表示的组合物的量大于80、81、82、83、84或85￥七％;以及由！11〇 色谱的峰3表示的组合物的量小于约20、19、18、17、16、15、14或13wt % ;以及
[0148] (C)T4时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约3、2或 lwt% ;由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于80、81、82、83、84或85￥七％;以及由！11〇 色谱的峰3表示的组合物的量小于20、19、18、17、16、15、14或13wt%。
[0149] 在下面的实施例中定义术语"SEC"、"T2"、"T4"、"HIC"、"单体含量"、"（多种）聚集 体"和"片段3"、"峰1"、"峰2"和"峰3"。
[0150] 包含约0. 01至约0. 05wt% w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；加上木糖 醇，或者木糖醇与葡甲胺的组合的特别优选的制剂以具有如下！\或T 2时的HIC分析为特 征，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约1 % ;由HIC色谱的峰2表示的组合物 的量大于约95wt. %并且优选大于约99wt% ;并且由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小 于约lwt%。在详细实施例中提供具体的木糖醇稳定化的制剂。
[0151] 虽然本发明不排除使用精氨酸，但是根据本发明的包含用于稳定化的表面活性剂 加木糖醇的依那西普制剂不含或基本上不含精氨酸。
[0152] VI.用表面活件剂加 NaCl稳定化的依那西普制剂
[0153] 在又一个实施方式中，本发明提供一种稳定化以减少依那西普的不稳定、聚集和/ 或片段化的含水依那西普制剂，所述制剂包括约25至约75mg/ml的依那西普，约0. 01至约 0. 05% w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；以及一种或者多种稳定剂，其中稳定剂 选自（i )氯化钠和（ii)氯化钠与蔗糖或海藻糖的组合；以及（iii)氯化钠，蔗糖和海藻 糖的组合。
[0154] 本发明的药物组合物可以通过组合纯化的依那西普、约0. 01至约0. 05% w/v的聚 山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂；和氯化钠，可选地与蔗糖和/或海藻糖来制备。另外，根 据需要可以添加缓冲液、张力调节剂和额外的赋形剂以及其他常用的非活性成分。为简单 起见，在后面的说明书中更充分地讨论这些。本领域的普通技术人员应该理解可以以任何 适当的顺序组合待纳入组合物的各种组分。例如，可以首先、中间或最后添加缓冲剂，并且 也可以首先、中间或最后添加张力调节剂。本领域的普通技术人员也应该理解一些这些化 学物质在某些组合中可能不相容，因此相应地，很容易用具有类似性质但在相关的混合物 中相容的不同化学物质代替。
[0155] 在利用表面活性剂加氯化钠稳定化的实施方式中，本发明的依那西普制剂可以包 括约25至75mg/ml的依那西普，约0· 01至约0· 05% w/v的聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活 性剂；高达约150mM的氯化钠，约1至约30mM的磷酸钠；以及约0至5wt%的鹿糖或者海藻 糖或者它们的组合；其中该组合物具有约6. 0至约pH7. 0,更优选为约6. 0至约6. 6,最优选 约6. 3至约6. 5的pH。
[0156] 表面活性剂/氯化钠稳定化的组合物优选以如下T2时的SEC分析为特征：大于约 80wt. %的单体含量；小于约3wt%的（多种）聚集体含量，以及约8wt. %的片段3含量。
[0157] 氯化钠稳定化的依那西普组合物的优选特征在于：
[0158] (a)大于约90、91、92、93、94、95、96或97wt%的单体含量；和小于约3、2或lwt% 的（多种）聚集体含量的T 4时的SEC分析；以及
[0159] (b) T2时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量为小于约4、3、2或 lwt% ;由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于80、81、82、83、84或85￥七％;以及由！11〇 色谱的峰3表示的组合物的量小于约20、19、18、17、16、15、14或13wt % ;以及
[0160] (C)T4时的HIC分析，其中由HIC色谱的峰1表示的组合物的量小于约3、2或 lwt% ;由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于80、81、82、83、84或85￥七％;以及由！11〇 色谱的峰3表示的组合物的量小于20、19、18、17、16、15、14或13wt%。
[0161] 在进一步的实施方式中，利用表面活性剂加氯化钠稳定化的优选的组合物包括高 达约150mM的氯化钠，约1至30mM的磷酸钠，以及约0-5wt. %的鹿糖或者海藻糖，或者鹿糖 和海藻糖的组合并且具有约6. 0至6. 6的pH ;以及特征在于：大于约95wt. %的单体含量 和小于约lwt%的（多种）聚集体含量的T4时的SEC分析；其中由HIC色谱的峰1表示的 组合物的量小于或者等于约3wt%、由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于约82wt%以 及由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约15wt %的T2时的HIC分析；以及其中由HIC 色谱的峰1表示的组合物的量小于约2wt%、由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于约 84wt%以及由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于或者等于约14被％的T 4时的HIC分 析。
[0162] 就聚集体和片段减少而言，特别优选的组合物是其中表面活性剂/氯化钠稳定化 的依那西普制剂表现出如下1\或T 2时的HIC分析的那些，其中由HIC色谱的峰1表示的组 合物的量小于约1 %;由HIC色谱的峰2表示的组合物的量大于约95wt. %以及优选大于约 99wt %，并且由HIC色谱的峰3表示的组合物的量小于约Iwt %。
[0163] 在本发明的进一步的实施方式中，NaCl稳定化的依那西普制剂包含高达约5mM的 精氨酸。
[0164] 在以上提及的NaCl稳定化的依那西普制剂中，术语"SEC"、"T2"、"T 4"、"HIC"、'$ 体含量"、"（多种）聚集体"和"片段3"、"峰1"、"峰2"和"峰3"在下面的实施例中进行定 义。
[0165] 用于ΜΦ不溶件微粒的表面活件剂
[0166] 如上所述，本发明采用表面活性剂（优选聚山梨醇酯表面活性剂或者泊洛沙姆表 面活性剂）以实现依那西普制剂中的不溶性微粒的形成的显著减少。虽然本发明预期使用 任何表面活性剂，以及任何聚山梨醇酯或泊洛沙姆表面活性剂，然而用于本发明的优选表 面活性剂是聚山梨醇酯80和普朗尼克F-68,这两者可容易地购买到。在具有或不具有在 以上实施方式中描述的额外的稳定化成分的情况下，可利用表面活性剂添加剂实现不溶性 微粒的减少来实施本发明。本发明部分基于我们的令人惊奇和意外的发现，即存在的表面 活性剂可以大大降低依那西普制剂中的不溶性微粒，相比于缺乏这类表面活性剂的制剂而 言。
[0167] 预期用于本文的聚山梨醇酯表面活性剂衍生自聚乙氧基山梨糖醇。聚山梨醇酯 80 (也称为聚氧乙烯-脱水山梨糖醇-20单油酸酯）也可作为"吐温80"商购并且特别优 选用于本发明。也可以使用聚山梨醇酯20、40和60。
[0168] 预期用于本文的泊洛沙姆表面活性剂是药物制剂领域公知的，并且由基于环氧乙 烷和环氧丙烷的嵌段共聚物组成并且可以购自BASF。例如，BASF销售商业上称为普朗尼克 F-68的泊洛沙姆并且其特别优选用于本发明。
[0169] 用于本发明的依那西普制剂的聚山梨醇酯或泊洛沙姆在制剂中的加入量为制 剂的0.0005%至1%(￥八）；优选约0.005%至约0.1%(￥八），并且最优选约0.01至约 0. 05% (w/v) 〇
[0170] 所提供的药物纟目合物的额外鉬分
[0171] 本发明的制剂还可以包括缓冲剂、张力调节剂、赋形剂、药学上可接受的载体和药 物组合物的其他常用的非活性成分。为简单起见，这些随后在申请中更充分地讨论。
[0172] 缓冲剂使pH维持在所需范围内。合适的缓冲剂包括组氨酸、磷酸钾、柠檬酸钠或 柠檬酸钾、马来酸、乙酸铵、三_(羟甲基）_氨基甲烷（tris)、各种形式的乙酸酯和二乙醇 胺。制剂中的缓冲剂的浓度优选为约ImM至约1M，更优选为约IOmM至约200mM。缓冲剂是 本领域公知的并通过已知的方法制成以及购自商业供应商。
[0173] 合适的缓冲剂的实例为磷酸盐、组氨酸、柠檬酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、琥珀酸 盐、醋酸盐、三_(羟甲基）_氨基甲烷（tris)、碳酸氢盐。
[0174] 在优选的实施方式中，缓冲剂为磷酸钠。
[0175] 在优选的实施方式中，药物组合物的pH处于或接近生理水平。因此，优选地，所提 供的组合物的pH介于约5. 8至约8. 4之间；甚至更优选，介于约6. 2至约7. 4之间。本领 域的普通技术人员将理解，可根据需要调整PH以使特定制剂中的依那西普的稳定性和溶 解度最大化。因此，处于生理范围之外的pH但患者可忍受的依那西普制剂也在本发明的范 围之内。
[0176] 张力调节剂是有助于溶液的渗透压的分子。优选调整药物组合物的渗透压以使活 性成分的稳定性最大化和/或使给药时患者的不适最小化。通常优选的药物组合物是与血 清等渗的药物组合物，即，具有相同或相似的渗透压，这通过加入张力调节剂实现。
[0177] 在优选的实施方式中，所提供的制剂的渗透压为约180至约420m0sM。然而，应该 理解，根据特定条件的需要，渗透压可以更高或更低。
[0178] 适于改变渗透压的张力调节剂的实例包括但不限于氨基酸（不包括精氨酸）（如， 半胱氨酸、组氨酸和甘氨酸）、盐（例如，氯化钠、氯化钾和柠檬酸钠）和/或糖类（例如，蔗 糖、葡萄糖和甘露醇）。
[0179] 优选的张力调节剂是甘氨酸、丙氨酸、氯化钠、氯化钾和硫酸钠。
[0180] 在优选的实施方式中，制剂中的张力调节剂的浓度优选介于约ImM至约IM之间， 更优选约IOmM至约200mM。张力调节剂是本领域公知的并通过公知的方法制造和购自商业 供应商。
[0181] 以溶液形式（也可以是干燥或冷冻的形式）稳定化多肽的赋形剂（也称为化学添 加剂、共溶质或助溶剂）也可以加入到药物组合物中。赋形剂是本领域公知的并通过公知 的方法制造和购自商业供应商。
[0182] 合适的赋形剂的实例包括但不限于糖/多元醇，诸如：蔗糖、乳糖、甘油、木糖醇、 山梨醇、甘露醇、麦芽糖、肌醇、海藻糖、葡萄糖；聚合物，诸如：血清白蛋白（牛血清白蛋白 (BSA)、人SA或重组HA)、葡聚糖、聚（乙烯醇）PVA、羟丙基甲基纤维素（HPMC)、聚乙烯亚胺、 明胶、聚乙烯吡咯烷酮（PVP)、羟乙基纤维素（HEC);非水溶剂，诸如：多元醇、（例如，PEG和 甘油）和二甲基甲酰胺（DMF);氨基酸，诸如：脯氨酸、L-丝氨酸、谷氨酸钠、丙氨酸、甘氨 酸、赖氨酸盐酸盐、肌氨酸和Y -氨基丁酸；以及杂赋形剂，诸如：磷酸钾、乙酸钠、硫酸铵、 硫酸镁、硫酸钠、三甲胺N-氧化物、甜菜碱、金属离子（例如，锌、钙、和镁）、CHAPS、单月桂 酸酯、2-0-β-甘露糖基甘油酸酯（mannoglycerate)或上述的任意组合。
[0183] 优选的赋形剂是蔗糖、乳糖、甘油、木糖醇、山梨醇、甘露醇、麦芽糖、肌醇、海藻 糖、葡萄糖、牛血清白蛋白（BSA)、人血清白蛋白（HSA)、重组白蛋白、葡聚糖、PVA、羟丙基 甲基纤维素（HPMC)、聚乙烯亚胺、明胶、聚乙烯吡咯烷酮（PVP)、羟乙基纤维素（HEC)、聚 乙二醇、乙二醇、甘油、丙氨酸、甘氨酸、赖氨酸盐酸盐、肌氨酸、SDS、三甲胺N-氧化物、甜 菜碱、锌离子、钙离子、镁离子、CHAPS、蔗糖单月桂酸酯、和2-0-β-甘露糖基甘油酸酯 (mannoglycerate)〇
[0184] 本发明的制剂中的一种或多种赋形剂的浓度优选介于约0. 001至5重量百分比之 间，更优选约〇. 1至2重量百分比。
[0185] 治疗方法
[0186] 在另一个实施方式中，本发明提供治疗哺乳动物的方法，包括对哺乳动物施用治 疗有效量的本发明的药物组合物，其中该哺乳动物具有可以用依那西普有益地治疗的疾病 或病症。
[0187] 在优选的实施方式中，依那西普衍生自将要用该组合物治疗的哺乳动物的相同物 种。
[0188] 在优选的实施方式中，哺乳动物是人。
[0189] 可以用所提供的组合物治疗的疾病或病症包括但不限于：类风湿性关节炎、牛皮 癣关节炎、强直性脊柱炎、韦格纳氏病（肉芽肿）、克罗恩病（或炎性肠炎）、慢性阻塞性肺 疾病（COPD)、丙型肝炎、子宫内膜异位症、哮喘、恶病质、牛皮癣和特应性皮炎。可以用本发 明的组合物治疗的另外的疾病或病症包括在WO 00/62790、WO 01/62272、美国专利申请第 2001/0021380号和美国专利7648702B2中描述的那些，其相关部分通过引用并入本文。
[0190] 可以通过全身性注射，例如通过静脉内注射；或通过对相关位点注射或施用，例如 当位点在手术中暴露时通过对位点直接注射或直接施用；或者通过局部施用对需要治疗的 受试者施用所提供的药物组合物。
[0191] 在一个实施方式中，本发明提供治疗和/或预防类风湿性关节炎的方法，包括对 有需要的哺乳动物施用治疗有效量的所提供的依那西普组合物之一。
[0192] 所提供的组合物中的依那西普的治疗有效量将取决于待治疗的病况、病况的严重 程度、之前的治疗以及患者的临床史和对治疗剂的反应。可以根据主治医生的判断调整适 当的剂量，使得可以对患