一种鲁索利替尼中间体的合成方法
【专利摘要】本发明涉及一种鲁索利替尼中间体的合成方法，首先由环戊烷甲酸甲酯和乙腈催化反应制备3-环戊基-3-氧代丙腈，然后3-环戊基-3-氧代丙腈经过酶催化不对称还原生成手性醇( S )-3-环戊基-3-羟基丙腈；( S )-3-环戊基-3-羟基丙腈再通过Mitsunobu反应和4-溴吡唑偶联得到鲁索利替尼中间体（3 R ）-3-（4-溴-1H-吡唑-1-基）-3-环戊烷丙氰；该合成方法具有路线简短、成本低、条件温和、立体选择性好、适合工业化大生产的优点。
【专利说明】一种鲁索利替尼中间体的合成方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种鲁索利替尼中间体的合成方法，特别涉及一种用于治疗骨髓 纤维化（myelofibrosis，MF)的药物鲁索利替尼的关键中间体（3R)-3-(4-溴-IH-吡 唑-1-基）-3-环戊烷丙氰（I )的制备方法。
【背景技术】
[0002] 鲁索利替尼（Ruxolitinib)，由美国Incyte公司开发的一种可口服给药的选择性 JAK1/JAK2激酶抑制剂，是2011年11月被美国FDA批准的首个用于骨髓纤维化治疗的药 物（商品名Jakafi)，被授予罕见病药物资格，并于2012年8月由诺华公司获欧盟批准上 市（商品名为Jakavi)。
[0003] 骨髓纤维化（myelofibrosis，MF)是临床常见的复杂难治性疾病，为一种罕见的 骨髓增生性肿瘤，是体内骨髓被瘢痕组织替代，导致血细胞在肝脏和脾脏等器官中生产，其 特征表现为脾肿大、贫血、白细胞和血小板减少，以及不同程度的骨质硬化。该病预后较差， 确诊后中位生存期为5年，近20%患者演变为急性白血病。鲁索利替尼抑制Janus相关激 酶JAKl和JAK2,通过阻断JAK信号转导及转录，激活在许多与细胞增生、生长和造血有关的 细胞因子和生长因子的信号转导中起关键作用的因子（signal transducer and activator of transcription，STAT)，达到治疗骨髓纤维化的作用。
[0004] 作为选择性强、毒副作用小和耐受性良好的口服治疗药物，鲁索利替尼适用于治 疗中度或高危MF，包括原发性MF、真性红细胞增多症后MF和原发性血小板增多症后MF，该 药的批准上市将为骨髓纤维化的治疗带来希望。其化学结构式如下：
[0005]
【权利要求】
1. 一种鲁索利替尼中间体的合成方法，首先由环戊烷甲酸甲酯和乙腈经催化反应制 备3-环戊基-3-氧代丙腈（II )，然后3-环戊基-3-氧代丙腈（II )经过酶催化不对称 还原生成手性醇（S)-3-环戊基-3-羟基丙腈（III); (S)-3-环戊基-3-羟基丙腈（III) 再通过Mitsunobu反应和4-溴吡唑偶联得到鲁索利替尼中间体（3R)-3-(4-溴-IH-吡 唑-1-基）-3-环戊烷丙氰（I );工艺路线如下：
2. 如权利要求1所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，具体包括以 下步骤： ⑴将催化剂加入到有机溶剂中，升温，然后缓慢滴加环戊甲酸甲酯和乙腈，反应生成 3-环戊基-3-氧代丙腈（II ); (2) 将催化酶系加入到磷酸盐缓冲溶液中，搅拌条件下加入3-环戊基-3-氧代丙腈 (II )的有机溶液，经过酶催化不对称还原反应生成手性醇（S)-3-环戊基-3-羟基丙腈 (III ); (3) 取（S)-3-环戊基-3-羟基丙腈（III)、4-溴吡唑以及三苯基膦溶解于有机溶剂中， 并在惰性气体保护下冷却降温，然后滴加偶联剂，随后自然升温，反应制得鲁索利替尼中间 体（3R) -3- (4-溴-IH-吡唑-1-基）-3-环戊烷丙氰（I )。
3. 如权利要求2所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，步骤（1)中， 所述催化剂选自氢化钠和氢化钾。
4. 如权利要求3所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，步骤（1)中， 所述催化剂、有机溶剂、环戊甲酸甲酯和乙腈的摩尔比为1?2 :6?12 :1 :1?2。
5. 如权利要求4所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，步骤（1)还包 括以下特征中的任一项或多项： (a) 所述有机溶剂选自四氢呋喃、二氧六环、甲苯和N，N-二甲基甲酰胺； (b) 所述升温至温度为60?80°C ; (c) 所述反应的温度为60?80°C，反应的时间为6?20小时。
6. 如权利要求2所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，步骤（1)还包 括3-环戊基-3-氧代丙腈（II )的分离纯化步骤：反应结束后降温，再将反应混合溶液经浓 缩去除部分溶剂，之后加水混合，并用乙酸乙酯进行萃取，分离获得溶解有3-环戊基-3-氧 代丙腈（II )的水相，然后向水相中加酸液进行酸化，再用乙酸乙酯进行萃取，分离获得溶 解有3-环戊基-3-氧代丙腈（II )的油相，再对油相进行干燥、过滤；滤液经旋转蒸发得到 亮黄色油状物3-环戊基-3-氧代丙腈（II )。
7. 如权利要求6所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，所述加酸液 酸化至pH为1?5。
8. 如权利要求7所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，所述步骤（1) 的分离纯化步骤还包括以下特征中的任一项或两项： (a) 所述酸液选自盐酸、硫酸和硝酸的水溶液； (b) 所述酸液的浓度为1?6mol/L。
9. 如权利要求2所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，步骤（2)中所 述的催化酶系为D-葡萄糖、D-葡萄糖脱氢酶、还原型辅酶II和羰基还原酶Ymr226c的组合 物，四者质量比为20?50 :1?3 :1?3 :1。
10. 如权利要求9所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，步骤（2)还 包括以下特征中的任一项或两项： (a) 所述3-环戊基-3-氧代丙腈（II )的有机溶液的溶剂选自二甲基亚砜和N，N-二 甲基甲酰胺； (b) 所述3-环戊基-3-氧代丙腈（II )的有机溶液中3-环戊基-3-氧代丙腈（II ) 的浓度为〇. 5?2mol/L。
11. 如权利要求10所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，步骤（2) 中，所述催化酶系、磷酸盐缓冲溶液、3-环戊基-3-氧代丙腈（II )的用量比为2?4g: 0. 15 ?0. 4L : lgD
12. 如权利要求11所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，步骤（2)中 所述反应的温度为25?35°C，反应的时间为16?32小时。
13. 如权利要求12所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，步骤（2)还 包括（S)-3-环戊基-3-羟基丙腈（III)的分离纯化步骤：反应液用甲基叔丁基醚萃取，分 离获得溶解有（S)-3-环戊基-3-羟基丙腈（III)的油相，然后对油相进行干燥、过滤，滤液 旋转蒸发得到亮黄色油状物（S) -3-环戊基-3-羟基丙腈（III)。
14. 如权利要求13所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，反应液用 甲基叔丁基醚萃取2?3次。
15. 如权利要求2所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，步骤（3)中 所述的冷却降温至温度为-10?5°C。
16. 如权利要求2所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，步骤（3)中 所述有机溶剂选自四氢呋喃和二氯甲烷。
17. 如权利要求16所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，步骤（3)中 所述偶联剂选自偶氮二甲酸二异丙酯和偶氮二甲酸二乙酯。
18. 如权利要求17所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，（S)-3-环 戊基-3-羟基丙腈（III)、4_溴吡唑、三苯基膦、有机溶剂和偶联剂的摩尔比为1?3 :1 :1? 3 :20 ?100 :1 ?3〇
19. 如权利要求18所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，步骤（3)还 包括以下特征中的一项或两项： (a) 所述惰性气体选自氩气和氮气； (b) 所述反应的温度为25?35°C，反应的时间为2?5小时。
20. 如权利要求2所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，步骤（3)还 包括鲁索利替尼中间体（3R)-3-(4-溴-IH-吡唑-1-基）-3-环戊烷丙氰（I )的分离纯 化步骤：将反应液浓缩后，直接经层析柱进行洗脱，得到淡黄色固体（3R)-3-(4-溴-IH-吡 唑-1-基）-3-环戊烷丙氰（I )。
21. 如权利要求20所述的一种鲁索利替尼中间体的合成方法，其特征在于，所述洗脱 的洗脱液为乙酸乙酯和正己烷的混合液；二者体积之比为4:1?1:1。
【文档编号】C07D231/16GK104496904SQ201410708821
【公开日】2015年4月8日 申请日期:2014年11月28日 优先权日:2014年11月28日
【发明者】王永, 刘利刚, 项杰, 杨世琼, 李倩, 康立涛 申请人:上海北卡医药技术有限公司