分别加 入浓度为5mg/ml的A组、B组和对比例分别培养的木耳粗提取物，测定它们清除率。
[0033] (4)清除羟基自由基的实验:FeS04与H202反应产生· 0H，在体系内加入水杨酸，可 捕捉羟基自由基并产生有色物质，该物质在510nm处有最大吸收，当反应体系中存在· 0H自 由基清除剂时，此氧化过程受到抑制，吸光度值则降低。在FeS04与H2〇2反应体系中，分别加 入浓度为30mg/ml的A组、B组和对比例分别培养的木耳粗提取物，测定清除率。
[0034] (5)模拟胃液pH条件下的NO2"清除反应作用:清除亚硝酸盐是有效防止N-亚硝基化 合物致癌的途径之一。在模拟体系中加入分别加入浓度为14mg/ml的A组、B组和对比例分别 培养的木耳粗提取物，测定清除率。
[0035] (6)DPPH法测定木耳抗氧化活性:DPPH·在有机溶剂中是一种稳定的自由基，广泛 用于抗氧化评价体系中。在体系中，分别加入浓度为30mg/ml的A组、B组和对比例分别培养 的木耳粗提取物，测定清除率。
[0036] 3、试验结果：
[0037]表1不同培养基培养的木耳粗提取物的还原能力
[0039]^表1结果表明，A组、B组和对比例培养的木
耳粗提取物具有抗氧化性，A组和B组抗 氧化性优于对比例。
[0040]表2不同培养基培养的木耳粗提取物清除超氧阴离子的能力
[0042] 表2表明，A组、B组和对比例培养的木耳粗提取物都具有清除超氧阴离子的能力，A 组和B组清除能力优于对比例。
[0043] 表3不同培养基培养的木耳粗提取物清除羟基自由基的能力
[0045]表3表明，A组、B组和对比例培养的木耳粗提取物都具有清除羟基自由基的能力，A组和B组清除能力优于对比例。
[0046]表4不同培养基培养的木耳粗提取物对NO2"清除作用
[0048] 表4表明，A组、B组和对比例培养的木耳粗提取物对勵2_都有清除作用，A组和B组清 除能力优于对比例。
[0049]表5不同培养基培养的木耳粗提取物对DPPH清除效果
[0051 ] 表5表明，A组、B组和对比例培养的木耳粗提取物对DPPH都有清除效果，A组和B组 清除效果优于对比例。
[0052] 综合上述氧化反应体系试验结果，可知A组、B组和对比例培养的木耳具有抗氧化 性，而A组和B组优于对比例，说明添加本发明添加剂的木耳培养基能够增强木耳的抗氧化 功效。
[0053] 试验例2:本发明培养的木耳抗癌作用
[0054] 1、实验动物:健康昆明种小鼠，体重（22±3)g，雌雄各半，由广西医科大学实验动 物中心提供。
[0055] 2、肿瘤细胞株:小鼠肉瘤S18Q腹水型瘤株，由广西肿瘤防治研究所提供。
[0056] 3、木耳药剂制备：
[0057] 分别取A组（向常规木耳培养基添加本发明实施例2,加入量为培养基总量的5%)、 对比例（常规培养基)培养出的木耳1 〇g，置于1OOOmL的玻璃烧杯中，加水500mL，浸泡lh后， 置于火上煎熬，先武火煮沸后改为文火，再煎熬60min后熄火，将药液3500r/min离心5min， 取出上清药液。然后再向沉渣中加入300mL水，用同样方法再煎熬两次。将3次上清药液混合 后置于文火上，浓缩定容成200mL，制成含生药5%的原药液，将该药液密封，置于冰箱冷藏 保存备用。
[0058] 3、实验方法：
[0059]取(22±3)g小鼠60只，前肢皮下分别接种经昆明系小鼠传代第7天的小鼠肉瘤S180 瘤株细胞(经台盼兰染色活细胞数大于95%)的腹腔稀释液0.2mL，其浓度5X105/mL。将注 射瘤细胞后的小鼠随机分为3组，每组10只，雌雄各半:A组，同侧同位注射木耳汤剂稀释液 0.25mL，终剂量为每只小鼠注射木耳成分0.5mg，连续注10次;对比例组，同侧同位注射木耳 汤剂稀释液〇.25mL，终剂量为每只小鼠注射木耳成分0.5mg，连续注10次;对照组，同侧同位 注射生理盐水〇.5mL。观察小鼠的生活状态、肿瘤生长状况及小鼠的生存情况。
[0060] 4、试验结果：
[0061] 自实验之日起，随时观察每只小鼠的生活状况。对照组小鼠1周开始出现肉眼可见 肿块（约〇. 〇 5cmX0.0 5cm)，而A组、对比例组则未见肉眼可见的肿块。A组、对比例组小鼠全 部存活。继续观察至实验第16天起，对照组小鼠开始逐渐死亡，至36天对照组全部死亡。而A 组、对比例组小鼠则全部存活，且均未出现肉眼可见肿块。继续观察至第96天，对比例组小 鼠出现肉眼可见肿块，继续观察至实验第106天起，对比例组小鼠开始逐渐死亡，至126天对 比例组小鼠全部死亡，A组小鼠全部存活，未出现肉眼可见肿块，继续观察至160天仍全部存 活。本实验共重复4次，结果基本相同。小鼠的生存情况见表6。
[0062]表6不同培养基培养的木耳抗小鼠&8〇腹水型肉瘤的实验观察结果
[0064]木耳抗癌试验结果表明，A组、对比例培养的木耳对518〇腹水型肉瘤细胞有抑制作 用，而A组优于对比例，说明添加本发明添加剂的木耳培养基能够增强木耳的抗癌作用。
【主权项】
1. 一种木耳培养基的添加剂，其特征在于，由以下重量份的原料制成：首乌藤20~40 份，儿茶10~20份，泽兰5~10份，降香10~20份，松节5~10份，藁本5~10份，蔓荆子30~50 份，谷精草10~20份，椿皮5~11份，木芙蓉叶10~30份，白薇6~16份。2. 根据权利要求1所述的木耳培养基的添加剂，其特征在于，由以下重量份的原料制 成:首乌藤30份，儿茶15份，泽兰8份，降香15份，松节7份，藁本8份，蔓荆子40份，谷精草15 份，椿皮8份，木芙蓉叶20份，白薇11份。
【专利摘要】本发明涉及食用菌培养基添加技术领域，特别涉及一种木耳培养基的添加剂,由以下重量份的原料制成：首乌藤20～40份，儿茶10～20份，泽兰5～10份，降香10～20份，松节5～10份，藁本5～10份，蔓荆子30～50份，谷精草10～20份，椿皮5～11份，木芙蓉叶10～30份，白薇6～16份。本发明的木耳培养基的添加剂应用在木耳培养基中时，促进木耳生长，提高产量，能够提高木耳的抗氧化性和抗癌性。
【IPC分类】C05G3/00
【公开号】CN105418292
【申请号】CN201511023758
【发明人】李荣轩
【申请人】广西扬桂生物科技有限公司
【公开日】2016年3月23日
【申请日】2015年12月31日