专利名称：具有抗肿瘤活性的嘧啶衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及具有抗肿瘤活性、抑制细胞活性，以及抑制由Ras癌基因产物产生信号的活性的新嘧啶衍生物。
背景技术：
癌基因“ras”如H-ras、K-ras和N-ras在许多肿瘤中被突变和激活。“Ras”,ras癌基因的产物，与由细胞周期加速以及许多与恶性转化如血管内皮生长因子和Ⅳ-型胶原酶有关的表达诱导引起的肿瘤发生密切相关。尤其是发现在实体瘤中有高发生率的ras突变，例如在难以采用现有的化学治疗剂治愈的胰腺癌(＞80％)、结肠癌(＞40％)和肺癌(＞20％)中。因此，认为Ras是在针对所述癌症的化学治疗剂的开发中最重要的靶分子之一。
已知法呢基-蛋白-转移酶(FPT)抑制剂(FPTI)为目标是Ras的化学治疗剂(WO95/13059、WO95/25086、WO95/25092、WO95/34535、US5608067和JP-A-7-112930)。
在表达激活的Ras的细胞中，过量的信号通过一些信号通路和一些信号递质分子如MAPK(促分裂原活化蛋白激酶)和P13K(磷脂酰肌醇-3-激酶)到达细胞核。所述信号激活在细胞核中的转录因子如AP1(激活剂蛋白-1)和ETS(E26转化特异性的)，然后它们通过转录激活元件如Ras反应性元件(RRE)诱导许多与恶性特征有关的基因的表达。因此，在抑制信号传递(从ras癌基因产物发出的信号)时，有可能阻止癌细胞的恶性转化。
发明公开在上述情况下，本发明人研究了具有对Ras癌基因产物产生的信号的抑制活性的抗肿瘤剂。
通过RRE的基因表达的激活程度与Ras产生的信号成比例，所述信号可通过其表达的量测定。本发明人人工制备了具有激活的Ras的细胞，其中萤火虫荧光素酶基因(报道基因)受RRE的调节，并且进行了抑制剂的筛选，所述抑制剂用通过细胞显示的荧光素酶活性作为信号通过Ras的指标。结果，本发明人发现了一系列具有对Ras癌基因产物产生的信号的很强抑制活性的嘧啶衍生物。
本发明涉及Ⅰ)由式(Ⅰ)代表的化合物、其前药或它们的药学上可接受的盐或它们的溶剂化物 其中R1、R2、R3和R4各自独立为氢原子、任选取代的烷基、任选取代的链烯基、任选取代的链炔基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的非芳族杂环基或酰基；或R1和R2、R3和R4，及R2和R3各自与相邻的氮原子结合在一起形成任选含有O、S或N的相同或不同的3-至6-元环，前提是当R2和R3结合在一起形成环时，则R1和R2及R3和R4不能形成环；R5和R6各自独立为氢原子、任选取代的烷基、任选取代的链烯基、任选取代的链炔基、任选取代的烷氧基、烷硫基、任选取代的烷氧基羰基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、卤素、羟基、巯基、任选取代的氨基、羧基、氰基或硝基；X是-N(R7)-、-NH-NH-、-O-或-S-，其中R7为氢原子或任选取代的烷基；Y为任选取代的5-元非-芳族杂环-二基或任选取代的5-元杂芳二基；Z为任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、任选取代的芳基链烯基或任选取代的链烯基。
更详细地说，本发明涉及Ⅱ)由式(Ⅱ)代表的化合物、其前药或它们的药学上可接受的盐或它们的溶剂化物 其中R8、R9、R10和R11各自独立为氢原子、任选取代的烷基、链烯基、链炔基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、任选取代的芳烷基、非芳族杂环基或酰基；W是-O-、-S-或-N(RA)-，其中RA为氢原子或任选取代的烷基；R5、R6、X和Z如上所定义；Ⅲ)由式(Ⅲ)代表的化合物、其前药或它们的药学上可接受的盐或它们的溶剂化物 其中R5、R6、R8、R9、R10、R11和Z如上所定义；Ⅳ)由式(Ⅳ)代表的化合物、其前药或它们的药学上可接受的盐或它们的溶剂化物 其中R12为氢原子或烷基；Ⅴ为任选取代的芳基；R8、R9、R10和R11如上所定义；Ⅴ)如上面Ⅰ)中所述的化合物、其前药或它们的药学上可接受的盐或它们的溶剂化物，其中R1、R2、R3和R4各自独立为氢原子、任选取代的烷基、链烯基、链炔基或酰基；Ⅵ)如上面Ⅱ)-Ⅳ)中任一项中所述的化合物、其前药或它们的药学上可接受的盐或它们的溶剂化物，其中R8、R9、R10和R11各自独立为氢原子、任选取代的烷基、链烯基、链炔基或酰基；Ⅶ)药用组合物，其含有作为活性成分的如Ⅰ)-Ⅵ)中任一项所述的化合物；Ⅷ)用作抗肿瘤药的药用组合物，其含有作为活性成分的如Ⅰ)-Ⅵ)中任一项所述的化合物；Ⅸ)用作细胞抑制剂的药用组合物，其含有作为活性成分的如Ⅰ)-Ⅵ)中任一项所述的化合物；Ⅹ)用作对由Ras癌基因产物产生的信号的抑制剂的药用组合物，其含有作为活性成分的如Ⅰ)-Ⅵ)中任一项所述的化合物；Ⅺ)如Ⅰ)-Ⅵ)中任一项所述的化合物在制备治疗癌症的药用组合物中的用途；和Ⅻ)治疗哺乳动物，包括人，以减轻癌症的病理影响的方法，该方法包括给予所述哺乳动物如Ⅰ)-Ⅵ)中任一项所述的化合物。
术语“烷基”单独使用或与本说明书中的其它术语结合使用时，包括具有1-8个碳原子的直链或支链一价烃基。烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、异己基、正庚基、正辛基等。优选以C1-C6烷基举例说明。更优选以C1-C3烷基举例说明。
术语“链烯基”单独使用或与本说明书中的其它术语结合使用时，包括具有2-8个碳原子和一个或多个双键的直链或支链一价烃基。链烯基的实例包括乙烯基、烯丙基、丙烯基、丁烯基、异戊二烯基、各种丁烯基异构体等。优选以C2-C6链烯基举例说明。更优选以C2-C3链烯基举例说明。
术语“链炔基”单独使用或与本说明书中的其它术语结合使用时，包括具有2-8个碳原子和一个或多个三键的直链或支链一价烃基。链炔基可以含有双键。链炔基的实例包括乙炔基、丙炔基、6-庚炔基、7-辛炔基等。优选以C2-C6链炔基举例说明。更优选以C2-C3链炔基举例说明。
术语“芳基”单独使用或与本说明书中的其它术语结合使用时，包括单环或稠环芳烃。芳基的实例包括苯基、1-萘基、2-萘基、蒽基等。优选以苯基、1-萘基和2-萘基举例说明。更优选以苯基举例说明。
本说明书中的术语“芳烷基”包括其中上述“烷基”被上述“芳基”取代的基团。芳烷基的实例包括苄基、苯乙基(如2-苯乙基)、苯丙基(如3-苯丙基)、萘甲基(如1-萘甲基和2-萘甲基)、蒽基甲基(如9-蒽基甲基)等。优选以苄基和苯乙基举例说明。
术语“杂芳基”单独使用或与本说明书中的其它术语结合使用时，包括5-或6-元芳环基，其环上含有一个或多个选自氧、硫和氮原子的杂原子并可与上述的“芳基”、“杂芳基”、“碳环基”和“非-芳族杂环基”稠合。当杂芳基为稠合的环时，杂芳基可以连接于任何可能的位置上。杂芳基的实例为吡咯基(如1-吡咯基)、吲哚基(如3-吲哚基)、咔唑基(3-咔唑基)、咪唑基(如4-咪唑基)、吡唑基(如3-吡唑基和5-吡唑基)、苯并咪唑基(如2-苯并咪唑基)、吲唑基(如3-吲唑基)、中氮茚基(如6-中氮茚基)、吡啶基(如3-吡啶基和4-吡啶基)、喹啉基(如5-喹啉基)、异喹啉基(如3-异喹啉基)、吖啶基(如1-取代基)、菲啶基(如2-菲啶基)、哒嗪基(如3-哒嗪基)、嘧啶基(如4-嘧啶基)、吡嗪基(如2-吡嗪基)、噌啉基(如3-噌啉基)、2,3-二氮杂萘基(如2-2,3-二氮杂萘基)、喹唑啉基(如2-喹唑啉基)、异噁唑基(3-异噁唑基)、苯并异噁唑基(如3-苯并异噁唑基)、噁唑基(如2-噁唑基)、苯并噁唑基(如2-苯并噁唑基)、苯并噁二唑基(如4-苯并噁二唑基)、异噻唑基(如3-异噻唑基)、苯并异噻唑基(如2-苯并异噻唑基)、噻唑基(如4-噻唑基)、苯并噻唑基(如2-苯并噻唑基)、呋喃基(如2-呋喃基和3-呋喃基)、苯并呋喃基(如3-苯并呋喃基)、噻吩基(如2-噻吩基和3-噻吩基)、苯并噻吩基(如2-苯并噻吩基)、四唑基、噁二唑基(如1,3,4-噁二唑基和1,2,4-噁二唑基)、噁唑基、噻二唑基(如1,3,4-噻二唑基和1,2,4-噻二唑基)、4H-1,2,4-三唑基、喹喔啉基、2-吡啶酮-3-基等。优选以吡啶基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基等举例说明。
在此使用的术语“5-元杂芳-二基”包括由上述“杂芳基”衍生的5-元二价基团。5-元杂芳-二基的实例为2,5-呋喃二基、2,5-噻吩二基、2,5-吡咯二基、3,5-吡唑二基、2,5-(1,3,4-噁二唑)二基、3,5-(1,2,4-噁二唑)二基、2,5-噁唑二基、3,5-异噁唑二基、2,5-(1,3,4-噻二唑)二基、3,5-(1,2,4-噻二唑)二基、3,5-(4H-1,2,4-三唑)二基等。
术语“非-芳族杂环基”单独使用或与本说明书中的其它术语结合使用时，包括5-至7-元非-芳族杂环基，其环上含有一个或多个选自氧、硫和氮原子的杂原子和其中两个或多个上述杂环基稠合的环状基团。杂环基的实例为吡咯烷基(如1-吡咯烷基)、吡唑烷基(如1-吡唑基)、哌啶基(如哌啶子基和2-哌啶基)、哌嗪基(如1-哌嗪基)、吗啉基(如吗啉代和3-吗啉基)等。
在此使用的术语“5-元非芳族杂环-二基”包括由上述“非-芳族杂环基”衍生的5-元二价基团。5-元非-芳族杂环-二基的实例为吡咯烷二基(如2,5-吡咯烷二基)等。
在此使用的术语“碳环基”包括3-至7-元非-芳族碳环基。碳环基的实例为环烷基(如环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基)、环烯基(如环戊烯基和环己烯基)等。
在本说明书中，由“R1和R2、R3和R4，及R2和R3各自与相邻的氮原子结合在一起形成相同或不同的3-至6-元非芳族杂环”表示的环的实例为氮丙啶、吡咯烷、哌啶、哌嗪、吗啉、咪唑烷、吡唑烷、吡咯、嘧啶、三嗪等。
术语“酰基”单独使用或与本说明书中的其它术语结合使用时，包括其烷基部分为上述“烷基”的烷基羰基和其芳基部分为上述“芳基”的芳基羰基。酰基的实例为乙酰基、丙酰基、苯甲酰基等。
在此使用的术语“卤素”指氟代、氯代、溴代和碘代。
在此所用的“烷氧基”的实例为甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等。优选以甲氧基、乙氧基、正丙氧基和异丙氧基举例说明。
在此所用的“烷硫基”的实例为甲硫基、乙硫基、正丙硫基、异丙硫基、正丁硫基、异丁硫基、仲丁硫基、叔丁硫基等。优选以甲硫基、乙硫基、正丙硫基和异丙硫基举例说明。
在此所用的“烷氧基羰基”的实例为甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丙氧基羰基等。
在此使用的术语“任选取代的氨基”指由一个或两个上述“烷基”、“芳烷基”、“酰基”任选取代的磺酰基(如烷氧基苯基磺酰基)、亚芳烷基(如亚苄基)、烷基磺酰基、氨基甲酰基等取代的氨基或未取代的氨基。任选取代的氨基的实例为氨基、甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、乙基甲基氨基、二乙基氨基、苄基氨基、苯甲酰基氨基、乙酰基氨基、丙酰基氨基、叔丁氧基羰基氨基、亚苄基氨基、甲基磺酰基氨基、4-甲氧基苯基磺酰基氨基等。优选以氨基、甲基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、乙酰基氨基举例说明。
“任选取代的芳烷基”的芳环上的取代基为，例如，羟基、烷氧基(如甲氧基和乙氧基)、巯基、烷硫基(如甲硫基)、环烷基(如环丙基、环丁基和环戊基)、卤素(如氟代、氯代、溴代和碘代)、羧基、烷酯基(如甲酯基和乙酯基)、硝基、氰基、卤代烷基(如三氟甲基)、芳氧基(如苯氧基)、任选取代的氨基(如氨基、甲基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基和亚苄基氨基)、烷基(如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基和新戊基)、链烯基(如乙烯基和丙烯基)、链炔基(如乙炔基和苯基乙炔基)、甲酰基、低级链烷酰基(如乙酰基和丙酰基)、酰氧基(如乙酰氧基)、酰基氨基、烷基磺酰基(如甲基磺酰基)等。这些取代基可以在一个或多个可能的位置上被取代。
“任选取代的烷基”、“任选取代的烷氧基”和“任选取代的烷酯基”的取代基为，例如，羟基、烷氧基(如甲氧基和乙氧基)、巯基、烷硫基(如甲硫基)、环烷基(如环丙基、环丁基、环戊基和环己基)、卤素(如氟代、氯代、溴代和碘代)、羧基、烷酯基(如甲酯基和乙酯基)、硝基、氰基、卤代烷基(如三氟甲基)、任选取代的氨基(如氨基、甲基氨基、二甲基氨基、氨基甲酰基氨基和叔丁氧基羰基氨基)、酰氧基(如乙酰氧基)、任选取代的芳烷氧基(如苄氧基和4-甲氧基苯基甲氧基)等。这些取代基可以在一个或多个可能的位置上被取代。
“任选取代的链烯基”和“任选取代的链炔基”的取代基为，例如，羟基、烷氧基(如甲氧基和乙氧基)、巯基、烷硫基(如甲硫基)、环烷基(如环丙基、环丁基、环戊基和环己基)、卤素(如氟代、氯代、溴代和碘代)、羧基、烷酯基(如甲酯基和乙酯基)、硝基、氰基、卤代烷基(如三氟甲基)、任选取代的氨基(如氨基、甲基氨基、二甲基氨基、氨基甲酰基氨基和叔丁氧基羰基氨基)、酰氧基(如乙酰氧基)、任选取代的芳烷氧基(如苄氧基和4-甲氧基苯基甲氧基)、任选取代的芳基(如苯基)等。这些取代基可以在一个或多个可能的位置上被取代。
“任选取代的烷基”的优选的实例为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、羟甲基、环己基甲基、羧乙基、乙酰氧基乙基和苄氧基甲基。更优选以甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基举例说明。
“任选取代的芳基”、“任选取代的杂芳基”、“任选取代的5-元杂芳-二基”、“任选取代的5-元非芳族杂环-二基”和“任选取代的非芳族杂环基”的取代基为，例如，羟基、任选取代的烷氧基(如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、乙氧基羰基甲氧基、羧基甲氧基和4-甲氧基苯基甲氧基)、巯基、烷硫基(如甲硫基)、环烷基(如环丙基、环丁基、环戊基)、卤素(如氟代、氯代、溴代和碘代)、羧基、烷酯基(如甲酯基、乙酯基和叔丁酯基)、硝基、氰基、卤代烷基(如三氟甲基)、芳氧基(如苯氧基)、任选取代的氨基(如氨基、甲基氨基、二甲基氨基、乙基氨基、二乙基氨基、N,N-乙酰基甲基氨基、亚苄基氨基、4-甲氧基苯基磺酰基氨基、甲基磺酰基氨基、苯甲酰基氨基、乙酰氨基、丙酰基氨基和叔丁氧基羰基氨基)、任选取代的氨基磺酰基(如氨基磺酰基)、任选取代的烷基(如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、叔丁氧基羰基氨基甲基和氨基甲基)、链烯基(如乙烯基、丙烯基和异戊二烯基)、任选取代的链炔基(如乙炔基和苯基乙炔基)、链烯基氧基(如丙烯基氧基和异戊二烯基氧基)、甲酰基、酰基(如乙酰基、丙酰基和苯甲酰基)、酰氧基(如乙酰氧基)、任选取代的氨基甲酰基(如氨基甲酰基和二甲基氨基羰基)、烷基磺酰基(如甲基磺酰基)、芳基(如苯基)、芳烷基(如苄基)、硫代酰胺(carbothioamide)、任选取代的杂环基(如二氧戊环基、2-甲基-1,3-二氧戊环-2-基、吡咯烷基和哌啶子基)、任选取代的杂芳基(如2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、吡啶N-氧化-4-基、1-甲基-2-吡啶酮-4-基、1-吡咯基、2-吡咯基和3-吡咯基)等。这些取代基可以在一个或多个可能的位置上被取代。优选以任选取代的氨基、卤素、硝基、烷基和烷氧基举例说明。
“任选取代的芳基”的实例为苯基、2-氨基苯基、3-氨基苯基、4-氨基苯基、2-乙酰基氨基苯基、4-乙酰基氨基苯基、2-苯甲酰基氨基苯基、4-苯甲酰基氨基苯基、2-甲基磺酰基氨基苯基、2-丙酰基氨基苯基、2-甲基氨基苯基、4-甲基氨基苯基、2-二甲基氨基苯基、4-二甲基氨基苯基、2-乙基氨基苯基、4-乙基氨基苯基、4-二乙基氨基苯基、2-(4-甲氧基苯基磺酰基氨基)苯基、2-羟苯基、4-羟苯基、2-乙氧基羰基甲氧基苯基、2-羧基甲氧基苯基、2-氯苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-碘苯基、4-三氟甲基苯基、2-甲基苯基、4-甲基苯基、4-甲氧基苯基、4-乙氧基苯基、4-正丙氧基苯基、4-异丙氧基苯基、4-叔丁氧基羰基苯基、4-异戊二烯氧基苯基、2-硝基苯基、4-硝基苯基、4-(4-甲氧基苯基甲氧基)苯基、4-甲氧基羰基苯基、4-氨基磺酰基苯基、4-(N,N-二甲基氨基羰基)苯基、4-羧基苯基、4-联苯基、4-苯甲酰基苯基、4-吡咯烷基苯基、4-哌啶基苯基、2-(3-氨基)萘基、2-氨基-5-氯苯基、2-氨基-3-氯苯基、2-氨基-4-氯苯基、2-氨基-6-氯苯基、4-氨基-2-氯苯基、2-氨基-4-氟苯基、2-氨基-5-氟苯基、2-氨基-6-氟苯基、4-氨基-2-氟苯基、2-氨基-4,5-二氟苯基、2-氨基-3-甲基苯基、2-氨基-4-甲基苯基、2-氨基-5-甲基苯基、2-氨基-6-甲基苯基、4-氨基-3-甲基苯基、4-氨基-3-甲氧基苯基、2-氨基-4-硝基苯基、4-氨基-3-羟基苯基、2-氨基-4-羧基苯基、2-氨基-4-甲氧基羰基苯基、4-氨基-2-羟基苯基、4-氨基-3-(4-甲氧基苯基甲氧基)苯基、2,4-二氨基苯基、3,4-二氨基苯基、2-(N-乙酰基-N-甲基氨基)苯基、2-乙酰基氨基-4-氟苯基、2-乙酰基氨基-4-氯苯基、2,3-二氯苯基、2,4-二氯苯基、2-(3-氨基)萘基、4-氨基-2-甲基苯基、2-氟-4-硝基苯基、4-氨基-2-甲氧基苯基、2-甲氧基-4-硝基苯基、4-氟-2-硝基苯基、4-氨基-2-三氟甲基苯基、4-氨基-2-乙氧基苯基、4-氨基-2-三氟甲氧基苯基、2-氯-4-硝基苯基、2-甲基-4-硝基苯基、4-硝基-2-三氟甲氧基苯基、4-硝基-2-三氟甲基苯基、2-乙氧基-4-硝基苯基等。
“任选取代的杂芳基”的实例为3-吡啶基、3-(2-氨基)吡啶基、5-(2-氨基)吡啶基、2-(3-氨基)吡嗪基、4-(3-氨基)吡唑基、5-(4-氨基-2-甲基)嘧啶基、3-(2-氨基)噻吩基、2-(3-甲基)噻吩基、2-(5-甲基)噻吩基、2-呋喃基、3-呋喃基、3-(2-甲基)呋喃基、3-(2,5-二甲基)呋喃基、2-(5-溴)呋喃基、4-(2-硝基)呋喃基、3-(1-甲基-4-硝基)吡唑基、5-(1-甲基-4-硝基)吡唑基、3-(5-硝基)吡唑基、3-(4-硝基)吡唑基、2-(3-吡啶基)-噻唑-4-基、2-(4-吡啶基)-噻唑-4-基、6-(1-吡咯基)-吡啶-3-基、N-甲基-2-吡啶酮-3-基等。
“任选取代的5-元杂芳-二基”的实例为2,5-呋喃二基、2,5-噻吩二基、2,5-吡咯二基、3,5-吡唑二基、2,5-(1,3,4-噁二唑)二基、3,5-(1,2,4-噁二唑)二基、2,5-噁唑二基、3,5-异噁唑二基、2,5-(1,3,4-噻二唑)二基、3,5-(1,2,4-噻二唑)二基、3,5-(4H-1,2,4-三唑)二基、3,5-(1-甲基吡唑)二基等。
“任选取代的芳基链烯基”的实例为4-氨基苯基乙烯基等。
由式(Ⅰ)表示的化合物的R1-R6、X、Y和Z的优选实例如下面(a)-(s)组中所示。
R1和R2:(a)各自独立为氢原子、任选取代的烷基、链烯基或链炔基；(b)各自独立为氢原子、由卤素任选取代的烷基、链烯基或链炔基；及(c)一个为氢原子而另一个为由卤素任选取代的C1-C3烷基。
R3和R4(d)各自独立为氢原子、任选取代的烷基、链烯基或链炔基；(e)各自独立为氢原子、由卤素任选取代的烷基、链烯基或链炔基；及(f)一个为氢原子而另一个为由卤素任选取代的C1-C3烷基。
R5为(g)氢原子、烷氧基、烷硫基或任选取代的烷基；(h)氢原子或烷基；及(i)氢或C1-C2烷基。
R6为(j)氢原子或烷基；及(k)氢原子。
X为(l)-O-或-S-；及(m)-S-。
Y为(n)5-元杂芳-二基；(o)2,5-(1,3,4-噁二唑)二基、3,5-(1,2,4-噁二唑)二基、2,5-(1,3,4-噻二唑)二基或3,5-(1,2,4-噻二唑)二基；及(p)2,5-(1,3,4-噁二唑)二基。
Z为(q)任选取代的芳基或任选取代的杂芳基；(r)任选取代的苯基或任选取代的单环杂芳基；和(s)苯基、吡啶基、噻吩基或呋喃基，其被1-3个选自下列的取代基取代任选取代的氨基、卤素、烷基、烷氧基、酰基、苯基、苯氧基羰基、羟基、硝基或卤代烷基。
一组优选的由式(Ⅰ)表示的化合物显示如下[(R1,R2),(R3,R4),R5,R6,X,Y]=[a,d,g,j,l,n],[a,d,g,j,l,o],[a,d,g,j,l,p],[a,d,g,j,m,r],[a,d,g,j,m,o],[a,d,g,j,m,p],[a,d,g,k,l,n],[a,d,g,k,l,o],[a,d,g,k,l,p],[a,d,g,k,m,n],[a,d,g,k,m,o],[a,d,g,k,m,p],[a,d,h,j,l,n],[a,d,h,j,l,o],[a,d,h,j,l,p],[a,d,h,j,m,n],[a,d,h,j,m,o],[a,d,h,j,m,p],[a,d,h,k,l,n],[a,d,h,k,l,o],[a,d,h,k,l,p],[a,d,h,k,m,n],[a,d,h,k,m,o],[a,d,h,k,m,p],[a,d,i,j,l,n],[a,d,i,j,l,o],[a,d,i,j,l,p],[a,d,i,j,m,n],[a,d,i,j,m,o],[a,d,i,j,m,p],[a,d,i,k,l,n],[a,d,i,k,l,o],[a,d,i,k,l,p],[a,d,i,k,m,n],[a,d,i,k,m,o],[a,d,i,k,m,p],[a,e,g,j,l,n],[a,e,g,j,l,o],[a,e,g,j,l,p],[a,e,g,j,m,n],[a,e,g,j,m,o],[a,e,g,j,n, p],[a,e,g,k,l,n],[a,e,g,k,l,o],[a,e,g,k,l,p],[a,e,g,k,m,n],[a,e,g,k,m,o],[a,e,g,k,m,p],[a,e,h,j,l,n],[a,e,h,j,l,o],[a,e,h,j,l,p],[a,e,h,j,m,n],[a,e,h,j,m,o],[a,e,h,j,m,p],[a,e,h,k,l,n],[a,e,h,k,l,o],[a,e,h,k,l,p],[a,e,h,k,m,n],[a,e,h,k,m,o],[a,e,h,k,m,p],[a,e,i,j,l,n],[a,e,i,j,l,o],[a,e,i,j,l,p],[a,e,i,j,m,n],[a,e,i,j,m,o],[a,e,i,j,m,p],[a,e,i,k,l,n],[a,e,i,k,l,o],[a,e,i,k,l,p],[a,e,i,k,m,n],[a,e,i,k,m,o],[a,e,i,k,m,p],[a,f,g,j,l,n],[a,f,g,j,l,o],[a,f,g,j,l,p],[a,f,g,j,m,n],[a,f,g,j,m,o],[a,f,g,j,m,p],[a,f,g,k,l,n],[a,f,g,k,l,o],[a,f,g,k,l,p],[a,f,g,k,m,n],[a,f,g,k,m,o],[a,f,g,k,m,p],[a,f,h,j,l,n],[a,f,h,j,l,o],[a,f,h,j,l,p],[a,f,h,j,m,n],[a,f,h,j,m,o],[a,f,h,j,m,p],[a,f,h,k,l,n],[a,f,h,k,l,o],[a,f,h,k,l,p],[a,f,h,k,m,n],[a,f,h,k,m,o],[a,f,h,k,n,p],[a,f,i,j,l,n],[a,f,i,j,l,o],[a,f,i,j,l,p],[a,f,i,j,m,n],[a,f,i,j,m,o],[a,f,i,j,m,p],[a,f,i,k,l,n],[a,f,i,k,l,o],[a,f,i,k,l,p],[a,f,i,k,m,n],[a,f,i,k,m,o],[a,f,i,k,m,p],[b,d,g,j,l,n],[b,d,g,j,l,o],[b,d,g,j,l,p],[b,d,g,j,m,n],[b,d,g,j,m,o],[b,d,g,j,m,p],[b,d,g,k,l,n],[b,d,g,k,l,o],[b,d,g,k,l,p],[b,d,g,k,m,n],[b,d,g,k,nk o],[b,d,g,k,m,p],[b,d,h,j,l,n],[b,d,h,j,l,o],[b,d,h,j,l,p],[b,d,h,j,m,n],[b,d,h,j,m,o],[b,d,h,j,m,p],[b,d,h,k,l,n],[b,d,h,k,l,o],[b,d,h,k,l,p],[b,d,h,k,m,n],[b,d,h,k,m,o],[b,d,h,k,m,p],[b,d,i,j,l,n],[b,d,i,j,l,o],[b,d,i,j,l,p],[b,d,i,j,m,n],[b,d,i,j,m,o],[b,d,i,j,m,p],[b,d,i,k,l,n],[b,d,i,k,l,o],[b,d,i,k,l,p],[b,d,i,k,m,n],[b,d,i,k,m,o],[b,d,i,k,m,p],[b,e,g,j,l,n],[b,e,g,j,l,o],[b,e,g,j,l,p],[b,e,g,j,m,n],[b,e,g,j,m,o],[b,e,g,j,m,p],[b,e,g,k,l,n],[b,e,g,k,l,o],[b,e,g,k,l,p],[b,e,g,k,m,n],[b,e,g,k,m,o],[b,e,g,k,m,p],[b,e,h,j,l,n],[b,e,h,j,l,o],[b,e,h,j,l,p],[b,e,h,j,m,n],[b,e,h,j,m,o],[b,e,h,j,m,p],[b,e,h,k,l,n],[b,e,h,k,l,o],[b,e,h,k,l,p],[b,e,h,k,m,n],[b,e,h,k,m,o],[b,e,h,k,m,p],[b,e,i,j,l,n],[b,e,i,j,l,o],[b,e,i,j,l,p],[b,e,i,j,m,n],[b,e,i,j,m,o],[b,e,i,j,m,p],[b,e,i,k,l,n],[b,e,i,k,l,o],[b,e,i,k,l,p],[b,e,i,k,m,n],[b,e,i,k,m,o],[b,e,i,k,m,p],[b,f,g,j,l,n],[b,f,g,j,l,o],[b,f,g,j,l,p],[b,f,g,j,m,n],[b,f,g,j,m,o],[b,f,g,j,m,p],[b,f,g,k,l,n],[b,f,g,k,l,o],[b,f,g,k,l,p],[b,f,g,k,m,n],[b,f,g,k,m,o],[b,f,g,k,m,p],[b,f,h,j,l,n],[b,f,h,j,l,o],[b,f,h,j,l,p],[b,f,h,j,m,n],[b,f,h,j,m,o],[b,f,h,j,m,p],[b,f,h,k,l,n],[b,f,h,k,l,o],[b,f,h,k,l,p],[b,f,h,k,m,n],[b,f,h,k,m,o],[b,f,h,k,m,p],[b,f,i,j,l,n],[b,f,i,j,l,o],[b,f,i,j,l,p],[b,f,i,j,m,n],[b,f,i,j,m,o],[b,f,i,j,m,p],[b,f,i,k,l,n],[b,f,i,k,l,o],[b,f,i,k,l,p],[b,f,i,k,m,n],[b,f,i,k,m,o],[b,f,i,k,m,p],[c,d,g,j,l,n],[c,d,g,j,l,o],[c,d,g,j,l,p],[c,d,g,j,m,n],[c,d,g,j,m,o],[c,d,g,j,m,p],[c,d,g,k,l,n],[c,d,g,]k,l,o],[c,d,g,k,l,p],[c,d,g,k,m,n],[c,d,g,k,m,o],[c,d,g,k,m,p],[c,d,h,j,l,rn],[c,d,h,j,l,o],[c,d,h,j,l,p],[c,d,h,j,m,n],[c,d,h,j,m,o],[c,d,h,j,m,p],[c,d,h,k,l,n],[c,d,h,k,l,o],[c,d,h,k,l,p],[c,d,h,k,m,n],[c,d,h,k,m,o],[c,d,h,k,m,p],[c,d,i,j,l,n],[c,d,i,j,l,o],[c,d,i,j,l,p],[c,d,i,j,m,n],[c,d,i,j,n,o],[c,d,i,j,m,p],[c,d,i,k,l,n],[c,d,i,k,l,o],[c,d,i,k,l,p],[c,d,i,k,m,n],[c,d,i,k,m,o],[c,d,i,k,m,p],[c,e,g,j,l,n],[c,e,g,j,l,o],[c,e,g,j,l,p],[c,e,g,j,m,n],[c,e,g,j,m,o],[c,e,g,j,m,p],[c,e,g,k,l,n],[c,e,g,k,l,o],[c,e,g,k,l,p],[c,e,g,k,m,n],[c,e,g,k,m,o],[c,e,g,k,m,p],[c,e,h,j,l,n],[c,e,h,j,l,o],[c,e,h,j,l,p],[c,e,h,j,m,n],[c,e,h,j,m,o],[c,e,h,j,m,p],[c,e,h,k,l,n],[c,e,h,k,l,o],[c,e,h,k,l,p],[c,e,h,k,rm,n],[c,e,h,k,m,o],[c,e,h,k,m,p],[c,e,i,j,l,n],[c,e,i,j,l,o],[c,e,i,j,l,p],[c,e,i,j,m,n],[c,e,i,j,m,o],[c,e,i,j,m,p],[c,e,i,k,l,n],[c,e,i,k,l,o],[c,e,i,k,l,p],[c,e,i,k,m,n],[c,e,i,k,m,o],[c,e,i,k,m,p],[c,f,g,j,l,n],[c,f,g,j,l,o],[c,f,g,j,l,p],[c,f,g,j,m,n],[c,f,g,j,m,o],[c,f,g,j,m,p],[c,f,g,k,l,n],[c,f,g,k,l,o],[c,f,g,k,l,p],[c,f,g,k,m,n],[c,f,g,k,m,o],[c,f,g,k,m,p],[c,f,h,j,l,n],[c,f,h,j,l,o],[c,f,h,j,l,p],[c,f,h,j,m,n],[c,f,h,j,m,o],[c,f,h,j,m,p],[c,f,h,k,l,n],[c,f,h,k,l,o],[c,f,h,k,l,p],[c,f,h,k,m,n],[c,f,h,k,m,o],[c,f,h,k,m,p],[c,f,i,j,l,n],[c,f,i,j,l,o],[c,f,i,j,l,p],[c,f,i,j,m,n],[c,f,i,j,m,o],[c,f,i,j,m,p],[c,f,i,k,l,n],[c,f,i,k,l,o],[c,f,i,k,l,p],[c,f,i,k,m,n],[c,f,i,k,m,o],[c,f,i,k,m,p]本发明的优选实施方案为其中Z是(q)至(s)中的任何一种和[(R1,R2)、(R3,R4)、R5、R6、X、Y]为上述组合中的任何一种的化合物。
在本说明书中，由式(Ⅰ)表示的其中R1为氢原子的化合物可以表示为下式(Ⅴ)的异构体 其中R2、R3、R4、R5、R6、X、Y和Z如上定义和R1为氢原子。
由式(Ⅱ)、(Ⅲ)和(Ⅳ)表示的化合物也可以各自为异构体。
由式(ⅩⅩⅤ)表示的化合物 其中R15和R16之一为-NR1R2，其中R1和R2各自独立为氢原子、任选取代的烷基、任选取代的链烯基、任选取代的链炔基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的非芳族杂环基或酰基，或R1和R2与相邻的氮原子一起可形成3-至6-元环，而另一个为烷硫基；或R15和R16均为烷硫基；R5和R6各自独立为氢原子、任选取代的烷基、任选取代的链烯基、任选取代的链炔基、任选取代的烷氧基、烷硫基、任选取代的烷氧基羰基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、卤素、羟基、巯基、任选取代的氨基、羧基、氰基或硝基；X是-N(R7)-、-NH-NH-、-O-或-S-，其中R7为氢原子或任选取代的烷基；Y为任选取代的5-元非-芳族杂环-二基或任选取代的5-元杂芳二基；Z为任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的链烯基；其前药或它们的药学上可接受的盐或它们的溶剂化物也用作药用组合物、抗肿瘤剂、抑制细胞生长的药物，以及对由Ras癌基因产物产生的信号的抑制剂。
实施本发明的最佳方式由式(Ⅰ)表示的本发明化合物可以通过化学文献中描述的熟知方法合成。合成本发明化合物的有用方法的概述如下所述。(合成方法) 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、X、Y和Z如上定义；R13为氢原子或羟基的保护基团。
通过使Z-Y-XH(Ⅵ)与胍基嘧啶衍生物(Ⅶ)反应可以合成由式(Ⅰ)表示的化合物。胍基嘧啶衍生物(Ⅶ)在诸如水、乙酸、吡啶等溶剂中用氢卤酸如盐酸和氢溴酸处理，得到5-卤代甲基嘧啶的氢卤酸盐。当R13为氢原子时，可以使用卤化剂如亚硫酰卤和磷酰卤。得到的盐和Z-Y-XH(Ⅵ)在诸如水、甲醇、乙醇、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、四氢呋喃等溶剂中与合适的碱如无机碱如氢氧化钠、丁醇钾、氢化钠、氢化钾和碳酸钾或有机碱如三乙胺、吡啶和二异丙基乙胺于-20℃至100℃(优选0℃至30℃)反应1分钟至24小时(优选10分钟至12小时)，得到目的化合物(Ⅰ)。
化合物(Ⅵ)和化合物(Ⅶ)可以通过如下所示的方法A-I和方法J-N合成。
在方法A-I中，Z代表任选取代的芳基或任选取代的杂芳基。每种方法的原料是市售获得的或可通过熟知的方法由市售获得的化合物合成。
方法A其中Y为噁二唑环和X为-S-的化合物的合成方法。 于0℃至100℃(优选60℃至100℃)，使化合物(Ⅷ)在诸如乙醇和苯的溶剂中与二硫化碳和碱如三乙胺、氢氧化钠、碳酸钾反应10分钟至24小时(优选2小时至12小时)得到化合物(Ⅵ-1)。
方法B其中Y为噁二唑环和X为-O-的化合物的合成方法。 向化合物(Ⅷ)在溶剂如四氢呋喃和甲苯的溶液中加入羰基二咪唑，使该混合物于0℃至120℃(优选60℃至120℃)反应10分钟至24小时(优选2小时至12小时)得到化合物(Ⅵ-2)。
方法C其中Y为噁二唑环和X为-N(R7)-的化合物的合成方法， 其中R7如上定义。
向化合物(Ⅸ)在溶剂如乙醇和四氢呋喃的溶液中加入氧化汞，使该混合物于0℃至120℃(优选30℃至80℃)反应0.5小时至24小时(优选1小时至24小时)得到化合物(Ⅵ-3)。
方法D其中Y为噻二唑环和X为-S-的化合物的合成方法。 向化合物(Ⅷ)在溶剂如乙醇四氢呋喃的溶液中加入二硫化碳和碱如三乙胺和氢氧化钠，使该混合物于0℃至100℃(优选20℃至60℃)反应0.5小时至24小时(优选1小时至12小时)。除去溶剂后，使残留物与浓硫酸于-20℃至40℃(优选0℃至20℃)反应1分钟至12小时(优选10分钟至1小时)得到化合物(Ⅵ-4)。
方法E其中Y为呋喃环和X为-S-的化合物的合成方法。 (步骤1)在钯催化剂如Pd(Ph3P)4和碱如碳酸钾、碳酸钙、三乙胺和甲醇钠存在下，使卤代呋喃如2-溴代呋喃与化合物(Ⅹ)在诸如二甲基甲酰胺、甲苯、二甲苯、苯、四氢呋喃和乙醇的溶剂中反应得到目的化合物(Ⅺ)(Suzuki反应)。反应温度为室温至100℃，优选室温至80℃，反应时间为5小时至50小时，优选15小时至30小时。(步骤2)向化合物(Ⅺ)在溶剂如四氢呋喃、乙醚和甲苯的溶液中加入碱如正丁基锂和仲丁基锂，使该混合物于-100℃至50℃(优选-80℃至0℃)搅拌1分钟至24小时(优选10分钟至60分钟)。向该混合物中加入硫，使得到的混合物于-100℃至50℃(优选-80℃至0℃)反应1小时至24小时(优选1小时至12小时)，得到目的化合物(Ⅵ-5)。
方法F其中Y为噻吩环和X为-S-的化合物的合成方法。 其中Hal为卤素。
可以以类似于方法E的步骤1和2中所述的方法进行步骤1和2。
方法G其中Y为噁唑环和X为-S-的化合物的合成方法。 在碱如三乙胺和氢氧化钠存在下，向化合物(ⅩⅢ)在溶剂如二氯甲烷、甲苯和乙醚的溶液中加入硫光气，使该混合物于-20℃至100℃(优选0℃至40℃)反应1小时至48小时(优选1小时至24小时)，得到化合物(Ⅵ-7)。
方法H其中Y为噁唑环和X为-O-或-S-的化合物的合成方法。 (步骤1)使化合物(ⅩⅣ)在诸如二氯甲烷和乙腈的溶剂中与缩合剂如二环己基碳二亚胺于-20℃至50℃(优选0℃至20℃)反应5分钟至24小时(优选10分钟至2小时)，得到化合物(Ⅵ-8)。(步骤2)向化合物(Ⅵ-8)在溶剂如甲苯和二氧六环的溶液中加入Lawesson’s试剂，使该混合物于60℃至150℃(优选80℃至120℃)反应1小时至24小时(优选2小时至12小时)，得到化合物(Ⅵ-9)。
方法Ⅰ其中Y为异噁唑环和X为-O-或-S-的化合物的合成方法。 其中R14为C1-C3烷基。(步骤1)使化合物(ⅩⅤ)在诸如甲醇和四氢呋喃的溶剂中与羟胺于20℃至100℃(优选50℃至80℃)反应1小时至24小时(优选2小时至12小时)，得到化合物(Ⅵ-10)。(步骤2)以类似于方法H的步骤2中所述的方法可以获得化合物(Ⅵ-11)。
在上述方法中未具体显示的化合物可通过以上方法A-I中的一些方法的组合和熟知的方法合成。
在方法J-N中，R1、R2、R3、R4、R5、R6和R13如上定义。每种方法的原料是市售获得的或可通过熟知的方法由市售获得的化合物合成。
方法J-K是构成嘧啶环的方法并可根据熟知的方法进行(见Joumal of Chemical Society,1937,364页，同上，1943,388页和J-Pharm.Soc.Japan 1954,742页)。
方法L-N是将胍基引入到得自方法J和方法K的嘧啶衍生物中的方法，并可根据熟知的方法进行(见Joumal of Chemical Society,1948,58页，同上，1946,1063页和Synthesis,1988,460页)。
方法J嘧啶环的合成 (步骤1)在碱如乙醇钠和氢氧化钠存在下，使化合物(ⅩⅥ)在诸如乙醇、四氢呋喃和二甲基甲酰胺的溶剂中与R5-C(=S)-NH2于0℃至150℃(优选60℃至100℃)反应0.5小时至48小时(优选1小时至12小时)，得到化合物(ⅩⅦ)。(步骤2)使化合物(ⅩⅦ)在诸如乙醚和四氢呋喃的溶剂或在如乙醚-四氢呋喃的混合溶剂中与还原剂如氢化铝锂和硼氢化锂于-80℃至100℃(优选-20℃至40℃)反应0.5小时至24小时(优选1小时至12小时)，得到醇衍生物。通过在有机合成中的保护基团(Theodora W Green(John Wiley & Sons))等中所述的方法保护获得的醇衍生物，得到化合物(ⅩⅧ)。甲基、乙基、三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基等作为R13的举例说明。
方法K嘧啶环的合成 (步骤1)在碱如乙醇钠和氢氧化钠存在下，使化合物(ⅩⅨ)在诸如乙醇、四氢呋喃和二甲基甲酰胺的溶剂中与R5-C(=NH)-NH2或其盐于0℃至150℃(优选60℃至100℃)反应0.5小时至48小时(优选1小时至12小时)，得到化合物(ⅩⅩ)或其盐。(步骤2)使化合物(ⅩⅩ)或其盐在诸如甲苯和二氯乙烷的溶剂中或在无溶剂的情况下与卤化剂如亚硫酰氯和磷酰氯于0℃至150℃(优选60℃至120℃)反应0.5小时至12小时(优选1小时至5小时)，得到卤代衍生物。使得到的卤代衍生物在诸如乙醇和四氢呋喃的溶剂中与R1NH2于-80℃至100℃(优选-20℃至30℃)反应0.5小时至48小时(优选1小时至12小时)，得到化合物(ⅩⅪ)。(步骤3)以类似于方法J的步骤2中所述的方法可以进行该步骤。
方法L胍基的引入 (步骤1)在碱如氢化钠存在下或不存在下，使化合物(ⅩⅧ)在诸如二甲基甲酰胺、吡啶和四氢呋喃的溶剂中与R3-NCS或R3R4NCS-Hal(其中Hal为卤素)于-20℃至120℃(优选0℃至120℃)反应0.5小时至48小时(优选1小时至24小时)，得到化合物(ⅩⅫ)。(步骤2)向化合物(ⅩⅫ)在诸如甲醇和四氢呋喃的溶剂中的溶液中加入重金属盐或重金属氧化物如氧化汞和R1R2NH，使该混合物于-20℃至100℃(优选0℃至50℃)反应0.5小时至48小时(优选1小时至12小时)，得到化合物(Ⅶ)。
方法M胍基的引入 (步骤1)使化合物(ⅩⅧ)在诸如二甲基甲酰胺和四氢呋喃的溶剂中与碱如氢化钠和丁醇钾于0℃至100℃(优选20℃至60℃)反应0.5小时至48小时(优选1小时至12小时)。向该混合物中加入二硫化碳，然后加入甲基碘，使得到的混合物于0℃至100℃(优选20℃至60℃)反应0.5小时至48小时(优选1小时至12小时)，得到化合物(ⅩⅩⅢ)。(步骤2)使化合物(ⅩⅩⅢ)在诸如甲醇和二甲基甲酰胺的溶剂中与R3R4NH于0℃至150℃(优选0℃至100℃)反应0.5小时至48小时(优选1小时至12小时)，得到化合物(ⅩⅩⅣ)。(步骤3)使化合物(ⅩⅩⅣ)在诸如甲醇和二甲基甲酰胺的溶剂中与R1R2NH于20℃至150℃(优选40℃至80℃)反应0.5小时至48小时(优选4小时至24小时)，得到化合物(Ⅶ)。
方法N胍基(R1=H)的引入 (步骤1)以类似于方法L的步骤1中所述的方法可以进行该步骤。(步骤2)以类似于方法L的步骤2中所述的方法可以进行该步骤。
当化合物在方法A至方法N的每一步骤中含有可能干扰该反应的官能团如羟基、巯基和氨基时，可根据文献如有机合成中的保护基团(Theodora W Green(John Wiley & Sons))中的方法，先进行保护并在合适的阶段去保护。
在本说明书中，术语“溶剂化物”包括，例如与有机溶剂所成的溶剂化物、水合物等。
在此使用的术语“本发明的化合物”包括所述化合物的药学上可接受的盐和水合物。例如，与碱金属(如锂、钠和钾)、碱土金属(如镁和钙)、铵、有机碱、氨基酸、无机酸(如盐酸、氢溴酸、磷酸和硫酸)或有机酸(如乙酸、柠檬酸、马来酸、富马酸、苯磺酸和对甲苯磺酸)所成的盐和它们的水合物作为示例说明。这些盐和水合物可通过通常的方法形成。所述水合物可以与任意数量的水分子相配。
前药是具有可经化学或代谢分解的基团的本发明化合物的衍生物，且这样的前药可通过溶剂分解作用或将该化合物置于体内生理条件下，转化为本发明的药用活性化合物。合适的前药衍生物的选择方法和加工方法述于文献如药物前体的设计(Elsevier,Amsterdam,1985)中。当本发明化合物具有羧基基团时，通过使基本的酸性化合物与合适的醇反应制备的酯衍生物或通过使基本的酸性化合物与合适的胺反应制备的酰胺可作为前药的例子说明。作为前药的特别优选的酯为甲酯、乙酯、正丙基酯、异丙基酯、正丁基酯、异丁基酯、叔丁基酯、吗啉基乙酯、N,N-二乙基2-羟乙酰胺基酯等。当本发明化合物具有羟基基团时，通过与合适的酰基卤或与合适的酸酐反应制备的酰氧基衍生物可作为前药的例子说明。作为前药的特别优选的酰氧基衍生物为-OCOC2H5、-OCOt-Bu、-OCOC15H31、-OCO(m-COONa-Ph)、-OCOCH2CH2COONa、-OCOCH(NH2)CH3和-OCOCH2N(CH3)2等。当本发明化合物具有氨基基团时，通过与合适的酰基卤或与合适的酸酐反应制备的酰胺衍生物可作为前药的例子说明。作为前药的特别优选的酰胺衍生物为-NHCO(CH2)20CH3和-NHCOCH(NH2)CH3等。
本发明的化合物并不限于任何特定的异构体，而是包括所有可能的异构体和外消旋变体。
本发明的化合物具有如以下实验实施例所示的对由Ras癌基因产物产生的信号的抑制活性。
因此，本发明的化合物可以用作癌症的治疗剂。
当将本发明的化合物给予病人以治疗或预防上述疾病时，可以通过口服例如散剂、颗粒剂、片剂、胶囊、丸剂和液体药物给药，或通过胃肠外如注射液、栓剂、皮下制剂、吹入等给药。通过与合适的药用附加剂如赋形剂、粘合剂、渗透剂、崩解剂、润滑剂等(如果必要)混合来配制有效量的本发明化合物。制备胃肠外注射剂时，可将本发明的化合物和合适的载体进行灭菌来制备。
适宜的剂量随病人的疾病、给药途径、病人的年龄及其体重而变化。在成人口服的情况下，该剂量一般可在0.01-100mg/kg/天之间，优选在0.1-20mg/kg/天之间。
提供以下实施例以便进一步说明本发明，但并不认为是对其范围的限制。
在实施例中，采用下列缩写。Me甲基Et乙基Pr正丙基i-Pr 异丙基Bu正丁基i-Bu 异丁基tBu 叔丁基Ac乙酰基Ph苯基MPM 对-甲氧基苯基甲基DMF 二甲基甲酰胺THF 四氢呋喃DMSO 二甲亚砜TsOH 对-甲苯磺酸TBS 叔丁基二甲基甲硅烷基在1H-NMR中，δ的值以ppm表示，s是单峰，d是双重峰，t是三重峰，q是四重峰，quit是五重峰，sext是六重峰，br是宽峰。J的值用Hz表示。实施例参照实施例1 步骤1搅拌及冰冷却下，向氢化铝锂(4.4g)在220ml THF中的悬浮液中滴加化合物1(22.0g)在220ml THF中的溶液，该化合物通过熟知的方法(G.W.Kenner,B.Lythgoe,A.R.Todd和A.Topham,J.Chem.Soc.,388(1943))获得。使该反应混合物升至室温并搅拌2小时。向生成的混合物中加入过量冰并再搅拌2小时。将无水硫酸钠加入到该混合物中，滤去沉淀物并用甲醇洗涤。真空浓缩合并的滤液并在加热下使残留物溶于乙醇中。滤去出现的不溶性物质并使乙醇溶液冷却。再次滤去不溶性物质。用乙醚稀释滤液，过滤出现的结晶物得到14.5g化合物2。熔点119-121℃1H-NMR(CDCl3):0.09(6H,s),0.90(9H,s),2.50(3H,s),4.60(2H,s),5.39(2H,br),7.95(1H,s)。步骤2搅拌及冰冷却下，向化合物2(13.9g)和7.7g咪唑在200ml DMF的溶液中加入7.7g叔丁基二甲基甲硅烷基氯。将该混合物搅拌过夜，将2.0g咪唑和3.4g叔丁基二甲基甲硅烷基氯加入该混合物中。搅拌该混合物6小时，加入乙酸乙酯。用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将乙酸乙酯加入残留物中并用己烷洗涤该混合物。过滤出现的结晶物得到12.8g化合物3。熔点119-121℃1H-NMR(CDCl3):0.09(6H,s),0.90(9H,s),2.50(3H,s),4.60(2H,s),5.39(2H,br),7.95(1H,s)。步骤3搅拌下，向2.9g氢化钠在90ml DMF中的悬浮液中滴加化合物3(18.1g)在90ml DMF中的溶液，搅拌该混合物1小时，在冰冷却下，将6.3ml异硫氰酸乙酯滴加入混合物中。于室温、冰冷却下，再搅拌生成的混合物30分钟，加入4.5ml乙酸，再加入乙酸乙酯。用硫酸氢钾水溶液和盐水洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析，得到15.8g化合物4。熔点86-87℃1H-NMR(CDCl3):0.17(6H,s),0.95(9H,s),1.36(3H,t,J=7.3 Hz),2.60(3H,s),3.76(2H,dq,J=4.9,7.3Hz),4.69(2H,s),8.19(1H,s),9.36(1H,br),11.5(1H,br)。步骤4于室温及搅拌下，向化合物4(8.0g)、5.6g氧化汞(红色)和60ml甲醇的混合物中加入溶于甲醇中的40％甲基胺。搅拌得到的混合物4小时，滤去不溶性物质。真空浓缩滤液，将甲醇/乙醚加入残留物中。滤去不溶性物质并真空浓缩溶剂。将甲苯/己烷加入残留物中，得到结晶的7.81g化合物5。熔点150-151℃1H-NMR(CDCl3):0.10(6H,s),0.95(9H,s),1.28(3H,t,J=7.0Hz),2.49(3H,s),2.92(3H,d,J=4.9Hz),3.34(2H，五重峰，J=7.0Hz),4.76(2H,s),8.30(1H,s)。参照实施例2 步骤1向磷酰氯(61.5g)在35ml甲苯中的溶液中加入9.0g化合物6的钠盐，该化合物通过熟知的方法(A.Kreutzberger和C.Grundmann,J.Org.Chem.,26,388(1961))获得，于100℃搅拌得到的混合物1小时。减压除去过量的磷酰氯，于0℃将18ml 10％氨的乙醇液加入该混合物中。于室温下搅拌该混合物130分钟，除去不溶物。真空浓缩溶剂，残留物经硅胶柱层析纯化，得到4.78g化合物7。1H-NMR(CDCl3):1.40(3H,t,J=7.3Hz),4.38(2H,q,J=7.3Hz),5.61(1H,br),7.86(1H,br),8.62(1H,s),8.90(1H,s)。步骤2于0℃，向氢化铝锂(1.19g)在30ml THF中的悬浮液中加入化合物7(4.77g)在42ml THF中的溶液，搅拌得到的混合物1小时。将少量的水加入到该混合物中，然后再搅拌50分钟。滤去不溶性物质并真空浓缩滤液。从乙醇中重结晶得到1.77g化合物8。1H-NMR(CDCl3):4.65(2H,s),8.09(1H,s),8.54(1H,s)。步骤3向化合物8(1.63g)在13ml DMF的溶液中加入在13ml DMF中的1.33g咪唑和2.36g叔丁基二甲基甲硅烷基氯，于室温下搅拌得到的混合物19小时，将水加入该反应混合物中，用乙酸乙酯提取该混合物。用盐水洗涤有机层，干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，得到2.68g化合物9。1H-NMR(CDCl3):0.10(6H,s),0.90(9H,s),4.62(2H,s),5.43(2H,bt),8.04(1H,s),8.51(1H,s)。步骤4向1.67g氢化钠在10ml DMF中的悬浮液中加入化合物9(4.00g)和3.81g二硫化碳在40ml DMF中的溶液。于室温下搅拌1小时后，向该混合物中加入7.11g在甲基碘，再搅拌生成的混合物4小时。向该混合物中加入硫酸氢钾水溶液，用乙酸乙酯提取该混合物。用盐水洗涤有机层，干燥并真空浓缩。向残留物中加入70％乙胺溶液(21.4g)，于60℃搅拌该混合物15小时。减压除去过量的乙胺。得到的残留物经硅胶柱层析纯化，得到3.11g化合物10。1H-NMR(CDCl3):0.11(6H,s),0.96(9H,s),1.28(6H,t,J=7.3Hz),3.33(4H,dq,J=5.6,7.3Hz),4.77(2H,s),8.38(1H,s),8.52(1H,s)。参照实施例3化合物G-l的合成 步骤1搅拌及冰冷却下，向4-氨基-5-乙氧基甲基-2-甲基嘧啶11(1.0g)(该化合物通过熟知的方法(M.Tomita,S.Uyeo,A.Takamizawa和R.Maeda,Yakugakuzassi,74,742(1943))获得)和0.74g叔丁醇钾在12mlDMF的溶液中滴加0.58ml异硫氰酸乙酯。滴加完毕后，于室温下搅拌混合物1小时。证实化合物11消失后，在冰冷却下向该混合物中加入0.42ml甲基碘，在冰冷却下搅拌得到的混合物10分钟，再于室温下搅拌10分钟。用乙酸乙酯提取反应混合物并用水和盐水洗涤有机层，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析，得到1.42g化合物12。熔点52-53℃1H-NMR(CDCl3):1.26(3H,t,J=6.9Hz),1.33(3H,t,J=7.3Hz),2.51(3H,s),2.55(3H,s),3.43(2H,dq,J=7.3,5.3Hz),3.60(2H,q,J=6.9Hz),4.61(2H,s),8.41(1H,s),11.1 8(1H,br)。步骤2使化合物12溶于25％溴化氢的乙酸(35ml)溶液中，于70℃搅拌混合物8小时。减压除去溶剂。使残留物溶于15ml DMF中，将得到的混合物加入到2-(4-硝基苯基)-5-巯基-1,3,4-噁二唑(2.69g)和碳酸钾(6.05g)在15ml DMF的悬浮液中。于室温下搅拌该反应混合物1.5小时后，将水加入该混合物中。过滤收集沉淀的结晶得到4.15g化合物G-1。熔点156-157℃1H-NMR(CDCl3):1.35(3H,t,J=7.3Hz),2.55(3H,s),2.57(3H,s),3.45(2H,dq,J=7.3,5.3Hz),4.58(2H,s),8.16(2H,d,J=8.7Hz),8.36(2H,d,J=8.7Hz),8.53(1H,s),11.31(1H,br)。实施例1化合物A-1的合成使化合物5(6.5g)溶于25％溴化氢的乙酸溶液中，于40℃搅拌该混合物过夜。减压除去溶剂。使残留物溶于43ml甲醇中。于冰冷却下，将该混合物加入到2-(2-氨基苯基)-5-巯基-1,3,4-噁二唑(11.9g)(其根据R.W.Young和K.H.Wood,J.Am.Chem.Soc.,77,400(1955)中所述方法获得)和氢氧化钾(3.3g)的54.5ml甲醇溶液中。于室温下搅拌该反应混合物3小时，过滤移出不溶物。减压除去溶剂。向残留物中加入二氯甲烷，过滤除去沉淀物。减压除去溶剂，残留物经硅胶柱层析纯化，得到化合物A-1。通过从乙醚中结晶进一步纯化，得到5.6g化合物A-1。物理数据示于表1中。实施例2化合物A-2的合成在冰冷却和搅拌下，向化合物A-1(4.77g)在120ml吡啶的溶液中滴加1.0ml乙酰氯。2.5小时后，使该混合物温热至室温并搅拌另外30分钟。向该混合物中加入约5％甲醇的氯仿液。用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤有机层，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残留物经硅胶柱层析纯化，得到4.37g化合物A-2。物理数据示于表1中。实施例3化合物A-3的合成使化合物10(0.17g)溶于25％溴化氢的乙酸(1ml)溶液中，于40℃搅拌该混合物15小时。减压除去溶剂，使残留物溶于3ml DMF中。在冰冷却下，将该混合物加入到2-(4-氨基苯基)-5-巯基-1,3,4-噁二唑(0.12g)和叔丁醇钾(0.2g)在1ml DMF溶液中。于室温下搅拌该反应混合物1小时并用乙酸乙酯提取。用水洗涤有机层并干燥。残留物经硅胶柱层析纯化，得到0.07g化合物A-3。物理数据示于表1中。实施例4化合物A-4的合成向4-氨基-5-乙氧基甲基-2-甲基吡啶(4.8g)(其根据M.Tomita,S.Uyeo,A.Takamizawa和R.Maeda,Yakugakuzasshi,74,742(1954)中所述方法获得)在48ml吡啶溶液中加入4.2g异硫氰酸甲酯，将得到的混合物加热回流7小时。另外，再加入1.1g异硫氰酸甲酯，将该混合物加热回流4小时。减压除去溶剂，残留物经硅胶柱层析纯化，得到4.18g4-(N’-甲基硫脲基)-5-乙氧基甲基-2-甲基嘧啶。1H-NMR(CDCl3):1.35(3H,t,J=7.0Hz),2.61(3H,s),3.28(3H,d,J=4.9Hz),3.62(2H,q,J=7.0Hz),4.52(2H,s),8.23(1H,s),9.48(1H,br),11.40(1H,br)。
向4-(N’-甲基硫脲基)-5-乙氧基甲基-2-甲基嘧啶(300mg)在6ml10％氨-乙醇的溶液中加入400mg红色的氧化汞，于室温下搅拌生成的混合物15分钟。过滤移出不溶性物质后，从乙酸乙酯中结晶得到117mg4-(甲基胍基)-5-乙氧基甲基-2-甲基嘧啶。1H-NMR(CDCl3):1.26(3H,t,J=7.0Hz),2.51(3H,s),2.92(3H,s),3.59(2H,q,J=7.0Hz),4.52(2H,s),6.49(1H,s),8.25(1H,s)。
将4-(甲基胍基)-5-乙氧基甲基-2-甲基嘧啶(500mg)在10ml 25％溴化氢的乙酸溶液回流加热6小时。减压除去溶剂，使残留物溶于14.5ml乙醇中，向该混合物中加入2-(2-氨基苯基)-5-巯基噁二唑(290mg)和氢氧化钾(350mg)，在冰冷却下搅拌得到的混合物2小时，过滤移出不溶性物质，真空浓缩滤液。残留物经硅胶柱层析纯化，得到210mg所需化合物。物理数据示于表1中。实施例5化合物A-5的合成向化合物A-4(200mg)在5ml甲醇中的悬浮液中加入5ml 10％盐酸的甲醇溶液，搅拌得到的混合物5分钟。减压除去溶剂，使残留物溶于乙醇中。向该溶液中加入乙酸乙酯，收集沉淀得到193mg化合物A-5。
元素分析(C、H、N、Cl)的结果显示该化合物为二盐酸盐。物理数据示于表1中。实施例6-实施例190以类似于实施例1-5中所述的方法合成化合物A-6至A-190。物理数据示于表1-21中。当未描述用于1H-NMR谱的溶剂时，使用CDCl3。
表1
表2
表3
表4
表5
表6
表7
表8
表9
表10
表11
表12 表13
表14
表15
表16
表17
表18
表19
表20
表21
实施例191化合物B-1的合成向2-(2-氨基苯基)-5-巯基噁二唑(2.0g)在50ml甲醇的溶液中加入600mg氢氧化钾和1.48g甲基碘，于室温下搅拌该混合物1小时。除去甲醇，加入二氯甲烷。用水洗涤有机层，经硅胶柱层析纯化，得到1.87g2-(2-氨基苯基)-(5-甲硫基)噁二唑。1H-NMR(CDCl3):2.78(3H,s),5.76(2H,br),6.74(1H,dt,J=1.0,7.8Hz),6.78(1H,dd,J=7.8,1.OHz),7.26(1H,dt,J=1.5,7.8Hz),7.69(1H,dd,J=1.5,7.8Hz)。
向2-(2-氨基苯基)-5-(甲硫基)噁二唑(1.8g)的甲氧基乙醇溶液中加入4.4g肼水合物，于120℃搅拌该混合物30小时。除去溶剂和过量的肼，残留物经硅胶柱层析纯化，得到613mg 2-(2-氨基苯基)-5-肼基噁二唑。1H-NMR(CDCl3):4.04(2H,br),5.44(2H,br),6.66(1H,dt,J=1.4,7.8Hz),6.69(1H,dd,J=7.8,1.4Hz),7.23(1H,dt,J=1.4,7.8Hz),7.23(1H,br),7.29(1H,dd,J=7.8,1.4Hz)。
使化合物5(100mg)溶于25％溴化氢的乙酸(3ml)溶液中，于40℃搅拌该混合物过夜。减压除去溶剂，使残留物溶于3ml甲醇中。向该溶液中加入180mg2-(2-氨基苯基)-5-肼基噁二唑，搅拌该混合物4小时。除去一半量的甲醇后，采用硅胶柱层析纯化残留混合物，得到55mg化合物Ⅱ-1。物理数据示于表22中。实施例192化合物B-2的合成向2-氨基苯甲酰肼(1.0g)在30ml THF的溶液中加入1.3g羰基二咪唑，将该混合物回流加热15小时。减压除去溶剂，使残留物从乙醇水溶液中结晶得到809mg 2-(2-氨基苯基)-5-噁二唑啉酮。1H-NMR(DMSOd6):6.30(2H,br),6.64(1H,ddd,J=7.9,7.0,0.9Hz),6.84(1H,dd,J=8.6,0.9Hz),7.22(1H,ddd,J=8.6,7.0,1.5Hz),7.44(1H,dd,J=7.9,1.5Hz),12.50(1H,br)。
使化合物5(200mg)溶于25％溴化氢的乙酸(1ml)溶液中，于40℃搅拌该混合物过夜。减压除去溶剂。使残留物溶于1ml DMF中，将该混合物加入320mg2-(2-氨基苯基)-5-噁二唑啉酮和75mg氢化钠的冰冷却的5ml DMF溶液中。于室温下搅拌该反应混合物1小时并将水加入该混合物中。用二氯甲烷提取该混合物，用盐水洗涤有机层并干燥。采用硅胶柱层析纯化，得到40mg所需化合物。物理数据示于表22中。实施例193化合物B-3的合成向1-(2-氨基苯甲酰基)氨基硫脲(1.3g)在30ml甲醇的溶液中加入1.52g红色的氧化汞，将该混合物回流加热5小时。过滤除去不溶性物质并真空浓缩滤液。残留物经硅胶柱层析纯化，得到645mg 2-氨基-5-(2-氨基苯基)噁二唑。1H-NMR(DMSOd6):6.53(2H,br),6.62(1H,t,J=7.8Hz),6.83(1H,d,J=7.8Hz),7.16(1H,dt,J=1.6,7.8Hz),7.16(2H,br),7.43(1H,dd,J=7.8,1.6Hz)。
使用2-氨基-5-(2-氨基苯基)噁二唑作为原料，以类似于实施例192中所述方法获得化合物B-3(33mg)。物理数据示于表22中。实施例194化合物B-4的合成向在DMF中的2-氨基苯甲酰肼(1.5g)溶液中加入0.7g异硫氰酸甲酯，将该混合物静置一天。除去溶剂，将氯仿加入残留物中，得到2.1g的1-(2-氨基苯甲酰基)-4-甲基氨基硫脲，为沉淀物。1H-NMR(DMSOd6):2.87(3H,d,J=4.3Hz),6.51(1H,t,J=7.8Hz),6.71(1H,d,J=7.8Hz),7.18(1H,t,J=7.8Hz),7.64(1H,d,J=7.8Hz),7.95(1H,br)。
以类似于实施例191中所述方法，与嘧啶衍生物缩合，获得化合物B-4。物理数据示于表22中。
表22
实施例195-实施例196以类似于实施例1-实施例190中所述方法合成化合物(C-1)和化合物(C-2)。物理数据示于表23中。表23
实施例197化合物D-1的合成将2-氨基烟酸甲酯(0.97g)和1.81g肼水合物的混合物于100℃加热2小时。减压除去过量的肼，使残留物悬浮于20ml乙醇中。向该悬浮液中加入1.65g二硫化碳和2.19g三乙胺，加热该混合物1.5小时。除去乙醇，将水加入该残留物中。除去不溶性物质后，通过加入硫酸氢钾水溶液中和该混合物，收集沉淀得到0.51g 2-(2-氨基吡啶-3-基)-5-巯基噁二唑。1H-NMR(CDCl3+CD3OD):6.77(1H,dd,J=7.8,4.9Hz),8.06(1H,dd,J=7.8,1.2),8.19(1H,dd,J=4.9,1.2Hz)。
使化合物10(200mg)溶于25％溴化氢的乙酸(1ml)溶液中，于40℃搅拌该混合物过夜。减压除去溶剂。使残留物溶于2ml DMF中，将该混合物加入到332mg 2-(2-氨基吡啶-3-基)-5-巯基-1,3,4-噁二唑和68mg氢化钠在2ml冰冷却的DMF溶液中。于室温下搅拌1小时后，将水加入该混合物中。用二氯甲烷提取得到的混合物，用盐水洗涤有机层并干燥。采用硅胶柱层析纯化，得到182mg化合物D-1。物理数据示于表24中。实施例198-实施例241以类似于实施例1至实施例190和实施例197中所述方法合成化合物D-2至化合物D-45。物理数据示于表24-27中。 表24 表25 表26 表27 实施例242化合物E-1的合成于0℃，向1-氨基-(4-氯代苯甲醛)肟(50mg)在4ml二氯甲烷中的溶液中加入40mg硫光气。于室温下搅拌该混合物2小时，将水加入该混合物中。用二氯甲烷提取得到的混合物。用碳酸钾水溶液洗涤有机层。通过加入稀盐酸中和水层并用二氯甲烷提取。干燥有机层，采用硅胶柱层析纯化，得到12mg 3-(4-氯苯基)-5-巯基-1,2,4-噁二唑。1H-NMR(CDCl3):6.96(2H,d,J=8.8Hz),7.32(2H,d,J=8.8Hz)。
使化合物10(58mg)溶于25％溴化氢的乙酸(1ml)溶液中，于40℃搅拌该混合物过夜。减压除去溶剂。使残留物溶于2ml DMF中，将该混合物加入到35mg 3-(4-氯代苯基)-5-巯基-1,2,4-噁二唑和55mg叔丁醇钾在1ml冰冷却的DMF溶液中。于室温下搅拌3小时后，将水加入该混合物中。用二氯甲烷提取得到的混合物，用盐水洗涤有机层，干燥，采用制备性薄层层析纯化，得到12mg化合物E-1。物理数据示于表28中。实施例243化合物E-2的合成以类似于实施例242中所述方法合成化合物E-2。物理数据示于表28中。实施例244化合物E-3的合成于0℃，向2-氨基-4’-氯代苯乙酮盐酸盐(1.48g)在30ml二氯甲烷的溶液中加入1.65g硫光气和3.63g三乙胺，于室温下搅拌该混合物过夜。向反应混合物中加入1N氢氧化钠溶液和甲醇。于室温下搅拌得到的混合物并在乙酸乙酯和水之间分配。通过加入稀盐酸中和水层，收集生成的结晶，干燥得到220mg 5-(4-氯苯基)-2-巯基噁唑。1H-NMR(CDCl3):7.10(1H,s),7.39(2H,d,J=8.6Hz),7.52(2H,d,J=8.6Hz)。
以类似于实施例242中所述方法，采用嘧啶衍生物进行缩合，得到284mg化合物E-3。物理数据示于表28中。实施例245化合物E-4的合成向在10ml乙醇中的4-氯代苯甲酰肼(500mg)的溶液中加入444mg二硫化碳和163mg氢氧化钾，于室温下搅拌该混合物2小时。减压除去乙醇，将获得的粉末逐渐加入到3ml冰冷却的浓硫酸中。搅拌10分钟后，将该混合液倾入冰水中并用乙酸乙酯提取。用碳酸钾水溶液提取有机层，通过加入浓盐酸中和水层。收集沉淀物并干燥，得到235mg5-(4-氯代苯基)-2-巯基噻二唑。1H-NMR(CDCl3):7.46(2H,d,J=8.5Hz),7.62(2H,d,J=8.5Hz),10.26(1H,br)。
以类似于实施例242中所述方法，采用嘧啶衍生物进行缩合，得到301mg化合物E-4。物理数据示于表28中。实施例246化合物E-5的合成使靛红酸酐(4.9g)和氨基硫脲(2.8g)溶于30ml DMF中，于60-80℃搅拌得到的混合物20小时。减压除去溶剂，残留物从甲醇和乙醇中重结晶，得到2.94g 1-(2-氨基苯甲酰基)氨基硫脲。1H-NMR(DMSOd6):6.49(1H,t,J=7.8Hz),6.70(1H,dd,J=7.8,1.3Hz),7.16(1H,dt,J=1.6,7.8Hz),7.51(1H,br),7.62(1H,d,J=7.8Hz),7.78(1H,br),9.96(1H,br)。
向1-(2-氨基苯甲酰基)氨基硫脲(500mg)和2-乙氧基乙醇的溶液中加入300mg叔丁醇钾，将得到的混合液回流加热2.5小时。减压除去溶剂，通过加入硫酸氢钾水溶液中和残留物。收集产生的沉淀，得到281mg 2-(2-氨基苯基)-5-巯基三唑。1H-NMR(DMSOd6):6.53(2H,br),6.62(1H,t,J=7.8 Hz),6.83(1H,d,J=7.8Hz),7.16(1H,dt,J=1.6,7.8Hz),7.16(2H,br),7.43(1H,dd,J=7.8,1.6Hz),7.78(1H,br),9.96(1H,br)。
以类似于实施例242中所述方法，采用嘧啶衍生物进行缩合，得到化合物E-5。物理数据示于表28中。实施例247化合物E-6的合成向4-氯代苯甲酰基乙酸乙酯(500mg)在4ml乙醇的溶液中加入202mg甲基肼，于室温下搅拌得到的混合物过夜。减压除去溶剂，通过采用硅胶柱层析纯化残余物，得到199mg 3-(4-氯代苯基)-1-甲基吡唑啉-5-酮。1H-NMR(CDCl3):3.41(3H,s),3.58(2H,s),7.39(2H,d,J=8.8Hz),7.60(2H,d,J=8.8Hz)。
向在上面步骤中合成的化合物的二氧六环溶液中加入231mgLawesson’s试剂，将得到的混合液回流加热4小时。浓缩该反应混合物，通过采用硅胶柱层析纯化残留物，得到91mg 3-(4-氯代苯基)-1-甲基-5-巯基吡唑。
以类似于实施例242中所述方法，使3-(4-氯代苯基)-1-甲基-5-巯基吡唑(91mg)与嘧啶衍生物缩合，得到化合物103mg化合物E-6。物理数据示于表28中。实施例248化合物E-7的合成在氮气下，将4-甲苯基硼酸(boronic acid)(500mg)、2-溴代呋喃和四(三苯膦)钯(177mg)加入24ml二甲氧基乙烷和15ml乙醇的混合物中。另外，将1N碳酸钠(12ml)加入该混合物中，将得到的混合物回流加热2小时。将水加入该混合物中并用乙醚提取该混合物。干燥有机层，减压除去溶剂，通过采用硅胶柱层析纯化残余物，得到438mg 2-(4-甲苯基)呋喃。1H-NMR(CDCl3):2.36(3H,s),6.45(1H,dd,J=3.4,1.5Hz),6.59(1H,d,J=3.4Hz),7.19(2H,d,J=8.0Hz),7.44(1H,d,J=1.5Hz),7.57(2H,d,J=8.0Hz)。
于-78℃，向在上面步骤中获得的化合物的5ml THF溶液中加入2.08ml 1.6M丁基锂，将得到的混合物搅拌30分钟。向该反应混合物中加入133mg硫粉，再搅拌得到的混合物1小时。将稀盐酸加入该混合物中并用乙醚提取该混合物。用盐水洗涤有机层，减压除去溶剂。通过采用硅胶柱层析纯化残留物，得到236mg 2-巯基-5-(4-甲苯基)呋喃。1H-NMR(CDCl3):2.38(3H,s),6.66(1H,d,J=3.8Hz),6.72(1H,d,J=3.8Hz),7.17(2H,d,J=8.2Hz),7.58(1H,d,J=8.2Hz)。
以类似于实施例242中所述方法，使2-巯基-5-(4-甲苯基)呋喃(70mg)与嘧啶衍生物缩合，得到78mg化合物E-7。物理数据示于表28中。表28 示于表29-43中的化合物F-1至F-1142能够以类似于实施例1-248中所述方法合成。 表29
表30
表31
表32
表33
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表35
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表38
表39
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表41
表42
表43
试验实施例1对Ras癌基因产物产生的细胞信号的抑制作用1)用于测定的细胞系的建立基于报道质粒(pGV-P(Toyo Ink,Japan))，其中荧光素酶基因连接于SV-40衍生的最小启动子，我们通过将3个化学合成的寡核苷酸(序列CAGGATATGACTCT，衍生自小鼠NVL-3(M.A.Reddy等(1992)Mol.Endocrinol.,6,1051))的模板插入所述启动子的上游部分来构建命名为pRRE3-luc的质粒。用这种质粒经脂质体-介导的转染作用转染v-ki-ras-转化的NIH3T3细胞(DT细胞，由Dr.Makoto Noda(KyotoUniv.,School of medicine)提供)，获得稳定掺入并维持每种质粒的转染细胞系。我们将pGV-P和pRRE3-转染的细胞系分别命名为DT-C和DT-R，并用于下述测定中。2)样品的制备ⅰ)于37℃，在5％二氧化碳条件下，将所有的细胞系在包含60mg/ml卡那霉素(Meiji Seika,Japan)的Dulbecco’s Modified Essential Medium(DMEM:10％胎牛血清(FCS:Hyclone,USA))中，在潮湿的培养箱中培养。ⅱ)将DT-C和DT-R细胞以2500个细胞/孔的浓度接种于平底96孔多孔板(multiplate)(Sumitomo bakelite)中并培养24小时。ⅲ)将试验化合物制备为1mg/ml DMSO溶液。ⅳ)将试验化合物的溶液加入培养物中。使用10mg/ml至0.51ng/ml(3倍稀释)浓度的试验化合物。ⅴ)24小时后，完全抽吸培养物的上清液，在干燥细胞前加入20ml细胞的溶胞溶液(PGC-50(ToyoInk,Japan))。为使细胞完全溶解，将多孔板于室温下放置10-30分钟。包裹平板并于-20℃贮存至测定日。3)样品的测定ⅰ)通过将96孔多孔板置于37℃来熔化样品并加入90μl/孔25mMTris(pH7.5)。ⅱ)转移50μl样品(110μl)至96孔微量培养板中以便进行测定(Microlite1(Dynatech))。ⅲ)采用发光计，LUMINOUS CT9000D(Dia-Yatron,Japan)测定样品。我们采用Pickagene发光试剂盒PGL 2000或LT2.0(Toyo Ink,Japan)作为发光测定的底物(50μl/孔)。4)结果判断ⅰ)将DT-C细胞和DT-R细胞的荧光素酶活性在其中相对活性和化合物浓度分别表示为Y轴和X轴的坐标上作图。我们通过DT-C细胞和DT-R细胞的活性的解离度作为指标来判断。ⅱ)具体地说，化合物的效能用下述的两个值表示。
a)在试验的浓度点中，最小浓度(最小活性浓度MAC)(此时DT-C细胞和DT-R细胞的活性解离)显示为该化合物的效能指标。MAC值不指示在该测定中未显示两种活性的解离的化合物(阴性)。
b)在试验的浓度点中，在对DT-C细胞的最接近50％抑制浓度的浓度(IC50-C)被显示为非特异性转录抑制效果或细胞毒性的指标。在阳性化合物的情况下，在DT-C细胞中的活性浓度面积以上的50％抑制浓度表示为IC50-C。
该测定的结果示于表44和45中。表44
表45
试验实施例2体外细胞生长抑制试验细胞和MTT测定使用人鳞状肺癌RERF-RC-AI、人鳞状肺癌Ma44、人肺腺癌A549、人结肠癌HT29和人胰腺癌PANC-1。于37℃，在潮湿的培养箱(5％二氧化碳)中，将所有的细胞系用Eagle’s Modified EssentialMedium(EMEM，补充有10％胎牛血清(FCS:Hyclone,USA)和60μg/ml卡那霉素(Meiji Seika,Japan))进行培养。将细胞接种于96孔微量培养板中。24小时后，加入以10μg/ml至0.1μg/ml(2倍稀释)浓度的化合物。4天后进行MTT测定，确定IC50值。该结果(浓度以ng/ml表示)示于表46至49中。表46
表47
表48
表49
试验实施例3体内抗肿瘤效果的评价使用小鼠结肠癌Colon26、人肺癌RERF-LC-AI、人肺癌Ma44。通过将小鼠-和人-衍生的癌细胞分别系列移植于Balb/c和Balb/c裸鼠来维持。在肿瘤移植后，每日口服给予化合物A-42的5％甲基纤维素混悬溶液，共14天。通过实验对肿瘤大小(短径和长径)评分并计算肿瘤体积。抗肿瘤效果通过处理组/对照组的比率估计生长抑制，来评价并表示为％抑制率。化合物A-42在30mg/kg给予14天对Colon26、RERF-LC-AI和Ma44的生长抑制分别为70％(P＜0.01)、74％(P＜0.01)和66％(P＜0.01)。制剂实施例制剂实施例1使用下列成分制备颗粒。成分由式(Ⅰ)表示的化合物 10mg乳糖700mg玉米淀粉 274mgHPC-L 16mg1000mg使式(Ⅰ)表示的化合物和乳糖通过60目筛。玉米淀粉通过120目筛。通过双壁式搅拌机将其混合。将HPC-L水溶液(低粘性羟丙基纤维素)加入到该混合物中，揉合得到的混合物，制粒(通过用孔径0.5-1mm目的筛挤压)并干燥。使如此得到的干颗粒通过一摆动筛(12/60目)得到所需颗粒。制剂2使用下列成分制备用于填充胶囊的粉末。成分由式(Ⅰ)表示的化合物10mg乳糖 79mg玉米淀粉 10mg硬脂酸镁 1mg100mg使式(Ⅰ)表示的化合物和乳糖通过60目筛。玉米淀粉通过120目筛。通过双壁式搅拌机将这些成分和硬脂酸镁混合。将100mg的10倍研磨粉末填充到5号硬明胶胶囊中。制剂3使用下列成分制备用于填充胶囊的颗粒。成分由式(Ⅰ)表示的化合物 15mg乳糖90mg玉米淀粉 42mgHPC-L 3mg150mg使式(Ⅰ)表示的化合物和乳糖通过60目筛。玉米淀粉通过120目筛。将其混合后，将HPC-L水溶液加入到该混合物中，揉合得到的混合物，制粒并干燥。润滑干燥的颗粒后，将150mg的颗粒填充到4号硬明胶胶囊中。制剂4使用下列成分制备片剂。成分由式(Ⅰ)表示的化合物 10mg乳糖 90mg微晶纤维素 30mgCMC-Na15mg硬脂酸镁 5mg150mg使式(Ⅰ)表示的化合物、乳糖、微晶纤维素和CMC-Na(羧甲基纤维素钠盐)通过60目筛，然后混合。将得到的混合物与硬脂酸镁混合，得到用于片剂的混合粉末。将混合的粉末压制成150mg的片剂。
工业应用本发明的嘧啶衍生物具有对Ras癌基因产物产生信号的抑制活性，因此它们对具有高频率的ras激活的实体癌如胰腺癌、结肠癌和肺癌是有效的。
权利要求
1．由式(Ⅰ)代表的化合物、其前药或它们的药学上可接受的盐或它们的溶剂化物 其中R1、R2、R3和R4各自独立为氢原子、任选取代的烷基、任选取代的链烯基、任选取代的链炔基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的非芳族杂环基或酰基；或R1和R2、R3和R4，及R2和R3各自与相邻的氮原子结合在一起形成任选含有O、S或N的相同或不同的3-至6-元环，前提是当R2和R3结合在一起形成环时，则R1和R2及R3和R4不能形成环；R5和R6各自独立为氢原子、任选取代的烷基、任选取代的链烯基、任选取代的链炔基、任选取代的烷氧基、烷硫基、任选取代的烷氧基羰基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、卤素、羟基、巯基、任选取代的氨基、羧基、氰基或硝基；X是-N(R7)-、-NH-NH、-O-或-S-，其中R7为氢原子或任选取代的烷基；Y为任选取代的5-元非-芳族杂环-二基或任选取代的5-元杂芳二基；Z为任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、任选取代的芳基链烯基或任选取代的链烯基。
2．由式(Ⅱ)代表的化合物、其前药或它们的药学上可接受的盐或它们的溶剂化物 其中R8、R9、R10和R11各自独立为氢原子、任选取代的烷基、链烯基、链炔基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、任选取代的芳烷基、非芳族杂环基或酰基；W是-O-、-S-或-N(RA)-，其中RA为氢原子或任选取代的烷基；R5、R6、X和Z如上所定义。
3．由式(Ⅲ)代表的化合物、其前药或它们的药学上可接受的盐或它们的溶剂化物 其中R5、R6、R8、R9、R10、R11和Z如上所定义。
4．由式(Ⅳ)代表的化合物、其前药或它们的药学上可接受的盐或它们的溶剂化物 其中R12为氢原子或烷基；V为任选取代的芳基；R8、R9、R10和R11如上所定义。
5．权利要求1的化合物、其前药或它们的药学上可接受的盐或它们的溶剂化物，其中R1、R2、R3和R4各自独立为氢原子、任选取代的烷基、链烯基、链炔基或酰基。
6．权利要求2-4中任一项的化合物、其前药或它们的药学上可接受的盐或它们的溶剂化物，其中R8、R9、R10和R11各自独立为氢原子、任选取代的烷基、链烯基、链炔基或酰基。
7．药用组合物，其含有作为活性成分的如权利要求1-6中任一项所述的化合物。
8．用作抗肿瘤药的药用组合物，其含有作为活性成分的如权利要求1-6中任一项所述的化合物。
9．用作细胞生长抑制剂的药用组合物，其含有作为活性成分的如权利要求1-6中任一项所述的化合物。
10．用作对由Ras癌基因产物产生的信号的抑制剂的药用组合物，其含有作为活性成分的如权利要求1-6中任一项所述的化合物。
11．权利要求1-6中任一项的化合物在制备治疗癌症的药用组合物中的用途。
12．治疗哺乳动物，包括人，以减轻癌症的病理作用的方法，该方法包括给予所述哺乳动物如权利要求1-6中任一项所述的化合物。
全文摘要
由通式(Ⅰ)代表的化合物、其前药或二者的药学上可接受的盐或它们的溶剂化物。在该式中，R
文档编号C07D413/12GK1317003SQ99810805
公开日2001年10月10日 申请日期1999年7月16日 优先权日1998年7月16日
发明者上田和生, 田中秀和, 竹中秀行 申请人:盐野义制药株式会社