专利名称：一种吖啶香豆素碱f的制备方法
技术领域：
本发明属于中药化学领域 ，涉及ー种吖啶香豆素碱F的制备方法。
背景技术：
芸香科柑橘属植物营养全面，含有黄酮类、柠檬苦素类、生物碱类、香豆素类及维生素等多种活性成分，其中，生物碱是其中的ー类重要的天然含负氧化态氮原子的有机化合物，具有碱性和显著的生物活性。吖啶香豆素碱F (Acrimarine F)，分子式为C31H29NO8,分子量为543. 57，为淡黄色粉末，是ー种B丫唳生物碱类化合物，分布于芸香科植物舟常桔Gtrw1S funadokv Hort. exY. Tanaka和葡萄柚杂交桔CYirw1S paradisi XCitrus tangerinaキ。现代药理研究表明，吖啶香豆素碱F具有抑制病毒活化作用，对埃-巴病毒(Epstein-Barr病毒，EBV)具有抑制作用，在500mol ratio/TPA浓度时，具有100%的抑制作用，在10 mo I ratio/TPA浓度时，有66. 8%抑制活性。目前未见有关自柑橘属植物中提取制备吖啶香豆素碱F的方法报道和专利申请。
发明内容
本发明的目的是提供一种利于大生产操作、产品纯度高的吖啶香豆素碱F的制备方法。本发明的目的是通过以下技术方案实现的
一种吖啶香豆素碱F的制备方法，其特征在于包括以下步骤
以葡萄柚杂交桔根为原料，粉碎至20-60目，加入90%こ醇浸溃，索氏提取1-4小时，提取液加入活性炭脱色，脱色液浓缩至浸膏，用酸水溶解，过滤，滤液上阳离子交换树脂，先用去离子水洗至中性，再用解吸附剂反复洗脱，洗脱液减压浓缩，调ρΗΙΟ-ll，经脱盐处理，氯仿萃取，萃取液注入高效逆流萃取器，以氯仿-O. 05mol/L磷酸钠-O. 03mol/L枸櫞酸缓冲液溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，收集吖啶香豆素碱F段，浓缩、干燥即得产品。所述活性炭加入量为提取液体积量的O. 5_1%。所述阳离子树脂为732、HZ002、HZ016、JK006中的ー种。所述解吸附剂为酸-醇溶液，其中酸的质量浓度为1-10%的盐酸、磷酸、硫酸或醋酸，醇的体积浓度为60-95%甲醇或者こ醇。本发明的有益效果是采用上述技术方案制备吖啶香豆素碱F，操作简单、设备投入小、产品纯度高，利于大生产操作。
具体实施例方式 下面将结合具体实施方式
进ー步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例I :
取IOkg葡萄柚杂交菊根粉碎至60目，装入索氏提取器中，加入5倍于原料量的90%こ醇浸溃12小时，索氏提取3小时，将提取液过滤，滤液加入其体积的1%的活性炭脱色，过滤得脱色液，减压浓缩至浸膏，将浸膏用2%硫酸水溶液溶解，过滤，滤液加入732型阳离子交换树脂柱上，先用水洗树脂至水洗液无色，然后用1%硫酸-60%こ醇溶液解吸附，将洗脱液减压浓縮，氨水调PH至10. 2，加入等体积氯仿萃取，将氯仿层回收溶剂至小体积，注入高效逆流萃取器中，以氯仿-O. 05mol/L磷酸钠-O. 03mol/L枸櫞酸缓冲液溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，收集吖啶香豆素碱F段，浓缩、干燥即得吖啶香豆素碱F546mg，经HPLC检测，其含量为98. 7%。实施例2:
取IOkg葡萄柚杂交菊根粉碎至20目，装入索氏提取器中，加入4倍于原料量的90%こ醇浸溃24小时，索氏提取4小时，将提取液过滤，滤液加入其体积的O. 5%的活性炭脱色，过滤得脱色液，减压浓缩至浸膏，将浸膏用1%磷酸水溶液溶解，过滤，滤液加入HZ016型阳离子交换树脂柱上，先用水洗树脂至水洗液无色，然后用3%磷酸-75%こ醇溶液解吸附， 将洗脱液减压浓縮，氨水调pH至10. 6，加入等体积氯仿萃取，将氯仿层回收溶剂至小体积，注入高效逆流萃取器中，以氯仿-O. 05mol/L磷酸钠-O. 03mol/L枸櫞酸缓冲液溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，收集吖啶香豆素碱F段，浓缩、干燥即得吖啶香豆素碱F538mg，经HPLC检测，其含量为98. 2%。实施例3
取IOkg葡萄柚杂交菊根粉碎至40目，装入索氏提取器中，加入6倍于原料量的90%乙醇浸溃15小时，索氏提取I. 5小时，将提取液过滤，滤液加入其体积的O. 8%的活性炭脱色，过滤得脱色液，减压浓缩至浸膏，将浸膏用3%醋酸水溶液溶解，过滤，滤液加入JK006型阳离子交换树脂柱上，先用水洗树脂至水洗液无色，然后用6%醋酸-80%こ醇溶液解吸附，将洗脱液减压浓縮，氨水调PH至11. 0，加入等体积氯仿萃取，将氯仿层回收溶剂至小体积，注入高效逆流萃取器中，以氯仿-O. 05mol/L磷酸钠-O. 03mol/L枸櫞酸缓冲液溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，收集吖啶香豆素碱F段，浓缩、干燥即得吖啶香豆素碱F529mg，经HPLC检测，其含量为98. 3%。实施例4:
取20kg葡萄柚杂交菊根粉碎至20目，装入索氏提取器中，加入4倍于原料量的90%乙醇浸溃10小时，索氏提取2. 5小时，将提取液过滤，滤液加入其体积的O. 6%的活性炭脱色，过滤得脱色液，减压浓缩至浸膏，将浸膏用5%盐酸水溶液溶解，过滤，滤液加入HZ002型阳离子交换树脂柱上，先用水洗树脂至水洗液无色，然后用8%盐酸-95%こ醇溶液解吸附，将洗脱液减压浓縮，氨水调PH至10. 5，加入等体积氯仿萃取，将氯仿层回收溶剂至小体积，注入高效逆流萃取器中，以氯仿-O. 05mol/L磷酸钠-O. 03mol/L枸櫞酸缓冲液溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，收集吖啶香豆素碱F段，浓缩、干燥即得吖啶香豆素碱F942mg，经HPLC检测，其含量为98. 6%。
权利要求
1.一种吖啶香豆素碱F的制备方法，其特征在于包括以下步骤以葡萄柚杂交桔根为原料，粉碎至20-60目，加入90%こ醇浸溃，索氏提取1-4小时，提取液加入活性炭脱色，脱色液浓缩至浸膏，用酸水溶解，过滤，滤液上阳离子交换树脂，先用去离子水洗至中性，再用解吸附剂反复洗脱，洗脱液减压浓縮，调ρΗΙΟ-ll，经脱盐处理，氯仿萃取，萃取液注入高效逆流萃取器，以氯仿-O. 05mol/L磷酸钠-O. 03mol/L枸櫞酸缓冲液溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，收集吖啶香豆素碱F段，浓缩、干燥即得产品。
2.如权利要求I所述的ー种吖啶香豆素碱F的制备方法，其特征在于所述活性炭加入量为提取液体积量的O. 5-1%。
3.如权利要求I所述的ー种吖啶香豆素碱F的制备方法，其特征在于所述阳离子树脂为 732、HZ002、HZ016、JK006 中的ー种。
4.如权利要求I所述的ー种吖啶香豆素碱F的制备方法，其特征在于所述解吸附剂为酸-醇溶液，其中酸的质量浓度为1-10%的盐酸、磷酸、硫酸或醋酸，醇的体积浓度为60-95%甲醇或者こ醇。
全文摘要
本发明涉及一种吖啶香豆素碱F的制备方法，方法包括以下步骤以葡萄柚杂交桔根为原料，粉碎至20-60目，加入90%乙醇索氏提取，提取液加入活性炭脱色，脱色液浓缩至浸膏，用酸水溶解，过滤，滤液上阳离子交换树脂，先用去离子水洗至中性，再用解吸附剂反复洗脱，洗脱液减压浓缩，调pH10-11，经脱盐处理，氯仿萃取，萃取液注入高效逆流萃取器，以氯仿-0.05mol/L磷酸钠-0.03mol/L枸橼酸缓冲液溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，收集吖啶香豆素碱F段，浓缩、干燥即得产品。本发明制备吖啶香豆素碱F，不仅得到高含量吖啶香豆素碱F，而且易于工业化生产。
文档编号C07D405/06GK102863429SQ20121035666
公开日2013年1月9日 申请日期2012年9月24日 优先权日2012年9月24日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司