特咖宁在制备神经再生剂中的应用_2

文档序号:9254213阅读:来源:国知局
DNF表达的抑制作用。此外,还可以抑制低渗激活的容积敏感性氯电流,减 少病理情况下兴奋性谷氨酸的释放,缓解神经元损伤,从而促进神经元存活。综合以上作 用,特咖宁可以通过作用于多靶点而达到促进神经再生的作用进而发挥抗帕金森氏病、阿 尔茨海默氏病、认知症、唐氏症、脑血管障碍、脑中风,脊髓损伤、亨丁顿氏舞蹈病、多发性硬 化症、肌萎缩性侧索硬化症、癫痫、焦虑性障碍、综合失调症、抑郁症、躁郁症、发育障碍、记 忆缺陷多动障碍、学习障碍等神经疾病的作用。
【附图说明】
[0022] 图1是特咖宁对小鼠学习记忆行为的影响。
[0023]图2是特咖宁对慢性水浸拘束应激负荷小鼠抑郁样行为的影响。
[0024] 图3是特咖宁对慢性水浸拘束应激负荷小鼠海马中5-HT和5-HIAA的影响。
[0025] 图4是特咖宁对慢性水浸拘束应激负荷小鼠血浆中皮质酮的影响。
[0026] 图5是特咖宁对慢性水浸拘束应激负荷小鼠海马齿状回神经元增殖的影响。
[0027] 图6中特咖宁对roE4/cAMP/CREB/BDNF/TrkB信号通路激活作用的结果图;
[0028] 图7是特咖宁对容积敏感性氯电流抑制作用的结果图;
【具体实施方式】
[0029] 以下结合具体实施例对本发明进行进一步的描述。
[0030] 实施例1
[0031] 特咖宁滴丸的制备:取实化合物特咖宁(Theacrine) 5. 0g,与聚乙二醇60009. 5g 充分混匀后,80°C下熔融,在二甲基硅油中冷却,滴制成丸,得到滴丸剂100粒。
[0032] 实施例2
[0033] 特咖宁软胶囊的制备:取实化合物特咖宁(Theacrine) 5.0g,与植物油45. Og充分 混匀后,送入软胶囊包装机,得到软胶囊100粒。
[0034] 实施例3
[0035] 特咖宁片的制备:取实化合物特咖宁(Theacrine) 5. 0g,加淀粉溶液,制粒,压片、 分装,得到片剂1〇〇片。
[0036] 实施例4
[0037] 特咖宁胶囊的软胶囊:取实化合物特咖宁(Theacrine) 5.0g,与淀粉15. Og混匀, 加入10%淀粉浆101^,拌和制成软材,压过80~100目筛制粒,于601:~701:干燥,整粒, 加入硬脂酸镁〇. 2g,混合均匀,装胶囊100个。
[0038] 实施例5
[0039] 特咖宁复方胶囊的制备:取实化合物特咖宁(Theacrine)5. Og,单唾液酸四己糖 神经节苷脂钠2.0g,与淀粉15. Og混匀,加入10%淀粉浆10mL,拌和制成软材,压过80~ 100目筛制粒,于60°C~70°C干燥,整粒,加入硬脂酸镁0. 2g,混合均匀,装胶囊100个,得 特咖宁复方胶囊。
[0040] 实施例6
[0041] 特咖宁咀嚼糖的制备:物特咖宁(Theacrine)5. 0g,咖啡因5. 0g,姜提取物10. 0g, 优质白砂糖400. 0g,甲级葡萄糖80. 0g,制成特咖宁润喉糖500粒。
[0042] 实施例7
[0043] 特咖宁复合饮料的制备:物特咖宁(Theacrine) 10.0 mg,咖啡因10.0 mg,和绿茶 1.0 g混合,加天然矿泉水1000 mL,加鹿糖配制而成。
[0044] 实施例8
[0045] 以下实骀例中的特咖宁剂量为实施列1-7中的特咖宁钝品量计算(不含辅料等)。
[0046] 试验例1特咖宁对试验动物学习记忆能力的影响:将昆明种小鼠随机分成空白对 照组(Nor)、咖啡因对照低剂量组(Ca-L,10mg/kg)、咖啡因对照高剂量组(Ca-H,30mg/kg)、 特咖宁低剂量组(Tc-L,10mg/kg)和特咖宁高剂量组(Tc-H,30mg/kg)。每日给药一次,连 续给药4天,避暗训练于给药第三天进行。实验动物在给药30min后放入避暗行为测试验 箱,每只动物训练5min。训练前将小鼠背着洞口放入明室,先适应环境3min,然后给暗室铜 栅通以36V电压,小鼠一进入暗室3s后即受到电击,训练持续5min。每只动物训练完毕后 用蘸少量乙醇的棉花清洁避暗箱内部,待其干燥后进行下一组实验。训练24h后,即第四天 于给药30min后对小鼠进行记忆测验,记录小鼠第一次进入暗室的时间,此为避暗潜伏期, 并记录5min内小鼠进入暗室的次数(即避暗错误次数),5min内未进入暗室的小鼠其潜伏 期按300s计算。摄像头分别记录每只动物5min内行为变化,实验结束后用小鼠避暗行为 分析软件进行分析。试验中各组动物交叉进行测定,试验在8:00-14:00之间完成。结果如 图1所示,特咖宁低、高剂量均能减少试验动物避暗行为的错误次数,表明特咖宁可以提高 小鼠记忆功能。
[0047] 试验例2特咖宁对帕金森病模型小鼠运动行为的影响:8周龄雄性C57BL/6小鼠 60只,随机分为生理盐水对照组(Nor),MPTP模型组,咖啡因(Ca, 20mg/kg)阳性对照组,及 特咖宁低剂量组(Tc-L,10mg/kg)、特咖宁高剂量组(Tc-H,20mg/kg),每组12只。爬杆实验 (pole test):将一直径为2. 5cm的泡沫塑料小球固定于一根长60cm粗Icm的木杆顶端,木 杆上缠2层纱布防滑。将小鼠头朝上置于离杆顶小球不远处,记录其爬至杆底的时间,交替 重复5次取平均值。小鼠爬完杆子的全程所用的时间越少,说明小鼠肢体运动协调情况越 好,爬杆实验结果见表1所示,MPTP模型组小鼠爬杆时间显著延长,且表现为步态不稳,四 肢抓杆不牢,随给药时间延长其爬杆时间也相应延长。咖啡因(Ca)及特咖宁高剂量(Tc-H) 均显著缩短小鼠爬杆全程时间,咖啡因最强,特咖宁低剂量(Tc-L)也能在一定程度减少小 鼠爬杆时间,结果提示特咖宁可以改善MPTP造成小鼠运动功能失调。
[0048] 表1特咖宁(Theacrine)对MPTP模型小鼠运动协调功能的影响(Mean土SD,n= 12)
[0049]
[0050]注:###P < 0? 001,与正常组比;#P < 0? 01,< 0? 001,与模型组相比。
[0051] 试验例3特咖宁对慢性水浸拘束应激(CWIRS)负荷小鼠抑郁行为的影响:应激 负荷实验使用动物为4周龄雄性昆明种小白鼠,由广东省医学实验动物中心购入。饲养温 度23±2°C,照明时间12小时/日(7:00~19:00开灯),经饲养一周后进行实验。将实 验小鼠分为7组(n = 10),分别为正常组(Nor),应激模型组(CWIRS),氟西汀阳性对照组 (Flx,20mg/kg),咖啡因组(Ca,20mg/kg),特咖宁低剂量组(Tc-L,5mg/kg),特咖宁中剂量 组(Tc-M,10mg/kg)与特咖宁高剂量组(Tc-H,20mg/kg)。用生理盐水将特咖宁溶解配置成 5,10和20mg/kg经口服方式给药,对照组给与等体积生理盐水,连续给药4周。从给药的 第二周起,除正常组小鼠外,小鼠每天水浸拘束应激1次,每次应激时间为2h,连续3周,以 建立小鼠抑郁模型。空白对照组小鼠即转移至新的饲养笼中2h,禁食。水浸拘束应激是将 小鼠禁食强制放入拘束装置(50mL聚丙烯锥形离心管,离心管壁上有小孔),将小鼠垂直浸 于23±2°C水浴中使水位达剑突处。慢性水浸拘束应激后,将小鼠进行抑郁样行为
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