专利名称：三成分放射药物复合物的制作方法
相关申请的前后对照本申请是我们的共同申请U.S.S.N.08/218,861的接续申请，该申请又是U.S.S.N.08/040,336(1993年3月30日申请)的接续申请，这些申请均作为参考文献包括在本申请内。
本发明领域本发明涉及可用作诊断心血管疾病，感染性疾病和癌症造影剂的新的放射药物，涉及制备它们的药盒。该放射药物由膦或胂结合锝-99m标记的肼或二嗪(diazino)修饰的生物活性分子组成，所述活性分子可选择性地对疾病位点进行定位，从而通过γ闪烁照相法可得到所处位点的影像。
本发明背景当前对许多疾病均需要非破坏性的新的诊断方法，这些疾病如血栓形成，动脉硬化，感染和癌症。由可发射γ-射线的放射核素标记的生物活性分子组成的放射药物可满足这一需要。生物活性分子可使放射核素定位于疾病所在位点，从而通过γ闪烁照相法显示所述位点。上述分子可以是蛋白质，抗体，抗体片段，肽或多肽，或肽类似物。分子与表达疾病的受体或结合位点相互作用，或与内生性细胞成分(如血小板和白细胞)上的受体或结合位点相互作用。这种相互作用使得一定百分比的注射入的放射药物选择性定位，而其它的则通过肾或肝胆管系统清除。然后在外面通过γ闪烁照相法造影。血管内容量净增，清除和放射核素衰减的比例决定了显影的容易程度，通常以靶部位一对一背景比例表示。通常，只有某一部分的生物活性分子与受体结合；这些部分被定义为识别序列或识别单位。
已发展了大量的由放射核素标记的蛋白质，抗体或抗体片段组成的放射药物，但是，至今只有一种得到食品和药品管理局(Food and DrugAdministration)的批准。这种稀少的结果是由于多种因素的结合使得开发这样的放射药物有困难，这些因素包括制备和质量控制的问题，不理想的血管内容量净增和清除率，以及对放射药物的抗原或过敏反应。这些问题主要是由蛋白质，抗体和抗体片段大分子的性质决定的。它们的高分子量使得直接的化学合成是不实际的，因此它们必须通过通常低产率的重组体和克隆技术进行合成并需要大量的分离和纯化步骤。其分子量减缓了它们定位的速度和通过肾或肝的活性消除机制阻止了它们的清除，导致了循环中保留时间过长，从而在造影过程中产生高水平背景(噪音)。而且身体的免疫系统对识别外来种类更有效。
采用低分子量肽，多肽或肽类似物作为生物活性分子可以避免一系列这些问题。这些分子可采用传统化学方法或通过自动肽合成仪直接合成。它们可以高产率获得并只需要比较简单纯化步骤。它们趋向于通过活性消除通道从循环系统更快地清除，从而导致造影中更低背景(噪音)。通常它们也不激发免疫应答。第一个放射核苷标记的多肽放射药物已获得食品和药品管理局的批准。
用放射核素标记生物活性分子作为放射药物有两种通用的方法，称之为直接标记法和间接标记法。直接标记法包括使放射核素与生物活性分子的原子相连；间接标记法包括通过螯合剂与放射核素相连。螯合剂可在与放射核素反应前与生物活性分子相连，或放射核素标记的螯合剂部分与生物活性分子相连。最近的几项研究描述了标记的方法并在此将它们作为参考文献包括在内S.Jurisson等，Chem.Rev.，1993，93，1137；A.Verbruggen，Eur.J.Nuc.Med.，1990，17，346；和M.Derwanjee，Semin.Nuc，Med.，1990，20，5。
最近已在下述文献中公开了采用肼或酰肼作为螯合剂修饰将用放射核素标记的蛋白质Schwartz等，US专利5,206,370。在用锝-99m标记时，肼-修饰蛋白质与被还原的锝(在螯合二氧配体的存在下通过高锝酸盐与还原剂反应制备)进行反应。据信是通过与由附属二氧配体所构成配位范围相连的酰肼或diazenido键，锝结合到蛋白质上。附属二氧配体包括葡庚糖盐(酯)，葡糖酸盐(酯)，2-羟基异丁酸盐(酯)和乳酸盐(酯)。
最近报道的某些二氧配体对用锝-99m标记的肼-修饰蛋白质特别有优势。Bridger等，欧洲专利申请93302712.0公开了一系列官能化氨基羧酸盐(酯)，据报道使用氨基羧酸盐(酯)可改善肼-修饰大分子如单克隆抗体的标记过程。这种改善通过缩短反应时间和提高选择活性表现出来。这些较好的二氧配体包括羟基烷基取代的甘氨酸衍生物如麦黄酮共同申请U.S.系列号08/218,861(同族专利WO94/22494)，申请日为1993年3月28日，公开了可作为血栓栓塞疾病造影剂的、新的放射标记的血小板IIb/IIIa受体拮抗剂的合成方法。这些试剂包括放射核素标记的螯合剂修饰的环状化合物。修饰环状化合物的优选的螯合剂是肼或diazenido部分。
本发明提供了新的以最小数目异构体形式生成的、锝-99m标记的肼或二嗪修饰的生物活性分子，各异构体的比例不随着时间的变化而变化。发展这些化合物较为简单，只需要不太复杂的制备和标记方法控制过程。
本发明概述本发明提供了可用作诊断心血管疾病如血栓栓塞或动脉硬化，感染性疾病和癌症造影剂的新的放射药物。该放射药物由膦或胂结合锝-99m标记的肼或二嗪修饰的生物活性分子组成，可选择性地对疾病位点进行定位，从而通过γ闪烁照相法得到所处位点的影像。本发明也提供了采用所述放射药物作为造影剂诊断心血管疾病如血栓栓塞或动脉硬化，感染性疾病和癌症的方法。本发明进一步提供了制备所述放射药物药盒的方法。
对附图的简要说明附
图1.HPLC色谱，采用方法1和2，本发明实施例1所得最终产物。
附图2.通过犬深静脉血栓症(Canine Deep Vein Thrombosis)模型得到数据，采用的是本发明实施例1和2的放射药物和Tc-蛋白质(阴性对照)；血栓对血液和血栓对肌肉的比。
附图3.通过动静脉分流术(Arteriovenous Shunt)模型得到的血清除曲线，采用的是本发明实施例1和2的放射药物和Tc-蛋白质(阴性对照)。
本发明详述本发明涉及用作诊断心血管疾病如血栓栓塞或动脉硬化，感染性疾病和癌症的新的放射药物，涉及采用所述放射药物作为造影剂诊断心血管疾病的方法和涉及用于制备所述放射药物的药盒。本发明一方面涉及含有下述(成分)的放射药物过渡金属放射核素，过渡金属螫合剂，与所述螯合剂相连的生物活性基团，第一附属配体，可稳定放射药物的第二附属配体，在所述螯合剂和所述所述生物活性基团之间任选含有连接基团。本发明另一方面涉及在所述螯合剂和所述生物活性基团之间含有连接基团的方案[1]的放射药物。本发明另一方面涉及式[2]方案的放射药物及其可药用盐[(Q)d’Ln-Ch’]x-Mt(AL1)y(AL2)z(1)其中Q表示生物活性分子；d’是1-20；Ln表示下式的连接基团M1-[Y1(CR55R56)f(Z1)f’Y2]f’-M2其中M1表示-[(CH2)gZ1]g’-(CR55R56)g”；M2表示-(CR55R56)g”-[Z1(CH2)g]g’-；g独立地表示0-10；g’独立地表示0-1；g”独立地表示0-10；f独立地表示0-10；f’独立地表示0-10；f’独立地表示0-1；各种情况下，Y1和Y2独立地选自一个键，O，NR56，C＝O，C(＝O)O，OC(＝O)O，C(＝O)NH-，C＝NR56，S，SO，SO2，SO3，NHC(＝O)，(NH)2C(＝O)，(NH)2C(＝S)；各种情况下，Z1独立地选自被0-4个R57取代的C6-C14饱和，部分饱和或芳香的碳环系；和任选被0-4个R57取代的杂环系；各种情况下，R55和R56独立地选自氢；被0-5个R57取代的C1-C10烷基；其中芳基被0-5个R57取代的烷芳基；各种情况下，R57独立地选自氢；OH；NHR58，C(＝O)R58，OC(＝O)R58；OC(＝O)OR58；C(＝O)OR58，C(＝O)NR58-，C≡N，SR58，SOR58，SO2R58，NHC(＝O)R58，NHC(＝O)NHR58，NHC(＝S)NHR58；或者，当与另外的分子Q相连时，R57每次出现时，独立地选自基团O，NR58，C＝O，C(＝O)O，OC(＝O)O，C(＝O)N-，C＝NR58，S，SO，SO2，SO3，NHC(＝O)，(NH)2C(＝O)，(NH)2C＝S；和R58每次出现时，独立地选自基团氢；C1-C6烷基；苄基；和苯基；x和y各自独立的表示1或2；z独立地表示1-4；Mt表示选自99mTc，186Re和188Re的过渡金属放射核素；Ch’表示与过渡金属放射核素Mt配合的放射核素金属螯合剂，当其每次出现时，独立地选自R40N＝N+＝，R40R41N-N＝，R40N＝和R40N＝N(H)-，其中当R40每次出现时，独立地选自与Ln相连的键，0-3个R52取代的C1-C10烷基，0-3个R52取代的芳基，0-3个R52取代的环烷基，0-3个R52取代的杂环基，0-3个R52取代的杂环烷基，0-3个R52取代的芳烷基和0-3个R52取代的烷芳基；R41独立地选自氢，0-3个R52取代的芳基，0-3个R52取代的C1-C10烷基，和0-3个R52取代的杂环基；当R52每次出现时，独立地选自与Ln相连的键，＝O，F，Cl，Br，I，-CF3，-CN，-CO2R53，-C(＝O)R53，-C(＝O)N(R53)2，-CHO，-CH2OR53，-OC(＝O)R53，-OC(＝O)OR53a，-OR53，-OC(＝O)N(R53)2，-NR53C(＝O)R53，-NR54C(＝O)OR53a，＝NR53C(＝O)N(R53)2，-NR54SO2N(R53)2，-NR54SO2NR53a，-SO3H，-SO2R53a，-SR53，-S(＝O)R53a，-SO2N(R53)2，-N(R53)2，-NHC(＝NH)NHR53，-C(＝NH)NHR53，＝NOR53，NO2，-C(＝O)NHOR53，-C(＝O)NHNR53R53a，-OCH2CO2H，2-(1-吗啉子基)乙氧基；R53，R53a，和R54当其各自出现时独立地选自氢，C1-C6烷基和与Ln相连的键；AL1表示选自下述的第一附属配体二氧配体，
官能化的氨基羧酸盐(酯)，和卤化物；AL2表示可稳定放射药物的附属配体，选自A9和A10-W-A11，其中A9在其各自出现时独立地表示选自下述的基团PR61R62R63和AsR61R62R63；A10和A11在其各自出现时独立地表示选自下述的基团PR61R62和AsR61R62；W表示选自下列的间隔基团被0-3个R70取代的C1-C10烷基，被0-3个R70取代的芳基，被0-3个R70取代的环烷基，被0-3个R70取代的杂环，被0-3个R70取代的杂环烷基，被0-3个R70取代的芳烷基，被0-3个R70取代的烷芳基；R61，R62和R63当其各自出现时独立地选自被0-3个R70取代的C1-C10烷基，被0-3个R70取代的芳基，被0-3个R70取代的环烷基，被0-3个R70取代的杂环，被0-3个R70取代的芳烷基，被0-3个R70取代的烷芳基；和被0-3个R70取代的芳基烷芳基；当R70各自出现时独立地选自F，Cl，Br，I，-CF3，-CN，-CO2R71，-C(＝O)R71，-C(＝O)N(R71)2，-CH2OR71，-OC(＝O)R71，-OC(＝O)OR71a，-OR71，-OC(＝O)N(R71)2，-NR71C(＝O)R71，-NR71C(＝O)OR71，-NR71C(＝O)N(R71)2，SO3-，-NR71SO2N(R71)2，-NR71SO2R71a，-SO3H，-SO2R71，-S(＝O)R71，-SO2N(R71)2，-N(R71)2，-N(R71)3+，-NHC(＝NH)NHR71，-C(＝NH)NHR71，＝NOR71，NO2，-C(＝O)NHOR71，-C(＝O)NHNR71R71a，-OCH2CO2H；和R71和R71a当其各自出现时独立地选自氢和C1-C6烷基。本发明另一方面涉及方案[3]的放射药物其中Q表示选自下述的生物活性分子IIb/IIIa受体拮抗剂，IIb/IIIa受体配体，血纤维蛋白(单体)结合肽，白细胞结合肽，趋化性肽，生长激素释放抑制因子类似物，以及选择蛋白结合肽；d’是1-3；Ln表示下式的连接基团
-(CR55R56)g”-[Y1(CR55R56)fY2]f’-(CR55R56)g”-其中g”表示0-5；f表示0-5；f’表示1-5；当Y1和Y2各自出现时，独立地选自O，NR56，C＝O，C(＝O)O，OC(＝O)O，C(＝O)NH-，C＝NR56，S，SO，SO2，SO3，NHC(＝O)，(NH)2C(＝O)，(NH)2C＝S；当R55和R56各自出现时，独立地选自氢，C1-C10烷基，烷芳基x和y各自独立的表示1或2；z独立地表示1-2；Mt表示选自99mTc；Ch’表示与过渡金属放射核素Mt配合的放射核素金属螯合剂，当其各自出现时，独立地选自R40N＝N+＝，R40R41N-N＝，R40N＝和R40N＝N(H)-，其中当R40各自出现时，独立地选自0-3个R52取代的芳基，和0-3个R52取代的杂环基；R41独立地选自氢，0-1个R52取代的芳基，0-1个R52取代的C1-C3烷基，和0-1个R52取代的杂环基；当R52各自出现时，独立地选自与Ln相连的键，-CO2R53，-CH2OR53，-SO3H，-SO2R53a，-N(R53)2，-N(R53)3+，-NHC(＝NH)NHR53和-OCH2CO2H；R53，R53a当其各自出现时独立地选自氢，C1-C3烷基；AL1选自下述基团吡喃酮，吡啶酮，和官能化的氨基羧酸盐(酯)；AL2选自下述基团A9和A10-W-A11，其中A9表示PR61R62R63；A10和A11表示PR61R62；W表示选自下列的间隔基团被0-3个R70取代的C1-C3烷基，被0-3个R70取代的芳基，被0-3个R70取代的杂环；R61，R62和R63当其各自出现时独立地选自被0-3个R70取代的C1-C3烷基，被0-3个R70取代的芳基，被0-3个R70取代的杂环；当R70各自出现时独立地选自-CO2R71，-OR71，SO3-，和-SO3H；和R71表示氢。本发明另一方面涉及方案[4]的放射药物，其中Q表示选自下述的生物活性分子IIb/IIIa受体拮抗剂，趋化性肽，；d’是1；Ln表示下式的连接基团-(CR55R56)g”-([Y1(CR55R56)fY2]f’-(CR55R56)g”-其中g”表示0-5；f表示0-5；f’表示1-5；当Y1和Y2各自出现时，独立地选自O，NR56，C＝O，C(＝O)O，OC(＝O)O，C(＝O)NH-，C＝NR56，S，NHC(＝O)，(NH)2C(＝O)，(NH)2C＝S；R55和R56表示氢；x和y是1；z是1；Ch’表示与过渡金属放射核素Mt配合的放射核素金属螯合剂，当其各自出现时，独立地选自R40N＝N+＝，和R40R41N-N＝；R40在其各自出现时，独立地选自R52取代的杂环基；R41表示氢；R52表示与Ln相连的键；AL1表示麦黄酮(tricine)；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63当其各自出现时独立地选自被0-3个R70取代的C1-C3烷基，被0-3个R70取代的芳基；当R70各自出现时独立地选自-CO2H，-OH，-SO3H，-SO3-。本发明另一方面涉及方案[3]的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
并且Ch’与Ln通过*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；AL1表示麦黄酮；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63各自表示在间位上可有SO3H或SO3-基团的苯基；x，y和z是1。本发明另一方面涉及方案[3]的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
并且Ch’与Ln通过*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；AL1表示麦黄酮(tricine)；AL2表示PR61R62R63，其中R61表示苯基，R62和R63各自表示在间位上带有SO3H或SO3-基团的苯基；x，y和z是1。本发明另一方面涉及方案[3]的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
和Ch’与Ln通过*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；
AL1表示麦黄酮；AL2表示PR61R62R63，其中R61和R62表示苯基，和R63表示在间位上可有SO3H或SO3-基团的苯基；x，y和z是1。本发明另一方面涉及方案[3]的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
并且Ch’与Ln通过*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；AL1表示麦黄酮；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63各自表示对-(2-苯基乙基)苯基，其中苯基乙基在对位上可有SO3H或SO3-基团；和x，y和z是1。
方案[10]本发明另一方面涉及方案[3]的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
并且Ch’与Ln通过*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；AL1表示麦黄酮；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63各自表示对-(2-苯基丙基)苯基，其中苯基丙基在对位上可有SO3H或SO3-基团；x，y和z是1。本发明另一方面涉及方案[3]的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
和Ch’与Ln通过*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；AL1表示麦黄酮；AL2表示R61R62PCH2CH2PR61R62，其中R61，R62各自表示在间位上可有SO3H或SO3-基团的苯基；x，y和z是1。本发明另一方面涉及方案[3]的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
和Ch’与Ln通过*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；AL1表示麦黄酮；
AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63表示被一个OH取代的C3-烷基；和x，y和z是1。本发明另一方面涉及方案[3]的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
和Ch’与Ln通过*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；AL1表示麦黄酮；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63表示CH2CH2COOH；x，y和z是1。[14]本发明另一方面涉及方案[3]的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
和Ch’与Ln通过*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；AL1表示曲酸；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63各自表示在间位上可有SO3H或SO3-基团的苯基；x和z是1；和y是2。本发明另一方面涉及对哺乳动物进行放射造影的方法，该方法包括(i)给所述哺乳动物施用有效量的方案[1]-[14]任意一项所述的放射药物，以及(ii)采用放射造影装置对哺乳动物进行扫描。本发明另一方面涉及通过放射造影显示哺乳动物(体内)血小板沉积位置的方法，该方法包括(i)给所述哺乳动物施用有效量的方案[6]-[14]任意一项所述的放射药物，以及(ii)采用放射造影装置对哺乳动物进行扫描。本发明另一方面涉及测定哺乳动物(体内)血小板沉积的方法，该方法包括给所述哺乳动物施用方案[6]-[14]任意一项所述的放射药物组合物，以及给所述的哺乳动物造影。本发明另一方面涉及诊断哺乳动物与血小板沉积有关的疾病的方法，该方法包括给所述哺乳动物施用方案[6]-[14]任意一项所述的放射药物组合物，以及给所述的哺乳动物造影。本发明另一方面涉及制备放射药物的药盒，该药盒包括(a)下式的预定数量的无菌可药用试剂(Q)d’Ln-Ch；(b)选自下列的预定数量的无菌可药用附属配体AL1二氧配体，官能化的氨基羧酸盐(酯)，和卤化物；和(c)选自下列的预定数量的无菌可药用第二附属配体AL2A9和A10-W-A11；其中Q表示生物活性分子；d’是1-20；Ln表示下式的连接基团M1-[Y1(CR55R56)f(Z1)f’Y2]f’-M2其中M1表示-[(CH2)gZ1]g’-(CR55R56)g”-；M2表示-(CR55R56)g”-[Z1(CH2)g]g’-；g独立地表示0-10；g’独立地表示0-1；g”独立地表示0-10；f独立地表示0-10；f’独立地表示0-10；f”独立地表示0-1；当Y1和Y2各自出现时，独立地选自键，O，NR56，C＝O，C(＝O)O，OC(＝O)O，C(＝O)NH-，C＝NR56，S，SO，SO2，SO3，NHC(＝O)，(NH)2C(＝O)，(NH)2C(＝S)；当Z1各自出现时，独立地选自被0-4个R57取代的C6-C14饱和，部分饱和或芳香碳环系；和任选被0-4个R57取代的杂环系；
当R55和R56各自出现时，独立地选自氢；被0-5个R57取代的C1-C10烷基；其中芳基被0-5个R57取代的烷芳基；当R57各自出现时，独立地选自氢；OH；NHR58，C(＝O)R58，OC(＝O)R58；OC(＝O)OR58；C(＝O)OR58，C(＝O)NR58-，C≡N，SR58，SOR58，SO2R58，NHC(＝O)R58，NHC(＝O)NHR58，NHC(＝S)NHR58；或者，当与另外的分子Q相连时，当R57各自出现时，独立地选自基团O，NR58，C＝O，C(＝O)O，OC(＝O)O，C(＝O)N-，C＝NR58，S，SO，SO2，SO3，NHC(＝O)，(NH)2C(＝O)，(NH)2C＝S；和当R58各自出现时，独立地选自基团氢；C1-C6烷基；苄基；和苯基；Ch表示放射核素金属螯合剂，当其各自出现时，独立地选自R40R41N-N＝C(C1-C3烷基)2和R40NNH2-，其中当R40各自出现时，独立地选自与Ln相连的键，0-3个R52取代的C1-C10烷基，0-3个R52取代的芳基，0-3个R52取代的环烷基，0-3个R52取代的杂环基，0-3个R52取代的杂环烷基，0-3个R52取代的芳烷基和0-3个R52取代的烷芳基；当R41各自出现时，独立地选自氢，0-3个R52取代的芳基，0-3个R52取代的C1-C10烷基，和0-3个R52取代的杂环基；当R52各自出现时，独立地选自与Ln相连的键，＝O，F，Cl，Br，I，-CF3，-CN，-CO2R53，-C(＝O)R53，-C(＝O)N(R53)2，-CHO，-CH2OR53，-OC(＝O)R53，-OC(＝O)OR53a，-OR53，-OC(＝O)N(R53)2，-NR53C(＝O)R53，-NR54C(＝O)OR53a，-NR53C(＝O)N(R53)2，-NR54SO2N(R53)2，-NR54SO2NR53a，-SO3H，-SO2R53a，SR53，-S(＝O)R53-SO2N(R53)2，-N(R53)2，-HC(＝NH)NHR53，-C(＝NH)NHR53，＝NOR53，NO2，-C(＝O)NHOR53，-C(＝O)NHNR53R53a，-OCH2CO2H，2-(1-吗啉子基)乙氧基；R53，R53a，和R54当其各自出现时独立地选自氢，C1-C6烷基和与Ln相连的键；A9在其各自出现时独立地表示选自下述的基团PR61R62R63和AsR61R62R63；A10和A11在其各自出现时独立地表示选自下述的基团PR61R62和AsR61R62；W表示选自下列的间隔基团被0-3个R70取代的C1-C10烷基，被0-3个R70取代的芳基，被0-3个R70取代的环烷基，被0-3个R70取代的杂环，被0-3个R70取代的杂环烷基，被0-3个R70取代的芳烷基和被0-3个R70取代的烷芳基；R61，R62和R63当其各自出现时独立地表示被0-3个R70取代的C1-C10烷基，被0-3个R70取代的芳基，被0-3个R70取代的环烷基，被0-3个R70取代的杂环，被0-3个R70取代的芳烷基，被0-3个R70取代的烷芳基；被0-3个R70取代的芳基烷芳基；当R70各自出现时独立地选自F，Cl，Br，I，-CF3，-CN，-CO2R71，-C(＝O)R71，-C(＝O)N(R71)2，-CH2OR71，-OC(＝O)R71，-OC(＝O)OR71a，-OR71，-OC(＝O)N(R71)2-NR71C(＝O)R71，-NR71C(＝O)OR71，-NR71C(＝O)N(R71)2，SO3-，-NR71SO2N(R71)2，-NR71SO2NR71a，-SO3H，-SO2R71，-S(＝O)R71，-SO2N(R71)2，-N(R71)2，-N(R71)3+，-NHC(＝NH)NHR71，-C(＝NH)NHR71，＝NOR71，NO2，-C(＝O)NHOR71，-C(＝O)NHNR71R71a，-OCH2CO2H；和R71和R71a当其各自出现时独立地表示氢和C1-C6烷基。本发明另一方面涉及方案[19]的药盒，其中Q表示选自下述的生物活性分子IIb/IIIa受体拮抗剂，IIb/IIIa受体配体，血纤维蛋白(单体)结合肽，白细胞结合肽，趋化性肽，生长激素释放抑制因子类似物，以及选择蛋白结合肽；d’是1-3；Ln表示下式的连接基团-(CR55R56)g”-[Y1(CR55R56)fY2]f’-(CR55R56)g”-其中g”表示0-5；f表示0-5；f’表示1-5；当Y1和Y2各自出现时，独立地选自O，NR56，C＝O，C(＝O)O，OC(＝O)O，C(＝O)NH-，C＝NR56，S，SO，SO2，SO3，NHC(＝O)，(NH)2C(＝O)，(NH)2C＝S；当R55和R56各自出现时，独立地选自氢，C1-C10烷基，(C1-C10烷基)芳基；AL1选自下述基团吡喃酮，吡啶酮，和官能化的氨基羧酸盐(酯)；AL2选自下述基团A9和A10-W-A11，其中A9表示PR61R62R63；A10和A11表示PR61R62；W表示选自下列的间隔基团被0-3个R70取代的C1-C3烷基，被0-3个R70取代的芳基，被0-3个R70取代的杂环；R61，R62和R63当其各自出现时独立地选自被0-3个R70取代的C1-C3烷基，被0-3个R70取代的芳基，被0-3个R70取代的杂环；当R70各自出现时独立地选自-CO2R71，-OR71，SO3-，和-SO3H；和R71表示氢。本发明另一方面涉及方案[20]的药盒，其中Q表示选自下述的生物活性分子IIb/IIIa受体拮抗剂，趋化性肽，；d’是1；Ln表示-(CR55R56)g”-[Y1(CR55R56)fY2]f’-(CR55R56)g”-其中g”表示0-5；f表示0-5；f’表示1-5；当Y1和Y2各自出现时，独立地选自O，NR56，C＝O，C(＝O)O，OC(＝O)O，C(＝O)NH-，C＝NR56，S，NHC(＝O)，(NH)2C(＝O)，(NH)2C＝S；R55和R56表示氢；AL1表示麦黄酮；AL2表示PR61R62R63，其中
R61，R62和R63当其各自出现时独立地选自被0-3个R70取代的C1-C3烷基，被0-3个R70取代的芳基；当R70各自出现时独立地选自-CO2H，-OH，-SO3H，-SO3-。本发明另一方面涉及方案[21]的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63各自表示在间位上可有SO3H或SO3-基团的苯基。本发明另一方面涉及方案[21]的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式
-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL2表示PR61R62R63，其中R61表示苯基，R62和R63各自表示在间位上可有SO3H或SO3-基团的苯基。本发明另一方面涉及方案[21]的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL2表示PR61R62R63，其中R61和R62表示苯基，和R63表示在间位上可有SO3H或SO3-基团的苯基。本发明另一方面涉及方案[21]的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式
-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63各自表示对-(2-苯基乙基)苯基，其中苯基乙基在对位上可有SO3H或SO3-基团。本发明另一方面涉及方案[21]的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63各自表示对-(2-苯基丙基)苯基，其中苯基丙基在对位上可有SO3H或SO3-基团。本发明另一方面涉及方案[21]的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式
-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL2表示R61R62PCH2CH2PR61R62，其中R61，R62各自表示在间位上可有SO3H或SO3-基团的苯基。本发明另一方面涉及方案[21]的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63表示被一个OH取代的C3-烷基。本发明另一方面涉及方案[21]的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63表示CH2CH2COOH。[30]本发明另一方面涉及方案[20]的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL1表示曲酸；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63各自表示在间位上可有SO3H或SO3-基团的苯基。本发明另一方面涉及其中也存在还原剂的方案[19]-[30]任意一项所述的药盒。本发明优选的方案是其中还原剂为氯化亚锡的方案[31]的药盒。
在任何组成和任何通式中当任何变化出现多于一次时，在各次出现时其定义与其它出现时定义是彼此独立的。因此，例如如果一个基团表示可被0-2个R52取代，那就是说所述基团可任选地被至多2个R52取代并且在各种情况下R52独立地选自可能的R52定义组。而且，通过对基团-N(R53)2举例说明，N上的两个R53取代基各自独立地选自可能的R53定义组。取代基和/或(其)变数的结合是允许的，只要这种结合能够产生稳定的化合物。
“稳定的化合物”或“稳定的结构”是指足够稳定到可从反应混合物中以可用的纯度分离(而不发生变化)，并配制成有效的诊断剂的化合物。
这里用来描述第二附属配体AL2的术语“可稳定”是指在所述条件下，在第一附属配体和过渡金属螯合剂的存在下，配体可与过渡金属放射核素配位，产生具有最小异构形式的式1放射药物，随着时间的变化各异构形式的相对比例并没有明显的变化，并且基本上不受稀释的影响。
这里所用的术语“取代的”是指所述的原子或基团上一或多个氢被从定义组中选择的基团所替代，条件是不能超过所述的原子或基团的正常的价数，并且这种取代产生的是稳定的化合物。当取代基是酮(即＝O)时，是指该原子上两个氢原子被取代。
这里所用的术语“键”是指单键或双键。
这里所用的术语“盐”，如CRC Handbook of Chemistry andPhysics，65th Edition，CRC Press，Boca Raton，Fla，1984，中所定义，是指可产生离子(除了氢离子或羟基离子)的物质。
这里所用的术语“烷基”包括具有特定碳原子数的支链或直链饱和脂肪烃基；“环烷基”包括饱和环基，包括单-，双-或多-环系，如环丙基，环丁基，环戊基，环己基，环庚基，环辛基和金刚烷基；和“双环烷基”包括饱和双环烷基如[3.3.0]二环辛烷，[4.3.0]二环壬烷，[4 4.0]二环癸烷(decalin)，[2.2.2]二环辛烷等等。
这里所用的术语“芳基”或“芳香残基”包括苯基或萘基，当其被取代时，取代可在任何位置。
这里所用的术语“杂环”或“杂环系”是指饱和，部分饱和或芳香的稳定的5-至7-元单环或双环或7-至10-元双环杂环系，上述杂环(系)是由碳原子和1-4个各自独立地选自N，O和S的杂原子构成，其中氮杂原子和硫杂原子可被任选氧化，和氮可被任选季铵化，并且包括其中任何上述杂环系与苯环稠合的任意双环基。杂环可通过其任何杂原子或碳原子与其侧基连接从而获得一个稳定的结构。如果所得的化合物是稳定的，那么这里所述的杂环可在碳或氮原子上被取代。上述杂环的实例包括但不限于苯并吡喃基，噻二嗪基，四唑基，苯并呋喃基，苯并噻吩基，indolene，喹啉基，异喹啉基或苯并咪唑基，哌啶基，4-哌啶酮，2-吡咯烷酮，四氢呋喃，四氢喹啉，四氢异喹啉，十氢喹啉，八氢异喹啉，吖辛因，三嗪(包括1，2，3-，1，2，4-，和1，3，5-三嗪)，6H-1，2，5-噻二嗪，2H，6H-1，5，2-二噻嗪，噻吩，四氢噻吩，噻蒽，呋喃，吡喃，异苯并呋喃，色烯，呫吨，phenoxathiin，2H-吡咯，吡咯，咪唑，吡唑，噻唑，异噻唑，噁唑(包括1，2，4-和1，3，4噁唑)，异噁唑，三唑，吡啶，吡嗪，嘧啶，哒嗪，中氮茚基，异氮茚基，3H-吲哚，吲哚，1H-吲唑，嘌呤，4H-喹嗪，异喹啉，喹啉，2，3-二氮杂萘，1，5-二氮杂萘，喹喔啉，喹唑啉，噌啉，喋啶，4aH-咔唑，咔唑，β-咔啉，菲啶，吖啶，白啶，菲咯啉，吩嗪，吩砒嗪，吩噻嗪，呋咱，吩噁嗪，异苯并二氢吡喃，苯并二氢吡喃，吡咯烷，吡咯啉，咪唑烷，咪唑啉，吡唑烷，吡唑啉，哌嗪，二氢吲哚，异二氢氮(杂)茚基，奎宁环或吗啉。也包括含有上述杂环的稠合环或螺化合物。
这里所用的术语“烷芳基”是指具有1-10个碳原子烷基(取代基)的芳基；术语“芳烷基”是指具有芳基(取代基)的1-10个碳原子的烷基；术语“芳基烷芳基”是指具有1-10个碳原子烷基(其上还具有芳基)取代基的芳基；术语“杂环烷基”是指具有杂环的1-10碳原子烷基。
生物活性分子Q可以是蛋白质，抗体，抗体片断，肽或多肽，或含有在疾病位点表达的受体或结合位点的识别序列或单位的肽类似物，或者含有在血小板或白细胞上表达的受体或结合位点的识别序列或单位的肽类似物。Q确切的化学组成是基于下述的因素选择的诊断的疾病状态，欲采用的定位机制，和可提供定位率，清除率和放射核素衰减率的理想组合至于本发明的目的，术语血栓栓塞疾病包括由于形成血块引起的静脉和动脉疾病以及肺的栓塞疾病。
在诊断血栓栓塞疾病或动脉硬化时，Q选自共同申请U.S.序列号08/218,861(相当于WO94/22494)所述的环IIb/IIIa受体拮抗剂化合物；专利4,578,079，4,792,525，PCT申请PCT US88/04403，PCT US89/01742，PCT US90/03788，PCT US91/02356和Ojima等人，204th Meeting ofthe Amer.Chem.Soc.，1992，Abstract44中所述的含RGD的肽；下文中所述的作为纤维蛋白原受体拮抗剂的肽EP专利申请90202015.5，90202030.4，90202032.2，90202032.0，90311148.2，90311151.6，90311537.6，或在PCTWO93/23085中所述的可作为IIb/IIIa受体配体的可特定结合的肽和多肽，纤维蛋白聚合反应位点的配体，层粘连蛋白衍生物，纤维蛋白原配体，或凝血因子配体(锝结合的基除外)；与PCT WO90/00178中所述的IIIa蛋白质相对应的低肽；PCT WO90/03391中所述的水蛭素-基肽；PCTWO90/15818中所述的IIb/IIIa受体配体；在PCT WO92/13572(除去锝结合基)或GB9313965.7中所述的血栓，血小板结合或(动脉)粥样硬化斑结合肽；在U.S.专利4,427,646和5,270,030中所述的纤维蛋白结合肽；在U.S.专利5,279,812中所述的水蛭素-基肽；或在U.S.专利5,217,705中所述的纤维蛋白结合蛋白质；在U.S.专利5,086,069中所述与IIb/IIIa受体结合的鸟嘌呤衍生物；或在欧洲专利申请0478328A1和Hartman等，J.Med.Chem.，1992，35，4640中所述的酪氨酸衍生物；或氧化的低密度脂蛋白(LDL)。
在诊断感染，发炎或移植排斥时，Q选自PCT WO93/17719(锝结合基除外)，PCT WO92/13572(锝结合基除外)或U.S.系列号08-140000中所述的白细胞结合肽；在欧洲专利申请90108734.6或A.Fischman等，Semin.Nuc.Med.，1994，24，154中所述的趋化性肽；或在U.S.专利5,277,892所述的白细胞刺激剂(leukostimulatory)。
在诊断癌症时，Q选自UK专利申请8927255.3或PCTWO94/00489所述的生长抑素类似物，PCT WO94/05269所述选择蛋白结合肽，PCT WO93/12819所述的生物-功能区，血小板因子4或生长因子(PDGF，EGF，FGF，TNF，MCSF或I11-8)。
Q也表示与受体或其它组织，器官，酶或液体上的结合位点结合的蛋白质，抗体，抗体片断，肽，多肽，或多肽类似物。其实例包括已证实在患阿尔茨海默氏病的病人体内累积的β-淀粉样蛋白，与心肌和肾受体结合的atrial naturetic因子衍生肽，与组织坏梗塞区域结合抗霉菌素抗体，或定位于体内低氧(hypoxic)区域的硝基咪唑衍生物。
附属二氧配体包括通过至少两个氧给体原子与金属离子配位的配体。其实例包括但不限于葡庚糖酸盐(酯)，葡糖酸盐(酯)，2-羟基异丁酸盐(酯)，乳酸盐(酯)，酒石酸盐(酯)，甘露糖醇，葡糖二酸盐(酯)，麦芽酚，曲酸，2，2，-二(羟甲基)丙酸，4，5-二羟基-1，3-苯二磺酸盐(酯)，或取代或未取代的1，2-或3，4-羟基吡啶酮。(这些例子中配体的名称是指配体的质子或非-质子形式)。
官能化的氨基羧酸盐(酯)包括含有氮给体原子和氧给体原子的的配体。这些配体包括但不限于亚氨基二乙酸，2，3-二氨基丙酸，腈三乙酸，N，N’-乙二胺二乙酸，N，N，N’-乙二胺三乙酸，羟基乙基乙二胺三乙酸，N，N’-乙二胺二-羟基苯基甘氨酸，或欧洲专利申请93302712.0所述的配体(这些例子中配体的名称是指配体的质子或非-质子形式)。
在水溶液中室温至100℃温度下，通过将放射核素的盐，式2试剂，附属配体AL1和附属配体AL2，以及任选的还原剂混合，可以很容易地制备本发明诊断血栓疾病的放射药物及其可药用盐(Q)d’Ln-Ch(2)其中Q，d’，Ln的定义如上和Ch表示放射核素金属螯合剂，在其各自出现时独立地选自R40R41N-N＝C(C1-C3烷基)2，和R40NNH2-，其中R40，R41的定义如上。
或者，本发明的放射药物可通过首先在水溶液中室温至100℃温度下，将放射核素的盐，附属配体AL1和还原剂混合，从而与附属配体AL1形成中间体放射核素复合物，然后加入式2试剂和附属配体AL2并在室温至100℃温度下进一步反应制备。
或者，本发明的放射药物可通过首先在水溶液中室温至100℃温度下，将放射核素的盐，附属配体AL1，式2试剂和还原剂混合，形成中间体放射核素复合物[如共同申请U.S.序列号08/218,861(相当于WO94/22494)所述]，然后加入附属配体AL2并在室温至100℃温度下进一步反应制备。
总的制备时间取决于放射核素的同一性，反应物的同一性和用量以及所采用的制备方法。制备完成可能获得产率＞80％的放射药物，在1分钟内完成或需要更多的时间。如果需要或想要更高纯度的放射药物，可采用本领域熟练技术人员公知的任意多种技术纯化产物，这些技术如液相色谱，固相提取，溶剂提取，渗透或超滤。
本发明的放射核素选自99mTc，186Re，或188Re。在用于诊断时，99mTc是优选的同位素。其半衰期是6小时，它的140KeVγ射线发射能量对所用的γ闪烁照相装置几乎是理想的，本领域熟练技术人员可以很好地设计进行的步骤。铼同位素也具有与γ闪烁照相法相配的γ射线发射能量，但是它们也发射对生物组织危害更大的高能β粒子。也可利用这些β粒子的发射，例如用于癌症的放疗。
99mTc的盐优选是以高锝酸根及可药用阳离子的化学形式存在。优选的高锝酸盐形式是高锝酸钠，如从可Tc-99m发生器中获得。制备本发明放射药物的高锝酸盐的量在0.1mCi-1Ci范围内，或优选在1-200mCi范围内。
式2试剂可按共申请U.S.序列号08/218,861(相当于WO94/22494)所述进行合成。用于制备本发明放射药物的试剂的量在0.1μg-10mg范围内，或更优选在0.5μg-100μg范围内。所用试剂的量根据其它反应物的量和欲制备的式1放射药物的同一性决定。
用于合成本发明放射药物的附属配体AL1可通过合成得到或通过商业途径得到，这些配体包括卤化物，二氧配体和官能化氨基羧酸盐(酯)。二氧配体是指通过至少两个氧给体原子与放射核素配位的配体，其实例包括但不限于葡庚糖酸盐(酯)，葡糖酸盐(酯)，2-羟基异丁酸盐(酯)，乳酸盐(酯)，酒石酸盐(酯)，甘露糖醇，葡糖二酸盐(酯)，麦芽酚，曲酸，2，2，-二(羟甲基)丙酸，4，5-二羟基-1，3-苯二磺酸盐(酯)，或取代或未取代的1，2-或3，4-羟基吡啶酮，或它们的可药用盐。
官能化的氨基羧酸盐(酯)包括通过氮给体原子和氧给体原子二者与放射核素配位的配体。这些配体包括但不限于亚氨基二乙酸，2，3-二氨基丙酸，腈三乙酸，N，N’-乙二胺二乙酸，N，N，N’-乙二胺三乙酸，羟基乙基乙二胺三乙酸，N，N’-乙二胺二-羟基苯基甘氨酸，或欧洲专利申请93302712.0所述的配体，或它们的可药用盐。
卤化物包括氟，氯，溴或碘化物。
附属配体AL1的选择取决于几个因素，包括附属配体的化学和物理性质，所得放射药物生成率，产率，异构物形式的数目，以及配体在冻干药盒制剂中的配伍性能。附属配体的电荷和亲油性可影响放射药物的电荷和亲油性。例如采用4，5-二羟基-1，3-苯二磺酸盐(酯)可得到具有其它两个阴离子基团的放射药物，这是因为磺酸盐(酯)基在生理条件下是阴离子。采用N-烷基取代的3，4-二羟基吡啶酮可得到具有不同亲油性的放射药物，这种不同取决于烷基取代基的大小。
由Bridger等公开的一系列官能化的氨基羧酸盐(酯)可改善锝标记肼修饰蛋白质的生成率。我们已经证实某些这类氨基羧酸盐(酯)可提高本发明放射药物的产率并得到其最少数目的异构形式。优选的附属配体AL1是二氧配体吡喃酮或吡啶酮和官能化的氨基羧酸盐(酯)(其为甘氨酸衍生物)；最优选的是麦黄酮(三(羟基甲基)甲基甘氨酸)。
附属配体AL1的用量在0.1mg-1g范围内，或更优选在1mg-100mg范围内。对具体放射药物而言确切的用量受所采用的步骤和其它反应物的用量和同一性的影响。AL1用量过大可导致由锝标记AL1构成的、不存在生物活性分子的副产物以及由锝标记生物活性分子和附属配体AL1构成的、但不存在附属配体AL2的副产物的生成。AL1用量过小可导致其它副产物如还原水解的锝或锝胶体的生成。
优选的附属配体AL2是三取代的膦或三取代的胂。取代基可以是烷基，芳基，烷氧基，杂环，芳烷基，烷芳基和芳基烷芳基并且可以带有或不带有含杂原子如氧，氮，磷或硫原子的官能基。这些官能基的实例包括但不限于羟基，羧基，氨基甲酰氨基，醚，酮，氨基，铵，磺酸盐(酯)，磺酰胺，磷酸盐(酯)和磷酰胺。这些膦和胂配体可通过商业途径得到也可通过本领域普通技术人员公知的一系列方法进行合成。其中许多方法可见Kosolapoff和Maier，Organic PhosphorusCompoundWiley-InterscienceNew York，1972；Vol，1。
附属配体AL2的选择取决于几个因素，包括附属配体的化学和物理性质，所得放射药物生成率，产率，异构物形式的数目，以及配体对冻干药盒制剂的适应性。本发明优选的附属配体是具有至少一个官能基的配体。官能基的存在影响附属配体的化学和物理性质如碱性，电荷，亲油性，大小，对氧化的稳定性，水溶解度和室温下的物理状态。优选的附属配体是指在水中的溶解度至少是0.001mg/ml的配体。这样的溶解度不需加入增溶剂或共-溶剂，即可使配体用于合成本发明放射药物。
更优选的附属配体AL2包括具有至少一个官能基的三取代的膦或三取代的胂，所述官能基含杂原子氧，硫或氮原子。这些配体可通过商业途径得到也可合成得到。特定的更优选配体的合成可参见下面的参考文献如Bartik等，Inorg.Chem.，1992，31，2667所述合成三(3-磺基苯基)膦，钠盐(TPPTS)。如Kuntz，E.，U.S.专利4,248,802所述合成二(3-磺基苯基)苯基膦，钠盐(TPPDS)和(3-磺基苯基)二苯基膦，钠盐(TPPMS)。如Bartik等，Organometallics，1993，12，164所述制备三(2-(对磺基苯基)乙基)膦，钠盐(TPEPTS)和三(3-(对磺基苯基)丙基)膦，钠盐(TPPPTS)。如Bartik等，Inorg.Chem.，1994，33，164所述合成1，2-二[二(3-磺基苯基)膦基]乙烷，钠盐(DPPETS)。合成其它更优选的附属配体AL2的参考文献包括Kuntz，E.，Br.专利1,540,242，Sinou，D.，等，J.Chem.Soc.ChemCommun.，1986，202和Ahrland，S.等，J.Chem.Soc.，1950，264，276。
更优选的配体AL2含有至少一个官能基或式2试剂的肼基或二嗪基(diazino)部分，该官能基由杂原子构成，其中所述的杂原子不和与附属配体AL1的给体原子竞争的锝结合。配体只通过磷或砷给体结合。这保证了所得的式I放射药物是以最少数目异构物混合物的形式得到。配体也是亲水性的，这已由其水溶解度至少为0.01mg/ml得到证实。配体的这种亲水性保证了足够的浓度以合成高产率的放射药物。本发明对适用溶解度的上限没有限制，因此，更优选的附属配体AL2的亲水性还可覆盖一个宽的范围。
附属配体的电荷和亲水性可影响放射药物的电荷和亲水性。正如在表1中可以看到的，仅在附属配体AL2的同一性方面不同的一系列式I放射药物的亲水性，如反相色谱HPLC的保留时间所测定的那样，也系统地变化。
所用的附属配体AL2的量在0.001mg-1g，或更优选在0.01mg-10mg范围内。对具体放射药物而言，确切用量随着所采用的步骤和其它反应物的量和同一性而变化。AL2用量过大可导致由锝标记AL2构成的、不存在生物活性分子的副产物或由锝标记生物活性分子和附属配体AL2构成的、但不存在附属配体AL1的副产物的生成。
合成式I放射药物可任选采用还原剂。合适的还原剂包括锡盐，连二亚硫酸盐或亚硫酸氢盐，硼氢化物盐，以及甲脒亚磺酸，其中的盐仅指可药用的形式，优选的还原剂是锡盐。还原剂的使用是任意的，这是因为附属配体AL2也可作为还原剂还原Tc-99m-高锝酸盐。所用还原剂的量在0.001mg-10mg，或更优选在0.005mg-1mg范围内。
本发明的药盒由下述(成分)的无菌、无热的混合物组成式2试剂，附属配体AL1，附属配体AL2，和任选含有还原剂。优选的，上述药盒由下述(成分)的冻干混合物组成预定量的式2试剂，预定量的附属配体AL1，预定量的附属配体AL2，和任选含有预定量的还原剂。药盒还可任选含有填充剂或冷冻干燥辅剂或缓冲液。可接受的一系列填充剂或冷冻干燥辅剂和可接受的一系列缓冲液可见United StatesPharmacopeia。
本发明的放射药物的具体结构取决于生物活性分子Q的同一性，数字d’，连接基团Ln的同一性，螯合剂部分Ch’的同一性，附属配体AL1的同一性，附属配体AL2的同一性，和放射核素Mt的同一性。Q，Ln，和Ch’的同一性以及数字d’通过式2试剂的选择确定。对给定的式2试剂来说，试剂的量，附属配体AL1和AL2的量和同一性，放射核素Mt的同一性以及所采用的合成条件即可确定式1放射药物的结构。
采用式2试剂浓缩物(＜100μg/ml)合成的放射药物含有一个酰肼基或diazenido基Ch’；x的值为1。采用＞1mg/ml浓缩物合成的(放射药物)含有两个酰肼基或diazenido基；x的值为2。两个Ch’基团可相同或不同。对大多数应用来说，只注射入有限量的生物活性分子而且并不产生不需要的副作用如放射药物的化学毒性，对生物过程或变化的生物分布的干扰。因此，x是2的放射药物，它需要更高浓度的含在生物活性分子部分的式2试剂来合成，在合成后必须进行稀释或纯化以避免副作用。
所用的附属配体AL1和AL2的量和同一性将决定y和z的值，y可为0-3的整数，z可为1-4的整数。结合起来，上述y和z的值可产生一个锝配位范围，组成为至少5个，不超过7个给体原子，优选6个给体原子。对单齿配位的式A9膦或砷来说，z表示1-4的整数；对双齿配位的式A10-A11膦或砷来说，z表示1或2。对单齿膦或砷来说，优选的组合为y是1或2和z是1。对双齿膦或砷来说，优选的组合为y是0或1和z是1或2。
放射药物通常溶于生理盐水通过静脉注射，剂量为1-100mCi/70kg体重，或优选的剂量是5-50mCi。采用已知的方法进行造影。
实施例部分在下面实施例中所述的，用于合成本发明放射药物的物质可如下所述获得式2试剂如共同申请U.S序列号08/218,861(相当于WO94/22494)所述制备。附属配体麦黄酮和曲酸可分别由ResearchOrganic Inc.和Aldrich Chemical Co.，得到。膦可如上所述合成，只有三(羟基丙基)膦是由Cytec Canada Limited公司得到和三(羟基乙基)膦是由Aldrich Chemical Co.得到。去离子水从Milli-Q水系统获得，其质量＞18MΩ。锝-99m-高锝酸盐(99mTcO4-)是从Dupont Pharma99Mo/99mTc发生器得到的。氯化亚锡二水合物是从Aldrich Chemical Co.得到。D-Phe(OMe)是从Bachem Bioscience Inc.得到。
这里采用下述缩写TPPTS 三(3-磺基(sulfonato)苯基)膦，钠盐
TPPDS 二(3-磺基苯基)苯基膦，钠盐TPPMS(3-磺基苯基)二苯基膦，钠盐TPEPTS三(2-(对磺基苯基)乙基)膦，钠盐TPPPTS三(3-(对磺基苯基)丙基)膦，钠盐THPP三(3-羟基丙基)膦TCEP三(2-羧基乙基)膦DPPETS 1，2-二[二(3-磺基苯基)膦]乙烷，钠盐实施例1合成99mTc(麦黄酮)(TPPTS)-环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca))向干净的10cc管瓶中加入溶于0.7ml去离子水中的40mg麦黄酮，溶于水中的5μg环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca))，溶于生理盐水中的20mCi99mTcO4-，溶于水中的1mgTPPTS，和溶于0.1N HCl中的20μgSnCl2·2H2O。总的反应体积是1-1.5ml，用1N盐酸将PH调至4，在50℃加热溶液30分钟，然后通过HPLC方法1和ITLC方法1进行分析。分析数据和产率如表1所示。
实施例2合成99mTc(麦黄酮)(TPPDS)-环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca))如实施例1所述进行合成，但是取代以TPPDS作为膦共-配体和在80℃加热30分钟。分析数据和产率如表1所示。
实施例3合成99mTc(麦黄酮)(TPPMS)-环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca))如实施例1所述进行合成，但是取代以TPPMS作为膦共-配体。分析数据和产率如表1所示。
实施例4合成99mTc(麦黄酮)(TPEPTS)-环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca))向10cc管瓶中加入溶于0.5ml去离子水中的40mg麦黄酮，溶于100μl水中的5μg XV-120，溶于0.5ml 0.9％生理盐水中的50mCi99mTcO4-，溶于0.2ml水中的1.0mgTPEPTS，和溶于0.1N HCl中的20μg SnCl2·2H2O。总的反应体积是1-1.4ml，用1N氢氧化钠将PH调至7，在80℃加热溶液30分钟，然后通过HPLC方法1和ITLC方法1进行分析。分析数据和产率如表1所示。
实施例5合成99mTc(麦黄酮)(TPPPTS)-环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca))如实施例4所述进行合成，但是取代以TPPPTS作为膦共-配体。分析数据和产率如表1所示。
实施例6合成99mTc(麦黄酮)(DPPETS)-环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca))向干净的10cc管瓶中加入溶于0.7ml去离子水中的40mg麦黄酮，溶于水中的5μg环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca))，溶于生理盐水中的20mCi99mTcO4-，和溶于0.1N HCl中的20μgSnCl2·2H2O。总的反应体积是1-1.5ml。在室温放置溶液5分钟，然后加入溶于水中的1mg DPPETS，将PH调至4，然后在80℃加热溶液20分钟，然后通过HPLC方法1和ITLC方法1进行分析。分析数据和产率如表1所示。
实施例7合成99mTc(麦黄酮)(THPP)-环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca))试剂分两步合成，即首先形成试剂99mTc(麦黄酮)-环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca))，然后与THPP反应制备。
步骤1 合成99mTc(麦黄酮)-环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca))向10ml管瓶中加入0.3ml99mTcO4-(～100mCi/ml)的生理盐水溶液，接着加入溶于生理盐水中的10μg环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca))，溶于水中的20mg麦黄酮(PH＝7)，和溶于1N HCl中的20μg SnCl2·2H2O。在室温放置反应混合物15-20分钟，然后通过HPLC方法1和ITLC方法1进行分析。形成复合物的产率是90-95％。
步骤2 与THPP的反应向上述反应溶液中加入溶于生理盐水的5mg THPP，在50℃加热混合物15-20分钟，通过HPLC方法1和ITLC方法1分析所得的溶液。分析数据和产率如表1所示。
实施例8合成99mTc(麦黄酮)(TCEP)-环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca))试剂分两步合成，即首先形成试剂99mTc(麦黄酮)-环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca))，然后与TCEP反应制备。
步骤1合成99mTc(麦黄酮)-环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca))向10ml管瓶中加入溶于0.5ml水中的40mg麦黄酮，溶于100μl水中的5μg环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca))，0.5ml99mTcO4-(～100mCi/ml)的生理盐水溶液，和溶于1N HCl中的20μgSnCl2·2H2O。总的反应体积是1-1.5ml。在室温放置反应混合物15-20分钟，然后通过HPLC方法1和ITLC方法1进行分析。形成复合物的产率是90-95％。
步骤2与TCEP的反应向上述反应溶液中加入溶于0.2ml水的1.0mgTCEP，采用1N HCl将PH调至4，在50℃加热混合物15-20分钟，通过HPLC方法1和ITLC方法1分析所得的溶液。分析数据和产率如表1所示(产物以可拆分的两种异构形式存在)。
实施例9合成99mTc(曲酸)(TPPTS)-环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca))如实施例1所述进行合成，以曲酸(30mg)取代麦黄酮。分析数据和产率如表1所示。
实施例10合成99mTc(麦黄酮)(TPPTS)-(肼基-烟碱基-D-Phe(OMe))步骤1合成2-肼基-烟碱基-D-Phe(OMe)如共同申请U.S.序列号，实施例3所述进行合成，但是以D-Phe(OMe)取代环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb-(5-Aca)。
步骤2合成99mTc(麦黄酮)(TPPTS)-(肼基-烟碱基-D-Phe(OMe))如实施例1所述进行合成，但是以2-肼基-烟碱基-D-Phe(OMe)取代环(D-Val-NMeArg-Gly-Asp-Mamb(肼基-烟碱基-5-Aca)。产物通过保留时间(17.6分钟和18.0分钟)识别(HPLC方法1)，产率为85％。
纯化作为一般规律，正如下述分析手段所测定的那样，这里所述的方法提供的化合物是纯的。但是如果需要更高的纯度，这里提供的化合物可进一步在HPLC上纯化，即如下所示，通过采用方法1收集HPLC柱洗脱液中的化合物进行。然后蒸发挥发物并将残留物再溶于2％麦黄酮的生理盐水溶液中。
分析方法HPLC方法1柱Vydac，C18，250mm×4.6mm，300埃孔径流速1.0ml/分钟溶剂A10mM一磷酸钠，PH＝6.0溶剂B100％乙腈梯度0％B 30％B 75％B 0％B0分钟 15分钟 25分钟 30分钟通过NaI探针测定HPLC方法2柱Zorbax-RX，C18，250mm×4.6mm，流速1.0ml/分钟溶剂A95％5mM四丁基铵离子，30mM磷酸盐，PH＝3.7；5％乙腈溶剂B20％溶剂A/乙腈梯度0％B10％B40％B60％B100％B
0分钟20分钟30分钟35分40分钟通过NaI探针测定ITLC方法1Gelman ITLC-SG条，1cm×7.5cm，在1∶1丙酮∶生理盐水(0.9％)中展开。
表199mTc试剂的分析数据和产率
表1中所列的数值是采用HPLC方法1得到的。对大多数这些实施例只给出了一个保留时间。含有这些放射药物的两类通常不能通过这种HPLC方法完全分开。典型的，在显示的主峰上有一个肩峰。
应用这里提供的放射药物可用作心血管疾病如血栓形成疾病或动脉硬化，感染疾病和癌症的造影诊断试剂。该放射药物由膦或胂结合锝—99m标记的肼或二嗪修饰的生物活性分子组成，所述活性分子可选择性地对疾病位点进行定位，从而通过γ闪烁照相法可得到所处位点的影像。通过对犬深层静脉血栓形成模型进行造影研究，来评估实施例1-3所述复合物作为诊断血栓形成疾病的放射药物的潜在的临床实用性。通过动静脉分流术(shunt)模型测定复合物的血清除率。上述的造影研究表明这里提供的放射药物可用来对血栓造影。
犬深层静脉血栓形成模型该模型包括三个一组的行为(凝固性过高的状态，停滞阶段，低切力(shear)环境)，这些行为对静脉富-纤维蛋白的生长活性的血栓的形成是必须的。试验步骤如下用戊巴比妥钠(35mg/kg，静脉)麻醉成年的两种性别的杂种狗(9-13kg)并通过气管内管(12次(stroke)/分钟，25ml/kg)与室内空气相通。在测定动脉压时，用生理盐水填充的聚乙烯导管(PE-240)向右股动脉插套管并与Statham压力转换器(P23ID；Oxnard，CA)相连。通过阻抑脉压信号测定平均动脉血压。采用心动计数器(Biotach，GrassQuincy，MA)测定心率，所述的心动计数器是由导程II心电图(通过肢导程产生)起动的。向右股静脉插套管(PE-240)进行给药。分离出两侧颈静脉的5厘米片断，剥离筋膜并丝线缝合。向管内插入低温植物(microthermister)探针，它可作为静脉血流的一种非直接的测定方法。采用气球栓子切除术导管以引发一15分钟的停滞期，在此期间将5U凝血酶施用至堵塞的片断，可随之引发凝固性过高的状态(AmericanDiagnosticia，Greenwich CT)。15分钟后，通过给气球放气重新恢复原有流动。在恢复流动的第一个5分钟内注入放射药物，采用γ闪烁照相法监测掺入速率。
动静脉分流术模型用戊巴比妥钠(35mg/kg，静脉)麻醉成年的两种性别的杂种狗(9-13kg)并通过气管内管(12次/分钟，25ml/kg)与室内空气相通。在测定动脉压时，用生理盐水填充的聚乙烯导管(PE-240)向左颈动脉插套管并与Statham压力转换器(P23ID；Oxnard，CA)相连。通过阻抑脉压信号测定平均动脉血压。采用心动计数器(Biotach，GrassQuincy，MA)测定心率，所述的心动计数器是由导程II心电图(通过肢导程产生)起动的。向颈静脉插套管(PE-240)进行给药。用二氧化硅处理过的(Sigmacote，Sigma Chemical Co.St Louis，MO)，生理盐水填充的聚乙烯导管(PF-240)向股动脉和股静脉内插套管并与二氧化硅处理过的管(PE-240)的5厘米片断相连，形成体外动-静脉分流术(A-V)。采用多普勒流动系统(型号VF-1，Crystal BiotechInc，Hopkinton，MA)和置于分流位点附近的流体探针(2-2.3mm，Titronics Med.Inst.，Iowa City，IA)监测分流(术)的开放情况。在多种波动描计器(型号7D Grass)上连续测定所有的参数，走纸速度10mm/分钟或25mm/秒。
15分钟的术后稳定期后，通过向分流处之一(另一个作为对照)引入血栓形成表面(4-0股丝线，长5厘米，Ethicon Inc.，Somerville，NJ)形成阻塞性血栓。连续两个1小时分流术期间均采用灌注液形式用5分钟施用试验剂，在插入血栓形成表面之前5分钟开始进行。各个1小时分流术之后，小心地拆除丝线和称重并通过计数(gamma wellcounting)测定结合％。分流术中分离的丝线的总重量减去植入前丝线的重量，可以计算出血栓的重量。在第一次分流术前动脉取血回收并在之后每30分钟取血以测定血清除率，总的血胶原-诱导血小板凝集，血栓-诱导血小板脱颗粒(血小板ATP的释放)，血栓形成前时间和血小板计数。在30分钟间隔内也有样板取血时间。
结果对实施例1和2放射药物的造影研究的结果如图2和Tc-99m-白蛋白，阴性对照所示。上图表示血栓对血液的比例，下图表示血栓对肌肉的比例，上述结果是通过画出合适的感兴趣的区域并比较各个区域计数从造影得到的。造影结果数值的记录是在灌注化合物后的第15，60和120分钟进行的，甚至早在15分钟，这三种放射药物的比值高于阴性对照组；在60-120分钟区别是显著的。
其中生物活性分子Q为趋化性肽的复合物，通过在病灶感染的兔模型中进行造影研究，可被评价为诊断感染的有效的临床应用的放射药物。
兔病灶感染模型采用灭菌技术，用氯胺酮/甲苯噻嗪(15/1.5mg/kg，静脉)通过耳缘静脉对两种性别的成年兔子(2-3kg)进行麻醉。向各个动物的后股肌肉内施用1ml2×10E9的eColi的悬浮液。在18-48小时后合适的时间点，各动物用戊巴比妥钠(35mg/kg，静脉)麻醉，然后进行气管造口术和采用啮齿动物呼吸机使动物通气。在测定动脉压时，用生理盐水填充的聚乙烯导管(PE-240)向左颈动脉插套管并与压力转换器相连。通过阻抑脉压信号测定平均动脉血压。采用心动计数器测定心率，所述的心动计数器是由导程II心电图(通过肢导程产生)起动的。向颈静脉插套管进行给药。用多种波动描计器上连续测定所有的参数。
15分钟的术后稳定期后，在1-5分钟内注入药剂(1-20mCi)。对与发炎位点的结合率的联机测定，是采用治疗后0-3和18-24小时的系列闪烁曲线获得的。造影目前是按5分钟/观察进行的。为了确定肽的位置，感兴趣的区域(的确定)是在相应时间下通过将感染股与对照动脉(contralateral)正常肌肉比较得到。在给药之前抽取动脉血并在之后每30分钟抽血测定血清除率，血液图谱和白细胞功能。这一计划完成后，杀死动物并通过γ孔计数(gamma well counting)测定化合物的生物分布。
权利要求
1.含有下述成分的放射药物过渡金属放射核素，过渡金属螯合剂，与所述螯合剂相连的生物活性基团，第一附属配体，可稳定放射药物的第二附属配体，在所述螯合剂和所述所述生物活性基团之间任选含有连接基团。
2.根据权利要求1的放射药物，其中所述螯合剂和所述生物活性基团之间含有连接基团。
3.下式表示的权利要求2的放射药物及其可药用盐[(Q)d’Ln-Ch’]x-Mt(AL1)y(AL2)z(1)其中Q表示生物活性分子；d’是1-20；Ln表示下式的连接基团M1-[Y1(CR55R56)f(Z1)f’Y2]f’-M2其中M1表示-[(CH2)gZ1]g’-(CR55R56)g”；M2表示-(CR55R56)g”[Z1(CH2)g]g’-；g独立地表示0-10；g’独立地表示0-1；g”独立地表示0-10；f独立地表示0-10；f’独立地表示0-10；f”独立地表示0-1；当Y1和Y2各自出现时，独立地选自一个键，O，NR56，C＝O，C(＝O)O，OC(＝O)O，C(＝O)NH-，C＝NR56，S，SO，SO2，SO3，NHC(＝O)，(NH)2C(＝O)，(NH)2C(＝S)；当Z1各自出现时，独立地选自被0-4个R57取代的C6-C14饱和，部分饱和或芳香的碳环系；和任选被0-4个R57取代的杂环系；当R55和R56各自出现时，独立地选自氢；被0-5个R57取代的C1-C10烷基；其中芳基被0-5个R57取代的烷芳基；当R57各自出现时，独立地选自氢；OH；NHR58，C(＝O)R58，OC(＝O)R58；OC(＝O)OR58；C(＝O)OR58，C(＝O)NR58-，C≡N，SR58，SOR58，SO2R58，NHC(＝O)R58，NHC(＝O)NHR58，NHC(＝S)NHR58；或者，当与另外的分子Q相连时，当R57各自出现时，独立地选自基团O，NR58，C＝O，C(＝O)O，OC(＝O)O，C(＝O)N-，C＝NR58，S，SO，SO2，SO3，NHC(＝O)，(NH)2C(＝O)，(NH)2C＝S；和当R58各自出现时，独立地选自基团氢；C1-C6烷基；苄基；和苯基；x和y各自独立的表示1或2；z独立地表示1-4；Mt表示选自9mTc，186Re和188Re的过渡金属放射核素；Ch’表示与过渡金属放射核素Mt配合的放射核素金属螯合剂，当其各自出现时，独立地选自R40N＝N+＝，R40R41N-N＝，R40N＝和R40N＝N(H)-，其中当R40各自出现时，独立地选自与Ln相连的键，0-3个R52取代的C1-C10烷基，0-3个R52取代的芳基，0-3个R52取代的环烷基，0-3个R52取代的杂环基，0-3个R52取代的杂环烷基，0-3个R52取代的芳烷基和0-3个R52取代的烷芳基；R41独立地选自氢，0-3个R52取代的芳基，0-3个R52取代的C1-C10烷基，和0-3个R52取代的杂环基；当R52各自出现时，独立地选自与Ln相连的键，＝O，F，Cl，Br，I，-CF3，-CN，-CO2R53，-C(＝O)R53，-C(＝O)N(R53)2，-CHO，-CH2OR53，-OC(＝O)R53，-OC(＝O)OR53a，-OR53，-OC(＝O)N(R53)2，-NR53C(＝O)R53，-NR54C(＝O)OR53a，-NR53C(＝O)N(R53)2，-NR54SO2N(R53)2，-NR54SO2NR53a，-SO3H，-SO2R53a，-SR53，-S(＝O)R53a，-SO2N(R53)2，-N(R53)2，-NHC(＝NH)NHR53，-C(＝NH)NHR53，＝NOR53，NO2，-C(＝O)NHOR53，-C(＝O)NHNR53R53a，-OCH2CO2H，2-(1-吗啉子基)乙氧基；R53，R53a，和R54当其各自出现时独立地选自氢，C1-C6烷基和与Ln相连的键；AL1表示选自下述的第一附属配体二氧配体，官能化的氨基羧酸盐(酯)，和卤化物；AL2表示可稳定放射药物的附属配体，选自A9和A10-W-A11，其中A9在其各自出现时独立地表示选自下述的基团PR61R62R63和AsR61R62R63；A10和A11在其各自出现时独立地表示选自下述的基团PR61R62和AsR61R62；W表示选自下列的间隔基团被0-3个R70取代的C1-C10烷基，被0-3个R70取代的芳基，被0-3个R70取代的环烷基，被0-3个R70取代的杂环，被0-3个R70取代的杂环基烷基，被0-3个R70取代的芳烷基，被0-3个R70取代的烷芳基；R61，R62和R63当其各自出现时独立地表示被0-3个R70取代的C1-C10烷基，被0-3个R70取代的芳基，被0-3个R70取代的环烷基，被0-3个R70取代的杂环，被0-3个R70取代的芳烷基，被0-3个R70取代的烷芳基；被0-3个R70取代的芳基烷芳基；当R70各自出现时独立地选自F，Cl，Br，I，-CF3，-CN，-CO2R71，-C(＝O)R71，-C(＝O)N(R71)2，-CH2OR71，-OC(＝O)R71，-OC(＝O)OR71a，-OR71，-OC(＝O)N(R71)2，-NR71C(＝O)R71，-NR71C(＝O)OR71，-NR71C(＝O)N(R71)2，SO3-，-NR71SO2N(R71)2，-NR71SO2R71a，-SO3H，-SO2R71，-S(＝O)R71，-SO2N(R71)2，-N(R71)2，-N(R71)3+，-NHC(＝NH)NHR71，-C(＝NH)NHR71，＝NOR71，NO2，-C(＝O)NHOR71，-C(＝O)NHNR71R71a，-OCH2CO2H；和R71和R71a当其各自出现时独立地表示氢和C1-C6烷基。
4.根据权利要求3的放射药物，其中Q表示选自下述的生物活性分子IIb/IIIa受体拮抗剂，IIb/IIIa受体配体，血纤维蛋白(单体)结合肽，白细胞结合肽，趋化性肽，生长激素释放抑制因子类似物，以及选择蛋白结合肽；d’是1-3；Ln表示下式的连接基团-(CR55R56)g”-([Y1(CR55R56)fY2]f’-(CR55R56)g”-其中g”表示0-5；f表示0-5；f’表示1-5；当Y1和Y2各自出现时，独立地选自O，NR56，C＝O，C(＝O)O，OC(＝O)O，C(＝O)NH-，C＝NR56，S，SO，SO2，SO3，NHC(＝O)，(NH)2C(＝O)，(NH)2C＝S；当R55和R56各自出现时，独立地选自氢，C1-C10烷基，和烷芳基x和y各自独立的表示1或2；z独立地表示1-2；Mt表示99mTc；Ch’表示与过渡金属放射核素Mt配合的放射核素金属螯合剂，当其各自出现时，独立地选自R40N＝N+＝，R40R41N-N＝，R40N＝和R40N＝N(H)-，其中当R40各自出现时，独立地选自0-3个R52取代的芳基，0-3个R52取代的杂环基；当R41各自出现时，独立地选自氢，0-1个R52取代的芳基，0-1个R52取代的C1-C3烷基，和0-1个R52取代的杂环基；当R52各自出现时，独立地选自与Ln相连的键，-CO2R53，-CH2OR53，-SO3H，-SO2R53a，-N(R53)2，-N(R53)3+，-NHC(＝NH)NHR53和-OCH2CO2H；R53，R53a当其各自出现时独立地选自氢，C1-C3烷基；AL1选自下述基团吡喃酮，吡啶酮，和官能化的氨基羧酸盐(酯)；AL2选自下述基团A9和A10-W-A11，其中A9表示PR61R62R63；A10和A11表示PR61R62；W表示选自下列的间隔基团被0-3个R70取代的C1-C3烷基，被0-3个R70取代的芳基，被0-3个R70取代的杂环；R61，R62和R63当其各自出现时独立地选自被0-3个R70取代的C1-C3烷基，被0-3个R70取代的芳基，被0-3个R70取代的杂环；当R70各自出现时独立地选自-CO2R71，-OR71，SO3-，和-SO3H；和R71表示氢。
5.根据权利要求4的放射药物，其中Q表示选自下述的生物活性分子IIb/IIIa受体拮抗剂，趋化性肽；d’是1；Ln表示下式的连接基团-(CR55R56)g”-([Y1(CR55R56)fY2]f’-(CR55R56)g”-其中g”表示0-5；f表示0-5；f’表示1-5；当Y1和Y2各自出现时，独立地选自O，NR56，C＝O，C(＝O)O，OC(＝O)O，C(＝O)NH-，C＝NR56，S，NHC(＝O)，(NH)2C(＝O)，(NH)2C＝S；R55和R56表示氢；x和y是1；z是1；Ch’表示与过渡金属放射核素Mt配合的放射核素金属螯合剂，当其各自出现时，独立地选自R40N＝N+＝，和R40R41N-N＝；R40在其各自出现时，独立地选自R52取代的杂环基；R41表示氢；R52表示与Ln相连的键；AL1表示麦黄酮；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63当其各自出现时独立地选自被0-3个R70取代的C1-C3烷基，被0-3个R70取代的芳基；当R70各自出现时独立地选自-CO2H，-OH，-SO3H，-SO3-。
6.根据权利要求3的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
和Ch’与Ln通过*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；AL1表示麦黄酮；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63各自表示在间位上带有SO3H或SO3-基团的苯基；x，y和z是1。
7.根据权利要求3的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
和Ch’与Ln通过*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；AL1表示麦黄酮；AL2表示PR61R62R63，其中R61表示苯基，R62和R63各自表示在间位上带有SO3H或SO3-基团的苯基；和x，y和z是1。
8.根据权利要求3的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过以*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
和Ch’与Ln通过以*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；AL1表示麦黄酮；AL2表示PR61R62R63，其中R61和R62表示苯基，和R63表示在间位上带有SO3H或SO3-基团的苯基；x，y和z是1。
9.根据权利要求3的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
并且Ch’与Ln通过*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；AL1表示麦黄酮；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63各自表示对-(2-苯基乙基)苯基，其中苯基乙基在对位上带有SO3H或SO3-基团；和x，y和z是1。
10.根据权利要求3的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
和Ch’与Ln通过*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；AL1表示麦黄酮；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63各自表示对-(2-苯基丙基)苯基，其中苯基丙基在对位上带有SO3H或SO3-基团；x，y和z是1。
11.根据权利要求3的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
和Ch’与Ln通过*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；AL1表示麦黄酮；AL2表示R61R62PCH2CH2PR61R62，其中R61，R62各自表示在间位上可有SO3H或SO3-基团的苯基；x，y和z是1。
12.根据权利要求3的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
和Ch’与Ln通过*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；AL1表示麦黄酮；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63表示被一个OH取代的C3-烷基；和x，y和z是1。
13.根据权利要求3的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
和Ch’与Ln通过*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；AL1表示麦黄酮；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63表示CH2CH2COOH；和x，y和z是1。
14.根据权利要求3的放射药物，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；Ch’是
或
和Ch’与Ln通过*表示的碳原子相连；Mt表示99mTc；AL1表示麦曲酸；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63各自表示在间位上带有SO3H或SO3-基团的苯基；x，和z是1；和y是2。
15.对哺乳动物进行放射造影的方法，该方法包括(i)给所述哺乳动物施用有效量的权利要求1-14任意一项所述的放射药物，以及(ii)采用放射造影装置对哺乳动物进行扫描。
16.通过放射造影显示哺乳动物(体内)血小板沉积位置的方法，该方法包括(i)给所述哺乳动物施用有效量的权利要求6-14任意一项所述的放射药物，以及(ii)采用放射造影装置对哺乳动物进行扫描。
17.测定哺乳动物(体内)血小板沉积的方法，该方法包括给所述哺乳动物施用权利要求6-14任意一项所述的放射药物组合物，以及给所述的哺乳动物造影。
18.诊断哺乳动物与血小板沉积有关的疾病的方法，该方法包括给所述哺乳动物施用权利要求6-14任意一项所述的放射药物组合物，以及给所述的哺乳动物造影。
19.制备放射药物的药盒，该药盒包括(a)下式的预定数量的无菌可药用试剂(Q)d’Ln-Ch；(b)选自下列的预定数量的无菌可药用第一附属配体AL1二氧配体，官能化的氨基羧酸盐(酯)，和卤化物；和(c)选自下列的预定数量的无菌可药用第二附属配体AL2A9和A10-W-A11；其中Q表示生物活性分子；d’是1-20；Ln表示下式的连接基团M1-[Y1(CR55R56)f(Z1)f’Y2]f’-M2其中M1表示-[(CH2)gZ1]g’-(CR55R56)g”-；M2表示-(CR55R56)g”-[Z1(CH2)g]g’-；g独立地表示0-10；g’独立地表示0-1；g”独立地表示0-10；f独立地表示0-10；f’独立地表示0-10；f’独立地表示0-1；当Y1和Y2各自出现时，独立地选自一个键，O，NR56，C＝O，C(＝O)O，OC(＝O)O，C(＝O)NH-，C＝NR56，S，SO，SO2，SO3，NHC(＝O)，(NH)2C(＝O)，(NH)2C(＝S)；当Z1各自出现时，独立地选自被0-4个R57取代的C6-C14饱和，部分饱和或芳香碳环系；和任选被0-4个R57取代的杂环系；当R55和R56各自出现时，独立地选自氢；被0-5个R57取代的C1-C10烷基；其中芳基被0-5个R57取代的烷芳基；当R57各自出现时，独立地选自氢；OH；NHR58，C(＝O)R58，OC(＝O)R58；OC(＝O)OR58；C(＝O)OR58，C(＝O)NR58-，C≡N，SR58，SOR58，SO2R58，NHC(＝O)R58，NHC(＝O)NHR58，NHC(＝S)NHR58；或者，当与另外的分子Q相连时，当R57各自出现时，独立地选自基团O，NR58，C＝O，C(＝O)O，OC(＝O)O，C(＝O)N-，C＝NR58，S，SO，SO2，SO3，NHC(＝O)，(NH)2C(＝O)，(NH)2C＝S；和当R58各自出现时，独立地选自基团氢；C1-C6烷基；苄基；和苯基；Ch表示放射核素金属螯合剂，当其各自出现时，独立地选自R40R41N-N＝C(C1-C3烷基)2和R40NNH2-，其中当R40各自出现时，独立地选自与Ln相连的键，0-3个R52取代的C1-C10烷基，0-3个R52取代的芳基，0-3个R52取代的环烷基，0-3个R52取代的杂环基，0-3个R52取代的杂环烷基，0-3个R52取代的芳烷基和0-3个R52取代的烷芳基；R41独立地选自氢，0-3个R52取代的芳基，0-3个R52取代的C1-C10烷基，和0-3个R52取代的杂环基；当R52各自出现时，独立地选自与Ln相连的键，＝O，F，Cl，Br，I，-CF3，-CN，-CO2R53，-C(＝O)R53，-C(＝O)N(R53)2，-CHO，-CH2OR53，-OC(＝O)R53，-OC(＝O)OR53a，-OR53，-OC(＝O)N(R53)2，-NR53C(＝O)R53，-NR54C(＝O)OR53a-NR53C(＝O)N(R53)2，-NR54SO2N(R53)2，-NR54SO2NR53a，-SO3H，-SO2R53a，SR53，-S(＝O)R53a，-SO2N(R53)2，-N(R53)2，-NHC(＝NH)NHR53，-C(＝NH)NHR53，＝NOR53，NO2，-C(＝O)NHOR53，-C(＝O)NHNR53R53a，-OCH2CO2H，2-(1-吗啉子基)乙氧基；R53，R53a，和R54当其各自出现时独立地选自氢，C1-C6烷基和与Ln相连的键；A9在其各自出现时独立地表示选自下述的基团PR61R62R63和AsR61R62R63；A10和A11在其各自出现时独立地表示选自下述的基团PR61R62和AsR61R62；W表示选自下列的间隔基团被0-3个R70取代的C1-C10烷基，被0-3个R70取代的芳基，被0-3个R70取代的环烷基，被0-3个R70取代的杂环，被0-3个R70取代的杂环烷基，被0-3个R70取代的芳烷基，被0-3个R70取代的烷芳基；R61，R62和R63当其各自出现时独立地表示被0-3个R70取代的C1-C10烷基，被0-3个R70取代的芳基，被0-3个R70取代的环烷基，被0-3个R70取代的杂环，被0-3个R70取代的芳烷基，被0-3个R70取代的烷芳基；被0-3个R70取代的芳基烷芳基；当R70各自出现时独立地选自F，Cl，Br，I，-CF3，-CN，-CO2R71，-C(＝O)R71，-C(＝O)N(R71)2，-CH2OR71，-OC(＝O)R71，-OC(＝O)OR71a，-OR71，-OC(＝O)N(R71)2，-NR71C(＝O)R71，-NR71C(＝O)OR71，-NR71C(＝O)N(R71)2，SO3-，-NR71SO2N(R71)2，-NR71SO2NR71a，-SO3H，-SO2R71，-S(＝O)R71，-SO2N(R71)2，-N(R71)2，-N(R71)3+，-NHC(＝NH)NHR71，-C(＝NH)NHR71，＝NOR71，NO2，-C(＝O)NHOR71，-C(＝O)NHNR71R71a，-OCH2CO2H；和R71和R71a当其各自出现时独立地表示氢和C1-C6烷基。
20.根据权利要求19的药盒，其中Q表示选自下述的生物活性分子IIb/IIIa受体拮抗剂，IIb/IIIa受体配体，血纤维蛋白(单体)结合肽，白细胞结合肽，趋化性肽，生长激素释放抑制因子类似物，以及选择蛋白结合肽；d’是1-3；Ln表示下式的连接基团-(CR55R56)g”-([Y1(CR55R56)fY2]f’-(CR55R56)g”-其中g”表示0-5；f表示0-5；f’表不1-5；当Y1和Y2各自出现时，独立地选自O，NR56，C＝O，C(＝O)O，OC(＝O)O，C(＝O)NH-，C＝NR56，S，SO，SO2，SO3，NHC(＝O)，(NH)2C(＝O)，(NH)2C＝S；当R55和R56各自出现时，独立地选自氢，C1-C10烷基，(C1-C10烷基)芳基；AL1选自下述基团吡喃酮，吡啶酮，和官能化的氨基羧酸盐(酯)；AL2选自下述基团A9和A10-W-A11，其中A9表示PR61R62R63；A10和A11表示PR61R62；W表示选自下列的间隔基团被0-3个R70取代的C1-C3烷基，被0-3个R70取代的芳基，被0-3个R70取代的杂环；R61，R62和R63当其各自出现时独立地选自被0-3个R70取代的C1-C3烷基，被0-3个R70取代的芳基，被0-3个R70取代的杂环；当R70各自出现时独立地选自-CO2R71，-OR71，SO3-，和-SO3H；和R71表示氢。
21.-根据权利要求20的药盒，其中Q表示选自下述的生物活性分子IIb/IIIa受体拮抗剂，趋化性肽；d’是1；Ln表示下式的连接基团-(CR55R56)g”-[Y1(CR55R56)fY2]f’-(CR55R56)g”-其中g”表示0-5；f表示0-5；f’表示1-5；当Y1和Y2各自出现时，独立地选自O，NR56，C＝O，C(＝O)O，OC(＝O)O，C(＝O)NH-，C＝NR56，S，NHC(＝O)，(NH)2C(＝O)，(NH)2C＝S；R55和R56表示氢；AL1表示麦黄酮；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63当其各自出现时独立地选自被0-3个R70取代的C1-C3烷基，被0-3个R70取代的芳基；当R70各自出现时独立地选自-CO2H，-OH，-SO3H，-SO3-。
22.根据权利要求21的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63各自表示在间位上带有SO3H或SO3-基团的苯基。
23.根据权利要求21的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL2表示PR61R62R63，其中R61表示苯基，R62和R63各自表示在间位上带有SO3H或SO3-基团的苯基。
24.根据权利要求21的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL2表示PR61R62R63，其中R61和R62表示苯基，和R63表示在间位上带有SO3H或SO3-基团的苯基。
25.根据权利要求21的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63各自表示对-(2-苯基乙基)苯基，其中苯基乙基在对位上带有SO3H或SO3-基团。
26.根据权利要求21的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63各自表示对-(2-苯基丙基)苯基，其中苯基丙基在对位上带有SO3H或SO3-基团。
27.根据权利要求21的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL2表示R61R62PCH2CH2PR61R62，其中R61，R62各自表示在间位上带有SO3H或SO3-基团的苯基。
28.根据权利要求21的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63表示被一个OH取代的C3-烷基。
29.根据权利要求21的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63表示CH2CH2COOH。
30.根据权利要求20的药盒，其中Q表示
d’是1；Ln与Q通过*表示的碳原子相连，并具有下面的通式-(C＝O)NH(CH2)5C(＝O)NH-；AL1表示曲酸；AL2表示PR61R62R63，其中R61，R62和R63各自表示在间位上带有SO3H或SO3-基团的苯基。
31.权利要求19-30任意一项所述的药盒，其中还存在还原剂。
32.权利要求31的药盒，其中还原剂为氯化亚锡。
全文摘要
本发明涉及可用作诊断心血管疾病,感染性疾病和癌症造影剂的新的放射药物。该放射药物由膦或胂结合锝－99m标记的肼或二嗪修饰的生物活性分子组成,所述活性分子可选择性地对疾病位点进行定位,从而通过γ闪烁照相法可得到所处位点的影像。本发明也提供了使用放射药物和含有放射药物前体的药盒的方法。本发明的放射药物的结构如下:[(Q)
文档编号A61K51/08GK1185116SQ96194172
公开日1998年6月17日 申请日期1996年4月3日 优先权日1995年4月3日
发明者D·S·爱瓦尔斯, S·刘 申请人:杜邦麦克制药有限公司