专利名称：一种泻鼠李皮苷b的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种泻鼠李皮苷B的制备方法，尤其是一种从植物中提取泻鼠李皮苷 B的制备方法。
背景技术：
泻鼠李皮苷B (Frangulin B)，分子式C2(1H1809，分子量402. 357，CAS 登录号 14101-04-3，主要存在于鼠李科多种植物中。其中鼠李科植物欧鼠李Rhamnus frangula L.的树皮中含量丰富，其分子式如下。现代研究表明，泻鼠李皮苷B具有抗肿瘤、抑制血小板聚集等作用，同时其也作为合成其它活性衍生物的原料。鼠李科植物欧鼠李Rhemnus frangula L.的树皮被作为中药药绿材使用，能润肠通便。现有技术中，尚没有适用于高纯度泻鼠李皮苷B工业化大生产的制备工艺报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种利于大生产操作、产品纯度高的泻鼠李皮苷B的制备方法。为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案。取欧鼠李树皮，粉碎，加入其质量8-12倍量体积浓度为50-70%的乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率300-600W，萃取1-3次，每次3-10分钟，合并萃取液，滤过，减压回收乙醇并浓缩，以比例为3:1的乙酸乙酯-水混合溶剂进行6-8级逆流萃取，合并乙酸乙酯层，减压回收乙醇并浓缩，通过大孔吸附树脂吸附，70-80%乙醇洗脱，收集3-8 倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，加入丙酮结晶，分离结晶，洗涤、干燥，即得。微波萃取用乙醇的浓度为60%，用量为原料质量的10倍量体积。微波萃取功率500W，萃取2次，每次8分钟。逆流萃取的级数为7级。大孔吸附树脂选自AB-8型、HPD-700型、H-50型大孔吸附树脂中的一种。大孔吸附树脂洗脱用乙醇的浓度为75%。大孔吸附树脂洗脱用乙醇的收集量为5倍量柱体积。制备所得泻鼠李皮苷B可采用下列方法检测。
试验例1 HPLC法测定泻鼠李皮苷B纯度。色谱条件
色谱柱十八烷基硅烷键合胶硅胶为填充剂；流动相甲醇-乙腈溶液(90 10)；流速:lmL/min ；检测波长:255nm ；柱温:30°C。测定方法
精密称取泻鼠李皮苷B2mg，置于50mL量瓶中，加人甲醇20mL，超声振荡使溶解，甲醇定容至刻度，吸取10 μ L，注入高效液相色谱仪，采用归一化法测定样品纯度。采用本发明制备泻鼠李皮苷B，利于大生产操作，能耗小，污染小。下面将结合具体实施方式
对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1
取欧鼠李树皮10Kg，粉碎，加入80L浓度为50%的乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率300W，萃取1次，3分钟，合并萃取液，滤过，减压回收乙醇并浓缩，以比例为 3:1的乙酸乙酯-水混合溶剂进行6级逆流萃取，合并乙酸乙酯层，减压回收乙醇并浓缩， 通过AB-8型大孔吸附树脂吸附，70%乙醇洗脱，收集3倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，加入丙酮结晶，分离结晶，洗涤、干燥，即得泻鼠李皮苷Bll. 3g，经HPLC检测，纯度为 95. 0%，UV、IKMSjHNMR^CMffi等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。实施例2
取欧鼠李树皮10Kg，粉碎，加入120L浓度为70%的乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率600W，萃取3次，每次10分钟，合并萃取液，滤过，减压回收乙醇并浓缩， 以比例为3:1的乙酸乙酯-水混合溶剂进行8级逆流萃取，合并乙酸乙酯层，减压回收乙醇并浓缩，通过HPD-700型大孔吸附树脂吸附，80%乙醇洗脱，收集8倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，加入丙酮结晶，分离结晶，洗涤、干燥，即得泻鼠李皮苷B13. 3g，经HPLC检测，纯度为94. 2%，UV、IR, MS,2HNMR, 13CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。实施例3
取欧鼠李树皮10Kg，粉碎，加入100L浓度为60%的乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率500W，萃取2次，每次8分钟，合并萃取液，滤过，减压回收乙醇并浓缩，以比例为3 1的乙酸乙酯-水混合溶剂进行7级逆流萃取，合并乙酸乙酯层，减压回收乙醇并浓缩，通过H-50型大孔吸附树脂吸附，75%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，加入丙酮结晶，分离结晶，洗涤、干燥，即得泻鼠李皮苷B12. 9g，经HPLC检测，纯度为98. 3%，UV、IR, MS,2HNMR, 13CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。
权利要求
1.一种泻鼠李皮苷B的制备方法，其特征在于所述的方法由下列步骤组成取欧鼠李树皮，粉碎，加入其质量8-12倍量体积浓度为50-70%的乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率300-600W，萃取1-3次，每次3-10分钟，合并萃取液，滤过，减压回收乙醇并浓缩，以比例为3:1的乙酸乙酯-水混合溶剂进行6-8级逆流萃取，合并乙酸乙酯层， 减压回收乙醇并浓缩，通过大孔吸附树脂吸附，70-80%乙醇洗脱，收集3-8倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，加入丙酮结晶，分离结晶，洗涤、干燥，即得。
2.根据权利要求1所述一种泻鼠李皮苷B的制备方法，其特征在于所述微波萃取用乙醇的浓度为60%，用量为原料质量的10倍量体积。
3.根据权利要求1所述一种泻鼠李皮苷B的制备方法，其特征在于所述微波萃取功率 500W，萃取2次，每次8分钟。
4.根据权利要求1所述一种泻鼠李皮苷B的制备方法，其特征在于所述逆流萃取的级数为7级。
5.根据权利要求1所述一种泻鼠李皮苷B的制备方法，其特征在于所述大孔吸附树脂选自AB-8型、HPD-700型、H-50型大孔吸附树脂中的一种。
6.根据权利要求1所述一种泻鼠李皮苷B的制备方法，其特征在于所述大孔吸附树脂洗脱用乙醇的浓度为75%。
7.根据权利要求1所述一种泻鼠李皮苷B的制备方法，其特征在于所述大孔吸附树脂洗脱用乙醇的收集量为5倍量柱体积。
全文摘要
本发明涉及一种操作简便、污染小、能耗少的泻鼠李皮苷B的制备方法。工艺步骤为取欧鼠李树皮，粉碎，加入乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，合并萃取液，滤过，减压回收乙醇并浓缩，以比例为3:1的乙酸乙酯-水混合溶剂进行6-8级逆流萃取，合并乙酸乙酯层，减压回收乙醇并浓缩，通过大孔吸附树脂吸附,乙醇洗脱，加入丙酮结晶，分离结晶，洗涤、干燥，即得。采用本发明制备泻鼠李皮苷B，产品纯度高，易于实现产业化放大。
文档编号C07H1/08GK102250169SQ20111015060
公开日2011年11月23日 申请日期2011年6月7日 优先权日2011年6月7日
发明者张发成, 王峰, 王琳 申请人:苏州派腾生物医药科技有限公司