04] 在另一个实施方式中，本发明提供包括依那西普、约0. 01至约0. 05% w/v的聚山 梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；和离子多元醇衍生物赋形剂的稳定的含水制剂，其中所述 赋形剂选自由葡甲胺（N-甲基-D-葡糖胺）、甘露糖基甘油酸酯、葡糖基甘油酸酯、甘露糖基 乳酸酯、甘露糖基乙醇酸酯和磷酸二甘油酯组成的组。
[0105] 优选地，在该实施方式或方面中，本发明是含水的稳定的依那西普制剂，包括：依 那西普；约〇. 01至约〇. 05% w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；和阻止制剂中的依 那西普的不稳定、聚集和片段化的稳定化成分，所述稳定化成分由（a)葡甲胺；或（b)葡甲 胺与蔗糖的组合；或（c)葡甲胺与氯化钠的组合；或（d)葡甲胺与氯化钠和蔗糖的组合组 成。
[0106] 葡甲胺是常用的小分子赋形剂。现在我们惊奇地发现，葡甲胺也能稳定含有诸如 依那西普的大蛋白的含水药物组合物。
[0107] 据认为，葡甲胺减少依那西普以不希望的三元或四元复合物的方式相结合的倾 向，并因此减少依那西普的聚集。据认为，聚集的减少持续很长一段时间，例如两年或超过 两年。不希望受限于特定的理论，据认为，葡甲胺能够通过三种不同机制的组合稳定化包含 依那西普的含水药物组合物。首先，葡甲胺可以以甘露醇、蔗糖和山梨醇增加构象稳定性 的相同方式充当被排除的溶质。第二，带电溶质可以改变胶体稳定性，从而减少自结合的 倾向，从而减缓聚合。第三，这些离子多元醇衍生物，接近中性PH时带电荷，可以充当盐溶 (salting-in)试剂，如精氨酸那样，潜在地再增溶聚集体。葡甲胺的稳定作用不限于减少聚 集体，也可能涉及包含依那西普单体的制剂中的依那西普单体的稳定化的其它方面。
[0108] 本发明的药物组合物可以通过组合纯化的依那西普、约0. 01至约0. 05% w/v的聚 山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；和离子多元醇衍生物（优选葡甲胺）来制备。另外，根据 需要可以添加缓冲液、张力调节剂和额外的赋形剂以及其他常用的非活性成分。为简单起 见，在后面的说明书中更充分地讨论这些。本领域的普通技术人员应该理解可以以任何适 当的顺序组合待纳入组合物的各种组分。例如，可以首先、中间或最后添加缓冲剂，并且也 可以首先、中间或最后添加张力调节剂。本领域的普通技术人员也应该理解一些这些化学 物质在某些组合中可能不相容，因此相应地，很容易用具有类似性质但在相关的混合物中 相容的不同化学物质代替。
[0109] 在优选的实施方式中，在所提供的制剂中的葡甲胺的浓度优选为约0. 1% (w/v) 至40 % (w/v)，更优选为约1 %至约20%，更优选为约2 %至约10%，甚至更优选为约2 %至 约5%。
[0110] 葡甲胺购自商业供应商。
[0111] 优选的实施方式包括约25至约75mg/ml的依那西普，约0· 01至约0· 05% w/v的 聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；约l_30mM的磷酸钠；高达约10%的葡甲胺；任选地高 达约5wt%的鹿糖；和任选地高达约IOOmM的氯化钠，其中组合物具有约6. 0至7. 0的pH, 且优选约6. 0至约6. 6的pH,以及最优选约6. 3至约6. 5的pH。
[0112] 表面活性剂/葡甲胺稳定化的依那西普组合物优选以如下T2时的SEC分析为特 征：大于约85wt. %的单体含量；小于约3wt%的（多种）聚集体含量；和少于约8wt. %的 片段3含量。
[0113] 其中存在用于稳定化的诸如葡甲胺的离子多元醇衍生物的更优选的依那西普制 剂的特征在于：
[0114] (a)大于约90、91、92、93、94、95、96或97wt%的单体含量；和小于约3、2或lwt% 的（多种）聚集体含量的T 4时的SEC分析；以及
[0115] (b) T2时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量为小于约4、3、2或 lwt% ;由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于80、81、82、83、84或85￥七％;以及由！11〇 色谱的峰3表示的组合物的量小于约20、19、18、17、16、15、14或13wt % ;以及
[0116] (C)T4时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约3、2或 lwt% ;由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于80、81、82、83、84或85￥七％;以及由！11〇 色谱的峰3表示的组合物的量小于20、19、18、17、16、15、14或13wt%。
[0117] 用表面活性剂加上葡甲胺稳定化的特别优选的依那西普制剂以如下！\或T 2时的 HIC分析为特征，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约1 % ;由HIC色谱的峰2 表示的组合物的量大于约99wt%;并且由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约lwt%。
[0118] 在下面的实施例中定义术语"SEC"、"T2"、"T4"、"HIC"、"单体含量"、"（多种）聚集 体"和"片段3"、"峰1"、"峰2"和"峰3"。
[0119] 在其它实施方式中，在所述制剂，可以用山梨糖醇、甘油或甘露醇的另一离子多元 醇衍生物代替葡甲胺，所述另一离子多元醇衍生物诸如甘露糖基甘油酸酯、葡糖基甘油酸 酯、甘露糖基乳酸酯、甘露糖基乙醇酸酯和磷酸二甘油酯（在约〇. 1 %至约40% )。
[0120] 包含约0.01至约0.05% w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂，且不含精 氨酸并且呈现如上所述的分析性质的优选的葡甲胺稳定化的依那西普制剂包括约25至 约75mg/ml的依那西普；约0. 5wt. %的葡甲胺；约25mM的磷酸盐；约1 %的鹿糖；以及约 IOOmM的氯化钠。
[0121] 不含精氨酸并且呈现如上所述的分析性质的进一步优选的表面活性剂/葡甲胺 稳定化的依那西普制剂包括约〇. 01至约〇. 05% w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂； 约50mg/ml的依那西普；约5wt. %的葡甲胺；约25mM的磷酸盐。
[0122] 虽然本发明不排除使用精氨酸，但是根据本发明的包括用于稳定化的诸如葡甲胺 的离子多元醇衍生物的依那西普制剂优选不含或基本上不含精氨酸。
[0123] IV.用表面活件剂以及糖和多元醇的鉬合稳定化的依那西普
[0124] 在又一个实施方式中，本发明提供包括依那西普、约0. 01至约0. 05% w/v的聚山 梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂、糖和多元醇的稳定的含水制剂。
[0125] 据认为，糖和多元醇的组合减少依那西普以不希望的三元或四元复合物的方式相 结合的倾向，并因此减少依那西普的聚集。据认为，聚集的减少持续很长一段时间，例如两 年或超过两年。因此，据认为，糖和多元醇的组合能够稳定含有依那西普的含水药物组合 物。不希望受限于特定的理论，据认为，糖和多元醇的组合对于使依那西普稳定化的目的是 协同的，因为即使被排除的溶质通常存在于主体（bulk)中而不是蛋白质的表面上，事实为 在糖/多元醇和蛋白质之间仍将存在相互作用。这些相互作用在糖和较小的多元醇之间可 能有所不同。此外，在高浓度时，这两种添加剂会改变其它添加剂的热力学活性，从而导致 与从每个单独的组分观察的溶液行为不同的溶液行为。如下面进一步的讨论，多元醇可以 取代胺。
[0126] 本发明的药物组合物可以通过组合纯化的依那西普、约0. 01至约0. 05% w/v的 聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；糖，和多元醇制备。另外，根据需要可以添加缓冲液、张 力调节剂和额外的赋形剂以及其他常用的非活性成分。为简单起见，在后面的说明书中更 充分地讨论这些。本领域的普通技术人员应该理解可以以任何适当的顺序组合待纳入组合 物的各种组分。例如，可以首先、中间或最后添加缓冲剂，并且也可以首先、中间或最后添加 张力调节剂。本领域的普通技术人员也应该理解一些这些化学物质在某些组合中可能不相 容，因此相应地，很容易用具有类似性质但在相关的混合物中相容的不同化学物质代替。
[0127] 在一些实施方式中，糖和多元醇可共同发挥作用，与两种金属形成具有任一金属 都不呈现的性质的合金的方式相同。应当理解的是，同样的方法会导致同时使用氨基酸 (诸如脯氨酸、丝氨酸、或者谷氨酸盐）和糖以实现比任一赋形剂本身可以提供的更好的稳 定性特征。据认为合金中的糖与多元醇（或氨基酸）的优选比率介于5 :1至1 :5之间。
[0128] 据认为最优选的糖是蔗糖、海藻糖、乳糖、棉子糖和麦芽糖。
[0129] 据认为最优选的多元醇是山梨醇、甘露醇、甘油和丙二醇。
[0130] 据认为优选的氨基酸是脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸和谷氨酸盐。
[0131] 在优选的实施方式中，在所提供的制剂中的糖的浓度优选为约〇. 1% (w/v)至 40 %，更优选约1 %至约20 %，更优选约2 %至约10 %，并还更优选约5 %至9 %。
[0132] 在优选的实施方式中，在所提供的制剂中的多元醇的浓度优选为约0. 1%至 30 %，更优选约1 %至约10%，并且还更优选为约2 %至约5 %。
[0133] 糖和多元醇购自商业供应商。
[0134] 在一个实施方式中，本发明的制剂包括约25至约75mg/ml的依那西普；约(λ 01至 约0. 05% w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；约1 %至约10 %的蔗糖；约1 %至约 5%的甘露醇；约IOmM至约50mM的磷酸钠；以及约OmM至约IOOmM的NaCl，处于约pH 6. 3 至约pH 7.0。
[0135] 在另一个实施方式中，在制剂中可以用诸如海藻糖的另一种糖（为约1%至约 10% )替换蔗糖。在又一个实施方式中，在制剂中可以用如山梨醇的另一种多元醇替换甘 露醇（为约1%至约5% )。
[0136] 虽然本发明不排除使用精氨酸，但是包含用于稳定化的糖和多元醇（或氨基酸） 的依那西普制剂优选不含或基本上不含精氨酸。
[0137] V.用表面活件剂加木糖醇稳定化的依那西普
[0138] 在又一个实施方式中，本发明提供一种包括依那西普、约0. 01至约0. 05% w/v的 聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂、以及抑制依那西普的不稳定性、聚集和/或片段化的 稳定剂的稳定化的含水药物组合物，其中该稳定剂包含木糖醇或木糖醇和葡甲胺的组合。
[0139] 不希望受限于任何特定的理论，据认为，木糖醇减少依那西普以不希望的三元或 四元复合物的方式相结合的倾向，并因此减少依那西普的聚集。据认为，聚集的减少持续很 长一段时间，例如两年或超过两年。木糖醇的稳定化效果不限于聚集体的减少，也可能涉及 含有依那西普单体的制剂中的依那西普单体的稳定化的其他方面。
[0140] 优选的含有用于稳定化的木糖醇的稳定化的依那西普制剂由约0. 01至约0. 05% w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂、加上木糖醇和葡甲胺的组合提供。
[0141] 本发明的药物组合物可以通过组合纯化的依那西普、约0. 01至约0. 05% w/v的聚 山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；和木糖醇、或者木糖醇和葡甲胺的组合制备。另外，根据 需要可以添加缓冲液、张力调节剂和额外的赋形剂以及其他常用的非活性成分。为简单起 见，在后面的说明书中更充分地讨论这些。本领域的普通技术人员应该理解可以以任何适 当的顺序组合待纳入组合物的各种组分。例如，可以首先、中间或最后添加缓冲剂，并且也 可以首先、中间或最后添加张力调节剂。本领域的普通技术人员也应该理解一些这些化学 物质在某些组合中可能不相容，因此相应地，很容易用具有类似性质但在相关的混合物中 相容的不同化学物质代替。
[0142] 本发明的木糖醇稳定化的依那西普制剂可以包括约25至75mg/ml的依那西普；约 0. 01至约0. 05% w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；约I-IOwt. %的木糖醇；约1至 30mM的磷酸钠；任选高达约5wt%的葡甲胺；任选高达约5mM的NaCl ;和任选高达约5wt% 的蔗糖。
[0143] 额外地包含葡甲胺、氯化钠和蔗糖的表面活性剂/木糖醇稳定化的依那西普制 剂除了木糖醇之外还可以包括约l_3mM的NaCl ;约1至5wt%的蔗糖；和量为组合物的约 l-5wt%的葡甲胺。
[0144] 在进一步的实施方式中，木糖醇稳定化的依那西普制剂可以包括：约25至约 75mg/ml的依那西普；约0. 01至约0. 05% w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；以及 抑制依那西普的不稳定性、聚集和/或片段化的稳定剂，其中稳定剂是含量构成组合物的 高达约IOwt. %的木糖醇，并且其中该组合物以如下T2时的SEC分析为特征：约80wt%至 约95wt%的单体含量；小于约4wt%和优选小于约3%的聚集体含量的T 2时的SEC分析；小 于约8wt%以及优选小于约6wt%的片段3含量的T2时的SEC分析；其中该组合物具有约 6. 0至约ρΗ7· 0,更优选为约6. 0至约6. 6,最优选约6. 3至约6. 5的pH。
[0145] 在含有表面活性剂加木糖醇或表面活性剂加木糖醇与葡甲胺的组合的稳定化的 依那西普制剂（诸如以上提及的那些）中，该制剂更优选特征在于：
[0146] (a)大于约90、91、92、93、94、95、96或97wt%的单体含量；和小于约3、2或lwt% 的（多种）聚集体含量的T 4时的SEC分析；以及
[0147] (b) T2时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量为小于约3、2或 lwt% ;由HIC色谱的峰2