一种羽扇豆醇的制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种羽扇豆醇（Lupeol）的制备方法，使用酸化技术使部分羽扇豆醇的皂甙及酸酯类衍生物得以分解转化为羽扇豆醇，并破坏杂质部分从而达到分离制取羽扇豆醇的目的。结合大孔树脂床结合硅胶柱层析技术，降低了羽扇豆醇的分离难度，能将枸骨叶提取物中的羽扇豆醇的纯化含量由传统的90%提高到98%。同时提高了资源利用率，使羽扇豆醇的含量达到了国内外市场要求，降低了羽扇豆醇的规模化生产成本。
【专利说明】[0001] -种羽扇豆醇的制备方法
【技术领域】
[0002] 涉及一种羽扇豆醇（Lupeol)的制备方法，使用酸化技术使部分羽扇豆醇的皂甙及 酸酯类衍生物得以分解转化为羽扇豆醇，并破坏杂质部分从而达到分离制取羽扇豆醇的目 的。结合大孔树脂床结合硅胶柱层析技术，降低了羽扇豆醇的分离难度，能将枸骨叶提取物 中的羽扇豆醇的纯化含量由传统的90%提高到98%。同时提高了资源利用率，使羽扇豆醇的 含量达到了国内外市场要求，降低了羽扇豆醇的规模化生产成本。
[0003]
【背景技术】
[0004] 羽扇豆醇（Lupeol) Lup-20 (29) - en_3 β _〇1; 3 β-hydroxy -20 (29) - lupene， 又名蛇麻脂醇，蛇麻酯醇，蛇麻醇酯。广泛分布于豆科，姚金娘科，桑科，柿科植物中，如：姚 金娘，广豆根，杨梅，君迁子等。羽扇豆醇是一种在水果、蔬菜以及药用植物中存在的食物三 萜，它作为药物的活性成分之一在北美、日本、中国很早就被当地的传统医学所应用。体外 实验发现羽扇豆醇具有较强的抗氧化、抗炎、抗风湿、抗诱变、抗疟疾的活性，并且在体内是 人的D N A拓扑异构酶II ( t ο ρ ο II)选择性抑制成分，其在医学领域有着广泛的潜在扩 展应用前景。最早提取分离羽扇豆醇的原料是从羽扇豆的种皮中提取分离的，有关羽扇豆 醇的药理药效研究也是从羽扇豆的种皮开始的。由于羽扇豆主要分布于北美洲西部、南美 洲、地中海地区以及非洲，原料价格昂贵且难以取得。国内有关资源的研究，开始于山楂、 余甘子、蒲公英及一些水果类的研究。据研究资料显示，这些资源中羽扇豆醇的含量都很 低（最低的是ppm级）达不到工业化生产的原料来源要求。因此寻找新的高含量资源，并根 据不同资源中杂质成分组成的不同研发新的分离工艺就成为能否实现羽扇豆醇规模化生 产的关键。枸骨叶在我国分布范围较广，且枸骨叶的种植面积较大，原料便宜易得，价低且 含量相对较高(最高含量达到1.3%)。但由于被提取物原料中成分复杂，母体结构相同衍生 物较多，传统工艺用乙醇提取，皂化后再用环己烷萃取的方法纯化，但其所得到的产物中羽 扇豆醇含量仅在30-84%之间，难以得到高含量产品。经过多次使用包括乙酸乙酯、石油醚、 正丁醇及氯仿等溶剂萃取后，再用硅胶柱层析分离，最多能达到90%的含量。用醇提取或二 氯甲烷提取后用大孔吸附树脂分离最多达到80%的含量。制备色谱法可以达到99%以上的 含量，但难以满足规模化生产的需要，目前仅仅用于对照品的分离。由于大批量提取分离较 为困难。影响了对其进一步进行的研究试验推广工作。其制备分离纯化困难导致纯化成本 过高，极大地限制了该产品广泛研究应用。针对目前现实实际生产状况，及国内外市场的需 求，对分离纯化制备羽扇豆醇工艺做了大量的分析研究，提出了使用酸化技术使部分羽扇 豆醇的皂甙及酸酯类衍生物得以分解转化为羽扇豆醇，并破坏杂质部分从而达到分离制取 羽扇豆醇的目的。与现有方法相比较，酸化水解部分衍生物可以得到更多的目标物，在酸化 水解过程中部分杂质结构破坏使得分离过程变的更为简单。该方法具有生产环节少，方法 简单，设备要求不苛刻，质量可控性强，通过酸化一硅胶柱层析一结晶工艺后即可达到98% 以上的含量。由于酸的水解使羽扇豆醇的皂甙、酯、盐等衍生物转化为羽扇豆醇，从而大大 提高了羽扇豆醇的回收率，降低了生产成本。易于实现工业化大生产，成本低廉有利于后期 药品的推广使用。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是在应用国产枸骨叶生产羽扇豆醇的前提下，建立一种能够用使用 酸化技术使部分羽扇豆醇的皂甙及酸酯类衍生物得以分解转化为羽扇豆醇，并破坏杂质部 分从而达到分离制取羽扇豆醇的目的。结合大孔树脂床结合硅胶柱层析技术，降低了羽扇 豆醇的分离难度，能将枸骨叶提取物中的羽扇豆醇的纯化含量由传统的90%提高到98%。同 时提高了资源利用率，使羽扇豆醇的含量达到了国内外市场要求，降低了羽扇豆醇的规模 化生产成本。
[0006] 为了实现上述目的，本发明采取的方案是：以含有羽扇豆醇的植物枸骨叶为原料， 经粉碎清水浸泡去除大部分杂质后将水液除去，应用醇液提取有效成分，收集醇提取溶液、 过滤、浓缩、正丁醇萃取、浓缩、得到羽扇豆醇的初提制品，通过树脂柱吸附洗脱分离技术， 使提取物达到一定纯度，在此的基础上经过乙醇溶解酸化处理，使部分羽扇豆醇的皂甙及 酸酯类衍生物得以分解转化为羽扇豆醇，并破坏杂质部分化学结构从而达到分离制取羽扇 豆醇的目的。再通过简单的溶剂萃取、过滤、浓缩、结晶、硅胶层析柱分离、结晶获取符合药 用要求的羽扇豆醇。
[0007] -种羽扇豆醇的制备方法，从含有羽扇豆醇的植物枸骨叶中提取制备获取符合药 用质量标准的羽扇豆醇产品的方法，其特征在于：将含有羽扇豆醇的植物枸骨叶为原料，经 粉碎清水浸泡去除大部分杂质后将水液除去，应用醇液提取有效成分，收集醇提取溶液、过 滤、浓缩、正丁醇萃取、浓缩得到羽扇豆醇的初提制品，通过树脂柱吸附洗脱分离技术，使提 取物达到一定纯度，在此基础上经过乙醇溶解酸化处理，使部分羽扇豆醇的皂甙及酸酯类 衍生物得以分解转化为羽扇豆醇，并破坏杂质部分化学结构从而达到分离制取羽扇豆醇的 目的。再通过简单的溶剂萃取、过滤、浓缩、结晶、硅胶层析柱分离、结晶获取符合药用要求 的羽扇豆醇。
[0008] 所述一种羽扇豆醇的制备方法，其特征是：用于生产羽扇豆醇的基材是以枸骨叶 为原料经水浸、醇提取、浓缩后正丁醇萃取并再次浓缩后通过树脂柱洗脱分离技术处理，在 此基础上乙醇溶解酸化处理，此酸化处理所用酸液为高浓度盐酸，使部分羽扇豆醇的皂甙 及酸酯类衍生物得以分解转化为羽扇豆醇，并破坏杂质部分化学结构从而达到分离制取羽 扇豆醇的目的。再通过简单的溶剂萃取、过滤、浓缩、结晶、硅胶层析柱分离、结晶获取符合 药用要求的羽扇豆醇。
[0009] 所述一种羽扇豆醇的制备方法，其特征是：用于生产羽扇豆醇的基材是以枸骨叶 为原料经水浸、醇提取、浓缩后正丁醇萃取并再次浓缩后通过树脂柱洗脱分离技术处理，在 此基础上乙醇溶解酸化处理，此酸化处理所用酸液为高浓度盐酸，盐酸浓度可以是5%，也可 以是15%，整个酸化处理过程中可以是在搅拌加热中完成，酸化反应时间可根据加热的温度 反应完成具体情况决定。酸化的目的是使部分羽扇豆醇的皂甙及酸酯类衍生物得以分解转 化为羽扇豆醇，并破坏杂质部分化学结构从而达到分离制取羽扇豆醇的目的。再通过简单 的溶剂萃取、过滤、浓缩、结晶、硅胶层析柱分离、结晶获取符合药用要求的羽扇豆醇。
[0010] 所述一种羽扇豆醇的制备方法，其特征是：用于生产羽扇豆醇的基材是以枸骨叶 为原料经水浸、醇提取、浓缩后正丁醇萃取并再次浓缩后通过树脂柱洗脱分离技术处理，在 此基础上乙醇溶解酸化处理，此酸化处理所用酸液为高浓度盐酸，使部分羽扇豆醇的皂甙 及酸酯类衍生物得以分解转化为羽扇豆醇，并破坏杂质部分化学结构从而达到分离制取羽 扇豆醇的目的。酸化结束后酸化溶液调碱至中性浓缩再通过简单的溶剂萃取、也可以直接 过滤沉淀物进行萃取、浓缩、结晶、硅胶层析柱分离、结晶获取符合药用要求的羽扇豆醇。 [0011] 所述一种羽扇豆醇的制备方法，其特征是：最终结晶获取产品整个溶解结晶过程 可以在乙醇的单一溶剂下进行也可以在乙醇、丙酮、正己烷、石油醚等单纯或混合溶剂中溶 解结晶。
[0012] 本发明的新颖处在首次提出了将枸骨叶作为制备羽扇豆醇的工业原料，使用酸化 技术使部分羽扇豆醇的皂甙及酸酯类衍生物得以分解转化为羽扇豆醇，并破坏杂质部分从 而达到分离制取羽扇豆醇的目的。结合树脂床结合硅胶柱层析技术，降低了羽扇豆醇的分 离难度，能将枸骨叶提取物中的羽扇豆醇的纯化含量由传统的90%提高到98%。同时提高了 资源利用率，使羽扇豆醇的含量达到了国内外市场要求，降低了羽扇豆醇的规模化生产成 本。
【具体实施方式】
[0013] 本发明是以含有羽扇豆醇及衍生物的植物枸骨叶为原料，将含有羽扇豆醇的植物 枸骨叶为原料，经粉碎清水浸泡去除大部分杂质后将水液除去，应用醇液提取有效成分，收 集醇提取溶液、过滤、浓缩、正丁醇萃取、浓缩得到羽扇豆醇的初提制品，通过强酸型离子柱 吸附洗脱分离技术，使提取物达到一定纯度，在此的基础上经过乙醇溶解酸化处理，使部分 羽扇豆醇的皂甙及酸酯类衍生物得以分解转化为羽扇豆醇，并破坏杂质部分化学结构从而 达到分离制取羽扇豆醇的目的。再通过简单的溶剂萃取、过滤、浓缩、结晶、硅胶层析柱分 离、结晶获取符合药用要求的羽扇豆醇。
[0014] 通过下述实施例可以帮助对本发明的理解，而不应限制本发明的保护范围。
[0015] 实施例1 取500g含量1. 2%的枸骨叶，粉碎到20目，用3000ml水室温条件下浸泡2小时，除去 水浸泡液，用85%乙醇溶液2500ml，2000ml，1800ml将水浸泡残渣重复回流提取三次，合并 提取液，过滤，70°C下减压浓缩。得到浸膏82克，将82克浸膏用300ml正丁醇常温下萃取上 次所得的萃取液回收正丁醇。干燥萃取物得到干品16. 5克检测羽扇豆醇含量为34%。将 干品用30%乙醇溶液搅拌溶解得到100克浸膏。在玻璃柱下层装入处理好的Diaon HP-20 树脂200g，然后将溶解的浸膏溶液慢慢倒入柱中，用30 %乙醇300ml冲洗，然后用70 %的 乙醇溶液300ml洗脱，收集70%乙醇洗脱液并蒸干溶剂，得到7. 9g粗品，含量69. 20%。将 7. 9克粗品用80%乙醇50ml溶解后加入浓盐酸至盐酸终浓度为10%水浴搅拌2小时后冷却 至室温，用10%氢氧化钠中和盐酸至中性，回收醇液，干燥后上硅胶柱层析用氯仿-甲醇洗 脱分离，薄层检测洗脱成分，收集目标物浓缩干燥后用无水乙醇结晶得到结晶6. 2克含量 为 98. 45% 实施例2
【权利要求】
1. 一种羽扇豆醇的制备方法，从含有羽扇豆醇的植物枸骨叶中提取制备获取符合药 用质量标准的羽扇豆醇产品的方法，其特征在于：将含有羽扇豆醇的植物枸骨叶为原料，经 粉碎清水浸泡去除大部分杂质后将水液除去，应用醇液提取有效成分，收集醇提取溶液、过 滤、浓缩、正丁醇萃取、浓缩得到羽扇豆醇的初提制品，通过树脂柱吸附洗脱分离技术，使提 取物达到一定纯度，在此的基础上经过乙醇溶解酸化处理，使部分羽扇豆醇的皂甙及酸酯 类衍生物得以分解转化为羽扇豆醇，并破坏杂质部分化学结构从而达到分离制取羽扇豆醇 的目的。
2. 再通过简单的溶剂萃取、过滤、浓缩、结晶、硅胶层析柱分离、结晶获取符合药用要求 的羽扇豆醇。
3. 根据权利要求1所述一种羽扇豆醇的制备方法，其特征是：用于生产羽扇豆醇的基 材是以枸骨叶为原料经水浸、醇提取、浓缩后正丁醇萃取并再次浓缩后通过树脂柱洗脱分 离技术处理，在此基础上乙醇溶解酸化处理，此酸化处理所用酸液为高浓度盐酸，使部分羽 扇豆醇的皂甙及酸酯类衍生物得以分解转化为羽扇豆醇，并破坏杂质部分化学结构从而达 到分离制取羽扇豆醇的目的。
4. 再通过简单的溶剂萃取、过滤、浓缩、结晶、硅胶层析柱分离、结晶获取符合药用要求 的羽扇豆醇。
5. 根据权利要求1所述一种羽扇豆醇的制备方法，其特征是：用于生产羽扇豆醇的基 材是以枸骨叶为原料经水浸、醇提取、浓缩后正丁醇萃取并再次浓缩后通过树脂柱洗脱分 离技术处理，在此基础上乙醇溶解酸化处理，此酸化处理所用酸液为高浓度盐酸，盐酸浓度 可以是5%，也可以是15%，整个酸化处理过程中可以是在搅拌加热中完成，酸化反应时间可 根据加热的温度反应完成具体情况决定。
6. 酸化的目的是使部分羽扇豆醇的皂甙及酸酯类衍生物得以分解转化为羽扇豆醇，并 破坏杂质部分化学结构从而达到分离制取羽扇豆醇的目的。
7. 再通过简单的溶剂萃取、过滤、浓缩、结晶、硅胶层析柱分离、结晶获取符合药用要求 的羽扇豆醇。
8. 根据权利要求1所述一种羽扇豆醇的制备方法，其特征是：用于生产羽扇豆醇的基 材是以枸骨叶为原料经水浸、醇提取、浓缩后正丁醇萃取并再次浓缩后通过树脂柱洗脱分 离技术处理，在此基础上乙醇溶解酸化处理，此酸化处理所用酸液为高浓度盐酸，使部分羽 扇豆醇的皂甙及酸酯类衍生物得以分解转化为羽扇豆醇，并破坏杂质部分化学结构从而达 到分离制取羽扇豆醇的目的。
9. 酸化结束后酸化溶液调碱至中性浓缩再通过简单的溶剂萃取、也可以直接过滤沉淀 物进行萃取、浓缩、结晶、硅胶层析柱分离、结晶获取符合药用要求的羽扇豆醇。
10. 根据权利要求1所述一种羽扇豆醇的制备方法，其特征是：最终结晶获取产品整个 溶解结晶过程可以在乙醇的单一溶剂下进行也可以在乙醇、丙酮、正己烷、石油醚等单纯或 混合溶剂中溶解结晶。
【文档编号】C07J63/00GK104119418SQ201310146888
【公开日】2014年10月29日 申请日期:2013年4月25日 优先权日:2013年4月25日
【发明者】代维正 申请人:陕西龙孚生物化工有限责任公司