专利名称：：羟基红花黄色素a及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及从中药红花中提取的羟基红花黄色素A，及其制备方法和应用。
背景技术：
：红花为菊科植物红花属红花(Cartha咖stinctoriusL.)的干燥花，性味辛温，入心、肝经，具祛瘀止痛功效，是多种活血化瘀方剂的君药。对红花中有效成分的提取越来越引起有关人士的关注，以往研究表明红花活血的有效成分主要集中在水溶性的红花黄色素。红花黄色素为查耳酮类化合物，具有扩张冠脉、抗氧化、保护心肌、降血压、免疫抑制和脑保护等多种药理学功效。近年来研究证实红花的有效成分主要集中在水溶性的黄色素部分，初步分析表明，红花黄色素是三种水溶性成份的混合物羟基红花黄色素A(Hydroxysaffloryellow-A)、红花黄色素B、红花黄色素C。研究表明水溶性的红花黄色素中羟基红花黄色素A(hydroxysaffloryellow-A)的含量最高，且是红花药理功效的最有效水溶性部位，它的结构式为<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage4</formula>文献臧宝霞、金鸣、司南等，羟基红花黄色素A对血小板活化因子的拮抗作用[J]。药学学报，2002，37(9):696显示，羟基红花黄色素A通过拮抗血小板活化因子的作用抑制血小板的聚集。中国专利[申请公开CN1422616，发明名称羟基红花黄色素A在制备治疗、预防心脑血管疾病方面的药物用途和申请公开CN1640392，发明名称大剂量的羟基红花黄色素A或其可药用盐在缺血引起的急性脑中风的药物中的应用]明确了羟基红花黄色素A对缺血性脑中风具有预防和治疗作用。目前己有关于羟基红花黄色素A的制备方法，CN1422616和CN1640392均公开了采用水提醇沉的提取方法，与大孔吸附树脂柱层析法和聚酰胺吸附法组合，获得羟基红花黄色素A。由于红花经过水提取后，提取液中虽然黄色素含量较大，同时水溶性的多糖、蛋白质等干扰物质也大量出现，由于红花黄色素的水溶性较好，若采用醇沉的方式，即易将黄色素和杂质一起沉淀出来，黄色素损失较大。而且，由于采用聚酰胺吸附法，虽然效果较好，但是在实际应用中受到聚酰胺质量不稳定的影响较大，预处理周期长且复杂，应用难度较大，不易应用于大规模的工业生产中。CN1475272采用"提取-分离-醇沉_纯化-再纯化-除菌冷冻干燥"工艺制备，将水提取液柱层析分离后再醇沉然后再柱层析纯化，保证了羟基红花黄色素A的纯度，其含量高达90%以上，但其收率很低，仅仅高于1%，不到2%。如此小的收率不利于工业大规模化生产，无实际应用价值。可见，目前尚无基于收率较高的羟基红花黄色素A的制备方法，而同时又能保证所制备的羟基红花黄色素A的纯度较高。本发明人在对红花提取液进行分离纯化的过程中惊奇地发现，当红花提取液不经醇沉，直接将水提取液进行两步柱层析，并按照不同的柱床径高比将层析柱装成不同的高度时，对羟基红花黄色素A的收率影响很大。本发明人通过多次试验，选定了能保证羟基红花黄色素A收率高的柱床径高比范围，此外本发明人应用Molisch反应和茚三酮反应来监测层析分离过程以保证羟基红花黄色素A的纯度，从而完成了本发明。
发明内容本发明的目的在于提供一种纯度高的羟基红花黄色素A，该羟基红花黄色素A用下述方法制备1)提取取红花药材，加12倍量水8(TC下提取3次，每次1.5小时，合并提取液，浓縮至6(TC下相对密度为1.10-1.14，静置24小时后离心分取上清液；2)分离取上清液柱层析，上清液体积与柱床体积之比为1:8-12,柱床径高比为1:7-13，用水以18-22ml/min的流速洗脱至洗脱液Molisch反应及茚三酮反应呈阴性,再用5个柱床体积的5%乙醇溶液以18-22ml/min的流速洗脱，收集5%乙醇洗脱溶液，浓缩至5(TC下相对密度为1.2，得浓缩液A;3)纯化取浓缩液A柱层析，浓縮液体积与柱床体积之比为1:18-22的量，柱床径高比为1:9-15，用水以8-12ml/min的流速洗脱，收集黄色素色带，浓縮至5(TC下相对密度为1.2，得浓缩液B;4)再纯化取浓縮液B按步骤3)所述工艺，以水为洗脱液反复纯化3次，得浓縮液C;5)除菌、喷雾干燥将浓縮液C用垂融玻璃G5初滤后，再采用0.2ym微孔滤膜滤过除菌，然后立即喷雾干燥，出口温度8(TC，得羟基红花黄色素A干粉。本发明的另一目的在于提供一种纯度高收率高且工艺简化的羟基红花黄色素A的制备方法，该方法包括如下步骤1)提取取红花药材，加12倍量水8CTC下提取3次，每次1.5小时，合并提取液，浓縮至60。C下相对密度为1.10-1.14，静置24小时后离心分取上清液；2)分离取上清液柱层析，上清液体积与柱床体积之比为1:8-12，柱床径高比为1:7-13,用水以18-22ml/min的流速洗脱至洗脱液Molisch反应及茚三酮反应呈阴性，再用5个柱床体积的5%乙醇溶液以18-22ml/min的流速洗脱，收集5%乙醇洗脱溶液，浓縮至50'C下相对密度为1.2，得浓縮液A;3)纯化取浓縮液A柱层析，浓縮液体积与柱床体积之比为1:18-22的量，柱床径高比为1:9-15，用水以8-12ml/min的流速洗脱，收集黄色素色带，浓縮至5(TC下相对密度为1.2，得浓缩液B;4)再纯化取浓縮液B按步骤3)所述工艺，以水为洗脱液反复纯化3次，得浓缩液C;5)除菌、喷雾干燥将浓縮液C用垂融玻璃G5初滤后，再采用0.2ym微孔滤膜滤过除菌，然后立即喷雾干燥，出口温度80。C，得羟基红花黄色素A干粉。在本发明的另一优选实施方案中，歩骤2)中所述的柱层析是在洗脱过程中，上样体积与柱床体积之比为1:10，柱床径高比为1:10。合理选择层析柱的长度和直径是保证分离效果的重要环节。本发明在相同的样品浓度下，上相同的样品体积，以相同的洗脱流速考察了不同径高比的凝胶柱对分离的影响，结果表明高径高比的柱床有利于提高分离度和保证终产品中有效成分的含量。此外，上样体积也是影响分离效果的重要因素，上样体积或上样量小，分辨效果好。本发明在上样体积与柱床体积之比为1:10，柱床径高比为1:10的条件下进行柱层析，不仅提高了分离度，而且保证了终产品中有效成分的本发明中的柱层析，为选用大孔树脂柱和/或葡聚糖凝胶柱进行柱层析。柱层析的一个优选实施方案，是分离中所述的柱层析为使用大孔树脂柱进行柱层析，纯化中所述的柱层析为使用葡聚糖凝胶柱进行柱层析。因为红花经过水提取后，提取液中虽然黄色素含量较大，同时水溶性的多糖、蛋白质等干扰物质也大量出现，由于红花黄色素的水溶性较好，若采用醇沉的方式，极易将黄色素和杂质一起沉淀出来，造成损失。大孔吸附树脂在中药水溶性成份的粗分中己经得到广泛应用，选用大孔树脂进行粗分，可以使黄色素与其它水溶性杂质初步分离。由于大孔吸附树脂只适合粗分，为了更好更多地富集黄色素，还需要进一步的精制处理。曾釆用聚酰胺层析法，虽然效果较好，但是在实际应用中受到聚酰胺质量不稳定的影响较大，预处理过程周期长且复杂，应用难度较大，不适宜应用在工业生产中。本发明结合两步柱层析对红花水提取液进行分离、纯化，先应用大孔吸附树脂粗制，再应用葡聚糖凝胶精制，不仅简化了工艺过程，縮短了生产周期，从而提高了生产效率，节约了生产成本，而且黄色素的损失极少，从而收率较高。本发明采用的葡聚糖凝胶质量稳定，可以反复使用，且所用洗脱剂只需用水即可。本发明中的大孔树脂柱为现有的大孔树脂柱，优选为非极性大孔树脂，作为非极性大孔树脂柱，优选为D101非极性大孔树脂柱。红花水提取液中含有大量的干扰物质多糖和蛋白质。与多糖及蛋白质相比，黄色素的亲脂性要稍强，因此，选用非极性大孔吸附树脂进行粗分。适宜的大孔吸附树脂不仅要有一定的选择性，同时还应该要有较高的吸附容量和解吸率，D101型树脂的选择性、吸附容量和解吸率均较好，且应用更为普遍，还可以尽可能的避免吸附损失。本发明步骤2)中柱层析水洗脱后采用Molisch反应和茚三酮反应来监测粗分中是否含有多糖和蛋白质从而监测除杂质是否彻底，从而保证了羟基红花黄色素A的纯度。红花中含有多糖和蛋白质，若未完全除去，会直接影响羟基红花黄色素A的纯度。本发明中采用Molisch反应和茚三酮反应提示本发明的方法制备所得的羟基红花黄色素A均无蛋白质和糖类反应，表明其羟基红花黄色素A的纯度较高。本发明中的葡聚糖凝胶柱选用SeophadexG-25、LH-20型，优选SeophadexG-25。羟基红花黄色素A的分子量为612，符合G-25、LH-20的分离范围。本发明优选G-25，因为G-25相对价廉，而且流速易于控制。作为Se叩hadexG-25，优选柱床径高比为1:7-17的SeophadexG-25,柱床径高比为1:12最优，因为径高比为1:12的柱床有利于提高分离度，并保证终产品中有效成分的含量。本发明中采用喷雾干燥法得到的羟基红花黄色素A粉末，产品质量好，颗粒细而松脆。现有技术采用冷冻干燥法，但冷冻干燥需要高度真空与低温，耗能大，成本高，不利于工业生产。本发明采用喷雾干燥，不仅产品的质量好，溶解性能好，含菌量低，而且干燥时间很短，一般只需零点几秒至十几秒，从而大大提高了生产效率，节约了成本。本发明的又一目的是提供羟基红花黄色素A在制备预防和治疗心脑血管疾病脑梗塞、高血压脑出血等的药物中的应用。本发明的预防和治疗脑血管疾病脑梗塞、高血压脑出血等的药物可为冻干粉针剂、片剂、胶囊剂、注射剂等多种剂型。本发明采取水提取结合柱层析进行提取、分离和纯化制备羟基红花黄色素A，有效的富集了红花的有效部位。这种方法不仅可有效地除去蛋白质及糖类杂质，明显提高羟基红花黄色素A的纯度，而且通过严格控制柱层析工艺中的柱子径高比、上样量、洗脱流速，从而大大提高了收率。本发明的方法制备所得的羟基红花黄色素A均无蛋白质及糖类反应，本发明的方法制备所得的羟基红花黄色素A可用高效液相色谱法测定羟基红花黄色素A含量，该方法重现性、稳定性好。本发明的方法制备所得的羟基红花黄色素A的含量高达99y。。由于本发明的羟基红花黄色素A制备方法采取水提取结合两步柱层析，并严格控制柱层析工艺中的柱床径高比和上样量，明显地提高了收率，高达50%多，且工艺简化，縮短生产周期，从而提高生产效率，节约生产成本。且此法操作简便，易于掌握，可应用在大规模、高效率、工业化生产中。本发明的预防和治疗脑血管疾病脑梗塞、高血压脑出血等的药物中主要活性成分羟基红花黄色素A的纯度稍高于现有技术，其疗效也稍优于现有技术。图1为本发明方法按实施例1制得的羟基红花黄色素A的含量测试结果图；图2为本发明方法按实施例1制得的羟基红花黄色素A的指纹图谱；图3为对照用羟基红花黄色素A的指纹图谱。具体实施例方式以下通过实施例来进一步阐述本发明药物的制备方法。[实施例l]制备羟基红花黄色素A1)提取取红花药材100g，加1200g水8(TC下提取3次，每次1.5小时，合并提取液，浓縮至60'C下相对密度为1.12，静置24小时后离心分取上清液；2)分离取上清液，按上清液体积与柱床体积之比为1:10的量加至已处理过的柱床径高比为1:10的D101大孔吸附树脂柱上，用水以20ml/min的流速洗脱至洗脱液Molisch反应及茚三酮反应呈阴性，再用5个柱床体积的5%乙醇溶液以20ml/min的流速洗脱，收集5%乙醇洗脱溶液，浓縮至50。C下相对密度为1.2,得浓縮液A;3)纯化取浓縮液A按上清液体积与柱床体积之比为l:20的量加至柱床径高比为1:12的葡聚糖凝胶SeophadexG-25柱上，用水以10ml/min的流速洗脱，收集黄色素部分，浓缩至5(TC下相对密度为1.2，得浓缩液B;4)再纯化取浓縮液B按步骤3)所述工艺，以水为洗脱液反复纯化3次，得浓缩液C;5)除菌、喷雾干燥将浓縮液C用垂融玻璃G5初滤后，再采用0.2ym微孔滤膜滤过除菌，然后立即喷雾干燥，出口温度8(TC，得羟基红花黄色素A干粉60g。计算得羟基红花黄色素A收率为52.5%，用高效液相色谱法测定羟基红花黄色素A含量为99.5%，见图1。通过高效液相色谱法测定按照上述所述的歩骤制备的羟基红花黄色素A和按CN1475272实施例10所述的步骤制备的羟基红花黄色素A的含量，并测定羟基红花黄色素A的收率，结果显示于表l。<table>complextableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>从表1可以看出，与CN1475272相比较，可见采用本发明申请的制备方法制备羟基红花黄色素A的收率明显大大提高了，其纯度也比CN1475272稍高。而且本发明申请的工艺较CN1475272歩骤少，易于工业化生产。实施例2、3、4、5为D101大孔吸附树脂柱层析分离、葡聚糖凝胶Se叩hadexG-25纯化法制备羟基红花黄色素A，具体步骤同实施例1，不同之处在于按照不同的柱床径高比将D101大孔吸附树脂柱装成不同的高度。实施例6、7、8、9为D101大孔吸附树脂柱层析分离、葡聚糖凝胶Se叩hadexG-25纯化法制备羟基红花黄色素A，具体歩骤同实施例1，不同之处在于按照不同的柱床径高比将葡聚糖凝胶SeophadexG-25柱装成不同的高度。实施例10、11为D101大孔吸附树脂柱层析分离、葡聚糖凝胶Se邻hadexG-25纯化法制备羟基红花黄色素A，具体步骤同实施例l,不同之处在于分离过程中按照不同的上样体积与柱床体积之比进行上样。实施例12、13为D101大孔吸附树脂柱层析分离、葡聚糖凝胶Se叩hadexG-25纯化法制备羟基红花黄色素A,具体歩骤同实施例1，不同之处在于纯化过程中按照不同的上样体积与柱床体积之比进行上样。投入红花药材量均为100g，加入水量均为1200g。各实施例各歩骤工艺条件见表2。表2<table>Complextableseetheoriginaldocumentpage10</column></row><table>按本发明实施例1方法制得羟基红花黄色素A，按以下制剂实施例方法制得可使用的冻干粉针剂、胶囊剂、片剂及注射液。羟基红花黄色素A冻干粉针剂羟基红花黄色素A25g甘露醇25g加注射用水至400ml分别称取羟基红花黄色素A干燥粉末、甘露醇，加注射用水使溶解并添加注射用水至全量，搅匀，无菌过滤，滤液分装于西林瓶中，每瓶0.4ml,真空冷冻干燥，压塞，封铝盖。制得羟基红花黄色素A冻干粉针剂。羟基红花黄色素A冻干粉针剂羟基红花黄色素A25g甘露醇50g加注射用水至800ml分别称取羟基红花黄色素A干燥粉末、甘露醇，加注射用水使溶解并添加注射用水至全量，搅匀，无菌过滤，滤液分装于西林瓶中，每瓶0.8ml，真空冷冻干燥，压塞，封铝盖。制得羟基红花黄色素A冻干粉针剂。羟基红花黄色素A冻干粉针剂羟基红花黄色素A25g甘露醇75g加注射用水至1200ml分别称取羟基红花黄色素A干燥粉末、甘露醇，加注射用水使溶解并添加注射用水至全量，搅匀，无菌过滤，滤液分装于西林瓶中，每瓶1.2ml，真空冷冻干燥，压塞，封铝盖。制得羟基红花黄色素A冻干粉针剂。羟基红花黄色素A胶囊剂羟基红花黄色素A50g干淀粉150g分别称取羟基红花黄色素A干燥粉末和干淀粉，混合均匀后，分装入1000个硬胶囊中，得轻基红花黄色素A口服胶囊剂。羟基红花黄色素A片剂羟基红花黄色素A50g硬脂酸镁10g淀粉100g分别称取羟基红花黄色素A干燥粉末、硬脂酸镁及淀粉，混合均匀后，按常规制药方法经压片、包衣、分装、包装等工艺，得IOOO片羟基红花黄色素A片剂。羟基红花黄色素A注射液羟基红花黄色素A70mg加0.9%氯化钠注射液至250ml分别称取羟基红花黄色素A干燥粉末，加0.9%氯化钠注射液使溶解并添加0.9%氯化钠注射液至全量，按常规方法经灌装、封口、灭菌等步骤制得羟基红花黄色素A注射液。羟基红花黄色素A注射液羟基红花黄色素A140mg加0.9%氯化钠注射液至500ml分别称取羟基红花黄色素A干燥粉末，加0.9%氯化钠注射液使溶解并添加0.9%氯化钠注射液至全量，按常规方法经灌装、封口、灭菌等步骤制得羟基红花黄色素A注射液。羟基红花黄色素A注射液羟基红花黄色素A280mg加0.9%氯化钠注射液至1000ml分别称取羟基红花黄色素A干燥粉末，加0.9%氯化钠注射液使溶解并添加0.9%氯化钠注射液至全量，按常规方法经灌装、封口、灭菌等步骤制得羟基红花黄色素A注射液。以下通过临床疗效观察试验来进一歩阐述本发明药物的有益效果。羟基红花黄色素A冻干粉针剂治疗急性脑梗塞的疗效观察1、一般资料收治50例急性脑梗塞患者，随机分成治疗组和对照组各25例。治疗组男15例，女10例，年龄50-76岁，单灶性脑梗塞20例，多灶性脑梗塞3例，腔隙性脑梗塞2例；颈内动脉系统梗塞20例，椎基底动脉系统梗塞5例。对照组男18例，女7例，年龄56-80岁，单灶性脑梗塞18例，多灶性脑梗塞5例，腔隙性脑梗塞2例；颈内动脉系统梗塞18例，椎基底动脉系统梗塞7例。2、诊断标准(1)第二届全国脑血管病专题会议制定的诊断标准(2)计算机断层扫描(CT)检査诊断3、治疗方法两组病人平均于发病后6天-11天在一般药物治疗基础上加用对照药物。治疗组制剂实施例1的羟基红花黄色素A冻干粉针剂(含羟基红花黄色素A25mg)静脉滴注，每人每日2次，每次1瓶。对照组CN1475272的羟基红花黄色素A冻干粉针剂(含羟基红花黄色素A25mg)静脉滴注，每人每闩2次。两组病人均为4周一疗程，间隔4天进行第二疗程。两疗程结束时评定临床疗效，其它对症治疗两组病人相似。4、治疗结果见表3。表3:两组病人疗效比较显著好转(例数)显著好转率(%)显效(例数)显效率(%)无效(例数)无效率(%)总有效率(%)治疗组265223461298对照组255023462496结果表明，制剂实施例1的羟基红花黄色素A冻干粉针剂对急性脑梗塞患者有明显的治疗作用，与CN1475272的羟基红花黄色素A冻干粉针剂相比，本发明产品的羟基红花黄色素A冻干粉针剂的效果较优。将本发明的其它实施例所制备的羟基红花黄色素A的药物应用于本试验例可获得相同的效果。权利要求1、一种羟基红花黄色素A，其特征在于该羟基红花黄色素A用下述方法制备1)提取取红花药材，加12倍量水80℃下提取3次，每次1.5小时，合并提取液，浓缩至60℃下相对密度为1.10-1.14，静置24小时离心分取上清液；2)分离取上清液柱层析，上清液体积与柱床体积之比为1∶8-12，柱床径高比为1∶7-13，用水以18-22ml/min的流速洗脱至洗脱液Molisch反应及茚三酮反应呈阴性，再用5个柱床体积的5％乙醇溶液以18-22ml/min的流速洗脱，收集5％乙醇洗脱溶液，浓缩至50℃下相对密度为1.2，得浓缩液A；3)纯化取浓缩液A柱层析，浓缩液体积与柱床体积之比为1∶18-22，柱床径高比为1∶9-15，用水以8-12ml/min的流速洗脱，收集黄色素色带，浓缩至50℃下相对密度为1.2，得浓缩液B；4)再纯化取浓缩液B按步骤3)所述工艺，以水为洗脱液反复纯化3次，得浓缩液C；5)除菌、喷雾干燥将浓缩液C用垂融玻璃G5初滤后，再采用0.2μm微孔滤膜滤过除菌，然后立即喷雾干燥，出口温度80℃，得羟基红花黄色素A干粉。2、一种羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于该方法包括下述顺序的歩骤1)提取取红花药材，加12倍量水8(TC下提取3次，每次1.5小时，合并提取液，浓縮至60'C下相对密度为1.10-1.14，静置24小时后离心分取上清液；2)分离取上清液柱层析，上清液体积与柱床体积之比为1:8-12，柱床径高比为1:7-13，用水以18-22ml/min的流速洗脱至洗脱液Molisch反应及茚三酮反应呈阴性，再用5个柱床体积的5%乙醇溶液以18-22ml/min的流速洗脱，收集5%乙醇洗脱溶液，浓縮至5(TC下相对密度为1.2，得浓縮液A;3)纯化取浓縮液A柱层析，浓縮液体积与柱床体积之比为1:18-22，柱床径高比为1:9-15，用水以8-12ml/min的流速洗脱，收集黄色素色带，浓缩至5(TC下相对密度为1.2，得浓缩液B;4)再纯化取浓縮液B按步骤3)所述工艺，以水为洗脱液反复纯化3次，得浓縮液C;5)除菌、喷雾干燥将浓缩液C用垂融玻璃G5初滤后，再采用0.2iim微孔滤膜滤过除菌，然后立即喷雾干燥，出口温度8(TC，得羟基红花黄色素A干粉。3、根据权利要求2所述的羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于步骤2)中所述的上清液体积与柱床体积之比为1:10，所述的柱床径高比为1:9-11;步骤3)中所述的浓縮液体积与柱床体积之比为1:20，所述的柱床径高比为1:11-13。4、根据权利要求3所述的羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于歩骤2)中所述的柱床径高比为1:10，步骤3)中所述的柱床径高比为1:12。5、根据权利要求2所述的羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于所述的柱层析为应用大孔树脂柱和/或葡聚糖凝胶柱进行柱层析。6、根据权利要求5所述的羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于歩骤2)中所述的柱层析为使用大孔树脂柱进行柱层析，步骤3)中所述的柱层析为使用葡聚糖凝胶柱进行柱层析。7、根据权利要求6所述的羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于所述的大孔树脂柱为非极性大孔树脂柱。8、根据权利要求7所述的羟基红花黄色素的制备方法，其特征在于所述的非极性大孔树脂柱为D101非极性大孔树脂柱。9、权利要求1所述的羟基红花黄色素A在制备预防及治疗涉及脑血管疾病的药物中的应用。10、根据权利要求9所述的羟基红花黄色素A，其特征在于药物可制成冻干粉针剂、胶囊剂、片剂或注射液。全文摘要本发明涉及从中药材红花中提取的羟基红花黄色素A，及其制备方法和应用。本发明提供的提取羟基红花黄色素A的方法按照不同的径高比装填层析柱，并根据不同的上样体积与柱床体积之比来上样进行柱层析，从而对红花提取液进行分离纯化。此工艺简单，步骤少，成本低，收率高，无环境污染，适用于工业化、大规模化生产，提取羟基红花黄色素A收率达50％多，应用高效液相色谱法测定的羟基红花黄色素A的含量高达99.5％。应用羟基红花黄色素A制成的药物对预防和治疗脑血管疾病脑梗塞、高血压脑出血等有显著疗效。文档编号C07H15/20GK101195647SQ200610160959公开日2008年6月11日申请日期2006年12月6日优先权日2006年12月6日发明者炜杨申请人:炜杨