专利名称：一种苄氧羰基丙氨酰丙氨酸的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种两肽的制备方法，特别涉及一种苄氧羰基丙氨酰丙氨酸的制备方法。
背景技术：
两肽的合成是最简单多肽合成中最简单的，由一分子的游离氨基和一份子的游离羧基脱掉一分子的羧基，两肽的合成尤其适用于液相合成，不同的氨基酸合成两肽有不同的的缩合方法，1985年9月由科学出版社出版的《多肽合成》这本书中介绍了碳二亚胺法，活化酯法，混合酸酐法，叠氮物法等方法，具体应用到两个不同的氨基酸上，需要灵活运用，经检索，未发现同一序列的化合物的优选方法，苄氧羰基丙氨酰丙氨酸是一种常用的多肽，有多种方法可以完成，现有方法多产量不大，不适于工业化生产。
发明内容
本发明的目的是提供一种苄氧羰基丙氨酰丙氨酸的制备方法，主要解决现有合成方法不适于工业化生产的技术问题。本发明的思路:苄氧羰基丙氨酸和丙氨酸甲酯盐酸盐由#，舻_ 二环己基碳二亚胺缩合得苄氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯，然后皂化，得到苄氧羰基丙氨酰丙氨酸。本发明的技术方案:一种苄氧羰基丙氨酰丙氨酸的制备方法，其特征在于其制备具体步骤为，第一步反应:将丙氨酸甲酯盐酸盐加入到二氯甲烷中，加入有机碱，物质的量为丙氨酸甲酯盐酸盐的广1.3倍，加入苄氧羰基丙氨酸，物质的量为丙氨酸甲酯盐酸盐的
0.8^1.2倍，冰浴，滴加#，舻-二环己基碳二亚胺的二氯甲烷溶液，与#，舻-二环己基碳二亚胺物质的量为苄氧羰基丙氨酸广1.2倍，反应过夜(12-16小时)，滤去二环己基脲，旋蒸去掉二氯甲烷，加入乙酸 乙酯，碳酸氢钠溶液洗涤有机层，稀盐酸洗涤有机层，饱和食盐水洗涤有机层，乙酸乙酯干燥，过滤，蒸干，得白色固体，重结晶，得苄氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯；第二步反应:将苄氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯溶于酒精中，加入氢氧化钠溶液，其物质的量为苄氧羰基丙氨酸广1.2倍，皂化，完毕后，浓缩，乙醚洗涤，加入乙酸乙酯，调pH值至酸性，乙酸乙酯提取，水洗有机层，有机层干燥，抽滤，浓缩，苄氧羰基丙氨酰丙氨酸析出，乙醚洗涤，得到产品。所述有机碱选自胺类化合物、醇的碱金属盐、烷基金属锂化合物或胺基锂化合物中的一种，优选甲胺、乙醇钠、丁基锂或二异丙基胺基锂中的一种。本发明的有益效果:本发明根据具体的氨基酸序列和保护基团特点，提供一种相应的两肽的的生产方法，经研究分析，选择了合适的氨基酸及缩合剂，合适的结晶重结晶方法，纯度可达98%以上，收率达85%以上，适于工业化生产。
具体实施例方式实施例1:将丙氨酸甲酯盐酸盐加入到二氯甲烷中，加入甲胺，物质的量为丙氨酸甲酯盐酸盐的I倍，加入苄氧羰基丙氨酸，物质的量为丙氨酸甲酯盐酸盐的0.8倍，冰浴，滴加#，舻-二环己基碳二亚胺的二氯甲烷溶液，与火舻-二环己基碳二亚胺物质的量为苄氧羰基丙氨酸I倍，反应过夜，滤去二环己基脲，旋蒸去掉二氯甲烷，加入乙酸乙酯，碳酸氢钠溶液洗涤有机层，稀盐酸洗涤有机层，饱和食盐水洗涤有机层，乙酸乙酯干燥，过滤，蒸干，的白色固体，重结晶，得苄氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯；将苄氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯溶于酒精中，加入氢氧化钠溶液，其物质的量为苄氧羰基丙氨酸I倍，皂化，完毕后，浓缩，乙醚洗涤，加入乙酸乙酯，调PH值至酸性，乙酸乙酯提取，水洗有机层，有机层干燥，抽滤，浓缩，苄氧羰基丙氨酰丙氨酸析出，乙醚洗涤，得到产品。纯度98.1%，收率85%。产物的定性分析:
质谱:分子量 294.3 测得结果 295.20 [M+H] + 317.15 [M+Na] + 611.50[2M+Na] +
核磁氢谱:溶剂二甲亚砜化学位移1.198 1.222 1.266 1.2671.290 峰面积6.49 化学位移2.511峰面积细线化学位移4.083峰面积1.07化学位移4.199峰面积1.00 化学位移5.018 峰面积1.92 化学位移6.028 峰面积细线化学位移 7.306 7.337 7.342 7.359 7.429 7.454 7.455 峰面积 5.27 化学位移8.133 8.155 8.158峰面积1.02化学位移12.557峰面积0.95。实施例2:
将丙氨酸甲酯盐酸盐加入到二氯甲烷中，加入乙醇钠，物质的量为丙氨酸甲酯盐酸盐的1.3倍，加入苄氧羰基丙氨酸，物质的量为丙氨酸甲酯盐酸盐的1.2倍，冰浴，滴加#，舻_ 二环己基碳二亚胺的二氯甲烷溶液，与舻-二环己基碳二亚胺物质的量为苄氧羰基丙氨酸1.2倍，反应过夜，滤去二环己基脲，旋蒸去掉二氯甲烷，加入乙酸乙酯，碳酸氢钠溶液洗涤有机层，稀盐酸洗涤有机层，饱和食盐水洗涤有机层，乙酸乙酯干燥，过滤，蒸干，的白色固体，重结晶，得苄 氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯；将苄氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯溶于酒精中，加入氢氧化钠溶液，其物质的量为苄氧羰基丙氨酸1.2倍，皂化，完毕后，浓缩，乙醚洗涤，加入乙酸乙酯，调PH值至酸性，乙酸乙酯提取，水洗有机层，有机层干燥，抽滤，浓缩，苄氧羰基丙氨酰丙氨酸析出，乙醚洗涤，得到产品。纯度99.2%，收率90%。定性分析结果同实施例1。实施例3:
将丙氨酸甲酯盐酸盐加入到二氯甲烷中，加入丁基锂，物质的量为丙氨酸甲酯盐酸盐的1.1倍，加入苄氧羰基丙氨酸，物质的量为丙氨酸甲酯盐酸盐的I倍，冰浴，滴加#，舻-二环己基碳二亚胺的二氯甲烷溶液，与#，舻-二环己基碳二亚胺物质的量为苄氧羰基丙氨酸1.1倍，反应过夜，滤去二环己基脲，旋蒸去掉二氯甲烷，加入乙酸乙酯，碳酸氢钠溶液洗涤有机层，稀盐酸洗涤有机层，饱和食盐水洗涤有机层，乙酸乙酯干燥，过滤，蒸干，的白色固体，重结晶，得苄氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯；将苄氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯溶于酒精中，力口入氢氧化钠溶液，其物质的量为苄氧羰基丙氨酸1.1倍，皂化，完毕后，浓缩，乙醚洗涤，力口入乙酸乙酯，调PH值至酸性，乙酸乙酯提取，水洗有机层，有机层干燥，抽滤，浓缩，苄氧羰基丙氨酰丙氨酸析出，乙醚洗涤，得到产品。纯度99.3%，收率87%。定性分析结果同实施例1o
实施例4:
将丙氨酸甲酯盐酸盐加入到二氯甲烷中，加入二异丙基胺基锂，物质的量为丙氨酸甲酯盐酸盐的1.1倍，加入苄氧羰基丙氨酸，物质的量为丙氨酸甲酯盐酸盐的0.9倍，冰浴，滴加#，舻_ 二环己基碳二亚胺的二氯甲烷溶液，与火舻-二环己基碳二亚胺物质的量为苄氧羰基丙氨酸1.1倍，反应过夜，滤去二环己基脲，旋蒸去掉二氯甲烷，加入乙酸乙酯，碳酸氢钠溶液洗涤有机层，稀盐酸洗涤有机层，饱和食盐水洗涤有机层，乙酸乙酯干燥，过滤，蒸干，的白色固体，重结晶，得苄氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯；将苄氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯溶于酒精中，加入氢氧化钠溶液，其物质的量为苄氧羰基丙氨酸1.2倍，皂化，完毕后，浓缩，乙醚洗涤，加入乙酸乙酯，调PH值至酸性，乙酸乙酯提取，水洗有机层，有机层干燥，抽滤，浓缩，苄氧羰基丙氨酰丙氨酸析出，乙醚洗涤，得到产品。纯度99.3%，收率89%。定性分析结果同 实施例1。
权利要求
1.一种苄氧羰基丙氨酰丙氨酸的制备方法，其特征在于其制备具体步骤为， 第一步反应:将丙氨酸甲酯盐酸盐加入到二氯甲烷中，加入有机碱，再加入苄氧羰基丙氨酸，冰浴，滴加#，舻-二环己基碳二亚胺的二氯甲烷溶液，反应过夜，滤去二环己基脲，旋蒸去掉二氯甲烷，经常规处理后得到白色固体进行重结晶，得苄氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酷； 第二步反应:将苄氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯溶于酒精中，加入氢氧化钠溶液进行皂化反应，经常规处理得到最终产品。
2.根据权利要求1所述的一种苄氧羰基丙氨酰丙氨酸的制备方法，其特征在于所述的第一步反应中，有机碱选自胺类化合物、醇的碱金属盐、烷基金属锂化合物或胺基锂化合物中的一种。
3.根据权利要求2所述的一种苄氧羰基丙氨酰丙氨酸的制备方法，其特征在于有机碱选自甲胺、乙醇钠、丁基锂或二异丙基胺基锂中的一种。
4.根据权利要求1所述的一种苄氧羰基丙氨酰丙氨酸的制备方法，其特征在于所述的第一步反应中，有机碱物质的量为丙氨酸甲酯盐酸盐的广1.3倍，苄氧羰基丙氨酸物质的量为丙氨酸甲酯盐酸盐的0.8~1.2倍,N,N'-二环己基碳二亚胺物质的量为苄氧羰基丙氨酸广1.2倍。
5.根据权利要求1所述的一种苄氧羰基丙氨酰丙氨酸的制备方法，其特征在于所述的第二步反应中，氢氧化钠物质的量为苄氧羰基丙氨酸广1.2倍。
全文摘要
本发明涉及一种两肽的制备方法，特别涉及一种苄氧羰基丙氨酰丙氨酸的制备方法。主要解决现有合成方法不适于工业化生产的技术问题。技术方案为一种苄氧羰基丙氨酰丙氨酸的制备方法，第一步反应将丙氨酸甲酯盐酸盐加入到二氯甲烷中，加入有机碱，再加入苄氧羰基丙氨酸，冰浴，滴加N,N'-二环己基碳二亚胺的二氯甲烷溶液，反应过夜，滤去二环己基脲，旋蒸去掉二氯甲烷，经常规处理后得到白色固体进行重结晶，得苄氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯；第二步反应将苄氧羰基丙氨酰丙氨酸甲酯溶于酒精中，加入氢氧化钠溶液进行皂化反应，经常规处理得到最终产品。
文档编号C07K5/062GK103073618SQ201310013700
公开日2013年5月1日 申请日期2013年1月15日 优先权日2013年1月15日
发明者徐红岩, 李忠亮 申请人:吉尔生化(上海)有限公司, 上海吉尔多肽有限公司, 无锡亚肽生物科技有限公司