专利名称：作为ccr3受体配体的氨基-烷基-酰胺衍生物的制作方法
作为CCR3受体配体的氨基-垸基-酰胺衍生物
本发明涉及通式(I)的CCR3受体配体(其有利地是拮抗剂)以及其盐、 溶剂化物和异构体、包含其的药物组合物、通式(I)的化合物以及其盐、溶 剂化物和异构体的应用和通式(I)的化合物以及其盐、溶剂化物和异构体的 制备。
趋化因子是分泌的低分子量(8-12 kDa)多肽，由于它的白细胞吸引(趋 化)作用，其在免疫过程中起着重要的调节作用。其通过属于G蛋白偶联 受体族的趋化因子受体来发挥其作用。
许多炎症细胞，如嗜碱性细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、上皮细胞、 树突细胞都表达CC趋化因子受体3 (CCR3受体)，但是发现其在嗜酸性细 胞的表面上的存在量最大。
CCR3受体配体属于C-C趋化因子族。其具有许多选择性和非选择性 配体。选择性配体有嗜酸粒细胞趋化因子(eotaxin)、嗜酸粒细胞趋化因子 -2和最近发现的嗜酸粒细胞趋化因子-3。非选择性配体有RANTES、单核 细胞趋化蛋白(MCP-2、 MCP-3、 MCP-4)和巨噬细胞抑制剂蛋白(MIP-1)。 在长时间来已知的描述最充分的CCR3配体是嗜酸粒细胞趋化因子。
该嗜酸粒细胞趋化因子通过CCR3受体的活化选择性吸引嗜酸性细 胞。在变应原激发前，测得哞喘患者支气管-肺泡灌洗液中的嗜酸粒细胞趋 化因子水平提高了67%。在激发作用下，发现呼吸道的上皮和内皮细胞有 2.4倍的增力口。
在肺中，在许多细胞中都产生嗜酸粒细胞趋化因子。在变应原响应后， 最重要的嗜酸粒细胞趋化因子源是上皮细胞，但是肺的成纤维细胞、呼吸 道的平滑肌细胞和内皮细胞、肺泡巨噬细胞和淋巴细胞、以及嗜酸性细胞 本身也产生大量的嗜酸粒细胞趋化因子。
最初，数据表明仅在嗜酸性细胞中发现了 CCR3受体(Bertrand CP， Ponath PD" Expert Opin Investig Drugs. 2000年1月；9(1): 43-52.)，但是， 在表达i普的基础上，发现其它炎性细胞也包含CCR3受体，尽管含量较少 (Eisner J， Escher SE， Forssmann U.， Allergy. 2004年12月；59(12): 1243-58.)。因此，CCR3拮抗剂具有更广泛的作用，其活性并不仅限于嗜 酸性细胞并且因此认为其在哞喘、变应性和炎性疾病的治疗中是更有价值 和更有效的耙点。
根据上面的观察结果，CCR3拮抗剂可能在一些病症的治疗中具有重 要的预防和治疗作用，其中在所述病症中，CCR3受体在该疾病的发展中 起一定的作用。这些疾病的特征在于白细胞功能(活化、趋化性)紊乱，其 中有许多慢性炎性疾病，如哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎、湿疹、炎性 肠病、溃疡性结肠炎、变应性结膜炎、关节炎、多发性硬化、克罗恩病、 HIV-感染和与AIDS有关的疾病。
迄今为止，在文献中所公开的CCR3拮抗剂都是脲-、疏脲衍生物(WO 01/0卯88、 WO 02/059081)和/或包含饱和环状氨基的化合物(WO 00/35451、 US 6,605,623、 WO 01/98270、 WO 03/004487、 WO 03/018556、 WO 2004/028530、 WO 00/53600、 WO 00/35876、 WO 01/64216、 WO 02/50064、 WO 02/102775、 GB 2373186、 WO 03/082291、 WO 2004/004731、 WO 2004/058702、 WO 2004/085423)。本发明涉及一种新型结构的化合物，开 链的氨基-烷基-酰胺衍生物，这些化合物的代表是有效的CCR3受体拮抗 剂。
从治疗应用的角度来看，重要的是该分子不与其它CCR受体亚型结 合或仅在十分高的浓度下才与其它CCR受体亚型结合。
我们的目标是制备具有高拮抗活性并同时对CCR3受体具有选择性 (即与其它CCR受体相比，其在低得多的浓度下抑制CCR3受体)的化合物。 另一个目标是该新化合物具有确保其可作为药物的稳定性、生物利用度、 治疗指数和毒性值。另 一个目标是该化合物由于其良好的肠吸收而可以被 口服应用。
我们发现通式(I)的化合物以及其盐、溶剂化物和异构体以及其盐和溶 剂化物满足上述标准，
Ar1 表示任选地被一个或多个卣素原子取代的苯基；
X和Y独立地表示任选地被一个或多个相同或不同的直链或支链烷基 取代的直链或支链Cw亚烷基；
Z 表示价键或任选地被一个或多个相同或不同的直链或支链Q-4烷基 取代的直链亚烷基或直链C2-4亚链烯基；
B 表示价键、-O-、 -S-、 -SO-、 S02-，或者与Z—起表示任选地被一 个或多个相同或不同的直链或支链d-4烷基取代的直链C2_4亚烷基 或(:2-4亚链烯基；
Q 表示直链或支链d-4烷基、氨基或氧原子；
R1和W独立地表示氩原子或直链或支链Cw烷基；
Ar2 表示任选地被卣素原子取代的苯基；
包含一、二或三个氮原子、或两个氮原子和一个氧原子、或一个氮 原子和一个氧原子、或一个氮原子和一个-克原子的5-或6-元杂环， 其任选地被一个或多个相同或不同的选自直链或支链Cw烷基、囟 素原子、任选地被一个或多个直链或支链Cw烷基、囟素原子或苄 氧基取代的苯基、氧代基团的取代基所取代；
这些5-或6-元杂环的苯并类似物(benzologues)，其中其苯环可任选 地进一步被一个或多个相同或不同的选自卣素原子、直链或支链 d-4烷基、直链或支链烷氧基、羟基、三氟甲基、硝基、Cw 亚烷二氧基、氨基、被一个或两个相同或不同的直链或支链C"烷 基或千基取代的氨基、或磺酰基的取代基所取代；或者
与包含一个或两个氮原子的6-元杂芳环稠合的包含一、二或三个氮 原子、或一个氮原子和一个氧原子、或一个氮原子和一个硫原子的 5-元杂环，其任选地被一个或多个相同或不同的选自直链或支链
Cw烷基、直链或支链d-4烷氧基、羟基、氨基、被一个或两个相 同或不同的直链或支链d.4烷基或节基取代的氨基的取代基所取
代；
A- 表示一种阴离子； r表示0或1。
上面取代基的详细含义如下
C^烷基指的是1-4个碳原子的饱和的直链或支链脂族基团，如甲基、 乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基。
d-4亚烷基指的是-(CH2)n-基团，其中n的值是l、 2、 3或4，如亚甲 基、亚乙基、亚丙基、亚丁基。
C2_4亚链烯基指的是包含1个双键的亚链烯基，例如-CH-CH-或 CH2-CH-CH-基团。
Cw烷氧基指的是其中烷基的含义如上面所定义的-o-烷基，如甲氧
基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧 基。
Cw亚烷二氧基指的是其中亚烷基的含义如上面所定义的-o-亚烷基
-o-基团，如亚曱二氧基、亚乙二氧基。
卤素原子指的是氯、氟、碘或溴原子。
包含一、二或三个氮原子的5-或6-元杂环指的是不饱和、饱和或部分 饱和的杂环，例如p比咯、咪唑、吡唑、1,2，3-三唑、1,2，4-三唑、吡咬、嘧 咬、钛嚷、吡噪、1,2，4-三噢、1，3，5-三嚷、1，2，3-三溱、p比p各烷、咪唑烷1，2，4]三唑烷、哌啶、哌噪、2-咪唑啉环。
包含一个氮原子和一个氧或硫原子的5-或6-元杂环指的是不饱和、饱 和或部分饱和的杂环，例如嘈、唑、异嗜唑、噻唑、异噻唑、1，2^恶唤、1，3-噶 漆、1，4-喝療、1，2-噢漆、1，3-噢漆、1，4-遂噢、"恶哇烷、噻唑烷、吗啉、硫 代吗啉、2-^唑啉、2-哺唑啉环。
包含两个氮原子和一个氧原子的杂环例如可以是"恶二唑环。
苯并类似物指的是与苯环稠合的衍生物，例如吲咪、苯并嚅唑、苯并 遙峻、苯并咪哇、会啉、壹唾啉、壹5t淋o
与包含一或两个氮原子的6-元杂环稠合的包含一、二或三个氮原子、 或一个氮原子和一个氧原子、或一个氮原子和一个硫原子的5-或6-元杂环 的衍生物例如可以是塞喳并他淀、三哇并吡咬、塞哇并嘧咬、喁唑并吡咬、 9H-噤呤、3H-咪唑并吡啶。
阴离子指的是可药用的阴离子，例如卣离子、曱苯磺酸根、硫酸根、 磷酸根阴离子。
通式(I)化合物的盐指的是用无机和有机酸和碱形成的盐。有利的是与 可药用的酸例如盐酸、硫酸、乙磺酸、酒石酸、富马酸、柠檬酸和碱例如 氢氧化钠、氢氧化钾、乙醇胺形成的盐。在纯化和分离过程中形成的盐， 有利地是与四氟硼酸和高氯酸形成的盐也是本发明的主题。
溶剂化物指的是与各种溶剂，例如与水或乙醇形成的溶剂化物。 异构体指的是结构和光学异构体。结构异构体可以是平衡中的互变异
构形式或分离的稳变异构体，其也是本发明的主题。通式(I)的化合物可以 包含一个或多个不对称碳原子，因此其可以是光学异构体、对映异构体或 非对映异构体。这些对映异构体和非对映异构体以及其包括外消旋物在内 的混合物也是本发明的主题。
一组优选的通式(I)的化合物由如下化合物以及其盐、溶剂化物和异构 体以及其盐和溶剂化物所组成，其中 Ar1表示任选地被一个或多个卣素原子取代的苯基； X和Y独立地表示任选地被一个或多个相同或不同的直链或支链d_4烷基
取代的直链Cw亚烷基； Z 表示价键或任选地被一个或多个相同或不同的直链或支链Cw烷基
取代的直链Cw亚烷基；
B 表示价键、-O-、 -S-、 -SO-、 S02-，或者与Z —起表示任选地被一 个或多个相同或不同的直链或支链d_4烷基取代的直链C2_4亚烷基； Q 表示直链或支链d—4烷基、氨基或氧原子； R1和R2独立地表示氢原子或直链或支链d-4烷基； Ar2 表示苯基；
任选地被一个或多个直链或支链Cw烷基取代的包含一、二或三个 氮原子、或一个氮原子和一个氧原子、或一个氮原子和一个》充原子 的5-或6-元杂环；
这些5-或6-元杂环的苯并类似物，其中其苯环可任选地进一步被一 个或多个卣素原子、直链或支链d-4烷基所取代；或者 任选地被一个或多个氨基、被一个或两个相同或不同的直链或支链 d-4烷基取代的氨基取代的与包含一个或两个氮原子的6-元杂芳环 稠合的包含两个或三个氮原子、或一个氮原子和一个氧原子、或一 个氮原子和一个硫原子的5-元杂环；
A— 表示一种阴离子；
r 表示0或1。
尤其优选的是下面的化合物
N-(3-[(3，4-二氯节基)(曱基)氮酰(nitroryl)l丙基}-2-(6-曱基苯并"恶唑-2-基硫基)乙酰胺，
1-(3，4-二氯千基)-1-曱基-1-[3-{[(6-甲基苯并嗜唑-2-基硫基)乙酰基-氨 基}丙基]二氮铮(diazanium)曱苯磺酸盐，
碘化N-(3，4-二氯千基)-N，N-二甲基-3-[(苯基乙酰基)氨基]丙铵， 以及其盐、溶剂化物和异构体以及其盐和溶剂化物。 本发明还涉及包含通式(I)的化合物或其异构体、盐或溶剂化物的药物 制剂，其优选地是口服制剂，但是也可以是可吸入、胃肠外和经皮制剂， 并且也形成了本发明的一个主题。上面的药物制剂可以是固体或液体制剂， 例如片剂、小丸、胶嚢、贴剂、溶液、混悬液或乳剂。在固体制剂中，首 选片剂和胶嚢。 上面的药物制剂可以通过应用常规赋形剂和技术操作来进行制备。
本发明通式(I)的化合物可用于治疗其中CCR3受体在疾病的发展中起 一定作用的病症。
本发明的化合物可有利地用于治疗诸如译喘、过敏性鼻炎、特应性皮 炎、湿渗、炎性肠病、溃疡性结肠炎、变应性结膜炎、多发性硬化、克罗 恩病、HIV-感染和与AIDS有关的疾病之类的疾病。
本发明的另一个主题是通式(I)的化合物用于治疗上述病症的应用。根 据疾病的性质和严重程度以及患者的性别和体重，建议的日剂量是 l-100mg活性组分。
本发明的另一个主题是其中Ar1、 X、 Y、 Z、 B、 Q、 R1、 R2、 Ar2、
A—和r具有上面所定义含义的通式(I)的化合物以及其盐、溶剂化物和异构
体的制备。
图1示范了通式(I)化合物的制备方法。
<formula>formula see original document page 13</formula>图1.
在本发明的方法中，
a.)对于其中Q表示直链或支链Cw烷基，Ar1、 X、 Y、 Z、 B、 R1、 R2、 A一和A-的含义如上面所定义并且r是1的通式(I)化合物的制备而言， 将其中Ar1、 X、 Y、 Z、 B、 R1、 R2、 Ar2的含义如上面所定义的通式(II) 的化合物
<formula>formula see original document page 13</formula> (II)
与适于引入基团Q的烷化剂进行反应，或者
b. )对于其中Q表示氨基，Ar1、 X、 Y、 Z、 B、 R1、 R2、 Ar2和A'的 含义如上面所定义并且r是l的通式(I)化合物的制备而言，将其中Ar、X、 Y、 Z、 B、 R1、 R2、 Ar2的含义如上面所定义的通式(II)的化合物与O-甲 苯磺酰基羟基胺进行反应，或者
c. )对于其中Q表示氧，Ar1、 X、 Y、 Z、 B、 R1、 R2、 A—的含义如上 面所定义并且r是0的化合物的制备而言，将其中Ar1、 X、 Y、 Z、 B、 R1、 W和A一的含义如上面所定义的通式(II)的化合物氧化，并且
如果需要的话，用已知的方法将由此获得的通式(I)化合物的取代基和 阴离子转化成式(I)中定义的另 一种取代基和阴离子和/或将所得的通式(1) 的化合物转化成其盐或溶剂化物，或者将其从其盐或溶剂化物形式中释放 出来和/或将其拆分成其光学活性异构体，或者将其光学活性异构体转化成 外消旋化合物并且如果需要的话，将其结构异构体彼此分离。
在本发明方法a.)的一个优选的实施方案中，烷化优选地是用烷基石克酸 酯、烷基磷酸酯或烷基囟化物，最优选地用烷基石典化物在惰性溶剂中来进 行的。就惰性溶剂而言，使用卣化烃如二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃，乙腈， 优选使用乙腈。该反应是在0。C-5(TC下进行的。
在方法b.)中，反应优选地是在惰性溶剂中在0。C-50。C的温度下进行 的。就惰性溶剂而言，使用卣化烃如二氯曱烷、氯仿、四氢呋喃、乙腈， 优选使用乙腈。
在方法c.)中，用已知的氧化剂如过氧化氬、高锰酸钾，优选间氯过苯 曱酸作为氧化剂。该反应优选地是在0。C-30。C的温度下进行的。
在匈牙利专利申请P0500877、 P0500878和P0500879以及其相应的 PCT申请PCT/HU2006/00077; PCT/HU2006/00078; PCT/HU2006/00079 中描述了通式(II)的新起始材料以及其制备方法。
图2示范了一种制备通式(II)化合物的可能方法
<formula>formula see original document page 15</formula>图2
在图2所示的方法中，将其中Ar1、 X、 Y、 定义的通式(V)的二胺
W和W的含义如上面所
Ari/XYY、NH
"1 一 (v)
与其中Ar2、 Z和B的含义如上面所定义且W表示卤素原子、羟基、
國OR"-基团(其中R"表示d-4-烷基)或-0-CO-Z-B-Ar2-基团(其中Z、 B和
Ar2的含义如上面所定义)的通式(XVII)的羧酸衍生物进行反应，
<formula>formula see original document page 15</formula>
并且如果需要的话，用已知的方法将由此获得的通式(II)化合物的取代
基转化成另一种取代基和/或将所得的通式(n)的化合物转化成其盐或溶剂 化物，或者将其从其盐或溶剂化物形式中释放出来和/或将其拆分成其光学 活性异构体，或者将其光学活性异构体转化成外消旋化合物并且如果需要 的话，将其结构异构体彼此分离。
在该方法的一个优选的实施方案中，通过使用成酰氯试剂(优选亚硫酰 氣)将其中w表示羟基的通式(xvn)的酸转化成酰氯，并在室温下或在回 流条件下，将所得的酰氯在惰性溶剂如二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯中与通 式(v)的胺在存在碱如三乙胺的情况下进行反应或者在吡咬、或在碱性水溶 液中进行反应。
在另一种优选的方法中，将其中w表示羟基的通式(xvn)的酸与通式 (v)的胺在存在活化剂的情况下进行反应。羧酸的活化可以通过在惰性溶剂 例如二氯曱烷、氯仿、四氢呋喃、乙腈中在存在结合酸的叔胺例如三乙胺、
N-甲基吗啉的情况下在-10。C至25'C的温度下使用例如新戊酰氯(M.T. Leplawy: Tetrahedron 1960， 11， 39)、氯甲酸乙酯(T. Wieland: J. Liebigs Ann. Chem. 1951， 572， 190)、氯曱酸异丁酯(J. R. Vaughan: JACS. 1951， 73， 3547 )或二环己基碳二亚胺(DCC) (R. Arshady: J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1， 1981， 529或D. Hudson: J. Org. Chem. 1988, 53， 617),经混合酸 酐中间体来进行。
该活化还可以通过J吏用羰基二咪唑(H.A. Staab: Lieb. Ann. Chem: 1957， 609， 75)在惰性溶剂中(优选地在二氯曱烷、氯仿、四氢呋喃、乙腈或 其混合物中)来进行或者可以在惰性溶剂中用苯并三唑-l-基-氧基-三吡咯 烷-l-基锈六氟磷酸盐(PyBOP)来进行(J. Corte: Tetrahedron Lett. 31， 1990, 205)。
如果通式(XVII)的化合物是一种羧酸酯(在这种情况中，在所述结构式 中，W表示OR"-基团)，则该反应可以用文献中已知的方法之一来进行， 优选地在100。C-150。C下，在不使用溶剂的情况下，在熔化的情况下进行。
如果通式(II)的化合物是一种外消旋化合物，则可以用手性制备柱色镨 或另 一种适于碱性化合物的拆分的已知方法来完成对映异构体的分离。
根据取代基R1、 R2、 X和Y的性质，可以用不同的方法来制备通式(V) 的二胺。
图3表示了属于通式(V)的这些化合物的制备，其中在所述结构式中， W表示氢原子，Y表示l，3-亚丙基、l-甲基-l，3-亚丙基、2-甲基-l，3-亚丙基 或1，4-亚丁基(116和R 彼此独立地表示氢原子或曱基，p是0或1),并且 Ar1和X的含义如上面所定义。
图3
(醛或酮)通过用通式(IX)的胺在醇性介质中在存在氰基硼氢化钠的情况下 进行还原胺化(Holzgrabe U.: Arch. Pharm. 1987， 320， 7， 647-654)、或通过 催化氢化(Elslager E. F.: J. Med. Chem. 1981， 24， 2，140-145)或用硼氢化钠 在含水的醇介质中(Simig Gy.: J. Chem. Soc Perkin Trans. 1. 1992， 13， 1613-16)进行还原胺化来制备。通式(IX)的化合物是通过商业途径获得的。 通式(X)的醛是通过商业途径获得的或者可以用文献中已知的方法来进行 制备。通式(VI)的化合物可以由通式(VIII)的化合物用通式(VII)的烯烃-氰 化物用文献中的类似方法(King M.等人JACS. 1946， 68， 1468，或Surrey等 人JACS. 1956， 78， 2573)来进行制备。通式(VII)的氰化物是通过商业途径 获得的。通式(V)的二胺可以用文献中的类似方法通过通式(VI)的氰化物在 醇或己烷溶液中在存在氨和阮内镍或铑催化剂的情况下进行催化氢化来制 备的，在给定情况中其是在加压下进行的(Shapiro等人JACS. 1959， 81， 3083-84，和Roufos L: J. Med. Chem. 1996， 39， 7， 1514)。
其中Y表示亚乙基、W表示氢原子并且A一和X的含义如上面所定义 的通式(V)的二胺可以如图4中所示的那样，
<formula>formula see original document page 17</formula>(V)
图5
通式(XI)的化合物是通过Mannich缩合由通式(VIII)的胺和低聚曱醛 以及丙酮来获得的。与文献中的方法相似，该反应可以在异丙醇中在回流 条件下进行(JACS. 1959, 81， 2214-18)。通式(XII)的^t是用文献中的类似方 法，由通式(XI)的化合物和羟基胺在异丙醇水溶液中来进行制备的(JACS. 1959， 81， 2214-18)。通式(V)的胺是用文献中的类似方法由通式(XII)的將通 过在存在阮内镍催化剂的情况下在乙醇氨溶液中进行催化氢化来制备的。
图6示范了其中J^和R"表示甲基并且Ar1、 X和Y的含义如上面所 定义的通式(V)化合物的制备。
18
用文献中的类似方法，由通式(VIII)的胺与2-溴乙基胺在热水溶液中来进 行制备(Arz. Forsch. 1975， 25， 1853-58)。
其中W表示氢原子、Y表示3-曱基亚丙基并且A—和X的含义如上 面所定义的通式(V)的二胺可以如图5所示的那样来进行制备。
<formula>formula see original document page 18</formula>
(XIV)的N，N'-二甲基氨基烷基化合物在惰性溶剂中，优选地在乙腈中在存 在结合酸的有机胺的情况下进行反应来获得。
其中X表示1，3-亚丙基且A一的含义如上面所定义的通式(X)的化合物 可以如图7中所示的那样，用与文献中方法(J. Org. Chem. 2002， 67, 25， 8758-8763)相似的方法，
<formula>formula see original document page 19</formula>(XV) (X)
图7
由适宜的通式(XV)的醇通过用氯铬酸吡啶镄在惰性溶剂(优选二氯曱烷)中 进行氧化来获得。
其中X表示3-甲基亚丙基的通式(X)的酮可以用图8中所示的方法，
<formula>formula see original document page 19</formula>
(XIII)
(X)
图8
用与文献中的方法(Powel等人JACS. 2004， 126， 25， 7788-89)相似的方法， 通过将商业获得的通式(xin)的卡基氯与戊烷-2 ，4-二酮 一起在醇溶液中在 回流条件下在存在碳酸钾的情况下进行加热来制备。
通式(xvn)的化合物是通过商业途径获得的或者可以用文献中已知的 方法来进行制备。
用一些实施例来对本发明更进一步的细节进行说明，但是本发明并不 仅限于这些实施例。
实施例i
硤化N-(3，4-二氯千基)-N，N-二甲基-3-(苯基乙酰基)氨基]丙铵
在通式(I)中，AP表示3,4-二氯苯基，X和Z表示亚曱基，Q表示甲 基，W表示甲基，Y表示1，3-亚丙基，W表示氢原子，B表示价键，Ar2 表示苯基，A-表示碘阴离子，r表示l。
a. ) N-(3，4-二氯千基)-N-甲基-3-[(苯基乙酰基)氨基丙烷
向0.24 g (1 mmol) N-(3,4-二氯千基)-N-(甲基)丙烷-l，3-二胺在2 ml氯 仿中的溶液中加入0.06 g (1.5 mmol)位于1 ml水中的氢氧化钠，在冷却的 情况下向其中滴加0.15 g (1 mmol)位于1 ml氯仿中的苯乙酰氯。将该反应 混合物在室温下搅拌3小时。蒸发掉溶剂，将含水残余物用3x20 ml乙酸 乙酯进行萃取，将有机相用疏酸钠进行干燥，过滤并对其进行蒸发，得到 0.36 g标题化合物。LC/MSMH+=365(C19H22C12N20 365.30)
b. )碘化N-(3，4-二氯卡基)-N,N-二曱基-3-[(苯基乙酰基)氨基l丙铵
将0.11 g (0.3 mmol) N-(3，4-二氯千基)-N-曱基-3-[(苯基乙酰基)氨基丙 烷溶解于2 ml乙腈中，在室温下向该溶液中滴加0.42 g (0.3 mmol)位于1 ml 乙腈中的碘甲烷并将该混合物搅拌14小时。蒸发掉溶剂，将残余物用乙醚 进行处理，将固体物质滤出并用乙醚对其进行洗涤，得到0.15g标题化合 物。Mp: 128-130。C。
实施例2
碘化3-(苯曱酰基氨基)-N-(3,4-二氯千基)-N,N-(二曱基)丙烷-l-铵
在通式(I)中，A—表示3，4-二氯苯基，X表示亚曱基，W表示甲基，Q
表示曱基，Y表示l，3-亚丙基，W表示氢原子，Z和B表示价键，A一表
示苯基，A—表示碘阴离子，r表示l。
按照实施例l.b.)中所述的操作并由N-(3，4-二氯节基)-N-甲基-3-(苯曱
酰基氨基)丙烷开始，得到0.13g标题化合物。Mp: 59-62°C。 实施例3
N-(3-[(3，4-二氯节基)(甲基)氮酰丙基}-2-(6-曱基苯并-恶唑-2-基硫基)乙酰胺 在通式(I)中，A一表示3，4-二氯苯基，X和Z表示亚甲基，W表示甲 基，Q表示O-， Y表示l,3-亚丙基，R2表示氢原子，B表示价键，A一表 示6-甲基苯并嚅唑-2-基，r表示0。
在水水冷却的情况下，向0.27 g (0.6 mmol) N-(3-[(3，4-二氯千基)(甲基) 氨基1丙基}-2-(6-甲基苯并嗜唑-2-基)硫基乙酰胺在6 ml 二氯甲烷中的溶液 中加入0.11 g (0.66 mmol)间-氯过苯甲酸并将该混合物搅拌1小时。用固体 碳酸钾对酸进行中和，将沉淀出来的盐滤出，对该二氯甲烷溶液进行蒸发。 将残余物用柱色谦进行纯化，用氯仿-甲醇9:1混合物作为洗脱剂。由此得 到100 mg晶体形式的标题化合物。Mp: 89-90°C。
实施例4
N-(3-[(3，4-二氯节基)(曱基)氮酰丙基卜2-(l-曱基-lH-苯并咪唑-:2-基硫基)乙 酰胺
在通式(I)中，A—表示3，4-二氯苯基，X和Y表示亚曱基，W表示曱 基，Q表示(T， Y表示l，3-亚丙基，R2表示氢原子，B表示硫原子，Ar2 表示l-甲基苯并咪唑-2-基，r表示0。
a.) N-(3-[(3，4-二氯苄基)(甲基)氨基l丙基)-2-(l-甲基-lH-苯并咪唑-2-基硫基) 乙酰胺
a/1.) (l-曱基-lH-笨并咪唑-!2-基硫基)乙酸甲酯
向1.16 g (11 mmol)巯基乙酸曱酯在14 ml氯仿中的溶液中加入1.2 g (12 mmol)三乙胺和1.33 g (8 mmol) 2-氯-l-甲基-lH-苯并咪唑在10 ml氯仿 中的溶液，将该反应混合物在60。C下加热20小时。将该氯仿溶液用水、 稀硫酸氢钾溶液和水洗涤，用硫酸钠进行干燥并对其进行蒸发。将残余物 用柱色谱进行纯化，用己烷-乙酸乙酯2:l混合物作为洗脱剂。将沉淀出来 的晶体滤出。由此得到0.52 g标题化合物。LC/MS [MH+-237(CuHuSN202 236.29)
a/2.) N-(3-(3,4-二氯千基)(甲基)氨基]丙基卜2-(l-甲基-lH-苯并咪唑-2-J^克 基)乙酰胺
将0.52 g (2.2 mmol) (l-曱基-lH-苯并咪唑-2-基疏基)乙酸曱酯和0.61 g (2.5 mmol) N-(3，4-二氯千基)-N-(曱基)丙烷-l，3-二胺的混合物在100。C下加 热搅拌1小时。将该熔化物用柱色镨进行纯化，用氯仿作为洗脱剂。由此 得到350 mg油状的标题化合物。LC/MS [MH+1-451 (C21H24Cl2N4OS 451.42)。
b.) N-(3-[(3，4-二氯节基)(曱基)氮酰丙基)-2-(l-曱基-lH-苯并咪唑-2-基硫基) 乙酰胺
在冰水冷却的情况下，向0,68 g (0.15 mmol) N-(3-(3,4-二氯节基)(甲基) 氨基丙基L2-(l-曱基-lH-苯并咪唑-2-基硫基)乙酰胺在1.5 ml 二氯甲烷中 的溶液中加入0.03 g (0.17 mmol)间-氯过苯曱酸并将该混合物搅拌1小时。 用固体碳酸钾对酸进行中和，将沉淀出来的盐滤出，对该二氯甲烷溶液进 行蒸发。将残余物用柱色谱进行纯化，用氯仿-曱醇4:1混合物作为洗脱剂。 由此得到53 mg晶体形式的标题化合物。Mp.: 106-110°。。
实施例5
1-(3，4-二氯节基)-1-曱基-1-[3-{[(6-甲基苯并"恶唑-2-基硫基)乙酰基氨基)丙 基l二氮错甲^t酸盐
在通式(I)中，A一表示3，4-二氯苯基，X和Y表示亚曱基，W表示甲 基，Q表示氨基，Y表示l，3-亚丙基，W表示氢原子，B表示好u原子，Ar2 表示6-曱基苯并-恶唑-2-基，A-表示甲M酸根阴离子，r表示l。
在冰-水冷却的情况下，向0.08 g (0.44 mmol) O-曱苯磺酰基羟基胺在 9ml 二氯甲烷中的溶液中滴加0.18 g (0.4 mmol) N-(3-[(3,4-二氯苄基)(甲基) 氨基]丙基卜2-(6-甲基苯并嚅唑-2-基硫基)乙酰胺在5 ml 二氯甲烷中的溶 液。将该反应混合物在冷却的情况下搅拌30分钟并在室温下搅拌2小时。
将沉淀滤出，用二氯曱烷进行洗涤。由此得到0.15 g标题化合物。Mp: 112画114。C。
实施例6
用已知的方法制备如下组成的片剂 活性组分 40 mg 乳糖 35 mg
Avicel: 21 mg
交联聚维酮3mg 硬脂酸镁 1 mg
实施例7
A.)人重组CCR3受体(hr-CCR3)结合试验
用在表达hCCR3受体的重组K562和RBL2H3细胞上进行的嗜酸粒 细胞趋化因子结合试验测定了通式(I)化合物的CCR3受体拮抗作用。为了 进行试验，使用用放射性碘1251 (2200 Ci/mmol)标记的嗜酸粒细胞趋化因 子。
在该试验中，将200000个细胞在存在0.11 nM 1251-嗜酸粒细胞趋化因 子的情况下进行培养，培养37。C下60分钟。试验緩沖液的组成 RPMI-1640培养基，pH=7，6 (GIBCO)，[包含80 mg CHAPS, 500 BSA (无蛋 白酶)，100 mg明胶，3 ml 25 mM位于100 ml RPMI中的HEPES。将试验 化合物溶解于DMSO中，将储备溶液用试验緩冲液稀释。最终的DMSO 浓度不高于1%。该试验是在深孔板中进行的。将这些细胞用试验化合物 培养15分钟，然后加入进行了标记的嗜酸粒细胞趋化因子，在存在200 nM 未标记的嗜酸粒细胞趋化因子的情况下测定非特异性结合。在培养l小时 后，加入500 pi包含0.5 M NaCl溶液的水冷的试验緩沖液。通过在板式离 心机(JUAN)中在3600 g下离心6分钟来终止该反应。通过将该板在倒置位 置旋转来倾倒出上清液。用薄纸吸去剩余的小滴。为了溶解，向该小丸中
加入200^1 0.5 M NaOH溶液。使其在室温下溶解1小时后，在y计数器 (1470 Wizard, Wallac)上对150fU溶解的溶液中的放射性进行计数。
该溶液的放射性与细胞的受体数、结合的1251-嗜酸粒细胞趋化因子的 量和所试验拮抗剂的活性直接成比例。
以总结合和非特异性结合之间的差的形式来计算特异性结合。由特异 性结合和存在拮抗剂分子时测得的结合来计算化合物的活性。
用ICs。值来表征化合物的活性。
B.) hCCR3-RBL和hCCR3 K562细胞中Ca"动员的研究
将HCCR3-K562和hCCR3-RBL2H3细胞以40000个细胞/孔(微量培 养板的一个孔中的细胞数目)的密度培养24小时。用钙指示剂染料(Calcium Plus试验试剂盒，分子装置)对这些细胞进行洗涤和负载。在进行负栽的同 时，将这些细胞在存在染料的情况下培养60分钟。所述染料是荧光钙指示 剂，其灵敏地指示细胞内钙浓度。细胞内钙浓度与样品的荧光信号直接成 比例。该实验是在BMG NOVOSTAR装置中在激发波长和发射波下进行 的。
在该实验中所用的选择性激动剂是
嗜酸粒细胞趋化因子
嗜酸粒细胞趋化因子-2
嗜酸粒细胞趋化因子-3
RANTES
在加入所述选择性激动剂后，这些细胞中的细胞内钾浓度显著增加， 可以在荧光信号的帮助下对其进行监测。'在该实验中，所用激动剂的浓度 是与可达到的最大信号相比，引起75 %钩信号的浓度。
在激动剂处理前15分钟加入拮抗剂
在该过程进行期间，对荧光信号的变化监测30秒。
将加入激动剂后最大信号的强度与加入相同激动剂但是不存在抑制剂 情况下获得的钙信号进行比较。
用ICso值来表征化合物的活性。
根据试验A和B，发现通式(I)的化合物有生物学活性。最有效的化合 物是如权利要求2所述的通式(I)的化合物，其形成了如权利要求1所述通 式(I)化合物的一个范围较窄的组。其ICso值范围为0.5nM至500nM。在 这些化合物中，尤其有利的分子具有0.5 nM至15 nM的ICso值。
权利要求
1.通式(I)的化合物以及其盐、溶剂化物和异构体以及其盐和溶剂化物，其中Ar1表示任选地被一个或多个卤素原子取代的苯基；X和Y独立地表示任选地被一个或多个相同或不同的直链或支链C1-4烷基取代的直链或支链C1-4亚烷基；Z表示价键或任选地被一个或多个相同或不同的直链或支链C1-4烷基取代的直链C1-4亚烷基或直链C2-4亚链烯基；B表示价键、-O-、-S-、-SO-、SO2-，或者与Z一起表示任选地被一个或多个相同或不同的直链或支链C1-4烷基取代的直链C2-4亚烷基或C2-4亚链烯基；Q表示直链或支链C1-4烷基、氨基或氧原子；R1和R2独立地表示氢原子或直链或支链C1-4烷基；Ar2表示任选地被卤素原子取代的苯基；包含一、二或三个氮原子、或两个氮原子和一个氧原子、或一个氮原子和一个氧原子、或一个氮原子和一个硫原子的5-或6-元杂环，其任选地被一个或多个相同或不同的选自直链或支链C1-4烷基、卤素原子、任选地被一个或多个直链或支链C1-4烷基、卤素原子或苄氧基取代的苯基、氧代基团的取代基所取代；这些5-或6-元杂环的苯并类似物，其中其苯环可任选地进一步被一个或多个相同或不同的选自卤素原子、直链或支链C1-4烷基、直链或支链C1-4烷氧基、羟基、三氟甲基、硝基、C1-2亚烷二氧基、氨基、被一个或两个相同或不同的直链或支链C1-4烷基或苄基取代的氨基、或磺酰基的取代基所取代；或者与包含一个或两个氮原子的6-元杂芳环稠合的包含一、二或三个氮原子、或一个氮原子和一个氧原子、或一个氮原子和一个硫原子的5-元杂环，其任选地被一个或多个相同或不同的选自直链或支链C1-4烷基、直链或支链C1-4烷氧基、羟基、氨基、被一个或两个相同或不同的直链或支链C1-4烷基或苄基取代的氨基的取代基所取代；A-表示一种阴离子；r表示0或1。
2.如权利要求1所述的通式(I)的化合物以及其盐、溶剂化物和异构体以及 其盐和溶剂化物，其中Ar1表示任选地被一个或多个面素原子取代的苯基；X和Y独立地表示任选地被一个或多个相同或不同的直链或支链d—4烷基取代的直链d4亚烷基； Z 表示价键或任选地被一个或多个相同或不同的直链或支链Cw烷基取代的直链Cw亚烷基； B 表示价键、-O-、 -S-、 -SO-、 S02-，或者与Z —起表示任选地被一个或多个相同或不同的直链或支链Cw烷基取代的直链C2.4亚烷基； Q 表示直链或支链Cw烷基、氨基或氧原子； W和W独立地表示氢原子或直链或支链Cw烷基； Ar2 表示苯基；任选地被一个或多个直链或支链d—4烷基取代的包含一、二或三个 氮原子、或一个氮原子和一个氧原子、或一个氮原子和一个^^原子 的5-或6-元杂环；这些5-或6-元杂环的苯并类似物，其中其苯环可任选地进一步,皮一 个或多个离素原子、直链或支链cl4坑基所取代；或者 任选地被一个或多个氨基、被一个或两个相同或不同的直链或支链 Cl4烷基取代的氨基取代的与包含一个或两个氮原子的6-元杂芳环稠合的包含两个或三个氮原子、或一个氮原子和一个氧原子、或一个氮原子和一个硫原子的5-元杂环； A— 表示一种阴离子； r 表示0或1。
3. 如权利要求1-2所述的化合物，选自N-P-[(3，4-二氯爷基)(甲基)氮酰I丙基)-2-(6-甲基苯并嚅唑-2-基硫基)乙 酰胺，1-(3,4-二氯卡基)-1-曱基-1-[3-{[(6-曱基苯并"恶唑-2-基硫基)乙酰基1-氨基}丙基1二氮错甲苯磺酸盐，碘化N-(3，4-二氯千基)-N，N-二甲基-3-[(苯基乙酰基)氨基l丙铵， 以及其盐、溶剂化物和异构体以及其盐和溶剂化物。
4. 制备其中Ar1、 X、 Y、 Z、 B、 Q、 R1、 R2、 Ar2、 A-和r具有权利要求 1所定义的含义的通式(I)化合物以及其盐、溶剂化物或异构体的方法，其 特征在于，a.)对于其中Q表示直链或支链Cw烷基，Ar1、 X、 Y、 Z、 B、 R1、 R2、 A一和A-具有上面所定义的含义并且r是1的通式(I)化合物的制备而 言，将其中Ar1、 X、 Y、 Z、 B、 R1、 R2和Ar2具有上面所定义的含义的 通式(II)的化合物 与适于引入基团Q的烷化剂进行反应，或者b. )对于其中Q表示氨基，Ar1、 X、 Y、 Z、 B、 R1、 R2、 Ar2和A'具 有上面所定义的含义并且r是l的通式(I)化合物的制备而言，将其中Ar1、 X、 Y、 Z、 B、 R1、 W和A一具有上面所定义的含义的通式(n)的化合物与 O-甲苯磺酰基羟基胺进行反应，或者c. )对于其中Q表示氧原子，Ar1、 X、 Y、 Z、 B、 R1、 112和A一具有 上面所定义的含义并且r是O的通式(I)化合物的制备而言，将其中Ar1 、X、 Y、 Z、 B、 R1、 W和Ai^具有上面所定义的含义的通式(II)的化合物氧化， 并且如果需要的话，用已知的方法将由此获得的通式(I)化合物的取代基转 化成式(I)中定义的另一种取代基和/或将所得的通式(I)的化合物转化成其 盐或溶剂化物，或者将其从其盐或溶剂化物形式中释放出来和/或将其拆分 成其光学活性异构体，或者将其光学活性异构体转化成外消旋化合物并且如果需要的话，将其结构异构体彼此分离。
5. 如权利要求4a.)所述的方法，其特征在于就适于引入基团Q的烷化剂而 言，使用烷基硫酸酯、烷基磷酸酯、烷基卣化物，优选使用烷基碘化物。
6. 如权利要求4b.)所述的方法，其特征在于就氧化剂而言，使用过氧化氢、 高锰酸钾，优选使用间-氯过苯甲酸。
7. 如权利要求4a.)、 b.)或c.)所述的方法，其特征在于该反应是在惰性溶剂 中进行的。
8. 药物制剂，其特征在于其包含一种或多种其中Ar1、 X、 Y、 Z、 B、 Q、 R1、 R2、 Ar2、 A-和r具有权利要求1所定义的含义的通式(I)的化合物和/ 或其盐、溶剂化物或异构体以及其盐或溶剂化物和一种或多种制药工业中 所用的赋形剂。
9. 如权利要求8所述的药物制剂，其特征在于其包含一种或多种如权利要 求3所述的化合物作为活性组分。
10. 其中Ar1、 X、 Y、 Z、 B、 Q、 R1、 R2、 Ar2、 A'和r具有权利要求1 所定义的含义的通式(I)的化合物以及其盐、溶剂化物和异构体以及其盐和 溶剂化物用于制备治疗其中CCR3受体在该疾病的发展中起一定作用的病 症的药物的应用。
11. 如权利要求10所述的其中Ar1、 X、 Y、 Z、 B、 Q、 R1、 R2、 Ar2、 A-和r具有权利要求1所定义的含义的通式(I)的化合物以及其盐、溶剂化物 和异构体以及其盐和溶剂化物的应用，用于制备治疗诸如哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎、湿渗、炎性肠病、溃疡性结肠炎、变应性结膜炎、多发 性硬化、克罗恩病、HIV-感染和与AIDS有关的疾病之类的病症的药物。
12. —种治疗或预防受体CCR3在其中起作用的疾病在患者中发展的方 法，其包括给所述患者施用药物有效量的如权利要求1所述的化合物。
13. 如权利要求12所述的方法，其中所述疾病是孝喘、过敏性鼻炎、特应 性皮炎、湿渗、炎性肠病、溃疡性结肠炎、变应性结膜炎、多发性硬化、 克罗恩病、HIV-感染和与AIDS有关的疾病。
全文摘要
本发明涉及通式(I)的CCR3受体配体(其有利地是拮抗剂)以及其盐、溶剂化物和异构体、包含其的药物组合物、通式(I)的化合物以及其盐、溶剂化物和异构体的应用以及通式(I)的化合物以及其盐、溶剂化物和异构体的制备。
文档编号C07D263/58GK101360705SQ200680034896
公开日2009年2月4日 申请日期2006年9月21日 优先权日2005年9月23日
发明者A·帕普内贝尔, E·米库什, E·舒尚, J·瓦尔格内塞赖迪, K·乌尔班-绍宝, L·T·纳吉, M·瓦尔高, M·科瓦奇, P·奥劳尼, S·巴托里, T·绍博, V·鲍尔塔内博多尔, Z·卡布依 申请人:塞诺菲-安万特股份有限公司