制备的止血复合微球平均直径800 μπι，平均孔径为90 μπι，比表面积高达790.1m2.g_l，产率后质量计达到97.7%
[0137]采用本发明制备而得的止血用复合微球的止血疗效如下:
[0138]试验I中华田园犬脾出血模型止血试验:
[0139]动物及材料健康成年中华田园犬10只，雌雄各半，体重17 ± I公斤；止血用复合微球，按实施例1方法制备，灭菌后使用。
[0140]方法:中华田园犬用3%戊巴比妥钠耳静脉麻醉后，将动物腹部剪毛并用碘尔康溶液消毒后，沿左侧肋缘下切口，进入腹腔，从肋缘下找到脾脏，在脾脏的平坦面，沿长轴先后划出长1cm、深Imm的两条对称性伤口，其中一条用本发明制备方法而得的止血用复合微球，另一条随机化原则用国产和进口的止血粉，观察创面止血情况，记录完成止血的时间，并观察止血粉末与创面的粘合情况，结果表明，本发明制备而得的止血用复合微球平均止血时间为9.8秒，和进口止血粉止血时间相当，优于国产止血粉的止血时间(平均止血时间为42秒)ο
[0141]试验2中华田园犬脾出血模型止血试验:
[0142]动物及材料健康成年中华田园犬10只，雌雄各半，体重19 ± I公斤；止血用复合微球，按实施例2方法制备，灭菌后使用。
[0143]方法:中华田园犬用3%戊巴比妥钠耳静脉麻醉后，将动物腹部剪毛并用碘尔康溶液消毒后，沿左侧肋缘下切口，进入腹腔，从肋缘下找到脾脏，在脾脏的平坦面，沿长轴先后划出长1.5cm、深1.2mm的两条对称性伤口，其中一条用本发明制备方法而得的止血用复合微球，另一条随机化原则用国产和进口的止血粉，观察创面止血情况，记录完成止血的时间，并观察止血粉末与创面的粘合情况，结果表明，本发明制备而得的止血用复合微球平均止血时间为8.7秒，和进口止血粉止血时间相当，优于国产止血粉的止血时间(平均止血时间为42秒)ο
[0144]试验3中华田园犬脾出血模型止血试验:
[0145]动物及材料健康成年中华田园犬1只，雌雄各半，体重20 ± I公斤；止血用复合微球，按实施例3方法制备，灭菌后使用。
[0146]方法:中华田园犬用3%戊巴比妥钠耳静脉麻醉后，将动物腹部剪毛并用碘尔康溶液消毒后，沿左侧肋缘下切口，进入腹腔，从肋缘下找到脾脏，在脾脏的平坦面，沿长轴先后划出长1.3cm、深1.2mm的两条对称性伤口，其中一条用本发明制备方法而得的止血用复合微球，另一条随机化原则用国产和进口的止血粉，观察创面止血情况，记录完成止血的时间，并观察止血粉末与创面的粘合情况，结果表明，本发明制备而得的止血用复合微球平均止血时间为10.2秒，和进口止血粉止血时间相当，优于国产止血粉的止血时间(平均止血时间为42秒)。
[0147]试验4中华田园犬脾出血模型止血试验:
[0148]动物及材料健康成年中华田园犬1只，雌雄各半，体重21 ± I公斤；止血用复合微球，按实施例4方法制备，灭菌后使用。
[0149]方法:中华田园犬用3%戊巴比妥钠耳静脉麻醉后，将动物腹部剪毛并用碘尔康溶液消毒后，沿左侧肋缘下切口，进入腹腔，从肋缘下找到脾脏，在脾脏的平坦面，沿长轴先后划出长1.5cm、深1.0mm的两条对称性伤口，其中一条用本发明制备方法而得的止血用复合微球，另一条随机化原则用国产和进口的止血粉，观察创面止血情况，记录完成止血的时间，并观察止血粉末与创面的粘合情况，结果表明，本发明制备而得的止血用复合微球平均止血时间为9.1秒，和进口止血粉止血时间相当，优于国产止血粉的止血时间(平均止血时间为42秒)ο
[0150] 最后应说明的是:以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
【主权项】
1.一种用于临床手术中止血用复合微球的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤: (1)制备几丁糖溶液: 在搅拌条件下分子量为4万?12万Da，脱乙酰度85% -95%几丁糖粉末溶解于稀盐酸中，制备几丁糖质量分数为0.5?5.0%的溶液； (2)制备几丁糖微球: 向步骤(I)制得的几丁糖溶液中加入粒径为20?60微米的固体氯化石蜡粉末，固体氯化石蜡粉末质量与几丁糖质量分数为0.5?5.0%的溶液体积之比为Ig: 2?5ml，搅拌均匀后泵入喷雾离心机，控制离心机转速为4000-8000r/min进行喷雾完成后，用电动搅拌机缓慢搅拌10?30分钟，然后进行过滤，收集的滤渣即为几丁糖微球； (3)制备多孔几丁糖微球: 步骤⑵完成后，按照几丁糖微球质量与体积分数为75?95%乙醇溶液体积比Ig: 4?8ml的比例，将步骤⑵中收集到的几丁糖微球分散于体积分数为75?95%乙醇溶液中，在30?90r/min的速度下进行第一次搅拌以溶解氯化石蜡粉末，搅拌处理30?60min后，过滤并收集滤渣，在滤渣中加入体积分数75?95%乙醇溶液进行第二次搅拌并溶解氯化石蜡粉末，加入的乙醇溶液体积及处理条件与第一次溶解氯化石蜡粉末相同，第二次溶解氯化石蜡粉末处理完成后进行过滤，所得到的滤渣即为多孔几丁糖微球； (4)制备交联几丁糖湿球微球: 步骤(3)完成后，将步骤(3)制备的多孔几丁糖微球分散于水溶液中，在搅拌条件下先升温至60?90摄氏度，再用碱性溶液调节pH为8.5?10.5，按照1，2-环己二醇二缩水甘油醚质量与多孔几丁糖微球体积比为Ig: 50?20ml，加入1，2-环己二醇二缩水甘油醚，进行交联反应60?90分钟，反应完成后过滤，再用纯净水反复洗涤滤渣，直至洗涤液pH值为中性时停止，然后进行过滤，收集滤渣为交联几丁糖湿球微球； (5)制备多孔交联几丁糖微球: 步骤(4)完成后，将步骤(4)制备的交联几丁糖微球湿球微球送入真空干燥，得到多孔交联几丁糖微球； (6)制备植物淀粉微球: 首先将植物淀粉与水混合，配制质量百分浓度为20?70%的植物淀粉乳液；然后将增稠剂与水混合，在1000?5000转/分的搅拌转速下，升温至40?80摄氏度，配制质量百分浓度2?15%的增稠剂溶液，将上述植物淀粉乳液加入增稠剂溶液，调整温度至65?80摄氏度，恒温搅拌10-30分钟，静置，自然冷却下，弃上清液，洗涤、喷雾干燥，得到植物淀粉微球； (7)制备交联淀粉微球: 步骤(6)完成后，将步骤(6)制备的植物淀粉微球分散于水溶液中，在搅拌条件下先升温至60?90摄氏度，再用碱性溶液调节pH为8.5?10.5，按照醋酸酐/己二酸-琥珀酸酐质量与植物淀粉微球体积比为Ig: 50?20ml，加入醋酸酐/己二酸-琥珀酸酐，进行交联反应60?90分钟，反应完成后过滤，再用纯净水反复洗涤滤渣，直至洗涤液pH值为中性时停止，然后进行过滤，收集滤渣为交联淀粉微球； (8)将步骤(4)制备的交联几丁糖湿球微球加水制成浓度为1.5-2.5% (W/V)的交联几丁糖湿球微球溶液； (9)将步骤(7)制备的交联淀粉微球加水制成浓度为10-20%(W/V)的交联淀粉微球溶液； (10)将步骤(8)中交联几丁糖湿球微球溶液和步骤(9)中交联淀粉微球溶液混合成复合溶液按照体积比为5: 5，6: 4，7: 3或8: 2的比例混合，用超声波超声使溶液混合均匀，然后用高速离心机离心30min，脱泡； (11)制备止血用复合微球: 在无菌条件下，将步骤(10)中得到的混合溶液，在质量浓度为0.5%的碱性溶液中固化，然后用酒精脱水，利用注射用水洗涤，在30?40摄氏度下烘干至半烘干状态，脱水、洗涤、固化喷雾烘干，包装灭菌，经钴60灭菌，制得止血用复合微球。
2.根据权利要求1所述的用于临床手术中止血用复合微球的制备方法，其特征在于:步骤(4)中碱性溶液为稀氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液。
3.根据权利要求1所述的用于临床手术中止血用复合微球的制备方法，其特征在于:步骤(7)中碱性溶液为稀氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液。
4.根据权利要求1-3任一项所述的用于临床手术中止血用复合微球的制备方法，其特征在于:所述植物淀粉为马铃薯淀粉、玉米淀粉、木薯淀粉、小麦淀粉或绿豆淀粉。
5.一种用于临床手术中止血用复合微球，其特征在于:该止血用复合微球由权利要求1-4任一所述的制备方法制作而成。
【专利摘要】一种用于临床手术中止血用复合微球的制备方法，主要包括由交联几丁糖湿球微球加水制成浓度为1.5-2.5％(W/V)的交联几丁糖湿球微球溶液与交联淀粉微球加水制成浓度为10-20％(W/V)的交联淀粉微球溶液按照体积比为5∶5，6∶4，7∶3或8∶2的比例混合，用超声波超声使溶液混合均匀，然后用高速离心机离心30min，脱泡，在无菌条件下，在质量浓度为0.5％的NaOH溶液中固化，然后用酒精脱水，利用注射用水洗涤，在30～40摄氏度下烘干至半烘干状态，脱水、洗涤、固化喷雾烘干，包装灭菌，经钴60灭菌，制得止血用复合微球。该止血复合微球平均直径600-900μm，平均孔径为50-100μm，比表面积高达720.8～810.2m2·g-1，可以吸收及降解生物材料并用于各种创伤和手术新鲜组织急性创面出血区的止血。
【IPC分类】A61L15-64, A61L15-42, A61L15-32
【公开号】CN104815348
【申请号】CN201510187386
【发明人】杨子中
【申请人】杨子中
【公开日】2015年8月5日
【申请日】2015年4月21日