专利名称：以枯草芽孢杆菌活培养物为基的生物药制剂,治疗细菌、病毒感染和免疫缺陷症的方法
技术领域：
本发明涉及药物领域，特别涉及提供具有抗菌和抗病毒活性，且也能治疗免疫缺陷症的制剂。
使用重组人干扰素制剂是当前治疗多种疾病的主要途径之一。这种基因工程制剂，如Reaferonum、Roferon、Berofor、Intron-A等在医学实践中得到了广泛的应用。积累了大量的临床资料来证实注射形式干扰素的治疗效果。然而这种类型的制剂仍具有一系列的缺点它们的作用结果取决于感染形式、机体的状态、制剂的独特耐受性；注射干扰素经常引起不希望的付反应(体温过高、头和肌肉疼痛、恶心、呕吐)；在某些情况下生成中和干扰素的抗体，这就严重下降了治疗效果并可能引发过敏反应；使用注射形式伴随着增高传染肝炎和艾滋病的危险；注射形式干涉素相对较贵，因此在真正的临床实践中这些制剂只具有有限的应用。
除此之外，任何一种干扰素制剂都不具有治疗同时发生的细菌感染(肠结肠炎、双细菌病、肺炎)的抗菌作用。
另一种向靶器官提供干扰素的可能性是由腐生细菌菌株(RU № 2084233)在胃肠系统(GIT)内产生干扰素产物。这些干扰素生产性菌株可成为口服药用制剂的基础。我们的观点是，在最有前途的细菌性载体中，最值得注意的是芽孢杆菌(Bacillus)，特别是枯草芽孢杆菌(B.Substilis)(SmimovV.V.等，作为生物活性物质生产者的形成孢子的需氧菌，基辅，《科学思维》，1982年第280页)。这种微生物广泛地分布在周围环境中，具有一系列有价值的性质是病原性和限制性病原菌丛的(葡萄球菌、链球菌、沙门氏菌、变形杆菌、酵母菌)拮抗物；产生消除肠道内腐败物的酶；合成一系列的氨基酸、维他命和免疫调节物；促进上皮再生；枯草芽孢杆菌的孢子对酶促蛋白水解作用和胃中的酸性介质是稳定的，并可以完整地进入肠道，在肠道中成为营养体型。
由于完全无毒且具有广谱生物活性，枯草芽孢杆菌活培养物可以在医药领域用作治疗和预防性药物的基础。注册并成功地应用了一系列这样的制剂Bactisubtil(克罗地亚)，Flonivin-BS(南斯拉夫)，Biosporinum(乌克兰)，SL-Bacterinum(乌克兰)，Sporobacterinum(俄罗斯)。这些制剂用于治疗双细菌病、腹泻、肠炎、结肠炎、化脓性创伤、扁桃体炎、素质病、湿疹、过敏疾病。在不耐受抗生素和磺胺的情况下，摄生学治疗仍然有效。
最接近本发明的是制剂Subalin。该制剂包含以能产生α-2-干扰素的重组枯草孢杆菌活培养物(RU № 2035185，92年5月20日公布)为基础的组合物。已知的生物制剂优选以1克制剂中枯草芽孢杆菌的生物量为1×109CFU施用，且用于兽医领域。
本发明的目的是提供一种以枯草芽孢杆菌活培养物为基的生物药制剂，该制剂同时具有抗菌和抗病毒活性，也可用于对抗免疫缺陷症。此目的是这样达到的在含有产生人α-2-干扰素的枯草芽孢杆菌的重组菌株的生物制剂中还含有地衣形芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)活培养物，各组分比例如下枯草芽孢杆菌1×106-1×107CFU/g地衣形芽孢杆菌1×105-1×106CFU/g填充剂——补足至1g。
为制成制剂可以使用能产生人α-2-干扰素的各种枯草芽孢杆菌重组菌株，包括保藏在俄罗斯国立工业微生物保藏中心的菌株VKPM B-7289。
填充剂可以使用通常用于形成片剂的组分，例如葡萄糖、淀粉、氢氧化铝、硬脂酸钙等，并用一般可以接受的比例(为口服给药)。琼脂及其它凝胶用于外用。
以特定的枯草芽孢杆菌菌株(营养体型和孢子型)为基的生物制剂被用作在实际临床条件下具有抗病毒和抗菌活性的物质，该制剂被暂时命名为Deprecan-A。
在治疗各种感染的非感染疾病时，该制剂都表现出高的临床效果·甲、乙、丙型病毒性肝炎；·带状疱疹和单纯性疱疹感染；·病毒性脑炎；·人乳头瘤病毒引起的感染；·急性呼吸病毒感染；·浆液性脑膜炎；
·慢性病毒感染(包括弥漫性硬化症)；·肠炎，结肠炎；·急性肠道感染，包括较小年龄的儿童的；·衣原体病；·细菌性阴道炎；·干扰素缺乏综合症。
Deprecan-A是新一代摄生学制剂，以含有人α-2-干扰素基因的枯草芽孢杆菌活培养物为基。口服Deprecan-A保证了细菌进入肠内，在那里细菌直接进行繁殖并产生干扰素。经上皮，淋巴集结、门静脉，干扰素到达受肝病病毒损伤的肝实质。这样实现了全新的非注射途径将活性药物制剂送到靶器官。
在甲、乙、丙型病毒性肝炎的病人身上进行的临床试验显示如下1、观察到总的血胆红素水平下降3-5倍；2、病毒抗原从血清中消失并观察到血清转化；3、病人的临床症状显著改善，病毒性肝炎特征的一般症状消失。
于任何一种情况均未出现毒性、过敏或其它副作用(体温升高，头疼，肌肉、腹部疼，呕吐，腹泻等等)。
为了治疗急性肝炎建议下述使用Deprecan-A的方案五天期间一日四次，每次2.5g在进食之间的间隔内服用。间隔一周后可重复疗程(在指示下)。
用下述实施例说明本发明。
实施例1.制剂Deprecan-A的试验是在传染病医院在8个志愿的患者身上进行，他们患有不同程度的丙型病毒性肝炎。使用制剂5天后得到的结果列于表1。根据生化数据(胆红素，丙氨酸氨基转移酶(AAT)等)从表中可以看出Deprecan-A治疗肝炎的有效过程。
实施例2.肾够植接受者K，在移植后患乙型肝炎。使用Deprecan-A同样得到有效结果。血中所含物指标和主要生化数据的动态情况列于表2。
实施例3.肾移植接受者L，在移植后患乙型和丙型肝炎，在口服给药Deprecan-A情况下得到有效的结果。血中所含物指标和主要生化数据的动态情况列于表3。
实施例4.肾移植接受者M，患乙型和丙型肝炎，从一系列生化指标看，也表现出有效的结果。
血中所含物指标和主要生化数据的动态情况列于表4。在抗病毒性肝炎的同时，Deprecan-A可有效地用于治疗由病毒引发的下述感染单纯性疱疹和带状疱疹，病毒性脑炎，人乳头瘤病毒，以及急性呼吸病毒感染，慢性病毒感染(包括弥漫性硬化症)，浆液性脑膜炎。
值得提及的是所用的枯草芽孢杆菌具有下述特点对肠胃道内消化性酶有高稳定性并有在肠道内迅速繁殖的能力，口服时细菌于2昼夜期间在肠胃道内扩增。
过了两昼夜它们全部从机体中排出，甚至再投药也不会引起不良后果。因此，Deprecan-A成功地用于不仅是治疗基本的细菌感染，而且也用于治疗继发性细菌肠道感染。
口服Deprecan-A以治疗和预防双细菌病、肠炎、肠结肠炎、痢疾、食物和酒精中毒、肝炎、胆囊炎、流感、疱疹、蜱传播的脑炎、咽峡炎、感冒、葡萄球菌感染，同时也预防免疫缺陷症，控制过敏和素质病。
建议完全康复前每昼夜服用2至4次每次1片，最好不要空腹吃药，时间间隔4-12小时。为了让孢子更有效地布满喉部和口腔，不要送服制剂，应含在口中至完全溶解。
为预防免疫缺陷症，在5天内每天服用制剂1-2次每次1片。
建议不要将制剂与抗菌素和磺胺同时口服，后者降低所用细菌的活性。当必须时，Deprecan-A可以和注射形式的抗菌素联合施用。
因此，Deprecan-A是以非侵入方式治疗细菌、病毒感染和免疫缺陷症的新一代制剂。
表1
表2
<p>表3<
>
表
权利要求
1.以枯草芽孢杆菌活培养物为基的生物药制剂，含有产生人α-2-干扰素的重组枯草芽孢杆菌菌株和填充剂，其特征在于还含有地衣形芽孢杆菌活培养物，各组分比例如下枯草芽孢杆菌 1×106-1×107CFU/g地衣形芽孢杆菌 1×105-1×106CFU/g填充剂 补足至1g其具有抗菌、抗病毒和免疫调节活性。
2.权利要求1的制剂，其特征在于含有枯草芽孢杆菌重组菌株VKPM B-7289。
3.通过向机体内施用抗菌剂治疗细菌感染的方法，其特征在于向机体施用有效量的权利要求1的制剂。
4.按照权利要求3的方法，其特征在于细菌感染选自肠炎、结肠炎、急性肠道感染(其中包括小龄儿童的)、衣原体病、细菌性阴道炎。
5.通过向机体内施用抗病毒剂治疗病毒感染的方法，其特征在于向机体施用有效量的权利要求1的制剂。
6.按照权利要求5的方法，其特征在于病毒感染选自甲、乙、丙型病毒性肝炎；带状疱疹或单纯性疱疹感染、病毒性脑炎；人乳头瘤病毒感染、急性呼吸病毒感染、慢性病毒感染(其中包括弥漫性硬化症)、浆液性脑膜炎。
7.施用免疫调节剂治疗免疫缺陷症的方法，其特征在于施用有效量的权利要求1的制剂。
8.按照权利要求7的方法，其特征在于治疗的是干扰素缺乏综合症。
全文摘要
本发明涉及医药领域。其实质在于提供以芽孢杆菌活培养物为基的制剂,它含有产生人α－2－干扰素的重组枯草芽孢杆菌菌株,和地衣形芽孢杆菌活培养物,含有一定量的新的或普通的填充剂。制剂可以治疗病毒感染,这些如肝炎、疱疹、脑炎及其它;可以治疗细菌感染,这些如肠炎、结肠炎、衣原体病、阴道炎等,也可以治疗免疫缺陷症。本发明增加了大量的物质,用非注射的方法对抗细菌、病毒感染和免疫缺陷症。
文档编号A61K48/00GK1259873SQ98804473
公开日2000年7月12日 申请日期1998年7月6日 优先权日1998年5月12日
发明者V·G·科斯特洛维斯奇, V·I·斯尔奇恩科, A·V·瓦伦德, S·N·格尼多伊, V·V·普斯多瓦伊 申请人:赛托基因股份有限公司