抑制鸟氨酸脱羧酶的环状氨基氧基化合物的制作方法

专利名称：抑制鸟氨酸脱羧酶的环状氨基氧基化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的具有药物活性的环状氨基氧基化合物、这些化合物的制备方法、包含这些化合物的药物组合物、用于治疗人或动物体的预防性、治疗性或诊断性方法的这些化合物、这些化合物在对于人或动物体的预防性或治疗性治疗方面的应用，以及药物组合物的制备。
根据现有知识状态，可以假设多胺亚精胺和精胺及二胺腐胺参与调节生长过程。
通过抑制多胺生物合成可以有利地影响许多细胞功能。
所述鸟氨酸脱羧酶(ODC)是多胺生物合成的关键酶之一。ODC活性的降低导致多胺生物合成的减少，并且因而导致细胞中多胺含量的下降。若通过ODC抑制剂实现该酶的活性抑制，那么借助于所述ODC抑制剂就可以影响(即降低)哺乳动物细胞(包括人细胞)中的多胺浓度。
在哺乳动物细胞中，ODC催化腐胺的合成，所谓腐胺即是一种二胺，同时它也是多胺生物合成中的中间体。
令人惊奇的是，现已发现具有环状中心成分的本发明化合物具有有利的药理学性质。
本发明化合物是式Ⅰ化合物及其盐
其中基团A是C3-C6亚环烷基;
n为0或1;和m为0或1;
条件是a)氨基氧基基团H2N-O-与氨基基团-NH2之间的距离至少为3个并不大于4个碳原子，并且b)H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2两个基团不键合到A的同一环碳原子上。
本发明化合物可以作为顺式和反式异构体的混合物存在，或优选作为纯的顺式或纯的反式异构体存在;若存在不对称碳原子(即若A不为1，4-亚环己基或1，3-亚环丁基)，则这些碳原子可彼此独立地为(R)、(S)或(R，S)构型。在顺式和反式异构体混合物中，在每种情况下，可以存在两种或只存在一种顺式和反式异构体的旋光对映体。优选纯的顺式或反式异构体，它们可以以纯对映体或对映体混合物(例如以外消旋混合物)存在，特别是以纯的对映体存在。
用于描述本发明的术语和一般表达形式优选定义如下其中H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2两个基团不键合到同一环碳原子上的C3-C6亚环烷基A是环烃的二价基团，并选自1，2-亚环丙基;1，2-或1，3-亚环丁基;1，2-或1，3-亚环戊基;和1，2-、1，3-或1，4-亚环己基;优选1，2-亚环丙基、1，3-亚环丁基、1，3-亚环戊基或1，3-或1，4-亚环己基。
氨基氧基团H2N-O-和氨基基团-NH2之间的距离至少为3个并且不大于4个碳原子是这样定义的即在计数环A中的碳原子时包括基团H2N-(CH2)n-和基团-(CH2)m-O-NH2之间的最短连接。根据条件a)中的内容选择n和m的数值;优选，n为0，且m为0或1。
本发明化合物的盐是酸加成盐，特别是可药用酸加成盐，即在所用具体剂量中不具有令人烦恼的毒性的那些酸加成盐，例如与无机酸形成的盐，所述无机酸可为例如盐酸、硫酸或磷酸;或与适宜的有机羧酸或磺酸形成的盐，所述有机羧酸或磺酸可为乙酸、辛酸、琥珀酸、己二酸、富马酸、马来酸、羟基马来酸、丙酸、乳酸、苹果酸、柠檬酸、水杨酸、对氨基水杨酸、抗坏血酸、草酸、苯磺酸、1，5-萘二磺酸、甲磺酸或1，2-乙二磺酸;与N-环己基氨基磺酸或与氨基酸例如谷氨酸或天冬氨酸形成的盐。依据所存在的碱性基团的碱性的不同，可以形成单盐或二盐。
不可药用的盐，例如苦味酸盐或高氯酸盐也可用于分离或纯化。只有可药用盐可用于治疗，因而是优选的。
本发明化合物具有有用的，特别是药理学上可用的性质。令人惊奇的是，已发现式Ⅰ化合物对鸟氨酸脱羧酶(ODC)具有特别有效的、特异性抑制作用，这对于二胺氧化酶(DAO)来讲是有选择性的。它们是新的一类ODC抑制剂。
ODC作为多胺生物合成中的关键性酶起着重要作用，所述生物合成特别在哺乳动物(包括人)的所有细胞中进行。细胞中多胺浓度用ODC来调节。酶ODC的抑制导致了多胺浓度的降低。由于多胺浓度的降低引起细胞生长的抑制，因此可能通过施用抑制ODC的物质来抑制真核生物细胞以及原核生物细胞的生长，特别是抑制迅速或不可控制地生长的细胞的生长，并且甚至于破坏细胞或者抑制细胞分化作用的发生。
对酶ODC的抑制作用可以例如通过J.E.Seely和A.E.Pegg的方法来证明鸟氨酸脱羧酶(小鼠肾)，第158-161页，H.Tabor和C.White-Tabor(编辑)Methods in Enzymology，Volume 94Polyamines，Academic Press，New York 1983。在该试验中若使用小鼠肝脏中的ODC(isolationHayashi，S.-I.和Kameji，T.，同卷，第154-158页)，用式Ⅰ化合物所得IC50值在微摩尔浓度区，最小至约0.01μM，优选约0.01～10μM，例如约0.02至约7.2μM。IC50是ODC活性是不加抑制剂的对照组的ODC活性的50%时抑制剂的浓度。
作为ODC抑制剂，式Ⅰ化合物具有抗增殖性质，这可例如通过证实对人T24膀胱癌细胞的生长的抑制作用来加以证实。可如下进行证明使这些细胞在已向其中加入了5%(V/V)胎牛血清的“伊格尔氏最低必需培养基”中，在空气中在加湿的保温箱中于37℃和5%(体积)CO2中保温。所述癌细胞(1000-1500)经接种进入96-孔微滴度板中，并在上述条件下保温过夜。在第一天通过连续稀释法加入试验物质。将微滴度板在所述条件下保温5天。在此期间，对照培养物经历至少4次细胞分裂。保温后，细胞用3.3%(重量/体积＝W/V)戊二醛水溶液固定，用水洗涤，并用0.05%(W/V)亚甲蓝水溶液染色。洗涤后，染料用3%(w/v)盐酸水溶液洗脱。之后，用光度计(Titertek multiskan)在665nm处测定每孔的光密度(OD)，该光密度与细胞数成正比例。用计算机系统运用下式计算诸IC50值IC50(OD665(试验)－OD665(起始))/(OD665(对照)－OD665(起始)) ×100
IC50值被定义为在保温时间终点时每孔的细胞数仅为对照培养物中细胞数的50%时活性成分的浓度。式Ⅰ化合物的IC50值例如在10-6～2.5×10-4M范围内。
因此式Ⅰ化合物特别适用于治疗对鸟氨酸脱羧酶的抑制产生应答的疾病状态，例如良性和恶性肿瘤。它们可引起肿瘤消退，并因此预防肿瘤细胞的扩散和微转移瘤的生长。而且它们可以例如用于治疗原生动物感染，例如锥虫病、症疾或由卡氏肺囊虫引起的肺炎。
在此式Ⅰ化合物可显示良好的耐受性。这可通过对大鼠进行试验来证明对于最初为130～250g的健康雄性患白化病的大鼠[TifRAIf(SPF)，CIBAAnimalProduction，Stein，Switzerland]给予压成丸的标准食物(NAFAGNo.890;NAFAG，Gossau，Switzerland)和任意给予水。通过单独人工喂养对大鼠再施用14天的每天20、60或200mg/kg式Ⅰ化合物在10ml水溶液中的溶液(浓度为0.20.6;和2.0%)。在给药期间可测定例如下列数据死亡率、临床症状、体重、食物消耗、水消耗、听觉、临床生物化学、血液学、尿分析、尸体剖检。结果所研究的式Ⅰ化合物每天在最多至200mg/kg的剂量时是可被耐受的，没有明显的毒性征兆。
可将式Ⅰ化合物本身或也可与其他药理活性物质结合用作选择性ODC抑制剂。可以想到的结合是下列的结合例如与(a)多胺生物合成的其他酶的抑制剂，例如S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶抑制剂，(b)蛋白激酶C抑制剂，(c)酪氨酸蛋白激酶抑制剂，(d)促细胞分裂剂(cytokines)，(e)负生长调节剂，(f)芳香酶(aromatase)抑制剂，(g)抗雌激素剂或(h)常规的抑制细胞生长的活性成分等的结合。
优选的式Ⅰ化合物为下述化合物及其盐其中基团A为C3-C6亚环烷基;
n为0或1;和m为0或1;
条件是a)氨基氧基基团H2N-O-与氨基基团-NH2之间的距离至少为3个并不大于4个碳原子，并且b)H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2两基团不键合到A的同一环碳原子上;式Ⅰ化合物以顺式或反式形式存在或以顺式或反式形式的混合物存在，优选以顺式或反式形式存在，特别是若存在不对称碳原子时以纯的对映体存在，特别优选以反式形式(若存在不对称碳原子时，以对映体混合物或特别是以纯的对映体)存在。
特别优选的式Ⅰ化合物为下述化合物及其盐其中基团A为C3-C6亚环烷基;
n为0及m为0或1;
条件是a)氨基氧基基团H2N-O-与氨基基团-NH2之间的距离至少为3个并不大于4个碳原子，并且b)H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2两个基团不键合到A的同一环碳原子上;式Ⅰ化合物以顺式或反式形式存在或以顺式或反式形式的混合物存在，优选以顺式或反式形式存在，特别是若存在不对称碳原子时以纯的对映体存在，特别优选以反式形式(若存在不对称碳原子时，以对映体混合物或特别是以纯对映体)存在。
更特别优选的式Ⅰ化合物为下述的化合物及其盐其中基团A为C3-C6亚环烷基;
n为0和m为0;
条件是a)氨基氧基基团H2N-O-与氨基基团-NH2之间距离至少为3个且不大于4个碳原子，并且b)H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2两个基团不键合到A的同一环碳原子上;式Ⅰ化合物以顺式或反式形式存在或以顺式或反式形式的混合物存在，优选以顺式或反式形式存在，特别是若存在不对称碳原子时以纯对映体存在，特别优选以反式形式(若存在不对称碳原子时，以对映体混合物或特别是以纯对映体)存在。
非常特别优选的式Ⅰ化合物为下述的化合物及其盐其中A为1，2-亚环丙基;1，3-亚环丁基;1，3-亚环戊基;或1，3-或1，4-亚环己基;
m为0或1;和n为0或1;
条件是氨基氧基基团H2N-O-与氨基基团-NH2之间的距离至少为3个且不大于4个碳原子;式Ⅰ化合物以顺式或反式形式存在或以顺式或反式形式的混合物存在，优选以顺式或反式形式存在，特别是若存在不对称碳原子时以纯对映体存在，特别优选以反式形式(若存在不对称碳原子时，以对映体混合物或特别是以纯对映体)存在。
尤其优选的式Ⅰ化合物为下述的化合物及其盐其中A为1，2-亚环丙基;1，3-亚环丁基;1，3-亚环戊基;或1，3-或1，4-亚环己基m为0或1;和n为0或1;
条件是a)氨基氧基基团H2N-O-与氨基基团-NH2之间的距离至少为3个且不大于4个碳原子，b)若A为1，2-亚环丙基或1，3-亚环丁基时则n为0或1，且c)若A是除1，2-亚环丙基或1，3-亚环丁基外其余的定义基团时，则n为0;式Ⅰ化合物以顺式或反式形式存在或以顺式或反式形式的混合物存在，优选以顺式或反式形式，特别是若存在不对称碳原子时以纯对映体存在，特别优选以反式形式(若存在不对称碳原子时，以对映体混合物或特别是以纯对映体)存在。
异常优选的式Ⅰ化合物为下述的化合物及其盐其中A为1，2-亚环丙基;1，3-亚环丁基;1，3-亚环戊基;或1，3-或1，4-亚环己基n为0和m为0或1;
条件是氨基氧基基团H2N-O-与氨基基团-NH2之间的距离至少为3个且不大于4个碳原子式Ⅰ化合物以顺式或反式形式存在或以顺式或反式形式的混合物存在，优选以顺式或反式形式，特别是若存在不对称碳原子时以纯对映体存在，特别优选以反式形式(若存在不对称碳原子时，以对映体混合物，或特别是以纯对映体)存在。
高度优选的式Ⅰ化合物为下述化合物及其盐其中A为1，4-亚环己基;
n为0;和m为0;
并且以顺式或反式形式，特别是以反式形式存在。
高度优选的式Ⅰ化合物还为下述化合物及其盐其中A为1，3-亚环丁基;
n为0;和m为0或1(特别是m为1);
并且以顺式或反式形式，特别是以反式形式存在。
高度优选的式Ⅰ化合物最后还是下述化合物及其盐其中A为1，2-亚环丙基;
n为0或1;和m为1;
并且以顺式或反式形式，特别是以反(cis)式形式存在。
在实施例中具体提及的式Ⅰ化合物及其盐，特别是可药用盐在所有化合物中是优选的。
新的式Ⅰ化合物及其盐可以通过本身已知的方法制备，例如通过下述方法制备，其中从式Ⅱ化合物或其盐(如果存在成盐基团的话)制备，然后除掉所存在的氨基保护基团，
其中A、n和m如式Ⅰ化合物中所定义，条件是ⅰ)基团-O-NX3X4与基团X1X2N-之间的距离至少为3个并不大于4个碳原子，并且ⅱ)X1X2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NX3X4两基团不键合到A的同一环碳原子上;并且其中X1、X2、X3和X4彼此独立地为氢或一价的氨基保护基团，也可以X1与X2、X3与X4、或X1与X2和X3与X4在每种情况下一起形成二价保护基团;并且如果必要其中不参与反应的其它官能团以被保护的形式存在，条件是基团X1、X2、X3和X4中至少一个为氨基保护基团;
并且，如果必要，将获得的式Ⅰ化合物转化为其它的式Ⅰ化合物，将获得的异构体混合物分离成异构体，和/或将获得的游离的式Ⅰ化合物转化为盐，或将获得的式Ⅰ化合物的盐转化为游离的式Ⅰ化合物或转化为其他盐。
优选的方法变体的详细描述除非另外指出，在下面起始原料和最终产物中A、m和n如在式Ⅰ化合物中所定义。对于式Ⅰ化合物的条件也相应地适用。
保护基团的消除对于起始原料中的官能团，特别是对于氨基和羟基的保护基团，包括特别是常用于例如肽化合物、先锋霉素、青霉素、核酸衍生物和糖类的合成中的常规保护基团。这些保护基团可以早已存在于上述中间体中，并应保护所讨论的官能团不产生有害的副反应。保护基团的特征是它们可以易于被引入和除掉，即不产生有害的副反应，并且它们不存在于最终产品中。
保护基团及其除去是本身已知的，并被描述于文献中，例如J.F.W.McOmie，“ProtectiveGroupsinOrganicChemistry”，PlenumPress，London，NewYork，1973，和T.W.Greene，“ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis”，Wiley，NewYork，1984。氨基保护基团可以是一价或二价的。
优选的一价的氨基保护基团X1、X2、X3和X4是酰基，优选低级链烷酰基，例如甲酰基、乙酰基或丙酰基，卤代低级链烷酰基，例如2-卤代乙酰基，特别是2-氯-、2-溴-、2-碘-、2，2，2-三氟-或2，2，2-三氯乙酰基;未取代的或取代(例如被卤素、低级烷氧基、低级烷氧羰基或硝基所取代)的苯甲酰基。例如苯甲酰基、4-氯苯甲酰基、4-甲氧基苯甲酰基、2-甲氧羰基苯甲酰基或4-硝基苯甲酰基;羧酸半酯的酰基，特别是具有一个或两个芳基(优选苯基、萘基或9-芴基)的芳基甲氧羰基，所述芳基为未被取代的或一取代或多取代的，例如被低级烷基(特别是叔低级烷基，例如叔丁基)、低级烷氧基(例如甲氧基)、羟基、卤素(例如氯)和/或硝基所取代，例如未被取代的或取代的苄氧羰基(例如4-硝基苄氧羰基)、或取代的二苯基甲氧羰基(例如二-(4-甲氧基苯基)-甲氧羰基);2-卤代低级烷氧羰基(例如2，2，2-三氯乙氧羰基、2-溴甲氧羰基或2-碘乙氧羰基);低级烷氧羰基，特别是在低级烷基的1-位有支链的或在1-或2-位被适当取代的低级烷氧羰基，特别是叔低级烷氧羰基(例如叔丁氧羰基)，或伯低级烷氧羰基(例如乙氧羰基);烷基亚胺甲基，例如低级烷基-亚胺甲基，例如叔丁基-亚胺甲基;磺基(-SO3H)，该磺基也可以盐形式存在，例如以碱金属或铵盐形式存在，例如作为钠盐或钾盐;或芳基甲基，例如一芳基甲基、二芳基甲基或特别是三芳基甲基，所述芳基特别是未取代的或取代的苯基，例如苄基、二苯基甲基或三苯基甲基(三苯甲游基)。还优选苯基-低级烷基-甲基，例如(R，S)-、(R)-或特别是1(S)-苯基乙基。还可能为三-低级烷基甲硅烷基，例如三甲基甲硅烷基。
特别优选的一价氨基保护基X1、X2、X3和X4为羧酸半酯的酰基，特别是低级烷氧羰基，例如叔丁氧羰基或乙氧羰基、苄氧羰基、所述羧酸半酯的酰基可为未取代的或取代的，例如如上所定义，例如4-硝基-苄氧羰基、二苯基甲氧羰基或2-卤代低级烷氧羰基，例如2，2，2-三氯乙氧羰基;三苯甲游基;低级链烷酰基，例如甲酰基和乙酰基、2-甲氧羰基-苯甲酰基或低级烷基亚胺甲基，特别是其中低级烷基在1-位有一个或二个支链的低级烷基亚胺甲基，例如叔丁基亚胺甲基。在所有上述基团中优选的保护基团X1或X2为低级烷氧羰基，例如叔丁氧羰基，或低级链烷酰基，例如乙酰基。
由基团X1与X2和/或X3与X4形成的优选的二价氨基保护基为一取代或二取代的亚甲基(在X3和X4的情况下导致肟衍生物)，例如1-低级烷氧基(特别是甲氧基或乙氧基)-低级亚烷基(例如-亚乙基或-1-亚正丁基)，例如＝C(CH3)(OC2H5)，1-低级烷基(特别是甲基或乙基)-低级亚烷基(特别是-1-亚乙基)，例如＝C(CH3)2，或1-苯基-低级亚烷基，例如＝CH-苯基，和优选通过二个羰基键合到待保护的氮原子上的烃基二羧酸基团(导致双酰基衍生物)，特别是邻苯二甲酰基或氢化的类似物，它们是未取代的或可被例如与上面对取代的苯甲酰基所定义的相同的取代基所取代，例如邻苯二甲酰基，它与待保护的氮原子一起形成1H-异吲哚-1，3-(2H)-二酮基团(邻苯二甲酰亚氨基)，或相应的二氢-、四氢-或六氢-邻苯二甲酰基，低级烷基-二羧酸基团，例如琥珀酸基团，低级链烯基二羧酸基团，例如马来酸基团，或C6-C12双环二羧酸基团，例如5-降冰片烯-2，3-二羧酸基团。
所述保护基团可按本发明方法以本身已知的方式除去，例如通过溶剂分解作用，特别是水解、醇解、酸解、氨解或肼解;通过还原反应，特别是氢解;通过光解或借助于酶催方法;可以同时消去所有存在的保护基团或逐步消去，对于部分去除保护基的中间体来讲可能以末纯化的或已纯化的形式进一步使用。所述保护基的消去反应描述于例如上述标准著作中。
根据保护基的性质的不同，优选逐步或同时按本身已知的方式除去氨基保护基，例如通过还原反应或溶剂分解作用，特别是水解(优选在酸性介质中)、醇解、酸解、氨解或肼解。低级烷氧羰基，例如叔丁氧羰基或三苯甲游基可以例如通过用酸处理除去，例如用无机酸如硫酸或氢卤酸如盐酸在有或无溶剂特别是水、醇(如甲醇或乙醇)或醚(如四氢呋喃或乙醚)的存在下，或用有机酸例如甲酸、乙酸或三氟乙酸在有或无水或有机溶剂例如二氯甲烷的存在下，优选在-20℃至最高至回流温度，特别是在0℃至室温或在回流温度下进行，伯低级烷氧羰基优选在碱性条件下，例如用羟基碱，例如碱金属氢氧化物，例如氢氧化钠或氢氧化钾，在水、含水溶剂例如醇/水混合物例如乙醇/水或甲醇/水中，或在醇例如甲醇或乙醇中，在对低级烷氧羰基的酸除去法中所定义的优选温度下除去。未取代或取代的苄氧羰基的除去可例如通过还原性氢解，即通过在适宜催化剂例如钯的存在下用氢气处理，或通过用在液氨中的钠、或通过酸解，特别是通过溴化氢/冰醋酸来实现。2-卤代低级烷氧羰基可以例如通过用适宜的还原剂，例如锌，在有机溶剂例如甲醇或乙酸水溶液的存在下进行处理而除去。低级烷基-亚胺甲基，例如叔丁基亚胺甲基优选通过碱，例如氢氧化物，特别是碱金属氢氧化物，例如氢氧化钾除去。烃基二羧酸基团，特别是邻苯二甲酰基可以通过例如肼解，例如用水合肼在有或无进一步的水(也可在反应过程中首先加入)和/或有机溶剂，如醇类(例如乙醇)或醚类(例如乙醚)的存在下，在优选温度为0℃至回流温度，例如在20～30℃或在回流温度下除去;通过氨解，例如用伯胺(例如低级烷基胺，例如丁胺)、环烷基胺(例如环己胺)或芳基胺(例如苯胺)除去;或通过铵盐，优选在极性溶剂(例如醇类，例如甲醇或乙醇)中，在有或无液体氯代烃类(例如二氯甲烷或氯仿)的存在下，或(若用氢氧化铵作碱)在水中，在优选温度为50℃至回流温度下，特别是在回流温度下除去;或通过酸，特别是无机酸(例如硫酸或氢卤酸，例如盐酸)，在水中在有或无有机溶剂(例如醇类，例如甲醇)的存在下，在优选温度为50℃至回流温度下，特别是在回流温度下除去。未取代或取代的苯甲酰基优选在碱性或酸性条件下，例如用氢氧化物碱(例如碱金属氢氧化物，例如氢氧化钠或氢氧化钾)，在水或含水溶剂(例如水/醇混合物，例如水/乙醇或水/甲醇)中，在优选温度为50℃至反应混合物的沸点温度之间，特别是在回流温度下除去，或在硫酸或氢卤酸(例如盐酸)的存在下，在水或含水溶剂(例如水/醇混合物，例如水/甲醇或水/乙醇)中，在如对在氢氧化物碱存在下的除去中所述的优选温度下除去。对于低级链烷酰基保护基团的除去来讲，优选使用碱性水解，例如通过羟基碱(例如碱金属氢氧化物，例如氢氧化钠或氢氧化钾)，在水或含水溶液中在优选温度为50℃至最高达回流温度之间，例如在回流温度下除去，或由酸性水解，例如用无机酸(例如氢卤酸或硫酸)，例如盐酸水溶液或硫酸水溶液，在加热的影响下，例如在上面最后所述温度下除去。磺基(包括以盐形式存在的磺基)优选通过在酸性条件下，特别是用硫酸或氢卤酸(例如盐酸)，在水或含水溶剂中，在优选温度为50℃至回流温度之间，例如在汽馏的情况下除去。1-低级烷基-低级亚烷基优选在酸性条件下，例如在硫酸或氢卤酸，例如盐酸的存在下，在水或含水溶剂中在优选温度为50℃至反应混合物的沸点温度之间，例如在回流下或汽馏下除去。1-低级烷氧基-低级亚烷基优选通过在酸(例如硫酸或氢卤酸，例如盐酸)的存在下，在有机溶剂(如醚类，例如乙醚)中，在水存在下在优选温度为0～50℃之间，特别是在室温下反应除去。苯基-低级烷基-甲基，例如1(S)-苯基乙基，可以通过氢化作用，例如用氢气在贵金属催化剂，例如钯的存在下，所述钯可键合到载体材料，如氧化铝、硅胶、硫酸钡、硫酸锶、碳酸钙或木炭上，在醇(例如低级链烷醇，例如乙醇)中，在温度为0℃至最高达回流温度之间，例如在约50℃，优选在常压下除去。
式Ⅱ起始原料可以用本身已知的方法制备，例如通过类似于在Houben-Weyl，MethodenderOrganischenChemie(有机化学方法)，VolumeX/1(1971)和VolumeE16a(1990)中所述的方法制备。
式Ⅱ化合物优选通过式Ⅲ起始原料或其盐与式Ⅳ的羟胺或其酸加成盐的反应来制备
其中A、n和m如式Ⅰ化合物中所定义，条件是a)基团-W1与基团X1X2N-之间的距离至少为3个并不大于4个碳原子，并且b)-(CH2)m-W1和X1X2N-(CH2)n-两基团不键合到A的同一环碳原子上;并且其中X1和X2彼此独立地为氢或一价氨基保护基，条件是基团X1和X2中至少一个为氨基保护基，或X1和X2也可一起形成二价的保护基团，并且W1为羟基或离去基团，
其中X3和X4如式Ⅱ化合物中所定义。
在式Ⅲ化合物中，基团W1为羟基或离去基团，优选衍生的羟基，例如被脂肪族或芳族取代基所取代的磺酰基，例如低级烷基磺酰氧基(例如甲磺酰氧基)，或芳基磺酰氧基(＝芳基-SO2-O-)，其中芳基具有6～14个碳原子(优选为苯基、萘基、茚基或2，3-二氢化茚基)并且是未被取代的或被最多达3个基团取代，例如被低级烷基(例如甲基)、低级烷氧基(例如甲氧基)、或卤素(例如氟、氯或溴)所取代，例如低级烷基苯基磺酰氧基(＝低级烷基苯基-SO2-O-)，例如对甲苯磺酰氧基，取代的低级烷基磺酰基，例如卤代低级烷基磺酰基，例如三氟甲磺酰基，或特别是，游离羟基或卤原子，例如氯、溴或碘。
若W1为羟基，即在式Ⅱ化合物的制备方法的优选实施方案中的情况下，所述反应优选通过分子内脱水反应进行。特别适宜的反应是Mitsunobu反应的变体(类似于Synthesis，682(1976)中的方法)，其中使式Ⅲ化合物与上面所定义的式Ⅳ的氨基保护的羟胺(其中所述氨基官能团优选被上述二价的氨基保护基团之一所保护，例如N-羟基邻苯二甲酰亚胺、N-羟基-5-降冰片烯-2，3-二羧酸酰亚胺或乙酰氧肟酸乙酯，特别是N-羟基邻苯二甲酰亚胺)和三芳基膦(其中芳基优选具有6～14个碳原子并为一环、二环或三环的芳基，例如苯基、萘基、茚基或2，3-二氢化茚基，例如三苯膦)及N，N′-偶氮二甲酸二酯(例如N，N′-偶氮二甲酸二-低级烷基酯，例如N，N′-偶氮二甲酸二乙酯)反应，该反应优选在非质子传递性溶剂(例如醚，例如环醚，例如四氢呋喃，或特别是芳族溶剂，例如苯、甲苯或二甲苯)中，在没有惰性气氛或有惰性气氛(例如氮气或氩气)中，并在优选温度为0℃～80℃之间，特别是10～40℃(例如在20～30℃)下进行。所述反应优选这样进行，即使转化发生在带有羟基的碳原子上。
所述反应导致在可获得的式Ⅱ化合物中的氨基氧基被二价氨基保护基，特别是通过两个羰基键合的烃基二羧酸基团所保护。
羟基W1还可被转化为低级烷氧羰基氨基氧基，这是通过氮宾插入反应通过使N-碳酸低级烷基酯-叠氮化物，例如碳酸乙酯-叠氮化物(H5C2-O-(C＝O)-N3)，在有机溶剂(例如酰胺类，例如二甲基甲酰胺，或醚类，例如二低级烷基醚类，例如乙醚)中，在温度为20℃至回流温度之间，优选在回流温度下发生反应而实现的。
若W1为上面所定义的衍生的羟基，特别是卤原子(例如溴原子)或芳基磺酰基(例如甲苯磺酰基)，则所述反应优选用式Ⅳ的氨基被保护的羟胺进行，其中X3和X4如上所述，合在一起为通过两个羰基键合的烃基二羧酸基团或单取代或二取代的亚甲基，特别是1-低级烷基-亚烷基或1-低级烷氧基-亚烷基;和其中X3为磺基和X4为磺基;或其中基团X3和X4之一为氢而另一个为酰基，如上面所定义，特别是低级烷氧羰基、苄氧羰基、2-卤代低级烷氧羰基、低级烷基-亚胺甲基、未取代的或取代的苯甲酰基、低级链烷酰基或磺基。
式Ⅲ化合物与式Ⅳ化合物的反应在此情况下优选按如下条件进行在有机溶剂(例如芳族溶剂，例如苯、甲苯或二甲苯)中;在醇类(如低级醇类，例如甲醇或乙醇)中;在极性溶剂(例如二-低级烷基-羧酸酰胺类，例如二甲基甲酰胺;二-低级烷基亚砜类，例如二甲亚砜;腈类，例如乙腈;酮类，例如二-低级烷基酮类，例如丙酮;或醚类，例如环醚类，例如四氢呋喃或二噁烷)中;在水中(如果必要在洗涤剂的存在下，例如Zephirol (＝氯化苄基-十二烷基-二甲基铵及其同系物，所述同系物含有其他除十二烷基外的烷基;Bayer，FederalRepublicofGermany);或在上述溶剂的混合物中;若反应会被水或质子传递性溶剂(例如由于水解或所述试剂的溶剂分解作用)极大地破坏，则优选在无水条件或无质子传递性溶剂中进行;在无或有碱性试剂或催化剂的存在下，特别是在下述碱的存在下，例如碳酸盐或碳酸氢盐，例如碱金属碳酸盐，例如碳酸钾或碳酸氢钾或碳酸钠或碳酸氢钠(如果必要在冠醚，例如二苯并-18-冠-6的存在下);碱金属氢化物，例如氢化钠;碱金属氨基化物，例如氨基化钠;碱金属醇化物，例如甲醇钠或乙醇钠(其也可通过加入碱金属到所讨论的醇中而就地制备);位阻胺类，例如叔胺类，例如三乙胺、N，N，N′，N′-四甲基-亚甲基二胺或1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(1，5-5);氢氧化物，例如碱金属氢氧化物;例如氢氧化钠或氢氧化钾，或者无碱存在下，通过直接使用式Ⅳ化合物的盐或就地制备它们(例如通过加入碱金属，例如钠或钾);在优选温度为0℃至回流温度之间或在蒸发下，特别是在20℃、40℃至80℃，在回流温度或在蒸发下;使用或不使用惰性气氛，例如氩气或氮气。本领域技术人员可以选择具体的适宜条件。
优选的制备式Ⅰ化合物的方法是使式Ⅲ和Ⅳ化合物反应生成式Ⅱ化合物，随后以连续的反应步骤消去所述方法中所定义的保护基团。
式Ⅲ和Ⅳ化合物是已知的，可从市场上买到或可按本身已知的方法制备。
式Ⅲ化合物可以例如通过类似于Houben-Weyl，MethodenderOrganischenChemie(有机化学方法)，VolumeX/1(1971)和VolumeE16a(1990)中所述方法制备。
更具体地讲，它们可按如下制备优选地，在一定条件下例如在上述标准著作中所述的条件或下述在制备式Ⅳ化合物(此时在起始化合物中使用X1和X2，而不是X3或X3′及X4或X4′)时用于引入保护基团的条件下，使式Ⅴ化合物通过与引入氨基保护基团X1和/或X2的试剂反应而将式Ⅴ化合物转化为其中W1为羟基的式Ⅲ化合物，
其中W＊1为羟基，A、n和m如对式Ⅰ化合物所定义，条件是a)基团-W＊1与基团H2N-之间的距离至少为3个并不大于4个碳原子，并且b)-(CH2)m-W＊1和H2N-(CH2)n-两基团不键合到A的同一环碳原子上(这些化合物相应于下述化合物，其中在式Ⅲ中，W1为羟基，X1和X2被氢原子转换，并且其余基团如对式Ⅲ化合物所定义)。
例如，酰基X1或X2可通过习用的氨基酰化方法及保护基团的引入方法来引入。
特别优选的制备是下述式Ⅲ化合物的制备其中基团X1和X2之一为氢而另一个为碳酸半酯的酰基，特别是低级烷氧羰基，例如叔丁氧羰基，或苄氧羰基，和其余基团如上所定义，从式Ⅴ化合物出发通过它与式Ⅵ的活化了的酸衍生物反应来进行制备，
其中Q为碳酸半酯的酰基，特别是低级烷氧羰基或苄氧羰基，同时，W2为反应性衍生的羟基，优选1-氮杂环烷基(azolido)，例如1-咪唑烷基(imidazolido)，卤素，例如氯或溴，或特别是与Q相同的通过氧杂键合的碳酸半酯的酰基(则式Ⅵ化合物为对称的酸酐，即连二碳酸二酯)。
式Ⅵ的活化的酸衍生物也可就地制备，例如通过在碳化二亚胺类(例如N，N′-二-低级烷基-或N，N′-二-C5-C7环烷基碳化二亚胺，例如二异丙基碳化二亚胺或N，N′-二环己基碳化二亚胺)的存在下，有利地是在活化催化剂[例如N-羟基琥珀酰亚胺或N-羟基苯并三唑(它为未取代的或被卤素、低级烷基或低级烷氧基所取代)]的存在下反应来制备。如果方便和必需的话，可以加入盐，例如碱金属卤化物，例如氯化钠。
所述反应优选在惰性溶剂(例如醚，例如脂族醚，例如乙醚，或环醚，例如四氢呋喃或二噁烷;或N，N-二-低级烷基-低级链烷羧酸酰胺，例如二甲基甲酰胺;或其混合物)中;也可有水存在，特别是若在使用环醚类或N，N-二-低级烷基-低级链烷羧酸酰胺类的情况下;在温度为0℃至回流温度之间，优选在15～35℃之间，例如在室温下进行。若必要可加入碱，例如叔胺类，例如三乙胺、二异丙基乙基胺、4-二甲氨基吡啶、N-甲基吗啉或吡啶。
在引入保护基团X1和X2之一或由这二者形成的二价保护基团之前，理想的是可以保护存在于式Ⅴ中的羟基W1。
羟基可以例如通过一价保护基团(例如酰基，例如未取代的或被卤素，例如氯取代的低级链烷酰基，例如乙酰基或2，2-二氯乙酰基)来保护，或特别地通过对被保护氨基所定义的碳酸半酯的酰基所保护。优选的羟基保护基团为例如2，2，2-三氯乙氧羰基、4-硝基苄氧羰基或二苯基甲氧羰基。羟基也可被下列基团保护三-低级烷基甲硅烷基，例如三甲基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、或特别是二甲基-(2，3-二甲基-2-丁基)甲硅烷基(即叔己基(thexyl)二甲基甲硅烷基);可易于被除去的酯化基团，例如烷基，例如叔低级烷基，例如叔丁基;氧杂-或硫杂-脂族或-环脂族烃基，特别是2-氧杂-或2-硫杂-脂族或-环脂族烃基，例如1-低级烷氧基-低级烷基或1-低级烷硫基-低级烷基，例如甲氧基甲基、1-甲氧基乙基、1-乙氧基乙基、甲硫基甲基、1-甲硫基乙基或1-乙硫基乙基;或具有5-7个环原子的2-氧杂-或2-硫杂环烷基，例如2-四氢呋喃基或2-四氢吡喃基;或相应的硫杂类似物;以及1-苯基-低级烷基，例如苄基、二苯基甲基或三苯甲游基，其中所述苯基可以为未取代的或例如被卤素(例如氯)、低级烷氧基(例如甲氧基)和/或硝基取代。被保护的羟基优选被低级烷氧羰基或三低级烷基甲硅烷基，特别是被三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、二甲基-(2，3-二甲基-2-叔丁基)甲硅烷基或叔丁氧羰基所保护。
如果必要，可通过本身已知的方法将羟基保护基团引入式Ⅴ的起始原料中。适宜的反应条件的实例例如在上述J.F.W.McOmie和T.W.Greene的标准著作中作了描述。
例如，通过使式Ⅴ化合物中的羟基与三-低级烷基甲硅烷基卤化物(例如三低级烷基甲硅烷基氯)在惰性溶剂(例如低级烷基氰化物，例如乙腈)中，在叔氮碱例如1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯的存在下，在温度为0至50℃，特别是在15至30℃之间反应，可将三低级烷基甲硅烷基保护基转化为被三低级烷基甲硅烷基保护的羟基。
在引入氨基保护基团X1和X2后，可从相应的式Ⅲ氨基被保护的化合物中除去所述羟基保护基团，而不同时消去所述氨基保护基团。
被适宜的酰基或被未取代的或取代的1-苯基-低级烷基所保护的羟基的释出类似于相应的被保护的氨基。被2，2-二氯乙酰基保护的羟基的释出例如可通过碱性水解释出，而被叔-低级烷基或被2-氧杂-或2-硫杂-脂族或-环脂族烃基所保护的羟基通过酸解，例如通过用无机酸或强羧酸，例如三氟乙酸处理来释出。
三低级烷基甲硅烷基，例如三甲基甲硅烷基或二甲基-(2，3-二甲基-2-丁基)甲硅烷基优选通过例如用醇类，例如甲醇或乙醇，在20℃至回流温度之间的温度下的溶剂分解作用除去。三低级烷基甲硅烷基也可以通过与无机酸，特别是氢氟酸或强羧酸，例如三氟乙酸的酸解，或通过与金属的氟化物盐或能释放氟离子的碱(例如氟化氢的酸加成盐及氮碱)或金属氟化物(例如碱金属氟化物，例如氟化钠或氟化钾)，在有或无大环多醚(“冠醚”)的存在下反应，或与有机季铵碱的氟化物(例如氟化四低级烷基铵或氟化三低级烷基芳基-低级烷基铵，例如氟化四乙基铵、氟化四丁基铵或氟化N-苄基-三甲基铵)，在非质子传递性、极性溶剂(例如醚类，例如四氢呋喃或二噁烷、二甲亚砜或N，N-二甲基乙酰胺)的存在下，在优选温度为约-20℃至50℃(例如在0℃至室温之间)反应除去。
作为羧基保护基团的2-卤代低级烷氧羰基可通过还原剂(例如还原性金属，例如锌;还原性金属盐，例如铬(Ⅱ)盐)除去，或通过硫化合物(例如连二亚硫酸钠或，优选，硫化钠和二硫化碳)除去。
如上所定义，作为羟基保护基团的三低级烷基甲硅烷基的引入和消去是特别优选的，尤其是若碳酸半酯基团，特别是低级烷氧羰基作为氨基保护基团X1或X2存在时。
其中W1为离去基团的式Ⅲ化合物可以例如从其中W1为羟基的式Ⅲ化合物出发通过它与相应的亲核试剂反应来制备，所述亲核试剂的实例是例如磺酰卤，例如磺酰溴或磺酰氯，它们可被脂族或芳族取代基所取代，例如低级链烷基磺酰卤(例如甲磺酰氯)或芳基磺酰卤(例如芳基-SO2-Cl;Br)，(其中芳基具有6～14个碳原子，例如为苯基、萘基、茚基或2，3-二氢化茚基，并且可为未取代的或被最多达3个基团所取代，例如被低级烷基(例如甲基)、低级烷氧基(例如甲氧基)或卤素(例如氟、氯或溴)所取代)，例如低级烷基苯基磺酰氯(即低级烷基苯基-SO2-Cl)，例如对甲苯磺酰氯，取代的低级链烷磺酰卤，例如卤代低级链烷磺酰氯(例如三氟甲磺酰氯);或氢卤酸(特别是盐酸、氢溴酸或氢碘酸)。如果必要在适宜溶剂(例如卤代烃，例如氯仿、二氯甲烷或二氯乙烷)中，在无(特别是在使用氢卤酸时)或有叔氮碱(例如三低级烷基胺，例如三乙胺或乙基二异丙基胺、吡啶或二甲氨基吡啶)的存在下，在温度为-78℃于回流温度之间，特别是从-5°至30℃之间进行反应。所述条件优选适用于引入除卤素以外的离去基团W1。卤素基团可优选通过使其中W1为被脂族或芳族取代基所取代的磺酰氧基的相应化合物与例如卤化物(特别是金属卤化物，例如金属氯化物、金属溴化物或金属碘化物，例如碱金属氯化物、碱金属溴化物或碱金属碘化物或碱土金属氯化物、碱土金属溴化物或碱土金属碘化物)，在适宜溶剂(例如二低级烷基酮类，例如丙酮)中，在优选温度为从-20℃至最高达回流温度之间(例如在10～30℃)反应而引入，如果必要，在有铜的存在下进行，例如在使用碘化物的情况下，反应在少量或粉末形式的铜的存在下进行。
也可以直接制备被氨基保护基团X1和/或X2所保护的式Ⅲ化合物，而不必通过具有游离氨基的式Ⅴ中间体来进行。
因此，式Ⅲ化合物(其中m为1和其中基团X1和X2之一为氢，而另一个为氢或对式Ⅱ化合物所定义的一价氨基保护基团，和n为0或1，条件是对于式Ⅲ化合物所定义的条件)，也可以按下法制备，其中使式Ⅶ化合物发生反应以还原该酰胺键， 其中Y为上面对X1或X2所定义的一价氨基保护基，特别是低级烷氧羰基，A如式Ⅰ化合物中所定义，和
n′为0或1，条件是a)借助于A和-(C＝O)-(N-Y)-[(CH2)n′]-所形成的环具有4或5个环原子并且基团-(C＝O)-(N-Y)-[(CH2)n′]-中的两条键不是来自A的同一碳原子。
所述发生同时开环的还原反应优选使用适宜的复合氢化物，例如在醚类(例如乙醚)中的氢化锂铝、在醇类(优选)(例如甲醇或乙醇)中的硼氢化钠、或在醚类(例如四氢呋喃)中的二异戊基硼烷(双(3-甲基-丁-1-基)甲硼烷)，在温度为-20℃至50℃之间，特别是-5至25℃之间进行。因为Y为对在上述对式Ⅱ化合物所定义的X1或X2所定义，特别是低级烷氧羰基，所以其中W1为羟基的相应的式Ⅲ化合物可以在此直接获得。
其中A中的诸键优选为顺式构型;所以可获得相应的顺式式Ⅲ化合物。
式Ⅶ化合物是已知的或可以按本身已知的方法制备。
例如，顺式的式Ⅶ化合物其中Y为作为氨基保护基团的碳酸半酯的酰基，A为1，3-亚环戊基和n′为0，可以通过使其中Y被氢原子所置换的相应的中间体(名称为2-氮杂二环[2.2.1]庚-3-酮)通过用下面所定义的式Ⅵ化合物在4-二甲氨基吡啶的存在下，在类似于上面对式Ⅵ化合物的反应所定义的条件下酰化来制备，优选(当Y＝叔低级烷氧羰基时，例如叔丁氧羰基)用连二碳酸二叔低级烷基酯(例如连二碳酸二叔丁酯)在催化量的4-二甲氨基吡啶的存在下在有机溶剂(例如醚，例如四氢呋喃)中酰化。2-氮杂二环[2.2.1]庚-3-酮例如可通过还原2-氮杂二环[2.2.1]庚-5-烯-3-酮中的双键获得，特别是可通过在催化剂，例如特别是键合到载体(如木炭)上的钯、铂或钌的存在下，若必要在加压条件下，例如在1～10巴压力下，在适宜氢化装置(例如帕尔装置)中，在0至50℃，特别是15至30℃之间的温度下，在溶剂(例如醚，例如乙酸乙酯)中氢化来制备。2-氮杂二环[2.2.1]庚-5-烯-3-酮例如可通过使3-甲苯磺酰基-2-氮杂二环[2.2.1]庚-2，5-二烯在低级链烷酸(例如乙酸)中，在0至40℃，特别是15至30℃之间的温度下反应来获得;3-甲苯磺酰基-2-氮杂二环[2.2.1]庚-2，5-二烯例如可通过使甲苯磺酰氰在0～50℃，特别是15～30℃温度下环加成到环戊二烯(该后者用作溶剂)来获得。
此外式Ⅶ化合物可以类似地通过甲苯磺酰氰与双键的热力学环加成作用或光化学环加成作用并类似地继续如对3-甲苯磺酰基-2-氮杂二环[2.2.1]庚-2，5-二烯所述的合成来制备。
由式Ⅷ化合物其中A＊为具有一个或多个不饱和键的3～6元环烃基(亚环丁二烯基除外)，Y′为上面对X1或X2所定义的一价氨基保护基(特别是低级链烷酰基，例如乙酰基)、或氢，
并且其它定义及条件类似于式Ⅰ化合物的定义和条件，条件是a)基团-OH与基团Y′-HN-之间的距离至少为3个并不大于4个碳原子，并且b)-(CH2)m-OH和Y′-NH-(CH2)n-两个基团不键合到A＊的同一环碳原子上，通过还原环A＊中的不饱和键也可制备相应的式Ⅲ化合物(Y′＝氨基保护基团)或式Ⅴ化合物(Y′＝氢)。不饱和键优选为双键且A＊优选选自亚苯基、亚环戊烯基、亚环戊二烯基、亚环丁烯基和亚环丙烯基，特别是亚苯基。
所述反应优选通过在适宜催化剂，特别是碱性重金属或其氧化物，例如镍或钴(优选镍或阮内镍在醇类例如乙醇中，或特别是在碱性水溶液例如碱金属氢氧化物溶液，例如氢氧化钠水溶液中，在150～190℃温度下在加压条件下，例如在50～200巴条件下);或贵金属或贵金属氧化物，例如铂、氧化铂、钯、氧化钯或钌(优选在选自醇类，例如甲基或乙醇，酯类，例如乙酸乙酯，醚类，例如二噁烷和水的适宜溶剂中，或在适宜的所述溶剂的混合物中;在有或无低级链烷酸，例如乙酸的存在下，或在碱性条件下，也可能使上述催化剂键合到载体材料上，例如木炭、硫酸钡、硫酸锶、碳酸钙、氧化铝或硅胶上;在适宜温度下，特别是在0至50℃之间，例如在室温下;如果必要在加压下，例如在约1～20巴条件下)的存在下氢化来进行。
类似于式Ⅷ化合物的氢化反应，也可以氢化其中-NH-Y′被硝基所置换的类似化合物;然后所述氢化反应优选用阮内镍在50～80巴的压力下在150～190℃的温度下在碱性水溶液，例如氢氧化钠溶液中进行。相应的式Ⅴ化合物可直接获得。
式Ⅷ化合物是已知的或可通过本身已知的方法制备，也正如其中-NH-Y′被硝基所置换的其类似物那样。
式Ⅳ化合物可以例如制备如下若X3或X4为一价氨基保护基，例如酰基，如上所定义，则通过与产生酰基的式Ⅸ或Ⅹ的酸或与其活化衍生物的反应可以将游离的羟胺或其盐转化为N-保护形式，
其中X3′和X4′为如上所定义的作为氨基保护基团的酰基， 上述活化的衍生物也可首先通过氨基的酰化反应和保护基团的引入反应的习用方法，例如在上述或下述标准著作中所述的方法就地生成。如果X3′或X4′为，例如，低级链烷酰基或未取代或取代的苯甲酰基，则其中所述式Ⅸ或Ⅹ中的羟基被活化羟基所置换的活化衍生物可以为例如酰氧基(其中酰基为不与或优选与X3′或X4′相同的基团)、叠氮基、1-氮杂环烷基(azolido)[例如1-咪唑烷基(imidazolido)〕、卤素(例如氯或溴)、或硝基苯氧基;例如相应的酸酐、酰基叠氮或酰基卤，特别是相应的酰氯。活化的酸衍生物的制备可就地例如通过在碳化二亚胺类，例如N，N′-二低级烷基-或N，N′-二C5-C7环烷基-碳化二亚胺(例如二异丙基碳化二亚胺或N，N′-二环己基碳二亚胺)的存在下，有利地是在活化催化剂(例如N-羟基琥珀酰亚胺，或未取代的或被卤素、低级烷基或低级烷氧基取代的N-羟基苯并三唑)的存在下反应进行。若必要可加入碱，例如叔胺类，例如三乙胺、二异丙基乙基胺、二甲氨基吡啶、N-甲基吗啉或吡啶。若X3′或X4′为碳酸半酯基团，则X3′或X4′中的羟基优选作为上述所定义的活化的羟基存在于式Ⅸ或Ⅹ化合物中;特别是，然后所述羟基被卤素(例如氯或溴)或氮杂环基(例如咪唑基)所置换。
烷基亚胺甲基X3或X4是例如通过类似于由Meyers，A.等人描述于J.Am.Chem.Soc.106，3270(1984)中的方法而被引入羟胺中的;所述叔丁基亚胺甲基例如通过使游离的羟胺与N，N-二甲基-N′-叔丁基甲脒在催化量的硫酸铵的存在下在甲苯中在回流温度下反应，或用另一种方式通过使叔丁基甲酰胺与Et3O+BF4-在二氯甲烷中在室温下反应，加入所述氨基化合物并在室温至40℃的温度下进一步反应而引入的。
胲基二磺酸(在式Ⅳ化合物中X3和X4为磺基)，并且特别是其碱土金属或铵盐可例如通过使碱金属亚硝酸盐的浓溶液与碱金属硫酸氢盐，或相应的铵盐，及二氧化硫反应来制备的。
在式Ⅳ化合物中的芳基甲基X3和/或X4可例如通过使羟胺与芳基甲基卤化物，特别是芳基甲基氯化物或溴化物反应，伴有卤原子的亲核置换，优选通过在叔胺(例如三乙胺或吡啶)存在下，在非质子传递溶剂(例如醚，例如四氢呋喃或二噁烷;或碳酸酰胺，例如二低级烷基甲酰胺，例如二甲基甲酰胺)中反应而引入。
如果式Ⅳ化合物中的X3和X4一起为二价氨基保护基团，则下列制备方法优选用于这些起始化合物的制备式Ⅳa的肟衍生物其中Xⅲ为如上对于式Ⅱ化合物中X3和X4所定义的二价的一取代的或二取代的亚甲基，可以由相应的醛或酮中间体(其中式Ⅳa中的＝N-OH被双键氧(＝O)所置换)在下述条件下反应而制备在醛类或酮类与氨基化合物、羟胺[优选以盐的形式，特别是与无机酸例如氢卤酸、例如盐酸的盐，与硫酸的盐，例如以硫酸盐或硫酸氢盐的形式，与磷酸的盐，例如作为磷酸盐、磷酸氢盐或磷酸二氢盐，与有机酸，例如可在低级烷基被卤素，例如氟、氯或碘所取代的，或优选为未取代的低级链烷酸，例如乙酸、氯乙酸、二氯乙酸或三氟-或三氯乙酸，磺酸，例如低级链烷磺酸，例如甲磺酸或乙磺酸或乙二磺酸的盐，或与芳族磺酸，例如苯磺酸或萘磺酸或萘-1，5-二磺酸的盐，或以复盐的形式，例如Zn(NH2OH)2Cl2(Crismers试剂)]反应的习用条件下;在与相应的醛或酮在水、含水溶剂混合物(例如水与醇类，例如甲醇或乙醇、二低级烷基亚砜类，例如二甲亚砜、或二低级烷基-低级链烷酰胺类，例如二甲基甲酰胺的混合物)中，或于有机溶剂，例如上面最后所述化合物，或足够惰性的腈类，例如乙腈、其混合物或液氨中，优选在含水的醇溶剂中，例如在甲醇/水或乙醇/水中;在-78℃至回流温度，优选-30～100℃，特别5～90℃，例如在约80℃的温度下;在1～10，000巴的压力，优选若使用羟胺盐时在常压下;在无碱的存在下或优选，在使用羟胺的酸式盐的情况下，用碱，特别是羟基碱，例如碱金属氢氧化物，例如氢氧化钠或氢氧化钾，用碳酸盐或碳酸氢盐，特别是碱金属碳酸盐或碱金属碳酸氢盐或碱土金属碳酸盐或碱土金属碳酸氢盐;例如碳酸钠或碳酸钾或碳酸氢钠或碳酸氢钾，用弱有机酸的盐，特别是低级链烷羧酸的碱金属盐，例如乙酸钠或乙酸钾，用有机氮碱，特别是位阻(仲或叔)胺类，例如吡咯烷，或吡啶，或用阴离子交换器，例如Amberlite IR-4B缓冲所述酸，在特别优选有碱金属碳酸盐的存在下进行反应。另一方面，其中Xⅲ为1-低级烷氧基-低级亚烷基的式Ⅳa化合物可例如用类似于通过Chem.Abstr.73，25359和66520(1970)获得的方法来得到。
式Ⅳa的烃基二羧酸衍生物，其中Xⅲ为上述对式Ⅱ化合物中X3和X4所定义的通过两个羰基键合的烃基二羧酸基，可以例如，通过羟胺与相应的可提供所述烃基二羰基的游离羟基二羧酸类，或其活性衍生物的反应来制备。活性衍生物为，例如，相应的二羧酸酐、二羧酰基二叠氮或二羧酰二卤，特别是相应的二羧酰二氯、或相应的内二羧酸酐(通过氧杂键合的两个羰基)，或就地生成的活性衍生物，例如按上述对式Ⅸ和Ⅹ化合物在与羟胺反应中所述方法制备。所述反应优选在类似于上面对式Ⅸ和Ⅹ化合物的反应所述条件下进行。所述相应的二羧酸二酯类，例如二羧酸二低级烷基酯，例如二羧酸二甲酯或二乙酯与羟胺的氨基转移作用也可能发生。
式Ⅴ化合物可从市场上买到，是已知的或可按本身已知的方法制备。
例如，式Ⅴ化合物可以由其中Y1被氢所置换而其它基团如上所定义的式Ⅷ化合物开始通过上述方法来制备，或通过其中Y被氢原子所置换的上面所定义的式Ⅶ化合物的类似物，在对于式Ⅶ化合物中酰胺键的还原和解离所述条件下的反应制备。
式Ⅴ化合物，其中A为C3-C5亚环烷基(特别是1，3-亚环丁基)，m为1和n为0或1，特别是0;
条件是a)基团-W＊1(羟基)与基团H2N-之间的距离至少为3个并不大于4个碳原子，并且b)-(CH2)m-W＊1与H2N-(CH2)n-两基团不键合到A的同一环碳原子上，可以特别由式Ⅺ化合物，
其中A＊＊为C3-C6亚环烷基，特别是亚环丁-1-基-3-基，n″为0或1，特别是0，和X＊1为叔低级烷氧羰基，例如叔丁氧羰基，或苯基-1-低级烷氧羰基，例如苄氧羰基，条件是a)基团H2C＝(亚甲基)与基团X＊1HN-之间的距离至少为2个并不大于3个碳原子，并且b)H2C＝与X＊1HN-[(CH2)n″]-两基团不键合到A的同一环碳原子上，通过优选与BH3在醚(例如四氢呋喃)，与硼氢化钠和醚合三氟化硼在二乙二醇二甲醚中，或与硼氢化钠在低级链烷酸(例如乙酸)的存在下，在醚(例如四氢呋喃)中，在0～40℃的温度下，特别是在0℃至室温之间的温度下的硼氢化反应，和随后的优选与氢氧化铵或碱金属氢氧化物，例如氢氧化钠或氢氧化钾，及过氧化氢的水溶液在0～50℃，特别是在15～30℃之间的温度下的碱性氧化反应来制备，所述亚甲基被转化成羟甲基并且X＊1同时被除去。在优选的实施方案中，X＊1不被除去，并且得到式Ⅲ化合物，其中X1被上面最后所定义的基团X＊1所置换且X2被氢所置换，而其他基团如对式Ⅲ化合物所定义。
其中所述基团如上所定义，特别是A＊＊为亚环丁-1-基-3-基及n″为0或1，特别是0，的式Ⅺ化合物，例如可由式Ⅻ的羧酸其中A＊＊为C3-C6亚环烷基，特别是亚环丁-1-基-3-基，和n为0或1，特别是0，条件是a)基团H2C＝(亚甲基)与基团-COOH之间的距离至少为2个并不大于3个碳原子，并且b)H2C＝与HOOC-[(CH2)n″]-两基团不键合到A的同一碳原子上，通过将式Ⅻ的羧酸，或其活化的酸衍生物，例如酰基卤或与低级链烷酸(例如乙酸)的酸酐(它可用已知方法制备)，用叠氮化物盐(例如碱金属叠氮化物，例如叠氮化钠)转化为所述酰基叠氮并使之(优选在回流条件下)在叔低级链烷醇(例如叔丁醇)或苯基-1-低级链烷醇(例如苄醇)中反应;优选伴随通过与有机磷酰基叠氮，例如二苯基磷酰基叠氮的叠氮化物，在上述醇中在回流条件下反应就地直接制备酰基叠氮;同时伴随基团X＊1的重排和形成(类似于库尔提斯降解反应)来制备。
式Ⅻ化合物是已知的或可通过本身已知的方法制备，例如通过类似于Cripps，H.N.等人在J.Am.Chem.Soc.81，2723-28(1959)中的方法来制备。
式Ⅴ化合物其中W＊1为羟基A为C3-C6亚环烷基，特别是1，3-亚环丁基，n为1和m为0，条件如上所述，也可以由式ⅩⅢ的酮基-腈化合物N≡C-(A＊＊＊)＝O(ⅩⅢ)其中A＊＊＊为C3-C6亚环烷基，例如亚环丁-1-基-3-基，条件是a)氰基与氧代基(＝O)之间的距离至少为2个并不大于3个碳原子，并且b)氧代和N≡C-两基团不键合到A的同一环碳原子上;
通过同时或分步还原所述氰基和所述酮基，例如首先用适宜的复合氢化物，例如氢化锂铝(也可同时还原所述氰基)、LiAlH[OC(CH3)3]3或双(3-甲基-丁-2-基)甲硼烷(disiamylborane)，在醚(例如乙醚或四氢呋喃)中;或特别是用硼氢化钠或氰基硼氢化钠，若必要在LiCl的存在下，在水或醇(例如低级链烷醇或低级链烷二醇，例如甲醇、乙醇或乙二醇)中;在0～50℃，例如25～40℃之间的温度下还原所述酮基;并且(若必要)，例如通过在适宜的重金属催化剂，特别是院内镍的存在下，在醇，例如甲醇或乙醇中，优选在氨，例如1～15%(重量)氨的存在下，在0～50℃，例如25～40℃的温度下的氢化反应随后还原所述氰基来制备。
式ⅩⅢ的酮基腈类是已知的或可以通过本身已知的方法制备。例如，3-氧代环丁烷基腈可以由3-亚甲基环丁烷基腈在水和醚(例如乙醚)的混合物中，在0～30℃，特别是在5～10℃的温度下，通过加入锇酸并缓慢加入碱金属偏高碘酸盐，例如偏高碘酸钠，优选在惰性气氛，例如氮气氛下反应，过滤，用不能与水混合的有机溶剂，例如卤代低级烷烃，例如氯仿洗涤，蒸发有机相，将残余物溶于醚，例如四氢呋喃中，加入汞和碳酸银，使其回流并避光，蒸发掉醚并在油泵抽真空条件下蒸馏相应的式ⅩⅢ产物来制得。3-亚甲基环丁烷基腈可以由丙二烯与丙烯腈的环加成反应获得(Cripp，H.N.等人，于J.Am.Chem.Soc.81，2723-28(1959)中)。
式Ⅴ化合物其中A如对式Ⅰ化合物所定义，特别是1，2-亚环丙基，m为1，n为1和W＊1为羟基，条件如上所述，
可以通过例如下述方法制备其中将式ⅩⅠⅤ的氰基羧酸酯N≡C-〔(CH2)n-1〕-A-〔(CH2)m-1〕-COOG(ⅩⅠⅤ)其中A如上所定义和G为低级烷基，例如甲基或乙基，芳基，例如苯基、萘基或芴-9-基或芳基-低级烷基，例如苯基-、萘基-或芴-9-基甲基和n和m如上最后所定义，条件是所述氰基与基团-COOG之间的距离为2个碳原子， 通过同时或分步还原所述氰基和所述酮基而转化为相应的式Ⅴ化合物，例如用适宜的复合氢化物，例如氢化锂铝(优选;也可同时还原所述氰基)或LiAlH[OC(CH3)3]3在醚，例如乙醚或四氢呋喃中;或用硼氢化钠在LiCl存在下在水或醇，例如低级链烷醇或低级链烷二醇，例如甲醇、乙醇或乙二醇中;在0℃至回流温度之间，特别是在回流温度下;或用碱金属，例如钠，在醇，例如乙醇中首先还原所述酯基(-COOG);并且(若必要)随后，例如通过在适宜的重金属催化剂，特别是阮内镍的存在下，在醇，例如甲醇或乙醇中，在0～50℃，例如25～40℃的温度下的氢化反应来还原所述氰基;或者一次性地在适宜催化剂，特别是碱性重金属或其氧化物，例如镍或钴(优选镍或阮内镍在醇类，例如乙醇中，在150～190℃的温度下在加压，例如在50～200巴下)，或贵金属或贵金属氧化物，例如铂、氧化铂、钯、氧化钯或钌(优选在选自醇类，例如甲醇或乙醇，酯类，例如乙酸乙酯，及醚类，例如二噁烷的适宜溶剂，或上述溶剂的适宜混合物中;优选在过量氨，例如1～15%(重量)氨的存在下，也可将所述催化剂键合到适宜载体材料，例如木炭、硫酸钡或硫酸锶、碳酸钙、氧化铝或硅胶上;在适宜的温度，例如0～50℃之间，例如在室温下;若必要在加压，例如在1～20巴条件下)的存在下，将所述酯基还原为所述羟甲基并将所述氰基还原为所述氨甲基。
式ⅩⅠⅤ化合物为已知的或可用本身已知的方法制备。例如，式ⅩⅠⅤ化合物其中A为1，2-亚环丙基和G为乙基(2-氰基环丙烷羧酸乙酯)，可以通过优选在升温，特别是在回流条件下使重氮基乙酸乙酯(N2CH-CO-OEt)与丙烯腈(例如以相对于重氮基乙酸乙酯来讲为2～3倍摩尔量)发生环加成反应，蒸馏出过量丙烯腈并随后进一步加热至温度为120～170℃来制备。
其他起始原料是可从市场上买到的，是已知的或可用本身已知的方法制备。
其他方法通过已定义的方法获得的并具有成盐的性质的游离的式Ⅰ化合物可用本身已知的方式转化为其盐;因为这些化合物是碱性化合物，所以这可通过用酸或其适宜衍生物处理来进行。
此外，式Ⅱ化合物可以由用于纯化目的[例如借助于具有可以纯净形式(例如以(S)或(R)构型)存在的不对称中心的保护基团来用于分离被保护的非对映体或对映体]的式Ⅰ化合物制备。然后通过用上述方法除去保护基团来进行纯化的式Ⅰ化合物的释出。
可以几种异构体形式存在的式Ⅰ化合物的异构体混合物可通过本身已知的方法分离成各个异构体。
顺式或反式异构体或这两者可通过习用方法从顺式和反式异构体的混合物中以纯净的形式获得。用于除去一种异构体或用于分离这两种异构体的适宜方法是，例如，色谱方法，例如在硅胶上的吸附色谱法，用有机溶剂或溶剂混合物洗脱，例如烃类，例如液体低级烷烃，例如戊烷、己烷或庚烷，或酯类，例如低级烷基-低级链烷酸酯，例如乙酸乙酯，或其混合物，如果必要多效分配于不混溶溶剂中，例如水和不能与水混溶的有机溶剂，例如卤代烃，例如二氯甲烷或氯仿中，或分级结晶法，例如由在有机溶剂，例如芳族化合物，例如苯、甲苯或二甲苯中的溶液进行分级结晶，如果必要加入纯的顺式或反式异构体晶种。
对映体混合物例如可被分离成各个对映体，优选通过与旋光纯的成盐试剂，例如(S，S)-或(R，R)-酒石酸、(R)-或(S)-乳酸、1(R)-或1(S)-樟脑磺酸或(L)-谷氨酸形成盐，并分离如此获得的非对映体混合物，例如通过分级结晶和/或通过机械方法获得对映体分离;通过引入具有不对称中心的旋光活性保护基团(例如(S)-1-苯基乙基)，并分离所得非对映体，例如通过分级结晶，优选用色谱法，例如通过分配色谱法或吸附色谱法，或通过分配于多相溶剂混合物中进行分离，并按上述方法除去所述保护基团;或通过在旋光柱材料，例如旋光石英、纤维素、旋光离子交换剂、共价键合到氨基丙基-硅胶上的D-二硝基苯甲酰基苯基甘氨酸(Pirkle相)、键合到硅胶上的D-3，5-二硝基苯甲酰基苯基甘氨酸，或共价键合到硅胶上的对映体纯的氨基酸，例如(L)-缬氨酸或(L)-脯氨酸，如果方便和必要，也以铜复合物的形式的色谱法进行对映体混合物的分离。
优选直接应用这样的起始原料，即它可选择性地制备式Ⅰ化合物的各个异构体，例如纯的顺式或反式异构体或对映体纯的起始原料，特别是式Ⅱ化合物。
游离的式Ⅰ化合物的盐可用本身已知的方式制备，例如通过用酸(例如无机酸，例如盐酸或硫酸;有机羧酸，例如己二酸，或有机磺酸，例如苯磺酸)，在适宜溶剂(例如水、醇、例如甲醇，醚，例如乙醚，或其混合物)中处理，或用适宜的阴离子交换剂试剂处理来制备，该阴离子交换剂试剂例如带有相应酸的阴离子电荷。所述盐可以用常规方式转化成游离化合物，例如通过用适宜的碱性试剂，例如在自由溶液中的羟基碱，例如碱金属氢氧化物，或例如带有氢氧根的阴离子交换剂处理，例如通过色谱法或通过分批方法进行。
按如上所述方法，式Ⅰ化合物的盐的转化可以通过所述游离化合物的制备并随后将其转化成酸加成盐来进行。
也可用第二种新酸将一种式Ⅰ化合物的酸加成盐直接转化成式Ⅰ化合物的另一种酸加成盐和另一种酸。这种转化作用优选如下进行a)通过将最初的酸加成盐在自由溶液中在适量，例如过量的新酸的存在下反应，或b)在带有新酸的阴离子的离子交换剂上进行。
凝胶色谱法盐转化方法也可用于所有反应中，该反应用于将式Ⅰ碱的酸加成盐转化成另一种酸加成盐或转化成游离化合物或游离碱及相应的酸。
在游离化合物或带有二价负电荷酸的盐(例如硫酸盐)的情况下，特别是，若因此可得到晶状的式Ⅰ化合物的盐时，优选将游离化合物或一种盐转化成另一种盐(例如卤化物，例如氯化物)。
反应条件的一般定义作为以游离形式和以盐形式存在的带有成盐基团的起始原料之间密切联系的结果和作为以游离形式和以盐形式存在的式Ⅰ化合物之间密切联系的结果，在方便和必要时，上述或下述的相应的游离化合物或其盐还可理解为其具有起始原料或式Ⅰ化合物的相应的盐或游离化合物的意义。
若在起始原料中存在酸基，例如磺基或羧基，可以存在例如与碱形成的盐，例如金属盐，例如碱金属盐或碱土金属盐，例如钠盐、钾盐、镁盐或钙盐，铵盐和与氮碱形成的盐，例如季氮化合物，例如四低级烷基铵化合物等。如果存在碱性基团，例如，可存在类似于在式Ⅰ化合物的盐的定义中所述的酸加成盐。
根据所述方法和反应条件的不同，可以游离形式或以盐形式获得带有其成盐碱性基团的本发明化合物。
所述化合物，包括其盐还可以以其水合物的形式获得，或者其晶体可以包括，例如，用于所述结晶的溶剂。从所得化合物也可首先生成水合物，例如通过使其在空气中放置。
不想让其参与反应的官能基团，特别是氨基和羟基，可存在于起始原料中，若必要，以被保护的形式存在。保护基团，特别是氨基保护基团和羟基保护基团如果必要可通过本身已知的方法引入起始原料(例如式Ⅲ化合物)中。适宜的反应条件的实例描述于，例如下列标准著作中J.F.W.McOmie，“ProtectiveGroupsinOrgan.icChemistry”，PlenumPress，London，NewYork，1973和T.W.Greene，“ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis”，Wiley，NewYork，1984。只是在化学上可能的范围内待保护的氨基可以用两个保护基团同时保护。优选，在被保护的氨基中只存在一个一价或只存在一个二价保护基团。
可获得的被保护的中间体可以被释出或可以在不除去保护基团的条件下进一步使用。此时所用保护基团的引入、其性质及其消除均类似于上述或下述内容。如果在保护基团中存在不对称中心并且该基团是对映体纯的，例如以(S)-苯基-低级烷基-甲基，例如1(S)-苯基-乙基形式存在，则可以使用中间体的相应非对映体，以便通过分离这些非对映体，例如通过硅胶色谱法，使用有机溶剂混合物，例如(苯或甲苯)/(乙醚或二噁烷)/(二低级烷基酮，例如丙酮)来获得对映体纯的中间体或对映体纯的式Ⅰ化合物。
如果必要，羟基，例如羟基W1，可以被保护的形式存在;象上述氨基保护基团那样，所述相应的保护基团可以是一价或二价的(在后一种情况下，羟基和氨基还可以一起被保护，即，例如，氨基保护基团X1、X2、X3和X4中的一个或两个各自均可用其另一个键保护羟基)。
羟基可以例如被一价的保护基团，例如酰基(例如可为未取代的或被卤素，例如氯取代的低级链烷酰基，例如乙酰基或2，2-二氯乙酰基)，或特别是被对保护的氨基所述的碳酸半酯的酰基所保护。优选的羟基保护基团为例如，2，2，2-三氯乙氧羰基，4-硝基苄氧羰基或二苯基甲氧羰基。羟基还可以被三低级烷基甲硅烷基[例如三甲基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基或，特别是，二甲基-(2，3-二甲基-2-丁基)甲硅烷基(即叔己基二甲基甲硅烷基)]、可易于被除去的醚化基团(例如烷基，例如叔低级烷基，例如叔丁基，氧杂-或硫杂-脂族或-环脂族烃基，特别是2-氧杂-或2-硫杂-脂族或-环脂族烃基，例如1-低级烷氧基-低级烷基或1-低级烷硫基-低级烷基，例如甲氧基甲基、1-甲氧基乙基、1-乙氧基乙基、甲硫基甲基、1-甲硫基乙基或1-乙硫基乙基，或具有5-7个环原子的2-氧杂-或2-硫杂环烷基，例如2-四氢呋喃基或2-四氢吡喃基，或相应的硫杂类似物)、和1-苯基-低级烷基(例如苄基、二苯基甲基或三苯甲游基)保护，其中所述苯基可为未取代的，或例如被卤素(例如氯)、低级烷氧基(例如甲氧基)和/或硝基取代。
同时存在于一个分子中的羟基和氨基可以一起被保护，例如被二价的保护基团，例如亚甲基所保护，所述基团可为未取代的或，优选，例如被一个或两个低级烷基或氧代所取代，例如被未取代或取代的亚烷基(例如低级亚烷基例如亚异丙基)、亚环烷基(例如亚环己基)、羰基或苯基亚甲基所取代。
被保护的羟基优选被低级烷氧羰基或三低级烷基甲硅烷基，特别是被三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、二甲基-(2，3-二甲基-2-丁基)甲硅烷基或叔丁氧羰基保护。
被适宜的酰基或被未取代或取代的1-苯基-低级烷基所保护的羟基可用类似于相应的被保护的氨基的方法释出。被2，2-二氯乙酰基所保护的羟基，例如，可通过碱性水解释出，而被叔低级烷基或被2-氧杂-或2-硫杂-脂族或-环脂族烃基所保护的羟基可通过酸解，例如通过用无机酸或强羧酸，例如三氟乙酸释出。
同时存在于一个分子中并被低级烷基、低级亚烷基(例如亚异丙基)、亚环烷基(例如亚环己基)、或苯基亚甲基一取代或二取代的二价的保护基团，例如亚甲基同时保护的羟基和氨基可以通过酸性溶剂分解作用，特别是在无机酸或强有机酸存在下释出。
三低级烷基甲硅烷基，例如三甲基甲硅烷基或二甲基-(2，3-二甲基-2-丁基)甲硅烷基，优选通过溶剂分解作用，例如用醇类，例如甲醇或乙醇，在20℃至回流温度之间的温度下除去。三低级烷基甲硅烷基还可通过酸解用无机酸，特别是氢氟酸，或强羧酸，或通过与释放氟离子的金属或碱的氟化物盐，例如氟化氢和氮碱的酸加成盐或金属氟化物，例如碱金属氟化物，例如氟化钠或氟化钾，在无或有大环多醚(“冠醚”)的存在下反应，或与有机季铵碱的氟化物，例如氟化四低级烷基铵或氟化三低级烷基芳基-低级烷基铵，例如氟化四乙基铵或氟化四丁基铵，在非质子传递性极性溶剂，例如醚类，例如四氢呋喃或二噁烷、二甲亚砜或N，N-二甲基乙酰胺的存在下，在约-20～50℃，例如在0°至室温之间的优选温度下反应除去。
2-卤代低级烷氧羰基作为羟基保护基团可通过还原剂，例如还原性金属，例如锌，还原性金属盐，例如铬(Ⅱ)盐，或通过硫化合物，例如连二亚硫酸钠或，优选硫化钠和二硫化碳除去。
酯化的羟基，例如低级链烷酰氧基，例如乙酰氧基，也可通过酯酶释出。
也可只为了从另一种构型化合物中分离出顺式和反式化合物，例如顺式和反式式Ⅲ化合物的目的而保护羟基。这特别可通过在对将相应的保护基团引入式Ⅴ化合物所述条件下将三低级烷基甲硅烷基保护基团引入式Ⅲ化合物中来实现。在随后分离所述顺式/反式异构体后，例如通过色谱法，优选在硅胶上使用适宜溶剂或溶剂混合物作洗脱剂分离后，可再从被分离出的异构体中按上述方法除去所述羟基保护基团。
上述反应可以在本身已知的反应条件下，在无(例如，若所述试剂本身用作溶剂或以熔化物存在)或，通常，在有溶剂或稀释剂，优选对所用试剂呈惰性并溶解或悬浮它们的溶剂或稀释剂的存在下，在无或有催化剂、缩合剂或中和剂的存在下，并且根据所述反应和反应参与物的性质的不同，在降低的温度、常温或升温下，例如在约-80℃至约200℃，优选约-20℃至最高达回流温度，例如在约0～30℃或在回流温度下，在大气压力或于密封容器中，如果必要在加压下，或在惰性气氛中，例如在氩气或氮气气氛下，如果必要在避光条件下，在方便和必要时从上述选择适宜的参数来进行。详细叙述的具体反应条件是优选的。
溶剂和稀释剂是例如，水、醇类(例如低级烷基醇，例如甲醇、乙醇或丙醇)、二醇类(例如乙二醇)、三醇类(例如甘油)、或芳基醇类(例如苯酚)、酰胺类(例如羧酸酰胺类，例如二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺，或无机酸的酰胺类，例如六甲基磷酰三胺或1，3-二甲基-3，4，5，6-四氢-2(1H)-嘧啶酮(DMPU))、醚类(例如环醚类，例如四氢呋喃或二噁烷;或无环醚类，例如乙醚或乙二醇二甲醚)、卤代烃类(例如卤代低级烷烃类，例如二氯甲烷或氯仿)、酮类(例如丙酮)、腈类(例如乙腈)、酸酐类(例如乙酐)、酯类(例如低级链烷酸低级烷基酯类，例如乙酸乙酯)、二烷基亚砜类(例如二甲亚砜)、氮杂环化合物(例如吡啶)、烃类(例如低级烷烃类，例如庚烷;或芳族化合物，例如苯、甲苯或二甲苯)，或这些溶剂的混合物。可以选择具体的适宜溶剂用于上述反应。
采用习用方法处理获得的式Ⅰ化合物或其盐例如过量试剂的溶剂分解作用;重结晶;色谱法，例如分配色谱法、离子色谱法或凝胶色谱法;在无机和有机溶剂相之间分配;简单抽提或多次提取，特别是在酸化或提高碱度或盐含量之后;干燥吸湿盐;水解;过滤;洗涤;溶解;蒸发(如果必要在真空下或在高真空下);蒸馏;结晶，例如结晶所得油状物形式的化合物或从所述母液中结晶，也可以对产物来讲加入最终产物的晶体进行析晶;或将上述也可重复使用的处理步骤中的两种或多种结合使用等。
起始原料和中间体可以以纯净形式(例如按上面最后所述处理后)，以部分纯化的形式或，例如也可直接作为粗产物使用。
异构体，例如顺式/反式异构体或对映体，可以在合成本发明化合物的任何适宜阶段分离，或者在中间体阶段或者在最终产物阶段。这里所用方法类似于上面在“其它方法”中所述的方法或类似于在“一般反应条件”部分中所述的方法。也可以直接使用仅仅异构体纯的起始原料。
与在实施例中所述方法类似的方法特别优选用于制备起始原料和最终产物。
本发明也涉及所述方法的实施方案，其中在任何反应阶段作为中间体获得的化合物被用作起始物质并且进行缺掉的步骤，或其中起始原料是在所述反应条件下生成的，或以衍生物(例如其盐)的形式使用。
药物组合物本发明还涉及药物组合物，它包含作为活性成分的一种药物活性的式Ⅰ化合物或其可药用盐。用于肠内、特别是口服，和用于非肠道给药的组合物是特别优选的。所述组合物包含所述活性成分本身或，优选，可药用载体。所述活性成分的剂量取决于待治疗的疾病和物种、年龄、体重、皮肤面积和具体病症，以及给药方式。
所述药物组合物包含约5%至约95%活性成分，单次剂量给药形式优选含有约20%至约90%并且非单次剂量的给药形式优选含有约5%至约20%活性成分。剂量单位形式，例如包衣片剂、片剂或胶囊剂，含有约0.01g至约2g，优选约0.05g至约1.0g的活性成分，特别是0.1至0.6g。
本发明还涉及式Ⅰ化合物用于制备用作为ODC抑制剂，例如用于治疗对ODC的抑制产生应答的疾病，特别是上述疾病的药物组合物的用途。
本发明的药物组合物可以用本身已知的方法制备，例如通过常规的混合、粒化过程、包衣、溶解或冷冻干燥方法制备。因此，用于口服的药物组合物可以通过将所述活性成分与一种或多种固体载体混合，如果必要，使所得混合物成粒，并加工所述混合物或颗粒，如果必要，加工成片剂或包衣的片心，如果必要通过加入附加的赋形剂来制得。
适宜的载体为，特别是，填充剂，例如糖类，例如乳糖、蔗糖、甘露糖醇或山梨糖醇、纤维素制剂和/或磷酸钙，例如磷酸三钙或磷酸一氢钙，以及其它粘合剂，例如淀粉类，例如玉米淀粉、麦淀粉、米淀粉或马铃薯淀粉，甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮，和/或，如果需要，崩解剂，例如上述淀粉类，和其他羧甲基淀粉、交联聚乙烯吡咯烷酮、藻酸或其盐，例如藻酸钠。
附加的赋形剂特别是流动调节剂和润滑剂，例如硅酸、滑石、硬脂酸或其盐，例如硬脂酸镁或硬脂酸钙、和/或聚乙二醇，或其衍生物。
如果需要抵抗胃液，可用适宜的包衣提供包衣的片剂，所用包衣物质为特别是含有阿拉伯树胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或如果必要有二氧化钛的浓缩的糖溶液、在适宜有机溶剂或溶剂混合物中的包衣溶液、或用于制备对胃液有抵抗力的包衣的包衣溶液、适宜的纤维素制剂的溶液(例如邻苯二甲酸乙酰基纤维素或邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素)。染料或颜料可以掺合到所述片剂或包衣的片剂包衣中，例如用于区分或鉴定不同的活性成分剂量。
可口服施用的药物组合物也为干填充的明胶胶囊剂和软、密封的明胶胶囊剂和软化剂，例如甘油或山梨糖醇。所述干填充的胶囊可含有以颗粒形式的所述活性成分，例如与填充剂、例如玉米淀粉、粘合剂和/或润滑剂，例如滑石或硬脂酸镁，和如果必要稳定剂混合的活性成分。在软胶囊中，所述活性成分优选溶解于或悬浮于适宜的液体赋形剂，例如脂油、石蜡油或液体聚乙二醇类中，也可以加入稳定剂。
其它口服给药形式为，例如，以常规方式制备并含有所述活性成分的糖浆，例如以悬浮形式并以浓度为约5%～20%，优选约10%的形式，或以可给出适宜的单次剂量，例如，在计量5或10ml时的类似浓度存在。其他适宜的形式还有，例如用于摇动制剂的，例如在奶中的粉状或液体浓缩物。所述浓缩物也可以单次剂填充。
可以作直肠施用的药物组合物为例如，栓剂，它包含所述活性成分和栓剂基质的混合物。适宜的栓剂基质为，例如，天然存在的或合成的甘油三酯类、烷属烃类、聚乙二醇类或高碳醇类。
适于非肠道给药的组合物为，特别是，以水溶性形式，例如水溶性盐形式存在的活性成分的水溶液、或含有增粘物质，例羧甲基纤维素钠、山梨糖醇和/或葡聚糖，和若必要有稳定剂的含水的注射悬浮液。所述活性成分也可在此以冻干物，如果必要混有赋形剂的形式存在，并可通过在非肠道给药之前加入适宜溶剂溶解。
例如用于非肠道给药的溶液也可用作输注溶液。
本发明还涉及用于治疗温血动物，即哺乳动物，并且特别是人，优选那些需要所述治疗的温血动物的上述疾病状况的方法。本发明的式Ⅰ化合物或其可药用盐(如果成盐基团存在的话)可用于这种预防或治疗目的，并优选以药物组合物形式，例如以适于抑制鸟氨酸脱羧酶并且对抗对鸟氨酸脱羧酶的抑制产生应答的所述疾病之一，例如肿瘤或原生动物感染具有预防或治疗有效量使用。对于体重为约70kg时，此时给药日剂量为约0.3g至约15g，优选约0.5g至约5g的本发明化合物。
所述药物组合物优选为适用于对温血动物，例如人给药，适用于治疗或预防对鸟氨酸脱羧酶的抑制产生应答的上述疾病之一的药物组合物，且它包含对抗对鸟氨酸脱羧酶的抑制产生应答的疾病有效量(特别是对抑制该酶有效量)的式Ⅰ化合物或其可药用盐，以及赋形剂。
下述实施例用于说明本发明，但并不限制其范围。
缩写BOC代表叔丁氧羰基。m.p.为“熔点”，decomp.为“伴随分解”。盐水(Brine)是在室温为饱和的氯化钠溶液。温度以摄氏温度给出。Rf值(被待测化合物覆盖的迁移区与被溶剂前沿覆盖的区的比率)用于描述薄层色谱法。在溶剂和稀释剂的混合物的情况下，用体积比表示。
实施例1反式-4-氨基氧基-环己胺二盐酸盐将8.77g(0.0381mol)反式-(4-氨基氧基)-N-BOC-环己胺和180ml3.5M盐酸的甲醇溶液的混合物在室温搅拌3小时，然后真空蒸发。将残余物溶于甲醇中，并再次真空蒸发该混合物。残余物用甲醇/乙醚重结晶得到标题化合物，m.p.＞260℃(高于230℃褐色褪去)。
起始化合物制备如下a)反式-(4-氨基氧基)-N-BOC-环己胺将16.2g(0.04495mol)2-[反式-4-(N-BOC-氨基)-环己基氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮和95ml水合肼的混合物在室温搅拌1/2小时，然后加入145ml水并继续搅拌1/2小时。加入450ml乙醚后，将反应混合物再搅拌2小时然后分出醚相。水相每次用200ml乙醚萃取三次。合并的醚相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并真空蒸发。得到晶状形式的标题化合物，m.p.105～106℃。
b)2-[反式-4-(N-BOC-氨基)-环己基氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮在20～30℃，在搅拌的同时，将12ml(0.0718mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)在80ml苯中的溶液滴加到14.62g(0.06791mol)顺式-4-(N-BOC-氨基)-环己醇、11.1g(0.068mol)N-羟基邻苯二甲酰亚胺、17.84g(0.068mol)三苯膦和600ml苯的混合物中。将反应混合物在室温再搅拌15小时然后真空蒸发。残余物通过二氯甲烷在粒度为0.04-0.063mm的硅胶上进行快速色谱法纯化。蒸发含有产物的级分后，得到标题化合物，为晶状残余物，m.p.207～208℃。
c)顺式-4-(N-BOC-氨基)-环己醇和反式-4-(N-BOC-氨基)-环己醇将51.73g(0.237mol)连二碳酸二叔丁酯在100ml四氢呋喃中的溶液滴加到52g(0.2257mol)4-氨基-环己醇(Fluka，Buchs，Switzerland;顺式/反式混合物;50%水溶液)在100ml四氢呋喃中的溶液中并将该混合物在室温搅拌15小时。然后将反应混合物真空蒸发至干并将残余物在300ml乙醚中搅拌，过滤并用乙醚洗涤该晶体后，得到反式标题化合物，m.p.166℃[参见Anti-CancerDrugDesign2，25(1987)]。将滤液真空蒸发并且残余物用乙酸乙酯/己烷混合物(1∶2和1∶1)在硅胶上通过快速色谱法纯化。因此得到顺式标题化合物，m.p.92～94℃。
实施例2顺式-4-氨基氧基-环己胺二盐酸盐用类似于实施例1的方法，从0.875g(0.0038mol)顺式-(4-氨基氧基)-N-BOC-环己胺和10ml3M盐酸的甲醇溶液开始，但保持反应时间为20小时，得到标题化合物，m.p.196～197℃(伴随分解)。
起始化合物制备如下a)顺式-(4-氨基氧基)-N-BOC-环己胺将2g(0.00555mol)2-[顺式-4-(N-BOC-氨基)-环己基氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮和12ml水合肼的混合物在室温搅拌1小时，然后加入50ml乙醚并继续搅拌1.5小时。然后分离出有机相并按类似于实施例1a的方法处理。所得晶状标题化合物在120～121℃熔化。
b)2-[顺式-4-(N-BOC-氨基)-环己基氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮在20～30℃，将4.1ml(0.0244mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)滴加到5g(0.0232mol)反式-4-(N-BOC-氨基)环己醇(参见实施例1c)、3.8g(0.0232mol)N-羟基邻苯二甲酰亚胺、6.1g(0.0232mol)三苯膦和100ml四氢呋喃的混合物中。在室温将反应混合物再搅拌15小时然后真空蒸发。为了分离出1，2-肼二羧酸二乙酯和氧化三苯膦，将油状残余物溶于乙酸乙酯中，将溶液冷却至0℃并过滤，蒸发滤液并将同样的操作再重复一次，只是使用乙醚。蒸发乙醚后得到的残余物用乙酸乙酯/己烷混合物(1∶2和1∶1)在硅胶上进行快速色谱法纯化。蒸发含有产物的级分后，得到标题化合物，为晶状残余物，m.p.134～135℃。
实施例3反式-3-氨基氧基-环己胺二盐酸盐在搅拌的同时，将4.5g(0.0261mol)反式-(3-氨基氧基)-N-乙酰基-环己胺和22ml2M氢氧化钠溶液(0.044mol)的混合物加热回流15小时。将反应混合物冷却并用二氯甲烷充分萃取，有机相用硫酸钠干燥并真空蒸发。将该油状残余物溶于少量甲醇中，加入稍过量的2M盐酸甲醇溶液并真空蒸发该混合物。用甲醇/乙醚重结晶该残余物后，得到标题化合物，m.p.190℃(伴随分解)。
起始化合物制备如下a)反式-(3-氨基氧基)-N-乙酰基-环己胺将13.4g(0.0443mol)2-[反式-3-(乙酰氨基)-环己基氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮和70ml水合肼的混合物在室温搅拌1小时。加入250ml乙醚后，再在室温下继续搅拌2小时，然后分出有机相并将水合肼相真空蒸发。向残余物中加入500ml乙醇。将该混合物加热至回流温度，使其冷却至室温并过滤并将滤液真空蒸发。残余物二氯甲烷/甲醇混合物(50∶1和9∶1)在硅胶上进行快速色谱法纯化。蒸发含有产物的级分后从甲醇/乙醚中重结晶该残余物，得到标题化合物，m.p.95～96℃。
b)2-[反式-3-(乙酰氨基)-环己基氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮和2-[顺式-3-(乙酰氨基)-环己基氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮在20～30℃，将46ml(0.275mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)滴加到39.3g(0.25mol)3-乙酰氨基环己醇[参见J.Am.Chem.Soc.75，1345(1953)]、40.78g(0.25mol)N-羟基邻苯二甲酰亚胺、65.58g(0.25mol)三苯膦和750ml四氢呋喃的混合物中，然后将反应混合物在室温搅拌15小时。滤出沉淀出的产物，用四氢呋喃洗涤并用乙醇重结晶。因此得到反式标题化合物，在214～215℃熔化。
为了得到顺式标题化合物，将上述滤液和上面重结晶中的母液合并并真空蒸发，残余物用甲苯/异丙醇混合物(97.5∶2.5和19∶1)在硅胶上通过快速色谱法纯化。蒸发含有产物的级分后，得到顺式标题化合物，为晶状残余物，m.p.248～249℃。
实施例4顺式-3-氨基氧基-环己胺二盐酸盐用类似于实施例3的方法，从1.38g(0.008mol)顺式-(3-氨基氧基)-N-乙酰基-环己胺和7ml2M氢氧化钠溶液(0.014mol)开始，得到标题化合物，m.p.193～194℃(伴随分解)。
起始化合物制备如下a)顺式-(3-氨基氧基)-N-乙酰基-环己胺在搅拌的同时，将3.02g(0.01mol)2-[顺式-3-(乙酰氨基)-环己基氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(参见实施例3b)、0.52ml水合肼(0.0105mol)和60ml乙醇的混合物在回流下沸腾1小时。将该混合物冷却至室温并过滤，真空蒸发滤液并且残余物用二氯甲烷/甲醇混合物(50∶1和50∶3)在硅胶上通过快速色谱法纯化。蒸发含有产物的级分后，得到标题化合物，为油状物，其逐渐固化成晶体，m.p.94～96℃。
实施例5顺式-3-氨基氧基甲基-环戊胺二盐酸盐将2g(0.00555mol)2-[顺式-3-(N-BOC-氨基)-环戊基甲氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮和8ml水合肼的混合物在室温搅拌 1/2 小时，然后加入25ml乙醚并继续搅拌 1/2 小时。分离出有机相并且将水合肼相用乙醚充分萃取。合并的醚相用水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥并真空蒸发。向如此得到的Rf值＝0.15(硅胶/乙酸乙酯∶己烷(2∶1)的顺式-3-氨基氧基甲基-N-BOC-环戊胺粗品中加入25ml 3M盐酸甲醇溶液并将该反应混合物在室温搅拌15小时。真空蒸发并从乙醇/乙醚中重结晶残余物后，得到标题化合物，m.p.137℃(伴随分解)。
起始化合物制备如下a)2-[顺式-3-(N-BOC-氨基)-环戊基甲氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮在20-30℃，在搅拌的同时，将2.94ml(0.01755mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)在10ml苯中的溶液滴加到3.6g(0.01672mol)顺式-3-(N-BOC-氨基)-环戊烷基甲醇、2.73g(0.01673mol)N-羟基邻苯二甲酰亚胺、4.49g(0.01672mol)三苯膦和60ml苯的混合物中。将混合物在室温搅拌1小时后，滤出在反应过程中形成的沉淀，将滤器上的残余物悬浮于苯中并再次过滤该悬浮液。将后一操作重复两次以上(在滤器上的残余物1，2-肼二羧酸二乙酯)，并合并所得滤液并将其真空蒸发。残余物的纯化用乙酸乙酯/己烷混合物(1∶3和1∶1)在硅胶上通过快速色谱法进行。因此得到标题化合物，m.p.162～163℃。
b)顺式-3-(N-BOC-氨基)-环戊烷基甲醇在20分钟时间内，在搅拌并用冰浴冷却的同时，分批将2.7g(0.0714mol)硼氢化钠加入到3.8g(0.018mol)N-BOC-2-氮杂二环[2.2.1]庚-3-酮在125ml甲醇的溶液中。将反应混合物再于0℃搅拌1小时并在室温搅拌1小时，然后滴加入4.08ml(0.0714mol)乙酸在8ml甲醇中的溶液并将该混合物真空蒸发至干。将该晶状残余物分配于二氯甲烷和水中。有机相用盐水洗涤后，用硫酸钠干燥并真空蒸发，得到标题化合物，为晶状残余物，m.p.73-74℃。
c)N-BOC-2-氮杂二环[2.2.1]庚-3-酮将0.019g(0.00075mol)4-二甲氨基-吡啶加入到5.56g(0.05mol)2-氮杂二环[2.2.1]庚-3-酮[J.Org.Chem.39，564(1974)]和12g(0.055mol)连二碳酸二叔丁酯在50ml四氢呋喃中的溶液中并在室温将该混合物搅拌15小时。然后将其真空蒸发并用乙酸乙酯/己烷重结晶该残余物。因此得到标题化合物，它在89-90℃熔化。
实施例6顺式-3-氨基氧基甲基-环丁胺二盐酸盐将10.3g(0.02973mol)2-[顺式-3-(N-BOC-氨基)-环丁基甲氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮、54ml水和45ml浓(约12M)盐酸的混合物加热回流1.5小时。然后将反应混合物冷却至0℃并过滤，滤器上的残余物(苯二甲酸)用水洗涤并真空蒸发滤液。将残余物溶于乙醇中并再真空蒸发该溶液。用甲醇/乙醚重结晶该残余物后，得到标题化合物，m.p.192℃(伴随分解)。
起始化合物制备如下a)2-[顺式-3-(N-BOC-氨基)-环丁基甲氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮在20-30℃，在搅拌的同时，将6.54ml(0.0391mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)在30ml苯中的溶液滴加到7.5g(0.03726mol)顺式-3-(N-BOC-氨基)-环丁烷基甲醇、6.08g(0.03726mol)N-羟基邻苯二甲酰亚胺、9.774g(0.03726mol)三苯膦和120ml苯的混合物中。将反应混合物在室温搅拌2小时并过滤，该晶状残余物(1，2-肼二羧酸二乙酯)用苯洗涤并真空蒸发滤液。残余物用乙酸乙酯/己烷混合物(1∶3和1∶2)在硅胶上通过快速色谱法纯化。蒸发含有产物的级分后用乙酸乙酯/己烷重结晶残余物，得到标题化合物，m.p.131.5-132.5℃。
b)顺式-3-(N-BOC-氨基)-环丁烷基甲醇在搅拌并用冰浴冷却的同时，将98.95ml(0.09895mol)1M氟化四丁基铵的四氢呋喃溶液滴加到17g(0.04947mol)顺式-3-(N-BOC-氨基)-1-(叔己基二甲基甲硅烷基)氧基甲基-环丁烷(-叔己基-＝2，3-二甲基-2-丁基-)在75ml四氢呋喃中的溶液中。将该反应混合物在室温再搅拌1.5小时，然后加入150ml盐水并每次用100ml乙酸乙酯萃取该混合物5次。合并的有机相用100ml盐水洗涤并真空蒸发后，残余物用乙酸乙酯/己烷混合物(1∶2和1∶1)在硅胶上通过快速色谱法纯化。蒸发含有产物的级分并用异丙醚重结晶该残余物。因此得到标题化合物，m.p.83-84℃。
c)顺式-3-(N-BOC-氨基)-1-(叔己基二甲基甲硅烷基)氧基甲基-环丁烷和反式-(N-BOC-氨基)-1-(叔己基二甲基甲硅烷基)氧基甲基-环丁烷在20-25℃，在搅拌的同时，将49.18ml(0.2495mol)叔己基二甲基氯甲硅烷滴加到45.65g(0.2268mol)3-(N-BOC-氨基)-环丁烷基甲醇(EP 0 366 059 A2)和40.55ml(0.2723mol)1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯在400ml乙腈中的溶液中。将反应混合物在室温再搅拌15小时然后真空蒸发。将残余物分配在二氯甲烷和水之间，有机相用硫酸钠干燥并蒸发并且油状残余物用己烷和己烷/乙酸乙酯混合物(49∶1和19∶1和12.5∶1)在硅胶上通过快速色谱法纯化。蒸发含有产物的级分，得到顺式标题化合物，Rf值＝0.25(硅胶/乙酸乙酯∶己烷(1∶15))和反式标题化合物，Rf值＝0.23，均为油状物。
实施例7反式-3-氨基氧基甲基-环丁胺二盐酸盐用类似于实施例6的方法，从7.25g(0.02093mol)2-[反式-3-(N-BOC-氨基)-环丁基甲氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮、35ml水和30ml浓盐酸开始，制得标题化合物，m.p.198℃(伴随分解)。
起始化合物制备如下a)2-[反式-3-(N-BOC-氨基)-环丁基甲氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮用类似于实施例6a的方法，从5.6g(0.02782mol)反式-3-(N-BOC-氨基)-环丁烷基甲醇、4.54g(0.02783mol)N-羟基邻苯二甲酰亚胺、7.3g(0.02783mol)三苯膦和5.12ml(0.0306mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)开始，制得标题化合物，m.p.120-122℃。
b)反式-3-(N-BOC-氨基)-环丁烷基甲醇用类似于实施例6b的方法，从13.2g(0.03842mol)反式-3-(N-BOC-氨基)-1-(叔己基二甲基甲硅烷基)氧基甲基-环丁烷(参见实施例6c)在60ml四氢呋喃中的溶液和76.8ml(0.0768mol)1M氟化四丁基铵的四氢呋喃溶液开始，制得标题化合物，m.p.98-100℃。
标题化合物7b也可如下制得在缓慢搅拌的同时，在室温下，向10g3-(N-BOC-氨基)-环丁烷基甲醇[顺式/反式混合物(参见EP0366059A2)]在20ml苯和30ml异丙醚中的溶液中加入少量反式-3-(N-BOC-氨基)-环丁烷基甲醇晶体作晶种。将该混合物搅拌15小时并过滤并且所述晶体用异丙醚洗涤。用异丙醚重结晶仍混杂有只有约3%顺式-3-(N-BOC-氨基)-环丁烷基甲醇的粗产物，得到纯的标题化合物，m.p.98-99℃。
实施例83-氨基氧基甲基-环丁胺二盐酸盐用类似于实施例6的方法，从1.15g(0.00332mol)2-[3-(N-BOC-氨基)-环丁基甲氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮、6ml水和5ml浓盐酸开始，制得标题化合物，m.p.179℃(伴随分解)。
起始化合物制备如下a)2-[3-(N-BOC-氨基)-环丁基甲氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮用类似于实施例6a的方法，从1.59g(0.0079mol)3-(N-BOC-氨基)-环丁烷基甲醇(EP0366059A2)、1.29g(0.0079mol)N-羟基邻苯二甲酰亚胺、2.07g(0.0079mol)三苯膦和1.39ml(0.0083mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)开始，制得标题化合物，m.p.108-109℃。
实施例93-氨基氧基-环丁基甲基胺二盐酸盐将 0.58g(0.001674mol)2-[3-(N-BOC-氨甲基)-环丁基氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮、3ml水合肼和10ml乙醚的混合物在室温搅拌1/2小时。分离出醚相，向水合肼相加入2ml水和10ml乙醚，将该混合物在室温搅拌1/4小时然后分离出有机相。重复刚才的操作后，用水和盐水洗涤合并的醚相，用硫酸钠干燥并真空蒸发。向如此制得的Rf值＝0.63(硅胶/二氯甲烷∶甲醇(9∶1)的油状3-氨基氧基-N-BOC-环丁基甲基胺中加入10ml 3M盐酸甲醇溶液，并将该反应混合物在室温搅拌15小时。真空蒸发并用甲醇/乙醚重结晶残余物后，得到标题化合物，m.p.213℃(伴随分解)。
起始化合物制备如下a)2-[3-(N-BOC-氨甲基)-环丁基氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮用类似于实施例16的方法，所不同的是在快速色谱法中使用乙酸乙酯/己烷混合物(1∶3和1∶1)，从15.24g(0.0757mol)3-(N-BOC-氨甲基)-环丁醇、12.35g(0.0757mol)N-羟基邻苯二甲酰亚胺、19.85g(0.0757mol)三苯膦和13.3ml(0.0795mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)开始，从乙酸乙酯中重结晶后制得标题化合物，它在161-162℃熔化，蒸发母液并用乙酸乙酯/己烷重结晶残余物后得到另一批标题化合物，m.p.145-150℃。
b)3-(N-BOC-氨甲基)-环丁醇在1小时时间内，将59.2g(0.2712mol)连二碳酸二叔丁酯在100ml四氢呋喃中的溶液滴加到24.94g(0.2466mmol)3-氨甲基-环丁醇在180ml四氢呋喃中的悬浮液中。然后向反应混合物中加入80ml水，再在室温继续搅拌16小时并真空蒸发该混合物。得到标题化合物，为晶状残余物，它在96-99℃熔化。
c)3-氨甲基-环丁醇将24.28g(0.25mol)3-氰基-环丁醇[J.Am.Chem.Soc.93，110(1971)]、550ml约8%氨的乙醇溶液和10.9g阮内镍的混合物在35℃氢化。在氢气吸收的终点，滤出催化剂并真空蒸发滤液。得到标题化合物，为晶状残余物，它在72℃熔化。
实施例10顺式-2-氨基氧基甲基-环丙基甲基胺二盐酸盐将1.5g(0.00433mol)2-[顺式-2-(N-BOC-氨甲基)-环丙基甲氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮和9ml水合肼的混合物在室温搅拌1/2小时。然后向反应混合物中加入9ml水并且，再经1/2小时后，加入50ml二氯甲烷。将反应混合物进一步再搅拌3小时，然后分离出二氯甲烷相并每次用30ml二氯甲烷洗涤水相两次。合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发。将因此得到的Rf值＝0.13(硅胶/乙酸乙酯∶己烷(1∶1))的油状顺式-2-氨基氧基甲基-N-BOC-环丙基甲基胺溶于18ml 3M盐酸甲醇溶液中并在室温将反应混合物搅拌1小时。加入乙醚并在冰浴中冷却后，滤出结晶出的标题化合物，用乙醚洗涤并干燥，m.p.178-180℃(伴随分解)。
起始化合物制备如下a)2-[顺式-2-(N-BOC-氨甲基)环丙基甲氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮在20-30℃，在搅拌的同时，将2.61ml(0.0157mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)在15ml苯中的溶液滴加到3g(0.0149mol)顺式-2-(N-BOC-氨甲基)-环丙烷基甲醇、2.43g(0.0149mol)N-羟基邻苯二甲酰亚胺、3.9g(0.0149mol)二苯膦和120ml苯的混合物中。将反应混合物在室温搅拌16小时并过滤。晶状残余物用苯洗涤，并真空蒸发滤液。残余物用己烷和己烷/乙酸乙酯(2∶1)在硅胶上通过快速色谱法纯化。蒸发含有产物的级分并用甲醇/己烷重结晶残余物后，得到标题化合物，m.p.96-97℃。
b)顺式-2-(N-BOC-氨甲基)-环丙烷基甲醇将25.45g(0.1166mol)连二碳酸二叔丁酯在100ml四氢呋喃中的溶液滴加到10.9g(0.1078mol)顺式-2-氨甲基-环丙烷基甲醇[J.Med.Chem.31，2304(1988)]在100ml四氢呋喃中的溶液中并将该混合物在室温搅拌15小时。然后真空蒸发反应混合物并且残余物用乙酸乙酯/己烷(1∶1)在硅胶上通过快速色谱法纯化。蒸发含有产物的级分后，得到标题化合物，为无色油状物，Rf值＝0.23(硅胶/乙酸乙酯∶己烷(1∶1)]。
实施例11反式-2-氨基氧基甲基-环丙基甲基胺二盐酸盐用类似于实施例10的方法，从0.46g(0.00133mol)2-[反式-2-(N-BOC-氨甲基)-环丙基甲氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮和3ml水合肼开始，制得油状的反式-2-氨基氧基甲基-N-BOC-环丙基甲基胺，Rf值＝0.07(硅胶/乙酸乙酯∶己烷(1∶1))。将其溶于4.5ml 3M盐酸甲醇溶液中，并在室温将反应混合物搅拌1/4小时。蒸发并用乙醇/乙醚结晶后，得到标题化合物，m.p.175-176℃(伴随分解)。
起始化合物制备如下a)2-[反式-2-(N-BOC-氨甲基)-环丙基甲氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮用类似于实施例10a的方法，从2.0g(0.00994mol)反式-2-(N-BOC-氨甲基)-环丙烷基甲醇、1.62g(0.00994mol)N-羟基邻苯二甲酰亚胺、2.61g(0.00995mol)三苯膦和1.75ml(0.01047mol)偶氮二甲酸二乙酯(93%)开始，制得标题化合物，为无色树脂状物，Rf值＝0.36(硅胶/乙酸乙酯∶己烷(1∶1))。
b)反式-2-(N-BOC-氨甲基)-环丙烷基甲醇用类似于实施例10b的方法，从11.69g(0.1156mol)反式-2-氨甲基-环丙烷基甲醇[J.Med.Chem.31，2304(1988)]和27.3g(0.1251mol)连二碳酸二叔丁酯开始，制得油状物形式的标题化合物，Rf值＝0.16(硅胶/乙酸乙酯∶己烷(1∶1))。
实施例12反式-4-氨基氧基-环己胺二盐酸盐在氮气氛下并在搅拌的同时，将19.65g(0.1141mol)反式-(4-氨基氧基)-N-乙酰基-环己胺和140ml15%浓度的氢氧化钠溶液(0.525mol)的混合物在100℃加热8小时。按类似于实施例3的方法处理后，得到标题化合物，m.p.＞260℃。
起始化合物制备如下a)反式-(4-氨基氧基)-N-乙酰基-环己胺将37.4g(0.1237mol)-2-[反式-4-(乙酰氨基)-环己基氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮、12.3ml(0.248mol)水合肼、620ml乙醇和225ml二氯甲烷的混合物加热回流1小时。将该混合物冷却至室温并过滤，在滤器上的残余物用二氯甲烷洗涤并真空蒸发滤液。将晶状残余物溶于200ml二氯甲烷中，滤出不可溶的成分并再次真空蒸发滤液。再次重复刚才的操作并使用250ml二氯甲烷。因此得到标题化合物，为晶状残余物，m.p.105-106℃。
b)2-[反式-4-(乙酰氨基)-环己基氧基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮在20-30℃，在搅拌的同时，将39.5ml(0.2413mol)偶氮二甲酸二乙酯(95%)在300ml四氢呋喃中的溶液滴加到36.13g(0.2298mol)顺式-4-乙酰氨基环己醇[Ber.Dtsch.Chem.Ges.72，995，(1939)]、37.49g(0.2298mol)N-羟基邻苯二甲酰亚胺、60.28g三苯膦和1500ml四氢呋喃的混合物中。在室温搅拌14小时后，向反应混合物中再加入各自为原先所用量的20%的三苯膦和偶氮二甲酸二乙酯，继续搅拌6小时并使反应混合物在室温放置2.5天。滤出所生成的晶状沉淀并用四氢呋喃洗涤。如此制得的标题化合物在210-213℃熔化。通过进一步重结晶母液或对母液进行色谱法纯化可提高产量。
实施例13胶囊含有0.25g活性成分，例如实施例1-12化合物之一的胶囊可制备如下
组成(用于5000个胶囊)活性成分1250g滑石180g麦淀粉120g硬脂酸镁80g乳糖20g使粉状物质通过网眼大小为0.6mm的筛并混合。通过胶囊灌注机器将各为0.33g的所述混合物分批填装入明胶胶囊中。
实施例14药理学数据在进行用于抑制鸟氨酸脱羧酶的IC50[采用大鼠肝脏的ODC(参见上述，通过Hayashi和Kameji方法获得)通过Seely和Pegg的上述方法]和用上述方法进行用于抑制T24囊性癌细胞的增殖的IC50的测定时，使用所述诸实施例中所提到的具体化合物可获得下列IC50值实施例中化合物ODC抑制作用T24细胞生长的抑制作用IC50(μM) IC50(μM)1)0.227.53)116)0.0837)0.0234.98)0.024.159)0.05310)0.4权利要求
1.式Ⅰ化合物或其盐，其中基团A为C3-C6亚环烷基；n为0或1；并且m为0或1；条件是a)所述氨基氧基H2N-O-与氨基-NH2之间的距离至少为3个并不大于4个碳原子，并且b)H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2两基团不键合到A的同一环碳原子上。
2.根据权利要求1的式Ⅰ化合物或其盐，其中基团A为C3-C6亚环烷基;n为0或1;并且m为0或1;条件是a)所述氨基氧基H2N-O-与氨基-NH2之间的距离至少为3个并不大于4个碳原子，并且b)H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2两基团不键合到A的同一环碳原子上。
3.根据权利要求1的式Ⅰ化合物或其盐，其中基团A为C3-C6亚环烷基;n为0;和m为0或1;条件是a)所述氨基氧基H2N-O-与氨基-NH2之间的距离至少为3个并不大于4个碳原子，并且b)H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2两基团不键合到A的同一环碳原子上。
4.根据权利要求1的式Ⅰ化合物或其盐，其中基团A为C3-C6亚环烷基;n为0;和m为0;条件是a)所述氨基氧基H2N-O-与氨基-NH2之间的距离至少为3个并不大于4个碳原子，并且b)H2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NH2两基团不键合到A的同一环碳原子上。
5.式Ⅰ化合物或其盐，其中A为1，2-亚环丙基、1，3-亚环丁基、1，3-亚环戊基、或1，3-或1，4-亚环己基;m为0或1;和n为0或1;条件是所述氨基氧基H2N-O-与氨基-NH2之间的距离至少为3个并不大于4个碳原子。
6.根据权利要求1的式Ⅰ化合物或其盐，其中A为1，2-亚环丙基、1，3-亚环丁基、1，3-亚环戊基、或1，3-或1，4-亚环己基;m为0或1;和n为0或1;条件是a)所述氨基氧基H2N-O-和氨基-NH2之间的距离至少为3个并不大于4个碳原子;b)若A为1，2-亚环丙基或1，3-亚环丁基时，则n为0或1;且c)若A为如上所定义的除1，2-亚环丙基或1，3-亚环丁基外的基团时，则n为0。
7.根据权利要求1的式Ⅰ化合物或其盐，其中A为1，2-亚环丙基、1，3-亚环丁基、1，3-亚环戊基、或1，3-或1，4-亚环己基;n为0;和m为0或1;条件是所述氨基氧基H2N-O-与氨基-NH2之间的距离至少为3个并不大于4个碳原子。
8.以顺式或反式形式存在的根据权利要求1至7中任何一项的式Ⅰ化合物或其盐。
9.以顺式或反式形式存在的，若存在不对称碳原子时为纯对映体的根据权利要求1至7中任何一项的式Ⅰ化合物或其盐。
10.根据权利要求1的式Ⅰ化合物或其盐，其中A为1，4-亚环己基;n为0，和m为0;并且所述化合物以顺式或反式形式存在。
11.根据权利要求1的式Ⅰ化合物或其盐，其中A为1，3-亚环丁基;n为0，和m为0或1;并且所述化合物以顺式或反式形式存在。
12.以反式形式存在的根据权利要求10或11的式Ⅰ化合物或其盐。
13.根据权利要求1的式Ⅰ化合物或其盐，其中A为1，2-亚环丙基;n为0或1，和m为1;并且所述化合物以顺式或反式形式存在。
14.以顺式形式存在的根据权利要求13的式Ⅰ化合物或其盐。
15.根据权利要求1的式Ⅰ的反式-4-氨基氧基-环己胺或其可药用盐。
16.根据权利要求1的式Ⅰ的顺式-4-氨基氧基-环己胺或其可药用盐。
17.根据权利要求1的式Ⅰ的反式-3-氨基氧基-环己胺或其可药用盐。
18.根据权利要求1的式Ⅰ的顺式-3-氨基氧基-环己胺或其可药用盐。
19.根据权利要求1的式Ⅰ的顺式-3-氨基氧基甲基-环戊胺或其可药用盐。
20.根据权利要求1的式Ⅰ的顺式-3-氨基氧基甲基-环丁胺或其可药用盐。
21.根据权利要求1的式Ⅰ的反式-3-氨基氧基甲基-环丁胺或其可药用盐。
22.根据权利要求1的式Ⅰ的3-氨基氧基甲基-环丁胺或其可药用盐。
23.根据权利要求1的式Ⅰ的3-氨基氧基-环丁基甲基胺或其可药用盐。
24.根据权利要求1的式Ⅰ的顺式-2-氨基氧基甲基-环丙基甲基胺或其可药用盐。
25.根据权利要求1的式Ⅰ的反式-2-氨基氧基甲基-环丙基甲基胺或其可药用盐。
26.一种药物组合物，该药物组合物包含根据权利要求1至25中任何一项的式Ⅰ化合物或其盐的一种化合物，或其可药用盐以及可药用载体。
27.一种用于治疗或预防对鸟氨酸脱羧酶的抑制产生应答的温血动物的疾病的药物组合物，该药物组合物包含对抗对鸟氨酸脱羧酶的抑制产生应答的疾病有效量的根据权利要求1的式Ⅰ化合物或根据权利要求1的其可药用盐，以及可药用载体。
28.一种用于治疗对鸟氨酸脱羧酶的抑制产生应答的疾病的方法，该方法包含对需要这种治疗的温血动物给药预防或治疗抑制鸟氨酸脱羧酶有效量的根据权利要求1的式Ⅰ化合物或其可药用盐。
29.根据权利要求1至25中任何一项的式Ⅰ化合物或其可药用盐用于治疗对所述酶鸟氨酸脱羧酶的抑制产生应答的疾病的用途。
30.根据权利要求1至25中任何一项的式Ⅰ化合物或其盐用于制备用于治疗肿瘤或原生动物感染的药物组合物的根据权利要求29的用途。
31.根据权利要求1至25中任何一项的式Ⅰ化合物或其盐用于制备用于治疗对所述酶鸟氨酸脱羧酶的抑制产生应答的疾病的药物组合物的用途。
32.根据权利要求1至25中任何一项的式Ⅰ化合物或其盐用于制备用于治疗肿瘤的药物组合物的根据权利要求31的用途。
33.用于诊断性或治疗性治疗人或动物体的方法中的根据权利要求1至25中任何一项的式Ⅰ化合物或其盐。
34.用于治疗对所述酶鸟氨酸脱羧酶的抑制产生应答的疾病的根据权利要求1至25中任何一项的式Ⅰ化合物或其盐。
35.制备根据权利要求1的式Ⅰ化合物的方法，该方法包含这样的步骤，其中从式Ⅱ化合物或其盐(如果存在成盐基团的话)制备，然后除掉所存在的氨基保护基团，其中A、n和m如式Ⅰ化合物中所定义，条件是ⅰ)基团-O-NX3X4与基团X1X2N-之间的距离至少为3个并不大于4个碳原子，并且ⅱ)X1X2N-(CH2)n-和-(CH2)m-O-NX3X4两基团不键合到A的同一环碳原子上;并且其中X1、X2、X3和X4彼此独立地为氢或一价的氨基保护基团，也可以X1与X2、X3与X4、或X1与X2和X3与X4在每种情况下一起形成二价保护基团;并且如果必要其中不参与反应的其它官能团以被保护的形式存在，条件是基团X1、X2、X3和X4中至少一个为氨基保护基团;并且，如果必要，将获得的式Ⅰ化合物转化为其它的式Ⅰ化合物，将获得的异构体混合物分离成异构体，和/或将获得的游离的式Ⅰ化合物转化为盐，或将获得的式Ⅰ化合物的盐转化为游离的式Ⅰ化合物或转化为其他盐。
全文摘要
本发明描述了式I化合物及其盐，其中基团A为CH
文档编号A61P35/00GK1104411SQ94190173
公开日1995年6月28日 申请日期1994年4月2日 优先权日1993年4月13日
发明者J·弗赖, J·施坦内克 申请人:西巴-盖尔基股份公司