专利名称：蛋白质浓缩/纯化装置的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及化学仪器，具体地说是一种利用等电凝胶桥隔离法浓縮/纯 化蛋白质的装置。
技术背景
目前蛋白质的浓縮/纯化方法较多，主要有盐析法、等电点沉淀法、低温有 机溶剂沉淀法、透析和超滤、凝胶过滤法、离子交换层析法等，每种方法都有 自己的设备，这些设备有的操作过程较复杂，有的分离纯化时间较长，有的纯 化成本较高。 实用新型内容
本实用新型的目的是为克服现有技术的不足，而提供一种蛋白质浓縮/纯化 装置，该装置结构简单，易操作，分离过程快、纯化成本低。
本实用新型主要由直流电源、待浓縮/纯化蛋白质原池、正极池、负极池及 凝胶玻璃桥管组成。正极池、负极池与直流电源的正、负极接通。正极池、负 极池分别由凝胶玻璃桥管与待浓縮/纯化蛋白质溶液原池连通；原池在正极池、 负极池之上之下均可。
所述凝胶玻璃桥管，用1%琼脂将其下端封住，冷凝30分钟，灌l 129b的隔 离胶，灌到4 15cm，用水封住，冷凝30分钟将水倒出，吸干，冷凝30分钟后 备用。使用时，玻璃桥管要浸在正、负极池及原池中。
所述的正极池、负极池倒入缓冲液5ml，原池加入缓冲液100 150ml，再把 待分离纯化的蛋白质溶液加入原池。
' 所述的池中缓冲液为PH值2~9:由36. 6gTris， 48ml lmo1/1的HC1或先加 水至80ml，用浓HC1调PH，再定容至100ml制成。
所述的隔离胶由4.9ml蒸馏水，KOml309&的丙烯酰胺，3.8ml1.5mo1/1 Tris-HCl， 150" 10%的过硫酸铵，6ul TEMED配制而成。
所述的直流电压为50~300V。
蛋白质纯化仪安装好后，在4'C环境中，加上电泳电压，此时待分离的蛋白 质及氨基酸分别按其电荷的性质从原池通过凝胶桥管进入正极池及负极池，而 等电点等于原池PH的蛋白质则留在原池。通过调节原池的PH值，使不同等电
点的蛋白质在电场作用下进入正、负极池，直至纯化为止。
分离纯化的标准蛋白质纯度以SDS-丙烯酰胺凝胶电泳图谱出现单一区带 为标准氨基酸纯度以氨基酸分析仪出现单峰为标准。
本实用新型的优点在于浓縮纯化方法新颖，操作容易，分离设备简单， 成本低，分离纯化时间縮短、效率高。
图1为本实用新型结构示意图。
1为直流电池、2为正极池、3为负极池、4为凝胶玻璃桥管、5为待分离纯 化物质原池。
具体实施方式
本实用新型由直流电源l、待浓縮/纯化物质原池5、正极池2、负极池3及 凝胶玻璃桥管4组成，正极池2、负极池3与直流电源1的正、负极接通，正极 池2、负极池3分别由凝胶玻璃桥管4与待浓縮/纯化溶液原池5连通。
其中直流电源电压为100V，原池5为1000厘米3，正极池2、负极池3均 为l厘米'；凝胶玻璃桥管，用1%琼脂将其下端封住，冷凝30分钟，灌1~12% 的隔离胶，灌到4 15cm，用水封住，冷凝30分钟将水倒出，吸干，冷凝30分 钟后备用。使用时，玻璃桥管要浸在正、负极池及原池中；正极池、负极池倒 入缓冲液5ml，原池加入缓冲液100 150ml，再把待分离纯化的蛋白质溶液加入 原池；池中缓冲液(PH值2 9):由36.6gTris， 48ml lmo1/1的HC1或先加水 至80ml,用浓HC1调PH，再定容至100ml制成；隔离胶由4.9ml蒸馏水， l"^.0ml30免的丙烯酰胺，3.8mll.5mo1/1 Tris-HC1, 150" 1096的过硫酸铵,6 iil TEMED配制而成。
权利要求1.蛋白质浓缩/纯化装置，其特征是它主要由直流电源(1)、正极池(2)、负极池(3)、等电凝胶桥管(4)、待分离纯化的蛋白质原池(5)组成，直流电源(1)的正、负极分别与正极池(2)、负极池(3)连接，凝胶桥管(4)分别连通正极池(2)与原池(5)、负极池(3)与原池(5)、凝胶桥管(4)浸渍在正极池(2)、负极池(3)、原池(5)中。
2. 根据权利要求1所述的蛋白质浓縮/纯化装置，其特征是所述的待分 离纯化的蛋白质原池(5)、正极池(2)、负极池(3)，其内部都盛装缓冲液。
专利摘要本实用新型提供了一种蛋白质浓缩/纯化装置，它主要由直流电源、待分离纯化的蛋白质原池、正极池、负极池和等电凝胶桥管组成。直流电源的正负极分别与正极池、负极池连接，凝胶桥管分别连通原池与正极池、原池与负极池。这种装置利用氨基酸、蛋白质等两性离子在不同pH溶液中，其带电的性质不同，在直流电场作用下，凡是等电点不等于原池溶液pH值的氨基酸及蛋白质分别由原池通过凝胶管的凝胶分别移动到正极池或负极池，而其等电点等于原池溶液pH而不带电荷的蛋白质、氨基酸留在原池而进行分离，分离设备简单，易操作掌握，成本低，分离时间短，效率高。
文档编号C07K1/00GK201068436SQ20072007991
公开日2008年6月4日 申请日期2007年6月8日 优先权日2007年6月8日
发明者仇小强, 施文祥, 李胜联, 陆明深, 陈森洲 申请人:桂林医学院