比杜米芬含片更快的使溃疡伤口愈合。
实施例2
1)萝卜溶菌酶的制备，取成熟新鲜的萝卜叶片剪碎，加入1-1.5倍于材料的0.066mol/l，ph6.2的磷酸钠缓冲液，捣碎机匀浆，通过140目的尼龙布过滤，将滤液于4000r/min离心10min，收集上清液，即得粗酶液，用0.066mol/l磷酸钠缓冲液充分平衡、吸干的蟹壳脱氨几丁质25mg与210ml粗酶液于4℃下混合并缓慢搅拌2h，装入层析柱，用0.1mol/lhac洗脱，分部收集酶活性部分，然后将其对缓冲液透析即制得精制的萝卜溶菌酶；
2)将将明胶20份、羧甲基纤维素钠20份、聚乙烯醇15份、甲硝锉5份、普鲁卡因0.1份、冰片2份、金银花23份、肉桂23份、西红花20份、山药10份和黄芪10份磨成细粉，通过200目的筛网筛分，在按薄荷油0.5-2份以及由步骤1)制取的萝卜溶菌酶25-40份加入到细粉中，并通过搅拌机充分的混合均匀，制成具有粘性的液体制剂，将具有粘性的液体制剂灌装到雾化喷瓶中，对口腔内部进行喷雾。
找10名口腔溃疡程度相近的口腔溃疡患者，对其中4名口腔溃疡患者口腔内部进行喷雾，作为实验组1，4名口腔溃疡患者将杜米芬含片含在嘴中，作为实验组2，剩下2名作为对照组，每小时观察一次，贯穿口腔溃疡患者伤口愈合的时间，其结果如表2所示：
表2
由表2可知，本发明所述的溶菌酶制剂能够有效的治疗口腔溃疡，且治疗口腔溃疡的效果较杜米芬含片有很大的提升，能够比杜米芬含片更快的使溃疡伤口愈合，且比实施例1中溶菌酶制剂的治疗效果有进一步的提升。
实施例3
1)萝卜溶菌酶的制备，取成熟新鲜的萝卜叶片剪碎，加入1-1.5倍于材料的0.066mol/l，ph6.2的磷酸钠缓冲液，捣碎机匀浆，通过140目的尼龙布过滤，将滤液于4000r/min离心10min，收集上清液，即得粗酶液，用0.066mol/l磷酸钠缓冲液充分平衡、吸干的蟹壳脱氨几丁质25mg与210ml粗酶液于4℃下混合并缓慢搅拌2h，装入层析柱，用0.1mol/lhac洗脱，分部收集酶活性部分，然后将其对缓冲液透析即制得精制的萝卜溶菌酶；将具有粘性的液体制剂加入液体石蜡20-35份，将混合液调成软硬适中的胶体制剂。
2)将明胶10-30份、羧甲基纤维素钠15-30份、聚乙烯醇10-15份、甲硝锉5-15份、普鲁卡因0.1-0.2份、冰片0.5-2份、金银花17-23份、肉桂17-23份、西红花10-20份、山药8-10份和黄芪8-10份磨成细粉，通过200目的筛网筛分，在按薄荷油0.5-2份以及由步骤1)制取的萝卜溶菌酶25-40份加入到细粉中，并通过搅拌机充分的混合均匀，制成具有粘性的液体制剂，将具有粘性的液体制剂加入液体石蜡20-35份，将混合液调成软硬适中的胶体制剂，将软硬适中的胶体制剂装入灌中，在使用时只需将胶体涂抹在口腔溃疡处即可。1)将由权利要求3-5所述的任意一种方法制备的制成具有粘性的液体制剂灌装到雾化喷瓶中，对口腔内部进行喷雾；
找10名口腔溃疡程度相近的口腔溃疡患者，将胶体涂抹在其中4名口腔溃疡患者的口腔溃疡处，作为实验组1，4名口腔溃疡患者将杜米芬含片含在嘴中，作为实验组2，剩下2名作为对照组，每小时观察一次，贯穿口腔溃疡患者伤口愈合的时间，其结果如表3所示：
表3
由表3可知，本发明所述的溶菌酶制剂能够有效的治疗口腔溃疡，且治疗口腔溃疡的效果较杜米芬含片有很大的提升，能够比杜米芬含片更快的使溃疡伤口愈合，且比实施例1中溶菌酶制剂的治疗效果接近，但是溶菌酶制剂的用量降低，能够节约治疗的成本。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。