专利名称：：6,7-二氢-5H-咪唑并[1,2-α]咪唑-3-磺酸的衍生物的制作方法
技术领域：
：本发明主要涉及6,7-二氢-5/f-咪唑并[l,2-a]咪唑-3-磺酸的一类衍生物，这些化合物的合成方法，其在治疗炎性疾病中的用途，以及含有这些化合物的药物组合物。背景信息最近十年期间的研究有助于说明体内参与细胞-细胞相互作用的分子现象，尤其是那些涉及免疫系统中细胞的运动及活化。参见Springer,T.淑脏,1990,346,425-434。细胞表面蛋白和尤其细胞粘附分子("CAM")及"白细胞整合素"，包括LFA-1、MAC-l及p150,95(在WHO命名中分别称为CD18/CDlla、CD18/CDllb及CD18/CDllc),已相应地成为医药研发的主题，其将干扰白细胞外渗至受伤部位和白细胞运动至不同靶点的过程作为其目标。举例而言，目前认为在白细胞外渗(其为炎性反应的强制性部分)之前，结构上表现于白细胞上的整合素发生活化，且随后为整合素(例如LFA-1)与表现于血管内皮细胞表面上及其他白细胞上之一或若干种不同细胞内粘附分子(ICAMs)(命名为ICAM-1、ICAM-2、ICAM-3或ICAM-4)之间的紧密配体/受体相互作用。CAM与白细胞整合素的相互作用为免疫系统的正常功能运作中的关^t步骤。例如抗原呈现、T-细胞介导细胞毒性及白细胞外渗的免疫过程都需要ICAMs与白细胞整合素相互作用所介导的细胞粘附。参见Kishimoto,T.K.;Rothlein;R.R.爿A.尸/2armac0/.1994,25,117-138及Diamond,M.;Springer,T.Q/r固f腺ogy,1994,4,506-517。缺乏白细胞的适当表达的一群个人被称为得了一种名为"白细胞粘附缺失症，，的病症(Anderson，D.C,;等人，M1985,44，2671-2677及Anderson,D.C,;等人,《//"/e".1985,152,668-689)。这些个人由于其细胞不能粘附至细胞基质而无法进行正常的炎性和/或免疫反应。这些资料显示，当淋巴细胞由于缺乏CD18家族的功能粘附分子而无法以正常方式粘附时，免疫反应减弱。由于缺乏CD18的LAD患者确实无法进行炎性反应，因此认为CD18、CD11/ICAM相互作用的拮抗性亦会抑制炎性反应。现已证明，CAM与白细胞整合素之间相互作用的拮抗性可利用针对其任一组^分的试剂来实现。具体而言，阻断例如ICAM-1的CAM或例如LFA-1的白细胞整合素(利用针对这些分子中的任一个或两者的抗体)可有效地抑制炎性反应。利用CAM或白细胞整合素的抗体所抑制的炎症及免疫反应的体外模型包括抗原或有丝分裂促进剂诱导的淋巴细胞增殖，淋巴细胞的同型聚合，T-细胞介导的细胞溶解及抗原特异性诱导的耐受性。体外研究的相关性可由针对ICAM-1或LFA-1的抗体的体内研究来支持。举例而言，针对LFA-1的抗体在小鼠体内可防止曱状腺移植排斥反应并且延长心脏同种异体移植的存活(Gorski，A.;/mmw"o/ogy7b^y，1994,15,251-255)。更重要的是，针对ICAM-1的抗体在人类疾病(例如肾同种异体移植排斥反应及类风湿性关节炎)中显示出了如同抗炎性制剂的体内功效(Rothlein，R.R.;Scharschmidt，L.，in:^ci/zew'o"Mo/ecw/es,股gwer，C.D,等人，1994,1-8;Cosimi,C.B.，等人，乂/mm，o/.1990,J",4604-4612及Kavanaugh,A.,等人，爿W/zn'fei/^wm.1994，37,992-1004)且已证明了针对LFA-1的抗体在骨髓移植中及在防止肾同种异体移植的早期排斥反应中的免疫抑制效应(Fischer,A.;等人，1989，2,1058-1060及LeMauff,B.;等人，7hmsp/a"加/o",1991,52,291-295)。同时也已证明，ICAM-1的重组可溶形式可充当ICAM-1与LFA-1相互作用的抑制剂。可溶ICAM-1充当细胞上CD18、CD11/ICAM-1相互作用的直接拮抗剂，且在免疫反应的体外模型中显示出了抑制活性，该免疫反应例如人类混合淋巴细胞反应、细胞毒性T细胞反应及糖尿病患者对胰島细胞反应的T细胞增殖(Becker，J.C.;等人，J1993，75厶7224及Roep:B.O.;等人，丄眞",1994,凤1590)。因此，现有技术已证明，拮抗CAM结合至白细胞整合素的大蛋白质分反应中具有治疗潜力。然而，蛋白质作为治疗剂具有显著的缺陷，包括不能口服给药及潜在免疫反应性，其限制了这些分子用于长期给药。此外，基于蛋白质的治疗剂通常制造成本昂贵。胞整合素的相似能力的小分子可制成较佳的治疗剂。在文献中已经描述了若干种小分子影响CAM与白细胞整合素的相互作用。举例而言，美国专利6,355,664及其相应的WO98/39303公开一类具有乙内酰脲核心的小分子，其为LFA-1与ICAM-1的相互作用的抑制剂。与本发明最相关的为美国专利6,492，408,其公开具有6,7-二氢-5乐咪唑并[1,2-a]咪唑核心的化合物。虽然对于CAM与白细胞整合素的相互作用，美国专利6,492,408特定描述的化合物4交之美国专利6,355,664及相应的WO9839303的乙内酰脲具有更有效的抑制作用，但由于其代谢速率不合需要地高，因此其并非理想治疗剂。LFA-1与ICAM-1的相互作用的具有6,7-二氢-5//-咪唑并[1，2-^]咪唑核心结构的其它抑制剂在美国专利6,844,360与6，852，748中也有描述。本发明所要解决的问题在于发现对CAMs与白细胞整合素的相互作用具有良好抑制效果并同时亦具有可接受的代谢情况的其它小分子。发明简述本发明的化合物是由美国专利6,492,408—般性而非特定性描述的6,7-二氢-5/f-咪唑并[l,2w]咪唑的子集或者选才奪。本发明的化合物为LFA-1与ICAM-1的相互作用的有效抑制剂，且因此适用于治疗炎性疾病。另外，本发明的代表性化合物已经显示出了具有或期望具有改良的代谢情况，例如改良的代谢稳定性。本发明的特定实施例包括式(I)化合物及其可药用盐；药物组合物，其包含该式(I)化合物或其可药用盐，及一种或多种可药用载体或助剂；及治疗如本文所述的炎性病症的方法，其包含向需要其的患者给药治疗有效量的式(I)化合物或其可药用盐。发明详述本发明包含式I化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>其中R1为0H或NH2:R2为(A)选自吡啶基与嘧啶基的芳基，其中所述芳基的一个或多个氢原子独立地被选自下列的基团所取代(i)氰基，(ii)卤素，及(iii)式-NR!3R"的基团，其中R"与R"各自独立为氢或1至3个碳原子的直链或支链烷基；(B)三氟曱氧基，或(C)氰基；R3为1至3个碳原子的直链或支链烷基；R"为面素或被一或多个卣素原子取代的1至2个碳原子的烷基；R"为卣素或被一或多个卣素原子取代的1至2个碳原子的烷基；X为-CH-或-N-;且Y为氧或^L原子；或其可药用盐。以下为式(I)化合物中的各种可变基团的一些优选实施方案(A)W的定义(Ai)R1为OH(Aii)R1为NH2(B)R2的定义(Bi)R2为(A)选自3-吡啶基与5-嘧啶基的芳基，其中所述芳基被以下各基团单、二或三取代(i)氰基；(ii)卤素；或(iii)NH2;(B)三氟曱氧基；或(C)氰基；(Bii)R2为(A)选自3-吡啶基与5-嘧啶基的芳基，其中所述芳基被以下各基团单取代(i)氰基，或(ii)丽2，(B)三氟甲氧基，或(C)氰基；(Biii)R2为(A)被NH2单取代的5_嘧咬基；(B)三氟曱氧基，或(C)氰基；(C)R3的定义(Ci)F^为曱基或乙基；(Cii)R3为曱基。(D)R"的定义(Di)R"为C1或CF3;卿1143为CI;(Diii)R4a为CF3(E)R"的定义(Ei)R仆为Cl或CF3;(Eii)R仆为Cl;(Eiii)R4b为CF3(F)X的定义(Fi)X为-CH-;(Fii)X为-N、(G)Y的定义(Gi)Y为氧；(Gii)Y为硫。以上定义(Ai)至(Gii)中的任意一项以及每一项可以以任意组合方式互相组合，以获得式(I)化合物的特定亚类定义。下表列出了式(I)化合物的其他亚类实施方案I-1至1-45,其中表中的可变基团是根据上述定义(Ai)至(Gii)加以定义<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>(I*)特别优选的式I化合物为选自下表I中的化合物表I<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>22O-"ONH2丫N(R)-5-[4-(4-氨基-嘧啶-5-基)-苄基]-7-(2,6-二氯-吡啶-4-基)-5-曱基-6-氧代-6，7-二氢-5/^咪唑并[1,2-"]咪唑-3-磺酰胺23丫N(11)-5-[4-(4-氨基-嘧啶-5-基)-苄基]-7-(3,5-双-三氟曱基-苯基)-5-曱基-6-氧代-6,7-二氢-5仏咪唑并[l，2-a]咪唑-3-磺酸240=甲=0^f^]NH2丫N(义)_5-[4-(4-氨基-嘧啶-5-基)-苄基]-7-(3,5-双-三氟曱基-苯基)-5-曱基-6-氧代-6,7-二氢-5i7-咪唑并[1,2-"]咪唑-3-磺酰胺本发明也包括式I化合物的所有可药用盐。如本领域的熟练技术人员所知，这些可药用盐包括任何可药用酸加成盐以及可药用碱加成盐。因此，本发明的化合物包括其游离碱或酸、其可药用盐，且亦可在其结构中包括氧化的硫原子或季铵化的氮原子(尽管未明确阐述或说明)，尤其为其可药用形式。本发明包含这些这些形式，尤其是可药用形式。本发明的某些化合物可以一种以上的互变异构形式存在，且因此本发明包括所有这些互变异构体。一般而言，除非在化合物名称或结构中具体指出特定立体化学或异构形式，否则化学结构或化合物包含全部互变异构形式以及异构形式及混合物，单一几何异构体或立体异构体或异构体的外消旋或非外消旋混合物。亦包括在本发明的范畴内的为基本上纯形式的式(I)化合物，包括其亚属及其特定实施例。在本发明中，术语"基本上纯"意谓着分离形式的式(I)化合物含有少于约5%、优选少于约1%的其他化合物或杂质。一旦根据本文所述合成方法获得式(I)的粗产物，即可使用在本领域中已知的分离及纯化技术很容易的获得这些分离形式。这些已知分离及纯化技术包括(例如)重结晶、过滤、洗涤、硅胶层析法、HPLC等。通用合成方法
技术领域：
：本发明的化合物可利用下述通用方法来制备。各单独步骤的最佳反应条件及反应时间可视所使用的特定反应物而定。除非另有说明，否则本领域内的普通技术人员可易于选择溶剂、温度及其他反应条件。具体的步骤是在合成实施例部分中提供。通常，若需要，反应进度可利用薄层层析法(TLC)来监测。若需要，中间产物及产物可利用硅胶层析法和/或重结晶来纯化，且利用以下技术中的一种或多种加以表征NMR、质镨分析及熔点。起始原料及试剂是市售可得的或可由本领域的熟练技术人员利用化学文献中描述的方法由市售物质制备的。式I化合物可利用下文所述步骤由中间产物II制备。II制备中间产物II的方法中间产物n可利用以下流程图i中所示的步骤制备，该步骤在美国专利6,844,360亦出现。流程图I<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>如上所示，在约-20。C至-30。C下以例如双(三甲基^f圭烷基)酰胺锂的适宜碱使中间产物III去质子化，并接着以取代的卣化千、优选溴千(IV)加以烷基化以产生V。通过V的三氟乙酰氨基的水解(例如利用40%的含水千基三甲基氢氧化铵的二哺烷/50%NaOH处理，接着以例如HC1的酸处理)得到VI。在例如4-(N,N-二甲基氨基)吡啶的碱存在下以硫羰基二咪唑处理VI得到VII。以氨基乙醛二曱缩醛及^k丁基过氧化氢溶液处理VII,接着以例如对甲笨磺酸的酸处理中间产物缩醛，得到VIII。利用例如N-石典代琥珀酰亚胺的卣化剂卣化VIII得到II。中间产物III的制备、以三氟乙酸处理由N-Boc-D-丙胺酸及3，5-二氯丙胺所形成的酰胺以除去Boc-基团、接着以特戊醛处理且以三氟乙酸酐酰化所得咪唑酮的方法是在U.S.6,414,161(以上所引用)及化学文献(N.Yee，Org.Lett.,2000,2,2781-2783)中予以描述。制备中间产物II的其它方法Wu等人的美国专利6,492,408、Frutos等人的美国专利6,414,161及Wang等人的美国专利申请公开号2006/0025447Al中也报道了中间产物II的合成。式I化合物(其中R1为NH。的合成流程图II中列出了由中间产物II合成式I化合物(其中R为NH2)。流程图III(R1是,如上所示，以式RdMgY的格氏试剂，(其中Rd为Cw烷基或C3-6环烷基，且Y为卣化物)处理II,接着以S02且以及接着以N-氯代琥珀酰亚胺处理所得镁盐，得到磺酰氯IX。于适宜溶剂中在适宜碱的存在下以氨处理IX(例如利用加入氢氧化铵)，得到所需的式I产物。或者，此两步法可以以一锅法有效地进行，而不用分离中间产物IX。此一锅法包含使式II化合物与式RdMgY化合物(其中Rd与Y如上文所定义)、二氧化硫及N-氯代琥珀酰亚胺反应，接着于适宜溶剂中在适宜的碱下与氨(例如利用加入氢氧化铵)反应，以形成式I化合物而不用分离中间产物。合适的RdMgY包括例如异丙基氯化镁、异丙基溴化镁、环戊基氯化镁及环戊基溴化镁。当W基团为5-嘧啶基时，必需在RdMgY与式II化合物反应之前将例如N，N,N，，N，-四曱基乙二胺的有机碱与RdMgY预混合，以防止RdMgY与5-嘧咬基加成。用于该反应的适宜的溶剂包括非质子有机溶剂，例如四氢呋喃。用于该反应的第二步骤中的适宜的碱包括例如三乙胺、二异丙基乙胺、碳酸钾、碳酸铯及碳酸钠。RdMgY的添加是在约-40。C至约-15匸、优选约-25。C至约-15。C的温度下进行。二氧化硫及N-氯代琥珀酰亚胺的添加是在约-40。C至约-5。C、优选约-15。C至约-5。C的温度下进行。式I化合物(其中R1为OH)的合成流程图III中列出了由中间产物IX(如流程图II中所制备)合成式I化合物(其中W为OH)。流程图III<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>在例如DMSO或二嗜烷的适宜溶剂中使式IX化合物与水反应，并接着加热以获得式I的磺酸化合物。流程图in，中列出了制备式I化合物(其中R'为OH)的替代方法流程图III，在例如THF的适宜溶剂中，使式VIII化合物(流程图I)与例如S03吡啶复合物的合适磺化剂反应并接着加热以获得式I的磺化化合物。W基团变化式I化合物上的所需R2可利用在流程图I中选择经适宜的取代的中间产物IV而获得。或者，可根据流程图I的步骤制备中间产物VIII,其R2为Br(VIIIa),其接着可(例如)利用流程图IV中所示步骤转化为R2为CN或经取代的5-嘧咬基的中间产物。流程图IVVIlibZ=~CH=;如上所示，以氰化物盐(优选为CuCN)处理芳基溴化物VIIIa，并在例如DMF的合适溶剂中加热以得到氰基-中间产物VIIIb。在合适溶剂(例如二曱氧基乙烷)中，在例如[U，-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II).CH2Cl2(PdCl2(dppf).CH2Cl2)的钯催化剂及例如碳酸钾的碱存在下，以例如5-(4,4,5，5-四曱基-[l,3,2]二氧杂戊硼烷-2-基)-嘧，定的嘧啶硼酸酯处理VIIIa(Suzuki反应)，得到嘧啶中间产物VIIIc。接着可利用上面描述的步骤使中间产物Vlllb及VIIIc转化为所需的式I化合物。亦可对式I化合物(其中R^Br)(化合物Ia)进行Suzuki反应以将R2=Br转化为112=任选取代的嘧啶。Suzuki反应亦可逆向进行。溴化物VIIIa(或具有R2=Br的式I化合物)可例如利用在例如PdCl2(dppf)的钯催化剂存在下以联硼酸频哪醇酯处理而转化为硼酸酯并接着与所需嘧啶基溴化物反应。式I的初始产物可利用本领域中已知的方法进一步加以修饰以得到本发明的其它化合物。举例而言，本发明的其他特征及优点将通过阐述本发明原理的详细实施例而更加清楚。Pd催化剂K2C03DME合成实施例实施例1:(R)-5-[4-(4-氨基-嘧啶-5-基)-苄基]-7-(3,5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6,7-二氢-5//-咪唑并[1,2《]咪唑-3-磺酸(1)的合成Wu等人的U.S.6,492，408及Wang等人的美国专利申请公开号2006/0025447Al报道了化合物(25)的合成，两者皆以引用的方式并入本文中。用N-硤代琥珀酰亚胺(1.05当量)与对曱苯磺酸吡锭(O.l当量)处理(R)-3-(4-溴-千基)-l-(3,5-二氯-苯基)-3-曱基-l界咪唑并[l,2-"]咪唑-2-酮(25)于THF(0.12M)中的溶液。将混合物在室温下搅拌17小时，接着以EtOAc稀释且以io%Na2S203溶液及水洗涤。以EtOAc萃取合并的水层。合并有机相并用盐水洗涤，经Na2S04干燥，过滤且浓缩。利用硅胶层析法纯化粗产物油以得到所需碘化物(26)。将以上碘化物(26)于THF(0.12M)中的溶液在-40。C下冷却，同时在10分钟内滴加环戊基氯化镁(1.05当量)。在-40。C下搅拌1小时后，利用将一入口针刚好置放于反应混合物的表面上来添加S02(g)历时1.5分钟。在1小时内将反应混合物温热至-20。C并接着在室温下搅拌1小时。用N2(g)通过混合物鼓泡20分钟，接着浓缩且在高真空下抽12小时。将所得发泡体溶解于THF(0.1M)中并在-20。C下冷却，同时在5分钟内滴加N-氯代琥珀酰亚胺(1.2当量)于THF(0.3M)中的溶液。在-20。C下搅拌1小时后，将混合物倾倒在水上并用两份EtOAc萃取。将合并的有机相用水冷盐水洗涤，经Na2S04干燥，过滤且浓缩。利用硅胶层析法纯化，得到固体状的磺酰氯(27)。将磺酰氯(27)(727mg)添加至DMSO(4.4mL)与水(0.7mL)的混合物中，并接着在80。C下加热3小时。将所得均一化反应物冷却至室温并以15mL水稀释，形成沉淀。经真.空过滤收集固体并在空气下干燥过夜，得到定量的磺酸(28)。将磺酸(28)(826mg)溶解于无水二p恶烷(15.6mL)中且用N2通过溶液鼓泡20分钟。一起添加联硼酸频哪醇酯(474mg)、PdCl2(dppf)■CH2Cl2(127mg)及KOAc(610mg)的固体混合物。将反应物以N2淹没且在N2气氛下在80°C下加热16小时。冷却至室温后，以水稀释反应物并以10。/。EtOAc/己烷萃取以除去少量极性物质。接着用EtOAc萃取水相。用MgS04干燥合并的EtOAc层并浓缩，得到953mg深色发泡体状的四曱基乙二醇硼酸酯且不用进一步纯化便可使用。用N2将四曱基乙二醇硼酸酯(pinacolboronate,频哪醇硼酸酯，29)(506mg)、4-氨基-5-溴嘧啶(189mg)及Na2C03(123mg)于二噹烷(5.2mL)水(2.6mL)混合物中的悬浮液脱气20分钟。添加PdCl2(dppf)CH2Cl2(59mg)并以N2淹没反应混合物。将反应加热至80°C15小时，接着冷却至室温，以水(10mL)及盐水(10mL)稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机层用MgS04干燥，过滤并浓缩。用反相HPLC纯化所获得的物质。经由冻干法除去溶剂，得到120mg白色固体状的标题化合物(l)。(MS544.95M+l)实施例2:(R)-5-[4-(4-氨基-嘧啶-5-基)-苄基]-7-(3，5-二氯-苯基)-5-曱基-6-氧代-6,7-二氢-5//-咪唑并[1,2-0]咪唑-3-磺酰胺(2)的合成在室温下将磺酰氯(27)("0mg)溶解于THF(15mL)与DMF(0.5mL)的混合物中。添加一份CsC03(667mg),接着添加浓NH4OH(0.6mL)。在室温下将所得溶液搅拌l小时。将反应物以水稀释并以EtOAc萃取。将合并的有机层浓缩并用层析法纯化，得到495mg石黄酰胺(30)。将磺酰胺(30)(495mg)溶解于螺旋盖小瓶中的无水二嗜、烷(9.3mL)中。将该溶液冷冻并接着在真空下放置25分钟，同时其部分融化。将溶液放置于N2下且一起添加联硼酸频哪醇酯(284mg)、Pd催化剂(38mg)及KOAc(275mg)的固体混合物。将反应物以N2淹没并以盖及封口蜡膜(parafilm)密封，且在8(TC下加热20小时。冻干溶剂且用快速层析法纯化残余物，得到407mg发泡体状的四甲基乙二醇硼酸酯(31)。将四曱基乙二醇硼酸酯(31)、4-氨基-5-溴嘧啶(92mg)及Na2C03(52mg)悬浮于小瓶中的二嚅烷(2.2mL)与水(l.lmL)中。用N2通过混合物鼓泡20分钟。添加Pd催化剂(2.9mg)且将该小瓶以N2淹没，加盖且以封口蜡膜密封。将反应物加热至8CTC18小时。将反应物冷却至室温，以水(18mL)稀释且用EtOAc萃取。用MgS04干燥合并的有机层且浓缩。用层析法纯化残余物，得到49.0mg标题化合物。利用反相HPLC进一步纯化该物质。利用冻干法除去溶剂，得到44.3mg白色粉末状的所需氨基嘧啶(2)的三氟乙酸盐。(MS544.23M+l)方法来制备。方法使用必要的试剂来制备。Q':'''实施例3:(R)-7-(3,5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-5-(4-三氟曱氧基-苄基)-6,7-二氢-57/"咪唑并[l,2-fl]咪唑-3-磺酸(17)的合成化合物(32)是用化合物(25)所述的类似的方法来制备的。以N-碘代琥珀酰亚胺(0.846g)与对曱苯石黄酸吡It(0.086g)处理(R)-l-(3,5-二氯-笨基)-3-曱基-3-(4-三氟曱氧基-苄基)-lH-咪唑并[l,2-a]咪唑-2-酮(32)(1.54g)于THF(30mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌17小时，接着以EtOAc稀释并用10%的Na2S203溶液及水洗涤。用EtOAc萃取合并的水层。将合并的有机相用盐水洗涂，经Na2S04干燥，过滤且浓缩。用硅胶层析法纯化粗产物油，得到1.27g油状化合物(33)。(MS582.0，M+l)在-40。C下冷却碘化物(33)(1.24g)于THF(16mL)中的溶液，同时在10分钟内滴加环戊基氯化镁(1.17mL,2M于二乙醚中)。在-40。C下搅拌l小时后，利用将一入口针刚好置放于反应混合物的表面上来添加SCb(g)历时1.5分钟。在1小时内将反应混合物温热至-20。C并接着在室温下搅拌1小时。用N2(g)通过混合物鼓泡20分钟，接着浓缩并在高真空下抽12小时。将所得发泡体溶解于THF(16mL)并在-20。C下冷却，同时经5分钟滴加N-氯代琥珀酰亚胺(0.341g)于THF(8mL)中的溶液。在-20。C下搅拌1小时后，将混合物倾倒于水上并用EtOAc萃取。将合并的有机相用冰冷盐水洗涤，经Na2S04干燥，过滤且浓缩。用硅胶层析法纯化，得到0.975g粘稠油状化合物(34)。(MS554.2，M+l)将磺酰氯(34)(500mg)添加至DMSO(4.4mL)与水(0.7mL)的混合物中，并接着在80。C下加热3小时。将所得均一化反应物冷却至室温并以15mL水稀释，形成沉淀。经由真空过滤收集固体并在空气下干燥过夜，得到462mg磺酸(17)。(MS535.9M+l)实施例4:(11)-7-(3,5-二氯-苯基)-5-曱基-6-氧代-5-(4-三氟曱氧基-千基)-6,7-二氢-5//-咪唑并[1,2-]咪唑-3-磺酰胺(18)的合成在室温下，将Cs2CO3(0.89g)添加至磺酰氯(34)(1.0g)于THF与DMF(4.0ml，体积比5:1)的混合溶液中，接着添加氳氧化铵(0.9ml，28%水溶液)。30分钟后，以水处理混合物并用EtOAc萃取。浓缩萃取物，且利用硅胶层析法纯化残余物，得到647mg磺酰胺(18)。(MS534M+1)实施例5:(R)-5-(4-氰基-苄基)-7-(3,5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6,7-二氢-5/7-咪唑并[l,2-a]咪唑-3-磺酸(19)将Zn(CN2)(1.58g)添加至(R)-3-(4-溴-苄基)-l-(3,5-二氯-苯基)-3-甲基-1H-咪唑并[l,2-a]咪唑-2-S同(25)(10.0g)于DMF(200mL)中的溶液中。用N2气流使所得溶液脱气2小时。添加Pd2dba3(1.02g)及dppf(1.48g),且将反应混合物加热至12(TC2小时。将溶剂蒸发且将残余物溶解于EtOAc中，接着用水及盐水洗涤，接着干燥并过滤且用Florisil纯化残余物，得到7.0g化合物(35)。在30分钟内将对曱苯磺酸吡锭(0.25g)与N-石舆代琥珀酰亚胺(2.9g)逐份添加至化合物(3"(《0g)于CH2Cl2(S0mL)中的经搅拌的冷(-;3(rC)溶液中。将浴温度缓慢升高至室温并搅拌过夜。以10%的NaHS03及水洗涤反应混合物。经Na2S04干燥有机相并浓缩。用层析法纯化所得粗产物，得到3.5g碘化物(36)。在10分钟内将环戊基氯化镁(1.5mL,2M于Et20中)滴加至碘化物(S6)(1.0g)于THF(10mL)中的冷(^0。C)溶液中。将混合物在-WC下搅拌1小时，接着利用将一入口针刚好置放于反应混合物的表面上来添加SO"g)历时1分钟。在1小时内将所得溶液温热至-20。C，并接着在室温下再搅拌1小时。用N2(g)通过混合物鼓泡20分钟，接着浓缩并在高真空下抽12小时。将所得发泡体溶解于THF(10mL)并在-20。C下冷却，同时在1分钟内添加N-氯代琥珀酰亚胺(0.3g)于THF(10mL)中的溶液。将混合物在-20。C下搅拌1小时后，接着将其倾于冰/水上并以EtOAc萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2S04干燥，过滤且浓缩。用层析法纯化粗产物，得到0.65g磺酰氯(37)。将磺酰氯(37)(70mg)添加至DMSO(lmL)与水(0.2mL)的混合物中，并接着在80。C下加热3小时。将所得均一化反应物冷却至室温并以水稀释且用EtOAc萃取水层。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO,干燥，过滤且浓缩。用层析法纯化残余物，得到58mg^黄酸(19)。(MS477M+1)实施例6:(R)-5-(4-氰基-千基)-7-(3,5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6,7-二氯-5/7-咪唑并[l,2-a]咪唑-3-磺酰胺(20)将CsCO3(0.24g)添加至磺酰氯(37)(495mg)于THF(lmL)与DMF(0.2mL)的混合溶液中，接着添加NH4OH(0.24mL)。在室温下将反应混合物搅拌30分钟并接着以水处理。用Et20萃取水层，且将有机相用水及盐水洗涤，经Na2S04干燥，过滤并浓缩。用层析法纯化粗产物，得到100mg标题化合物。(MS475.9M+l)生物学性质说明可利用下述实验方案研究式I化合物的生物学性质。测定LFA-1结合至ICAM-1的抑制实验实—验的目的设计该实验方案以利用测试化合物来研究CAM、ICAM-1与白细胞整合素CD18/CDlla(LFA-l)的相互作用的直接拮抗性。实验方案描述:利用前述方案(Dustin，M.J.;等人，J/附mimo/.1992,〃S,2654-2600),使用来自20g人类JY或SKW3细胞沉淀的TS2/4抗体免疫纯化LFA-1。利用TS2/4LFA-1mAb琼脂糖免疫亲和层析法从SKW3溶胞物中纯化LFA-1,并在2mMMgCl2及1%辛基糖苷存在下pH11.5下进行洗脱。收集并中和来自TS2/4柱的级份后，将试样混合且以蛋白质G琼脂糖预澄清。ICAM-1的可溶形式的构建、表现、纯化且表征如前所述(Marlin，S.;等人，淑脏，1990,3",70-72,且参见Arruda,A.;等人，勘"7m'cra6.C7^moAw.1992,36，1186-1192)。简而言之，使用标准寡核苦酸引导的突变，将位于胞外域的域5与跨膜区域之间的推断界限处的异亮氨酸454变为终止密码子。此建构体产生与膜结合ICAM-1的第一个453氨基酸相同的分子。以仓鼠二氢叶酸还原酶基因、抗新霉素标记及上述sICAM-l结构的编码区，与SV40早期区域的启动子、剪切信号及多聚腺嘌呤信号一起形成表达载体。使用标准磷酸钙方法将重组的质体转染至CHODUX细胞内。将细胞在选择性培养基(G418)中传代且使用曱胺喋呤扩增分泌的sICAM-l克隆。使用已知的非亲和层析技术(包括离子交换及尺寸排阻层析法)从无血清培养基中纯化sICAM-l。利用室温下在96孔培养板中，将40吗/mL的sICAM-l先在具有钙及镁的杜尔贝科磷酸盐緩沖生理食盐水(Dulbecco，sphosphatebufferedsaline)中、再在2mMMgCl2与0.1mMPMSF(稀释緩冲剂)中培养30分钟，来监测LFA-1对ICAM-1的结合。接着在37。C下利用将2。/。(w/v)牛血清白蛋白添加至稀释緩冲剂中而使培养板阻断1小时。将阻断溶液自孔中除去，且稀释并接着添加测试化合物，接着添加约25ng的免疫亲和性纯化的LFA-1。在测试化合物及ICAM-1的存在下，将LFA-1在37。C下培养1小时。以稀释緩冲剂将孔洗涤3次。利用将多克隆抗体(针对对应于CD18细胞质尾的肽)添加至具有稀释緩冲剂与1%BSA的1:100稀释液中且在37。C下培养45分钟来检测结合的LFA-1。以稀释緩冲剂将孔洗涤3次，且利用添加偶联兔免疫球蛋白的辣根过氧化物酶(结合至山羊免疫球蛋白)的1:4000稀释液来检测结合的多克隆抗体。将该试剂在37。C下培养20分钟，如上洗涤孔，且将辣根过氧化物酶的底物添加至各孔中，得到与结合至sICAM-l的LFA-1的量成比例的定量比色信号。将可溶的ICAM-l(60(ig/mL)用作抑制LFA-1/ICAM-1相互作用的阳性对照。将结合实验中不添加LFA-1用作全部试样的背景对照。得到全部测试化合物的剂量-反应曲线。在该实验中测试选自上表I中的代表性的式I化合物，且发现每种化合物均具有小于10pM的Kd。治疗用途说明本发明所提供的式I的新颖小分子抑制人类淋巴细胞的ICAM-1/LFA-1依赖性同型聚合及人类淋巴细胞与ICAM-1的粘附。这些化合物在免疫细胞活化/增殖的调节中具有治疗作用，例如作为涉及CAM与白细胞整合素的细胞内配体/受体结合反应的竟争性抑制剂。更具体而言，本发明的化合物可用于治疗某些炎性病症，包括由哺乳动物中非特异性免疫系统的反应引起的病症(例如成人呼吸窘迫综合症、休克、氧中毒、败血症继发性多器官损伤综合症、外伤继发性多器官损伤综合症、归因于心肺分流术的组织再灌注损伤、心肌梗塞或使用溶血栓剂、急性肾小球肾炎、脉管炎、反应性关节炎、具有急性炎性成份的皮肤病、中风、热损伤、血液透析、白细胞去除术、溃疡性结膜炎、坏死性小肠结肠炎及粒细胞输液相关综合症)及由哺乳动物中特异性免疫系统的反应引起的病症c例如牛皮癣、器官/组织移植排斥反应、移植物抗宿主反应及包括雷诺综合症(Raynaud'ssyndrome)的自体免疫疾病、自体免疫甲状腺炎、皮炎、多发性硬化症、类风湿性关节炎、胰岛素依赖性糖尿病、葡萄膜炎、包括节段性回肠炎(Crohn，sdisease)及溃疡性结肠炎的炎性肠病、及全身性红斑狼^)。本发明的化合物亦可用于治疗哞喘或在癌症治疗中作为助剂以将细胞因子疗法的毒性减至最小。一般而言，这些化合物可用于治疗那些目前可由类固醇疗法治疗的疾病。因此，本发明的另一方面是提供一种给药治疗量或预防量的一种或多种式I化合物来治疗或预防上述病症的方法。根据本发明所提供的方法，式I的新颖化合物可单独或与其他免疫抑制剂或消炎剂一起给药以用于预防或治疗目的。当预防性给药时，免疫抑制性化合物在任何炎性反应或症状之前给药(例如在器官或组织移植之前、期间或之后不久，但应在器官排斥反应的任何症状出现之前)。式I化合物的预防性给药可用于预防或减弱任何并发性炎性反应(例如移植器官或组织的排斥反应等)。式I化合物的治疗性给药可用于减弱任何实际炎症(例如移植器官或组织的排斥反应)。因此，根据本发明，式I化合物可在炎症发作之前给药(以便抑制预炎性症)或在炎症发作之后给药。根据本发明，可利用口服、肠胃外或局部途径以单次或分次剂量给药式I的新颖化合物。式I化合物的合适口服剂量为每天约O.lmg至10g的范围。在肠胃外制剂中，合适的剂量单位可含有0.1至250mg此类化合物，而对于局部给药而言，优选含有0.01至1%活性成份的制剂。然而，应了解不同患者的给药剂量会不同，且用于任何特定患者的剂量将取决于临床医师的判断，其根据患者的大小及病症以及患者对药物的反应标准来调整合适的剂量。式I化合物通常以其含有至少一种可药用载体或助剂的药物组合物形式给药。当本发明的化合物利用口服途径给药时，其可以含有自身与至少一种相容性医药载体物质的药物组合物形式的药物给药。该载体物质可为适于口服给药的惰性的有机或无机载体物质。这些载体物质的实例为水、明胶、滑石粉、淀粉、硬脂酸镁、阿拉伯胶、植物油、聚亚烷二醇、石油膏及其类似物。该药物组合物可以利用已知的方法制备，且成品剂型可为固体剂型，例如片剂、糖衣药丸、胶囊等，或液体剂型，例如溶液、悬浮液、乳液等。可使该药物组合物经受例如灭菌的已知医药操作。此外，该药物组合物可含有一中或多种已知助剂，例如防腐剂、稳定剂、乳化剂、味道改良剂、湿润剂、緩冲剂、用于改变渗透压的盐等助剂。可使用的固体载体物质包括(例如)淀粉、乳糖、甘露醇、曱基纤维素、微晶纤维素、滑石粉、硅石、磷酸氢二钙及高分子量聚合物(例如聚乙二醇)。对于肠胃外使用而言，式I化合物可以水溶液或非水溶液、可药用油中的悬浮液或乳液或液体混合物给药，这些液体可含有抑菌剂、抗氧化剂、防腐剂、緩沖剂或其他使溶液与血液等张的溶质、增裯剂、悬浮剂或其他可药用添加剂。此类型的添加剂包括(例如)酒石酸盐、柠檬酸盐及乙酸盐缓冲剂，乙醇，丙二醇，聚乙二醇，复合物形成剂(例如EDTA)，抗氧化剂(例如亚硫酸氬钠、偏亚硫酸钠及抗坏血酸)，用于粘度调节的高分子量聚合物(例如液体环氧乙烷)，及山梨糖醇酐的聚乙烯衍生物。若需要，则亦可添加防腐剂，例如苯曱酸、对羟基苯曱酸甲酯或对羟基苯曱酸丙酯、氯化苯曱烃铵及其他季铵盐化合物。本发明的化合物亦可以用于鼻施药的溶液给药，且在水性媒剂中除可含有本发明的化合物外，亦可含有合适的緩冲剂、张力调节剂、微生物防腐剂、抗氧化剂及增粘剂。用于增强粘性的试剂的实例为聚乙烯醇、纤维素衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、聚山梨醇酯或甘油。所添加的微生物防腐剂包括氯化苯曱烃铵、硫柳汞、氯丁醇或笨乙醇。另外，本发明所提供的化合物可以局部方式或利用栓剂给药。制剂式I化合物可以诸多方式配制以用于治疗性给药。以下给出若干种例示性制剂的说明。实施例A胶嚢或片剂<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>混合这些赋形剂物质并接着加至式I化合物中之一的溶解所必需的体积的溶液中。继续混合直至溶液澄清为止。接着将溶液过滤至合适小瓶或安瓿内且利用在高压釜中处理来灭菌。实施例c悬浮液成份数量式I化合物lOOmg柠檬酸l,92g笨扎氯铵0.025重量％EDTA0.1重量％聚乙烯醇10重量％水适量至100mL将这些赋形剂物质与水混合并且随后添加式I化合物中之一，且继续混合直至悬浮液均匀为止。接着将悬浮液移至合适小瓶或安瓿中。实施例D局部给药制剂成份数量式I化合物5重量％Tefose6313重量％LabrafUM1944CS3重量％石蜡油8重量％对羟基苯曱酸曱酯(MP)0.15重量％对羟基苯曱酸丙酯(PP)0.05重量％去离子水适量至100mL将适量Tefose63、LabrafilM1944CS、石蜡油与水混合，并在75。C下加热直至所有组份融化为止。接着在连续搅拌下将混合物冷却至5CTC。在混合下添加对羟基笨曱酸曱酯与对羟基苯曱酸丙酯，且将该混合物冷却至周围温度。将式I化合物添加至混合物中并充分混合。权利要求1.式(I)化合物或其可药用盐其中R1为OH或NH2R2为(A)选自吡啶基和嘧啶基的芳基，其中所述芳基的一个或多个氢原子独立地被下列的基团所取代(i)氰基，(ii)卤素，及(iii)式-NR13R14的基团，其中R13与R14各自独立地为氢或1至3个碳原子的直链或支链烷基；(B)三氟甲氧基，或(C)氰基；R3为1至3个碳原子的直链或支链烷基；R4a为卤素或被一个或多个卤素原子取代的1至2个碳原子的烷基；R4b为卤素或被一个或多个卤素原子取代的1至2个碳原子的烷基；X为-CH＝或-N＝；且Y为氧或硫原子。2.如权利要求1的式I化合物或其可药用盐，其中R'为OH。3.如权利要求1的式I化合物或其可药用盐，其中R'为NH2。4.如前述权利要求中任一项的式I化合物或其可药用盐，其中R为(A)选自3-吡咬基与5-嘧啶基的芳基，其中所述芳基被以下各基团单、二或三取代(iv)氰基；(v)卤素；或(vi)腿2;(B)三氟曱氧基；或(C)氰基。5.如前述权利要求中任一项的式I化合物或其可药用盐，其中W为(A)被NH2单取代的5-嘧啶基；(B)三氟曱氧基，或(C)氰基。6.如前述权利要求中任一项的式I化合物或其可药用盐，其中R为曱基或乙基。7.如前述权利要求中任一项的式I化合物或其可药用盐，其中W为曱基。8.如前述权利要求中任一项的式I化合物或其可药用盐，其中R"与R4b各自选自C1或CF3。9.如前述权利要求中任一项的式I化合物或其可药用盐，其中X为-CH-。10.如前述权利要求中任一项的式I化合物或其可药用盐，其中X为-N=。11.如权利要求1的式I化合物，其选自以下化合物或其可药用盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>12.如权利要求中任一项的式I化合物，其用作药物。13.药物组合物，其包含如权利要求1至12中任一项的化合物及至少一种可药用载体或助剂。14.如权利要求1至12中任一项的式I化合物在制备治疗炎症或炎性病症的药物中的用途。15.如权利要求14的用途，其中治疗的病症为成人呼吸窘迫综合症、休克、氧中毒、败血症继发性多器官损伤综合症、外伤继发性多器官损伤综合症、归因于心肺分流术的组织再灌注损伤、心肌梗塞或使用溶血栓剂、急性肾小球肾炎、脉管炎、反应性关节炎、具有急性炎性成份的皮肤病、中风、热损伤、血液透析、白细胞去除术、溃疡性结膜炎、坏死性小肠结肠炎及粒细胞输液相关综合症、牛皮癣、器官/组织移植排斥反应、移植物抗宿主反应、自体免疫疾病、雷诺综合症、自体免疫曱状腺炎、皮炎、多发性硬化症、类风湿性关节炎、胰岛素依赖性糖尿病、葡萄膜炎、炎性肠病、节段性回肠炎、溃疡性结肠炎或全身性红斑狼疮、哞喘或细胞因子疗法的毒性效应。全文摘要本发明公开了6，7-二氢-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酸的衍生物，其显示出了对CAM与白细胞整合素的相互作用的良好抑制效果，并因此适用于治疗炎性疾病。文档编号C07D487/04GK101166743SQ200680014552公开日2008年4月23日申请日期2006年5月3日优先权日2005年5月19日发明者勒内·M·莱米克斯,戴维·P·约瑟夫,王晓军,约翰·P·巴里,马格努斯·C·埃里克森申请人:贝林格尔·英格海姆国际有限公司