作为lxr调节剂的n-苄基,n′-芳基羰基哌嗪衍生物的制作方法

专利名称：作为lxr调节剂的n-苄基,n′-芳基羰基哌嗪衍生物的制作方法
作为LXR调节剂的N-苄基，N'-芳基羰基脈嗪衍生物 本发明涉及N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生物，涉及包含所述衍生物的药物组合物，以及涉及这些N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生物在动脉粥样硬化治疗中的用途。肝脏X受体(LXR)是在结合于诱导靶基因转录的天然存在的羟固醇(oxysterols) 时活化的一个核受体家族。已经鉴定了 LXR的两个亚型(α和β)，在它们的配体-结合 结构域和DNA-结合结构域中都表现出77%的同源性。两种亚型在人和啮齿类动物之间都 是高度保守的，然而，它们的组织表达模式显著不同。LXRa的表达只限于涉及脂类代谢的 组织，在肝脏中具有最高的表达，在肾脏、脾、小肠和脂肪组织中也有显著的水平。LXRii分 布非常广泛，并且实质上已经在所检查的所有组织中都有发现，包括肝脏和脑。LXRa和 LXRβ 都在巨噬细胞中表达。参见 Costet 等人，J. Biol. Chem 275:28240-28245(2000)。LXR受体的作用尚未完全了解，然而，公认的是LXR作为肝脏和外周组织中的 脂类代谢的主要调节剂，以及作为ATP-结合盒转运蛋白Al(ABCAl)基因的关键诱导剂 (Venkateswaran 等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 97 12097-12102 (2000))。在人类中， ABCAl基因的突变导致高度致动脉粥样化的脂蛋白特征(Singaraja等人，Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 23 1322-1332 (2003))，其在最严重的情况中引起丹吉尔病和相关的 早期动脉粥样硬化，(参见Bodzioch等人，Nat. Genet. 22 :347_351 (1999)；和Rust等 人，Nat. Genet. 22 :352_355 (1999))。这种罕见的遗传病症的特征在于高密度脂蛋白 (HDL)的水平极低、胆固醇酯类的巨噬细胞蓄积、以及动脉粥样硬化疾病的危险显著增加 (Brooks-Wilson 等人，Nat. Genet. 22 :336_345 (1999))。已有证据证明，在人巨噬细胞和小肠的肠细胞中的ABCAl的向上调节是由LXR活 化介导的(Costet等人，同前)。此外，LXR激动剂也已经表明促进胆固醇外流。参见Claudel 等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98 :2610_2615 (2001)。因此，LXR 受体在巨噬细胞中的胆 固醇体内平衡中起到关键作用，并且在晚期动脉粥样硬化斑块的局部环境中的抑制可能是 该疾病的病理学的关键特征。在最近几年来，LXR激动剂治疗动脉粥样硬化的潜在应用已经有越来越多的记录。 参见，例如 Levin 等人，Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 25 135-142 (2005)。动脉粥样硬 化是动脉的一种疾病，其存在多年而不引起症状。然而，晚期的动脉粥样硬化斑块可以变得 脆弱而破裂，促进急性血栓形成和临床事件诸如心肌梗塞(MI)和中风。涉及动脉粥样硬化 斑块破裂以及随后的临床事件的主要细胞型是巨噬细胞。预期LXR激动剂在动脉粥样硬化中实现效力的主要机制是通过减少动脉的胆固 醇负担(通过ABCAl的向上调节)而发生的，以便产生更稳定的病变并由此减少临床事件。 另外，LXR激动剂可以增加循环的HDL水平，这是由于ABCAl具有由肝脏生成新生HDL的作 用。由于对炎症的抑制(允8印11等人，妝{^6(1.9:213-219(2003))和对葡萄糖代谢作用的 影响，LXR激动剂可能有另外的抗动脉粥样硬化作用。参见Latiffe等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 100 5419-24(2003)。仍需要有效作为LXR调节剂的化合物。为此，本发明提供通式I的N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生物
式I或其药学可接受的盐，其中η为 1 或2;A为任选地包含1或2个氮原子的6元芳香族环；X 为 NR8、0 或键；R1为H，(C1^8)烷基[任选地被卤素、(C1^4)烷氧基、沁_4)烷氧基羰基、(C3_8)环烷 基、OH、CF3、氰基或NR9Rltl取代]，(C2_6)烯基，(C2_6)炔基，(C3_8)环烷基，苯基[任选地被 (CL4)烷基、(CV4)烷氧基、卤素、CN、CF3> OCF3或NO2取代]，包含1或2个选自0和S的杂 原子的5或6元饱和杂环基团，或包含1-3个选自0、S和N的杂原子的5或6元杂芳基基 团[任选地被(Ch)烷基、(CH)烷氧基、卤素或CF3取代]；或队为被苯基[任选地被(Ch)烷基、(CH)烷氧基、卤素取代；或在相邻的位置上被 2个取代基取代，形成0-(CH2)n-O,其中η为1或2]取代的沁_3)烷基，包含1_3个选自0、 S和N的杂原子的5或6元杂芳基基团[任选地被(Cu)烷基、(C1^3)烷氧基或卤素取代]， 或包含1或2个选自0、S和N的杂原子的5或6元饱和杂环基团[任选地被(C1J烷基、 (CV4)烷氧基、氧代、OH或卤素取代]；或在X为NR8时，R1可与R8以及它们所连接的N合起来，形成任选地包含另一个选 自0和S的杂原子的4-8元环[并且该环任选地被OH、(CV4)烷基、(C1^4)烷氧基或卤素取 代]；R2任选地表示1-3个取代基，所述取代基独立地选自(CV4)烷基、沁_4)烷氧基、 CF3和卤素；R3任选地表示1-4个取代基，所述取代基独立地选自(CV4)烷基和被OH或1个或 多个卤素取代的(Cy)烷基；R4为H或(U烷基；R5任选地表示1-3个取代基，所述取代基独立地选自(CV3)烷基、(Q_3)烷氧基和 卤素；R6为H，(C1^6)烷基[任选地被卤素、CF3或CN取代]，(C3_6)环烷基[任选地包含选 自0和S的杂原子且任选地被CN或苯基取代]，(C3_6)环烷基(Ch)烷基，或5或6元(杂) 芳基基团，任选地通过亚甲基基团连接，并且任选地被(CV4)烷基、(CV4)烷氧基、沁_4)烷 基磺酰基、卤素、CN、CF3、CF3O或NO2取代]；R7 为 H 或(Ch)烷基；R8在存在时为H或(U烷基；或R8与R1以及它们所连接的N合起来形成任选地包含另一个选自0和S的杂原子的4-8元环[并且该环任选地被OH、(C1^3)烷基、(Ch)烷氧基或卤素取代]；R9和Rltl独立地选自H、(CV3)烷基或(CV3)烷基羰基；或R9和Rltl与它们所连接的N合起来形成任选地包含另一个选自0和S的杂原子的 4-8元环。术语(C")烷基，如式I的定义中所使用的，是指具有1-8个碳原子的支链或非支链的烷基基团，如辛基、己基、戊基、异戊基、丁基、异丁基、叔丁基、丙基、异丙基、乙基和甲基。术语(Cd烷基，如式I的定义中所使用的，是指具有1-4个碳原子的支链或非支 链的烷基基团，如丁基、异丁基、叔丁基、丙基、异丙基、乙基和甲基。同样地，在式I的定义中使用的术语(CV3)烷基是指具有1-3个碳原子的支链或 非支链的烷基基团，如丙基、异丙基、乙基和甲基。术语(C2_6)烯基是指具有2-6个碳原子的支链或非支链的烯基基团，诸如乙烯基、 丙烯-2-基、2-甲基-丙烯基、戊烯-4-基等。术语(C2_6)炔基是指具有2-6个碳原子的支链或非支链的炔基基团，诸如乙炔基、 丙炔-2-基、戊炔-4-基等。术语(C3_8)环烷基是指具有3-8个碳原子的环烷基基团，如环庚基、环己基、环戊 基、环丁基和环丙基。在式I的R6的定义中，(C3_8)环烷基可以包含选自0和S的杂原子， 以形成饱和的杂芳环，诸如四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基和四氢噻喃基。术语包含1-3个选自0、S和N的杂原子的5或6元杂芳基基团例如为噁唑基、异 噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、呋喃基、批咯基、呋咱基、批唑基、吡嗪基、批啶基、嘧啶基、咪 唑基、噻唑基、噻二唑基、噻吩基等。术语包含1或2个选自0和S的杂原子的5-6元饱和杂环基团例如为四氢呋喃基、 四氢噻吩基、四氢吡喃基和四氢噻喃基。术语包含1或2个选自0、S和N的杂原子的5-6元饱和杂环基团例如为四氢呋喃 基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、吗啉-1-基、硫代吗啉-1-基、哌啶基、吡咯烷基、 咪唑烷基等。术语卤素是指F、Cl、Br或I。优选其中X为NH且η为1的式的N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生物。进一步优选的是其中另外A为苯基的式I的N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生物。更优选的是其中R1为沁_8)烷基[任选地被(C3_8)环烷基取代]、(C2_6)烯基、(C3_8) 环烷基或苯基[任选地被卤素取代]的式I的化合物。还优选的是其中R3为不存在或表示甲基、以及其中R5为不存在或表示卤素的式I 的N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生物。特别优选的是其中另外R6为任选地被CF3取代的(CV6)烷基，以及R7为H的式I 的N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生物。具体的本发明的N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生物为-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺2，2，2_三氟乙酸盐；-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐；-N-叔丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-环丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基) 甲基)苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-异丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-异戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-(环丁基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基) 甲 基)苯甲酰胺；-N-叔丁基-3- ((4- (4- (3_ 丁基脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯甲 酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-(2-环丙基乙基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基) 甲基)苯甲酰胺；-3-((4-(4-(3_新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_(1，1，1-三 氟-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酰胺；-3-((4-(4-(3-丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)-Ν_(1，1，1_三氟_2_甲 基丙烷-2-基)苯甲酰胺；-3-((4-(4-(3_异丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_(1，1，1-三 氟-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酰胺；-3-((4-(3-氟-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_(1，1，1_三 氟-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酰胺；-3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_(1， 1，1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酰胺盐酸盐；-N-叔丁基-3-((4-(3-氯-4-(3-环丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(3-氯-4-(3-(环丙基甲基)脲基)苯甲酰基)哌嗪基) 甲基)苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(3-氯-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(3-氯-4-(3-异丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺；-1-(3-(叔丁基氨基甲酰基)苄基)-4-(3-氯-4-(3-(环丁基甲基)脲基)苯甲 酰基)哌嗪ι-氧化物；-N-叔丁基-3- ((4- (4- (3_ 丁基脲基)_3_氯苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯甲 酰胺；
-N-叔丁基-3-((4-(3-氯-4-(3-异戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(2，3-二氟-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(2，3-二氟-4-(3-异戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-丁基脲基)-2，3-二氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基) 苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(2，3-二氟-4-(3-异丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺；-N-叔丁基_3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_2，3_ 二氟苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-环丁基脲基)-2，3-二氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲 基)苯甲酰胺盐酸盐；-N-叔丁基-3-((4-(3_氯_4-(3-(环丙基甲基)脲基)_2_氟苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺；-N-叔丁基-3- ((4- (3-氯_2_氟_4_ (3_异丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基) 甲基)苯甲酰胺；-N-叔丁基-3- ((4- (4- (3_环丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_2_氟苯 甲酰胺；-N-叔丁基-2-氟-3-((4-(4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺；-N-环丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺；和- (R) -N-仲丁基-3- ((4- (3_氟_4_ (3_新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺；或其药学可接受的盐。本发明的N-苄基，N' _芳基羰基哌嗪衍生物可以使用有机合成领域中一般的合 成方法来制备，例如使用方案1中所示的合成路线来制备。本领域技术人员知道，可以改变添加式2-8的关键构件的顺序，但是仍得到期望 的式1的产物。根据一个这种途径，将式2的(高)哌嗪中间体(其中Y表示氨基保护基， 诸如例如叔丁氧羰基({10()，且1 3具有前述定义的含义)在溶剂(例如二氯甲烷或乙腈) 中在室温或高温下在使用有机碱例如三乙胺或无机碱例如碳酸钾的情况下用式3的苯甲 酰胺衍生物(其中R4、R5、R6和R7具有前述定义的含义，且其中L表示离去基团，诸如氯或 溴)烷基化，得到中间体-式5的N-苄基(高)哌嗪 衍生物。方案1 作为选择，式5的中间体可以得自式2的(高)哌嗪中间体与式4的中间体苯甲 酰胺衍生物(其中R4、R5、R6和R7具有前述定义的含义)之间的还原胺化反应，所述反应可 以在溶剂例如二氯甲烷中使用还原剂例如三乙酰氧基硼氢化钠来进行。式5的Boc-保护的中间体的脱保护(例如使用三氟乙酸和二氯甲烷)提供式6 的中间体哌嗪衍生物，其随后在溶剂例如二氯甲烷中使用偶联剂例如N-(3-二甲氨基丙 基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐或1-丙烷膦酸环酐(1-propanephosphonic acid cyclic anhydride)与式7的苯甲酸衍生物(其中R2具有前述定义的含义)偶联，得到式8的N-苄 基，N'-苯甲酰基哌嗪中间体。式I的本发明化合物(其中X为NR8,且R1和R8具有前述定义的含义)可以通过 使式8的中间体与4-硝基苯基氯甲酸酯或与(双(三氯甲基)碳酸酯(三光气)在溶剂 例如二氯甲烷中在室温或高温反应，随后在碱例如三乙胺的存在下添加期望的式R1R8NH的 胺(其中R1和R8具有前述定义的含义)从式8的中间体制备。其中X为NH的本发明化合物也可以如下制备使式8的N-苄基，N'-苯甲酰基 哌嗪中间体与式R1-NCO的异氰酸酯(其中R1具有前述定义的含义)在溶剂例如二氯甲烷 中反应。其中X为0的式I的化合物可以如下制备使式8的中间体与4-硝基苯基氯甲酸 酯或三光气在室温或高温在溶剂例如二氯甲烷中反应，随后加入过量的式R1-OH的醇(其 中队具有前述定义的含义)。其中X为键的本发明化合物可以如下制备使式8的N-苄基，N'-苯甲酰基哌嗪 中间体在溶剂例如二氯甲烷中在有机碱例如三乙胺的存在下在室温或高温与式R1CO2Cl的 酰基氯反应(其中R1具有前述的定义)，或者可选择地，通过使用偶联试剂例如N- (3- 二甲氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐或1-丙烷膦酸环酐和碱例如三乙胺，使式8的N-苄 基，N'-苯甲酰基哌嗪中间体与式R1COOH的酸衍生物(其中R1具有前述的定义)在溶剂 例如二氯甲烷中反应。式2的中间体哌嗪衍生物、式3和式4的苯甲酰胺衍生物、以及式7的4_氨基苯 甲酸衍生物是可以使用本领域中公知的方法从市售的中间体制备的化合物。如上述使用的术语N-保护基是指通常用于保护氨基的基团，如烯丙氧羰基 (Alloc)基团、叔丁氧羰基(Boc)基团、苄氧羰基(Z)基团或9-芴甲氧基羰基(Fmoc)基 团。这些和其它保护基的去除可以以不同的方法进行，取决于那些保护基的性质。关 于保护基及其去除方法的概述在T. W. Greene和P. G. M. Wuts，”Protective Groups in OrganicSynthesis”，第二版，1991，John Wiley & Sons，Inc 中给出。式I的N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生物及其盐可以包含至少一个手性中心，并 由此作为立体异构体存在，包括对映体和非对映体。本发明在其范围内包括上述的立体异 构体以及式I的化合物及其盐的基本上不含(即包含少于5%、优选少于2%、特别是少于 1 %的)另一种对映体的每种单独的R和S对映体，以及这种对映异构体以任何比例的混合 物，包括含基本上等量的两种对映体的外消旋混合物。用于获得纯的立体异构体的不对称合成方法是本领域中公知的，例如手性诱 导合成或从手性中间体开始、对映体选择性酶促转化、在手性介质上使用色谱法分离立 体异构体或对映体。这种方法描述在例如Chirality in Industry (由Α. N. Collins， G. N. Sheldrake 和 J. Crosby 编著，1992，John Wiley)中。药学可接受的盐可以通过用矿物酸或有机酸处理式I的化合物的游离碱来得到， 所述矿物酸诸如盐酸、氢溴酸、磷酸和硫酸，所述有机酸诸如例如抗坏血酸、柠檬酸、酒石 酸、乳酸、马来酸、丙二酸、富马酸、羟基乙酸、琥珀酸、丙酸、乙酸、甲磺酸等。本发明的化合物可以作为未溶剂化的形式以及作为与药学可接受的溶剂例如水、 乙醇等的溶剂化形式存在。一般说来，对于本发明的目的来说，认为溶剂化的形式与非溶剂 化形式是等效的。本发明另外提供药物组合物，包括与药学可接受的助剂、以及任选的其它治疗剂 混合的通式I的N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生物或其药学可接受的盐。术语“可接受的” 是指与组合物的其它成分相容并且不对其接受者有害。组合物包括例如适合于经口、舌下、 皮下、静脉内、硬膜外、鞘内、肌肉内、透皮、经肺、局部、或直肠等方式给药的那些，全部都是 以单位剂型给药。对于口服给药，活性成分可以作为离散的单元存在，诸如片剂、胶囊、粉剂、颗粒 齐U、溶液、悬浮液等。对于非肠道给药，本发明的药物组合物可以作为单位剂量或多剂量容器存在，例 如预定量的注射用液体，例如在密封的小瓶和安瓿中，并且可以储存在冷冻干燥(冻干)条 件下，只需要在使用前添加无菌的液体载体例如水。通过与这种药学 可接受的助剂混合，例如如标准参考文献Germaro，A. R.等人， Remington :The Scienee and Practice ofPharmacy (第 20 版，Lippincott Williams & Wilkins，2000，尤其参见 Part 5 pharmaceutical Manufacturing)中所述的，可以将活性 剂压缩为固体剂量单位，诸如丸剂、片剂，或者加工为胶囊、栓剂或贴剂。借助于药学可接受的液体，活性剂可以作为流体组合物施用，例如作为溶液、悬浮液、乳液形式的注射剂制剂，或者作为喷雾剂，例如鼻喷雾剂。为了制备固体的剂量单位，考虑了使用常规的添加剂，诸如填料、着色剂、聚合物 粘结剂等。一般说来，可以使用不妨碍活性化合物功能的任何药学可接受的添加剂。可以 将与本发明的活性剂一起作为固体组合物给药的适合的载体包括以适当量使用的乳糖、淀 粉、纤维素衍生物等、或其混合物。对于非肠道给药，可以使用含水悬浮液、等渗盐水溶液和 无菌的可注射溶液，包含药学可接受的分散剂和/或润湿剂，诸如丙二醇或丁二醇。本发明另外包括如上所述的药物组合物与适合于所述组合物的包装材料的组合， 所述包装材料包括将组合物用于上述应用的使用说明书。本发明的N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生可用作LXR α的调节剂，特别是对其具 有激动活性，并且本身可用于预防和降低动脉粥样硬化和与胆固醇和胆汁酸转运和代谢有 关的相关病症的危险，诸如高胆固醇血症(例如冠心病)、胆固醇胆结石、脂质积累病、糖尿 病和肥胖症。本发明的化合物潜在地还可以用于另外的适应症，诸如炎件疾病LXR的配体活化已经表现出抑制多种炎性路径，例如白细胞介素、白细胞 介素_6、环氧化酶_2，并且最近表现出直接抑制C反应蛋白表达。参见Blaschke等人， Circ. Res. 99 =88-99. (2006)。本发明的化合物可能在抑制炎性疾病的炎症方面具有治疗用 途，所述炎性疾病诸如接触性皮炎(参见Fowler等人，J. Invest. Dermatol. 120 =246-55. (2003)、神经炎症性疾病诸如多发性硬化(Zhang-Gandhi和Drew. J. Neuroimmunol. 183 50-59. (2007))和自身免疫脑脊髓炎。参见 Hindinger 等人，J. Neurosci. Res. 84 1225-1234(2006)。血管增殖性疾病LXR配体T0901317已经表现出在体外和体内抑制泡沫化损伤之后的血管平滑肌 细胞增殖和新内膜形成。因此，本发明的化合物可以在血管增殖性疾病中具有治疗用途。参 见 Blaschke 等人，Circ. Res. 95 :110_123 (2004)。糖尿病/代谢性综合征最近的文献在胰岛素抵抗和糖尿病的动物模型中证明了 LXR激动剂的效力，因 此，本发明的化合物在治疗糖尿病和代谢性综合征中具有潜在的治疗用途(参见Liu等 人，Endocrinology. 147 5061-5068(2006) ；Fernandez-Veledo 等人，Diabetologia. 49 3038-3048(2006))。癌症LXR激动剂T0901317在前列腺癌动物模型中延缓肿瘤的进展。本发明的化合物潜 在地可用于治疗前列腺癌。参见Chuu等人，Cancer. Res. 66 =6482-6486(2006)。神经变性疾病通过调节细胞的胆固醇水平，LXR激动剂可以减少脑中的β -淀粉样蛋白的沉积。 另外，Τ0901317已经表现出减少β-淀粉样蛋白的沉积，并且改善记忆。参见Riddell等 人，Mol. Cell. Neurosci. 34 =621-628(2007)。因此，本发明的激动剂衍生物可以在神经变性 疾病诸如阿尔茨海默氏病中具有治疗用途。
联合治疗本发明的化合物可以与可用于治疗其它代谢性病症(诸如高血压、高脂血症、 血脂异常、糖尿病、慢性炎性病症、肥胖症、以及其中增强胆固醇逆向转运和/或改善 LDL HDL比例具有潜在临床利益的任何病况)的另一种治疗剂联合。这种治疗剂的实例 是3_羟基-3-甲基-戊二酰-CoA还原酶(HMG CoA还原酶)的抑制剂(例如阿托伐他 汀、普伐他汀、辛伐他汀、洛伐他汀、瑞舒伐他汀、和其它)、胆固醇吸 收抑制剂(例如依泽麦 布)、胆汁螯合剂(例如考来烯胺)、微粒体的甘油三酯转移蛋白(mtp)抑制剂、过氧化物酶 体增殖物激活受体的调节剂(例如莫格列他、罗格列酮、贝特类和其它)、胆固醇酯转移蛋 白抑制剂、烟酸衍生物(例如Niaspan 等)、酰基辅酶a 胆固醇酰基转移酶(acat)抑制 剂(例如伊鲁麦布)、法尼醇X受体调节剂、用于治疗代谢综合症或2型糖尿病的治疗剂例 如二甲双胍。本发明的化合物可以与抗炎治疗剂(例如阿司匹林)联合，以及与用于神经 变性疾病治疗齐IJ (例如Aricept 、 Exelon , Reminyl 和Ebixa )联合。本发明的化合物可以以充分量对人给药并给予充分量的时间，以便减轻症状。说 明性地，人用的日剂量水平可以为每千克体重0. 001-50mg范围内，优选日剂量为每千克体 重0.01-20mg。通过以下实施例说明本发明。一般的实骑高效液相饩谱法(HPLC)在这个实验部分中使用HPLC纯化，是指高效液相色谱法。可用于纯化化合物 的一般方法的一些实例为使用5%乙腈/95%水到100%乙腈的标准梯度的酸性的反相 HPLC(水/乙腈/0. 三氟乙酸)，或使用10%乙腈/90%水到100%乙腈的标准梯度的碱 性反相HPLC (水/乙腈/0. 氨溶液)。使用UV检测(例如254nM)从HPLC收集级分。本 说明书给出了一般方法，也可以使用设备类型、柱、流动相、检测波长、溶剂梯度和运行时间 的变体来纯化化合物。游离碱和盐在通过酸性HPLC纯化之后，碱性的产物可以作为三氟乙酸盐分离或通过常规的 一般方法释放游离碱，例如强阳离子交换色谱法，使用含2M氨的甲醇洗脱；或者二氧化硅 碳酸盐柱色谱法或在有机溶剂例如乙酸乙酯和碱水溶液例如碳酸氢钠水溶液之间分配并 在分离有机物层之后用无机固体例如硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。产物的游离碱还可以通过标准方法转化为盐酸盐，例如将游离碱溶解于二氯甲烷 中并加入含2M盐酸的乙醚并减压浓缩，得到盐酸盐。缩写Boc 叔丁氧羰基；CDCl3 氯仿_d ；CD3OD 甲醇_d4 ；HPLC 高效液相色谱；HOBt IH-苯并[d][l，2，3]三唑-1-醇；HATU :0_ (7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N，N-四甲基脲 六氟磷酸盐；EDCI :N-(3-二甲氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐。实施例1.N-叔丁基-3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺2，2，2_三氟乙酸盐 A :Ν-,叔丁某-3-(哌卩泰-1-某甲某)苯甲酰胺二盐酸盐步骤1 在氩气下在-30°C (冷却浴温度)将3-(氯甲基)苯甲酰氯(2. 26mL，15. 9mmo 1)加入到搅拌的二氯甲烷(50mL)溶液。在搅拌10分钟之后，滴加叔丁基胺(1.66mL， 15. 9mmol)和N-乙基_N_异丙基丙烷-2-胺(5. 53mL,31. 7mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶 液。继续搅拌，同时允许冷却浴温度在45分钟内缓慢升高到-15°C。将反应混合物真空浓 缩，得到中间体N-叔丁基-3-(氯甲基)苯甲酰胺，为白色固体。步骤2 将N-叔丁基_3-(氯甲基)苯甲酰胺置于氩气气氛下并在室温用含1-哌嗪_甲 酸叔丁酯(2. 96g,15. 9mmol)和 N-乙基 _N_ 异丙基丙烷-2-胺(5. 53mL,31. 7mmol)的二甲 基亚砜(15mL)溶液处理。将反应混合物搅拌过夜，用乙酸乙酯(IOOmL)稀释并用饱和氯化 钠水溶液洗涤(x5)。有机相用硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到粗的油状物。将该油状物 通过重复的二氧化硅色谱法(含20-70%乙酸乙酯的正-己烷，随后用含0-6%甲醇的二氯 甲烷)纯化，得到中间体4-(3-(叔丁基氨基甲酰基)苄基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5. 04g)。步骤3 将中间体4-(3-(叔丁基氨基甲酰基)苄基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5g，13. 3mmol) 在室温与无水盐酸在无水乙醇(20mL)中的溶液(14% wt. /wt.)搅拌4小时。然后将溶液 真空浓缩，得到标题化合物(4. 66g)。MS (ESI) m/z 276. 2[M+H] +B :N-叔丁基-3-((4-(4-硝基苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯甲酰胺在氩气气氛下在0°C (冰浴)将N-叔丁基-3_(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺二盐 酸盐(0. 50g, 1. 44mmol)悬浮在搅拌的二氯甲烷(20mL)中。缓慢加入N-乙基-N-异丙基丙 烷-2-胺(1.0mL，5. 75mmol)。在搅拌10分钟之后，得到的溶液用4-硝基苯甲酰氯(0. 267g， 1. 44mmol)在二氯甲烷(IOmL)中的悬浮液处理。撤去冰浴并继续搅拌1小时。溶液用二氯 甲烷(70mL)稀释并用水洗涤(x4)。有机相用硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合 物(0.58g)，为黄色泡沫状物。MS (ESI) m/z 425 [M+H] +C :3-((4-(4-氨基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)叔丁基苯甲酰胺在室温将N-叔丁基-3-((4-(4_硝基苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯甲酰胺 (0. 56g, 1. 31mmol)溶解于甲醇(IOmL)。加入阮内 2800 镍(Raney 2800 nickel)( ImL 的含水悬浮液)并将灰色悬浮液剧烈搅拌。通过三通玻璃活塞为烧瓶连接氢气气球并使氢 气缓慢流过系统1分钟。将烧瓶在1个大气压的氢气下密封并继续剧烈搅拌1小时。移除 气球并用氩气吹扫烧瓶。将悬浮液重力过滤通过有凹槽的滤纸并用甲醇洗涤。将滤液浓缩 为粗的泡沫状物/玻璃状物并进行二氧化硅色谱法(含70-90%乙酸乙酯的正-己烷，含 1-3%甲醇；随后用含1-6%甲醇的二氯甲烷)，得到标题化合物(0. 35g)。
MS(ESI)m/z 395. 1[M+H] +D :^,叔丁某-3-((4-(4-(3-(环丙某甲某)脲某)苯甲酰某)哌ff泰某)甲某) 苯甲酰胺2, 2, 2-三氟乙酸盐在-78°C向搅拌的含3-((4-(4-氨基苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_叔丁基苯 甲酰 胺(30mg，0. 122mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中滴加含4-硝基苯基氯甲酸酯(25mg， 0. 122)的二氯甲烷(ImL)溶液。将反应混合物在_78°C搅拌30分钟并使其在2小时内缓 慢回温到室温。加入环丙基甲基胺(lOOmg，1. 41mmol)并继续室温搅拌18小时。将反应真 空浓缩并将得到的残余物通过酸性的反相HPLC纯化，得到标题化合物(30mg)。MS(ESI)m/ ζ 492. 1[Μ+Η] +按类似方式制备以下化合物IB :Ν-,叔丁某-3-((4-(4-(3-新戊某脲某)苯甲酰某)哌ff泰某)甲某)苯甲 酰胺2, 2, 2-三氟乙酸盐 IC :N-叔丁基-3-((4-(4-(3-环丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯甲 酰胺盐酸盐 ID :N-(4-(4-(3-(叔丁某氨某甲酰某)苄某)哌嗪羰某)苯某)哌啶甲 酰胺2, 2, 2-三氟乙酸盐 MS (ESI) m/z 506. 1[M+H] +实施例2.N-叔丁基-3-((4-(4-(3-异噁唑-3-基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯 甲酰胺 将3-((4-(4_氨基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-N_叔丁基苯甲酰胺 (0. 152mmol,60mg)溶解于二氯甲烷(12mL)并滴加含4-硝基苯基氯甲酸酯(0. 152mmol, 30.7mg)的二氯甲烷(20mL)溶液。将反应在室温搅拌2小时。加入异噁唑_3_胺 (1.521mmol,128mg)并将得到的混合物室温搅拌过夜。将反应混合物真空浓缩并将残余物 溶解于二氯甲烷。将溶液加载到强阳离子交换柱上并用二氯甲烷(20mL)洗涤，然后用甲醇 (20mL)洗涤。然后用含2M氨的甲醇(20mL)洗脱并将洗脱液真空浓缩。残余物通过酸性的 反相HPLC纯化并冻干，得到标题化合物(46mg)。MS (ESI) m/z 505. 8[M+H] +按类似方式制备以下化合物2B:N-叔丁基-3-((4-(4-(3-(2, 2-二氟乙基)脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺ms)esi)m/z 502.3 [m+h]+
2C =N-叔丁基-3- ((4- (4~ (3~异丙基_3_甲基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺MS (ESI) m/z 494. 2 [M+H]+2D:N_叔丁基-3-((4-(4-(3_(四氢-2H-吡喃基)脲基)苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺MS (ESI) m/z 522. 8 [M+H]+2E :N-(4-(4-(3-(叔丁基氨基甲酰基)苄基)哌嗪羰基)苯基)_4_羟基哌 啶-ι-甲酰胺 MS (ESI) m/z 522. 2 [M+H]+实施例3 4-(4-(3-(,叔丁某M某甲酰某)苄某)哌ff泰-1-羰某)苯某M某甲酸环丙某甲酉旨 2,2,2-三氟乙酸盐 在_78°C向搅拌的含3-((4-(4_氨基苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_Ν_叔丁基苯甲酰胺(14mg，0.036mmOl)的二氯甲烷(ImL)溶液中滴加4-硝基苯基氯甲酸酯(7. 3mg， 0. 036mmol)的二氯甲烷(ImL)溶液。将混合物在_78°C搅拌30分钟，然后使其在2小时内 逐渐回温到室温。加入过量的环丙基甲醇( 20当量)，随后加入N，N-二甲基吡啶-4-胺 (5mg)并将反应混合物室温搅拌18小时。将反应真空浓缩并通过酸性的反相HPLC纯化，得 到标题化合物(8. 8mg)，为无色油状物。MS (ESI) m/z 493. 1[M+H] +
通过类似方式制备以下化合物 3B a-α-(3-(MT^mMmm)苄某)哌ff泰-ι-羰某)as某M某甲酸新戊,酉旨 2,2,2-三氟乙酸盐MS (ESI) m/z 509. 1[M+H] +实施例4 N-叔丁基-3-((4-(4-(2-环丁基乙酰氨基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯甲 酰胺2, 2, 2-三氟乙酸盐 将3-((4-(4_氨基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-N_叔丁基苯甲酰胺(20mg， 0. 05mmol)，环丁基乙酸(6mg，0. 05mmol)和 0-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N, N，N-四甲 基脲六氟磷酸盐(19mg，0.05mmOl，HATU)在N，N_ 二甲基甲酰胺(0. 5mL)中的混合物室温搅 拌18小时。然后使粗的混合物经过酸性的反相HPLC纯化，得到标题化合物(10. 4mg)，为白 色半固体。MS (ESI) m/z 491[M+H] +按类似方式制备以下化合物4B :N-(4-(4-(3-(,叔T某M某甲酰某)苄某)哌卩泰Ii某)^ )异'烟酉H安 MS (ESI) m/z 498. 4[M_H”实施例5 3-((4-(4-苯甲酰氨某苯甲酰某)哌嗪-1-某)甲某)-N-叔丁某苯甲酰胺 将3-((4-(4_氨基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-N_叔丁基苯甲酰胺 (0. 203mmol,0. 080g)和三乙胺(1. 015mmol,0. 103g)溶解于二氯甲烷(12mL)并将搅拌的混 合物冷却到0°C。加入苯甲酰氯(0.305mmol，0.043g)并使反应混合物达到室温并搅拌过 夜。向反应加入水，然后分离有机层，干燥(硫酸钠)并真空浓缩。残余物通过二氧化硅柱 色谱法(二氯甲烷/甲醇(5% -10% ))纯化并与二氯甲烷(x3)和乙醚(x3)共蒸发，得到 标题化合物(93mg)。MS (ESI) m/z 499. 8 [M+H]+按类似方式制备以下化合物5B :N-(4-(4-(3-(,叔丁某M某甲酰某)苄某)哌ff泰羰某)苯某)异噁P半_5_甲 酰胺 MS (ESI) m/z 490. 8 [M+H]+实施例6 N-,叔丁某-3-((4-(4-(环P/掠甲酰氡某)-3-氟宠甲酰某)哌卩泰某)甲某) 苯甲酰胺 向搅拌的含3-((4-(4_氨基-3-氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_叔丁基苯 甲酰胺(0. 121 讓ol，50mg)和三乙胺(0. 485mmol,0. 068mL，49. Img)的二氯甲烷(1. 5mL)溶 液加入环己甲酰氯(0. 133mmol, 19. 55mg)。在搅拌16小时之后，将反应真空浓缩并通过酸 性的反相HPLC纯化，得到标题化合物(28mg)。MS (ESI) m/z 523. 5 [M+H]+按类似方式制备以下化合物巡:N-叔丁某-3-((4-(4-(2-环戊,某乙酰氨某)-3-氟苯甲酰某)哌嗪某)甲 基)苯甲酰胺MS (ESI) m/z 523. 5 [M+H]+实施例7N-叔丁某-3-((4-(3-氟-4-(3-新戊,某脲某)苯甲酰某)哌嗪某)甲某)苯 甲酰胺 A :Ν-叔丁基-3_(氯甲基)苯甲酰胺将3_(氯甲基)苯甲酰氯(20g，105. 80mmol)加入到冷却的(_30°C )搅拌的二 氯甲烷(60mL)中。在搅拌10分钟之后，滴加含叔丁基胺(11. ImL, 105. 80mmol)和N-乙 基-N-异丙基丙烷-2-胺(36.9mL，211.60mmOl)的二氯甲烷(30mL)溶液。在加入完成之 后，使反应回温到_15°C并搅拌90分钟然后使其回温到室温。将反应真空浓缩并将残余物 溶解于乙酸乙酯并连续地用2M盐酸水溶液、水(x2)和盐水洗涤。将有机相真空浓缩，得到 标题化合物(19.61g)，为白色固体。MS (ESI) m/z 226. 4[M+H] +B :Ν-,叔丁某-3_(哌嗪-1-某甲某)苯甲酰胺将N-叔丁基-3-(氯甲基)苯甲酰胺(14. 71g，65. 2mmol)，哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (12. 14g，65. 2mmol)，碘化钠(1. 95g，13. Ommol)，三乙胺(27. 3mL, 195. 5mmol)和四氢呋喃 (125mL) 一起室温搅拌18小时。然后将反应真空浓缩并将残余物溶解于乙酸乙酯。有机 混合物连续地用饱和碳酸氢钠水溶液，水(x2)和盐水洗涤，然后真空浓缩。将残余物溶解 于二氯甲烷(IOOmL)，用三氟乙酸(25. OmL，326. Ommol)处理并在60°C搅拌2. 5小时。将反 应真空浓缩并通过强阳离子交换(SCX)色谱法纯化，用含2M氨的甲醇洗脱大孔聚苯乙烯磺 酸。将得到的溶液真空浓缩，得到标题化合物(12. 8g)，为白色固体。MS(ESI)m/z 276. 3[M+H] +C :3-((4-(4-氨基-3-氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)叔丁基苯甲酰胺将4-氨基-3-氟苯甲酸(500mg，3. 22mmol)，N-叔丁基-3-(哌嗪-1-基甲基) 苯甲酰胺(888mg，3. 22mmol)，N-(3-二甲氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐(926mg， 4. 83mmol,EDCI)和三乙胺(984mg，898 μ 1，6. 44mmol)合并并在乙腈(IOmL)中室温搅拌过 夜(在氮气下)。将反应减压浓缩。将残余物溶解在二氯甲烷(30mL)中并用水洗涤。有机 相用硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物通过二氧化硅色谱法(用二氯甲烷甲醇/ 二氯甲 烷的溶剂梯度洗脱)纯化，得到标题化合物(355mg)。MS (ESI) m/z 413. 5 [M+H]+D :N-叔丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺将3-((4-(4_氨基-3-氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_叔丁基苯甲酰胺 (175mg,0. 424mmol)和4-硝基苯基氯甲酸酯(85mg，0424mmol)在二氯甲烷(2mL)中搅拌 30分钟。加入新戊基胺(110mg，1.272mmOl)并将反应室温搅拌2小时。将反应真空浓缩。 得到的残余物通过酸性的反相HPLC纯化，得到标题化合物(26mg)。MS (ESI) m/z 526. 5 [M+H]+按类似方式制备以下化合物7B :N-叔丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-环丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺MS (ESI)m/z 510. 9 [M+H]+
7C :N-叔丁某-3-((4-(4-(3-(环丙某甲某)脲某氟苯甲酰某)哌嗪-基) 甲某)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 510. 9[M+H] + 7D :N-叔丁某-3-((4-(3-氟-4- (3-异T某脲某)茏甲酰某)哌嗪某)甲基)
苯甲酰胺
MS (ESI) m/z 512. 8[M+H] +7E :N-叔丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-异戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)
苯甲酰胺
OMS (ESI) m/z 526. 8[M+H] +7F :N-叔丁某-3-((4-(4-(3-(环T某甲某)脲某氟苯甲酰某)哌嗪基) 甲某)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 524. 5[M+H] +7G :N-叔丁某-3-((4-(4-(3-丁基脲某)-3-氟苯甲酰某)哌嗪某)甲基)苯
甲酰胺 MS (ESI) m/z 512. 7[M+H] +
7H (S)-N-叔丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-(1,1,1-三氟丙烷-2-某)脲基)苯甲 酰某)哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 MS(ESI)m/z 552. 3[Μ+Η] +71 :N-(4-(4-(3-(叔丁某氨基甲酰某)苄某)哌嗪羰基)氟苯基)异 丙某吗啉-4-甲酰胺 MS (ESI) m/z 568. 5[M+H] +7J :N-叔丁基-3-((4-(3_氟-4-(3_(卩比啶-2-基甲基)脲基)苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 547. 5[M+H] +7K :Ν-叔丁基-3-((4-(4-(3_(3-乙氧某丙基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌 嗪-1-某)甲基)苯甲酰胺MS (ESI) m/z 542. 5 [Μ+Η] +7L :N-叔丁基-3-((4-(3_氟-4_(3-(呋喃基甲基)脲基)苯甲酰基)哌 嗪-1-某)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 536. 3 [Μ+Η]+71 :Ν-叔丁基-3-((4_(3-氟-4_(3-苯乙某脲基)苯甲酰基)哌嗪-1_基)甲基) 苯甲酰胺 MS(ESI)m/z 560. 5[M+H] +7N :N-叔丁基-3- ((4- (3-氟(3- (2-(吡啶_2_基)乙基)脲基)苯甲酰基) 哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 561.3[M+H] +70 :Ν-,叔丁某-3-((4_(3-氟,Ι-Ο- ΡΙΙ吩-2-某甲某)脲某)苯甲酰某)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 552. 7[M+H] +7P :N-叔丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-(3-甲基丁 烯基)脲基)苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 524. 7 [Μ+Η] +7Q :N-叔丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-((1,3, 5-三甲基-IH-吡唑-4-基)甲基)脲 ；S)辦脑)_泰-1-胃)■)辦酉· MS (ESI) m/z 578. 3 [Μ+Η]+TR :Ν-,叔丁某-3-((4-(3-氟,-4-(3-(2-(吡P各烷-1-某)乙某)脲某)苯甲酰某) 哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺
MS(ESI)m/z 553. 3[M+H] +TS :N--3- ((4- (3- ft ~4~ (3~ ((1~)甲某)脲某)苯甲酰某) 哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 526. 3[M+H] +7T (R) -N-叔丁基 ((4- (3-氟 (3_ (1_ 羟基 苯基丙烷 _2_ 基)脲基)苯 甲酉先基)π -ι- g)甲基)as甲酉糾安 MS (ESI) m/z 590. 7[M+H] + 7U :N-,叔T某-3-((4-(3-氟,-4-(3-(3-(2-氧代吡咯烷-1-某)丙某)脲某)苯 甲酰基)哌嗪-ι-基)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 581. 3 [Μ+Η] +7V :Ν-,叔丁某-3-((4-(3-tt-4-(3-(3-异丙氧,某丙某)脲某)苯甲酰某)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 556. 3 [Μ+Η]+7ff =N-叔丁基-3-((4~(3~氟(3~(2~(1~甲基吡咯烷_2_基)乙基)脲基)苯 甲Bffi) ΠΜ -1- g)甲基)as甲M安
MS(ESI)m/z 567. 7[M+H] +7X :3-((4-(4-(3_(2-乙酰氨基乙基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲 某)-N-叔丁基苯甲酰胺 MS(ESI)m/z 541. 5[Μ+Η] +7Υ :Ν~ 叔丁基-3-((4-(4~(3~(1~( 二甲氨基)~2~ 甲基丙烷 基)脲基)~3~ 氟 苯甲酰基)哌嗪-ι-某)甲某)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 555. 5[M+H] +7Z :N-叔丁基-3-((4-(4-(3_(2,6-二氟苄基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 582. 3 [M+H] +7AA :3-((4-(4-(3-(2-(苯并「d1「l,3l 二氧杂环戊烯 基)乙基)脲基)_3_ 氟 苯甲酰基)哌嗪-1-某)甲某)-N-叔丁基苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 604. 7 [M+H]+7AB :N-叔丁基-3-((4_(3-氟-4-(3-((l-羟基环己基)甲基)脲基)苯甲酰基)哌嗪-ι-某)甲某)苯甲酰胺 7AC 叔丁基-3-((4_(3-氟-4_(3-((lS,2S)-2_羟某环戊基)脲基)苯甲酰基) 哌嗪-1-某)甲某)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 540. 7[M+H] +7AD :N-叔丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-(2-(2-氧代咪唑烷-1-基)乙基)脲基)苯 甲酰基)哌嗪-ι-基)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 568. 5 [M+H] +7AE :N-叔丁某-3-((4-(3-氟-4-(3-(3, 3, 3-三氟-2-羟某丙基)脲基)苯甲酰 某)哌嗪-ι-基)甲某)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 568. 5 [M+H]+7AF :(R)-N_ 叔丁基-3-((4_(3-氟-4-(3_((四氢呋喃-2-基)甲基)脲基)苯 甲酰某)哌嗪-ι-某)甲某)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 540. 5 [M+H]+
7AG :N~叔丁基((4~ (3~氟(3~ (噻唑基甲基)脲基)苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 553. 3[M+H] +7AH :^,叔丁某-3-((4-(4-(3-((1-植某环丙某)甲某)脲某)氟龙甲酰某) 哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 535. 3 [Μ+Η] +在合成中需要的1_(氨基甲基)环丙烷甲腈如下制备步骤1 向1-氰基环丙烷甲酸乙酯(35.9mmol，5g)，二甲氧基乙烷(IOOmL)和甲醇 (IOmL)的混合物中缓慢加入硼氢化钠(287mmol，10. 87g)并将混合物室温搅拌18小时。溶 液缓慢地用饱和碳酸氢钠稀释，然后用10%甲醇/ 二氯甲烷提取(x3)。将有机层合并，用 硫酸钠干燥并真空浓缩，得到中间体1_(羟基甲基)环丙烷甲腈(2. 36g)。IH NMR (CDCl3,400MHz) δ 0. 99 (2Η, m)，1· 28 (2H, m)，2. 5 (1H, br s)，3. 62 (2H, s)步骤2 将搅拌的1_(羟基甲基)环丙烷甲腈(24.30mmol，2.36g)在二氯甲 烷(30mL)中的混合物用三乙胺(48.6mmol，6.83mL，4.92g)和分批加入的甲烷磺酰氯 (31. 6mmol,2. 445mL, 3. 62g)处理，保持反应混合物在0°C。将溶液搅拌1小时，然后用饱和 碳酸氢钠稀释并用10%甲醇/ 二氯甲烷提取(x3)。将有机层合并并减压浓缩，得到中间体 (1-氰基环丙基)甲基甲烷磺酸酯(3.77g)。1H NMR (CDCl3,400MHz) δ 1. 18 (2Η, m)，1· 46 (2H, m)，3. 14 (3H, s)，4. 18 (2H, s)步骤3:将搅拌的(1-氰基环丙基)甲基甲烷磺酸酯(21.52mm0l，3.77g)和叠氮 化钠(43. Ommol, 2. 80g)在N，N_ 二甲基甲酰胺(40mL)中的混合物加热到120°C，保持 18 小时。使混合物冷却并用水和乙酸乙酯稀释。将有机层分离，用硫酸钠干燥并减压浓缩，得 到油状物。将该油状物溶解在乙醚中并用水洗涤，干燥并减压浓缩，得到中间体1_(叠氮基 甲基)环丙烷甲腈(1.8g)，为油状物。1H NMR (CDCl3,400MHz) δ 1. 02 (2Η, m)，1. 36 (2H, m)，3. 38 (2H, s)步骤4 向含1-(叠氮基甲基)环丙烷甲腈(14.74mm0l，L8g)的甲醇(20mL)溶 液中加入包含水(200yL)的10%炭载钯(14. 74mmol，200mg)。将混合物在3巴的氢气下 室温搅拌过夜。通过过滤除去催化剂并将滤液减压浓缩，得到标题化合物(1.3g)。 1H NMR (CDCl3,400MHz) δ 0. 87 (2Η, m)，1· 23 (2H, m)，2. 76 (2H, s) 7AI :N-叔丁基-3-((4-(4-(3-(2_环丙基乙基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪-ι-某)甲某)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 524. 7[M+H] +7AJ :3-( (4-(4-(3-(2-氨某-2-甲基丙某)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基) 甲某)-N-叔丁某苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 527. 5[M+H] +7AK :N-叔丁基-3-((4_(4-(3-(3，3_ 二氟环丁基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 546. 5[M+H] + 7AL :N-叔 丁 基-3-(4-{4_「3-(l, 二 氧代-四氢-16-噻吩 _3_ 基)-脲 某 -3-氟,-茏甲酉先某i- 口刷泰 MS (ESI) m/z 574. 4[M+H] +实施例8N-叔丁某-3- ((4- (3-氟-4_ (3- (2-氟苯基)脲基)苯甲酰某)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺 将3-((4-(4_氨基-3-氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_叔丁基苯甲酰胺 (100mg,0. 242mmol)和2-氟苯基异氰酸酯(37mg，0. 267mmol)合并并在二氯甲烷中在微波 中在100°C加热10分钟。减压除去溶剂并通过酸性的反相HPLC纯化残余物，得到标题化合 物(12mg)。MS (ESI) m/z 550. 5[M+H] +按类似方式制备以下化合物8B =N-叔丁基-3- ((4~ (3~氟(3~吡啶基脲基)苯甲酰基)哌嗪基) 甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 533. 3 [M+H] +8C :N-叔丁某-3- ((4- (3-氟 ~4~ (3~ (5~ 甲某 (三氟甲某)呋_ 某)脲某) 苯甲酰基)哌嗪-ι-基)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 604. 5 [M+H]+实施例9N-叔丁某-3-((4-(4-(3-(5_叔丁某异噁啤-3-某)脲某)_3-氟苯甲酰某)哌 嗪-1-某)甲某)苯甲酰胺2，2，2_三氟乙酸盐 将3-((4-(4_氨基-3-氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_叔丁基苯甲酰胺 (100mg,0. 242mmol)，二氯甲烷和4-硝基苯基氯甲酸酯(49mg，0. 242mmol)合并并室温搅拌 30分钟。加入5-叔丁基异噁唑-3-胺(101mg，0. 726mmol)和三乙胺(73mg，0. 726mmol)并 将反应在微波中在120°C加热10分钟。将反应减压浓缩并将得到的残余物通过酸性的反相 HPLC纯化，得到标题化合物(40mg)。MS (ESI) m/z 579. 5 [M+H]+按类似方式制备以下化合物9B :N-叔丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-(4-甲基噻唑-2-基)脲基)苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺
MS(ESI)m/z 553. 2[Μ+Η] +实施例10N-叔丁某-3-((4-(3-氟(5-(三氟甲某)吡啶某)脲某)苯甲酰某) 哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 将5_(三氟甲基)卩比啶-2-胺(0. 485mmol,0. 079g)和N-乙基-N-异丙 基丙烷-2-胺(0. 727mmol,0. 120mL,0. 094g)加入到搅拌的含双(三氯甲基)碳酸 酯(0. 160mmol，0.047g)的二氯甲烷(IOmL)溶液中。将反应室温搅拌3小时。加入 3-((4-(4_氨基-3-氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-N-叔丁基苯甲酰胺(0.242mmol， 0. Ig)并将反应搅拌30分钟。将反应在微波中在120°C加热10分钟。将反应真空浓缩并 通过酸性的反相HPLC纯化，得到标题化合物(50mg)。MS (ESI) m/z 601.3[M+H] +按类似方式制备以下化合物IQB :N~ 叔丁基-3-((4-(4-(3-(5-叔丁基-1,3,4-噻二唑 _2_ 基)脲基)_3_ 氟 苯甲酰基)哌嗪-ι-基)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 596. 5[M+H] +IOC :N~叔丁基-3- ((4- (3~氟(3~噻唑_2_基脲基)苯甲酰基)哌嗪基) 甲基)苯甲酰胺 MS(ESI)m/z 539. 5[M+H] +实施例11N-叔丁基-3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_3，5_二氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯甲酰胺 A :3-((4-(4-氨基-3,5-二氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)-N-叔丁基苯甲酰 胺 向搅拌的4-氨基-3，5- 二氟苯甲酸(lg，5. 78毫摩尔)，N-叔丁基_3_ (哌嗪基 甲基)苯甲酰胺(1.598，5.78毫摩尔)和三乙胺(4mL)在二氯甲烷(30mL)中的溶液加入 1-丙烷膦酸环酐(8mL，乙酸乙酯中的50%溶液)。在搅拌2小时之后，反应混合物用乙酸 乙酯稀释并用碳酸钠(水溶液)洗涤(3x)，干燥(硫酸镁)并减压浓缩，得到标题化合物 (2. 24g)，为灰白色泡沫状物。MS (ESI)m/z 431. 9[M+H] +B:N-叔丁基-3-((4-(4-(3_(环丙基甲基)脲基)_3，5_ 二氟苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺向搅拌的含双(三氯甲基)碳酸酯(0. 353mmol, 105mg)的二氯甲烷(IOmL)溶液 中加入3-((4-(4_氨基-3，5-二氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-N-叔丁基苯甲酰胺 (0. 929mmol,400mg)和N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(0. 3mL)在二氯甲烷(IOmL)中的溶 液(滴加)。在搅拌2小时之后，加入环丙基甲基胺(1. 022mmol,0. 089mL，72. 7mg)和N-乙 基-N-异丙基丙烷-2-胺(0.222mL)在二氯甲烷(IOmL)中的溶液。将反应混合物搅拌24 小时。在二氧化硅上进行色谱(用二氯甲烷洗脱，然后用二氯甲烷/甲醇洗 脱)，得到标题化合物(220mg)。MS (ESI)m/z528. 3[M+H] +实施例12N-叔丁基-3-((4-(3-氯-4-(3-环丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯 甲酰胺 A^ 3-((4-(4-氡某-3-氯,苯甲酰某)哌嗪某)甲某),叔丁某苯甲酰胺 将4-氨基-3-氯苯甲酸(1.04g，6. 06mmol)，N-叔丁基_3_(哌嗪基甲基) 苯甲酰胺(888mg，3. 22mmol)，N-(3-二甲氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐(1. 742g， 9. 09mmol)和三乙胺(1. 23g，1. 69mL，12. 12mmol)合并并在乙腈(20mL)中室温搅拌过夜 (在氮气下)。将反应减压浓缩并将残余物用二氯甲烷(30mL)和水稀释。分离有机层，用 硫酸钠干燥并真空浓缩。得到的残余物通过二氧化硅色谱法(用二氯甲烷到4%甲醇/ 二 氯甲烷的溶剂梯度洗脱)纯化，得到标题化合物(1.3g)。MS (ESI) m/z 429. 7[M+H] +B^. N-叔丁基-3-((4-(3-氯-4-(3-环丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺3-((4-(4-氨基-3-氯苯甲酰基)哌嗪基)甲基)-N-叔丁基苯甲酰胺(200mg， 0. 466mmol)和4-硝基苯基氯甲酸酯(94mg，0. 466mmol)在二氯甲烷(IOmL)中加热回流2 小时。加入环丁基胺(99mg，1. 398mmol)并搅拌反应过夜。反应混合物用水洗涤，用硫酸钠 干燥并真空浓缩。得到的残余物通过酸性的反相HPLC纯化，得到标题化合物(20mg)。MS (ESI) m/z 527. 3 [M+H] +按类似方式制备以下化合物12B =N-叔丁基-3-((4-(3_氯(3_(环丙基甲基)脲基)苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺MS (ESI) m/z 526. 5 [M+H]+12C :N-叔丁基-3-((4_(3-氯-4_(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺MS (ESI) m/z 542. 8 [M+H]+12D :N-叔丁基-3-((4-(3-氯-4-(3-异丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺MS (ESI) m/z 528. 5 [M+H]+12E (3-(叔丁基氨基甲酰基)苄基)(3_氯(3_ (环丁基甲基)脲基)苯 甲酰基)哌嗪-ι-氧化物MS (ESI) m/z 540. 5 [M+H]+12F :N-叔丁基-3-((4-(4-(3-丁基脲基)-3-氯苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺MS (ESI) m/z 528. 2 [M+H]+12G :N-叔丁基-3-((4-(3-氯-4-(3-异戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺MS (ESI) m/z 542. 5 [M+H]+实施例13N-叔丁基-3-((4-(2-甲基-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯甲酰胺 A^ 3-((4-(4-氡某-2-甲某苯甲酰某)哌嗪某)甲某),叔丁某苯甲酰胺 将4-氨基-2-甲基苯甲酸(lg，6. 62mmol)和三乙胺(4mL)在二氯甲烷中搅拌。滴 加1-丙烷膦酸环酐(8mL，在乙酸乙酯中的50%溶液)并将反应室温搅拌2小时。将反应 减压浓缩并将残余物经乙酸乙酯溶解。有机溶液用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，用硫酸钠干燥 并真空浓缩，得到标题化合物(902mg)。MS (ESI) m/z 409. 7[M+H] +B_l N-叔丁基-3- ((4- (2-甲基(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺将3-((4-(4-氨基-2-甲基苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_叔丁基苯甲酰胺 (100mg，0. 24mmol)和4-硝基苯基氯甲酸酯(49mg，0. 24mmol)在二氯甲烷(2mL)中搅拌30 分钟。加入新戊基胺(64mg，0.73mmol)并将反应室温搅拌2小时。将反应真空浓缩。得到 的残余物通过酸性的反相HPLC纯化，得到标题化合物(31mg)。MS(ESI)m/z 522. 7[M+H] +实施例14N-叔丁基-3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_2_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺 A^ N-叔丁某-3-((4-(2-氟,-4-硝某苯甲酰某)哌嗪某)甲某)苯甲酰胺 将2-氟-4-硝基苯甲酸(5g，27. Olmmol)溶解于乙腈(150mL)和三乙胺(7. 53mL， 54. 02mmol)中。加入N-(3-二甲氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐(7. 8g，40. 52mmol)， 随后加入N-叔丁基-3-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺(7.44g，27.01mmol)。将反应室温搅 拌18小时并真空浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯中，过滤通过硅藻土(dicalite)，连续地用水(x2)和盐水洗涤并真空浓缩。产物通过强阳离子交换色谱法纯化，用含2M氨的甲醇洗 脱大孔聚苯乙烯磺酸。将得到的溶液真空浓缩，得到标题化合物，为浅黄色油状物(2.6g)。 MS (ESI)m/z443. 7[M+H] +B^ 3-((4-(4-氡某-2-氟龙甲酰某)哌嗪某)甲某),叔丁某苯甲酰胺 向铁(0)粉(3. 3g，58. 76mmol)和N-叔丁基_3_ ((4_ (2_氟_4_硝基苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺(2.6g，5.88mmol)在丙烷_2_醇(75mL)中的悬浮液加入IM含 水盐酸(8. 8mL，8. lmmol)。将反应室温搅拌2. 5小时，过滤通过硅藻土并真空浓缩。将残余 物溶解于甲醇并通过强阳离子交换色谱法纯化，用含2M氨的甲醇洗脱大孔聚苯乙烯磺酸。 将得到的溶液真空浓缩，得到标题化合物，为粘稠的橙色油状物(2. 2g)。MS (ESI) m/z 413. 5[M+H] +C :N-叔丁基-3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_2_氟苯甲酰基)哌嗪基) 甲基)苯甲酰胺将4-硝基苯基氯甲酸酯(59mg，0. 29mmol)加入到含3_ ((4_ (4_氨基_2_氟苯甲 酰基)哌嗪-1-基)甲基)-N-叔丁基苯甲酰胺(100mg，0. 24mmol)的乙腈(IOmL)溶液中。 在室温搅拌1小时之后，加入环丙基甲基胺(126μ ，1.21πιπι01)。在搅拌2小时之后，反应 通过强阳离子交换色谱法纯化，用含2Ν氨的甲醇洗脱大孔聚苯乙烯磺酸。将得到的溶液真 空浓缩并通过碱性反相HPLC纯化，得到标题化合物，为白色固体(IOmg)。MS (ESI) m/z 510. 9[M+H] +实施例I5N-,叔丁某-3-((4-(2-氯,-4-(3-异丁某脲某)苯甲酰某)哌嗪某)甲某)苯 甲酰胺 A^ N-叔丁某-3-((4-(2-氯,-4-硝某苯甲酰某)哌嗪某)甲某)苯甲酰胺 将1-丙烷膦酸环酐(3. 16g,92mmol,2. 95mL)滴加到2_氯_4_硝基苯甲酸(lg， 4. 9mmol), N-叔丁基-3-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺(1.4169g，5. lmmol)和三乙胺 (1.4979g，14. 7mmol,2mL)在二氯甲烷中的溶液中。将反应减压浓缩并将残余物经乙酸乙酯溶解，用水、碳酸氢钠和盐水洗涤。将有机相真空浓缩，得到标题化合物(2. 06g)。MS(ESI) m/z 459. 7[M+H] +B 3-((4-(4-氡某-2-氯,苯甲酰某)哌嗪某)甲某),叔丁某苯甲酰胺 将N-叔丁基-3-((4-(2_氯-4-硝基苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯甲酰胺 (1. 9483g，4. 2mmol)加入到被还原的铁粉(2. 3623g, 42mmol)和IM盐酸(6mL)在异丙醇中 的悬浮液中。将反应室温搅拌2小时。将反应减压浓缩并将剩余的残余物经二氯甲烷溶 解并用水洗涤。有机相用硫酸镁干燥并真空浓缩，得到标题化合物(1.57g)。MS(ESI)m/ z429.5[M+H]+C :N-,叔丁某-3-((4-(2-氯,-4-(3-异丁某脲某)苯甲酰某)哌ff泰某)甲某) 苯甲酰胺将3-((4-(4_氨基-2-氯苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_叔丁基苯甲酰胺 (250mg,0. 625mmol)和4-硝基苯酚氯甲酸酯(126mg，0. 625mmol)合并并在二氯甲烷中搅 拌1小时。加入异丁基胺(87. 8mg, 1. 2mol,0. 12mL)并将反应搅拌30分钟。反应混合物 用水稀释并冲洗通过疏水性玻璃料。(frit)将反应减压浓缩，得到残余物，将其通过二氧 化硅色谱法(用二氯甲烷到4%甲醇/ 二氯甲烷的溶剂梯度洗脱)纯化，得到标题化合物 (178. lmg)。MS (ESI) m/z 528. 3[M+H] +实施例I6N-叔丁基-3-((4-(4-(3-环丁基脲基)-2, 5-二氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺 A 4-氨基-2, 5-二氟苯甲酸将2，5_二氟-4-硝基苯甲酸(lg，4.9mm0l)溶解于乙醇。加入10%炭载钯(500mg) 并将反应在氢气球下搅拌过夜。将催化剂过滤掉并将滤液减压浓缩，得到标题化合物 (0. 79g)。MS (ESI) m/z 172. 3 [Μ-ΗΓB :19 :3-((4-(4-氨基-2,5-二氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)-N-叔丁基苯甲 酰胺 将1-丙烷膦酸环酐(2. 91g，9. 2mmol，2. 73mL)滴加到含4_氨基_2，5_ 二氟苯甲 酸(792. 9mg，4. 6mmol)，N_ 叔丁基 _3_(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺(1. 3878g，5mmol)和三 乙胺(1.39g，13.9mm0l，1.91mL)的二氯甲烷溶液中。将反应混合物室温搅拌1小时。将反 应减压浓缩并将残余物经乙酸乙酯溶解，用水、碳酸氢钠和盐水洗涤。将有机相真空浓缩， 得到标题化合物(1.52g)。MS (ESI) m/z 431. 9[M+H] +C :N-叔丁基-3-((4-(4-(3-环丁基脲基)-2, 5-二氟苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺将3-((4-(4-氨基-2，5-二氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)_N_叔丁基苯甲酰 胺(lg,0. 023mol)和4-硝基苯酚氯甲酸酯(0. 4636g,0. 0023mol)合并并在二氯甲烷中室 温搅拌1小时。加入环丁基胺(0. 8969g，0. 0017mol,0. 108mL)并将反应搅拌30分钟。反 应混合物用水稀释并冲洗通过疏水性玻璃料。将有机相真空浓缩并通过酸性的反相HPLC 纯化，得到标题化合物(21mg)。MS (ESI) m/z 528. 3 [M+H] +实施例ΠN-叔丁基-3- ((4- (5-氯(3~异丁基脲基)~2~甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基) 甲基)苯甲酰胺 3- ((4- (4-氨基-5-氯_2_甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-N-叔丁基 苯甲酰胺 将1-丙烷膦酸环酐(6. 31g，9.92mmol，5.91mL)滴加到含4_氨基_5_氯_2_甲氧 基苯甲酸(18，5讓01)力-叔丁基-3-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺(1.5150g，5. 5mol)和三 乙胺(1.506g，14.88mmOl，2.068mL)的二氯甲烷溶液中。将反应室温搅拌1小时。将反应 减压浓缩并将残余物经乙酸乙酯溶解，用水、碳酸氢钠和盐水洗涤。将有机相真空浓缩，得 到标题化合物(1. 71g) ο MS (ESI) m/z 459. 7 [M+H]+B :N-叔丁基-3- ((4- (5-氯(3_异丁基脲基)甲氧基苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺
将3-((4-(4-氨基-5-氯-2-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)_N_叔丁基 苯甲酰胺(1.712g，0. 0037mol)和4-硝基苯酚氯甲酸酯(0. 7518g，0. 0037mol)合并并在二 氯甲烷中室温搅拌1小时。加入异丁基胺(0. 1536g 0. 208mol)并将反应搅拌另外的30分 钟。反应混合物用水稀释并冲洗通过疏水性玻璃料。将有机相真空浓缩并通过酸性的反相 HPLC纯化，得到标题化合物(37mg)。MS (ESI) m/z 558. 3[M+H] +实施例18N-叔丁基-3- ((4- (4- (3-异丁基脲基)_2_甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基) 苯甲酰胺 A^. 3- ((4- (4-氨基_2_甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-N-叔丁基苯甲酰 胺 将1-丙烷膦酸环酐(12.91g，20. 2mmol，12.91mL)滴加到含4-氨基-2-甲氧基苯 甲酸(1.70g，10. lmmol)，N-叔丁基-3-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺(3. 07g,ll. 2mmol)禾口 三乙胺(3.08g，30. 3mmol，4. 23mL)的二氯甲烷溶液中。将反应室温搅拌1小时。将反应减 压浓缩并将残余物经乙酸乙酯溶解，用水、碳酸氢钠和盐水洗涤。将有机相真空浓缩，得到 标题化合物(1.39g)。MS(ESI)m/z 425. 4[M+H] +B_l N-叔丁基-3-((4-(4-(3-异丁基脲基)-2-甲氧基苯甲酰基)哌嗪基) 甲基)苯甲酰胺将3-((4-(4-氨基-2-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)_N_叔丁基苯甲酰 胺(200mg，0.48mmol)和4-硝基苯酚氯甲酸酯(475mg，0. 48mmol)合并并在二氯甲烷中搅 拌1小时。加入异丁基胺(102. 4mg, 1. 4mmol,0. 14mL)并将反应混合物搅拌30分钟。反应 混合物用水稀释并冲洗通过疏水性玻璃料。将有机相减压浓缩并通过酸性的反相HPLC纯 化，得到标题化合物(67mg)。MS (ESI) m/z 524. 5[M+H] +实施例19N-叔丁某-3-((4-(4_(3-异丁某脲某)-3_(三氟甲氧,某)苯甲酰某)哌嗪某) 甲基)苯甲酰胺 A^ 3-((4-(4-氡某-3-(三氟甲氧某)苯甲酰某)哌嗪某)甲某)-N-,叔丁 基苯甲酰胺 将1-丙烷膦酸环酐(5. 76g，92mmol，5. 38mL)滴加到含4_氨基_3_ (三氟甲氧基) 苯甲酸(lg，4.6mmol)，N-叔丁基-3-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺(1.3952g，5. Immo 1)和 三乙胺(1. 37g，13. 8mmol, 1. 886mL)的二氯甲烷溶液中。将反应室温搅拌1小时。将反应 减压浓缩并将残余物经乙酸乙酯溶解，用水、碳酸氢钠和盐水洗涤。将有机相真空浓缩，得 到标题化合物(1. 36g)。MS (ESI) m/z 479. 3[M+H] +Β:Ν-,叔丁某-3-((4-(4_(3-异丁某脲某)-3_(三氟甲氧,某)苯甲酰某)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺将3-((4-(4_氨基_3-(三氟甲氧基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_叔丁 基苯甲酰胺(250mg，0. 525mmol)和4-硝基苯酚氯甲酸酯(106mg，0. 525mmol)合并并在二 氯甲烷中搅拌1小时。加入异丁基胺(0. 115g，1. 6mmol,0. 156mL)并将反应混合物搅拌30 分钟。反应混合物用水稀释并冲洗通过疏水性玻璃料。将有机相真空浓缩并通过碱性反相 HPLC 纯化，得到标题化合物(20mg)。MS (ESI) m/z 578. 5[M+H] +实施例2ON-叔丁基-3-((4-(5-氯-4-(3-(环丙基甲基)脲基)乙氧基苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 A_l 3- ((4- (4-氨基氯_2_乙氧基苯甲酰基)哌嗪基)甲基)~N~叔丁基 苯甲酰胺 将1-丙烷膦酸环酐(5. 90g，9. 2mmol，5. 52mL)滴加到含4_氨基_5_氯_2_乙氧基 苯甲酸(lg,4. 6mmol), N-叔丁基-3-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺(1.40g，5. Immo 1)和三 乙胺(1.401g，13.8mmOl，1.93mL)的二氯甲烷溶液中。将反应混合物室温搅拌2小时。将 反应减压浓缩并将残余物溶解在乙酸乙酯中，用水、碳酸氢钠和盐水洗涤。将有机相真空浓 缩，得到标题化合物(2.08g)。 MS (ESI) m/z 474. 1 [M+H] +B :N-叔丁基-3-((4-(5-氯-4-(3-(环丙基甲基)脲基)_2_乙氧基苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺将3-((4-(4-氨基-5-氯-2-乙氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)_N_叔丁基 苯甲酰胺(250mg，0. 525mmol)和4-硝基苯酚氯甲酸酯(425. 7mg,0. 525mmol)合并并在二 氯甲烷中搅拌1小时。加入环丙基甲基胺(0. 114g，1. 6mmol,0. 139mL)并将反应搅拌30分 钟。反应混合物用水稀释并冲洗通过疏水性玻璃料。将有机相减压浓缩并通过碱性反相 HPLC纯化，得到标题化合物(9. Img)。MS (ESI) m/z 570. 5 [M+H]+实施例21N-叔丁基-3-((4-(3-甲基-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺 A^ 3-((4-(4-氡某-3-甲某苯甲酰某)哌嗪某)甲某),叔丁某苯甲酰胺 向搅拌的含4-氨基-3-甲基苯甲酸(3.31mmol，0.50g)，N-叔丁基_3_(哌 嗪-1-基甲基)苯甲酰胺(3. 45mmol,0. 95g)和三乙胺(14. 35mmol,2. OOmL, 1. 452g)的二 氯甲烷(IOmL)溶液中滴加1-丙烷膦酸环酐(6. 75mmol,4mL,4. 30g，50%在乙酸乙酯中)。 将混合物搅拌1小时。此后，加入乙酸乙酯并将有机混合物用饱和碳酸氢钠(x2)，水(x2) 洗涤，最后用盐水洗涤。有机层用硫酸钠干燥并真空浓缩，得到标题化合物(0.60g)。MS (ESI) m/z 409. 3 [M+H]+
B :N-叔丁基-3-((4-(3-甲基-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺向搅拌的含3-((4-(4_氨基-3-甲基苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_叔丁 基苯甲酰胺(0. 153mmol，62. 5mg)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入4-硝基苯基氯甲酸酯 (0. 153mmol，30. 8mg)。在搅拌1小时之后，加入2，2-二甲基丙烷-1-胺(0. 306mmol，
26.7mg)并继续搅拌1小时。将反应真空浓缩并将残余物溶解于甲醇(ImL)。通过碱性反 相HPLC纯化，得到标题化合物(11. 5mg)。MS (ESI) m/z 522. 7[M+H] +实施例22N-叔丁基-3-((4-(3-甲氧基-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺 A^. 3- ((4- (4-氨基_3_甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-N-叔丁基苯甲酰 胺 向搅拌的含4-氨基-3-甲氧基苯甲酸(5.98讓01，^)，^叔丁基-3-(哌嗪-1-基 甲基)苯甲酰胺(5. 99mmol,1.65g)和三乙胺(28. 7讓ol，4mL，2. 90g)的二氯甲烷(20mL) 溶液中滴加1-丙烷膦酸环酐(13. 50mmol,8mL,8. 59g，在乙酸乙酯中的50%溶液)。在搅拌 1小时之后，加入乙酸乙酯并将有机混合物用饱和碳酸氢钠(x2)，水(x2)洗涤，最后用盐水 洗涤。有机相用硫酸钠干燥并真空浓缩，得到标题化合物(1. 2g)。MS (ESI) m/z 425. 3 [M+H] +B :N-叔丁基-3- ((4- (3_甲氧基(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺向搅拌的含3-((4-(4_氨基-3-甲氧基苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_叔 丁基苯甲酰胺(0. 155mmol，66mg)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入4-硝基苯基氯甲酸酯 (0. 155mmol，31.3mg)。在搅拌1小时之后，加入2，2-二甲基丙烷-1-胺(0. 31 Immol，
27.Img)并继续搅拌1小时。将反应真空浓缩并将残余物溶解于甲醇(ImL)。通过碱性反 相 HPLC 纯化，得到标题化合物(35mg)。MS (ESI) m/z 539. 0[Μ+Η] +实施例23N-叔丁某-3-((4-(4-(3-新戊,某脲某)-2-(三氟甲某)苯甲酰某)哌嗪某) 甲基)苯甲酰胺 A^. 3- ((4- (4-氨基(三氟甲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)~N~叔丁基 苯甲酰胺 步骤1 向搅拌的含N-叔丁基-3-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺(3.99mm0l，l. Ig)， 4-硝基-2-(三氟甲基)苯甲酸(3. 83mmol,0. 9g)和三乙胺(28. 7mmol，4mL，2. 90g)的二 氯甲烷(20mL)溶液中滴加1-丙烷膦酸环酐(8.94mmol，5. 3mL，5. 69g，在乙酸乙酯中的 50%溶液)。在搅拌1小时之后，加入乙酸乙酯并将有机混合物用饱和碳酸氢钠(x2)，水 (x2)洗涤，最后用盐水洗涤。有机混合物用硫酸钠干燥并真空浓缩，得到中间体N-叔丁 基-3-((4-(4-硝基-2-(三氟甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺。步骤2 向搅拌的N-叔丁基-3-((4-(4_硝基_2_(三氟甲基)苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺(2. 234mmol, 1. Ig)和铁粉(22. 38mmol, 1. 25g)在异丙醇(IOmL) 中的混合物中加入IM盐酸(3. OOmmol, 3mL)。将反应搅拌12小时，然后真空浓缩。加入二氯 甲烷并将有机混合物用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(0. 86g)。 MS (ESI) m/z 463. 5[M+H] +B :Ν-,叔丁某-3-((4-(4_(3-新戊某脲某)-2_(三氟甲某)苯甲酰某)哌嗪某) 甲基)苯甲酰胺向搅拌的含3-((4-(4_氨基_2-(三氟甲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_叔 丁基苯甲酰胺(0. 123mmol，57mg)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入4-硝基苯基氯甲酸酯 (0. 123mmol，24. 84mg)。在搅拌1小时之后，加入2，2-二甲基丙烷-1-胺(0. 123mmol, 10. 74mg)并继续搅拌1小时。将反应减压浓缩并将残余物溶解于甲醇(ImL)。通过碱性反 相HPLC纯化，得到标题化合物(27mg)。MS (ESI) m/z 577. 0[Μ+Η] +实施例24N-叔丁某-3-((4_(2，3-二氟新戊,某脲某)苯甲酰某)哌嗪某)甲 基)苯甲酰胺 A_l 3-((4-(4-氨基-2, 3-二氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)-N-叔丁基苯甲酰胺 向在二氯甲烷(30mL)中的4_氨基_2，3_ 二氟苯甲酸(4. 19mmol, 725mg)和N-叔 丁基-3-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺(2. 54mmol,700mg)和三乙胺(10. 76mmol,l. 5mL, 1089mg)滴加1-丙烷膦酸环酐(6.75讓01，41^，429611^，在乙酸乙酯中的50%溶液)。将 混合物搅拌2小时，然后加入乙酸乙酯。有机混合物用饱和碳酸氢钠、水、和饱和氯化钠 洗涤。有机相用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到标题化合物(1.28g)。MS (ESI) m/z 431. 6[M+H] +Β:Ν-,叔丁某-3-((4_(2，3-二氟新戊某脲某)苯甲酰某)哌嗪某)甲 基)苯甲酰胺向搅拌的含3-((4-(4_氨基-2，3_ 二氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_叔 丁基苯甲酰胺(0.077mmol，33mg)的二氯甲烷(ImL)溶液中加入4-硝基苯基氯甲酸酯 (0. 080mmol，16. 22mg)。在搅拌1小时之后，加入2，2-二甲基丙烷-1-胺(0. 077mmol， 150 μ 1,6. 68mg)并继续搅拌1小时。将反应减压浓缩并将残余物溶解于甲醇(ImL)。通过 酸性的反相HPLC和强阳离子交换柱色谱法纯化，得到标题化合物(7mg)。MS (ESI) m/z 544. 3 [M+H] +按类似方式制备以下化合物MS :Ν-,叔丁某-3-((4-(2，3-二氟异戊某脲某)苯甲酰某)哌嗪某) 甲基)苯甲酰胺MS (ESI) m/z 544. 3 [M+H]+24〇力-叔丁基-3-((4-(4-(3-丁基脲基)-2,3-二氟苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺MS (ESI) m/z 530. 3 [M+H]+240 :N-叔丁基-3-((4-(2, 3-二氟-4-(3-异丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基) 甲基)苯甲酰胺MS (ESI) m/z 530. 3 [M+H]+24E :N-叔丁基-3-((4-(4-(3_(环丙基甲基)脲基)_2，3_ 二氟苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺MS (ESI) m/z 528. 3 [M+H]+实施例25N-叔丁基-3-((4-(4-(3-环丁基脲基)-2, 3-二氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺盐酸盐 在2分钟内向搅拌的含双(三氯甲基)碳酸酯(0. 26mmol,76mg)的二氯甲烷(3mL) 溶液中滴加3-((4-(4_氨基-2，3-二氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-N-叔丁基苯甲酰 胺(0. 6mmol，257mg)和N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(0. IlmL)在二氯甲烷(2mL)中的混 合物。在搅拌30分钟之后，加入环丁基胺(1. 192mmol,0. 113mL,85mg)和N-乙基-N-异丙 基丙烷-2-胺(0. 22mL)的混合物。在搅拌2小时之后，反应混合物用二氯甲烷和水稀释。 分离有机层，用硫酸钠干燥并通过碱性反相HPLC纯化。将水/乙腈级分真空浓缩。将残余 物在二氯甲烷(ImL)中溶解并加入含2M盐酸(2mL)的乙醚。减压除去挥发物。在50°C真 空烘箱中干燥过夜，得到标题化合物(170mg)。MS (ESI) m/z 528. 5[M+H] +
实施例26N-,叔丁某-3-((4_(2-氯,-4-(3_(环丙某甲某)脲某)氟,苯甲酰某)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 A^ 4-氨基-2-氯-3-氟苯甲酸将4-氨基-2-氯-3-氟苯甲腈(500mg，2. 93mmol)和氢氧化钠(4M，18mL)与乙醇 (SmL)混合并加热回流18小时。此后，将混合物冷却到室温并加入IM盐酸，直到达到pH 1。 加入乙酸乙酯并分离有机层并用水和盐水洗涤。有机相用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得 到标题化合物(500mg)。MS (ESI)m/z 188. 1[M-H]_B :3-( (4-(4-氨基-2-氯-3-氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)-N-叔丁基苯甲 酰胺 向含4-氨基-2-氯-3-氟苯甲酸(2. 64mmol，500mg)和N-叔丁基_3_ (哌嗪基 甲基)苯甲酰胺(2. 54謹ο l，700mg)和三乙胺(10. 76mmol，1. 5mL，1089mg)的二氯甲烷 (30mL)中加入1-丙烷膦酸环酐(6. 75mmol，4mL，4296mg，在乙酸乙酯中的50%溶液)。在 搅拌2小时之后，加入乙酸乙酯。有机混合物用饱和碳酸氢钠、水、和饱和氯化钠洗涤。有 机混合物用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗的残余物通过二氧化硅色谱法(用含5%甲醇 的二氯甲烷洗脱)纯化，得到标题化合物(325mg)。MS (ESI) m/z 447. 1[M+H] +
C:N_,叔丁某-3-((4_(2-氯,-4-(3_(环丙某甲某)脲某)氟龙甲酰某)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺向搅拌的含双(三氯甲基)碳酸酯(0.076mmol，22.60mg)的二氯甲烷(3mL)溶 液中加入三乙胺(40mL)和含3-((4-(4_氨基-2-氯-3-氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲 基)-N-叔丁基苯甲酰胺(0. 206mmol, 92mg)的二氯甲烷(3mL)。将反应混合物加热回流2小 时。此后，将反应冷却到室温并加入环丙基甲基胺(35μ l，0.412mmol)和三乙胺(35 μ 1)。 在搅拌30分钟之后，减压除去挥发物并将粗的残余物通过二氧化硅色谱法(用含5%甲醇 的二氯甲烷洗脱)纯化，得到标题化合物(80mg)。MS (ESI) m/z 544. 3[M+H] +实施例27N-,叔丁某-3-((4_(3-氯,-4-(3_(环丙某甲某)脲某)氟,苯甲酰某)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 A :3_( (4-(4-氨基-3-氯-2-氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)-N-叔丁基苯甲 酰胺 向含4-氨基-3-氯-2-氟苯甲酸(0. 754mmol，143mg)，N-叔丁基-3-(哌嗪-1-基 甲基)苯甲酰胺(0. 754mmol，208mg)和三乙胺(3. 02mmol，0. 421mL，305mg)的二氯甲烷 (8mL)中加入1-丙烷膦酸环酐(1.886mmol，l. 117mL，1200mg，在乙酸乙酯中的50%溶液)。 在搅拌2小时之后，加入乙酸乙酯。有机溶液用饱和碳酸氢钠、水、和饱和氯化钠洗涤。有机 相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过二氧化硅色谱法纯化，得到标题化合物(155mg)。MS (ESI) m/z 447. 3[M+H] +B^ N-叔丁某-3-((4_(3-氯,-4-(3_(环丙某甲某)脲某)_2_氟苯甲酰某)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺向搅拌的含双(三氯甲基)碳酸酯(0. 128mmol,38. Img)的二氯甲烷(6mL)溶液 中加入三乙胺(0. 867mmol,0. 121mL,88mg)和3-((4-(4-氨基-3-氯-2-氟苯甲酰基)哌 嗪-1-基)甲基)-N_叔丁基苯甲酰胺(0. 347mmol，155mg)在二氯甲烷(6mL)中的混合 物。将混合物加热回流2小时，之后冷却到室温。加入环丙基甲基胺(0. 694mmol,0. 060mL, 49. 3mg)并将混合物搅拌2小时。此后，将反应减压浓缩并通过二氧化硅色谱法纯化，得到 标题化合物(17mg)。MS (ESI) m/z 544. 3[M+H] +
按类似方式制备以下化合物27B :N-叔丁基-3-((4-(3-氯-2-氟-4-(3-异丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基) 甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 546. 5[M+H] +实施例28N-,叔丁某-3-((4-(6-(3-苯某脲某)‘烟酰某)哌ff泰某)甲某)苯甲酰胺2， 2,2-三氟乙酸盐 A_l 6-(3-苯基脲基)烟酸中酯 向含6-氨基烟酸甲酯(500mg，3. 29mmol)的N，N- 二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加 入异氰酸苯酯(358 μ L，3. 29mmol)。将混合物加热到100°C，保持2小时，然后真空浓缩，得 到标题化合物(928mg)。MS (ESI) m/z 272. 1[M+H] +B^. 6-(3-苯基脲基)烟酸 在室温将6-(3-苯基脲基)烟酸甲酯(200mg，0. 43mmol)溶解于甲醇(2mL)。力口 入氢氧化锂(100mg，4. 17mmol)，随后加入水(10. 5mL)。将混合物加热到50°C并搅拌过夜。 通过添加浓盐酸使混合物达到PH4-5。然后过滤所形成的固体并真空干燥，得到标题化合物 (69mg)。MS (ESI) m/z 258. 1[M+H] +C :Ν-,叔丁某-3-((4-(6-(3-苯某脲某)’烟酰某)哌ff泰某)甲某)苯甲酰胺 2,2,2-三氟乙酸盐向N-叔丁基-3-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺二盐酸盐(16π^，46μπι01)和N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(20.4μ 1，117μπι01)在N，N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物加 Λ 6- (3-苯基脲基)烟酸(IOmg, 39 μ mol)，随后加入O- (7-氮杂苯并三唑基)-N，N，N， N-四甲基脲六氟磷酸盐(18mg，47. 3 μ mol, HATU)。将溶液室温搅拌16小时。将反应混合 物真空浓缩并在二氯甲烷(IOmL)和水(IOmL)之间分配。水层用二氯甲烷提取(x3)。将合 并的有机层干燥并真空浓缩。将得到的残余物溶解于甲醇并通过酸性的反相HPLC纯化，得 到标题化合物(19. 9mg)。MS (ESI) m/z 515. 1[M+H] +实施例29N-叔丁某-3-((4-(5-(3-苯某脲某)吡嗪羰某)哌嗪某)甲某)苯甲酰 胺2, 2, 2-三氟乙酸盐 A^吡嗪-2, 5-二甲酸二乙酯将吡嗪-2，5-二甲酸(4. OOg, 23. 79mmol)和盐酸(1M，在乙醇中)的混合物密封在 压力容器中并加热到80°C，保持48小时。将浑浊的混合物过滤通过短的硅藻土垫并将滤液 真空浓缩。将残余物在乙酸乙酯和碳酸氢钠饱和水溶液之间分配。分离有机层，用盐水洗 涤，用硫酸镁干燥并真空浓缩，得到标题化合物(1. 84g)。MS (ESI) m/z225. 0[Μ+Η] +B :5-(肼羰基)吡嗪-2-甲酸乙酯将吡嗪-2，5-二甲酸二乙酯(1.75g,7.81mmol)和乙醇(15mL)的混合物加热到 75°C，得到均质的溶液。在冷却到室温之后，在4小时向溶液中滴加含胼一水合物(0. 281g， 7. 03mmol)的乙醇(3. 5mL)溶液。在室温搅拌过夜之后，有固体从反应混合物沉淀析出。通 过过滤收集固体并真空干燥，得到标题化合物(1. 05g)。MS (ESI) m/z 211. 1[M+H] +C 5-(叠氮,某羰某)_泰-2-甲酸乙酯在剧烈搅拌下将5_(胼羰基)吡嗪-2-甲酸乙酯(1.00g，4.76mmOl)，亚硝酸钠 (1. 76g，25. 5mmol)，水(18mL)和二氯甲烷(18mL)的混合物冷却到0-5°C (冰浴)。在30分 钟内滴加6M盐酸(7.4mL)，保持温度低于10°C。在搅拌另外的30分钟之后，分离有机层， 用硫酸镁干燥并真空浓缩，得到标题化合物(1. Olg)。MS (ESI) m/z 222. 2 [M+H] +D^. 5_(叔丁氧基羰基)吡嗪-2-甲酸乙酯将5-(叠氮基羰基)吡嗪-2-甲酸乙酯(1. OOg, 4. 52mmol)，叔丁醇(1. 5mL, 20. 2mmol)和甲苯(15mL)的混合物加热回流1小时。在冷却到室温之后，收集固体沉淀物， 得到标题化合物(0. 75g)。MS(ESI)m/z268. 3[M+H] +E^. 5-(叔丁氧基羰基)吡嗪-2-甲酸向5-(叔丁氧基羰基)吡嗪-2-甲酸乙酯(0. 742g，2. 78mmol)和甲醇(20mL)的 混合物中加入含氢氧化钾(0. 23g，4. lmmol)的水(2mL)并将反应室温搅拌过夜。真空除去溶剂并将残余物溶解于水(5mL)并用IM盐酸酸化到pH 2。通过过滤收集固体沉淀物，得到 标题化合物(0. 61g) ο MS (ESI) m/z 240. 2 [M+H]+F:5-(4-(3_(,叔丁某M某甲酰某)苄某)哌ff泰羰某)吡ff泰某M某甲酸叔 丁酯 将5-(叔丁氧基羰基)吡嗪-2-甲酸(68. 5mg，0. 286mmol)，0- (7-氮杂苯并 三唑-1-基)-N，N, N, N-四甲基脲六氟磷酸盐(114mg，0. 3mmol), N-乙基_Ν_异丙基丙 烷-2-胺(330mg，2. 58mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(ImL)的混合物室温搅拌30分钟。加 入N-叔丁基-3-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺二盐酸盐(100mg，0. 286mmol)并将混合物室 温搅拌过夜。将反应减压浓缩并且残余物在乙酸乙酯和水之间分配。分离有机层，用水和 盐水洗涤，用硫酸镁干燥并真空浓缩，得到标题化合物(0. 12g)。MS (ESI) m/z 497. 3 [M+H]+G^. 3-((4-(2- Μ-5- ^ )哌嗪 某)甲某),叔丁某苯甲酰胺 将5-(1-(3-(叔丁基氨基甲酰基)苄基)哌嗪-4-羰基)吡嗪_2_基氨基甲酸叔 丁酯(实施例巡；120mg，0. 242mmol)，二氯甲烷(2mL)和三氟乙酸(2mL)的混合物室温搅 拌3小时，然后真空浓缩。将残余物与乙醚研磨，然后重力过滤通过有凹槽的滤纸。将收集 的固体在乙酸乙酯和饱和含水碳酸氢钠之间分配。分离水层并用乙酸乙酯提取。合并的有 机层用硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(89mg)。MS(ESI)m/z 397. 2[M+H]+H :N-叔丁基-3-((4-(5-(3-苯基脲基)吡嗪羰基)哌嗪基)甲基)苯 甲酰胺2, 2, 2-三氟乙酸盐将3-((4-(2-氨基吡嗪-5-羰基)哌嗪基)甲基)_N_叔丁基苯甲酰胺(15mg， 0. 038mmol)，异氰酸苯酯(0. 01mL,0. 092mmol)和二噁烷(0. 5mL)的混合物在70°C搅拌过 夜。将反应减压浓缩并通过酸性的反相HPLC纯化，得到标题化合物(3mg)。MS (ESI)m/z 516. 3[M+H]+实施例30N-叔丁某-3- ((4- (4- (3-环丁某脲某)苯甲酰某)，4_ 二氮杂环庚烷某) 甲基)苯甲酰胺2, 2, 2-三氟乙酸盐 A^ 4-(3_环丁基脲基)苯甲酸乙酯将环丁基胺(27. 91g，392. 4mmol,33. 5mL)滴加到搅拌的含4-异氰酸酯基苯甲酸 乙酯(25g，130. Smmol)的二氯甲烷溶液中。在搅拌40分钟之后，将所形成的固体沉淀物过 滤并干燥，得到标题化合物(30. 28g)。MS (ESI) m/z 263. 1[M+H] +B^. 4-(3-环丁基脲基)苯甲酸将4-(3_环丁基脲基)苯甲酸乙酯(49.9mmol，13. Ig)悬浮在乙醇(400ml)中并 用氢氧化钠(300mmol，74.9ml)处理。然后将混合物回流搅拌18小时。将反应冷却，用甲 苯(IOOmL)稀释并真空浓缩。用5M含水盐酸酸化到pH 3，得到白色固体。通过真空过滤收 集固体，用冷乙醇洗涤并真空干燥，得到标题化合物，为白色粉末(ll.Og)。1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ 1. 73 (2Η, m)，1· 92 (2H, m)，2. 32 (2H, m)，4. 22 (1H, m)， 7. 45 (2H, d) ,7. 90 (2H, d)。C :4-(3-(,叔丁某t[某甲酰某)苄某)-1,4-二氮,杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯 向含1-高哌嗪甲酸叔丁酯(0. 25g，1.25mmol)和N-叔丁基_3_(氯甲基)苯甲 酰胺(0. 470g，1. 25mmol)的四氢呋喃(4mL)溶液中加入N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺 (0. 33mL, 1. 88mmol)。将得到的混合物在80°C搅拌16小时。将混合物冷却到室温，用二氯 甲烷(50mL)稀释并用饱和氯化铵(水溶液)和盐水洗涤。将有机相干燥(硫酸钠)，过滤 并真空浓缩。残余物通过二氧化硅上的柱色谱法(使用二氯甲烷/甲醇的溶剂梯度)纯化， 得到标题化合物(0. 435g)，为白色固体。MS (ESI)m/z389. 9[M+H] +D^ 3-((l,4- 二氮,杂环庚烷-1-某)甲某)-N-叔丁某苯甲酰胺盐酸盐 将4-(3_(叔丁基氨基甲酰基)苄基)-1，4_ 二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁基酯 (0. 53g，1. 36mmol)用盐酸的乙醇溶液(3mL，含14. 5重量％盐酸的乙醇)处理。将得到的 混合物室温搅拌2小时。将混合物真空浓缩，与二氯甲烷共沸(x2)并真空干燥，得到标题 化合物(0. 394g)，为白色泡沫状固体。MS (ESI) m/z 290. 1[M+H] +E :N-叔丁某-3- ((4- (4- (3-环丁某脲某)苯甲酰某)，4_ 二氮杂环庚烷某) 甲基)苯甲酰胺2, 2, 2-三氟乙酸盐向含3-((1，4-二氮杂环庚烷-1-基)甲基)-N-叔丁基苯甲酰胺盐酸盐(0. 04g，0. 138mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(1. 5mL)溶液中加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N， N，N，N-四甲基脲六氟磷酸盐(0.052g，0. 138mmol, HATU)，4_(3_环丁基脲基)苯甲酸 (0. 032g,0. 138mmol)和 N-乙基-N-异丙基丙烧-2-胺(0. 060mL,0. 345mmol)。将反应混 合物室温搅拌20小时并真空浓缩。残余物用二氯甲烷(IOmL)稀释并用饱和氯化铵(水溶 液)和盐水洗涤。将有机相干燥(硫酸钠)，过滤并真空浓缩。HPLC纯化得到标题化合物 (0. 049g)。MS (ESI) m/z 506. 1 [M+H]+实施例31(S) -N-叔丁基-3- ((4- (4- (3~环丁基脲基)苯甲酰基)~3~甲基哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺2, 2, 2-三氟乙酸盐 A^ (S)-4-(4-(3-环丁某脲某)苯甲酰某)_3_甲某哌嗪甲酸叔丁酯 向含(S)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0. IOg, 0. 50mmol)的N，N-二甲基甲酰胺 (5mL)溶液中加入0-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N，N-四甲基脲六氟磷酸盐(0. 190g， 0. 50mmol，HATU)，4-(3-环丁基脲基)苯甲酸(0. 117g，0. 50mmol)和 N-乙基 _N_ 异丙基丙 烷-2-胺(0. 13mL，0. 75mmol)。将反应混合物室温搅拌20小时并真空浓缩。残余物用二氯 甲烷(15mL)稀释并用饱和氯化铵(水溶液)和盐水洗涤。将有机层干燥(硫酸钠)，过滤 并真空浓缩。粗的物质通过二氧化硅上的柱色谱法(使用二氯甲烷/甲醇的溶剂梯度)纯 化，得到标题化合物(0. 145g)，为白色固体。MS (ESI) m/z 416. 8 [M+H]+B^ (S)-I-环丁某-3-(4-(2-甲某哌嗪羰某)苯某)脲盐酸盐 将4-(4-(3_环丁基脲基)苯甲酰基)-3_甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0. 20g， 0. 48mmol)用盐酸的乙醇溶液(2mL，含14. 5重量％盐酸的乙醇)处理。将得到的混合物 室温搅拌2小时。将混合物真空浓缩，与二氯甲烷共沸(x2)并真空干燥，得到标题化合物 (0. 152g)，为白色泡沫状固体。MS (ESI) m/z 317. 0 [M+H]+C^. (S) -N-叔丁基-3- ((4- (4~ (3~环丁基脲基)苯甲酰基)~3~甲基哌嗪基) 甲基)苯甲酰胺2, 2, 2-三氟乙酸盐
向含(S)-I-环丁基-3-(4-(2-甲基哌嗪羰基)苯基)脲盐酸盐(0. 02g， 0. 063mmol)和N-叔丁基-3-(氯甲基)苯甲酰胺(0. 014g，0. 063mmol)的四氢呋喃(ImL) 中加入N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(0. 028mL,0. 158mmol)。将得到的混合物在80°C搅 拌16小时。将混合物冷却到室温，用二氯甲烷(50mL)稀释并用饱和氯化铵(水溶液)和盐 水洗涤。将有机相干燥(硫酸钠)，过滤并真空浓缩。HPLC纯化得到标题化合物(0. 003g)。 MS (ESI)m/z 506. 1[M+H] +实施例32N-叔丁基-3-(((2S,6R)-4-(4_(3-环丁基脲基)苯甲酰基)-2,6_ 二甲基哌 嗪-1-某)甲某)苯甲酰胺2，2，2_三氟乙酸盐 A^. (3S,5R)-3,5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯向冷却到0°C的搅拌的含2，6_顺式-二甲基哌嗪(1.0g，8. 76mmol)的二氯甲烷 (19mL)溶液中加入含二碳酸二叔丁酯(1. 87g，8. 58mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液。使反应混 合物缓慢回温到室温并搅拌20小时。混合物用二氯甲烷(15mL)稀释并用饱和碳酸钾(水 溶液)和盐水洗涤。将有机相干燥(硫酸钠)，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(1.29g)， 为白色固体。MS (ESI) m/z 215. 4[M+H] +B^ (3S，5R)-4-(3_(叔丁某t[某甲酰某)苄某)_3，5_ 二甲某哌嗪甲酸叔丁 塵 向含(3S，5R)-3，5-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.05g,0. 23mmol)和 N-叔丁 基-3_(氯甲基)苯甲酰胺(0. 052g，0. 23mmol)的四氢呋喃(2mL)溶液中加入N-乙基-N-异 丙基丙烷-2-胺(0. 080mL,0. 46mmol)。将得到的混合物在80°C搅拌16小时。将混合物冷 却到室温，用二氯甲烷(50mL)稀释并用饱和氯化铵(水溶液)和盐水洗涤。将有机相干燥 (硫酸钠)，过滤并真空浓缩。粗的物质通过二氧化硅上的柱色谱法(使用二氯甲烷/乙酸 乙酯的溶剂梯度)纯化，得到标题化合物(0.070g)，为白色固体。MS (ESI) m/z 404. 4[M+H] +C^. N-叔丁基-3-(((2S,6R)-2,6-二甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺盐酸盐 将(3S，5R)-4-(3_(叔丁基氨基甲酰基)苄基)_3，5_ 二甲基哌嗪甲酸叔丁酯 (0. 07g，0. 17mmol)用盐酸的乙醇溶液(2mL，含14. 5重量％盐酸的乙醇)处理。将得到的 混合物室温搅拌2小时。将混合物真空浓缩，与二氯甲烷共沸(x2)并真空干燥，得到标题 化合物(0. 052g)，为白色泡沫状固体。MS (ESI) m/z 304. 4[M+H] +D :N~ 叔丁基-3- (((2S,6R) ~4~ (4~ (3~ 环丁基脲基)苯甲酰基)_2,6_ 二 甲基哌 嗪-1-某)甲某)苯甲酰胺2，2，2_三氟乙酸盐向含N-叔丁基-3-(((2S，6R)_2，6-二甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺盐 酸盐(0.025g，0.083mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入0-(7-氮杂苯并三 唑-1-基)-N，N, N, N-四甲基脲六氟磷酸盐(0. 032g，0. 083mmol, HATU)，4-(3-环丁基脲 基)苯甲酸(0. 019g,0. 083mmol)和 N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(0. 036mL，0. 21mmol)。 将反应混合物室温搅拌20小时并真空浓缩。残余物用二氯甲烷(IOmL)稀释并用饱和氯化 铵(水溶液)和盐水洗涤。将有机相干燥(硫酸钠)，过滤并真空浓缩。酸性的反相HPLC 纯化得到标题化合物(0.0039g)。MS (ES I) m/z 520. 2[M+H] +实施例33(R) -N-叔丁基-3- ((4- (4_ (3-(环丙基甲基)脲基)-3-氟苯甲酰基)-2-甲基哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 A -AR)-4-(3-(MT^mMmm)苄某)-3-甲某哌ff泰-ι- ^murm 将(R)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯加入到包含N-叔丁基_3_(氯甲基)苯甲酰 胺(3. 38g，14. 9mmol)，碳酸钾(4. Ilg, 29. 8mmol)和碘化钠(催化量)的乙腈溶液中。将反 应回流搅拌2小时。减压除去乙腈。将得到的残余物溶解在二氯甲烷中并过滤。将滤液真 空浓缩，得到标题化合物(5.82g)。MS (ESI) m/z 390. 5 [M+H] +B_l (R) -N-叔丁基-3- ((2-甲基哌嗪基)甲基)苯甲酰胺 将(R)-4-(3-(叔丁基氨基甲酰基)苄基)-3_甲基哌嗪甲酸叔丁酯(8. 03g, 20.61mmol)在二氯甲烷三氟乙酸(1 1)的混合物中搅拌2小时。将反应混合物真空浓 缩并通过强阳离子交换柱色谱法纯化，得到标题化合物(3. 06g)。MS (ESI) m/z 290. 3[M+H] +C^. (R) -3- ((4- (4~氨基氟苯甲酰基)~2~甲基哌嗪基)甲基)~N~叔丁 基苯甲酰胺 将1-丙烷膦酸环酐(1.967g，3mmOl，1.840mL，在乙酸乙酯中的50%溶液)滴加 到含(R)-N-叔丁基-3-((2-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺(500mg，L7mmol)，4-氨 基-3-氟苯甲酸(239. 7mg，1. 5mmol)和三乙胺(469mg，4. 5mmol，1. 84mL)的二氯甲烷溶液 中。将反应室温搅拌2小时。减压除去二氯甲烷并将残余物溶解在乙酸乙酯中，用水、碳酸 氢钠和盐水洗涤。将有机层真空浓缩，得到标题化合物(476. 3mg)。MS (ESI) m/z 427. 4[M+H] +D^. (R) -N-叔丁基-3- ((4- (4- (3-(环丙基甲基)脲基)-3-氟苯甲酰基)-2-甲 基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺将(R) -3- ((4- (4-氨基_3_氟苯甲酰基)_2_甲基哌嗪基)甲基)-N-叔丁基 苯甲酰胺(119mg，0. 275mmol)和4-硝基苯酚氯甲酸酯(56mg，0. 275mmol)合并并在二氯甲 烷中搅拌1小时。加入环丙烷甲基胺(56. 8mg，0. 8mmol,0. 0694mL)并将反应搅拌另外的30 分钟。加入水并将反应混合物冲洗通过疏水性玻璃料。将有机相减压浓缩并通过碱性反相 HPLC 纯化，得到标题化合物(19. 8mg)。MS (ESI)m/z524. 7 [M+H] +实施例34(S)-N-,叔丁某-3-((4-(3-tt-4-(3-异丁某脲某)苯甲酰某)异丙某哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 L (S) - (4-氨某-3-氟苯某)(3-异丙某哌嗪某)甲酮 将1-丙烷膦酸环酐(1.752mmol，1.043mL，1115mg)加入到含(S)_2_异丙基哌 嗪-1-甲酸叔丁酯(0. 876mmol，200mg)，4-氨基-3-氟苯甲酸(0. 876mmol, 136mg)和三乙 胺(1. 752mmol,0. 244mL, 177mg)的二氯甲烷溶液中并室温搅拌2小时。此后，向反应加入 乙酸乙酯(IOOmL)。有机混合物用饱和碳酸氢钠、水洗涤，用硫酸钠干燥并真空浓缩。然后 将残余物溶解于二氯甲烷(5mL)中并加入三氟乙酸(17. 52mmol, 1997mg)。得到的溶液在室 温静置过夜。将反应真空浓缩并通过强阳离子交换色谱法纯化，得到标题化合物(200mg)， 为澄清的油状物。MS (ESI)m/z 266. 3[M+H] +B^. (S) -3- ((4- (4~氨基氟苯甲酰基)~2~异丙基哌嗪基)甲基)~N~叔 丁基苯甲酰胺 将(S)-(4-氨基-3-氟苯基)(3-异丙基哌嗪基)甲酮(0. 754mmol, 200mg)， N-叔丁基-3-(氯甲基)苯甲酰胺(0. 754mmol，170mg)，碳酸钾(1. 508mmol, 208mg)和碘化 钠(0.075mmOl，11.30mg)溶解于乙腈(20mL)并加热回流3小时。将反应真空浓缩并将粗 的物质溶解于乙酸乙酯并用水洗涤，用硫酸钠干燥并真空浓缩。然后将粗的残余物通过柱 色谱法(用二氯甲烷到二氯甲烷/甲醇(1% -5% )洗脱)纯化，得到标题化合物(160mg)， 为灰白色固体。MS(ESI)m/z 455. 4[M+H] +C (S) -N-,叔丁某-3- ((4- (3-氟-4- (3-异丁某脲某)苯甲酰某)-2-异丙某哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺在室温向搅拌的含(S) -3- ((4- (4-氨基-3-氟苯甲酰基)_2_异丙基哌嗪基) 甲基)-N-叔丁基苯甲酰胺(40mg，0.088mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入4-硝基苯基 氯甲酸酯(18. 62mg，0. 092mmol)。将反应混合物搅拌1小时，之后添加异丁基胺(6. 44mg, 0. 088mmol)。在搅拌2小时之后，将反应混合物施加到二氧化硅碳酸盐(carbonate)柱 上(2g)。将洗脱液真空浓缩并再溶解在甲醇中。通过HPLC纯化得到标题化合物(3mg)。 MS (ESI)m/z 554. 3[M+H]+实施例35N-,叔丁某-3-((4-(4-(3-(环丙某甲某)脲某)氟龙甲酰某)(氟用某)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 A^ (3-氟-4-硝基苯基)(3-(氟甲基)哌嗪基)甲酮将搅拌的3-氟-4-硝基苯甲酸(2g，10. 8mmol)在二氯甲烷(30mL)中的悬浮液冷 却到0°C (冰/水浴)。加入草酰氯(1. 646g，12. 97mmol)，随后加入N-甲基吡咯烷酮(ImL)， 得到溶液。将反应混合物在0°C搅拌1小时，然后减压浓缩。残余物与二氯甲烷共沸(x3)。 将残余物再溶解于二氯甲烷(20mL)中并冷却到0°C，之后加入三乙胺(64. 8mmol,6. 56g)和 1-(氟甲基)哌嗪二盐酸盐(10. 8mmol,2. 064g)。使反应混合物回温到室温并搅拌1小时， 之后施加到强阳离子交换柱上。使用含2M氨的甲醇从柱释放粗产物并使用二氧化硅色谱 法(4%甲醇/ 二氯甲烷)进行纯化，得到标题化合物(444mg)。MS (ESI) m/z 286. 4[M+H] +B^. N-叔丁基-3- ((4- (3~氟硝基苯甲酰基)~2~ (氟甲基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺 将搅拌的(3-氟-4-硝基苯基)(3_(氟甲基)哌嗪-1-基)甲酮(456mg，1. 6mmol)， N-叔丁基-3-(氯甲基)苯甲酰胺(361mg，1.6mmol)，三乙胺(3. Immol, 34Img)和碘化钠 (1. 6mmol,240mg)在乙腈(IOmL)中的混合物加热到60°C，保持几个小时。将反应减压浓缩。 然后将残余物溶解于二氯甲烷中并用水提取(x3)。将有机相干燥(硫酸钠)并真空浓缩。 粗的物质使用二氧化硅色谱法纯化，得到标题化合物(435mg)。MS (ESI) m/z 475.7[M+H] +C^. 3-((4-(4-氡某-3-氟龙甲酰某)-2-(氟甲某)哌嗪某)甲某)-N-叔丁 基苯甲酰胺 将N-叔丁基-3-((4-(3_氟-4-硝基苯甲酰基)-2_(氟甲基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺(435mg，0. 92mmol)，铁粉(558mg, IOmmol)和 IM 盐酸(1. 5mL, 1. 5mmol)在异 丙醇(30mL)中搅拌1小时。将反应减压浓缩并且残余物在二氯甲烷和水之间分配。分离 有机层，干燥(硫酸钠)并减压浓缩。粗产物使用二氧化硅色谱法进行纯化，得到标题化合 物(150mg)。MS(ESI)m/z 445. 6[M+H] +D :N-叔丁某-3- ((4- (4- (3-(环丙某甲某)脲某)氟苯甲酰某)(氟甲某) 哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺在室温向含3-((4-(4_氨基-3-氟苯甲酰基)-2_(氟甲基)哌嗪基)甲基)-N-叔丁基苯甲酰胺(150mg，0. 34mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入4-硝基苯基 氯甲酸酯(71. 4mg,0. 354mmol)。将反应混合物室温搅拌1小时，之后加入环丙烷甲基胺 (150 μ L)。将混合物室温搅拌过夜然后施加到二氧化硅碳酸盐柱上。将洗脱液减压浓缩并 再溶解在甲醇中。通过碱性反相HPLC纯化，得到标题化合物(2mg)。MS(ESI)m/z542. 5[M+H] +实施例36N-叔丁基-3-((4-(4-(3_环丁基脲基)氟苯甲酰基)_2, 2_ 二甲基哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 A^. (4-氨基-3-氟苯基)(3, 3-二甲基哌嗪-1-基)甲酮步骤1 向含2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酷(0.902mmol，0. 193g)的二氯甲 烷(5mL)加入 4-氨基-3-氟苯甲酸(0. 902mmol，0. 14g)和三乙胺(1. 805mmol，0. 252mL, 0. 183g)。向该混合物中加入1-丙烷膦酸环酐(1.805mmol,1.074mL,l. 149g，在乙酸乙酯中 的50%溶液)。在搅拌2小时之后，加入乙酸乙酯并将有机混合物用饱和碳酸氢钠、水、和 饱和氯化钠洗涤。有机层用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到中间体4- (4-氨基-3-氟苯 甲酰基)-2，2- 二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(264mg)。步骤2 向搅拌的4-(4-氨基-3-氟苯甲酰基)_2，2_ 二甲基哌嗪甲酸叔丁 酉旨(0. 569mmol,200mg)在二氯甲烷(2mL)中的混合物加入三氟乙酸(10. IOmmol，0. 75mL， 1151mg)。在搅拌1小时之后，将反应减压浓缩。将残余物溶解在二氯甲烷/甲醇中并加载 在强阳离子交换柱(5g)上，用二氯甲烷/甲醇洗脱。使用含2M氨的甲醇从柱洗脱产物。将 有机相真空浓缩，得到标题化合物(131mg)。MS (ESI) m/z 252. 3[M+H] +B^. 3- ((4- (4-氨基氟苯甲酰基)-2, 2_ 二甲基哌嗪基)甲基)~N~叔丁 基苯甲酰胺 向含(4-氨基-3-氟苯基)(3，3-二甲基哌嗪-1-基)甲酮(0. 52lmmol, 13Img) 的乙腈(5. 213mL)中加入N-叔丁基-3-(氯甲基)苯甲酰胺(0. 573mmol, 129mg)和三乙胺 (1. 040mmol, 145 μ 1，105mg)。加入催化量的碘化钠。将混合物加热回流3小时。使混合物冷 却并加入乙酸乙酯。将有机混合物用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过 二氧化硅色谱法(用含5%甲醇的二氯甲烷洗脱)纯化，得到标题化合物(90mg)。MS(ESI) m/z 441. 4[M+H] +C :N-叔丁基-3- ((4- (4- (3-环丁基脲基)-3-氟苯甲酰基)-2, 2- 二甲基哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺
向含3-((4-(4-氨基-3-氟苯甲酰基)-2，2-二甲基哌嗪-1-基)甲基)-N-叔丁 基苯甲酰胺(0. lmmol, 45mg)的二氯甲烷(1. 5mL)中加入4-硝基苯基氯甲酸酯(0. Ilmmol, 23mg)。将混合物搅拌2小时，之后加入环丁基胺(1. 757mmol, 125mg, 150 μ 1)。将混合物搅 拌另外的16小时，之后进行真空浓缩并通过酸性的反相HPLC纯化。使用强阳离子交换柱色 谱法得到产物的游离碱。将该物质冻干，得到标题化合物(16mg)。MS (ESI) m/z 538. 7 [M+H] +实施例37N-叔丁基-3-(1-(4-(4-(3-环丁基脲基)-3-氟苯甲酰基)哌嗪基)_2_甲基 丙基)苯甲酰胺 A^ 3-(l-羟基-2-甲基丙基)苯甲腈在氮气气氛下在0°C将含15%异丙基溴化镁的乙醚(23. 5mL, 24. Ommo 1)加入到搅 拌的3-甲酰基苯甲腈(2.62mg，20.0mmol)在无水四氢呋喃(18mL)中的溶液中。在0°C搅 拌1小时，然后在室温搅拌2小时，将混合物在乙酸乙酯和IM盐酸之间分配。水层用乙酸 乙酯提取并将合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物用二氧化硅柱 色谱法(用含9% -25%乙酸乙酯的庚烷洗脱)纯化，得到标题化合物(1. 164g)。1H WR(CDC13，400MHz) δ 0· 85(3H，d)，0· 95(3H，d)，1· 95(1H，七重峰)， 4. 44-4. 49 (1H, m)，7. 44 (1H, t)，7. 53-7. 58 (2H, m)，7. 63 (1H, s)。B^. 3-(1_羟基-2-甲基丙基)苯甲酸使3-(1_羟基-2-甲基丙基)苯甲腈(1. 16g,6. 62mmol)和IOM氢氧化钾(2. 40mL) 在乙醇(10. OmL)中的混合物在160°C经历微波辐射10分钟。将混合物真空浓缩并在乙醚 和水之间分配。水层用5M盐酸酸化并用二氯甲烷提取。合并的二氯甲烷提取物用盐水洗 涤，用硫酸钠干燥并真空浓缩，得到标题化合物(1. 072g)。1H 匪R (CDCl3,400MHz) δ 0. 84 (3Η, d)，0. 99 (3H, d)，1. 99 (1H,七重峰)，4. 48 (1H, d)，7. 46 (1H, t)，7. 59 (1H, d)，8. 01 (1H, d)，8. 05 (1H, s)。C^. N-叔丁基-3-(l-羟基-2-甲基丙基)苯甲酰胺使3- (1-羟基-2-甲基丙基)苯甲酸(677mg，3. 49mmol)，0- (7-氮杂苯并三 唑-1-基)-N，N, N, N-四甲基脲六氟磷酸盐(1.73g，4. 54mmol), N-乙基_Ν_异丙基丙 烷-2-胺(1. 2ImL, 6. 97mmol)和叔 丁基胺(510mg，6. 97mmol)在 N，N- 二甲基甲酰胺 (12. OmL)中的混合物在100°C经历微波辐射10分钟。将反应混合物真空浓缩并通过二 氧化硅柱色谱法(用含9% -33%乙酸乙酯的庚烷洗脱)纯化，得到标题化合物(718mg)。 MS (ESI)m/z 250. 4[M+H] +D. 4-(1-(3-(,叔丁某氡某甲酰某)苯某)_2_甲某丙某)哌嗪甲酸叔丁酯 步骤1 将含甲磺酰氯(165mg，1. 44mmol)的二氯甲烷(2. OmL)溶液加入到搅拌的 含N-叔丁基-3-(1-羟基-2-甲基丙基)苯甲酰胺(300mg，1. 20mmol)的二氯甲烷(8. OmL) 溶液中。搅拌1. 5小时之后，将混合物在二氯甲烷和碳酸氢钠水溶液之间分配。水层用二氯 甲烷提取并将合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并真空浓缩，得到中间体1-(3_(叔 丁基氨基甲酰基)苯基)丙基甲磺酸酯。
步骤2 将1- (3-(叔丁基氨基甲酰基)苯基)丙基甲磺酸酯，哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (447mg，2. 40mmol)和 N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(0. 623mL，3. 60mmol)在 N，N-二 甲基甲 酰胺(8. OmL)中的溶液在70°C搅拌4小时，然后在160°C经历微波辐射10分钟。将反应混 合物真空浓缩，用强阳离子交换柱色谱法处理并通过二氧化硅柱色谱法(用含20% -66% 乙酸乙酯的庚烷洗脱)纯化，得到标题化合物(16mg)。MS (ES I)m/z 418. 5[M+H] +E^. N-,叔丁某-3-(2-甲某-1-(哌嗪-1-某)丙某)苯甲酰胺 将4-(1-(3-(叔丁基氨基甲酰基)苯基)-2_甲基丙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (24mg，0. 057mmol)和 5M 盐酸(0. 20mL)在 1，4_ 二噁烷(2. OmL)中的混合物在 80°C搅拌 30 分钟。将反应混合物真空浓缩并用强阳离子交换柱色谱法处理，得到标题化合物(13. 6mg)。MS (ESI) m/z 318. 3[M+H] +F:3-(l~(4-(4-氨基氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)~2~甲基丙基)~N~叔丁基苯 甲酰胺 将N-叔丁基-3-(2-甲基-1-(哌嗪-1-基)丙基)苯甲酰胺(13.6mg，0. 043mmol)， 4-氨基-3-氟苯甲酸(10mg，0. 065mmol)，N-乙基-N-异丙基丙烷 _2_胺(1 lmg，0. 086mmol) 和1-丙烷膦酸环酐(55mg，0.086mmol，在乙酸乙酯中的50%溶液)在二氯甲烷(2. OmL)中 的混合物室温搅拌2小时。混合物用强阳离子交换柱色谱法处理并通过二氧化硅柱色谱法 (用含33%乙酸乙酯的庚烷洗脱，然后用含66%乙酸乙酯的庚烷洗脱)纯化，得到标题化合 物(11.8mg)。MS(ESI)m/z 455. 5[M+H] +G :N-叔丁基-3-(1-(4-(4-(3-环丁基脲基)-3-氟苯甲酰基)哌嗪基)_2_甲 基丙基)苯甲酰胺
将3-(1-(4-(4-氨基-3-氟苯甲酰基)哌嗪基)_2_甲基丙基)_N_叔丁基 苯甲酰胺(3. Omg,0. 0066mmol)和4-硝基苯基氯甲酸酯(1.5mg,0. 0073mmol)在二氯甲 烷(LOmL)中的混合物室温搅拌1小时。加入环丁基胺(cycloprobutylamine) (1. Omg, 0. 013mmol)并将混合物室温搅拌2小时。混合物用强阳离子交换柱色谱法处理并通过HPLC 纯化，得到标题化合物(1.6mg)。MS (ES I)m/z 552. 8[M+H] +实施例381-(4-(1-(5-(MT^mMmm)-2-甲氧,某苄某)哌ff泰-4-羰某)苯某)-3-as 基脲2, 2, 2-三氟乙酸盐 A^ 4-(4-(3_苯某脲某)苯甲酰某)哌嗪甲酸叔丁酯 在室温向含4-(3-苯基脲基)苯甲酸(13. 5g，52.68mmol)的乙腈(250mL)溶液中 加入哌嗪-1-甲酸叔丁酯(11.8g，63. 22mmol)，lH-苯并[d] [1,2,3]三唑-1-醇(21. Ig, 156. 5mmol, Η0ΒΤ)和1-乙基_3_(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(30g，156. 5mmol, EDCI)。将混合物在回流温度搅拌16小时，然后真空浓缩。残余物经过二氧化硅色谱法(含 0-5%乙酸乙酯的正-己烷作为洗脱剂)，得到标题化合物(15. Og)。MS (ESI) m/z 425. 1[M+H] +B^ 1-苯某-3-(4-(哌嗪-1-羰某)苯某)脲2，2，2_三氟乙酸盐 将4-(4-(3-苯基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(15. Og, 35. 34mmol)与 含50%三氟乙酸的二氯甲烷(200mL)在室温搅拌1小时。将反应真空浓缩，然后高真空干 燥过夜，得到标题化合物(15. 5g)。MS (ESI) m/z 325. 0[Μ+Η] +C^. 4-甲氧基-3-((4-(4-(3-苯基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯甲酸 甲酯 将1-苯基-3-(4-(哌嗪-1-羰基)苯基)脲(439mg, 1. Ommol)在乙腈(8mL)中在 室温搅拌1小时。加入N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(697111^，411111101)，随后加入含3-(氯 甲基)-4_甲氧基苯甲酸甲酯(215mg，1. Ommol)的乙腈(5mL)溶液。将混合物加热到45°C 并搅拌过夜。将混合物真空浓缩，用二氯甲烷(40mL)稀释并用饱和氯化铵水溶液(25mL)和 饱和氯化钠水溶液(25mL)洗涤。有机相用硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。残余物经过二氧 化硅色谱法(含0-10%甲醇的二氯甲烷作为洗脱剂)，得到标题化合物(216mg)。MS(ESI) m/z 503. 1[M+H] +D^. 4-甲氧基-3-((4-(4-(3-苯基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯甲酸 在室温将4-甲氧基-3-((4-(4-(3-苯基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酸甲酯(216mg,0. 43mmol)溶解于甲醇(20mL)。加入氢氧化锂(51.5mg，2. 15mmol)，随 后加入水(ImL)。将混合物在45°C搅拌过夜并真空浓缩。将残余物溶解于水(15mL)并用 IM含水盐酸调节到pH 3。混合物用乙酸乙酯(x2)和二氯甲烷(x2)提取。合并的有机 相用硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。残余物经过二氧化硅色谱法(含0-10%甲醇的二氯甲 烷作为洗脱剂)，得到标题化合物(78mg)。MS (ESI) m/z 489. 1[M+H] +E:l-(4-(l-(5-(,叔丁某M某甲酰某)-2_甲氧,某苄某)哌嗪羰某)苯 某)-3-苯某脲2，2，2-三氟乙酸盐在室温将4-甲氧基-3-((4-(4-(3-苯基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酸(10mg，20. δμπιο )溶解于N，N-二甲基甲酰胺(ImL)。加入叔丁基胺(10. 8 μ L， 102 μ mol)，随后加入0- (7-氮杂苯并三唑-1-基)-N, N, N, N-四甲基脲六氟磷酸盐(10mg， 26.3ymol, HATU) 0将混合物室温搅拌过夜，然后真空浓缩。残余物用二氯甲烷(15mL) 稀释，用饱和氯化铵水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤。有机相用硫酸镁干燥，过滤并真空 浓缩。得到的残余物在酸性的反相HPLC上纯化，得到标题化合物(10. 2mg)。MS(ESI)m/z 544. 1[M+H] +实施例39N-,叔丁某-3-((4-(4-(3-环丁某脲某)苯甲酰某)哌嗪某)甲某)_2_氟,苯 甲酰胺 A N-叔丁基-2-氟-3-甲基苯甲酰胺向搅拌的2-氟-3-甲基苯甲酸(8. 76謹ol，1. 35g)，2_甲基丙烷_2_胺(9. 43mmol， ImL, 0. 690g)和三乙胺(28. 7mmol，4mL，2. 90g)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中加入1_丙烷 膦酸环酐(13. 50mmol，8mL，8. 59g，在乙酸乙酯中的50%溶液)。将反应搅拌2小时并用二 氯甲烷和含水碳酸氢钠稀释。分离有机层，干燥并减压浓缩，得到标题化合物(Ig)。MS (ESI) m/z 210. 1[M+H] +B :3-(、遼甲某)-N-叔丁某-2-氟苯甲酰胺过氧化苯甲酰(0.048mmol, 11. 58mg)，N-溴代琥珀酰亚胺(5. 02mmol,893mg)禾口 N-叔丁基-2-氟-3-甲基苯甲酰胺(4. 78mmol，IOOOmg) —起在苯(12mL)中回流搅拌16 小时。此后，将反应冷却并将反应减压浓缩。加入二氯甲烷并将溶液用饱和氯化铵溶液提 取。有机相用硫酸钠干燥并减压除去挥发物。通过二氧化硅色谱法纯化，得到标题化合物 (105mg)。1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ 1. 44 (9Η, s)，4. 60 (2H, s)，7. 20 (1H, m)，7. 55 (2H, m)。C N-叔丁某-3-((4-(4-(3-环丁某脲某)苯甲酰某)哌嗪某)甲某)-2-氟, 苯甲酰胺将搅拌的3-(溴甲基)-N-叔丁基-2-氟苯甲酰胺(0. 36mmol，105mg)，l-环丁 基-3-(4-(哌嗪-1-羰基)苯基)脲(0. 33mmol,620mg)和三乙胺(2. 5mmol,0. 35mL，253mg) 在四氢呋喃(2mL)中的混合物加热到70°C，保持16小时。此后，真空除去挥发物。残余物 通过强阳离子交换色谱法和碱性反相HPLC纯化，得到标题化合物(74mg)。MS (ESI) m/z 510. 6[M+H] +实施例40N-叔丁基-2-氟-3-((4-(4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯 甲酰胺 A 4-(3-() -2-)哌嗪-1-甲酸叔丁酯 向搅拌的哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3. 53mmol,658mg)在乙腈(30mL)中的混合物中加入3-(溴甲基)-N-叔丁基-2-氟苯甲酰胺(3. 21mmol，925mg)，碘化钠(0. 321mmol,48. Img) 和三乙胺(4. 82mmol,0. 671mL,487mg)。将反应混合物回流搅拌4小时，然后用水和乙酸乙 酯稀释。分离有机层，干燥并减压浓缩。通过二氧化硅色谱法(用5%甲醇/ 二氯甲烷洗 脱)纯化，得到标题化合物(Ig)。MS (ESI) m/z 394. 1[M+H] +B^ N-叔丁某-2-氟-3-( _泰某甲某)苯甲酰胺 在室温向搅拌的4-(3_(叔丁基氨基甲酰基)-2_氟苄基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (2. 54mmol,lg)在二氯甲烷中的混合物加入三氟乙酸(53. 9mmol，4mL，6. 14g)。在搅拌3 小时之后，将反应减压浓缩。将残余物溶解在二氯甲烷/甲醇中并加载在强阳离子交换柱 (IOg)上，并用二氯甲烷/甲醇洗涤。用含2M氨的甲醇洗脱柱子，得到标题化合物(636mg)。 MS (ESI) m/z 294. 4[M+H] + C :3-((4-(4-氡某苯甲酰某)哌嗪-1-某)甲某)-N-,叔丁某-2-氟龙甲酰胺 将N-叔丁基-2-氟-3-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺(0. 648mmol, 190mg)， 4-氨基苯甲酸(0. 648mmol，89mg)和三乙胺(2. 59mmol,0. 361mL,262mg)溶解于二氯甲烷 (6. 476mL)。加入1_丙烷膦酸环酐(1. 295mmol，0. 767mL，824mg，在乙酸乙酯中的50 %溶 液)并将反应混合物搅拌2小时。加入乙酸乙酯并且有机相用水，碳酸氢钠，盐水洗涤并用 硫酸钠干燥。将有机相减压浓缩，得到标题化合物(146mg)。MS (ESI) m/z 413.4[M+H] +D :N-叔丁某-2-氟-3-((4-(4-(3-新戊,某脲某)苯甲酰某)哌嗪某)甲某) 苯甲酰胺将3-((4-(4_氨基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)_N_叔丁基_2_氟苯甲酰胺 (0. 109mmol,45mg)和4-硝基苯基氯甲酸酯(0. 120mmol,24. 19mg)合并在二氯甲烷(ImL) 中。将反应混合物搅拌1小时，之后加入2，2_ 二甲基丙烷-1-胺(0.855mmOl，100l·! 1， 74.5mg)。在搅拌30分钟之后，将反应真空浓缩。将残余物溶解在二氯甲烷/甲醇中并加 载在强阳离子交换柱(2g)上，并用二氯甲烷/甲醇洗脱。用含2M氨的甲醇洗脱柱子，得到 标题化合物(52mg)。MS (ESI) m/z 526. 2 [M+H]+实施例41N-叔丁基-3-((4-(4-(3-环丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_2,6_ 二 氟苯甲酰胺 A^. N-叔丁基-2,6- 二氟_3_甲基苯甲酰胺向搅拌的2，6-二氟-3-甲基苯甲酸(8. 75mmol，l. 5g)，2-甲基丙烷_2_胺 (9. 43mmol,lmL,0. 690g)和三乙胺(28. 7讓ol，4mL，2. 90g)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中 加入1-丙烷膦酸环酐(13. 50mmol，8mL，8. 59g，在乙酸乙酯中的50%溶液)。将反应搅拌2 小时，然后用二氯甲烷和碳酸氢钠水溶液稀释。分离有机层，干燥并真空浓缩，得到标题化 合物(l.lg)。MS(ESI)m/z 228. 4[M+H] + B :3-(溴甲某)-N-叔丁某-2，6- 二氟苯甲酰胺过氧化苯甲酰(0.048mmol, 11. 58mg)，N-溴代琥珀酰亚胺(5. 02mmol,893mg)禾口 N-叔丁基-2-氟-3-甲基苯甲酰胺(4. 78mmol, 1. Ig) 一起在苯(12mL)中回流搅拌16小 时。此后，将反应冷却并减压浓缩。加入二氯甲烷并将溶液用饱和氯化铵溶液提取。有机 相用硫酸钠干燥并将反应减压浓缩。通过二氧化硅色谱法纯化，得到标题化合物(Illmg)。1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ 1. 43 (9Η, s)，4. 60 (2H, s)，7. 00 (1H, m)，7. 50 (1H, m)。C :N-叔丁基-3-((4-(4-(3-环丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_2,6_二 氟苯甲酰胺将搅拌的3_(溴甲基(romomethyl))-N-叔丁基_2，6_ 二氟苯甲酰胺(0. 36mmol, 11111^)，1-环丁基-3-(4-(哌嗪-1-羰基)苯基)脲(0. 33mmol,620mg)和三乙胺(2. 5mmol, 0. 35mL, 253mg)在四氢呋喃(2mL)中的混合物在70°C加热16小时。此后，将反应真空浓缩。 残余物通过强阳离子交换柱色谱法和碱性反相HPLC纯化，得到标题化合物(60mg)。MS (ESI) m/z 528. 3[M+H] +实施例423-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_ (呋 喃-2-基甲基)苯甲酰胺2, 2, 2-三氟乙酸盐 使3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯 甲酸盐酸盐(300mg，0. 434mmol)，呋喃_2_基甲基胺(84mg，0. 87mmol),N-乙基-N-异丙基 丙烷-2-胺(112mg，0. 87mmol)和0-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N, N, N-四甲基脲六氟 磷酸盐(214mg，0. 564mmol)在N，N_ 二甲基甲酰胺(IOmL)中的混合物在100°C经历微波辐 射10分钟。反应混合物用强阳离子交换柱色谱法处理并通过酸性的反相HPLC纯化，得到 标题化合物(94. 7mg)。MS (ESI) m/z 534. 5 [M+H] +按类似方式制备以下化合物
42B :3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲 某)-N- ( -3-某)苯甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐 MS (ESI) m/z 524. 75[M+H] +42C :N-环己基-3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基) 甲基)苯甲酰胺2, 2, 2-三氟乙酸盐 MS(ESI)m/z 536. 7[Μ+Η] +42D :3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)-N-(吡啶-2-基甲基)苯甲酰胺双(2，2，2-三氟乙酸盐) MS (ESI) m/z 555. 5 [Μ+Η]+42Ε :3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲 某)-N-苯某苯甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐 MS (ESI) m/z 530. 5 [Μ+Η]+42F :3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲 某)-N- (2，4- 二氟苄某)苯甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐 MS(ESI)m/z 580. 3[M+H] +42G :N-(1-植某环戊某)-3-((4-(4-(3_(环丙某甲某)脲某)氟龙甲酰某)哌 嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 547. 5[M+H] +51M:3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲 某)-N-(2-甲某丁 -3- ^ -2-某)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 520. 5 [M+H] +趣:N- (2-氰某丙烷-2-某)-3- ((4- (4- (3_ (环丙某甲某)脲某)氟苯甲酰 基)哌嗪-ι-)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 521. 3 [M+H]+421 :3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)-N-(2-环丙基丙烷-2-基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 536. 5 [M+H]+42J旧式-3-((4-(4-(3-(环丙某甲某)脲某)氟龙甲酰某)哌嗪某)甲 基)-N-(2-苯基环丙基)苯甲酰胺 MS(ESI)m/z 570. 5[M+H] +42K :3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲 某)-N-((5-甲某异噁P半-3-某)甲某)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 549. 3[M+H] +42L :3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲 某)-N-(四氢-2H-吡_ -4-某)苯甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐 MS (ESI) m/z 538. 7 [Μ+Η] +421 :3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)-N-(噻哔-2-基)苯甲酰胺2，2，2-三氟乙酸盐 MS (ESI) m/z 537. 5 [M+H] +42N :N-(植某(苯某)甲某)((4_(4_(3_(环丙某甲某)脲某)_3_氟宠甲酰 基)哌嗪-ι-基)甲基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 569. 5 [M+H]+实施例431-(4-(1-(3-((1-(羟基甲基)环戊基)氨基甲酰基(caramoyl))苄基)哌 嗪-4-羰某)苯某)-3_苯某脲2，2，2_三氟乙酸盐 A:3_(哌ff泰-l-某甲;S) 甲_甲酉旨双(2，2，2_三氟盐) 将4-(3_(甲氧基羰基)苄基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1. 25g，3. 74mmol)与二氯甲 烷/三氟乙酸的4/1溶液(20mL)在室温一起搅拌1小时。然后将溶液真空浓缩，得到标题 化合物(1. 73g)。MS (ESI) m/z235. 1[M+H] +B^ 3-((4-(4-(3-苯某脲某)苯甲酰某)哌ff泰某)甲某)苯甲酸甲酯 向含4-(3_苯基脲基)苯甲酸乙酯(1.00g，3.90mmOl)的N，N-二甲基甲酰胺 (20mL)溶液中加入3-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酸甲酯双(2，2，2_三氟乙酸盐)(1.25g， 2. 70mmol)，N-乙基-N-异丙基丙烧-2-胺(0. 94mL，5. 40mmol)，IH-苯并[d] [1,2,3]三 唑-1-醇(0.40g，2.97mmol，Η0ΒΤ)和1-乙基_3-(3_ 二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐 (0. 57g，2.97mmol，EDCI)。将混合物在室温搅拌过夜，然后真空浓缩。将残余物溶解在乙酸 乙酯中并用水洗涤(x2)，然后用饱和含水氯化钠洗涤。有机相用硫酸镁干燥，过滤，真空浓 缩。二氧化硅色谱法(含10-40%乙酸乙酯的正-己烷)并从甲醇中重结晶，得到标题化合 物(1. 02g)。MS (ESI) m/z 473. 1[M+H] +C^. 3-((4-(4-(3-苯基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯甲酸 将3-((4-(4-(3-苯基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯甲酸甲酯(0. 47g， lmmol)悬浮在水(5mL)/l，4-二噁烷(15mL)的混合物中并用氢氧化锂一水合物(0. 168g， 4mmol)处理。将混合物室温搅拌60小时并用有凹槽的滤纸过滤。将滤液真空浓缩，然后 用IM盐酸酸化。混合物用乙酸乙酯提取(x4)并将合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并真 空浓缩，得到标题化合物(0.47g)。MS (ESI) m/z 459. 0[Μ+Η] +
D :1-(4-(1-(3-((1-(羟某甲某)环戊某)氡某甲酰某)苄某)哌ff泰羰某)苯 某)-3-苯某脲2，2，2-三氟乙酸盐将3-((4-(4-(3_苯基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲酸(25mg， 0. 055mmol)，l-氨基-1-环戊烷甲醇(18. 8mg，0. 163mmol)，0_(7_氮杂苯并三唑-1-基)-N， N，N，N-四甲基脲六氟磷酸盐(31mg，0. 082mmol)和N，N- 二甲基甲酰胺(0. 2mL)的混合物 室温搅拌过夜。反应混合物用甲醇(2mL)稀释并通过酸性的反相HPLC纯化，得到标题化合 物(12. 4mg)。MS (ESI) m/z 556. 1[M+H] +按类似方式制备以下化合物43B 1-(4-(1-(3-((2-甲氧某苯某)氡某甲酰某)苄某)哌ff泰羰某)苯某)_3_苯 基脲2, 2, 2-三氟乙酸盐 MS (ESI) m/z 564. 1[M+H] +实施例443-((4-(4-(3-环丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)-Ν_(1,1,三氟甲 基丙烷-2-基)苯甲酰胺 A^ 4-(4-(3-环丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪甲酸叔丁酯 为烧瓶装入4-(3-环丁基脲基)苯甲酸(51.3mmol，12. 023g)，三乙胺(129mmol， 18mL，13. 07g)和二氯甲烷(75mL)并冷却到0°C。然后加入哌嗪-1-甲酸叔丁酯(51. 3mmol， 9. 56g)并将各试剂在0°C —起搅拌10分钟，之后缓慢加入1-丙烷膦酸环酐(64. 2mmol, 38. OmL, 40. 8g，在乙酸乙酯中的50%溶液)。使反应混合物缓慢回温到室温。在搅拌5小 时之后，将反应倾倒在包含水(IOOmL)和盐水(20mL)的烧瓶中。然后搅拌混合物并静置过 夜。通过真空过滤收集得到的沉淀物，用冷水洗涤并真空干燥，得到标题化合物，为白色粉 末(19. 6g)。MS(ESI)m/z403. 5[M+H] +
B^ 1-环丁某-3- (4-(哌嗪羰某)苯某)M 将4-(4-(3-环丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(48. 7mmol，19. 6g)溶 解于二氯甲烷(125mL)和乙腈(IOmL)的混合物中。在完全溶解之后，在10分钟内加入三 氟乙酸(269mmol，20mL，30.7g)。搅拌反应，直到没有起始原料的痕迹。反应用碳酸氢钠中 和，过滤并真空浓缩，得到白色固体。通过使用索格斯利特提取器用二氯甲烷作为洗脱剂对 该物质进行连续提取分离期望的产物。将有机相真空浓缩，得到标题化合物，为白色粉末 (14.34g)。MS(ESI)m/z303. 5[M+H] +C^. 3-(氯,甲某)-N- (1，1，1-三氟_2_甲某丙烷_2_某)苯甲酰胺将3-(氯甲基)苯甲酰氯(38. 5mmol,5. 48mL,7. 29g)溶解于二氯甲烷(IOOmL)并 搅拌。向其中加入-三氟-2-甲基丙烷-2-胺(39. 3mmol，5g)和三乙胺(59. Ommol, 8. 22mL，5.97g)(滴加)的混合物并继续搅拌2小时。反应用二氯甲烷稀释并将这个有机混 合物用饱和氯化钠，水，和饱和氯化钠洗涤。有机相用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余 物通过二氧化硅色谱法(用二氯甲烷洗脱)纯化，得到标题化合物(5g)。MS (ESI) m/z 280. 1[M+H] +D :3-((4-(4-(3-环丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)(1,1,三 氟-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酰胺向含1-环丁基-3-(4-(哌嗪-1-羰基)苯基)脲(0. 165mmol，50mg)的四氢 呋喃(1654μ1)中加入3-(氯甲基)-Ν-(1，1，1-三氟-2-甲基丙烷_2_基)苯甲酰胺 (0. 182mmol,50. 9mg)和三乙胺(0. 496mmol,69. 1 μ 1，50· 2mg)。将反应加热到回流并搅拌 30分钟，然后加入乙腈(0.5mL)和碘化钠(催化量)。在搅拌3小时之后，加入乙酸乙酯并 且有机混合物用水和饱和氯化钠洗涤。有机相用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将该物质 冻干，得到标题化合物(81mg)。MS(ESI)m/z 546. 5[M+H] +实施例453-((4-(4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)-Ν_(1,1,三氟甲 基丙烷-2-基)苯甲酰胺 A :4-(3-(l,l,l-三氟-2-甲基丙烷基氨基甲酰基)苄基)哌嗪甲酸叔 丁酯将3_(氯甲基)-N_(l，l，l-三氟-2-甲基丙烷_2_基)苯甲酰胺(3. IOmmol, 868mg),哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3. lOmmol，578mg)，碘化钠(3. IOmmol, 465mg)和三乙胺 (3. IOmmol,0. 433mL)全部合并在乙腈(28mL)中并加热回流2小时。此后，使反应混合物冷却并加入乙酸乙酯和水。分离有机层，干燥并真空浓缩，得到标题化合物(1.3g)。MS (ESI) m/z 430. 5[M+H] +B 3~(哌嗪-1-基甲基)-Ν-(1,1,1-三氟-2-甲基丙烷基)苯甲酰胺将4-(3-(1，1，1_三氟-2-甲基丙烷-2-基氨基甲酰基)苄基)哌嗪甲酸叔丁酯(0. 792mmol,340mg)溶解于二氯甲烷(3mL)中并加入三氟乙酸(7. 92mmol,0. 588mL, 903mg)。在搅拌2小时之后，将混合物溶解在二氯甲烷中，加载在强阳离子交换柱(5g)上， 并用二氯甲烷/甲醇洗涤。用含2M氨的甲醇洗脱柱子，得到标题化合物(260mg)。MS(ESI) m/z 330. 3[M+H] +C^. 3-((4-(4-氨基苯甲酰基)哌嗪基)甲基)(1,1,三氟_2_甲基丙 烷-2-基)苯甲酰胺向搅拌的3_(哌嗪-1-基甲基)-N_(l，l，l-三氟-2-甲基丙烷_2_基)苯甲酰 胺(3. 07mmol，1.01g)，4-氨基苯甲酸(3. 07mmol,0. 421g)和三乙胺(6. 13mmol,0. 855mL, 0. 621g)在二氯甲烷(30. 7mL)中的混合物中加入1_丙烷膦酸环酐(6. 13mmol，3. 63mL， 3. 90g，在乙酸乙酯中的50%溶液)。在搅拌2小时之后，加入二氯甲烷并将有机混合物用 饱和碳酸氢钠、水、和饱和氯化钠洗涤。有机相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到标题化合物 (640mg)。MS (ESI) m/z 449. 5[M+H] +D :3-((4-(4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)(1,1,三 氟-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酰胺将3-((4-(4_氨基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)_N_(1，1，1-三氟_2_甲基丙 烷-2-基)苯甲酰胺(0. 129mmol,58mg)和4-硝基苯基氯甲酸酯(0. 142mmol, 29mg) 一起在 二氯甲烷(ImL)中搅拌16小时。此后，加入新戊基胺(0. 259mmol,32yL)。真空除去挥发物， 并将该残余物通过二氧化硅色谱法纯化，得到标题化合物(50mg)。MS(ESI)m/z562. 5[M+H] +按类似方式制备以下化合物45B :3-((4-(4-(3_ 丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪 基)甲基)-N-(1，1，三 氟-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 548. 5[M+H] +45C :3-((4-(4_(3-异丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)(1,1,三 氟-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酰胺 MS (ESI) m/z 548. 5[M+H] +
实施例463- ((4- (3-氟-4- (3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)(1,1,三 氟-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酰胺 A^. 3-((4-(4-氨基-3-氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)-N-(1,1,三氟_2_甲 基丙烷-2-基)苯甲酰胺 将3_(哌嗪-1-基甲基)-N_(l，l，l-三氟-2-甲基丙烷_2_基)苯甲酰胺 (1. 518mmol,0. 5g)，4-氨基-3-氟苯甲酸(1. 518mmol,0. 235g)和三乙胺(3. 80mmol, 0. 529mL,0. 384g)溶解于二氯甲烷(15. 18mL)中并搅拌5分钟。滴加1_丙烷膦酸环酐 (3. 04mmol, 1. 799mL, 1. 932g，在乙酸乙酯中的50%溶液)并将反应将混合物搅拌1小时。 加入二氯甲烷并将有机混合物用饱和碳酸氢钠、水、和饱和氯化钠洗涤。有机相用硫酸钠干 燥，过滤并浓缩，得到标题化合物(500mg)。MS(ESI)m/z467.4[M+H] +B:3-((4-(3-氟-4_(3-新戊,某脲某)苯甲酰某)哌嗪某)甲某)_Ν_(1，1， 1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酰胺将3-((4-(4-氨基-3-氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)_Ν_(1，1，1_三氟_2_甲 基丙烷-2-基)苯甲酰胺(0. 480mmol,224mg)和4-硝基苯基氯甲酸酯(0. 528mmol, 106mg) 一起在二氯甲烷(2mL)中搅拌16小时。加入新戊基胺(2.4mmol，300yL)并真空除去挥发 物。残余物通过二氧化硅色谱法纯化，得到标题化合物(184mg)。MS(ESI)m/z 580. 1[M+H] +按类似方式制备以下化合物46B :3-((4-(4-(3_(环丙基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲 某)-N- (1，1，1-三氟-2-甲某丙烷-2-某)苯甲酰胺盐酸盐 MS (ESI) m/z 564. 1[M+H] +实施例47N-环丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯 甲酰胺 A^ 4-(3-(环丁某t[某甲酰某)苄某)哌嗪-1-甲酸叔丁酯 将搅拌的哌嗪-1-甲酸叔丁酯(8.94mm0l，1.665g)，3-(氯甲基)-N-环丁基苯甲 酰胺(8. 94mmol，2g)，碳酸钾(17. 88mmol,2. 471g)和碘化钠(0. 894mmol,0. 134g)在乙腈 (50mL)中的悬浮液在80°C加热3小时。反应混合物用乙酸乙酯和水稀释。分离有机层，干 燥(硫酸镁)并减压浓缩，得到标题化合物(3.3g)。MS(ESI)m/z 374. 4([M+H]+)。B^. N-环丁基-3-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺 向搅拌的含4-(3_(环丁基氨基甲酰基)苄基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(8.84mmol， 3. 3g)的二氯甲烷(IOmL)溶液中加入三氟乙酸(5mL)。将反应混合物搅拌24小时，然 后减压浓缩。通过强阳离子交换柱色谱法纯化，得到标题化合物(2. 4g)。MS(ESI)m/z 274. 5[M+H] +C :3-((4-(4-氨某-3-氟苯甲酰某)哌嗪某)甲某)环丁某苯甲酰胺 向N-环丁基-3-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺(8.78讓01，2.48)，4-氨基-3-氟苯 甲酸(8. 78mmol,l. 362g)和三乙胺(26. 3mmol,3. 67mL,2. 67g)在二氯甲烷(50mL)中的溶 液中加入1-丙烷膦酸环酐(13.17讓01，7.84!^，8.388，在乙酸乙酯中的50%溶液)。将反 应搅拌1小时，然后用乙酸乙酯/碳酸氢钠(水溶液)稀释。分离有机层，干燥(硫酸镁) 并减压浓缩，得到标题化合物(2. 4g)。MS (ESI) m/z 411.5[M+H] +D :N-环丁基-3- ((4- (3-氟(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺向搅拌的含双(三氯甲基)碳酸酯(0.33lmmol，98mg)的二氯甲烷(IOmL)溶 液中加入3-((4-(4_氨基-3-氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-N-环丁基苯甲酰胺 (0. 974mmol,400mg)和 N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(2. 144mmol,0. 354mL，277mg)在二氯甲烷(IOmL)中的溶液(滴加)。将反应混合物搅拌1小时，然后加入2，2-二甲基丙烷-1-胺 (1. 169mmol,0. 137mL, 102mg)。将反应混合物搅拌20小时。在二氧化硅上进行色谱法(用 二氯甲烷到二氯甲烷/甲醇(1% -3% )洗脱)，得到标题化合物(266mg)。MS (ESI) m/z 524. 7[M+H] +实施例48(R)-N-仲丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺 A (R) -N-仲丁基-3-(氯甲基)苯甲酰胺在室温将(R)-丁烷-2-胺(14. 77讓ol，1. 478mL，1. 08lg)和三乙胺(15. 48mmol, 2. 157mL, 1. 566g)在二氯甲烷中的溶液滴加到搅拌的含3-(氯甲基)苯甲酰氯 (14. 07mmol,2mL,2. 66g)的二氯甲烷溶液。在加入完成之后，将反应搅拌2小时，之后真空 除去溶剂并加入乙酸乙酯(IOOmL)。然后将有机溶液用水(200mL)洗涤，用硫酸钠干燥并真 空浓缩，得到标题化合物(2.47g)，为乳膏状固体。MS(ESI)m/z226. 3[M+H] +B^ (R)-4-(3-(仲丁某M某甲酰某)苄某)哌嗪甲酸,叔丁酯将哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5. 32mmol，0.990g)，(1 )4-仲丁基-3-(氯甲基)苯甲酰 胺(5. 32mmol，l. 2g)，碳酸钾(10. 63mmol, 1. 469g)和碘化钠(0. 532mmol,0. 080g)在乙腈 (50mL)中的悬浮液在80°C加热3小时。反应混合物用乙酸乙酯和水稀释。分离有机层，干 燥(硫酸镁)并减压浓缩，得到标题化合物(2g)。MS(ESI)m/z 376.5[M+H] +C^. (R)-N-仲丁基-3-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺向搅拌的含(R)-4-(3_(仲丁基氨基甲酰基)苄基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (5. 33mmol,2g)的二氯甲烷(IOmL)溶液中加入三氟乙酸(5mL)。将反应混合物搅拌24小 时，然后减压浓缩。通过强阳离子交换柱色谱法纯化，得到标题化合物(1.4g)。MS(ESI)m/ ζ 276. 3([M+H]+)。D (R)-3-((4-(4-氨基-3-氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)-N-仲丁基苯甲酰 胺向(R) -N-仲丁基-3-(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺(5. 08mmol, 1. 4g)，4_氨 基-3-氟苯甲酸(5. 08mmol,0. 789g)和三乙胺(15. 25mmol,2. 126mL, 1. 543g)在二氯甲 烷(80mL)中的溶液中加入1-丙烷膦酸环酐(7.63mmol，2. 270mL，2.426g，在乙酸乙酯中的 50%溶液)。将反应混合物搅拌1小时，然后用乙酸乙酯和碳酸钾(水溶液)稀释。分离 有机层，干燥(硫酸镁)并减压浓缩。在二氧化硅上进行色谱法(用乙酸乙酯到乙酸乙酯 /甲醇(5%)洗脱)，得到中间体(R)-3-((4-(4-氨基-3-氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲 基)-N-仲丁基苯甲酰胺(L2g)。E (R) -N-仲丁基-3- ((4- (3-氟(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺
向搅拌的含双(三氯甲基)碳酸酯(0.989mmol，0.294g)的二氯甲烷(30mL)溶 液中加入含(R)-3-((4-(4-氨基-3-氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-N-仲丁基苯甲酰 胺(2. 91mmol, 1. 2g)和 N-乙基-N-异丙基丙烷 _2_ 胺(6. 40mmol, 1. 058mL，0. 827g)的二 氯甲烷(30mL)。将反应混合物搅拌1小时，然后加入2，2- 二甲基丙烷-1-胺(3. 49mmol, 0. 408mL,0. 304g)。在搅拌2小时之后，粗的物质通过酸性的反相LC/MS纯化，然后通过二 氧化硅色谱法纯化，得到标题化合物(25mg)。MS (ESI) m/z 526. 3[M+H] +实施例493-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_(3, 3-二氟环丁基)苯甲酰胺 A^ 3_(氯甲某)-N_(3，3-二氟环丁某)苯甲酰胺将3-(氯甲基)苯甲酰氯(13.93mmol，2.63g)在二氯甲烷(50mL)中在0°C搅拌。 将三乙胺(41.8mmol，5. 81mL，4. 23g)和 3，3-二氟环丁胺盐酸盐(13. 93mmol,2g)合并在二 氯甲烷中并滴加加入。使反应混合物回温到室温并搅拌过夜。反应混合物用水洗涤，用硫 酸钠干燥并真空浓缩，得到标题化合物(3. 33g)。MS (ESI) m/z 260. 3[M+H] +B^ 4-(3-(3，3_ 二氟环丁某t[某甲酰某)苄某)哌卩泰甲酸,叔丁酯 将3-(氯甲基)-N-(3，3-二氟环丁基)苯甲酰胺(12. 82mmol，3. 33g)，哌嗪-1-甲 酸叔丁酯(12. 82mmol,2. 388g)，碳酸钾(38. 5mmol,5. 32g)和碘化钠(2. 56mmol,0. 384g)合 并并在乙腈(50mL)中加热回流2小时。减压除去溶剂并将残余物溶解在二氯甲烷中，用水 洗涤，用硫酸钠干燥并真空浓缩，得到标题化合物(5. 179g)。MS (ESI) m/z 410. 3[M+H] +C^. N- (3，3- 二氟环丁某)(哌嗪某甲某)苯甲酰胺 在声处理的情况下将4-(3-(3，3-二氟环丁基氨基甲酰基)苄基)哌嗪甲酸 叔丁酯(12. 65mmol,5. 179g)在二氯甲烷(IOmL)/三氟乙酸(IOmL)中室温搅拌1小时。真空除去溶剂并将得到的残余物通过强阳离子交换柱色谱法纯化，得到标题化合物(3. 19g)。 MS (ESI)m/z310. 4[M+H] +D^. 3-((4-(4-氨基-3-氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)(3, 3_ 二氟环丁基) 苯甲酰胺 将Ν-(3，3-二氟环丁基)-3_(哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺(5. Hmmol，1. 59g)， 4_ 氨基-3-氟苯甲酸(5. 14mmol,0. 797g)和三乙胺(15. 42mmol，2. 143mL, 1. 560g)在二氯 甲烷(30mL)中在室温搅拌。滴加1-丙烷膦酸环酐(7. 71mmol,4. 59mL,4. 91g，在乙酸乙酯中 的50%溶液)并将反应搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩并将残余物溶解在乙酸乙酯中。 有机相用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，用硫酸钠干燥并真空浓缩，得到标题化合物(1. 255g)。 MS (ESI) m/z 447. 5[M+H] +E :3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_3_氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_(3, 3-二氟环丁基)苯甲酰胺将3-((4-(4-氨基-3-氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_ (3，3_ 二氟环丁基)苯 甲酰胺(0. 224mmol,0. Ig)和 N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(0. 672mmol,0. lllmL,0. 087g) 在二氯甲烷中的混合物滴加到搅拌的含双(三氯甲基)碳酸酯(0.083mmol，0.025g)的二 氯甲烷(IOmL)溶液中。将反应混合物室温搅拌30分钟。加入环丙基甲基胺(0.448mmol， 0. 039mL,0. 032g)并将反应混合物搅拌另外的2小时。反应混合物用水洗涤并将有机相 真空浓缩。得到的残余物通过酸性的反相HPLC纯化并转化为游离碱，得到标题化合物 (28mg)。MS (ESI) m/z 544. 5 [M+H]+实施例50N- (1-氰基-1-环丙基乙基)-3- ((4- (4- (3-(环丙基甲基)脲基)-3-氟苯甲酰 基)哌嗪-ι-基)甲基)苯甲酰胺 A :3_ (氯,甲某)-N-Q-氰某-1-环丙某乙某)苯甲酰胺将3-(氯甲基)苯甲酰氯(9. 08mmol，1.290mL，1.716g)和三乙胺(27. 2mmol, 3. 79mL, 2. 76g)在0°C在二氯甲烷(IOmL)中搅拌。滴加2-氨基-2-环丙基丙腈(9. 08mmol, lg)并使反应回温到室温并搅拌1小时。反应混合物用水洗涤并将有机相真空浓缩，得到标 题化合物(1.451g)。MS(ESI)m/z 263. 1 [M+H]+B^. 3-((4-(4-氨基-3-氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)(1_氰基环丙 基乙基)苯甲酰胺
将(4-氨基-3-氟苯基)(哌嗪-1-基)甲酮(2. 74mmol,0. 612g)，3_(氯甲 基)-N-(1-氰基-1-环丙基乙基)苯甲酰胺(2. 74mmol，0. 72g)，碘化钠(0. 548mmol， 0. 082g)和碳酸钾(8. 22mmol,l. 136g)合并在乙腈(25mL)中并加热回流2小时。将反应 减压浓缩并将得到的残余物溶解在二氯甲烷中并用水洗涤。有机相用硫酸钠干燥并真空浓 缩。残余物通过二氧化硅柱色谱法(用二氯甲烷到4%甲醇/ 二氯甲烷洗脱)纯化，得到标 题化合物(195mg)。MS(ESI)m/z 450. 3[M+H] +C :N-(1-氰基-1-环丙基乙基)-3- ((4- (4- (3-(环丙基甲基)脲基)-3-氟苯甲 酰基)哌嗪-ι-基)甲基)苯甲酰胺将3- ((4- (4-氨基-3-氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)_N_ (1_氰基环丙基 乙基)苯甲酰胺(49mg，0. 109mmol)在二氯甲烷中室温搅拌。加入4-硝基苯基氯甲酸酯 (22mg，0. 109mmol)并将反应混合物搅拌30分钟。加入环丙基甲基胺(23mg，0. 327mmol)并 将反应室温搅拌30分钟。将反应减压浓缩并将得到的残余物通过二氧化硅柱色谱法纯化， 得到标题化合物(25mg)。MS (ESI) m/z 547. 5[M+H] +实施例51放射件配体竞争结合闪烁迫沂分析法。该分析用于以化合物竞争结合激动剂放射性配体[3H]T0901317的能力来评价 它们的效力。该分析利用与谷胱甘肽-S-转移酶(GST)标记的蛋白质融合的肝脏X受体 α (LXRa)的纯化的配体结合结构域(LBD) (LXRa-LBD-GST)以及闪烁迫近分析法(SpA)技 术来测定化合物对人核激素受体LXR α的配体结合结构域(LBD)的亲合力(pKi)。用于表汰人LXRa-LBD-GST的方案通过PCR扩增肝脏X受体a (LXR a )的配体结合区域(LBD)并亚克隆到原核生物 表达载体pGEX-4T-l(GE Healthcare)中。来自大肠杆菌中pGEX_4T_l质粒的LXR α的表达 产生重组的谷胱甘肽-S-转移酶(GST) LXR α -LBD融合蛋白。繁殖，诱导，并通过离心收获大 肠杆菌(包含所述质粒)。将细菌团粒再悬浮在裂解缓冲液(50mM三(羟甲基)氨基甲烷 (TRIS)-pH 8. OUOOmM氯化钠(NaCl)、ImM乙二胺四乙酸(EDTA)、一片蛋白酶抑制剂混合剂 (完整的/不含EDTA) (Roche)(每50ml缓冲液)中。将混合物在Branson超声波仪上在冰 上进行声处理。将悬浮液离心并向上清液添加二硫苏糖醇(DTT)，以得到25mM的最终浓度。 通过在Glutathione-S印harose Fast flow (Amersham)上进行亲和色谱法从所得的上清液 中纯化重组的人LXRα-LBD-GST蛋白质，并将受体用包含谷胱甘肽(50mM tris pH 8. 0、2mM DTTUOmM谷胱甘肽)的缓冲液洗脱。将蛋白质在20mM N-2-羟基乙基哌嗪-N' -2-乙磺 酸(HEPES)、2mM DTT、10%甘油中在-80°C储存。对LXR α LBD 的结合对于每个分析，将稀释到0. 5 μ g/mL的重组人LXR α -LBD-GST蛋白的等分部 分在最终体积为100 μ 1的SpA缓冲液(IOmM无水磷酸氢钾[K2HPO4]、IOmM磷酸二氢钾[KH2PO4], 2mM EDTA、50mM NaClUmM DTT、2mM 3_[ (3-胆酰胺基丙基)二甲基铵]丙烷 磺酸盐(CHAPS))中温育，所述缓冲液包含最终浓度为lmg/ml的蛋白-A偶联的闪烁体填 充的YtSi SpA小珠(GE Healthcare)以及最终浓度为5 μ g/ml的山羊抗-GST抗体(GE Healthcare)。在该测定中使用Kd为IOnM的T0901317作为基准。向该测定中加入50nM[3H] T0901317(50Ci/mmol)，士试验化合物并在板摇动器上在15°C温育2小时。在温育之后，在 PackardTopCount上读取测定板。在该测定中，T0901317的pKi值为pKi 7. 8士0. 2。将 ΙμΜ浓度的T0901317用作最大结合对照。在该测定中，活性化合物表现出> 5. 5的pKi 值，优选的化合物表现出> 7的pKi值。LXRa反式激活测定使用重组的中国仓鼠卵巢Kl (CHO. Kl)细胞体外测量细胞内的激动剂活性，所述 细胞稳定表达来自真核生物表达构建体(construct)和包含荧光素酶报道基因构建体的 天然雌激素应答元件(ERE)中的人雌激素受体a /肝脏X受体α嵌合受体蛋白。所述 ERa/LXRα嵌合受体蛋白包含与人ERα受体DNA结合结构域(DBD)融合的人LXRα受体 配体结合结构域(LBD)。在该测定中，可以结合于人LXRa受体的LBD的化合物能够细胞内 活化ERa/LXRa嵌合受体蛋白。在活化之后，ERa DBD可以通过大鼠缩宫素启动子荧光素 酶构建体中存在的天然雌激素应答元件诱导ERE-介导的荧光素酶表达。使用这个系统，使 用T0901317作为激动剂对照产生LXR激动剂-诱导的荧光素酶测定。构津体如下制备表达构建体将人LXRa cDNA的人LXRa的配体结合区域(LBD)插入 邻近人ERa转录因子DNA结合区域(DBD)，以产生pNGVl. ERa DBD-LXRa LBD。pNGVl哺 乳动物表达构建体(EMBL核苷酸序列数据库文件ASPNGV1，acc. # X99274)携带新霉素 (G418)的选择标记物。使用ERa应答大鼠缩宫素(RO)来产生启动子构建体pROLUC，其 包含与荧光素酶报道基因相邻的ERa应答元件(ERE)的几个拷贝。启动子构建体的构 建以作为与荧光虫荧光素酶编码序列相连的Hindll/Mbol限制性内切酶片段的大鼠缩宫 素基因调节区(位置-363/+16)为基础。参见Ivell和Richter.，Proc Natl Acad Sci USA. 7 =2006-2010 (1984)。在转染并使用新霉素选择阳性表达克隆之后，产生表达pNGVl. ER α DBD-LXR α LBD和pROLUC 二者的稳定的CHO. Kl细胞系。基于响应于3μ M Τ0901317的 激动剂窗口和最多20代的响应稳定性来选择最好的细胞系(CH0.K1 LXRa)。
试验化合物在LXRci反式激活测定中的激动剂活性的测定在37°C在5% CO2的加湿气氛中，将CHO. KlLXRa细胞在200 μ IDulbecco改进的 Eagle培养基(不含酚红)中以25000细胞/孔的密度接种在96孔板中，所述培养基包含 5%的炭处理的小牛血清。在6小时之后，通过细胞与一定浓度范围的化合物培养16小时 来表征化合物。将浓度为3μΜ的Τ0901317用作最大激动剂对照。通过向每个孔加入裂 解缓冲液并使用Packard Topcoimt读取器测量光发射，使用荧光素酶测定试剂盒(Perkin Elmer)测定荧光素酶活性。在该测定中，T0901317的pEC50为:pEC50 = 7. 0士0. 3。将试验 化合物的激动剂活性与最大激动剂对照比较。使用该测定方案，本发明的优选化合物表现 出具有LXR α激动剂活性。
权利要求
通式I的N-苄基，N′-芳基羰基哌嗪衍生物式I或其药学可接受的盐，其中n为1或2；A为任选地包含1或2个氮原子的6元芳香族环；X为NR8、O或键；R1为H，(C1-8)烷基[任选地被卤素、(C1-4)烷氧基、(C1-4)烷氧基羰基、(C3-8)环烷基、OH、CF3、氰基或NR9R10取代]，(C2-6)烯基，(C2-6)炔基，(C3-8)环烷基，苯基[任选地被(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、卤素、CN、CF3、OCF3或NO2取代]，包含1或2个选自O和S的杂原子的5或6元饱和杂环基团，或包含1-3个选自O、S和N的杂原子的5或6元杂芳基基团[任选地被(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、卤素或CF3取代]；或R1为被苯基取代的(C1-3)烷基[任选地被(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、卤素取代或在相邻的位置上被2个取代基取代，形成O-(CH2)n-O，其中n为1或2]，包含1-3个选自O、S和N的杂原子的5或6元杂芳基基团[任选地被(C1-3)烷基、(C1-3)烷氧基或卤素取代]，或包含1或2个选自O、S和N的杂原子的5或6元饱和杂环基团[任选地被(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、氧代、OH或卤素取代]；或在X为NR8时，R1可与R8以及它们所连接的N合起来，形成任选地包含另一个选自O和S的杂原子的4-8元环[并且该环任选地被OH、(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基或卤素取代]；R2任选地表示1-3个取代基，所述取代基独立地选自(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、CF3和卤素；R3任选地表示1-4个取代基，所述取代基独立地选自(C1-4)烷基和被OH或1个或多个卤素取代的(C1-4)烷基；R4为H或(C1-6)烷基；R5任选地表示1-3个取代基，所述取代基独立地选自(C1-3)烷基、(C1-3)烷氧基和卤素；R6为H，(C1-6)烷基[任选地被卤素、CF3或CN取代]，(C3-6)环烷基[任选地包含选自O和S的杂原子且任选地被CN或苯基取代]，(C3-6)环烷基(C1-4)烷基，或5或6元(杂)芳基基团，任选地通过亚甲基基团连接，且任选地被(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、(C1-4)烷基磺酰基、卤素、CN、CF3、CF3O或NO2取代]；R7为H或(C1-3)烷基；R8在存在时为H或(C1-3)烷基；或R8与R1以及它们所连接的N合起来形成任选地包含另一个选自O和S的杂原子的4-8元环[并且该环任选地被OH、(C1-3)烷基、(C1-3)烷氧基或卤素取代]；R9和R10独立地选自H、(C1-3)烷基或(C1-3)烷基羰基；或R9和R10与它们所连接的N合起来形成任选地包含另一个选自O和S的杂原子的4-8元环。FPA00001013650500011.tif
2.权利要求1的N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生物，其中X为NH且η为1。
3.权利要求2的N-苄基，N'_芳基羰基哌嗪衍生物，其中A为苯基。
4.权利要求3的N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生物，其中R1为(Cp8)烷基[任选地 被(C3_8)环烷基取代]，(C2_6)烯基，(C3_8)环烷基或苯基[任选地被卤素取代]。
5.权利要求4的N-苄基，N'_芳基羰基哌嗪衍生物，其中R3为不存在或表示甲基，且 其中R5为不存在或表示卤素。
6.权利要求5的N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生物，其中R6为任选地被CF3取代的 (CV6)烷基且R7为H。
7.权利要求1的N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生物，其选自-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲 酰胺2，2，2-三氟乙酸盐；-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺2， 2,2-三氟乙酸盐；-N-叔丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲 酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-环丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲 酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)-3-氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基) 苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-异丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲 酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-异戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲 酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-(环丁基甲基)脲基)-3-氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基) 苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-丁基脲基)-3_氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-(2-环丙基乙基)脲基)-3-氟苯甲酰基)哌嗪基)甲 基)苯甲酰胺；-3-((4-(4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-Ν-(1，1，1-三氟-2-甲 基丙烷-2-基)苯甲酰胺；-3-((4-(4-(3-丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-Ν-(1，1，1-三氟-2-甲基 丙烷-2-基)苯甲酰胺；-3-((4-(4-(3-异丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-Ν-(1，1，1-三氟-2-甲 基丙烷-2-基)苯甲酰胺；-3-((4-(3-氟-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-Ν-(1，1，1-三 氟-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酰胺；-3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)-3_氟苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-Ν-(1，1， 1-三氟-2-甲基丙烷-2-基)苯甲酰胺盐酸盐；-N-叔丁基-3-((4-(3-氯-4-(3-环丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲 酰胺； -N-叔丁基-3-((4-(3-氯-4-(3-(环丙基甲基)脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲 基)苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(3-氯-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲 酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(3-氯-4-(3-异丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲 酰胺；-1-(3-(叔丁基氨基甲酰基)苄基)-4-(3-氯-4-(3-(环丁基甲基)脲基)苯甲酰基) 哌嗪ι-氧化物；-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-丁基脲基)-3-氯苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(3-氯-4-(3-异戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲 酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(2，3-二氟-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(2，3-二氟-4-(3-异戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-丁基脲基)-2，3-二氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯甲 酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(2，3-二氟-4-(3-异丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-(环丙基甲基)脲基)_2，3-二氟苯甲酰基)哌嗪基) 甲基)苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-环丁基脲基)-2，3-二氟苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯 甲酰胺盐酸盐；-N-叔丁基-3-((4-(3-氯-4-(3-(环丙基甲基)脲基)-2-氟苯甲酰基)哌嗪基) 甲基)苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(3-氯-2-氟-4-(3-异丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基) 苯甲酰胺；-N-叔丁基-3-((4-(4-(3-环丁基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-2-氟苯甲酰胺；-N-叔丁基-2-氟-3-((4-(4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲 酰胺；-N-环丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲 酰胺；和-(R)-N-仲丁基-3-((4-(3-氟-4-(3-新戊基脲基)苯甲酰基)哌嗪基)甲基)苯甲酰胺；或其药学可接受的盐。
8.药物组合物，包含权利要求1-7中任一项的N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生物和 药学可接受的助剂。
9.权利要求1-7中任一项的N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生物，用于治疗用途。
10.权利要求1-7中任一项的N-苄基，N'-芳基羰基哌嗪衍生物用于生产药物的用 途，所述药物用于治疗或预防动脉粥样硬化和与胆固醇和胆汁酸转运和代谢有关的相关病症。
全文摘要
本发明涉及通式I的N-苄基，N′-芳基羰基哌嗪衍生物式I涉及包含所述衍生物的药物组合物，以及涉及这些N-苄基，N′-芳基羰基哌嗪衍生物用于生产药物的用途，所述药物用于治疗或预防动脉粥样硬化和与胆固醇和胆汁酸转运和代谢有关的相关病症。
文档编号C07D317/58GK101848899SQ200880101573
公开日2010年9月29日 申请日期2008年8月18日 优先权日2007年8月20日
发明者A·J·库克, A·L·拉夫腾, A·S·爱德伍兹, D·J·本尼特, I·尼古, J-H·单, K-K·霍, M·L·莫瑞斯, M·欧梅尔, N·安萨瑞, 荣亚京 申请人:欧加农股份有限公司;药典有限责任公司