本文所用，单词"包括"及变体旨在非限制性，使得列表中条目的叙述不排除其 它也可能在本发明的材料、组合物、装置和方法中有用的类似条目。
[0032] 如本文所用，单词"优选的"、"优选地"和它们的变体是指在特定环境下能够提供 特定有益效果的本发明的实施方案。然而，其它的实施方案在相同或其它的环境下也可以 是优选的。此外，一个或多个优选实施方案的详述并不表示其它实施方案是无用的，并且不 旨在从本发明的范畴排除其它的实施方案。
[0033] 可用于本发明的活性物质和其它成分可根据它们的治疗和/或美容有益效果或 它们的假定作用或运行模式在本文中分类或描述。然而应当理解，在某些情况下，可用于本 发明的活性物质和其它成分可以提供一种以上的美容和/或治疗有益效果或作用，或通过 一种以上的作用模式起作用或运行。因此，本文的分类只是为了方便起见，并非旨在将成分 限制在所列的特别指出的应用或几个应用中。
[0034] 本发明的组合物可用于治疗和预防口腔疾病和病症，包括牙周病，从而促进和提 高待治疗个体的全身或系统健康，如由以下健康指数（或生物标志）来证实：
[0035] 1)减少产生心脏病发作、中风、糖尿病、严重呼吸道感染、低出生体重婴儿、以及产 后神经/发育功能的机能障碍的风险，以及相关的死亡率增加的风险；
[0036] 2)减少脂肪动脉斑纹的发生、动脉粥样硬化斑的发生、牙斑形成的发生、动脉粥样 硬化斑上纤维帽变薄的发生、动脉粥样硬化斑破裂的发生、以及继发的血液凝固事件的发 生；
[0037] 3)减小颈动脉（内膜）壁厚度（如用超声技术估计）
[0038] 4)减少血液和系统循环接触口腔病原体和/或它们的毒性组分，具体地讲，致使 减少口腔细菌、脂多糖（LPS)在血液中的含量，和/或减少出现口腔病原体和/或其存在于 动脉斑、动脉结构和/或远隔器官（如，心脏、肝脏、胰腺、肾）中的组分；
[0039] 5)减少下呼吸道接触所吸入的细菌病原体及以及肺炎的并发和/或慢性阻塞性 肺病的恶化；
[0040] 6)减少循环血球密度、血色素、白血球数量和/或血小板数量的变化；
[0041] 7)减少出现炎性介体/细胞因子诸如TNF- a、IL-1、IL_6和CD-14的血液/血清 和唾液含量失调；
[0042] 8)减少出现包括C-反应蛋白、纤维蛋白原、a 1-抗胰蛋白酶和结合珠蛋白在内的 急性期反应物的血液/血清和唾液含量失调；
[0043] 9)减少出现包括高半胱氨酸、糖基化血红蛋白、8-异-PGF-2-a和尿酸在内的代 谢失调血液/血清和唾液标记物的失调；
[0044] 10)减少出现葡萄糖代谢失调（通常由葡萄糖耐受性异常测试估计）、空腹血液葡 萄糖含量增加和空腹胰岛素含量反常；和
[0045] 11)减少包括血液或血清胆固醇、甘油三酯、0^、册1、￥0^、载脂蛋白8、和/或载 脂蛋白A-1在内的血液类脂含量的失调。
[0046] 不受理论的束缚，据信本发明的组合物可通过有效地调节主体对致病口腔细菌和 相关细菌毒素、内毒素、炎性介体和细胞因子的反应来促进全身或体统健康。本发明的组 合物可有效地治疗和预防存在于口腔中的细菌介导的疾病，包括牙斑、齿龈炎、牙周炎和疱 瘆、以及牙体治疗后发生的感染，所述牙体治疗如骨质修整手术、拔牙、牙周翻瓣术、牙种植 体手术和洁牙及牙根整平术。通过控制存在于口腔中的细菌介导的疾病和病症，可预防或 最大程度地减少病原体细菌以及包括毒素和内毒素在内的相关有害物质扩散到血液和身 体其它部分中。
[0047] 口腔感染会导致系统性感染。细菌可从口部蔓延到血流和身体的其它部位中，使 人体健康置于危险中。近来的研宄已经发现，牙周炎可导致多种严重病症的发展，包括心脏 病、糖尿病、严重呼吸道疾病、以及婴儿早产和体重不足。
[0048] 已知慢性口腔感染会产生生物体细菌毒素和炎性细胞因子负荷，这可能引发并且 加剧动脉粥样硬化和血栓栓塞事件。此外，一种已知的牙周病菌，牙龈卟啉单胞菌，已经从 动脉硬化斑中分离出来。牙周病已经显示会诱导显著的菌血症事件和血栓栓塞事件诸如心 肌梗塞；菌血症后可能会发生中风。已证实，与口腔疾病相关的某些细菌血链球菌和牙龈卟 啉单胞菌会导致血小板在接触这些细菌时聚集。产生的细菌诱导的血小板聚集体会形成栓 塞，栓塞是造成急性心肌梗塞或中风的原因。
[0049]据信，牙周病的普通型式牙周炎是由作为生物膜存在于牙根表面上的小群革兰氏 阴性菌细菌引起的。生物膜被定义为彼此粘附和/或粘附到表面或界面上的基质包封的细 菌群。专家近来断定，三种均为革兰氏阴性菌和厌氧菌的菌种存在于这些生物膜上，并且在 牙周炎病例中占大多数。这些是牙龈卟啉单胞菌、福赛斯拟杆菌和伴放线放线杆菌，后者主 要发现于青少年牙周炎病例中。生物膜中的细菌脱落富含脂多糖（LPS)的囊泡。细菌和细 菌物质尤其是LPS穿过结合上皮和囊袋上皮，得以进入到结缔组织和血管中，引发并且持 续免疫性炎症。血液和血清中的所有组分进入到结缔组织中。B-和T-淋巴细胞、血浆细胞 和巨噬细胞出现于牙周组织中。LPS与单核细胞和巨噬细胞相互作用以活化细胞，合成大量 促炎细胞因子（包括IL-1、TNFa、PGE 2)和基质金属蛋白酶（MMP' s)。MMP' s破坏齿龈和 牙周韧带的结缔组织；已显示，IL_l、TNFa和？6&可介导骨质破坏。牙周炎可以若干种方 式增加系统疾病的易染性。来自生物膜的LPS和革兰氏阴性活菌以及来自发炎牙周组织的 细胞因子可以致病量进入循环。
[0050] 在一个方面中，本发明涉及用于人类和动物的局部用口腔组合物，包括治疗性漱 口液，尤其是漱口水；洁齿剂，诸如牙膏、牙胶和牙粉；非研磨性凝胶；口喷剂；摩丝；泡沫； 口香糖；锭剂和口气清新薄荷；牙科用液剂和冲洗流体；牙具，诸如牙线和洁牙带；和宠物 护理产品，包括营养补充剂、食物、饮用水添加剂、咀嚼物或玩具，所述组合物包含以下物质 的组合：
[0051] (a) -种或多种对至少一种宿主促炎因子具有抑制活性的第一活性剂，所述宿主 促炎因子选自基质金属蛋白酶（MMP' s)、环加氧酶（C0X)、PGE2、白介素1(IL-1)、IL-If3转 化酶（ICE)、转化生长因子M(TGF-M)、诱导型氧化氮合酶（iNOS)、透明质酸酶、组织蛋 白酶、核因子1^8_-1〇8)、和11-1受体相关激酶（11^1();和
[0052] (b) -种或多种对至少一种细菌毒力因子具有抑制活性的第二活性剂，所述细 菌毒力因子选自生物膜形成、生物膜粘附和细菌酶，所述细菌酶选自牙龈卟啉菌蛋白酶 (gingipains)、蛋氨酸裂解酶（METase)和半胱氨酸溶解酶（Cystalysin)。
[0053] 至少两种不同活性剂的组合，对于治疗和预防细菌介导的口腔病症和抑制口腔细 菌介导的系统疾病提供增大的功效。
[0054] 所述第一活性剂具有抗炎活性，可由对至少一种、优选两种或更多种关键性宿主 促炎因子的抵抗活性来证实，所述宿主促炎因子包括基质金属蛋白酶（MMP' s)、环加氧酶 (COX)、PGE2、白介素l(IL-l)、IL-10转化酶（ICE)、转化生长因子0 l(TGF-0 1)、诱导型 氧化氮合酶（1勵5)、透明质酸酶、组织蛋白酶、核因子1〇8(即-1〇8)、和11-1受体相关激酶 (IRAK)。这些因子含量的增高与齿龈炎和牙周炎相关，表明这些组分是宿主内主要的炎症 介体。
[0055] MMP's(包括各种亚型，例如MMP 1、2、3、8、9、13)是促使组织破坏和改造的宿主细 胞外基质蛋白酶。C0X酶催化花生四烯酸转变成前列腺素，其导致血管舒张、发红、肿胀和 疼痛。IL-10是促炎细胞因子，其诱导PGE 2和各种MMP's的合成，并且可能涉及齿槽骨的 破坏。IL-10合成为较大的前体细胞肽，并且需要被ICE裂解成活性形式。因此，ICE是用 于制备IL-10的处理酶。IRAK是IL-10下游的信号分子。诱导型氧化氮合酶（iNOS)是 产生大量一氧化氮所涉及的酶，其可能毒害细胞。TGF-M促使细胞增殖，并且被提出是一 种生长因子，调节过度宿主反应与其它主要炎症介体。透明质酸酶可催化具有抗炎和抗浮 肿特性的糖胺聚糖即内源性透明质酸（玻璃酸）降解，因此对于牙斑诱导的齿龈炎具有有 益的效果。因此，抑制透明质酸酶将增加透明质酸的内源含量。齿龈炎和牙周炎的主要特 征是破坏周围结缔组织的胶原基质。组织蛋白酶是由邻近破坏位点的细胞释放的蛋白分解 酶。核因子-kB(NF-kB)是由LPS诱导的转录因子，并且诱导多种细胞因子和MMP's的表 达，因此控制多个炎症途径。
[0056] 由于炎症自身是多因子过程，因此优选的抗炎剂是可抑制至少两种不同促炎因子 的那些。甚至更有效的是可抑制三种或更多种这些促炎因子的试剂。或者可使用试剂的组 合，来彼此补足，并且提供可抵抗多种、优选大多数或所有促炎因子的活性。
[0057] 对可能的试剂，测定它们在抑制齿龈炎和牙周炎中所涉及的已知纯宿主和细菌酶 的能力方面的活性。通过分别裂解荧光基质Mca-Pr〇-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH 2 (Bio mol International)和 N-乙酉先基-Trp-Glu-His-Asp-AMC(Biomol International)』!^ 对人类纯MMP' s (由Biomol International提供）和ICE (由Calbiochem提供）的抑制。 使用C. G. Knight等人在"FEBS Lett. "（第296页，263,1992年）中所述的荧光检测分析 法，来测定活性。
[0058] 使用Cayman C0X筛选检测分析试剂盒（Cayman Chemical)，根据制造商的指导，测 定环加氧酶C0X1和C0X2的抑制性。
[0059] 在以人胚肾HEK 293细胞表达的Smad结合元件（SBE)控制下，使用0 -内酰胺酶 报告基因测定TGF- 0活性。通过TGF- 0 -诱导的0 -内酰胺酶活性的降低来监测TGF- 0 活性的抑制。使用荧光能量共振转移检测分析法，通过包含两种荧光探针（香豆素和荧光 素）的荧光基质的裂解来测定内酰胺酶的活性。
[0060] 在人内皮ECV 304细胞中，使用报告基因检测分析法来测定IL-1R(受体）活 性。报告基因ICAM-1/荧光素酶位于由IL-1R活化的两种转录因子NF-kB和AP-1调节的 ICAM-1启动子的控制之下。通过IL-1 0 -诱导的荧光素酶活性的降低，监测IL-1R活性的 抑制。使用依赖ATP的化学发光检测分析法来测定荧光素酶活性。
[0061] 通过人上皮A549细胞中IL-1 0 -诱导的-PGE2释放的降低，测定对PGE2B成的抑 制。使用PGE2均相时间分辨荧光（HTRF)试剂盒（由CisBio提供），根据制造商的指导，测 定释放到组织培养基中的PGE 2量。
[0062] 所述检测分析法确定具有抗炎活性的试剂，包括维生素化合物，诸如核黄素、核 黄素磷酸酯、叶酸、氰钴胺（维生素B12)和甲萘醌（维生素K3);类姜黄素，诸如姜黄素、 去甲氧基姜黄素、二甲氧基姜黄素和四氢姜黄素；得自香料和植物诸如丁香、肉桂、桂皮、 生姜、罗勒、芫荽、芫荽叶和多香果的包含活性化合物的油和提取物，所述活性化合物包括 肉桂醛、肉桂酸、愈疮木酚和衍生物，诸如丁子香酚、异丁子香酚、二氢丁子香酚、香草基丁 基醚、香草醛（4-甲酰基愈疮木酚）、5_羟甲基茴香脑、4-乙基-2-甲氧基苯酚、4-烯丙 基-2-甲氧基苯酚乙酸酯和4-甲基愈疮木酚；包含麝香草酚、香芹酚和香芹基乙基醚的百 里香、牛至和鼠尾草的油和提取物；印度楝树油；类黄酮和黄酮，诸如黄芩素、黄芩甙、汉黄 芩甙、汉黄芩素和栎精；得自植物源诸如茶、蔓越橘、石榴和橡木皮的酚类，包括儿茶酚、没 食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶酸（EC)、表没食子儿茶素（EGC)、表没食子儿茶素没食子酸 酯（EGCG)、表儿茶素没食子酸酯（ECG)、茶黄素、茶红素、花青素/花青素原和花色素甙（例 如花青素、花翠素、天竺葵色素、芍药色素、锦葵色素和牵牛花色素）；鞣酸；没食子酸；鞣花 酸；鞣花单宁；己脒定；和黄连素。
[0063]证明代表性可用试剂活性的检测分析结果概述于下表1中。无数据报告之处不表 示化合物/活性物质无活性；而是表示化合物/活性物质没有测试该活性。
[0064] 表I :宿主促.炎因子的抑I制
[0065]
[0066]
[0067] +200碰化合物、0.001%的油、0.03%的提取物的抑制％〈25%
[0068] ++200碰化合物、0.001%的油、0.03%的提取物的抑制％彡25%
[0069] +++200碰化合物、0.001%的油、0.03%的提取物的抑制％彡50%
[0070] ++++200碰化合物、0.001%的油、0.03%的提取物的抑制％彡75%
[0071] 1提取物
[0072]2树脂油
[0073]已确定，具有活性例如可作为MMP抑制剂的其它可用试剂包括邻氨基苯甲酸薄荷 酯（商业上在唇香膏中用作防晒剂）；异丁酸己酯（葡萄香味剂）；4_羟基苯甲醛（香草 精的风味剂组分）；多酚大类，包括白藜芦醇（红葡萄酒的组分，存在于葡萄皮中）、异甘草 素（存在于甘草中）、芹菜素（存在于春黄菊中）、车轴草醇（存在于红三叶草中）、4' -甲 氧基黄酮、8-甲基-4' -甲氧基黄酮和6-甲基-4' -甲氧基黄酮。具有抑制活性的其它试 剂包括：抗iNOS的巴西木素和栎精；抗透明质酸酶的绿茶和松果菊提取物；抗组织蛋白酶 的肉桂；抗NF-kB的姜黄素、咖啡酸苯乙酯、蜂胶制剂和水飞蓟素；和抗IRAK的姜黄素、非 瑟酮、栎精、木犀草素、芹菜素和香叶木素。具有抗炎活性的其它试剂包括多种植物衍生的 化学物质：类黄酮、异类黄酮和其它酚类（例如杨梅酮、山奈酷、木犀草素、橙皮素、柚皮素、 蝶芪、芦丁、迷迭香酸、光甘