度的混悬液备用，本实验剂量按石杉碱甲 片g/kg计算。
[0031] 丁溴酸东莨菪碱：20mg/瓶，海南双成药业有限公司生产，批号20100615,用生理 盐水配成所需浓度的溶液备用，本实验剂量按丁溴酸东莨菪碱g/kg计算。
[0032] 吡拉西坦片：0. 4g/片，湖北华中药业有限公司生产，批号20100831，用 0. 5%CMC-Na (羧甲基纤维素钠)溶液配制成所需浓度的混悬液备用，本实验剂量按吡拉西坦 片g/kg计算。
[0033] 亚硝酸钠：分析纯，成都市科龙化工试剂厂生产，批号20110228,用生理盐水配成 所需浓度的溶液备用，本实验剂量按亚硝酸钠g/kg计算。
[0034] 95%乙醇：分析纯，成都市长联化工试剂有限公司生产，批号20090727,用蒸馏水 配制成40%乙醇备用，本实验剂量按95%乙醇g/kg计算。
[0035] 1. 2实验仪器： 酶标仪=DenleyDragonMK2, 3 型，LABSYSTEMS 公司生产。
[0036] 小鼠跳台仪：ZXC-5Q，成都泰盟科技有限公司生产。
[0037] 脑立体定位仪：DM - 2000,成都泰盟科技有限公司生产。
[0038] 小鼠自主活动仪：ZZ-6型，成都泰盟科技有限公司生产。
[0039] 1. 3实验动物： 昆明种小鼠，SPF级，由四川省中医药科学院实验动物中心提供，生产合格证号SCXK(川 2010-19 号）。
[0040] 2实验环境： 四川省中医药科学院药理毒理研究所SPF屏障系统中。室温20-22°C，相对湿度40-70% 左右，照明12小时明亮，12小时黑暗。合格证号为SYXK (川）2008-100。
[0041] 3?实验方法及结果： 3. 1对小鼠记忆获得障碍模型的影响 取体重为18-22g的小鼠130只，雌雄各半，按表1随机分为13组，灌胃给药，每天灌 胃给药两次，连续给药7次；对照组及模型组则给予等体积蒸馏水，阳性组则给予石杉碱甲 0. 002mg/kg。在第5次给药后，间隔50min除空白对照组以外其余各组均腹腔注射东莨菪 碱5mg/kg，对照组则给予等体积生理盐水。造模后IOmin进行跳台法测试，将动物放入反应 箱内适应3min，然后立即通以36V交流电。动物受到电击后的正常反应是跳回平台以躲避 伤害性刺激，多数动物可能再次或者多次跳到电栅上，受到电击后又迅速跳回平台。如此测 试5min，记录小鼠跳下平台受到电击的次数(错误次数)，并以此作为学习成绩。24h后(末 次给药60min后)后再次进行测试，每只小鼠测定5min，记录动物第一次跳下平台的潜伏期 以及5min内的错误次数，结果见表1。
[0042] 表1结果显示，模型组造模成功，小鼠在腹腔注射东莨菪碱5. Omg/kg后，与对照组 相比较差异具有统计学意义，模型组中小鼠跳下平台的潜伏期明显缩短，其错误次数明显 增加。单独使用淫羊藿、红花、槐花，或淫羊藿+红花、槐花+红花、槐花+淫羊藿对东莨菪 碱致记忆获得障碍模型无明显影响，而本发明上述实施例1、实施例2、实施例3、实施例4以 及石杉碱甲均可显著延长东莨菪碱致记忆获得障碍模型动物的潜伏期，减少其错误次数， 与模型组比较有统计学差异。表明本发明的药用组合物或以其为有效成分的药物，对记忆 获得障碍具有良好的防治作用。
[0043] 3. 2对缺血性痴呆大鼠的影响 取体重20(T250g的大鼠，雌雄各半。将动物随机分为对照组和痴呆大鼠造型组，将 造模大鼠麻醉后在无菌情况下结扎颈总动脉，缝合皮肤，饲养一个月后，用跳台实验筛选动 物，将潜伏期提前20%、错误次数增加20%的动物作为实验动物。将合格的动物按表2随机 分组，灌胃给药。每天一次，连续30天，对照组和模型组则给以等体积的0. 5%CMC。于给药 第26用morris水迷宫法测定小鼠的学习记忆能力。
[0044] 定向航行试验：实验前将水池分为1、2、3、4四个象限，然后将安全平台置于其中 一个象限内，水温控制在20°C左右。此阶段是让动物通过空间搜索，学习、记忆平台的位置， 在此期间将安全平台放置于一个固定的位置。将动物面向池壁从固定的象限放入水池中， 并开始计时，测定动物到达平台所需的时间(潜伏期)和距离(如在120s内未找到平台，则其 潜伏期按120s计算)，在平台上持续的时间等指标，动物每天进行4次测试，连续4天，以第 4天的成绩为其记忆、学习成绩。结果见表2。
[0045] 表2结果显示，大鼠在脑缺血2个月后，其定向航行距离显著增加，找到平台的时 间（潜伏期）明显延长，与对照组比较有统计学差异。提示其记忆能力已经严重受损。单独 使用淫羊藿、红花、槐花，或淫羊藿+红花、槐花+红花、槐花+淫羊藿对脑缺血致记忆、学习 能力降低模型大鼠无明显影响，与模型组比较无统计学差异；而上述实施例1、实施例2、实 施例3、实施例4以及阳性药尼莫地平均可显著缩短定向航行距离、减少找到平台的时间， 与模型组比较有统计学差异。表明本发明对缺血性痴呆具有显著的治疗效果。
[0046] 上述实验结果清楚显示，由淫羊藿、槐花和红花提取物组成的本发明药用组合物 或以其为有效成分的本发明药物，在增强记忆、改善老年痴呆症方面具有显著的协同增效 作用，其结果明显优于淫羊藿和红花的单独作用。
【主权项】
1. 防治老年痴呆症的药用组合物，其特征是由淫羊藿、红花和槐花为原料的提取物组 成，各原料的重量比例为淫羊藿：红花：槐花=1: (〇. 1~1〇): (〇. 1~1〇)。2. 如权利要求1所述的药用组合物，其特征是所述原料的重量比例为淫羊藿：红花：槐 花为 I: (1~5) : (1~10)。3. 如权利要求2所述的药用组合物，其特征是所述原料的重量比例为淫羊藿：红花：槐 花为1:1:1。4. 如权利要求1至3之一所述的药用组合物，其特征是所述淫羊藿提取物中淫羊藿苷 的重量> 5%，和/或红花提取物中羟基红花黄色素A的重量> 10%，和/或槐花提取物中芦 丁的重量彡40%。5. 如权利要求1至4之一所述药用组合物的制备方法，其特征是将所述比例量的淫羊 藿、红花和槐花，分别或共同用体积含醇比例为50~80%的乙醇-水混合溶液加热回流提取， 收集提取液，固液分离，滤液除去溶剂，干燥后得到所述组成的组合物；其中，所述原料回流 提取时的原料与乙醇-水混合溶液的重量体积比优选为1:6~12 ;回流提取优选为2~3次， 每次回流1~3小时。6. 如权利要求1至4之一所述药用组合物的提取物制备方法，其特征是将所述比例量 的淫羊藿、红花和槐花，分别或共同用水加热回流提取，收集提取液，固液分离，滤液除去溶 剂，干燥后得到所述组成的组合物；其中，所述原料回流提取时的原料与水的重量体积比优 选为1:8~15 ;回流提取优选为2~3次，每次回流1~3小时。7. 如权利要求1至4之一所述药用组合物的提取物制备方法，其特征是按下述方式进 行： 淫羊藿提取物：将所述比例量的淫羊藿用体积含醇比例为〇~80%的乙醇-水混合溶 液回流提取，提取液除去乙醇后，用大孔吸附树脂吸附再水洗除杂后，用体积含醇比例为 50~80%的乙醇-水溶液洗脱，收集洗脱液，除去溶剂，干燥、粉碎，得到所述的淫羊藿提取 物；其中，回流提取时淫羊藿与所述乙醇-水混合溶液的重量体积比优选为1:6~15 ;回流提 取优选为2~3次，每次回流1~3小时； 红花提取物：将所述比例量的红花用40~6(TC的水浸提后，提取液用大孔吸附树脂 吸附再水洗除杂后，用体积含醇比例为50~80%的乙醇-水溶液洗脱，收集洗脱液，除去 溶剂，干燥、粉碎，得到所述的红花提取物；其中，水浸提时红花与水的重量体积比优选为 1:10~20 ;水浸提时优选为2~3次，每次浸提0. 5~1小时； 槐花提取物：将所述比例量的槐花用PH 8. 5~10和40~6(TC的水浸提后，提取液浓缩 后，用盐酸调节PH值2-4,静置沉淀后固液分离，固体成分干燥、粉碎，得到所述的槐花提取 物；其中，水浸提时槐花与水的重量体积比优选为1:1〇~20 ;水浸提时优选为2~4次，每次浸 提0. 5~2小时； 将上述分别得到的淫羊藿提取物、红花提取物、槐花提取物混合，得到所述的组合物。8. 防治老年痴呆症的药物，其特征是以权利要求1至4之一所述的药用组合物为有效 成分，与药物中可以接受的辅料成分共同组成可供使用的口服剂型。
【专利摘要】防治老年痴呆症的药用组合物、药物及制备方法。该药用组合物由淫羊藿、红花和槐花为原料的提取物组成，各原料的重量比例为淫羊藿：红花：槐花=1:(0.1~10):(0.1~10)。所述药用组合物中的提取物，为各原料药的水和/或醇提取物的混合物。以该药用组合物为有效成分，与药物中可以接受的辅料成分可共同组成可供使用的口服剂型。本发明的药用组合物及相应药物可有效延长老年痴呆症潜伏期，减少错误次数，改善认知功能障碍，延缓大脑萎缩，提高记忆力，在防治老年痴呆症方面具有显著作用。
【IPC分类】A61K36/489, A61P25/28
【公开号】CN105079090
【申请号】CN201410210393
【发明人】谭正怀, 易进海, 熊静悦
【申请人】四川省中医药科学院
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2014年5月19日