专利名称：一种高纯度闭联茄定二烯二醇的制备方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，涉及一种高纯度闭联茄定二烯二醇的制备方法。
背景技术：
闭联茄定二烯二醇(Etioline，Veralosidine, Deoxyveralodisinol), CAS 登录号为29271-49-6，分子式为C27H43NO2,分子量为413. 65，是一种留体生物碱类化合物，为无色针晶(丙酮)，mp. 149-151°C。广泛存在于百合科、茄科等植物中，如百合科植物狭叶藜芦 Veratrum stenophyllum Diels 全草、前禾斗植物珊瑚豆 5b應 capsicastrum Link 根皮等。现代药理研究表明，闭联茄定二烯二醇具有保肝和细胞毒活性。目前关于闭联茄定二烯二醇的研究较少，尚未发现大量制备高含量闭联茄定二烯二醇的方法报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种猪毛菜碱的制备方法，该方法产品收率高、
含量高。为了解决上述技术问题，本发明的技术方案如下
(1)将狭叶藜芦全草粉碎后用65-95%乙醇热回流提取2-4次，每次1-2.5h，合并提取液，过滤、浓缩得浓缩液；
(2)将浓缩液加水稀释后加入到大孔吸附树脂柱上，以20倍去离子水洗脱杂质，再以 10倍体积0. 05-0. 1%的氨水或氢氧化钠水溶液洗脱，然后用10-40%乙醇溶液洗脱，最后用 75-95%乙醇洗脱得到狭叶藜芦总留体生物碱洗脱液，减压浓缩得浸膏；
(3)以氯仿-甲醇-正丁醇-0.1%氨水为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离闭联茄定二烯二醇，收集闭联茄定二烯二醇组分，浓缩、干燥即得高纯度闭联茄定二烯二醇。所述步骤(2)中大孔吸附树脂可选D101、AB-8、HPD100、Diaion HP40型大孔树脂中的一种。所述步骤(3)中氯仿-甲醇-正丁醇-0. 1%氨水体积比为(25-30) (35-45) (4-8) (15-23)。所述步骤(3)中溶剂系统以上相为固定相，下相为流动相。本发明的有益效果在于本发明用乙醇水溶液加热回流提取，经大孔吸附树脂柱富集、高速逆流色谱法纯化，具有自动化程度高、操作简单、纯度高等优点，易于规模化生产。
具体实施例方式下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例1
将狭叶藜芦全草粉碎，用70%乙醇加热回流提取3次，每次1. 5h，合并提取液，过滤、浓缩得到浓缩液，将浓缩液加水稀释后加入DlOl大孔吸附树脂柱，先以20倍去离子水洗脱杂质，再以10倍体积量的0. 05%氨水水溶液洗脱，然后用20%乙醇洗脱，最后用80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液，减压浓缩得到浸膏；取氯仿、甲醇、正丁醇、0. 1%氨水按体积比为 28:43:7:20混合，静置分层，以上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速为850rpm，取下相溶解浸膏注入色谱仪，控制流动相流速为4ml/min，收集闭联茄定二烯二醇流分，浓缩、干燥得闭联茄定二 烯二醇，经HPLC检测，其含量为95. 6%。实施例2:
将狭叶藜芦全草粉碎，用65%乙醇加热回流提取4次，每次lh，合并提取液，过滤、浓缩得到浓缩液，将浓缩液加水稀释后加入AB-8大孔吸附树脂柱，先以20倍去离子水洗脱杂质，再以10倍体积量的0. 1%氨水水溶液洗脱，然后用10%乙醇洗脱，最后用85%乙醇洗脱，收集90%乙醇洗脱液，减压浓缩得到浸膏；取氯仿、甲醇、正丁醇、0. 1%氨水按体积比为 25 37 6 23混合，静置分层，以上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速为850rpm，取下相溶解浸膏注入色谱仪，控制流动相流速为2. 5ml/min，收集闭联茄定二烯二醇流分，浓缩、干燥得闭联茄定二烯二醇，经HPLC检测，其含量为96. 1%。实施例3:
将狭叶藜芦全草粉碎，用80%乙醇加热回流提取2次，每次2. 5h，合并提取液，过滤、浓缩得到浓缩液，将浓缩液加水稀释后加入Diaion HP40大孔吸附树脂柱，先以20倍去离子水洗脱杂质，再以10倍体积量的0. 06%氢氧化钠水溶液洗脱，然后用40%乙醇洗脱，最后用 90%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液，减压浓缩得到浸膏；取氯仿、甲醇、正丁醇、0. 1%氨水按体积比为30:35:8:17混合，静置分层，以上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速为850rpm，取下相溶解浸膏注入色谱仪，控制流动相流速为3ml/min，收集闭联茄定二烯二醇流分，浓缩、干燥得闭联茄定二烯二醇，经HPLC检测，其含量为95. 8%。实施例4:
将狭叶藜芦全草粉碎，用95%乙醇加热回流提取3次，每次2h，合并提取液，过滤、浓缩得到浓缩液，将浓缩液加水稀释后加入HPD100大孔吸附树脂柱，先以20倍去离子水洗脱杂质，再以10倍体积量的0. 08%氢氧化钠水溶液洗脱，然后用30%乙醇洗脱，最后用75%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液，减压浓缩得到浸膏；取氯仿、甲醇、正丁醇、0. 1%氨水按体积比为29:45:4:15混合，静置分层，以上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速为850rpm，取下相溶解浸膏注入色谱仪，控制流动相流速为2ml/min，收集闭联茄定二烯二醇流分，浓缩、干燥得闭联茄定二烯二醇，经HPLC检测，其含量为96. 3%。
权利要求
1.一种高纯度闭联茄定二烯二醇的制备方法，其特征在于包括以下步骤(1)将狭叶藜芦全草粉碎后用65-95%乙醇热回流提取2-4次，每次1-2.5h，合并提取液，过滤、浓缩得浓缩液；(2)将浓缩液加水稀释后加入到大孔吸附树脂柱上，以20倍去离子水洗脱杂质，再以 10倍体积0. 05-0. 1%的氨水或氢氧化钠水溶液洗脱，然后用10-40%乙醇溶液洗脱，最后用 75-95%乙醇洗脱得到狭叶藜芦总留体生物碱洗脱液，减压浓缩得浸膏；(3)以氯仿-甲醇-正丁醇-0.1%氨水为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离闭联茄定二烯二醇，收集闭联茄定二烯二醇组分，浓缩、干燥即得高纯度闭联茄定二烯二醇。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中大孔吸附树脂可选 D101、AB-8、HPD100、Diaion HP40 型大孔树脂中的一种。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中氯仿-甲醇-正丁醇-0. 1% 氨水体积比为(25-30) (35-45) (4-8) (15-23)。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中溶剂系统以上相为固定相，下相为流动相。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，涉及一种高纯度闭联茄定二烯二醇的制备方法。该方法将狭叶藜芦全草粉碎、有机溶剂提取、大孔吸附树脂柱富集、高速逆流色谱分离纯化、干燥制得闭联茄定二烯二醇单体成品。本发明操作简单、易于控制、环境污染小，所得产品纯度高，易于规模化生产。
文档编号C07J43/00GK102432661SQ20111030348
公开日2012年5月2日 申请日期2011年10月10日 优先权日2011年10月10日
发明者刘东锋, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司