一种多糖微凝胶的制备方法【
技术领域：
】[0001]本发明属于微凝胶制备方法领域，更具体地，设及一种能够负载药物或者无机纳米粒子的多糖微凝胶的制备方法。【
背景技术：
】[0002]高分子微凝胶是聚合物通过物理或化学交联形成的具有稳定=维网络结构的胶体粒子，其颗粒尺寸在纳米或微米级。具有生物相容性的高分子微凝胶在水中能充分溶胀并保持其稳定分散的胶体性质，从而具有很多优异的特性；多孔性、形态可塑性及尺寸可调性等。因此，水溶性高分子微凝胶在生物和制药等方面倍受重视。当被用作药物载体时，纳米凝胶表现出如下优势；1)在药物传输过程中，微凝胶能很好地稳定和保护所装载的小分子药物；2)当受到外界环境刺激时，微凝胶能调控自身尺寸，达到释放小分子药物的目的；3)微凝胶能可逆地调节自身物理化学性质，达到释放小分子的目的。[0003]在作为药物载体时，具有生物相容性且可降解的高分子微凝胶体系倍受关注。该类材料在体内可W被水解或者酶解，释放药物后很容易被人体代谢。例如，葡聚糖具有很好的生物相容性和可降解性，在药物载体构建方面展现出其独特优势。葡聚糖来源经济，无毒性，侧链基团易于功能化；与蛋白质相比，不易受环境影响而变性，且糖单元之间的碳氧键在抑值变化时可W发生水解。通过物理或化学方法制备的葡聚糖微凝胶具有温度或抑值敏感特性，可作为智能凝胶，在药物缓释、酶固载、膜分离等方面有很好的应用前景。[0004]由于葡聚糖凝胶广泛的应用前景，葡聚糖水凝胶的制备方法已有许多文献报道，但该些方法制备的水凝胶尺寸不可控，并不适用于作为药物载体。例如，Hennink课题组【1】于1998年在化arm.Res.上首次报道了基于葡聚糖和甲基丙己締酸哲已脂共聚物微凝胶的合成。随后，Zhang等人【2】于2004年，Shoichet等人【3】于2006年在Biomaterials分别报道了马来酸酢和硫酸酢修饰的葡聚糖微凝胶和合成方法（文献详细信息）。该些方法的前期单体制备过程复杂，成本较高，且合成的纳米粒子粒径分布较宽，难W用于药物的准确装载和释放。化rreira等人【4】于2005年在Biomaterials上报道了在结晶诱导作用下通过物理交联来制备葡聚糖微凝胶颗粒（文献详细信息），该方法制备的纳米粒子可调控性也较差。此外，该些水凝胶作为药物载体或者其他功能性无机纳米粒子的载体时，受水凝胶本身属性的制约和负载过程的限制，往往无法准确的装载W及释放药物粒子和其他功能性无机纳米粒子。[0005][1]StenekesR.,Franssen0.,vanRommelE.,etal.ThePreparationofDextranMicrospheresinanAll-AqueousSystem:EffectoftheFormulationParametersOnParticleCharacteristics.PharmaceuticalResearch1998,15(4):557~561.[0006][2]ZhangX.,WuD.,ChuC.SynthesisandCharacterizationofPartiallyBiodegradable,TemperatureandpHSensitiveDex-MA/PNIPAAmHydrogels.Biomaterials2004,25(19):4719~4730.[0007][3]加ptaD.,TatorC.H.,ShoichetM.S.Fast-GellingInjectableBlendofHyaluronanandMethylcelluloseforIntrathecal,LocalizedDeliverytotheIn_juredSpinalCord.Biomaterials2006,27(11):2370~2379.[000引[4]FerreiraL.,GilM.H.,C油ritaA.M.S.,etal.BiocatalyticSynthesisofHighlyOrderedDegradableDextran-BasedHydrogels.Biomaterials2005,26(23):4707~4716.【
发明内容】[0009]针对现有技术的W上缺陷或改进需求，本发明的目的在于提供一种多糖微凝胶的制备方法，其中通过对关键的多糖微凝胶的制备工艺、W及与之配合的粒子负载过程等进行改进，与现有技术相比能够有效解决微凝胶尺寸不可控的问题，该微凝胶能够对疏水性药物、功能性纳米粒子等进行有效包覆，实现药物的准确装载和释放，起到有效负载药物的作用，并且，该制备方法的产率高，能够有效降低多糖微凝胶的制备成本。[0010]为实现上述目的，按照本发明，提供了一种多糖微凝胶的制备方法，其特征在于，包括W下步骤：[0011](1)制备1,6-己二异氯酸醋胆固醇单醋：[001引将3g~5g胆固醇与20血~28血1,6-己二异氯酸醋混合，向其中分别加入80血~150血甲苯和2血~6血化晚，并在70°C~90°C下反应40h~6化得到第一混合体系；接着，于30°C~60°C减压蒸馈除去所述第一混合体系中的溶剂，然后向其中加入200血~500血石油離，在-20°C~-5°C下保存至少1化得到第二混合体系；接着，过滤该第二混合体系得到滤渣，将该滤渣真空干燥后即得到1,6-己二异氯酸醋胆固醇单醋；[0013](2)制备疏水性多糖衍生物：[0014]将0.2g~0.5g所述步骤（1)得到的1,6-己二异氯酸醋胆固醇单醋加入到80血~150血二甲亚讽中，并向其中加入2g~6g的天然多糖和6血~10血化晚，在70°C~90°C下反应她~1化得到第S混合体系；接着，向该第S混合体系中加入300血~600血己醇，于0°C~15°C下保存至少1化后得到沉淀；然后，收集沉淀，并将所述沉淀在水中透析3天~5天，保留下的沉淀干燥后即得到胆固醇修饰的多糖衍生物；[0015](3)制备无负载或者负载有药物或纳米粒子的多糖水凝胶：[0016]向二甲亚讽溶剂中加入所述步骤（2)得到的胆固醇修饰的多糖衍生物，形成胆固醇修饰的多糖衍生物质量百分浓度为0.Ig/血~Ig/血的第一溶液；向二甲亚讽溶剂或者四氨快喃溶剂中加入待负载物，形成待负载物质量百分浓度为Img/mL~lOmg/mL的第二溶液，所述待负载物为药物和纳米粒子中的一种或其混合物；接着，将10yL~100yL的所述第一溶液与0yL~80yL的所述第二溶液混合得到前驱体，剧烈揽拌所述前驱体，并向其中加入0.8血~10血&0,在50°C~80°C或者10°C~30°C下揽拌12h~2化，然后用40W~60W探头式超声波在20°C~50°C或者0°C~20°C下超声处理所述前驱体lOmin~15min;接着重复所述在50°C~80°C或者10°C~30°C下的揽拌处理、W及在20°C~50°C或者0°C~20°C下的超声处理至少2次，即得到无负载或者负载有药物或纳米粒子的多糖水凝胶。[0017]作为本发明的进一步优选，所述步骤（3)中向前驱体中加入0.8~lOmL&0是用注射累10~30min加入0.8~lOmL&0。[001引作为本发明的进一步优选，所述步骤（2)中的天然多糖为葡聚糖，所述葡聚糖的分子量为3000~2000000。[0019]作为本发明的进一步优选，所述步当前第1页1 2 3 4