专利名称：用作nos抑制剂的支化烷氧基取代的2－氨基吡啶的制作方法
技术领域：
本发明涉及某些支化的烷氧基取代的2-氨基吡啶，它们显示出作为氧化氮合酶(NOS)抑制剂的活性，涉及包含它们的药物组合物以及它们在治疗和预防中枢神经系统疾病，炎性疾病，脓毒性休克和其他疾病中的用途。
NOS存在三种已知的同工型-一种诱导形式(I-NOS)和两种分别称为神经元NOS(N-NOS)和内皮NOS(E-NOS)的组成形式。这些酶各自将精氨酸转化为瓜氨酸，同时响应于各种刺激产生一分子的氧化氮(NO)。据信NOS过度产生氧化氮(NO)在哺乳动物的许多疾病和症状的病理学中起作用。例如，人们认为由I-NOS产生的NO在涉及系统性低血压的疾病如中毒性休克和使用某些细胞因子的治疗中起作用。业已证明用细胞因子如白细胞介素1(IL-1)，白细胞介素2(IL-2)或肿瘤坏死因子(TNF)治疗的癌症患者患有细胞因子诱发的休克和因巨噬细胞，即诱导型NOS(I-NOS)产生的NO引起的低血压，参见Chemical & Engineering News，Dec.20，p.33，(1993)。I-NOS抑制剂可以将其逆转。还据信I-NOS在中枢神经系统的疾病如局部缺血的病理学中起作用。例如，已显示I-NOS的抑制在大鼠中缓解了脑局部缺血损伤，参见Am.J.Physiol.，268，p.R286(1995)。在Eur.J.Pharmacol.，273，p.15-24(1995)中报道了通过选择性抑制I-NOS来抑制辅药诱发的关节炎。
人们认为N-NOS产生的NO在诸如脑局部缺血，疼痛和阿片制剂耐受性的疾病中起作用。例如，对N-NOS的抑制在大鼠中降低了近端大脑中动脉闭塞后的梗塞体积，参见J.Cerebr.Blood Flow Metab.，14，p.924-929(1994)。还显示N-NOS抑制在防止感受伤害中有效，这一点由在福尔马林诱发的后爪舔食和乙酸诱发的腹部收缩试验的后期中具有活性来证明，参见Br.J.Pharmacol.，110，p.219-224(1993)。最后，据报道在啮齿动物中的类阿片戒除由N-NOS抑制来降低，参见Neuropsychopharmacol.，13，p.259-293(1995)。
发明概述本发明涉及下式的化合物及其可药用盐
其中X为CHOH，CH2或CHR10，其中R10与X、与X相邻的CH2基团和NR1R2的氮一起形成五或六元饱和环；R1，R2，R3和R4独立地选自(C1-C6)烷基，四氢萘，芳基和芳烷基，其中所述芳基和所述芳烷基的芳基部分为苯基或萘基且烷基部分为直链或支链且含有1至6个碳原子，而且其中所述(C1-C6)烷基和所述四氢萘以及所述芳烷基的芳基部分可以任选地被一至三个，优选0至两个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素(例如氯、氟、溴、碘)、硝基、羟基、氰基、氨基、(C1-C4)烷氧基和(C1-C4)烷基氨基；或R1和R2与和它们相连的氮一起形成哌嗪、哌啶或吡咯烷环或含有6至14个其中1至3个为氮和其余的为碳的环原子的氮杂双环，其中所述氮杂双环的例子如下
其中R5和R6选自氢、(C1-C6)烷基、苯基、萘基、(C1-C6)烷基-C(＝O)-、HC(＝O)-、(C1-C6)烷氧基-C(＝O)-、苯基-C(＝O)-、萘基-C(＝O)-和R8R9NC(＝O)-，其中R8和R9独立地选自氢和(C1-C6)烷基；R7选自氢、(C1-C6)烷基、苯基、萘基、苯基-(C1-C6)烷基-和萘基-(C1-C6)烷基-；以及其中所述哌嗪、哌啶和吡咯烷环可以任选地被一个或多个取代基，优选0至两个取代基取代，所述取代基独立地选自(C1-C6)烷基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、[二-(C1-C6)烷基]氨基、苯基取代的含有1至4个环氮原子的5-6元杂环、苯甲酰基、苯甲酰基甲基、苄基羰基、苯基氨基羰基、苯基乙基和苯氧羰基，且其中任何上述取代基的苯基部分可以任选地被一个或多个取代基，优选0至两个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基、硝基、氨基、氰基、CF3和OCF3；以及其中R3和R4与和它们相连的碳一起形成任选被取代的三至八元碳环。
本发明还涉及式I化合物的可药用酸加成盐。用于制备本发明上述碱化合物的可药用酸加成盐的酸为那些形成无毒酸加成盐的酸，无毒酸加成盐就是指含有药理上可接受的阴离子的盐，如盐酸盐，氢溴酸盐，氢碘酸盐，硝酸盐，硫酸盐，硫酸氢盐，磷酸盐，酸式磷酸盐，乙酸盐，乳酸盐，柠檬酸盐，酸式柠檬酸盐，酒石酸盐，酒石酸氢盐，琥珀酸盐，马来酸盐，富马酸盐，葡糖酸盐，蔗糖盐，苯甲酸盐，甲磺酸盐，乙磺酸盐，苯磺酸盐，对甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐[即1，1-亚甲基双(2-羟基-3-萘甲酸盐)]。
除非另有说明，本文所用的术语“烷基”包括具有直链，支链或环状部分或其组合的饱和一价烃基。
本文所用的术语“一个或多个取代基”是指等于一个到基于可键合位点数目的取代基的最大可能数目的许多取代基。
除非另有说明，本文所用的术语“卤代”和“卤素”包括氯，氟，溴和碘。
本发明的更为具体的实施方案包括(a)其中R1，R2，R3和R4独立地选自(C1-C6)烷基的式I化合物；(b)其中R3和R4独立地选自(C1-C6)烷基以及R1和R2与和它们相连的氮一起形成环的式I化合物；(c)其中R1和R2中一个选自(C1-C6)烷基以及另一个选自苯基或苯基-(C1-C6)烷基的式I化合物；(d)其中R1和R2与和它们相连的氮一起形成哌嗪，哌啶或吡咯烷环的式I化合物；以及(e)其中R1和R2独立地选自(C1-C6)烷基以及R3和R4与和它们相连的碳一起形成环的式I化合物。
本发明具体优选实施方案的实例为6-[2-异丙氧基-4-((4-苯乙基哌嗪-1-基)乙基)苯基]吡啶-2-基胺；6-[2-异丁氧基-4-((4-苯乙基哌嗪-1-基)乙基)苯基]吡啶-2-基胺；6-[2-异丁氧基-4-((4-二甲氨基乙基)苯基)]吡啶-2-基胺；6-[2-异丙氧基-(N-(2-甲基)丙基)-4-(吡咯烷-3-基)苯基]吡啶-2-基胺；1-[4-(6-氨基吡啶-2-基)-3-异丙氧基苯基]-2-(4-苯乙基哌嗪-1-基)乙醇；6-[2-环戊氧基-4-((4-二甲氨基乙基)苯基]吡啶-2-基胺；6-[2-环戊氧基-4-((4-苯乙基哌嗪-1-基)乙基)苯基]吡啶-2-基胺；以及上述化合物的可药用盐。
本发明具体实施方案的其他实例为6-[2-环己氧基-4-((4-苯乙基哌嗪-1-基)乙基)苯基]吡啶-2-基胺；6-[2-环丁氧基-4-((4-苯乙基哌嗪-1-基)乙基)苯基]吡啶-2-基胺；6-[2-环丙氧基-4-((4-苯乙基哌嗪-1-基)乙基)苯基]吡啶-2-基胺；6-[2-异戊氧基-4-((4-苯乙基哌嗪-1-基)乙基)苯基]吡啶-2-基胺；6-[2-异己氧基-4-((4-苯乙基哌嗪-1-基)乙基)苯基]吡啶-2-基胺；6-[2-环戊氧基-(N-(2-甲基)丙基)-4-(吡咯烷-3-基)苯基]吡啶-2-基胺；6-[2-环己氧基-(N-(2-甲基)丙基)-4-(吡咯烷-3-基)苯基]吡啶-2-基胺；6-[2-环丁氧基-(N-(2-甲基)丙基)-4-(吡咯烷-3-基)苯基]吡啶-2-基胺；6-[2-环丙氧基-(N-(2-甲基)丙基)-4-(吡咯烷-3-基)苯基]吡啶-2-基胺；6-[2-异戊氧基-(N-(2-甲基)丙基)-4-(吡咯烷-3-基)苯基]吡啶-2-基胺；6-[2-异己氧基-(N-(2-甲基)丙基)-4-(吡咯烷-3-基)苯基]吡啶-2-基胺；1-[4-(6-氨基吡啶-2-基)-3-异丁氧基苯基]-2-(4-苯乙基哌嗪-1-基)乙醇；1-[4-(6-氨基吡啶-2-基)-3-异丙氧基苯基]-2-(6，7-二甲氧基四氢异喹啉-2-基)乙醇；1-[4-(6-氨基吡啶-2-基)-3-异丙氧基苯基]-2-(4-二甲氨基哌啶-1-基)乙醇；1-[4-(6-氨基吡啶-2-基)-3-异丙氧基苯基]-2-(二甲氨基)乙醇；和1-[4-(6-氨基吡啶-2-基)-3-环戊氧基苯基]-2-(4-苯乙基哌嗪-1-基)乙醇；以及上述化合物的可药用盐。
本发明还涉及在哺乳动物，包括人中用于治疗或预防选自如下的疾病的药物组合物偏头痛、炎性疾病(例如哮喘和牛皮癣)、中风、急慢性疼痛、低血容量休克、创伤性休克、再灌注损伤、局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、脓毒性休克、多发性硬化、AIDS并发性痴呆、神经变性疾病、神经元毒性、阿尔茨海默疾病、帕金森疾病、化学品依耐性和成瘾性(如对毒品、酒精和尼古丁的依赖性)、呕吐、癫痫、焦虑、精神病、抑郁症(例如重性抑郁症和精神抑郁症)、头外伤、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、吗啡诱发的耐受性和戒除综合征、炎性肠疾病、骨关节炎、类风湿性关节炎、排卵、扩张性心肌病、急性脊髓损伤、亨廷顿舞蹈病、青光眼、黄斑变性、糖尿病性神经病、糖尿病性肾病和癌症，包含有效治疗或预防该疾病量的式I化合物或其可药用盐和可药用载体。
本发明还涉及在哺乳动物，包括人中治疗或预防选自如下的疾病的方法偏头痛、炎性疾病(例如哮喘和牛皮癣)、中风、急慢性疼痛、低血容量休克、创伤性休克、再灌注损伤、局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、脓毒性休克、多发性硬化、AIDS并发性痴呆、神经变性疾病、神经元毒性、阿尔茨海默疾病、帕金森疾病、化学品依耐性和成瘾性(例如对毒品、酒精和尼古丁的依赖性)、呕吐、癫痫、焦虑、精神病、抑郁症(例如重性抑郁症和精神抑郁症)、头外伤、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、吗啡诱发的耐受性和戒除综合征、炎性肠疾病、骨关节炎、类风湿性关节炎、排卵、扩张性心肌病、急性脊髓损伤、亨廷顿舞蹈病、青光眼、黄斑变性、糖尿病性神经病、糖尿病性肾病和癌症，包括给予所述哺乳动物一定量的式I化合物或其可药用盐，该量对治疗或预防该疾病有效。
本发明还涉及一种用于在哺乳动物，包括人中抑制氧化氮合酶(NOS)的药物组合物，包含NOS抑制有效量的式I化合物或其可药用盐和可药用载体。
本发明还涉及一种在哺乳动物，包括人中抑制NOS的方法，包括给予所述哺乳动物NOS抑制有效量的式I化合物或其可药用盐。
本发明还涉及一种用于在哺乳动物，包括人中治疗或预防选自下述的疾病的药物组合物偏头痛、炎性疾病(例如哮喘和牛皮癣)、中风、急慢性疼痛、低血容量休克、创伤性休克、再灌注损伤、局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、脓毒性休克、多发性硬化、AIDS并发性痴呆、神经变性疾病、神经元毒性、阿尔茨海默疾病、帕金森疾病、化学品依耐性和成瘾性(例如对毒品、酒精和尼古丁的依赖性)、呕吐、癫痫、焦虑、精神病、抑郁症(例如重性抑郁症和精神抑郁症)、头外伤、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、吗啡诱发的耐受性和戒除综合征、炎性肠疾病、骨关节炎、类风湿性关节炎、排卵、扩张性心肌病、急性脊髓损伤、亨廷顿舞蹈病、青光眼、黄斑变性、糖尿病性神经病、糖尿病性肾病和癌症，包含NOS抑制有效量的式I化合物或其可药用盐和可药用载体。
本发明还涉及一种在哺乳动物，包括人中治疗或预防选自下述的疾病的方法偏头痛、炎性疾病(例如哮喘和牛皮癣)、中风、急慢性疼痛、低血容量休克、创伤性休克、再灌注损伤、局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、脓毒性休克、多发性硬化、AIDS并发性痴呆、神经变性疾病、神经元毒性、阿尔茨海默疾病、帕金森疾病、化学品依耐性和成瘾性(例如对毒品、酒精和尼古丁的依赖性)、呕吐、癫痫、焦虑、精神病、抑郁症(例如重性抑郁症和精神抑郁症)、头外伤、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、吗啡诱发的耐受性和戒除综合征、炎性肠疾病、骨关节炎、类风湿性关节炎、排卵、扩张性心肌病、急性脊髓损伤、亨廷顿舞蹈病、青光眼、黄斑变性、糖尿病性神经病、糖尿病性肾病和癌症，包括给予所述哺乳动物NOS抑制有效量的式II化合物或其可药用盐。
式I化合物具有手性中心且因此可以存在不同的对映形式和非对映形式。本发明涉及式I化合物的所有旋光异构体和所有立体异构体及其混合物，涉及分别含有或使用它们的所有药物组合物和上述治疗方法。
上面的式I包括等同于所示那些的化合物，但其中一个或多个氢，碳或其他原子被其同位素替代。这类化合物可以在代谢药物动力学研究和结合研究中用作研究和诊断工具。
发明详述式I化合物可以如下列反应方案和讨论中所述制备。除非另有说明，X，R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R8，R9和R10以及下列反应方案和讨论中的结构式I如上所定义。
反应方案1
反应方案1(续)
反应方案2
参照反应方案1，使式II化合物与式CHR3R4Br或CHR2R4I的化合物和碳酸钾在溶剂如乙腈中大约在该反应混合物的回流温度下反应，以将式II的羟基转化为具有式-OCHR3R4的基团。然后在室温下用氢气在10％碳载钯存在下在乙醇溶剂中还原所得化合物，形成3-OCHR3R4-4-氨基甲苯，然后使其与亚硝酸钠和溴化亚铜在浓硫酸中反应形成3-OCHR3R4-4-溴甲苯。
然后将在上一反应中生成的3-OCHR3R4-4-溴甲苯在无水四氢呋喃(THF)中冷却至约-70℃并向其中加入正丁基锂溶液。然后将所得溶液用硼酸三乙酯处理并使其温热至室温以形成式III的化合物。
使式III化合物与式IV化合物反应形成式V化合物。该反应通常在含水的乙醇溶剂中在碳酸钠和四(三苯基膦)钯存在下大约在该反应混合物的回流温度下进行。
式VII化合物可以按以下方式形成。首先使式V化合物与N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)和双(1-氰基-1-氮杂)环己烷(式VI)在四氯化碳中反应并回流约8小时，在大约1，2和4小时时加入额外的引发剂。蒸发溶剂后，将该反应的产物与三乙基氰化铵在二氯甲烷中在大约室温下反应形成式VII的化合物。
式VII化合物的乙醇溶液用氯化氢饱和，然后将该混合物回流，再后在盐酸水溶液中加热，得到式VIII的化合物。将式VIII化合物水解得到相应的式IX化合物。该碱解通常使用碱金属或碱土金属的氢氧化物在乙醇与水的混合物中在大约室温至大约该溶剂的回流温度的温度下进行。
在前一步骤中形成的式IX化合物可以按下述方式转化为式I化合物。首先使式VII化合物与合适的式R2R1NH的化合物和N-乙基-N-二甲氨基丙基碳化二亚胺(EDAC)在碱存在下反应。合适的碱实例是选自三烷基胺，碱金属碳酸盐和碱土金属碳酸盐的那些。该反应通常在溶剂如乙腈，二氯甲烷或N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中在大约室温至大约100℃的温度下，优选大约室温下进行。优选该反应在催化添加剂如N-羟基琥珀酰胺或羟基苯并三唑存在下进行。
然后使用本领域熟练技术人员熟知的方法还原上述反应的产物。例如，还原可以使用氢化铝锂在四氢呋喃中，在加入或不加氯化铝下和/或使用甲硼烷二甲硫在四氢呋喃中在大约-78℃至大约0℃，优选大约-70℃的温度下进行，得到所需的式I化合物。
参照反应方案2，首先按下列方式将4-溴-3-氟甲苯转化为硼酸(boronic acid)衍生物，然后与6-溴-2-(叔丁基羰基氨基)吡啶偶合，形成式X化合物。在四氢呋喃，乙醚，二甲氧基乙烷，己烷或另一合适的醚或烃溶剂中在-100℃至大约室温的温度下使用丁基锂或另一合适的烷基锂试剂于3-氟-4-溴甲苯上进行卤素-金属交换反应，然后与硼酸三酯如硼酸三乙酯或硼酸三异丙酯在大约-100℃至大约回流温度的温度下反应大约1至大约48小时。然后将中间体硼酸衍生物在含水的乙醇溶剂中在碳酸钠和四(三苯基膦)钯的存在下大约在该反应混合物的回流温度下使用6-溴-2-(叔丁基羰基氨基)吡啶作为偶合对转化为式X化合物。然后通过用在溶剂如二甲基甲酰胺，四氢呋喃或二噁烷中形成的合适烷氧化物和金属氢化物如氢化钠在大约室温至大约回流温度的温度下置换该醇中的氟代基团大约5分钟至大约5小时将式X化合物转化为式XI化合物。与式X化合物的反应在该反应体系中于室温至大约回流温度的温度下进行大约1至大约48小时。
然后将式XI化合物以下列方式转化为相应的式IX化合物。首先使式XI化合物与N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)和双(1-氰基-1-氮杂)环己烷(反应方案1中的式VI)在四氯化碳中反应并回流大约8小时，在大约1，2和4小时后加入额外的引发剂，以溴化该化合物的甲基。蒸发溶剂后，使该反应的产物与三乙基氰化铵在二氯甲烷中于大约室温下反应以形成其中溴取代基被氰基替代的相应化合物。然后将所得氰基衍生物水解形成相应的式IX化合物。该碱解通常使用碱金属或碱土金属的氢氧化物在乙醇和水的混合物中在大约室温至大约该溶剂的回流温度的温度下进行。
在前一步骤中形成的式XII化合物可以下列方式转化为式I化合物。首先使式VII化合物与式R2R1NH的合适化合物和N-乙基-N-二甲氨基丙基碳化二亚胺(EDAC)在碱存在下反应。合适碱的实例是选自三烷基胺，碱金属碳酸盐和碱土金属碳酸盐的那些。该反应通常在溶剂如乙腈，二氯甲烷或N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中在大约室温至大约100℃的温度下，优选大约在室温下进行。优选该反应在催化添加剂如N-羟基琥珀酰胺或羟基苯并三唑的存在下进行。
然后使用本领域熟练技术人员熟知的方法还原前一反应的产物，得到所需的式I化合物。例如，可以使用氢化铝锂在四氢呋喃中，加入或不加氯化铝，或使用甲硼烷二甲硫在四氢呋喃中，在大约-78℃至大约0℃，优选大约-70℃的温度下进行还原。
其中X为CHOH的式I化合物可以使用类似于本申请实施例7所述的方法制备。其中X为五或六元饱和环的一部分的式I化合物可以使用类似于实施例6所述的方法制备。
用于反应方案1和2的方法中的原料是市售的，在本领域已知的或通过本领域熟练技术人员已知的方法易于从已知化合物得到。
在前述试验部分中未具体描述的其他式I化合物的制备可以使用本领域熟练技术人员已知的上述反应的组合来完成。
在上面所讨论或说明的各反应中，压力并不关键，除非另有说明。大约0.5大气压至大约5大气压的压力通常是可以接受的，为方便起见优选环境压力，即大约1大气压。
本质上为碱性的式I化合物(“本发明的活性化合物”)能够与各种无机和有机酸形成许多不同的盐。尽管此类盐对于动物给药必须是药物上可接受的，但实际上通常希望首先将式I化合物以药物上不可接受的盐从反应混合物中分离出来，然后通过用碱性试剂处理将后者简单地转化成游离碱化合物，再后将游离碱转化为可药用酸加成盐。本发明活性碱化合物的酸加成盐易于通过用基本等量的选定无机或有机酸在含水的溶剂介质中或在合适的有机溶剂如甲醇或乙醇中处理该碱性化合物而制备。小心蒸发该溶剂，易于得到所需的固体盐。
本发明的活性化合物及其可药用盐可以用作NOS抑制剂，即它们具有在哺乳动物中抑制NOS酶的能力，因此它们能够在患病哺乳动物的上述疾病和症状的治疗中用作治疗剂。
本发明的活性化合物及其可药用盐可以经口服，胃肠外或局部途径给药。通常，这些化合物最理想的是以大约0.01至大约250mg/天的剂量一次或分多次(即每天1至4次)给药，但取决于被治疗主体的种类，重量和状况以及所选择的具体给药途径必然可以进行改变。然而，最理想的是使用在大约0.07mg至大约21mg/kg体重/天范围内的剂量水平。但取决于被治疗动物的种类及其对所述药物的个体响应以及选定的药物制剂类型和进行该给药的时间周期和间隔可以进行改变。在某些情况下，低于上述范围的下限的剂量水平可能更为合适，而在另外的情况下，可以使用更大的剂量而不会引起任何有害的副作用，条件是该更大的剂量首先被分成几个小剂量在整天内给药。
本发明的活性化合物可以通过前述三种途径的任一种单独给药或与可药用载体或稀释剂组合给药，且该给药可以一次或分多次进行。更具体地说，本发明的该新型治疗剂可以多种不同的剂量形式给药，即它们可以片剂，胶囊，锭剂，糖锭，硬糖，粉剂，喷雾剂，霜剂，软膏，栓剂，胶冻，凝胶，糊剂，洗剂，膏剂，水悬浮液，可注射溶液，酏剂，糖浆等形式与各种可药用惰性载体组合。此类载体包括固体稀释剂或填料，无菌的含水介质和各种无毒的有机溶剂等。此外，可以将口服药物组合物适当甜化和/或矫味。通常，本发明的治疗有效化合物在该类剂型中的存在浓度为约5.0wt％至约70wt％。
对于口服给药，可以使用含有各种赋型剂如微晶纤维素，柠檬酸钠，碳酸钙，磷酸二钙和甘氨酸以及各种崩解剂如淀粉(且优选玉米淀粉，土豆淀粉和木薯淀粉)，藻酸和某些复合硅酸盐，以及造粒粘合剂如聚乙烯基吡咯烷酮，蔗糖，明胶和阿拉伯胶的片剂。另外，对于制片来说，润滑剂如硬脂酸镁，月桂基硫酸钠和滑石通常是非常有用的。相似类型的固体组合物也可在明胶胶囊中用作填料；在这一点上讲优选的材料还包括乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇。当对于口服给药需要水悬浮液和/或酏剂时，活性成分可以与各种甜味剂或调味剂，着色物质或染料组合以及若需要与乳化剂和/和悬浮剂，还有诸如水，乙醇，丙二醇，甘油及其各种类似组合体组合。
对于胃肠外给药，可以使用本发明活性化合物在芝麻油或花生油或含水丙二醇中的溶液。该含水溶液若需要应适当进行缓冲(优选pH大于8)，且首先应使该液体稀释剂等渗。这些水溶液适于静脉内注射。油溶液适于关节内，肌内和皮下注射。所有这些溶液在无菌条件下的制备易于由本领域熟练技术人员熟知的标准药物技术完成。
另外，在治疗皮肤的炎症时还可以局部给药本发明的活性化合物且这可通过霜剂，胶冻，凝胶，糊剂，贴剂，软膏等按照标准药物实践来进行。
式I化合物抑制NOS的能力可以使用文献中描述的方法测定。式I化合物抑制内皮NOS的能力可以使用Schmidt等人在Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，88，pp.365-369(1991)和Pollock等人在Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，88，pp.10480-10484(1991)中描述的方法测定。式I化合物抑制诱导型NOS的能力可以使用Schmidt等人在Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，88，pp.365-369(1991)和Garvey等人在J.Biol.Chem.，269，pp.26669-26676(1994)中描述的方法测定。式I化合物抑制神经元NOS的能力可以使用Bredt和Snyder在Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，87，682-685(1990)中描述的方法测定。
下列实施例1的标题化合物对于诱导型或神经元NOS的抑制显示出＜10μm的IC50。
本发明由下列实施例说明。然而，应当理解的是本发明并不限于这些实施例的具体细节。熔点未经校正。质子核磁共振光谱(1H NMR)和C13核磁共振光谱在氘代氯仿(CDCl3)或在CD3OD或CD3SOCD3的溶液中测定，且峰位置在从四甲基硅烷(TMS)开始的低磁场下以每百万的份数(ppm)表达。峰形标示如下s，单峰；d，双峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；b，宽峰。
实施例16-[2-甲氧基-4-((4-苯乙基哌嗪-1-基)乙基)苯基]吡啶-2-基胺A.2-异丙氧基-4-溴硝基苯向装有冷凝器和N2入口的500ml圆底烧瓶中加入20g(130mmol)2-硝基-5-甲基苯酚，29.6ml(260mmol)异丙基碘，35.9g(260mmol)碳酸钾和250ml无水乙腈。将该反应混合物回流24小时，冷却并浓缩。将残余物溶于1N氢氧化钠水溶液中并萃取到二氯甲烷中。有机层用盐水洗涤，用钠干燥并蒸发。残余物21.4g(84％)直接用于下一步中。1H-NMR(CDCl3，δ)1.35(δ，J＝6，6H)，2.36(s，3H)，4.63(m，J＝6，1H)，6.75(d，J＝8，1H)，6.84(s，1H)，7.68(d，J＝8，1H)。13C-NMR(CDCl3，δ)21.9，72.5，116.7，120.9，125.6，145.2，151.5。APCI MS(％)196(母体+1，100)。
将该油状物溶于200ml乙醇中并用45p.s.i.氢气在10％碳载钯存在下处理12小时，然后滤过硅藻土并浓缩，得到油状物，16.4g(90％)。1H-NMR(CDCl3，δ)1.345(d，J＝6，6H)，2.25(s，3H)，3.65(bs，2H)，4.51(m，J＝6，1H)，6.6(m，3H)。13C-NMR(CDCl3，δ)21.0，22.4，370.6，114.7，115.3，121.3，127.9，134.7，145.4。APCI MS(％)166(母体+1，100)。
B.3-异丙氧基-4-溴甲苯向装有冷凝器和N2入口的250ml圆底烧瓶中加入14.4g(87.1mmol)3-异丙氧基-4-氨基甲苯，94ml水和15ml浓硫酸。将该溶液冷却至0℃，在5分钟内滴加6.9g(100mmol)亚硝酸钠在29ml水中的溶液，并继续搅拌10分钟。然后将该褐色溶液慢慢加入加热到90℃的25g(170mmol)溴化亚铜在18ml浓硫酸中的淤浆中，将该反应混合物在80℃下搅拌2小时。然后冷却，倾入水中并用二氯甲烷萃取。二氯甲烷层用1N氢氧化钠水溶液，水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发，得到油状物，将该油状物在硅胶上进行层析，使用己烷/乙酸乙酯作为洗脱剂，得到油状产物，3.59g(18％)。1H-NMR(CDCl3，δ)1.35(d，J＝6，6H)，2.28(s，3H)，4.51(m，J＝6，1H)，6.62(d，J＝7，1H)，6.72(s，1H)，7.36(d，J＝7，1H)。APCI MS(％)228/230(母体+1，100/98)。
C.2-异丙氧基-4-甲基苯基硼酸向装有N2入口和隔膜的125ml 3N圆底烧瓶中加入3.59g(15.7mmol)3-异丙氧基-4-溴甲苯和30ml无水四氢呋喃。将该溶液冷却至-70℃，在5分钟内加入7.5ml(18.8mmol)2.5M丁基锂的己烷溶液并将该溶液在-70℃下搅拌5分钟。然后加入3.2ml(18.8mmol)硼酸三乙酯，再在-70℃下搅拌5分钟，然后在室温下搅拌24小时。将该反应用1N盐酸水溶液终止并萃取到乙酸乙酯中。有机层用水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发。残余物用己烷研制，得到白色固体，1.7g(56％)。1H-NMR(CDCl3，δ)1.39(d，J＝6，6H)，2.35(s，3H)，4.69(m，J＝6，1H)，6.25(s，2H)，6.71(s，1H)，6.81(d，J＝7，1H)，7.70(d，J＝7，1H)。
D.N-叔丁基羰基-6-(2-异丙氧基-4-甲基苯基)吡啶-2-基胺向装有冷凝器和N2入口的125ml圆底烧瓶中加入3.3g(16mmol)6-溴-2-(叔丁基羧酰氨基)吡啶，3.1g(12.8mmol)2-异丙氧基-4-甲基苯基硼酸，6.8g(640mmol)碳酸钠，462mg(0.4mmol)四(三苯基膦)钯，30ml乙醇和3ml水。将该混合物回流16小时，冷却，倾入水中并萃取到乙酸乙酯中。有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发。将残余物在硅胶上层析，使用己烷/乙酸乙酯作为洗脱剂，得到4.3g(100％)油状物。1H-NMR(CDCl3，δ)1.27(d，J＝6，6H)，1.31(s，9H)，2.36(s，3H)，4.49(m，1H)，6.795(s，1H)，6.85(d，J＝8，1H)，7.60(m，2H)，7.65(t，J＝8，1H)，8.10(bs，1H)，8.12(d，J＝8，1H)。13C-NMR(CDCl3，δ)21.5，11.0，237.4，39.7，371.0，111.3，115.8，121.1，121.8，126.9，130.7，13.6，140.0，151.0，154.5，155.2，176.9。APCI MS(％)327(母体+1，100)。
E.N-叔丁基羰基-6-(2-异丙氧基-4-氰基甲基苯基)吡啶-2-基胺向装有冷凝器和N2入口的250ml圆底烧瓶中加入4.1g(12.6mmol)N-叔丁基羰基-6-(2-异丙氧基-4-甲基苯基)吡啶-2-基胺，2.7g(15.1mmol)N-溴代琥珀酰亚胺，150ml四氯化碳和80mg双(1-氰基-1-氮杂)环己烷。将该反应混合物在回流下共加热8小时，在1和2小时加入额外的引发剂。冷却该反应混合物，用四氯化碳过滤并蒸发。直接使用该红色油状物。1H-NMR(CDCl3，δ)1.30(d，J＝6，6H)，1.32(s，9H)，4.50(s，2H)，4.55(m，J＝6，1H)，7.00(s，2H)，7.06(d，J＝8，1H)，7.6-7.7(m，3H)，8.04(bs，1H)，8.15(d，J＝8，1H)。MS(％)405/407(母体+1，98/100)。
将上述油状物溶于150ml无水二氯甲烷中并用1.9g(12.6mmol)四乙基氰化铵处理，将该反应混合物在室温下搅拌13小时。LCMS在P+1＝352处显示主峰，而TLC在20％乙酸乙酯的己烷溶液中于Rf＝0.4处显示主斑点。蒸发该反应混合物并将残余物在硅胶上层析，使用乙酸乙酯的二氯甲烷溶液作为洗脱剂，得到328mg(7％)泡沫。1H-NMR(CDCl3，δ)1.30(d，J＝6，6H)，1.33(s，9H)，3.77(s，2H)，4.58(m，1H)，6.95(s，1H)，6.985(d，J＝8，1H)，7.5-7.8(m，3H)，8.04(bs，1H)，8.16(d，J＝8，1H)。13C-NMR(CDCl3，δ)22.0，23.6，27.5，39.8，71.4，112.0，114.15，120.4，121.2，129.4，131.5，131.8，137.9，151.1，153.6，155.9，177.1。MS(％)352(母体+1，100)。
F.N-叔丁基羰基-6-(2-异丙氧基-4-乙酯基甲基苯基)吡啶-2-基胺向装有冷凝器和N2入口的100ml圆底烧瓶中加入730mg(2.09mmol)N-叔丁基羰基-6-(2-异丙氧基-4-氰基甲基苯基)吡啶-2-基胺和20ml乙醇。将该溶液用HCl饱和，加热至回流，加入一滴水并将反应混合物回流14小时。冷却该反应混合物并浓缩，将残余物溶于二氯甲烷中，用氢氧化钠水溶液和水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发，得到683mg(82％)油状物。1H-NMR(CDCl3，δ)1.21(t，J＝7，3H)，1.24(d，J＝6，6H)，1.27(s，9H)，3.58(s，2H)，4.11(q，J＝7，2H)，4.50(m，J＝6，1H)，6.90(m，2H)，7.5-7.7(m，3H)，8.11(d，J＝8，1H)，8.18(bs，1H)。13C-NMR(CDCl3，δ)14.2，22.0，27.5，39.8，41.5，60.9，71.0，111.8，115.7，121.2，121.8，128.3，131.1，136.0，137.8，151.1，154.2，155.4，171.3，177.1。MS(％)399(母体+1，100)。
G.6-(2-异丙氧基-4-羧基甲基苯基)吡啶-2-基胺向装有冷凝器和N2入口的100ml圆底烧瓶中加入577mg(1.56mmol)N-叔丁基羰基-6-(2-异丙氧基-4-乙酯基甲基苯基)吡啶-2-基胺和10ml乙醇。将该溶液加热至回流，滴加30ml 10％氢氧化钠水溶液并继续回流1小时。冷却该溶液并用1N盐酸在0℃下调节pH至4-5，然后用二氯甲烷，乙酸乙酯和乙腈/乙酸乙酯萃取。干燥合并的有机层并蒸发，得到泡沫，449mg(98％)。1H-NMR(CDCl3，δ)1.22(d，J＝6，6H)，3.69(s，2H)，4.47(m，J＝6，1H)，6.59(d，J＝7，1H)，6.71(m，1H)，6.78(d，J＝8，1H)，6.83(s，1H)，7.00(m，1H)，7.50(t，J＝8，1H)。13C-NMR(CDCl3，δ)21.9，43.9，71.2，111.7，112.1，115.8，120.0，122.7，130.0，141.3，142.0，144.3，155.0，184.4。MS(％)287(母体+1，100)。
H.6-(2-异丙氧基-4-N-(4-苯乙基哌嗪-1-基)羧酰氨基甲基苯基)吡啶-2-基胺向装有冷凝器和N2入口的100ml圆底烧瓶中加入200mg(0.7mmol)6-(2-异丙氧基-4-羧基甲基苯基)吡啶-2-基胺，266mg(1.4mmol)N-苯乙基哌嗪，537mg(2.8mmol)N-乙基，N-3-二甲氨基丙基碳化二亚胺，512mg(4.2mmol)N，N-二甲基-4-氨基吡啶和10ml无水二甲基甲酰胺。将该反应混合物在室温下搅拌12小时(LCMS显示P+1＝451且TLC显示Rf＝0.2，在5％甲醇/二氯甲烷中)，然后倾入水中，萃取入乙酸乙酯中并用水和盐水洗涤有机层，用硫酸钠干燥并蒸发。将残余物在硅胶上进行层析，使用甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂，得到泡沫状产物，180mg(56％)。1H-NMR(CDCl3，δ)1.24(d，J＝6，6H)，2.30(m，2H)，2.44(m，2H)，2.53(m，2H)，2.73(m，2H)，3.43(m，2H)，3.66(m，2H)，3.72(s，2H)，4.48(m，1H)，4.5(bs，2H)，6.38(d，J＝8，1H)，6.86(m，2H)，7.1-7.3(m，6H)，7.40(t，J＝8，1H)，7.69(d，J＝8，1H)。13C-NMR(CDCl3，δ)22.1，33.4，41.2，41.375，46.1，52.7，53.1，60.1，71.2，106.6，115.2，115.6，121.2，126.1，128.4，128.6，129.2，131.4，136.3，137.3，140.0，154.1，155.6，158.0，169.3。MS(％)459(母体+1，100)。
I. 6-[2-异丙氧基-4-N-((4-苯乙基哌嗪-1-基)乙基)苯基)]吡啶-2-基胺向装有冷凝器和N2入口的100ml圆底烧瓶中加入157mg氯化铝和10ml无水四氢呋喃。将该溶液冷却至0℃，加入2.70ml(2.70mmol)氢化铝锂的1.0M四氢呋喃溶液。继续在室温下搅拌20分钟，然后将该溶液冷却至-70℃，并加入180mg(0.39mmol)6-(2-异丙氧基-4-N-(4-苯乙基哌嗪-1-基)羧酰氨基甲基苯基)吡啶-2-基胺在10ml无水四氢呋喃中的溶液。继续在-70℃下搅拌1小时，然后在室温下搅拌2.5小时(LCMS显示P+1＝445)，然后小心用5ml 1N盐酸终止。搅拌20分钟后，将反应混合物用6ml 6N氢氧化钠水溶液处理，并用几部分二氯甲烷萃取。用硫酸钠干燥有机相并蒸发得到油状物，使用甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂将其层析，得到油状物，使用在乙醚中的HCl将其转化为盐酸盐，得到该产物，121mg(48％)，白色固体。1H-NMR(CDCl3，δ)1.25(d，J＝6.0Hz，6H)，2.6(m，12H)，2.8(m，4H)，4.44(m，6.0Hz)，4.5(bs，2H)，6.36(d，J＝8，1H)，6.81(s，1H)，6.86(d，J＝8，1H)，7.1-7.3(m，6H)，7.40(t，J＝8，1H)，7.65(d，J＝8，1H)。13C-NMR(CDCl3，δ)22.16，33.59，33.62，53.13，53.17，60.27，60.53，71.22，106.32，115.53，115.95，121.56，126.05，128.39，128.59，128.70，131.00，137.24，140.27，141.84，154.47，155.33，158.00。MS(％)445(母体+1，100)。C28H36N4O·3HCl·3H2O·C4H10O的分析计算值C 56.34，H 8.13，N 8.21。实测值C 56.00，H 7.81，N 8.57。实施例26-[2-异丁氧基-4-((4-苯乙基哌嗪-1-基)乙基)苯基]吡啶-2-基胺A.2-氟-4-甲基苯基硼酸向装有N2入口和隔膜的500ml三颈圆底烧瓶中加入10.0g(52.9mmol)4-溴-3-氟甲苯和100ml无水四氢呋喃。将该溶液冷却至-70℃，慢慢加入25.4ml(63.5mmol)2.5M丁基锂的己烷溶液以使温度不超过-60℃。将该透明溶液在-70℃下搅拌1小时，然后用10.8ml(63.5mmol)硼酸三乙酯处理。将反应混合物在-70℃下搅拌2小时，然后温热至室温并搅拌16小时。将该反应用饱和氯化铵水溶液终止，用1N盐酸将pH调节至1-2并用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发。残余物用己烷研制，得到白色固体，6.1g(75％)，为单芳基和二芳基硼酸的混合物。1H-NMR(CDCl3，δ)2.37和2.41(单峰，3H)，5.10(OH的宽双峰)，6.89(多重峰，1H)，7.01(多重峰，1H)，7.6-8.0(多重峰，1H)。
B.N-叔丁基羰基-6-(2-氟-4-甲基苯基)吡啶-2-基胺如实施例1D进行制备，产率为72.5％，油状物。1H-NMR(CDCl3，δ)1.33(s，9H)，2.38(s，3H)，6.955(d，J＝12，1H)，7.04(d，J＝8，1H)，7.47(m，1H)，7.73(t，J＝8，1H)，7.79(t，J＝8，1H)，8.06(宽s，1H，NH)，8.19(t，J＝8，1H)。13C-NMR(CDCl3，δ)21.1，27.4，39.75，112.255，116.555，116.8，120.1，120.2，123.7，125.1，130.3，138.6，141.3，151.25，151.6，159.0，161.5，177.05。APCI MS(％)287(100，母体+1)。
C.N-叔丁基羰基-6-(2-异丁氧基-4-甲基苯基)吡啶-2-基胺向装有隔膜，冷凝器和N2入口的125ml三颈圆底烧瓶中加入2.4ml(26.2mmol)2-丁醇和20ml无水二甲基甲酰胺。将该溶液加热至80℃，并加入1.2g(60％，在油中，30mmol)氢化钠。将该反应混合物在80℃下鼓泡加热1小时，然后加入2.5g(8.7mmol)N-叔丁基羰基-6-(2-氟-4-甲基苯基)吡啶-2-基胺在20ml无水二甲基甲酰胺中的溶液并在80℃下加热该反应混合物24小时。冷却该反应混合物，倾入水中并萃取到乙酸乙酯中。用水和盐水彻底洗涤该有机层，用硫酸钠干燥并蒸发。残余物在硅胶上层析，使用己烷/乙酸乙酯作为洗脱剂，得到2.4g(75％)油状产物。1H-NMR(CDCl3，δ)0.90(t，J＝7，3H)，1.22(d，J＝6，3H)，1.29(s，9H)，1.62(m，2H)，2.35(s，3H)，4.31(m，1H)，6.78(s，2H)，6.82(d，J＝8，1H)，7.58(m，1H)，7.67(t，J＝8，1H)，8.13(d，J＝8，1H)，8.19(bs，1H)。13C-NMR(CDCl3，δ)19.03，21.52，27.41，29.06，39.66，75.62，111.40，115.25，121.18，121.56，126.73，130.73，137.58，139.97，150.94，154.59，155.44，176.98。MS(％)341(100，母体+1)。
D.6-[2-异丁氧基-4-((4-苯乙基哌嗪-1-基)乙基)苯基)]吡啶-2-基胺在该顺序中的其余步骤按照实施例1(E-I)中的相应步骤进行，得到油状产物(最后一步的产率为63％)，将其转化为盐酸盐，得到黄色无定形固体。1H-NMR(CDCl3，δ)0.90(t，J＝7.5，3H)，1.21(d，J＝6，3H)，1.62(m，2H)，2.63(m，10H)，2.80(m，6H)，4.27(m，1H)，4.41(bs，2H)，6.38(d，J＝8，1H)，6.80(s，1H)，6.86(d，J＝8，1H)，7.2-7.4(m，6H)，7.41(t，J＝8，1H)，7.65(d，J＝8，1H)。13C-NMR(CDCl3，δ)9.61，19.03，29.04，33.53，33.60，53.09，53.14，60.22，60.46，75.78，106.18，115.34，115.64，121.20，125.96，128.29，128.42，128.61，130.87，137.08，140.22，141.78，154.48，155.42，157.80。MS(％)459(100，母体+1)。C29H38N4O·3HCl·1/2H2O的分析计算值C 60.36，H 7.34，N 9.71。实测值C 60.14，H 7.53，N 9.33。实施例36-[2-异丁氧基-4-((4-二甲氨基乙基)苯基)]吡啶-2-基胺如实施例2进行制备，产率为13％，为吸湿性盐酸盐。1H-NMR(CDCl3，δ)0.90(t，J＝7.5，3H)，1.2-1.3(m，6H)，1.63(m，2H)，2.305(s，3H)，2.55(m，2H)，2.76(m，2H)，4.28(m，1H)，4.38(bs，2H)，6.39(d，J＝8，1H)，6.78(s，1H)，6.85(d，J＝8，1H)，7.21(d，J＝8，1H)，7.42(t，J＝8，1H)，7.64(d，J＝8，1H)。13C-NMR(CDCl3，δ)19.00，29.04，29.62，34.38，45.35，61.38，75.74，106.18，115.24，115.71，121.16，128.39，130.89，137.11，141.68，154.49，155.42，157.74。MS(％)314(100，母体+1)。C19H28N3O的HRMS计算值314.2232。实测值314.2231。实施例46-[2-环戊氧基-4-((4-二甲氨基乙基)苯基)]吡啶-2-基胺如实施例2进行制备，在实施例2C中2-氟代中间体的氢化钠调节的置换中使用环戊醇作为原料醇，产率为36％，mp80℃(分解)，为盐酸盐。1H-NMR(CDCl3，δ)1.55(m，2H)，1.68(m，2H)，1.81(m，4H)， 2.29(s，6H)，2.53(m，2H)，2.75(m，2H)，4.41(bs，2H)，4.76(m，1H)，6.37(d，J＝8，1H)，6.77(s，1H)，6.83(d，J＝8，1H)，7.17(d，J＝7，1H)，7.40(t，J＝8，1H)，7.65(d，J＝8，1H)。13C-NMR(CDCl3，δ)23.78，30.22，32.68，45.35，61.39，79.87，106.15，114.55，115.44，120.85，125.43，130.79，137.08，141.69，154.38，155.35，157.82。MS(％)326(100，母体+1)。实施例56-[2-环戊氧基-4-((4-装乙基哌嗪-1-基)乙基)苯基]吡啶-2-基胺如实施例4进行制备，产率为60％，mp＞200℃，为盐酸盐。1H-NMR(CDCl3，δ)1.56(m，2H)，1.70(m，2H)，1.82(m，4H)，2.60(m，12H)，2.80(m，4H)，4.41(bs，2H)，4.75(m，1H)，6.38(d，J＝8，1H)，6.80(s，1H)，6.84(d，J＝8，1H)，7.1-7.3(m，6H)，7.40(t，J＝8，1H)，7.65(d，J＝8，1H)。13C-NMR(CDCl3，δ)23.785，30.22，32.70，33.66，53.08，53.11，60.245，60.47，79.865，106.18，114.59，115.45，120.91，125.43，125.97，128.31，128.61，130.77，137.11，140.19，141.74，154.33，155.34，157.80。MS(％)471(100，母体+1)。实施例66-[2-异丙氧基-(N-(2-甲基)丙基)-4-(吡咯烷-3-基)苯基]吡啶-2-基胺A.N-叔丁基羰基-6-(2-氟-4-溴甲基苯基)吡啶-2-基胺向装有冷凝器和N2入口的250ml圆底烧瓶中加入5.0g(17.48mmol)N-叔丁基羰基-6-(2-氟-4-甲基苯基)吡啶-2-基胺(实施例2B)，4.36g(24.47mmol)N-溴代琥珀酰亚胺，10mg偶氮双二(1，1-二甲基环己基)腈和85ml四氯化碳。将该反应混合物在加热灯下回流30分钟，冷却并过滤。浓缩滤液并在硅胶上进行层析，使用己烷/乙酸乙酯作为洗脱剂，得到5.36g(52％)油状产物，将其从异丙醇中结晶，得到mp97-100℃的产物。1H-NMR(CDCl3，δ)1.32(s，9H)，4.46(s，2H)，7.18(d，J＝11.5，1H)，7.24(d，J＝8，1H)，7.49(d，J＝8，1H)，7.74(t，J＝8，1H)，7.88(t，J＝8，1H)，8.06(bs，1H)，8.21(d，J＝8，1H)。13C-NMR(CDCl3，δ)27.52，31.90，39.85，112.92，116.82，117.07，120.37，120.47，124.99，125.03，126.75，131.17，131.20，138.87，140.42，140.51，150.80，151.47，158.99，161.48，177.15。MS(％)366(母体+1，100)。C17H18N2OFBr的分析计算值C 55.90，H 4.97，N 7.46。实测值C 55.57，H 4.79，N 7.46。
B.N-叔丁基羰基-6-(2-氟-4-甲酰基苯基)吡啶-2-基胺向装有冷凝器和N2入口的125ml圆底烧瓶中加入5.35g(14.66mmol)N-叔丁基羰基-6-(2-氟-4-溴甲基苯基)吡啶-2-基胺，36ml氯仿和4.10g(29.32mmol)六亚甲基四胺。将该反应混合物回流5小时，冷却并蒸发。将残余物溶于29ml50％乙酸水溶液中并回流16小时。将该反应混合物冷却，溶于乙酸乙酯中并用氢氧化钠水溶液和盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发。将残余物在硅胶上进行层析，使用己烷/乙酸乙酯作为洗脱剂，得到3.49g(67％)油状物。1H-NMR(CDCl3，δ)1.325(s，9H)，7.56(m，1H)，7.62(d，J＝11，1H)，7.7-7.8(m，2H)，8.10(m，2H)，8.26(d，J＝8，1H)，9.99(s，1H)。13C-NMR(CDCl3，δ)27.41，39.78，113.65，116.41，116.66，120.67，120.77，125.66，131.63，137.84，138.93，149.83，151.60，159.35，161.86，177.14，190.54。MS(％)301(母体+1，100)。C17H17N2O2F的分析计算值C 67.99，H 5.71，N 9.33。实测值C 67.62，H 5.67，N 9.50。
C.2-氟-4-[N-叔丁基羰基-6-吡啶-2-基胺]亚苄基丙二酸二乙酯向装有N2入口的125ml圆底烧瓶中加入2.65g(8.83mmol)N-叔丁基羰基-6-(2-氟-4-甲酰基苯基)吡啶-2-基胺，1.41g(8.83mmol)丙二酸乙酯，45ml苯，40mg(0.44mmol)哌啶和10mg苯甲酸。将该反应混合物回流3天，冷却并倾入水和乙酸乙酯中。有机层用1N盐酸，碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发。残余物在硅胶上层析，使用己烷/乙酸乙酯作为洗脱剂，得到3.14g(80％)黄色油状产物，将其用2-丙醇结晶，mp97-100℃。1H-NMR(CDCl3，δ)1.32(m，15H)，4.29(q，J＝7，2H)，4.34(q，J＝7，2H)，7.24(d，J＝12，1H)，7.32(d，J＝8，1H)，7.53(d，J＝7，1H)，7.67(s，1H)，7.75(t，J＝8，1H)，7.96(t，J＝8，1H)，8.05(bs，1H)，8.22(d，J＝8，1H)。13C-NMR(CDCl3，δ)13.94，14.12，27.51，39.85，61.89，61.97，113.27，116.75，117.00，120.53，120.63，125.63，125.66，127.77，131.10，131.13，135.09，135.17，138.95，139.89，150.29，151.53，159.04，161.55，163.76，166.20，177.16。MS(％)443(母体+1，100)。C24H27N2O5F的分析计算值C 65.15，H 6.15，N 6.33。实测值C 64.88，H 6.18，N 6.59。
D.3-[2-氟-4-(N-叔丁基羰基-6-吡啶-2-基胺)]苯基-3-氰基丙酸乙酯向装有冷凝器和N2入口的125ml圆底烧瓶中加入3.12mg(7.05mmol)2-氟-4-[N-叔丁基羰基-6-吡啶-2-基胺]亚苄基丙二酸二乙酯和100ml乙醇。向该搅拌的溶液中加入460mg(7.05mmol)氰化钾在1.8ml水中的溶液，将该反应混合物在室温下搅拌3天，然后在60℃下加热38小时。冷却反应混合物并用稀盐酸终止反应，然后溶于乙酸乙酯中并用酸和盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发。残余物在硅胶上层析，使用己烷/乙酸乙酯作为洗脱剂，得到1.88g(67％)油状物。1H-NMR(CDCl3，δ)1.24(t，J＝7，3H)，1.32(s，9H)，2.93(ABq，J＝8，Δυ＝58，2H)，4.17(m，2H)，4.33(t，J＝7，1H)，7.19(d，J＝11，1H)，7.26(d，J＝8，1H)，7.48(m，1H)，7.75(t，J＝8，1H)，7.94(t，J＝8，1H)，8.05(bs，1H)，8.225(d，J＝8，1H)。13C-NMR(CDCl3，δ)14.0，27.4，32.5，39.6，39.8，61.6，113.0，115.4，115.7，119.2，120.6，123.4，127.6，127.7，131.7，137.0，138.9，150.3，151.4，159.1，161.6，168.7，177.1。MS(％)398(母体+1，100)。
E.N-叔丁基羰基-6-[2-氟-4-(2-氧代吡咯烷-3-基)苯基]吡啶-2-基胺向125mlPaar瓶中加入1.88g(4.73mmol)3-[2-氟-4-(N-叔丁基羰基-6-吡啶-2-基胺)]苯基-3-氰基丙酸乙酯，35ml乙醇，1g10％碳载钯和2ml 6N盐酸。将该反应混合物在40p.s.i.氢气下振摇20小时，滤过硅藻土并将滤液蒸发。将残余物溶于乙酸乙酯中，用氢氧化钠水溶液洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发。将残余物溶于35ml无水甲苯中，用3.5ml三乙胺处理并回流加热18小时。然后将反应混合物冷却，用稀盐酸水溶液和盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发。将残余物在硅胶上进行层析，使用己烷/乙酸乙酯作为洗脱剂，得到394mg(23％)固体，mp162-165℃。1H-NMR(δ，CDCl3)1.31(s，9H)，2.59(ABq，J＝8，Δυ＝112，2H)，3.27(m，1H)，3.68(m，2H)，7.01(d，J＝12，1H)，7.10(d，J＝8，1H)，7.19(s，1H)，7.44(m，1H)，7.73(t，J＝8，1H)，7.84(t，J＝8，1H)，8.20(d，J＝8，1H)，8.23(bs，1H)。13C-NMR(δ，CDCl3)27.465，37.8，39.6，39.9，49.2，112.9，114.6，114.8，120.2，120.3，122.7，125.6，128.2，129.0，131.3，138.9，145.7，150.9，151.6，15.2，161.7，177.3，177.5。MS(％)356(母体+1，100)。C20H22N3O2F的分析计算值C 67.59，H 6.24，N 11.82。实测值C 67.49，H 6.37，N 11.76。
F.6-[2-氟-4-(2-氧代吡咯烷-3-基)苯基]吡啶-2-基胺使用6N盐酸在90℃下将上述物质解封闭18小时，然后用N-乙基，N-异丙基碳化二亚胺和N-羟基苯并三唑以及三乙胺和4-二甲氨基吡啶在乙腈中于室温下处理2天。将该反应混合物用乙酸乙酯和水处理，用硫酸钠干燥并蒸发。残余物在硅胶上层析，使用甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂，得到固体，mp185-188℃，167mg(47％)。1H-NMR(δ，CDCl3)2.49(ABq，J＝8，Δυ＝108，2H)，3.22(m，1H)，3.60(m，2H)，4.90(bs，2H)，6.38(d，J＝8，1H)，6.87(m，2H)，6.97(d，J＝8，1H)，7.35(t，J＝8，1H)，7.59(t，J＝8，1H)。13C-NMR(δ，CDCl3)37.6，39.3，49.1，108.0，114.1，114.4，122.4，126.3，131.0，138.2，144.6，150.6，158.6，158.8，161.3，177.9。MS(％)272(母体+1，100)。
G.6-[2-氟-4-(吡咯烷-3-基)苯基]吡啶-2-基胺向装有N2入口的25ml圆底烧瓶中加入160mg(0.59mmol)6-[2-氟-4-(2-氧代吡咯烷-3-基)苯基]吡啶-2-基胺和8ml无水四氢呋喃。将该溶液冷却至-70℃，加入5.9ml(5.9mmol)氢化铝锂的1.0M四氢呋喃溶液。将该反应混合物温热至室温并搅拌2天。将该反应用稀氢氧化钠水溶液小心终止，然后溶于乙酸乙酯和氢氧化钠水溶液中，水洗合并的有机层，用硫酸钠干燥并蒸发得到粗制油，将其直接用于下一步中。1H-NMR(δ，CDCl3)1.8-2.0和2.2-2.4(m，2H)，2.6-3.7(m，5H)，4.80(bs，2H)，6.41(d，J＝8，1H)，6.92(m，2H)，7.01(d，J＝8，1H)，7.21(d，J＝8，1H)，7.395(t，J＝8，1H)，7.66(t，J＝8，1H)，7.71(m，1H)。MS(％)258(100，母体+1)。
H.6-[2-氟-(N-(2-甲基)丙基)-4-(吡咯烷-3-基)苯基]吡啶-2-基胺向装有N2入口的25ml圆底烧瓶中加入151mg(0.587mmol)6-[2-氟-4-(吡咯烷-3-基)苯基]吡啶-2-基胺，85mg(1.175mmol)异丁醛，74mg(1.175mmol)氰基硼氢化钠和6ml甲醇。将该反应混合物在室温下搅拌2小时，倾入稀盐酸中并用乙酸乙酯洗涤。用1N氢氧化钠水溶液将水层的pH调节至12并用乙酸乙酯萃取。有机层用硫酸钠干燥并蒸发，残余物在硅胶上层析，使用甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂，得到25mg(％)的油状物。1H-NMR(δ，CDCl3)0.94(d，J＝6，6H)，1.7-1.9(m，2H)，2.32(m，3H)，2.55(m，1H)，2.74(m，2H)，2.98(m，1H)，3.37(m，1H)，4.49(bs，2H)，6.44(d，J＝8，1H)，7.05(d，J＝12，1H)，7.11(m，2H)，7.46(t，J＝8，1H)，7.79(t，J＝8，1H)。13C-NMR(δ，CDCl3)21.0，27.2，33.0，42.7，54.7，61.9，64.7，107.2，114.6，114.7，123.2，125.4，130.5，137.9，148.4，151.6，158.1，159.0，161.5。MS(％)314(母体+1，100)。
I.6-[2-异丙氧基-(N-(2-甲基)丙基)-4-(吡咯烷-3-基)苯基]吡啶-2-基胺向装有冷凝器和N2入口的25ml圆底烧瓶中加入24mg(0.077mmol)6-[2-氟-(N-(2-甲基)丙基)-4-(吡咯烷-3-基)苯基]吡啶-2-基胺和3ml无水二甲基甲酰胺。将该溶液加热到80℃并加入46mg(0.767mmol)2-丙醇和37mg(0.920mmol)氢化钠(60％的油分散液)。将该反应混合物在100℃下搅拌18小时，然后冷却并蒸发。残余物用二噁烷和1N氢氧化钠水溶液处理以在室温下裂解某些N-甲酰化的副产物18小时。将反应混合物分配在0.5N氢氧化钠水溶液和乙酸乙酯之间，有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发。残余物用制备板式硅胶层析法层析，使用甲醇/二氯甲烷/氨作为洗脱剂，得到24mg(89％)的油状物，将其转化为盐酸盐，mp118-138℃。1H-NMR(δ，CDCl3)0.96(d，J＝7，6H)，1.25(d，J＝6，6H)，1.8(m，1H)，1.9(m，1H)，2.4(m，3H)，2.64(m，1H)，2.85(m，2H)，3.07(m，1H)，3.38(m，1H)，4.45(m，3H)，6.395(d，J＝8，1H)，6.92(m，2H)，7.22(t，J＝8，1H)，7.42(t，J＝7，1H)，7.64(d，J＝8，1H)。13C-NMR(δ，CDCl3)21.0，22.2，27.2，33.1，43.2，55.0，62.0，64.75，71.2，106.4，114.5，115.6，119.9，128.7，131.0，137.3，146.4，154.4，155.4，157.9。MS(％)354(母体+1，100)。实施例71-[4-(6-氨基吡啶-2-基)-3-异丙氧基苯基]-2-(4-苯乙基哌嗪-1-基)乙醇A.N-叔丁基羰基-6-(2-异丙氧基-4-甲酰基苯基)吡啶-2-基胺向装有冷凝器和N2入口的100ml圆底烧瓶中加入4.85g(11.97mmol)N-叔丁基羰基-6-(2-异丙氧基-4-溴甲基苯基)吡啶-2-基胺(来自上面实施例1E)，3.35g(23.95mmol)六亚甲基四胺和30ml氯仿并将反应混合物回流2小时。将反应混合物浓缩并溶于24ml1∶1的乙酸∶水中，回流5小时。将反应混合物冷却，用氢氧化钠水溶液将pH调节至10并萃取到乙酸乙酯中。有机相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发。残余物在硅胶上层析，用己烷/乙酸乙酯作为洗脱剂，得到2.995g(74％)白色固体。1H-NMR(δ，CDCl3)1.32(m，15H)，4.68(septet，J＝6，1H)，7.47(s，1H)，7.51(d，J＝8，1H)，7.64(m，1H)，7.72(t，J＝8，1H)，7.90(d，J＝8，1H)，8.05(bs，1H)，8.20(d，J＝8，1H)，9.99(s，1H).MS(％)341(母体+1，100)。
B.N-叔丁基羰基-6-(2-异丙氧基-4-环氧乙烷基苯基)吡啶-2-基胺向装有冷凝器和N2入口的100ml圆底烧瓶中加入2.99g(8.79mmol)N-叔丁基羰基-6-(2-异丙氧基-4-甲酰基苯基)吡啶-2-基胺，1.79g(8.79mmol)三甲基碘化锍，0.98g(17.59mmol)粉末氢氧化钾，44ml乙腈和0.5ml水。将反应混合物加热到60℃并保持2.5小时，然后冷却，过滤并蒸发。直接使用该黄色油状物，3.3g(～100％)。1H-NMR(δ，CDCl3)1.27(d，J＝6，6H)，1.32(s，9H)，2.76(m，1H)，3.15(m，1H)，3.87(m，1H)，4.54(septet，1H)，6.87(s，1H)，6.97(d，J＝8，1H)，7.58(m，1H)，7.69(m，2H)，8.05(bs，1H)，8.13(d，J＝8，1H)。MS(％)355(母体+1，100)。
C.1-[N-叔丁基羰基-4-(6-氨基吡啶-2-基)-3-异丙氧基苯基]-2-(4-苯乙基哌嗪-1-基)乙醇向装有冷凝器和N2入口的25ml圆底烧瓶中加入300mg(0.847mmol)N-叔丁基羰基-6-(2-异丙氧基-4-环氧乙烷基苯基)吡啶-2-基胺，193mg(1.017mmol)N-苯乙基哌嗪，9ml乙腈和0.85ml水。将该反应混合物加热至80℃并保持20小时，冷却，并在乙酸乙酯和碳酸氢钠水溶液之间分配。分离有机相，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发。残余物在硅胶上进行层析，使用甲醇/二氯甲烷/氢氧化铵作为洗脱剂，得到283mg(62％)灰白色泡沫。1H-NMR(δ，CDCl3)1.27(d，J＝6，6H)，1.31(s，9H)，2.4-2.9(m，15H)，4.56(septet，J＝6，1H)，4.75(m，1H)，6.99(d，J＝8，1H)，7.06(s，1H)，7.1-7.3(m，5H)，7.58(d，J＝8，1H)，7.67(m，2H)，8.08(bs，1H)，8.13(d，J＝8，1H)。13C-NMR(δ，CDCl3)22.05，27.45，33.53，39.71，53.18，60.36，65.95，68.41，70.99，111.54，112.10，118.26，121.18，126.01，128.34，128.61，130.80，137.67，140.09，144.34，150.98，154.29，155.47，176.99。MS(％)545(母体+1，100)。
D.1-[4-(6-氨基吡啶-2-基)-3-异丙氧基苯基]-2-(4-苯乙基哌嗪-1-基)乙醇向装有冷凝器和N2入口的25ml圆底烧瓶中加入283mg(0.52mmol)1-[N-叔丁基羰基-4-(6-氨基吡啶-2-基)-3-异丙氧基苯基]-2-(4-苯乙基哌嗪-1-基)乙醇，5ml二噁烷和10ml 10％氢氧化钠水溶液。将该反应混合物回流三天，冷却，倾入水中并萃取到乙酸乙酯中。有机相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发。残余物在硅胶上进行层析，使用甲醇/二氯甲烷/氢氧化铵作为洗脱剂，得到203mg(86％)油状物，使用在四氢呋喃中的HCl将其转化为盐酸盐，mp148-165℃。1H-NMR(δ，CDCl3)1.27(d，J＝6，6H)，2.6-2.9(m，15H)，4.48(bs，2H)，4.52(septet，J＝6，1H)，4.74(m，1H)，6.385(d，J＝8，1H)，6.97(d，J＝8，1H)，7.03(s，1H)，7.1-7.3(m，6H)，7.41(t，J＝8，1H)，7.70(d，J＝8，1H)。13C-NMR(δ，CDCl3)22.16，33.62，53.03，53.27，60.45，66.04，68.57，71.19，106.47，112.56，115.62，118.46，126.09，128.42，128.70，129.75，130.97，137.27，140.22，143.81，154.35，155.52，158.01。MS(％)461(母体+1，100)。C28H36N4O2·3HCl·2H2O的分析计算值C 55.49，H 7.15，N 9.24。实测值C 55.50，H 7.38，N 8.97。
权利要求
1.一种下式的化合物及其可药用盐
其中X为CHOH，CH2或CHR10，其中R10与X、与X相邻的CH2基团和NR1R2的氮一起形成五或六元饱和环；R1，R2，R3和R4独立地选自(C1-C6)烷基，四氢萘，芳基和芳烷基，其中所述芳基和所述芳烷基的该部分为苯基或萘基且烷基部分为直链或支链且含有1至6个碳原子，而且其中所述(C1-C6)烷基和所述四氢萘以及所述芳烷基的芳基部分可以任选地被一至三个，优选0至两个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素(例如氯、氟、溴、碘)、硝基、羟基、氰基、氨基、(C1-C4)烷氧基和(C1-C4)烷基氨基；或R1和R2与和它们相连的氮一起形成哌嗪、哌啶或吡咯烷环或含有6至14个其中1至3个为氮和其余的为碳的环原子的氮杂双环；以及其中所述哌嗪、哌啶和吡咯烷环可以任选地被一个或多个取代基，优选0至两个取代基取代，所述取代基独立地选自(C1-C6)烷基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、[二-(C1-C6)烷基]氨基、苯基取代的含有1至4个环氮原子的5-6元杂环、苯甲酰基、苯甲酰基甲基、苄基羰基、苯基氨基羰基、苯基乙基和苯氧羰基，且其中任何上述取代基的苯基部分可以任选地被一个或多个取代基，优选0至两个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烷氧基、硝基、氨基、氰基、CF3和OCF3。
2.根据权利要求1的化合物，其中R1和R2与和它们相连的氮一起形成选自如下的环
和
其中R5和R6选自氢、(C1-C6)烷基、苯基、萘基、(C1-C6)烷基-C(＝O)-、HC(＝O)-、(C1-C6)烷氧基-C(＝O)-、苯基-C(＝O)-、萘基-C(＝O)-和R8R9NC(＝O)-，其中R8和R9独立地选自氢和(C1-C6)烷基；以及R7选自氢、(C1-C6)烷基、苯基、萘基、苯基-(C1-C6)烷基-和萘基-(C1-C6)烷基-。
3.根据权利要求1的化合物，其中R1和R2与和它们相连的氮一起形成任选被取代的哌啶、哌嗪、吡咯烷或3-氮杂-双环[3.1.0]己-6-基胺环。
4.根据权利要求1的化合物，其中R3和R4与和它们相连的碳一起形成任选被取代的三至八元碳环。
5.一种用于在哺乳动物中治疗或预防选自下述的疾病的药物组合物偏头痛、炎性疾病、哮喘、牛皮癣、中风、急慢性疼痛、低血容量休克、创伤性休克、再灌注损伤、局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、脓毒性休克、多发性硬化、AIDS并发性痴呆、神经变性疾病、神经元毒性、阿尔茨海默疾病、帕金森疾病、化学品依耐性和成瘾性、呕吐、癫痫、焦虑、精神病、抑郁症、头外伤、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、吗啡诱发的耐受性和戒除综合征、炎性肠疾病、骨关节炎、类风湿性关节炎、排卵、扩张性心肌病、急性脊髓损伤、亨廷顿舞蹈病、青光眼、黄斑变性、糖尿病性神经病、糖尿病性肾病和癌症，包含有效治疗或预防该疾病量的根据权利要求1的化合物和可药用载体。
6.一种在哺乳动物中治疗或预防选自下述的疾病的方法偏头痛、炎性疾病、哮喘、牛皮癣、中风、急慢性疼痛、低血容量休克、创伤性休克、再灌注损伤、局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、脓毒性休克、多发性硬化、AIDS并发性痴呆、神经变性疾病、神经元毒性、阿尔茨海默疾病、帕金森疾病、化学品依耐性和成瘾性、呕吐、癫痫、焦虑、精神病、抑郁症、头外伤、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、吗啡诱发的耐受性和戒除综合征、炎性肠疾病、骨关节炎、类风湿性关节炎、排卵、扩张性心肌病、急性脊髓损伤、亨廷顿舞蹈病、青光眼、黄斑变性、糖尿病性神经病、糖尿病性肾病和癌症，包括给予所述哺乳动物一定量的根据权利要求1的化合物，该量对治疗或预防该疾病有效。
7.一种用于在哺乳动物中抑制氧化氮合酶(NOS)的药物组合物，包含NOS抑制有效量的根据权利要求1的化合物和可药用载体。
8.一种在哺乳动物中抑制NOS的方法，包括给予所述哺乳动物NOS抑制有效量的根据权利要求1的化合物。
9.一种用于在哺乳动物中治疗或预防选自下述的疾病的药物组合物偏头痛、炎性疾病、哮喘、牛皮癣、中风、急慢性疼痛、低血容量休克、创伤性休克、再灌注损伤、局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、脓毒性休克、多发性硬化、AIDS并发性痴呆、神经变性疾病、神经元毒性、阿尔茨海默疾病、帕金森疾病、化学品依耐性和成瘾性、呕吐、癫痫、焦虑、精神病、抑郁症、头外伤、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、吗啡诱发的耐受性和戒除综合征、炎性肠疾病、骨关节炎、类风湿性关节炎、排卵、扩张性心肌病、急性脊髓损伤、亨廷顿舞蹈病、青光眼、黄斑变性、糖尿病性神经病、糖尿病性肾病和癌症，包含NOS抑制有效量的根据权利要求1的化合物和可药用载体。
10.一种在哺乳动物中治疗或预防选自下述的疾病的方法偏头痛、炎性疾病、哮喘、牛皮癣、中风、急慢性疼痛、低血容量休克、创伤性休克、再灌注损伤、局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、脓毒性休克、多发性硬化、AIDS并发性痴呆、神经变性疾病、神经元毒性、阿尔茨海默疾病、帕金森疾病、化学品依耐性和成瘾性、呕吐、癫痫、焦虑、精神病、抑郁症、头外伤、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、吗啡诱发的耐受性和戒除综合征、炎性肠疾病、骨关节炎、类风湿性关节炎、排卵、扩张性心肌病、急性脊髓损伤、亨廷顿舞蹈病、青光眼、黄斑变性、糖尿病性神经病、糖尿病性肾病和癌症，包括给予所述哺乳动物NOS抑制有效量的根据权利要求1的化合物。
全文摘要
本发明涉及式(Ⅰ)的6－苯基吡啶－2－基胺衍生物,其中R
文档编号A61P11/00GK1268122SQ98808459
公开日2000年9月27日 申请日期1998年8月11日 优先权日1997年8月28日
发明者J·A·洛三世 申请人:辉瑞产品公司