一种止疼剂及其制备方法
【专利摘要】本发明提供了一种止疼剂，其原料药包括防己、透骨草、延胡索、吴茱萸、五灵脂、没药、海参、土茯苓、天竺黄、松节、威灵仙、当归、白芍、生甘草、冰片、莪术、薏苡仁、生白术、肉苁蓉。本发明中药制剂就是在这个基础上提出，经过大量的临床用药观察，实验室研究以及相关安全性检测后，证实本发明中药制剂的组方配伍精当，治疗效果确定，安全性可靠，以穴位注射液的剂型进行临床推广，给各种因骨病疼痛所困扰的患者带来了福音。
【专利说明】
_种止疼剂及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及中医药技术领域，尤其涉及一种用于缓解骨病疼痛的中药穴位注射液 止疼剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 骨病从专业角度上来说是"骨病学"，它是骨科疾病三大病学之一，另外两种分别 为"正骨学"和"筋伤学"。骨病也是骨科疾病中最常见的疾病，它主要分为:先天性骨病、代 谢性骨病、骨坏死、职业性骨病、地方性骨病、关节退行性骨病、骨肿瘤、骨痈疽、骨结核、骨 关节痹证、痿证、筋挛等几大块内容。在这里请各位读者注意的是我们平时所说的"骨病"从 专业术语来讲是不正确的，可以说成是"骨科疾病"或者是更具体的病种。
[0003] 骨病一般包括:风湿性关节炎、类风湿性关节炎、退行性关节炎、颈椎病、腰椎病、 肩周炎、骨质增生、股骨头坏死、产后风等。
[0004] 风湿性关节炎是一种常见的急性或慢性结缔组织炎症。可反复发作并累及心脏。 临床一以关节和肌肉游走性酸楚、重著、疼痛为特征.属变态反应性疾病.是风湿热的主要 表现之一，多以急性发热及关节疼痛起病。
[0005] 类风湿性关节炎是一种以关节滑膜炎为特征的慢性全身性自身免疫性疾病。滑膜 炎持久反复发作，可导致关节内软骨和骨的破坏，关节功能障碍，甚至残废。血管炎病变累 及全身各个器官，故本病又称为类风湿病。
[0006] 退行性关节炎又称肥大性关节炎，是指一些老年人常常会有腰痛、腿痛、关节痛。 由于它多见于老年人，因而也称作老年性关节炎。老年性退化，是引起退行性关节炎的主要 原因。
[0007] 颈椎病又称颈椎综合征，是颈椎骨关节炎、增生性颈椎炎、颈神经根综合征、颈椎 间盘脱出症的总称，是一种以退行性病理改变为基础的疾患。表现为颈椎间盘退变本身及 其继发性的一系列病理改变，如椎节失稳、松动;髓核突出或脱出；骨刺形成;韧带肥厚和继 发的椎管狭窄等，刺激或压迫了邻近的神经根、脊髓、椎动脉及颈部交感神经等组织，并引 起各种各样症状和体征的综合征。
[0008] 肩周炎是以肩关节疼痛和活动不便为主要症状的常见病症。本病的好发年龄在50 岁左右，女性发病率略高于男性，多见于体力劳动者。如得不到有效的治疗，有可能严重影 响肩关节的功能活动。据临床观察，医院常用药合盛堂宗予以治疗，本病早期肩关节呈阵发 性疼痛，常因天气变化及劳累而诱发，以后逐渐发展为持续性疼痛，并逐渐加重，昼轻夜重， 肩关节向各个方向的主动和被动活动均受限。肩部受到牵拉时，可引起剧烈疼痛。
[0009] 骨质增生症又称为增生性骨关节炎、骨性关节炎(0A)、退变性关节病、老年性关节 炎、肥大性关节炎，是由于构成关节的软骨、椎间盘、韧带等软组织变性、退化，关节边缘形 成骨刺，滑膜肥厚等变化，而出现骨破坏，引起继发性的骨质增生，导致关节变形，当受到异 常载荷时，引起关节疼痛，活动受限等症状的一种疾病。
[0010] 股骨头坏死，又称股骨头缺血性坏死，为常见的骨关节病之一。大多因风湿病、血 液病、潜水病、烧伤等疾患引起，先破坏邻近关节面组织的血液供应，进而造成坏死。其主要 症状，从间断性疼痛逐渐发展到持续性疼痛，再由疼痛引发肌肉痉挛、关节活动受到限制， 最后造成严重致残而跛行。
[0011] 骨肉瘤是骨恶性肿瘤中最多见的一种，是从间质细胞系发展而来，肿瘤迅速生长 是由于肿瘤经软骨阶段直接或间接形成肿瘤骨样组织和骨组织。肿瘤部位发生不同程度的 疼痛是骨肉瘤非常常见和明显的症状，由膨胀的肿瘤组织破坏骨皮质，刺激骨膜神经末梢 引起。疼痛可由早期的间歇性发展为数周后的持续性，疼痛的程度可有所增强。下肢疼痛可 出现避痛性跛行。
[0012] 诸如此类骨病，虽然其发病的原因不同、症状不同、预后不同，但是一直困扰着几 类患者疗效及主观感受的症状是------疼痛。如何更好的缓解疼痛，减少因服用止痛片甚 至注射杜冷丁等止痛药，影响着医患双方。
[0013] 近年来，中医药对于骨病疼痛的治疗作用逐渐被人们所关注，中医认为骨病导致 的疼痛多"瘀、热、毒，虚"，因此提出了相应的治则治法，不论是中药的内服、外用，还是针 灸、埋线都起到了很好的治疗作用，迅速缓解疼痛，减少疼痛复发，配合西药对于原发病的 治疗，治愈疾病，使患者的生活质量得到提高，进而能够减少了精神类疾病的发生率，因此， 本发明中药制剂就是在这个基础上提出，经过大量的临床用药观察，实验室研究以及相关 安全性检测后，证实本发明中药制剂的组方配伍精当，治疗效果确定，安全性可靠，以穴位 注射液的剂型进行临床推广，给各种因骨病疼痛所困扰的患者带来了福音。
【发明内容】
[0014] 为解决上述技术问题，本发明提供了一种用于缓解骨病疼痛的中药穴位注射液止 疼剂，其配伍精当，治疗效果确定，安全性可靠，以穴位注射液的剂型进行临床推广，给各种 因骨病疼痛所困扰的患者带来了福音。
[0015] 本发明提供一种用于缓解骨病疼痛的中药穴位注射液止疼剂，其原料药包括防 己、透骨草、延胡索、吴茱萸、五灵脂、没药、海参、土茯苓、天竺黄、松节、威灵仙、当归、白芍、 生甘草、冰片、莪术、薏苡仁、生白术和肉苁蓉。
[0016] 其中，所述透骨草:防己：延胡索三者的用量质量比为3:1:3。
[0017]其中，所述注射液止疼剂中各原料药的重量份分别为防己10重量份、透骨草30重 量份、延胡索30重量份、吴茱萸11重量份~13重量份、五灵脂14重量份~16重量份、没药14 重量份~16重量份、海参14重量份~16重量份、土茯苳29重量份~31重量份、天竺黄9重量 份~11重量份、松节9重量份~11重量份、威灵仙19重量份~21重量份、当归29重量份~31 重量份、白苟29重量份~31重量份、生甘草19重量份~21重量份、冰片9重量份~11重量份、 莪术14重量份~16重量份、薏该仁29重量份~31重量份、生白术39重量份~41重量份、肉灰 蓉29重量份~31重量份。
[0018]其中，所述注射液止疼剂中各原料药的重量份分别为防己10重量份、透骨草30重 量份、延胡索30重量份、吴茱萸12重量份、五灵脂15重量份、没药15重量份、海参15重量份、 土茯苳30重量份、天竺黄10重量份、松节10重量份、威灵仙20重量份、当归30重量份、白苟30 重量份、生甘草20重量份、冰片10重量份、莪术15重量份、意该仁30重量份、生白术40重量 份、肉苁蓉30重量份。
[0019 ]本发明还提供上述注射液的制备方法，其包括：
[0020] 第一步，将各原料药组分分别称取，洗净，按所述重量份混合在一起，加入相对于 获得的混合物质量的6~8倍的醇浓度为80%的乙醇，加热回流5小时后提取，过滤，得第一 过滤液;将滤渣再次用相对于获得的混合物质量的4倍的醇浓度80 %的乙醇溶解，加热回流 3小时后提取，过滤，得第二过滤液;合并第一过滤液和第二过滤液，减压回收乙醇并浓缩至 药液浓度为〇.8g生药/mL，上D101大孔吸附树脂洗脱，树脂体积是浓缩药液体积的5倍，先用 7倍树脂柱体积的去离子水或蒸馏水洗脱，再用5倍树脂柱体积的醇浓度为90%乙醇洗脱， 收集乙醇洗脱液，减压浓缩除去乙醇，干燥并粉碎成粉末；
[0021] 第二步，向第一步所得粉末中加入注射用水，每1000ml注射用水中对应的生药为 300g，微热促进粉末溶解完全，静置过夜，0.45μπι微孔滤膜滤过得滤液，所得滤液加入pH调 节剂柠檬酸调节pH为6.2~6.8，所得溶液灭菌，分装，既得。
[0022]有益的技术效果
[0023] 本发明提供的止疼剂配伍精当，治疗效果确定，安全性可靠，以穴位注射液的剂型 进行临床推广，给各种因骨病疼痛所困扰的患者带来了福音。
【具体实施方式】
[0024] 中医药对于骨病疼痛的治疗作用逐渐被人们所关注，中医认为骨病导致的疼痛多 "瘀、热、毒，虚"，因此提出了相应的治则治法，不论是中药的内服、外用，还是针灸、埋线都 起到了很好的治疗作用，迅速缓解疼痛，减少疼痛复发，配合西药对于原发病的治疗，治愈 疾病，使患者的生活质量得到提高，进而能够减少了精神类疾病的发生率，因此，本发明中 药制剂就是在这个基础上，经过临床验证后得出的有效方剂。
[0025] 本发明提供一种用于缓解骨病疼痛的中药穴位注射液止疼剂，其原料药包括防 己、透骨草、延胡索、吴茱萸、五灵脂、没药、海参、土茯苓、天竺黄、松节、威灵仙、当归、白芍、 生甘草、冰片、莪术、薏苡仁、生白术和肉苁蓉。
[0026] 中药止痛药多具辛行、辛散之性，活血每兼行气，有良好的止痛作用，以"清热、解 毒、散瘀、补虚"为治法的方剂。本发明中药穴位注射液以透骨草、防己、延胡索三药为君药 组，其中君药透骨草，民间用全草入药，治感冒、跌打损伤，外用治毒疮、湿疹、疥疮。药理学 研究，该药有效成分与水杨酸类药物作用相似，具有很好的镇痛、抗炎、杀菌、敛创的功效， 对于骨性疼痛有很好针对治疗效果，防己祛风止痛，利水消肿，对于各类痹症具有很好的祛 风除湿、清热止痛作用，对于风湿类疾病、股性关节病等有很好的治疗作用，延胡索以块茎 入药，含20多种生物碱，用于行气止痛、活血散瘀、跌打损伤等，对于各类瘀血导致的疼痛具 有很好的缓解作用，同时具有很好的抗炎、消肿功效，通过临床研究发现，三药比例以透骨 草:防己：延胡索比例为3 :1:3为最佳，若改变各药的使用比例，则达不到临床预期最佳效 果，例如，若减少透骨草的使用剂量，该方清热解毒功效降低，抗炎作用下降较明显，减少防 己用量，其祛风除湿作用不显著，虽然在动物实验中指标无法较好表征，但是在临床实践中 却十分显著，而减少延胡索的使用剂量，其止痛效果明显降低，未能体现出更好的止痛效 果，因此，在最佳剂量的前提下，才能保证该方具有较好的疗效。使用天竺黄清热豁痰，凉心 定惊的功效，使用松节、威灵仙、土茯苓等药配合防己，增强君药祛风胜湿、清热止痛功效， 增强其抗炎、消肿作用，其中松节祛风燥湿，对于风寒湿痹，历节风痛，脚痹痿软，跌打伤痛 具有很好的疗效，威灵仙有祛风湿、通经络只功效，现代医学实践中发现，该药对于骨刺、足 跟痛等骨性疼痛具有很好的疗效，特别是顽痹更是效果显著，土茯苓具有很好的解毒除湿、 通利关节的功效，对于各类肢体拘挛，筋骨疼痛具有很好的治疗作用，使用五灵脂、吴茱萸、 没药、莪术等药，配合君药延胡索，促进其理气活血、化瘀止痛功效，其中五灵脂理气止痛功 效更为显著，吴茱萸擅于散寒止痛，而莪术、没药二药更偏于活血化瘀止痛，瘀血得祛，则新 血得生，迅速改善局部因血瘀导致的刺痛等，对于有外伤或闭合性骨折的情况，其促进局部 机体组织修复功能也得到了临床验证，诸药合用为臣药；因为本病的病因多虚，因此，本发 明中药制剂加入了益气养血、补脾益肾之药，如当归、白芍、薏苡仁、生白术、肉苁蓉、海参 等，薏苡仁擅于健脾利湿，生白术擅于健脾助运，二药合用，脾气得健，气血生化有源，肉苁 蓉擅于温补肾阳，海参擅于滋养肺肾之阴，而当归、白芍二药为养血活血之重要药对，因此， 诸药合用，气血同补，阴阳同调，具有较好的补虚功效;加入生甘草清热解毒、调和营卫，同 时又可以调和诸药，为使药。
[0027]所述注射液止疼剂中各原料药的重量份最优选分别为防己10重量份、透骨草30重 量份、延胡索30重量份、吴茱萸11重量份~13重量份、五灵脂14重量份~16重量份、没药14 重量份~16重量份、海参14重量份~16重量份、土茯苳29重量份~31重量份、天竺黄9重量 份~11重量份、松节9重量份~11重量份、威灵仙19重量份~21重量份、当归29重量份~31 重量份、白苟29重量份~31重量份、生甘草19重量份~21重量份、冰片9重量份~11重量份、 莪术14重量份~16重量份、薏该仁29重量份~31重量份、生白术39重量份~41重量份、肉灰 蓉29重量份~31重量份。
[0028]所述注射液止疼剂中各原料药的重量份最优选分别为防己10重量份、透骨草30重 量份、延胡索30重量份、吴茱萸12重量份、五灵脂15重量份、没药15重量份、海参15重量份、 土茯苳30重量份、天竺黄10重量份、松节10重量份、威灵仙20重量份、当归30重量份、白苟30 重量份、生甘草20重量份、冰片10重量份、莪术15重量份、意该仁30重量份、生白术40重量 份、肉苁蓉30重量份。
[0029 ]本发明还提供上述注射液的制备方法，其包括：
[0030] 第一步，将各原料药组分分别称取，洗净，按所述重量份混合在一起，加入相对于 获得的混合物质量的6~8倍的醇浓度为80%的乙醇，加热回流5小时后提取，过滤，得第一 过滤液;将滤渣再次用相对于获得的混合物质量的4倍的醇浓度80 %的乙醇溶解，加热回流 3小时后提取，过滤，得第二过滤液;合并第一过滤液和第二过滤液，减压回收乙醇并浓缩至 药液浓度为〇.8g生药/mL，上D101大孔吸附树脂洗脱，树脂体积是浓缩药液体积的5倍，先用 7倍树脂柱体积的去离子水或蒸馏水洗脱，再用5倍树脂柱体积的醇浓度为90%乙醇洗脱， 收集乙醇洗脱液，减压浓缩除去乙醇，干燥并粉碎成粉末；
[0031] 第二步，向第一步所得粉末中加入注射用水，每1000ml注射用水中对应的生药为 300g，微热促进粉末溶解完全，静置过夜，0.45μπι微孔滤膜滤过得滤液，所得滤液加入pH调 节剂柠檬酸调节pH为6.2~6.8，所得溶液灭菌，分装，既得。
[0032]防己：味苦、辛，性寒，入膀胱、肾经，具有利水消肿，祛风止痛的功能，用于水湿内 停所致水肿，小便不利，风湿痹痛等证。 辛，性温，入肺、肝二经，具有祛风胜湿、活血止痛的功效，用于风湿关节痛；外用治疮疡肿 毒。
[0034] 延胡索：味苦、辛，性温，归肝、心、胃经，具有善行走散，可升可降，具有活血散瘀， 行气止痛的功效，主治胸痹心痛，胁肋、脘腹诸痛，头痛、腰痛、疝气痛、筋骨痛、痛经、经闭， 产后瘀腹痛，跌打损伤等证。
[0035] 吴茱萸:性热，味辛、苦，具有散寒止痛，降逆止呕，助阳止泻的功效，用于用于厥阴 头痛，寒疝腹痛，寒湿脚气，经行腹痛，脘腹胀痛，呕吐吞酸，五更泄泻，外治口疮，高血压等 证。
[0036] 五灵脂:味甘，性温，入肝经，具有活血散瘀的功效，用于心腹淤血作痛，痛经，血瘀 经闭，产后淤血腹痛等证。
[0037] 没药：味苦，辛，性平，入肝、脾、心、肾经，有活血止痛、消肿生肌的功效，主治胸腹 瘀痛、痛经、经闭、症瘕、跌打损伤、痈肿疮疡、肠痈、目赤肿痛等证。
[0038] 海参:味甘咸，补肾，益精髓，摄小便，壮阳疗痿，其性温补，足敌人参，故名海参。海 参具有提高记忆力、延缓性腺衰老，防止动脉硬化以及抗肿瘤等作用。
[0039] 土茯苓:味甘、淡，性平，肝经；胃经;脾经，具有解毒，除湿，利关节的功效，主治梅 毒，淋浊，筋骨挛痛，脚气，疔疗疮，痈肿，瘰疬，梅毒及汞中毒所致的肢体拘挛，筋骨疼痛等 证。
[0040]天竺黄:味甘，性寒，具有清热豁痰，凉心定惊的功效，主治热病神昏谵妄，中风痰 迷不语，小儿惊风抽搐，癫痫。痰热咳嗽等证。
[0041 ]松节：味苦，性温，归肝经。功效为祛风燥湿，止痛。用于主风寒湿痹，历节风痛;脚 痹痿软;跌打伤痛等证。
[0042] 威灵仙：拉丁名clematidisradixetrhizoma，味辛、咸，性温，有小毒，入膀胱经，具 有祛风除湿，通络止痛，消痰水，散癖积的功效，主治痛风顽痹、风湿痹痛，肢体麻木，腰膝冷 痛，筋脉拘挛，屈伸不利，脚气，疟疾，症瘕积聚，破伤风，扁桃体炎，诸骨鲠咽等证。
[0043] 当归：拉丁名AngelicaeSinensisRadix，味甘、辛，性温，入肝、心、脾经，具有补血 活血，调经止痛，润肠通便的功效，主治心血不足之头晕目眩，倦怠乏力，心悸气短，血海空 虚，冲任虚寒或淤血阻滞之月经不调，经痛，产或腹痛，及其他血瘀作痛及阴虚血少肠燥之 便秘等证。
[0044]白苟:拉丁名PaeoniaeRadixAlba，味苦、酸，性凉，入肝、脾经，具有养血柔肝，缓中 止痛，敛阴收汗的功效，主治胸腹胁肋疼痛，泻痢腹痛，自汗盗汗，阴虚发热，月经不调，崩 漏，带下等证。
[0045]生甘草:味甘，性平，入十二经，有清热解毒，调和药性，祛痰止咳的作用，并能健脾 和中，缓急止痛，主要用于脾胃虚弱之腹胀纳呆，乏力;能缓解腹中拘挛性疼痛，缓和某些药 物的烈性和毒性，减轻药物对机体的毒副作用或对胃肠道的刺激，通过加入甘草能起到补 气中和，调和各组分的作用。
[0046] 冰片：拉丁名BorneolumSyntheticum，味辛、苦，性凉，入心、肺经，具有通诸穷，散 郁火，去翳明目，消肿止痛的功效，主治中风口噤，热病神昏，惊痫痰迷，气闭耳聋，喉痹，口 疮，中耳炎，痈肿，痔疮，目亦翳膜，蛲虫病等证。
[0047]莪术:味辛、苦，性温，入肝、脾经，具有破血行气，消积止痛的功效，用于气滞血瘀 所致的症瘕痞块，胸腹瘀痛，闭经，痛经，脘腹胀痛，跌打损伤，血瘀肿痛等证。
[0048] 薏苡仁:拉丁名Co i c i sSemen，味甘、淡，性微寒，入肺、脾、大肠经，具有健脾止泻， 利水除痹，排疮脓的功效，主治湿困肺胃之泄泻;湿邪侵渍肌肤之全身水肿，小便不利;湿热 阻于气血之痹通以及毒热蕴结于肺肠之肺痈、肠痈等证。
[0049] 生白术：拉丁名 atracty lodismacrocephalaerhizoma，味苦、甘，性温，入脾、胃经， 具有健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎的作用，用于脾胃虚弱，食少胀满，倦怠乏力，泄泻，水 湿停留、痰饮、水肿，表虚自汗等证。
[0050] 肉苁蓉：为列当科肉苁蓉属植物肉苁蓉和管花肉苁蓉的肉质茎，拉丁名 herbacistanches，味甘、咸，性温，入肾，大肠经，有补肾阳、益精血，润肠通便的作用，用于 肾阳虚衰，精血不足之阳痿早泄，不孕不育，腰膝酸痛，耳鸣耳聋，尿频尿数，肾虚肠燥及产 后血虚、病后津液不足的便秘等证。
[0051] 以下采用实施例来详细说明本发明的实施方式，借此对本发明如何应用技术手段 来解决技术问题，并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。
[0052]实施例1注射液1
[0053]将防己10g、透骨草30g、延胡索30g、吴茱萸12g、五灵脂15g、没药15g、海参15g、土 茯苓30g、天竺黄10g、松节10g、威灵仙20g、当归30g、白芍30g、生甘草20g、冰片10g、莪术 15g、薏该仁30g、生白术40g、肉灰蓉30g分别称取，洗净，混合在一起，加入3kg的醇浓度为 80%的乙醇，加热回流5小时后提取，过滤，得第一过滤液；将滤渣再次用1.6kg的醇浓度 80 %的乙醇溶解，加热回流3小时后提取，过滤，得第二过滤液;合并第一过滤液和第二过滤 液，减压回收乙醇并浓缩至药液浓度为〇.8g生药/mL，上D101大孔吸附树脂洗脱，树脂体积 是浓缩药液体积的5倍，先用7倍树脂柱体积的去离子水或蒸馏水洗脱，再用5倍树脂柱体积 的醇浓度为90%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩除去乙醇，干燥并粉碎成粉末，向所 得粉末中加入注射用水，每l〇〇〇ml注射用水中对应的生药为300g，微热促进粉末溶解完全， 静置过夜，0.45μπι微孔滤膜滤过得滤液，所得滤液加入pH调节剂柠檬酸调节pH为6.5，所得 溶液灭菌，分装，既得。
[0054] 毒理学研究
[0055] 选用健康KM小鼠60只，SPF级，雌雄各半，体重20±2g。
[0056]本发明实施例1制备的中药穴位注射液1，处理成含生药0.611g/ml、1.7795g/ml的 药液，其中选用高浓度注射液进行急毒性实验、采用低浓度注射液进行长期毒性实验。 [0057]表1小鼠的给药剂量及天数
[0058]
L〇〇59J 各批小鼠随机分成空白组、给药组，雌性各半，根据表1所示，给药组分别给予稀释 后的不同剂量的本发明注射液肌肉注射注射(模拟人体穴位注射），〇 . 2ml/20g体重，2次/ 天;空白组给予生理盐水肌肉注射注射，0.2ml/20g体重，2次/天。其中急毒性实验小鼠给药 7d，长期毒性试验小鼠给药7+21d，共28d，自由饮食、饮水。
[0060]给药后，每天观察小鼠的一般状况及死亡情况，观察指标:毛发是否整洁、有光泽； 口腔有无分泌物;上眼睑是否下垂，眼球有无震颤和突出；有无结膜充血与流泪；活动是否 自如，对刺激反应是否敏捷;有无共济失调;呼吸是否正常;有无腹湾、腹胀、便秘，粪便颜色 有无改变;有无拒食、消瘦等情况;并每天记录小鼠的体重变化和进食量。分别与实验观察 结束后1天处死小鼠，解剖观察其心、肝、脾、肾、胸腺、大脑是否有病理变化并称取各脏器的 重量。
[0061] 所有实验数据均以均数士标准差p(±S；)表示，使用SPSS15.0统计软件进行统计，采 用t检验，P<0.05或P<0.01为有统计学意义。
[0062] 结果
[0063] 给药后小鼠的一般情况:给药期间，无一死亡，上述指标均无异常出现，小鼠精神 状况良好。
[0064]药物对小鼠体重增长的影响：各浓度给药组的体重增长与空白组相比。体重均显 著增加(Ρ<〇·〇1)。
[0065] 药物对小鼠脏器指数的影响
[0066] 各组小鼠的主要脏器(心、肝、脾、肾、胸腺、大脑）肉眼观察颜色鲜红，表面光滑，未 发现肿胀、游血、发白的异常改变。各批小鼠给药组与空白组比较，心指数、肝指数、脾指数、 肾指数、胸腺指数和脑指数均无显著性差异(Ρ>〇.05)。
[0067] 讨论
[0068] 本实验结果表明，小鼠给药后未出现中毒症状和死亡发生，无法测出LD5Q，说明小 鼠对本品的最大耐受量至少为最高累积日剂量35.59g/kg，相当于成人日剂量的152倍。各 组小鼠日进食量接近，但给药组的小鼠体重增长较快，与空白组比较有统计学意义，提示该 处方可能还有促进生长的作用。脏器指数是反映药物对脏器影响，尤其是毒性的重要指标。 脏器指数增加表示脏器有充血、水肿、增生、肥大等变化，脏器指数下降表示脏器萎缩、退行 性变化等，而肝、肾是中药毒性作用的最主要脏器。急毒性及长期毒性实验中，给与小鼠不 同浓度的药物后，各主要脏器经肉眼观察无异常病变，各组小鼠心指数、肝指数、脾指数、肾 指数、胸腺指数、脑指数接近，经t检验均无显著性差异，提示该本发明注射液无明显的鞭脏 器毒害作用，安全范围较大。
[0069]临床观察
[0070] 对于诸多骨病导致的疼痛，我们选取其中较为严重的癌症骨转移患者做临床观察 研究，若能证实对于癌性疼痛都能有较好的疗效，那么对于其他因素导致的骨性疼痛应亦 有较好的疗效。
[0071] 临床资料
[0072] 2015年12月~2016年3月，我们共收治以骨痛为临床症状的癌性骨转移患者98例， 所有病例均由病理、影像和骨扫描证实。男47例，女51例;年龄39-63岁，平均55.1岁；原发病 肺癌29例，乳腺癌22例，直肠癌15例，前列腺癌9例，胃癌8例，子宫内膜癌8例，肝癌8例。随机 分为治疗组55例，单纯放疗组53例，两组临床资料比较无显著性差异。
[0073]治疗方法 [0074]中医疗法治疗组
[0075]在常规放射治疗癌症基础上，采用本发明实施例1制备的中药制剂穴位注射液1， 以骨癌转移部位局部取穴以及取肾俞穴，常规消毒后，每穴位注射〇.5ml，每日1次。
[0076]单纯放疗组
[0077]两组均用直线加速器X线体外照射，每周3次，每次350cGy(肿瘤组织量），共照射4 周，照射总量42Gy/12次。
[0078]观察指标
[0079]①疼痛分级(按患者主诉），
[0080] I级:无痛；
[0081] II级:轻度，虽有痛感，但可以忍受，睡眠不受干扰，能正常生活；
[0082] III级：中度，疼痛明显，不能忍受，要求止痛，睡眠受干扰；IV级：重度，剧烈疼痛， 可伴有自主神经功能表现或被动体位，睡眠严重受干扰;V级:极度，患者所能陈述的最严重 疼痛。
[0083]②中药止痛膏及放疗的不良反应。
[0084]疗效评定标准
[0085]完全缓解(CR)，部分缓解(PR)，轻度缓解(MR)，无效(NR)。
[0086]统计方法采用
[0087]采用SPSS15.0统计学软件，对数据进行X2检验，以P<0.05为有统计学差异。
[0088] 结果
[0089] 治疗1周后两组疗效比较
[0090] 表2治疗1周后两组疗效比较
[0091]
[0093] 两组疗效经统计学处理，*P<0.05
[0094]表2可以看出，使用本发明提供的穴位注射液整体疼痛效果明显减轻。
[0095] 治疗4周后两组疗效比较
[0096] 表3治疗4周后两组疗效比较
[0097]
[0098] 两组疗效经统计学处理，，<0.05
[0099] 表3可以看出，使用本发明提供的穴位注射液整体疼痛效果明显减轻。
[0100] 不良反应
[0101] 两组患者均有人出现放射性皮肤反应，经皮科会诊后，未经特殊处理，自然痊愈。 治疗组无中药过敏反应。
[0102] 结论
[0103] 综上所述，本发明中药制剂对于癌症骨转移导致的癌性疼痛具有很好的止痛作 用。
[0104] 比较例1穴位注射液2
[0105] 采用与实施例1相同的制备方法，药材用量除透骨草外完全相同，透骨草的使用量 为 logo
[0106] 比较例2穴位注射液3
[0107] 采用与实施例1相同的制备方法，药材用量除延胡索外完全相同，延胡索的使用量 为 logo
[0108] 实验研究 [0109] 材料与方法
[0110] 材料
[0111] 实验动物
[0112] KM小鼠、SD大鼠、日本大耳白兔，雌雄兼用。
[0113] 仪器及试剂
[0114] 酚红系上海三爱思试剂有限公司出品；松节油系上海香料厂生产；氨水系上海化 工二厂生产；二甲苯(含量>99.0%)系中国医药(集团）公司上海化学试剂公司出品；注射 用氨苄西林钠系上海四药有限公司出品。
[0115] 喉头喷雾器系上海市嘉定区医疗设备厂生产;额镜系上海医用听诊器厂生产;721 分光光度计系上海第三分析仪器厂生产；电子天平系上海天平仪器厂生产；离心机系上海 手术器械厂生产;奥林帕斯光学显微镜由日本生产。
[0116] 药物
[0117] 本发明实施例1制备的中药穴位注射液1，比较例1制备的中药穴位注射液2,比较 例2制备的中药注射液3，均处理成生药浓度为1 g/ml溶液。
[0118] 乙酰水杨酸，上海九福药业有限公司出品，临用时用蒸馏水配制成0.95%浓度供 实验用。
[0119]实验方法 [0120]抗炎作用观察
[0121] KM小鼠耳廓肿胀抑制实验
[0122] 选择体重25 ± 3g小鼠，雌雄兼用，随机分为4组，每组20只。对照组注射生理盐水， 发明组注射本发明实施例1制备的中药穴位注射液1，比较1组注射比较例1制备的中药穴位 注射液2，比较2组注射比较例2制备的中药穴位注射液3，均注射0. lml/10g体重，连续3天。 第4天给药后lh，于小鼠右耳廓正反面滴二甲苯2滴，30min后颈椎脱位处死小鼠，沿耳廓基 线剪下两耳，在同一部位用打孔器打下耳片(直径9mm)称重。以两耳片重量之差代表炎性肿 胀程度，进行组间t检验，并按以下公式求出各组的肿胀抑制率。
[0123] 肿胀抑制率（％ )=对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度/对照组平均肿胀度X 100%
[0124] 大鼠肉芽肿抑制实验
[0125] 选择体重300 ± 20gSD大鼠，随机分5组，分别为生理盐水(NS)对照组、发明组、比较 1组、比较2组和阿斯匹林(AS)组。在乙醚浅麻醉无菌条件下作腹部切口，在两侧腹股沟皮下 各埋入30± lmg的无菌棉球1个，用前每个棉球加氨节西林lmg/0. lml，50°C烘箱干。除阿司 匹林组为灌胃给药外（5mg/kg体重），其余各组术前lh及术后me(肌肉注射）给药，均注射 O.lml/lOg体重，连续7天。末次给药lh后大鼠断颈处死，剥离取出棉球肉芽组织，放入60°C 烘箱干燥4h。取出后称重，减去原棉球重量即为肉芽肿干重。计算并比较各组平均肉芽肿 重/100g体重。
[0126] 对关节疼痛的抑制作用
[0127] 选择体重300 ± 20gSD大鼠，随机分6组，分别为生理盐水(NS)对照组、模型对照组、 发明组、比较1组、比较2组和阿斯匹林(AS)组。在乙醚浅麻醉条件下，将大鼠左下肢固定在 自制操作台上，垂直坠落30g砝码，高度40cm，对大鼠左下肢造成闭合性骨折，然后左下肢肌 肉注射本发明实施例1制备的中药穴位注射液1，比较1组注射比较例1制备的中药穴位注射 液2，比较2组注射比较例2制备的中药穴位注射液3，均注射0. lml/10g体重，阿司匹林组为 灌胃给药(5mg/kg体重），观察大鼠因疼痛导致的扭体次数。
[0128] 结果
[0129] 本发明中药制剂的抗炎作用
[0130]本发明中药制剂对小鼠耳廓肿胀的影响，见表4。
[0131]表4本发明中药制剂对小鼠耳廓肿胀的影响(；X±S；) 「01321
[0133] 与发明组比较，*P<0.05,与对照组比较，λΡ<0.05
[0134] 在用二甲苯制作的小鼠耳廓肿胀模型上观察到，本发明中药制剂明显抑制小鼠耳 廓的肿胀，其肿胀抑制率达54.07%。结果表明，本发明中药制剂能明显对抗二甲苯所致小 鼠耳廓炎性水肿，当加入透骨草量过少时，消炎效果明显减弱。
[0135] 本发明中药制剂对大鼠棉球肉芽肿的影响，见表5
[0136] 表5本发明中药制剂对大鼠棉球肉芽肿的影响
[0137]
[0139] 与发明组比较，*P<0.05,与阿司匹林组比较，ΔΡ<0.05
[0140] 在大鼠棉球肉芽肿模型上观察到，本发明中药制剂明显抑制肉芽肿生长，肉芽肿 抑制率超过阿斯匹林组。
[0141 ]对关节疼痛模型大鼠疼痛扭体反应的影响
[0142] 表6对关节疼痛模型大鼠疼痛扭体反应的影响6c±s，η=1〇)
[0143]
[0144] 与空白组比较，#P<0.05,与模型组比较ZP<0.01，与发明组比较，λΡ<0.05
[0145] 在大鼠关节疼痛模型上，采用本发明中药制剂明显具有很好的止痛效果，而如果 延胡索的使用量过少则会减弱止疼效果。
[0146] 结论
[0147] 通过本发明中药穴位注射液的实验研究，其具有较好的抗炎、镇痛、消肿功效，并 通过了安全性评估，具有很好的临床推广价值。
[0148] 所有上述的首要实施这一知识产权，并没有设定限制其他形式的实施这种新产品 和/或新方法。本领域技术人员将利用这一重要信息，上述内容修改，以实现类似的执行情 况。但是，所有修改或改造基于本发明新产品属于保留的权利。
[0149] 以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任 何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等 效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所 作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。
【主权项】
1. 一种止疼剂，其特征在于：原料药包括防己、透骨草、延胡索、吴茱萸、五灵脂、没药、 海参、土茯苓、天竺黄、松节、威灵仙、当归、白芍、生甘草、冰片、莪术、薏该仁、生白术和肉苁 蓉。2. 如权利要求1所述的止疼剂，其特征在于:所述透骨草：防己：延胡索三者的用量质量 比为3:1:3。3. 如权利要求1或2所述的止疼剂，其特征在于:各原料药的重量份分别为防己10重量 份、透骨草30重量份、延胡索30重量份、吴茱萸11重量份~13重量份、五灵脂14重量份~16 重量份、没药14重量份~16重量份、海参14重量份~16重量份、土茯苳29重量份~31重量 份、天竺黄9重量份~11重量份、松节9重量份~11重量份、威灵仙19重量份~21重量份、当 归29重量份~31重量份、白苟29重量份~31重量份、生甘草19重量份~21重量份、冰片9重 量份~11重量份、莪术14重量份~16重量份、薏该仁29重量份~31重量份、生白术39重量份 ~41重量份、肉灰蓉29重量份~31重量份。4. 如权利要求1至3所述的止疼剂，其特征在于:各原料药的重量份分别为防己10重量 份、透骨草30重量份、延胡索30重量份、吴茱萸12重量份、五灵脂15重量份、没药15重量份、 海参15重量份、土茯苳30重量份、天竺黄10重量份、松节10重量份、威灵仙20重量份、当归30 重量份、白苟30重量份、生甘草20重量份、冰片10重量份、莪术15重量份、意该仁30重量份、 生白术40重量份、肉灰蓉30重量份。5. 如权利要求1至4所述止疼剂的制备方法，其特征在于，包括： 第一步，将各原料药组分分别称取，洗净，按所述重量份混合在一起，加入相对于获得 的混合物质量的6~8倍的醇浓度为80%的乙醇，加热回流5小时后提取，过滤，得第一过滤 液;将滤渣再次用相对于获得的混合物质量的4倍的醇浓度80%的乙醇溶解，加热回流3小 时后提取，过滤，得第二过滤液;合并第一过滤液和第二过滤液，减压回收乙醇并浓缩至药 液浓度为〇. 8g生药/mL，上D101大孔吸附树脂洗脱，树脂体积是浓缩药液体积的5倍，先用7 倍树脂柱体积的去离子水或蒸馏水洗脱，再用5倍树脂柱体积的醇浓度为90%乙醇洗脱，收 集乙醇洗脱液，减压浓缩除去乙醇，干燥并粉碎成粉末； 第二步，向第一步所得粉末中加入注射用水，每l〇〇〇ml注射用水中对应的生药为300g， 微热促进粉末溶解完全，静置过夜，0.45μπι微孔滤膜滤过得滤液，所得滤液加入pH调节剂柠 檬酸调节pH为6.2~6.8，所得溶液灭菌，分装，既得。
【文档编号】A61P29/00GK106039232SQ201610602412
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年7月25日 公开号201610602412.1, CN 106039232 A, CN 106039232A, CN 201610602412, CN-A-106039232, CN106039232 A, CN106039232A, CN201610602412, CN201610602412.1
【发明人】孙文朋
【申请人】孙文朋