0.260毫克/毫升。修饰率最大值为 51.6 %和59.2 %，因此，最优选溫度为25°C。
[0034] 实施例5 ：3kDaCH3〇-(CH2CH2〇)日日-C = 〇-basifungin的制备
[00对将分子量为3kDa的C曲0-(C此C此0)50-0H溶于适量的二氯甲烧中，加入1.1当量的 DSC(二班巧酷亚胺碳酸醋），2当量的DIEA(二异丙基乙胺），加入0.2当量的DMAP(N，N-二甲 基氨基化晚），溫控60°C，反应化，浓缩，用异丙酸析晶，得到3W)a分子量的PEG活化产物PEG-SC。
[0036] 将憐酸缓冲液加入己西芬净溶液中，调节其抑至8.3,然后加入阳G-SC在25°C进行 反应4小时。将反应混合液用色谱分离，流动相为含氯化钢醋酸缓冲液，色谱分离后，浓缩， 冻干得?j3kDa分子量的聚乙二醇修饰的己西芬净C出0-(师师0)日日-C(=0)-basifungin;
[0037] 实施例6 化DaCH3〇-(CH2CH2〇)i日日-C(=0)-basifungin的制备
[003引将分子量为化Da的C出0-(C出C此0)100-0田容于适量的二氯甲烧中，加入1.1当量的 DSC(二班巧酷亚胺碳酸醋），2当量的DIEA(二异丙基乙胺），加入0.2当量的DMAP(N，N-二甲 基氨基化晚），溫控60°C，反应化，浓缩，用异丙酸析晶，得到9W)a分子量的PEG活化产物PEG-SC。
[0039] 将憐酸缓冲液加入己西芬净溶液中，调节其抑至8.3,然后加入阳G-SC在25°C进行 反应4小时。将反应混合液用色谱分离，流动相为含氯化钢醋酸缓冲液，色谱分离后，浓缩， 冻干得?j6kDa分子量的聚乙二醇修饰的己西芬净C出0-(师师0)1日日-C( =0)-basifungin;
[0040] 实施例7 9kDaCH3〇-(CH2CH2〇)i日日-C(=0)-basifungin的制备
[OOW 将分子量为9kDa的C曲0-(C出C此Ohso-OH溶于适量的二氯甲烧中，加入1.1当量的 DSC(二班巧酷亚胺碳酸醋），2当量的DIEA(二异丙基乙胺），加入0.2当量的DMAP(N，N-二甲 基氨基化晚），溫控60°C，反应化，浓缩，用异丙酸析晶，得到9W)a分子量的PEG活化产物PEG-SC。
[0042] 将憐酸缓冲液加入己西芬净溶液中，调节其抑至8.3,然后加入阳G-SC在25°C进行 反应4小时。将反应混合液用色谱分离，流动相为含氯化钢醋酸缓冲液，色谱分离后，浓缩， 冻干得?JgkDa分子量的聚乙二醇修饰的己西芬净C出0-(师师0)1日日-C( =0)-basifungin;
[0043] 实施例 8 10kDaCH3〇-(CH2CH2〇)i6〇-C(=0)-basifungin 的制备
[0044] 将分子量为IOkDa的C曲0-(C出C此0)160-0田容于适量的二氯甲烧中，加入1.1当量的 DSC(二班巧酷亚胺碳酸醋），2当量的DIEA(二异丙基乙胺），加入0.2当量的DMAP(N，N-二甲 基氨基化晚），溫控60°C，反应8h，浓缩，用异丙酸析晶，得到IOkDa分子量的PEG活化产物 PEG-SCo
[0045] 将憐酸缓冲液加入己西芬净溶液中，调节其抑至8.3,然后加入阳G-SC在25°C进行 反应4小时。将反应混合液用色谱分离，流动相为含氯化钢醋酸缓冲液，色谱分离后，浓缩， 冻干得到IOkDa分子量的聚乙二醇修饰的己西芬净C出0-(师师0)16日-〔（=0)-basifungin;
[0046] 实施例9 20kDaCH3〇-(CH2CH2〇)3日日-C = 〇-basifungin的制备
[0047] 将分子量为20kDa的C曲0-(C出C此0)330-0田容于适量的二氯甲烧中，加入I. I当量的 DSC(二班巧酷亚胺碳酸醋），2当量的DIEA(二异丙基乙胺），加入0.2当量的DMAP(N，N-二甲 基氨基化晚），溫控60°C，反应8h，浓缩，用异丙酸析晶，得到20kDa分子量的PEG活化产物 PEG-SCo
[004引将憐酸缓冲液加入己西芬净溶液中，调节其抑至8.3,然后加入阳G-SC在40°C进行 反应4小时。将反应混合液用色谱分离，流动相为含氯化钢醋酸缓冲液，色谱分离后，浓缩， 冻干得到20kDa分子量的聚乙二醇修饰的己西芬净C出0-(师师0)3日日-C( =0)-basifungin;
[0049] 实施例 10 30kDaCH3〇-(CH2CH2〇)日日日-C(=0)-basifungin的制备
[0050] 将分子量为30kDa的C曲0-(C出C此0)日〇〇-〇田容于适量的二氯甲烧中，加入1.1当量的 DSC(二班巧酷亚胺碳酸醋），2当量的DIEA(二异丙基乙胺），加入0.2当量的DMAP(N，N-二甲 基氨基化晚），溫控60°C，反应8h，浓缩，用异丙酸析晶，得到30kDa分子量的PEG活化产物 PEG-SCo
[0051] 将憐酸缓冲液加入己西芬净溶液中，调节其抑至8.3,然后加入阳G-SC在25°C进行 反应4小时。将反应混合液用色谱分离，流动相为含氯化钢醋酸缓冲液，色谱分离后，浓缩， 冻干得到30kDa分子量的聚乙二醇修饰的己西芬净C出0-(师师0)日日日-C( =0)-basifungin; [0化2]实施例 11 40kDaCH3〇-(CH2CH2〇)6 日日-C(=0)-basifungin 的制备
[(K)对将分子量为40kDa的C出0-(C出C出0)650-0田容于适量的二氯甲烧中，加入1.1当量的 DSC(二班巧酷亚胺碳酸醋），2当量的DIEA(二异丙基乙胺），加入0.2当量的DMAP(N，N-二甲 基氨基化晚），溫控60°C，反应8h，浓缩，用异丙酸析晶，得到40kDa分子量的PEG活化产物 PEG-SCo
[0054]将憐酸缓冲液加入己西芬净溶液中，调节其抑至8.3,然后加入阳G-SC在25°C进行 反应4小时。将反应混合液用色谱分离，流动相为含氯化钢醋酸缓冲液，色谱分离后，浓缩， 冻干得到40kDa分子量的聚乙二醇修饰的己西芬净C出0-(师师0)6日日-C( =0)-basifungin; [0055]实施例 12 50kDaCH3〇-(CH2CH2〇)8日日-C(=0)-basifungin的制备 [0056] 将分子量为SOkDa的C曲0-(C出C此0)8〇〇-〇田容于适量的二氯甲烧中，加入1.1当量的 DSC(二班巧酷亚胺碳酸醋），2当量的DIEA(二异丙基乙胺），加入0.2当量的DMAP(N，N-二甲 基氨基化晚），溫控60°C，反应8h，浓缩，用异丙酸析晶，得到SOkDa分子量的PEG活化产物 PEG-SCo
[0057]将憐酸缓冲液加入己西芬净溶液中，调节其抑至8.3,然后加入阳G-SC在25°C进行 反应4小时。将反应混合液用色谱分离，流动相为含氯化钢醋酸缓冲液，色谱分离后，浓缩， 冻干得到SOkDa分子量的聚乙二醇修饰的己西芬净C出0-(师师0)8日日-C( =0)-basifungin。
【主权项】
1. 一种聚乙二醇修饰的巴西芬净化合物及其制备方法，其特征在于，巴西芬净通过酯 键与不同分子量的聚乙二醇相连，具体通式为D-R，其中D为巴西芬净抗真菌药物，R为PEG-(C = 0)-〇2. 根据权利要求1所述的聚乙二醇修饰的巴西芬净化合物，其特征在于巴西芬净D的修 饰位点为其环上的羟基。3. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于所述的聚乙二醇可为直链型或支链型聚 乙二醇，优选直链型聚乙二醇。4. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，PEG的分子量为3kDa~50kDa，优选分子 量为 3kDa，6kDa，9k，1 OkDa，20kDa，30kDa，40kDa，50kDa，更优选分子量为 9kDa。5. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，R连接的活化基团包括酯基、酰胺基、酰 亚氨基、氨基甲酸酯基、羧基、羟基、琥珀酰亚氨基、环氧基、氧羰基咪唑基、硝基苯基、醛基、 半胱氨酸基、组氨酸基或伯胺等。6. 根据权利力要求5所述的活化基团，优选琥珀酰亚胺琥珀酰酯（SS)、琥珀酰亚胺碳酰 酯(SC)、对硝基苯碳酸和醛基(adehyde)。7. 根据权利力要求5所述的活化基团，更优选琥珀酰亚胺碳酰酯(SC)。8. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于该化合物在保持巴西芬净原有活性的同 时，具有更好的抗真菌作用。9. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于巴西芬净通过酯键与不同分子量的聚 乙二醇相连，具体地，将PEG活化，形成端基为琥珀酰亚胺碳酸酯的活化物，再在碱性条件下 与巴西芬净的羟基通过酯键结合，得到聚乙二醇修饰的巴西芬净的化合物。10. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于具体指以下步骤： (1) mPEG修饰剂的制备 (2) 与巴西芬净进行反应 (3) 纯化，得到目标修饰产物。11. 根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于反应体系pH值为6.0~10.0，优选pH值 为6.0~9.0，更优选pH为8.3。12. 根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于反应时间2~6h，优选反应时间为3~ 5h，更优选反应时间为4h。13. 根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于反应体系的磷酸盐缓冲液浓度为5~ 50mmol/L，优选磷酸盐缓冲液的浓度为10~30mmol/L，更优选磷酸盐缓冲液的浓度为 25mmol/L〇14. 根据权利要求8所描述的制备方法，其特征在于反应体系的温度为5~40°C，优选温 度为25°C。
【专利摘要】本发明涉及一种聚乙二醇修饰的巴西芬净及其制备方法。其特征是，先将不同分子量的聚乙二醇的一端与二琥珀酰亚胺碳酸酯形成活泼酯，再与巴西芬净通过酯键连接，得到不同分子量的聚乙二醇修饰的巴西芬净。本发明中的聚乙二醇修饰的巴西芬净在保持原有活性的同时，其稳定性增强，在体内半衰期延长。
【IPC分类】A61K38/08, A61P31/10, A61K47/48
【公开号】CN105497910
【申请号】CN201510970112
【发明人】刘自成, 姚志勇, 李新宇, 支钦, 周莹
【申请人】深圳市健元医药科技有限公司
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2015年12月21日