本申请要求2014年1月16日提交的美国临时申请号61/928,130和2014年10月10日提交的美国申请号14/511,964的优先权。这些申请的全部内容通过引用整体并入本文。
背景
慢性B型肝炎病毒(HBV)感染是一种显著的全球健康问题，其感染了超过5％的世界人口(在全世界范围内超过3.5亿人且在美国125万名个体)的重要。
尽管可使用预防性HBV疫苗，但由于在大部分发展中世界中次优的治疗选择和持续新发感染率，慢性HBV感染的负担仍然是重大的未解决的全球医学问题。当前治疗不提供治愈并仅限于两类试剂(病毒聚合酶的干扰素和核苷类似物/抑制剂)；耐药性，低功效及抗性问题限制了其影响。HBV的低治愈率至少部分由于共价闭合环状DNA(cccDNA)在受感染的干细胞核中的存在和持续性。然而，HBV DNA的持续遏制减缓了肝病进展并且有助于预防肝细胞癌。当前针对HBV-感染的患者的治疗目标涉及减少血清HBV DNA至低或不可检测的水平，并且最终减少或预防硬化和肝细胞癌的发展。
本领域需要治疗、缓解或预防HBV感染的治疗剂。以单一疗法或与其它HBV治疗或辅助治疗组合施用这些治疗剂至HBV感染患者将导致显著改善的预后、减退的疾病进展及增强的血清转换率。
发明概述
本文提供了用于治疗有需要的受试者中的HBV感染的化合物。在一方面，本文提供了具有式I的化合物：
或其药学上可接受的盐。
在一个实施方案中，式I化合物具有式II
或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，式I化合物具有式III，
或其药学上可接受的盐。
在另一方面，本文提供了具有式IV的化合物：
或其药学上可接受的盐。
在另一方面，本文提供了具有式V的化合物：
或其药学上可接受的盐。
在另一方面，本文提供了包含与药学上可接受的载体一起的式I、Ia、Ib、II、III、IV、V、Vx或Va化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物。
在一方面，本文提供了在有需要的个体中治疗HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的式I、Ia、Ib、II、III、IV、V、Vx或Va化合物。
在另一方面，本文提供了在有需要的个体中根除HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的式I、Ia、Ib、II、III、IV、V、Vx或Va化合物。
在另一方面，本文提供了在有需要的个体中减少与HBV感染相关的病毒载量的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的式I、Ia、Ib、II、III、IV、V、Vx或Va化合物。
在另一方面，本文提供了一种在有需要的个体中减少HBV感染复发的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的式I、Ia、Ib、II、III、IV、V、Vx或Va化合物。
在又一方面，本文提供了在有需要的个体中减少HBV感染的不利生理影响的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的式I、Ia、Ib、II、III、IV、V、Vx或Va化合物。
本文还提供了在有需要的个体中诱导缓解由HBV感染引起的肝损伤的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的式I、Ia、Ib、II、III、IV、V、Vx或Va化合物。
在另一方面，本文提供了在有需要的个体中减少针对HBV感染的长期抗病毒疗法的生理影响的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的式I、Ia、Ib、II、III、IV、V、Vx或Va化合物。
在另一方面，本文提供了在有需要的个体中预防性治疗HBV感染的方法，其中所述个体罹患潜伏的HBV感染，其包括向所述个体施用治疗有效量的式I、Ia、Ib、II、III、IV、V、Vx或Va化合物。
以上方法的任一种还可包括向个体施用至少一种另外的治疗剂。在一个实施方案中，所述另外的治疗剂可选自但不限于由以下组成的组：HBV聚合酶抑制剂、免疫调节剂、聚乙二醇化干扰素、病毒进入抑制剂、病毒成熟抑制剂、衣壳组装调节剂、逆转录酶抑制剂、亲环素/TNF抑制剂、TLR-激动剂、HBV疫苗及独特或未知机制的试剂及其组合。
在另一个实施方案中，所述另外的治疗剂选自由以下组成的组：HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒进入抑制剂、病毒成熟抑制剂、衣壳组装调节剂、逆转录酶抑制剂、TLR-激动剂、和独特或未知机制的试剂及其组合。
在另一个实施方案中，所述另外的治疗剂是逆转录酶抑制剂并且是以下的至少一种：齐多夫定、去羟肌苷、扎西他滨、ddA、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韦、恩曲他滨、恩替卡韦、阿立他滨、阿替韦拉平、利巴韦林、阿昔洛韦、泛昔洛韦、伐昔洛韦、更昔洛韦、缬更昔洛韦、替诺福韦、阿德福韦、西多福韦、依非韦仑、奈韦拉平、地拉韦啶或依曲韦林。
在组合疗法的另一个实施方案中，所述另外的治疗剂是TLR激动剂。在一个优选的实施方案中，所述TLR激动剂是选自由以下组成的组的TLR-7激动剂：SM360320(9-苄基-8-羟基-2-(2-甲氧基-乙氧基)腺嘌呤)和AZD 8848([3-({[3-(6-氨基-2-丁氧基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)丙基][3-(4-吗啉基)丙基]氨基}甲基)苯基]乙酸甲酯)。
在组合疗法的另一个实施方案中，所述另外的治疗剂是干扰素，其中所述干扰素是可任选聚乙二醇化的任何干扰素。在又一个实施方案中，所述干扰素是干扰素α(IFN-α)、干扰素β(IFN-β)、干扰素λ(IFN-λ)或干扰素γ(IFN-γ)。在一个优选的实施方案中，所述干扰素是干扰素-α-2a、干扰素-α-2b、干扰素-α-n1、聚乙二醇化干扰素-α-2a或聚乙二醇化干扰素-α-2b。
在本文提供的任何方法中，所述方法可另外包括向个体施用至少一种HBV疫苗、核苷HBV抑制剂或其任何组合。在一个实施方案中，所述HBV疫苗是以下的至少一种：RECOMBIVAX HB、ENGERIX-B、ELOVAC B、GENEVAC-B或SHANVAC B。
在本文提供的方法的另一个实施方案中，与单独施用在有需要的个体中获得类似的预防性治疗HBV感染结果所需的至少一种另外的治疗剂相比，施用式I、Ia、Ib、II、III、IV、V、Vx或Va化合物允许以较低的剂量或频率施用至少一种另外的治疗剂。
在本文提供的方法的另一个实施方案中，与施用选自由HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒进入抑制剂、病毒成熟抑制剂、独特衣壳组装调节剂、独特或未知机制的抗病毒化合物及其任何组合组成的组的化合物相比，施用式I、Ia、Ib、II、III、IV、V、Vx或Va化合物以更大的程度或更快的速率减少个体中的病毒载量。
在本文提供的方法的另一个实施方案中，与施用选自由HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒进入抑制剂、病毒成熟抑制剂、不同衣壳组装调节剂、独特或未知机制的抗病毒化合物及其组合组成的组的化合物相比，施用式I、Ia、Ib、II、III、IV、V、Vx或Va化合物引起更低的病毒突变和/或病毒抗性发生率。
在另一方面，本文提供了在有需要的个体中治疗HBV感染的方法，其包括通过向所述个体单独施用或与逆转录酶抑制剂组合施用治疗有效量的式I、Ia、Ib、II、III、IV、V、Vx或Va化合物；和进一步向所述个体施用治疗有效量的HBV疫苗而减少HBV病毒载量。在一个实施方案中，所述逆转录酶抑制剂是以下的至少一种：齐多夫定、去羟肌苷、扎西他滨、ddA、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韦、恩曲他滨、恩替卡韦、阿立他滨、阿替韦拉平、利巴韦林、阿昔洛韦、泛昔洛韦、伐昔洛韦、更昔洛韦、缬更昔洛韦、替诺福韦、阿德福韦、西多福韦、依非韦仑、奈韦拉平、地拉韦啶或依曲韦林
在本文提供的方法的另一个实施方案中，所述方法还包括监测HBV病毒载量，并且其中所述方法进行一段时间使得HBV病毒不可检测。
发明详述
本文提供了可用于治疗和预防人中的HBV感染的化合物。在非限制性方面，这些化合物可通过与HBV衣壳相互作用调节或破坏产生感染性颗粒所必需的HBV组装和其它HBV核蛋白功能以得到具有极大减少的病毒性的缺陷型病毒颗粒。本发明的化合物具有有效的抗病毒活性，呈现有利的代谢、组织分布、安全性和药学特性，且适用于人。
HBV衣壳蛋白在病毒生命周期期间起到关键作用。HBV衣壳/核蛋白形成在胞间传代期间保护病毒基因组的亚稳态病毒颗粒或蛋白质壳，并且还在病毒复制过程中起到关键作用，该病毒复制过程包括基因组衣壳化、基因组复制及病毒粒子形态形成和排出。衣壳结构还响应于环境信号以使得在病毒进入后脱壳。自始至终，已发现适当的衣壳组装和核蛋白的功能对病毒感染来说是关键的。
HBV衣壳蛋白的至关重要的功能对病毒衣壳蛋白序列施加了严格的进化限制，从而导致观察到的低序列可变性和高保守性。自始至终，HBV衣壳中破坏其组装的突变是致命的，并且干扰衣壳稳定性的突变严重减弱病毒复制。药物靶标越保守，患者所需的复制-感受态抗性突变越少。实际上，慢性感染患者HBV衣壳中的天然突变在全长蛋白质中的183个残基中仅累积四个残基。因此，HBV衣壳组装和功能抑制剂可相对于现存的HBV抗病毒引发了较低的耐药性发生率。此外，当与靶向传统的神经氨酸苷酶酶活性位点的药物相比时，靶向HBV衣壳的药物疗法可能更不倾向于耐药性突变。描述结合病毒衣壳和抑制HIV、鼻病毒和HBV的复制的化合物的报道为病毒衣壳蛋白作为抗病毒药物靶提供了强药理学概念证明。
在一方面，本发明的化合物可通过破坏、加速、减少、延缓和/或抑制不成熟或成熟颗粒的正常病毒衣壳组装和/或拆卸，从而诱导异常衣壳形态并导致抗病毒作用诸如破坏病毒粒子组装和/或拆卸、病毒粒子成熟和/或病毒排出而用于HBV治疗。在一个实施方案中，衣壳组装的干扰剂与成熟或不成熟病毒衣壳相互作用以扰乱衣壳的稳定性，从而影响组装和/或拆卸。在另一个实施方案中，衣壳组装的干扰剂干扰病毒衣壳的稳定性、功能和/或正常形态所需的蛋白质折叠和/或盐桥，从而破坏和/或加速衣壳组装和/或拆卸。在又一个实施方案中，本发明的化合物结合衣壳并改变细胞多蛋白和前体代谢，从而导致蛋白质单体和/或寡聚体和/或异常颗粒的异常累积，这导致细胞毒性和受感染的细胞的死亡。在另一个实施方案中，本发明的化合物导致具有最佳稳定性的衣壳的形成失败，从而影响病毒的有效脱壳/或拆卸(如在感染期间)。
在一个实施方案中，本发明的化合物当衣壳蛋白不成熟时破坏和/或加速衣壳组装和/或拆卸。在另一个实施方案中，本发明的化合物当衣壳蛋白成熟时破坏和/或加速衣壳组装和/或拆卸。在又一个实施方案中，本发明的化合物在病毒感染期间破坏和/或加速衣壳组装和/或拆卸。在又一个实施方案中，破坏和/或加速衣壳组装和/或拆卸减弱了HBV病毒感染和/或减少病毒载量。在又一个实施方案中，破坏、加速、抑制、延缓和/或减少衣壳组装和/或拆卸从宿主生物体根除了病毒。在又一个实施方案中，从宿主根除HBV有利地消除了对慢性长期疗法的需求和/或缩短了长期疗法的持续时间。
在一个实施方案中，本文所述的化合物适用于单一疗法并且有效抵抗天然或自然HBV菌株且抵抗对当前已知药物耐受的HBV菌株。在另一个实施方案中，本文所述的化合物适用于组合疗法中。
在另一个实施方案中，本发明的化合物可用于调节(如抑制或破坏)HBV cccDNA的活性、稳定性、功能和病毒复制性质的方法中。在又一个实施方案中，本发明的化合物可用于减弱或预防HBV cccDNA形成的方法中。
在另一个实施方案中，本发明的化合物可用于调节(如抑制或破坏)HBV cccDNA活性的方法中。在又一个实施方案中，本发明的化合物可用于减弱或预防HBV cccDNA形成的方法中。
定义
以下列出了用于描述本发明的各种术语的定义。这些定义当在本说明书和权利要求书全文中单独或作为较大组的一部分使用时，除非在特定情况下另外限制否则适用于术语。
除非另外定义否则本文使用的所有技术和科学术语通常具有与本发明所属领域普通技术人员通常理解相同的含义。一般来讲，本文所用的命名和细胞培养、分子遗传学、有机化学和肽化学中的实验室程序是本领域熟知和普遍采用的那些。
如本文所用，冠词“一个”和“一种”是指一个或一个以上(即至少一个)的物品语法主题。举例来说，“一种要素”意指一个要素或一个以上的要素。此外，使用术语“包括(including)”以及其它形式诸如“包括(include)”、“包括(includes)”和“包括(included)”不是限制性的。
如本文所用，术语“约”将由本领域的普通技术人员理解并且将在使用其的前后文下作出一定程度的变化。如本文所用，当指代可测量的值诸如量、时持续时间等时，术语“约”意在涵盖从指定值变化±20％或±10％，更优选±5％，甚至更优选±1％，且仍更优选±0.1％，使得变化适当进行公开的方法。
如本文所用，术语“衣壳组装调节剂”是指破坏或加速或抑制或阻碍或延缓或减少或修饰正常衣壳组装(如在成熟期间)或正常衣壳拆卸(如在感染期间)或干扰衣壳稳定性、从而诱导异常衣壳形态和功能的化合物。在一个实施方案中，衣壳组装调节剂加速衣壳组装或拆卸，从而诱导异常衣壳形态。在另一个实施方案中，衣壳组装调节剂与主要衣壳组装蛋白质(CA)相互作用(如在活性位点结合、在变构位点结合、修饰和/或阻碍折叠等)，从而破坏衣壳组装或拆卸。在又一个实施方案中，衣壳组装调节剂导致CA的结构或功能(如CA组装、拆卸、结合至底物、折叠成适合的构象等的能力)扰动，这减弱了病毒感染和/或对病毒致死。
如本文所用，术语“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”被定义为出于治愈、愈合、减轻、缓解、改变、补救、改善、改良或影响HBV感染、HBV感染症状或出现HBV感染的潜能的目的，向患者施加或施用治疗剂即本发明的化合物(单独或与另一种药剂组合)或者向患者经分离的组织或细胞系施加或施用治疗剂(如用于诊断或离体应用)，该患者具有HBV感染、HBV感染症状或发展HBV感染的潜能。此类治疗可基于从药物基因组学领域获得的知识被特别调整或修改。
如本文所用，术语“预防(prevent)”或“预防(prevention)”意指如果没有病症或疾病发生，则没有病症或疾病发展，或如果病症或疾病已经发展，则没有进一步病症或疾病发展。还考虑了预防一些或所有与病症或疾病相关的症状的能力。
如本文所用，术语“患者”、“个体”或“受试者”是指人或非人哺乳动物。非人哺乳动物包括例如家畜和宠物，诸如绵羊、牛科动物、猪科动物、犬科动物、猫科动物和鼠科动物哺乳动物。优选地，患者、受试者或个体是人。
如本文所用，术语“有效量”、“药学上有效量”和“治疗有效量”是指无毒但足以得到期望生物结果的试剂量。此结果可为疾病的体征、症状或病因减少和/或减轻，或生物系统的任何其它期望改变。任一个体病例中的适当的治疗量可由本领域的普通技术人员使用常规实验确定。
如本文所用，术语“药学上可接受的”是指不消除化合物的生物活性或性质并且是相对无毒的材料，诸如载体或稀释剂，即所述材料可施用给个体而不引起不利的生物作用或以不利方式与含有所述材料的组合物的任何组分相互作用。
如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指经公开的化合物的衍生物，其中母体化合物通过转化现存的酸或碱部分为其盐形式。药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性残基诸如胺的矿物或有机酸盐；酸性残基诸如羧酸的碱或有机盐；等。本发明的药学上可接受的盐包括例如从无毒无机酸或有机酸形成的母体化合物的常见无毒性盐。本发明的药学上可接受的盐可通过常规化学方法从含有碱性或酸性部分的母体化合物合成。通常，此类盐可通过使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量量的适当的碱或酸在水或有机溶剂或这两者的混合物中反应制备；通常，非水性媒介如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈是优选的。适合的盐的列表见于Remington's Pharmaceutical Sciences,第17版,Mack Publishing Company,Easton,Pa.,1985,第1418页以及Journal of Pharmaceutical Science,66,2(1977)，其各自通过引用以其整体并入本文。
如本文所用，术语“组合物”或“药物组合物”是指至少一种本发明内可使用的化合物与药学上可接受的载体的混合物。所述药物组合物促进施用化合物给患者或受试者。多种施用化合物的技术存在于本领域中，包括但不限于静脉内、经口、气雾剂、胃肠外、眼用、经肺和局部施用。
如本文所用，术语“药学上可接受的载体”意指药学上可接受的材料、组合物或载体，诸如液体或固体填充剂、稳定剂、分散剂、助悬剂、稀释剂、赋形剂、增稠剂、溶剂或包封材料，其参与运载或运输本发明内可使用的化合物到患者体内或患者使得其可执行其预期功能。通常，此类构建体从身体的一个器官或一部分运载或运输到身体的另一个器官或部分。每种载体在与制剂的其它成分(包括本发明内可使用的化合物)相容方面必需是“可接受的”，并且不损害患者。可用作药学上可接受的载体的材料的一些实例包括：糖，诸如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，诸如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，诸如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素；粉末化黄芪胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，诸如可可脂和栓剂蜡；油，诸如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇，诸如丙二醇；多元醇，诸如甘油、山梨糖醇、甘露醇和聚乙二醇；酯，诸如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，诸如氢氧化镁和氢氧化铝；表面活性剂；藻酸；无热原水；等离子盐水；林格氏溶液(Ringer’s solution)；乙醇；磷酸盐缓存溶液；和药物制剂中采用的其它非毒性可相容物质。如本文所用，“药学上可接受的载体”还包括可与本发明内可使用的化合物的活性相容且对患者是生理上可接受的任何和所有包衣、抗细菌剂和抗真菌剂和吸收延缓剂等。补充性活性化合物还可掺入组合物中。“药学上可接受的载体”还可包括本发明内可使用的化合物的药学上可接受的盐。可包含在本发明实践中使用的药物组合物中的其它另外的成分是本领域已知的，并且描述于例如Remington's Pharmaceutical Sciences(Genaro,Ed.,Mack Publishing Co.,1985,Easton,PA)中，该文献通过引用并入本文。
如本文所用，术语“烷基”自身或作为另一取代基的一部分除非另有说明否则意指具有指定数目的碳原子的直链或支链烃(即C1-6意指一至六个碳原子)，并且包括直链、支链或环状取代基基团。实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、新戊基、己基和环丙基甲基。最优选的是(C1-6)烷基，特别是乙基、甲基、异丙基、异丁基、正戊基、正己基和环丙基甲基。
如本文所用，术语“卤代”或“卤素”单独或作为另一取代基的一部分除非另有说明，否则意指氟、氯、溴或碘原子，优选氟、氯或溴，更优选氟或氯。
如本文所用，术语“环烷基”是指单环或多环非芳族基，其中形成环的每个原子(即骨架原子)是碳原子。在一个实施方案中，环烷基基团是饱和或部分饱和的。在另一个实施方案中，环烷基基团与芳族环稠合。环烷基基团包括具有3至10个环原子的基团(C3-10环烷基)，或具有3至7个环原子的基团(C3-7环烷基)。环烷基基团的说明性实例包括但不限于以下部分：
单环环烷基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。二环环烷基包括但不限于四氢萘基、二氢茚基和四氢戊搭烯。多环环烷基包括金刚硼和降冰片烷。术语环烷基包括“不饱和的非芳族碳环基”或“非芳族不饱和碳环基”基团，这两者是指如本文所定义的非芳族碳环，其含有至少一个碳碳双键或一个碳碳三键。
如本文所用，术语“杂环烷基”或“杂环基”是指含有一至四个各自选自O、S和N的环杂原子的杂脂环族基团。在一个实施方案中，每个杂环烷基基团在其环系统中具有4至10个原子，前提是所述基团的环不含有两个相邻的O或S原子。在另一个实施方案中，杂环烷基基团与芳族环稠合。在一个实施方案中，氮和硫杂原子可任选地被氧化，并且氮原子可任选地被季铵化。除非另有说明，否则所述杂环系统可连接在任何杂原子或碳原子处，这得到了稳定的结构。杂环在性质上可为芳族或非芳族。在一个实施方案中，所述杂环是杂芳基。
3-元杂环烷基基团的实例包括且不限于氮丙啶。4-元杂环烷基基团的实例包括且不限于氮杂环丁烷和β内酰胺。5-元杂环烷基基团的实例包括且不限于吡咯烷、噁唑烷和噻唑烷二酮。6-元杂环烷基基团的实例包括且不限于哌啶、吗啉和哌嗪。杂环烷基基团的其它非限制性实例是：
非芳族杂环的实例包括单环基团诸如氮丙啶、环氧乙烷、环硫乙烷、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、硫杂环丁烷、吡咯烷、吡咯啉、吡唑烷、咪唑啉、二氧戊环、环丁砜、2,3-二氢呋喃、2,5-二氢呋喃、四氢呋喃、噻吩烷、哌啶、1,2,3,6-四氢吡啶、1,4-二氢吡啶、哌嗪、吗啉、硫代吗啉、吡喃、2,3-二氢吡喃、四氢吡喃、1,4-二噁烷、1,3-二噁烷、高哌嗪、高哌啶、1,3-二氧庚环、4,7-二氢-1,3-二氧杂环庚烷和环氧己烷。
如本文所用，术语“芳族”是指具有一个或多个多不饱和环且具有芳族特性的碳环或杂环，即具有(4n+2)个离域π(pi)电子，其中n是整数。
如本文所用，单独或与其它术语组合使用的术语“芳基”除非另有说明否则意指含有一个或多个环(通常是一个、两个或三个环)的碳环芳族系统，其中此类环可以悬垂方式连接在一起诸如联苯基或可稠合诸如萘。芳基基团的实例包括苯基、蒽基和萘基。优选的实例是苯基和萘基，最优选的是苯基。在一些实施方案中，芳基基团具有六个碳原子。在一些实施方案中，芳基基团具有六至十个碳原子。在一些实施方案中，芳基基团具有六至十六个碳原子。
如本文所用，术语“杂芳基”或“杂芳族”是指具有芳族特征的杂环。在一些实施方案中，杂芳基或杂芳族基团具有两至五个碳原子。在一些实施方案中，杂芳基或杂芳族基团具有两至十个碳原子。在一些实施方案中，杂芳基或杂芳族基团具有两至十六个碳原子。多环杂芳基可包括一个或多个部分饱和的环。在一些实施方案中，多环杂芳基基团具有两至五个碳原子。在一些实施方案中，多环杂芳基基团具有两至十个碳原子。在一些实施方案中，多环杂芳基基团具有两至十六个碳原子。实例包括以下部分：
杂芳基基团的实例还包括吡啶基、吡嗪基、嘧啶基(特别是2-和4-嘧啶基)、哒嗪基、噻吩基、呋喃基、吡咯基(特别是2-吡咯基)、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡唑基(特别是3-和5-吡唑基)、异噻唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,3,4-三唑基、四唑基、1,2,3-噻二唑基、1,2,3-噁二唑基、1,3,4-噻二唑基和1,3,4-噁二唑基。
多环杂环和杂芳基的实例包括吲哚基(特别是3-、4-、5-、6-和7-吲哚基)、吲哚啉基、喹啉基、四氢喹啉基、异喹啉基(特别是1-和5-异喹啉基)、1,2,3,4-四氢异喹啉基、噌啉基、喹喔啉基(特别是2-和5-喹喔啉基)、喹唑啉基、酞嗪基、1,8-萘啶基、1,4-苯丙二噁烷基、香豆素、二氢香豆素、1,5-萘啶基、苯并呋喃基(特别是3-、4-、5-、6-和7-苯并呋喃基)、2,3-二氢苯并呋喃基、1,2-苯并异噁唑基、苯丙噻吩基(特别是3-、4-、5-、6-和7-苯丙噻吩基)、苯丙噁唑基、苯丙噻唑基(特别是2-苯丙噻唑基和5-苯丙噻唑基)、嘌呤基、苯丙咪唑基(特别是2-苯丙咪唑基)、苯丙三唑基、硫代黄嘌呤基、咔唑基、咔啉基、吖啶基、吡咯嗪烷基和喹唑啉基。
如本文所用，术语“经取代的”意指原子或原子基团将氢替代为连接至另一基团的取代基。术语“经取代的”还指任何的取代水平，即单-、二-、三-、四-或五-取代，其中允许此类取代。所述取代基经独立地选择，并且取代可在任何化学可接近的位置处。在一个实施方案中，所述取代基的数目在一至四个之间变化。在另一个实施方案中，所述取代基的数目在一至三个之间变化。在又一个实施方案中，数目在一至两个之间变化。
如本文所用，术语“ddA”是指2’,3’-双脱氧腺甘。
本发明的化合物
本发明涉及发现可用于治疗和预防人中的HBV感染的化合物。在一方面，本发明的化合物可通过以下用于HBV治疗中：破坏、加速、减少延缓或抑制不成熟或成熟颗粒的正常病毒衣壳组装或拆卸，从而诱导异常衣壳形态学并导致抗病毒作用诸如破坏病毒粒子组装或拆卸或者病毒粒子成熟或病毒排出。
在另一方面，本发明的化合物结合至核蛋白，从而诱导异常病毒粒子并导致抗病毒作用诸如破坏病毒粒子组装、拆卸、成熟或病毒排出。
本文公开的衣壳组装干扰剂可用作单一疗法或用于跨类组合方案中，以用于治疗人中的HBV感染。与展现不同作用机制(MOA)在病毒生命周期的不同步骤起作用的药物一起的组合疗法可由于累加或协同抗病毒作用而给予更佳的功效。临床评估的HIV治疗方案显示了组合疗法改善了病毒载量减少的功效并且显著减少了抗病毒抗性的出现。用于治疗丙型肝炎(HCV)病毒感染的组合疗法还导致持续抗病毒响应和根除率显著改善。因此，与例如神经氨酸苷酶药物组合的本发明的HBV衣壳组装抑制剂的用途可能比当前标准护理给予更深刻的抗病毒作用和更高的疾病根除率。
衣壳组装在HBV基因组复制中起关键作用。HBV聚合酶结合前基因组HBV RNA(pgRNA)，并且pgRNA衣壳化必须在HBV DNA合成之前发生。此外，众所周知在核苷遏制疗法的存在下负责维持慢性HBV复制的cccDNA复制中间体的核累积需要衣壳梭动HBV DNA至核。因此，当单独使用或与现存核苷药物组合使用时，本发明的HBV衣壳组装干扰剂具有通过病毒基因组复制的协同或累加遏制提高HBV根除率并进一步减少cccDNA累积的的潜力。本发明的衣壳组装干扰剂还可改变正常核蛋白功能或降解，从而潜在导致改变MHC-1抗原呈递，这继而可通过免疫刺激活性提高血清转化率/根除率，从而更有效清除感染的细胞。
在一方面，耐药性对针对慢性HBV感染的当前疗法产生了主要威胁，并且跨类组合疗法是一种证明可用于延缓耐药性菌株出现的策略。本发明的衣壳组装干扰剂当单独施用或与其它HBV疗法组合施用时可提供增强的耐药性特性和改善的慢性HBV治疗。
本发明内使用的化合物可使用有机合成领域熟知的技术合成。合成所需的原料和中间体可从商业来源获得或根据本领域技术人员已知的方法合成。
在一方面，本发明的化合物是式I化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中
R4是H或C1-C3烷基；
每个R1在每次出现时独立地为OH、卤代、-CN、-NO2、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-O-C1-C6杂烷基、-C3-C10环烷基、-C3-C10杂环烷基、芳基、杂芳基、-C1-C4烷基-(C3-C10环烷基)、-C1-C4烷基-(C3-C10杂环烷基)、-C1-C4烷基-(芳基)或-C1-C4烷基-(杂芳基)，其中所述烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基基团任选地被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-5次；
每个R2在每次出现时独立地为OH、卤代、-CN、-NO2、R6或OR6，其中R6在每次出现时独立地为-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C3-C10环烷基、-C3-C10杂环烷基、芳基、杂芳基、-C1-C4烷基-(C3-C10环烷基)、-C1-C4烷基-(C3-C10杂环烷基)、-C1-C4烷基-(芳基)或-C1-C4烷基-(杂芳基)，其中所述烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基基团任选地被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-5次；
Cy是
R7和R8在每次出现时独立地为-C1-C6烷基、芳基、杂芳基、-C1-C4烷基-(芳基)或-C1-C4烷基-(杂芳基)，其中所述芳基或杂芳基基团任选地被C1-C3烷基取代；
或者R7和R8连结形成3-至10-元环；
R11在每次出现时独立地为OH、卤代、-CN、-NO2、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-O-C1-C6杂烷基、-C3-C10环烷基、-C3-C10杂环烷基、芳基、杂芳基、-C1-C4烷基-(C3-C10环烷基)、-C1-C4烷基-(C3-C10杂环烷基)、-C1-C4烷基-(芳基)或-C1-C4烷基-(杂芳基)，其中所述烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基基团任选地被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-5次；
R12在每次出现时独立地为H或-C1-C6烷基；
R13和R14连结形成CH2桥；
m是0、1、2、3或4；
n是1、2、3或4；
x是0、1、2、3、4或5；且
y是0、1、2、3或4。
在另一方面，本发明的化合物是式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中
R4是H或C1-C3烷基；
每个R1在每次出现时独立地为OH、卤代、-CN、-NO2、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-O-C1-C6杂烷基、-C3-C10环烷基、-C3-C10杂环烷基、芳基、杂芳基、-C1-C4烷基-(C3-C10环烷基)、-C1-C4烷基-(C3-C10杂环烷基)、-C1-C4烷基-(芳基)或-C1-C4烷基-(杂芳基)，其中所述烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基基团任选地被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-5次；
每个R2在每次出现时独立地为OH、卤代、-CN、-NO2、R6或OR6，其中R6在每次出现时独立地为-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C3-C10环烷基、-C3-C10杂环烷基、芳基、杂芳基、-C1-C4烷基-(C3-C10环烷基)、-C1-C4烷基-(C3-C10杂环烷基)、-C1-C4烷基-(芳基)或-C1-C4烷基-(杂芳基)，其中所述烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基基团任选地被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-5次；
或者两个R2基团与它们连接的苯基环连结形成苯并咪唑；
Cy是
R7和R8在每次出现时独立地为-C1-C6烷基、芳基、杂芳基、-C1-C4烷基-(芳基)或-C1-C4烷基-(杂芳基)，其中所述芳基或杂芳基基团任选地被C1-C3烷基取代；
或者R7和R8连结形成3-至10-元环；
R11在每次出现时独立地为OH、卤代、-CN、-NO2、＝O、-OC(O)CH3、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-O-C1-C6杂烷基、-C3-C10环烷基、-O-C3-C10环烷基、-C3-C10杂环烷基、芳基、杂芳基、-C1-C4烷基-(C3-C10环烷基)、-C1-C4烷基-(C3-C10杂环烷基)、-C1-C4烷基-(芳基)或-C1-C4烷基-(杂芳基)，其中所述烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基基团任选地被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-5次；
R12在每次出现时独立地为H或-C1-C6烷基；
R13和R14连同它们所连接的碳原子一起连结形成环丙基环；
m是0、1、2、3或4；
n是1、2、3或4；
x是0、1、2、3、4或5；且
y是0、1、2、3或4。
在另一方面，本发明的化合物是式Ib化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中
R4是H或C1-C3烷基；
每个R1在每次出现时独立地为OH、卤代、-CN、-NO2、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-O-C1-C6杂烷基、-C3-C10环烷基、-C3-C10杂环烷基、芳基、杂芳基、-C1-C4烷基-(C3-C10环烷基)、-C1-C4烷基-(C3-C10杂环烷基)、-C1-C4烷基-(芳基)或-C1-C4烷基-(杂芳基)，其中所述烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基基团任选地被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-5次；
每个R2在每次出现时独立地为OH、卤代、-CN、-NO2、R6或OR6，其中R6在每次出现时独立地为-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C3-C10环烷基、-C3-C10杂环烷基、芳基、杂芳基、-C1-C4烷基-(C3-C10环烷基)、-C1-C4烷基-(C3-C10杂环烷基)、-C1-C4烷基-(芳基)或-C1-C4烷基-(杂芳基)，其中所述烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基基团任选地被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-5次；
或者两个R2基团和它们所连接的苯基环连结形成苯并咪唑；
Cy是
R7和R8在每次出现时独立地为-C1-C6烷基、芳基、杂芳基、-C1-C4烷基-(芳基)或-C1-C4烷基-(杂芳基)，其中所述芳基或杂芳基基团任选地被C1-C3烷基取代；
或者R7和R8连结形成3-至10-元环；
R11在每次出现时独立地为OH、卤代、-CN、-NO2、＝O、-OC(O)CH3、-H2PO4、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-O-C1-C6杂烷基、-C3-C10环烷基、-O-C3-C10环烷基、-C3-C10杂环烷基、芳基、杂芳基、-C1-C4烷基-(C3-C10环烷基)、-C1-C4烷基-(C3-C10杂环烷基)、-C1-C4烷基-(芳基)或-C1-C4烷基-(杂芳基)，其中所述烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基基团任选地被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-5次；
R12在每次出现时独立地为H或-C1-C6烷基；
R13和R14连同它们所连接的碳原子一起连结形成环丙基环；
m是0、1、2、3或4；
n是1、2、3或4；
x是0、1、2、3、4或5；且
y是0、1、2、3或4。
在本文提供的式Ib的一个实施方案中，x是0、1、2或3。
在本文提供的式Ib的另一个实施方案中，x是1、2或3。
在本文提供的式I的一个实施方案中，
R4是H或C1-C3烷基；
每个R1在每次出现时独立地为OH、卤代、-CN、-NO2、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-O-C1-C6杂烷基、-C3-C10环烷基、-C3-C10杂环烷基、-C1-C4烷基-(C3-C10环烷基)或-C1-C4烷基-(C3-C10杂环烷基)，其中所述烷基、杂烷基、环烷基和杂环烷基基团任选地被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-3次；
每个R2在每次出现时独立地为OH、卤代、-CN、-NO2、R6或OR6，其中R6在每次出现时独立地为-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-C3-C10环烷基、-C3-C10杂环烷基、-C1-C4烷基-(C3-C10环烷基)或-C1-C4烷基-(C3-C10杂环烷基)，其中所述烷基、杂烷基、环烷基和杂环烷基基团任选地被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-3次；
Cy是
R7和R8在每次出现时独立地为-C1-C6烷基、芳基、杂芳基、-C1-C4烷基-(芳基)或-C1-C4烷基-(杂芳基)；
或者R7和R8连结形成3-至7-元环；
R11在每次出现时独立地为OH、卤代、-CN、-NO2、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-O-C1-C6杂烷基、-C3-C10环烷基、-C3-C10杂环烷基、-C1-C4烷基-(C3-C10环烷基)或-C1-C4烷基-(C3-C10杂环烷基)，其中所述烷基、杂烷基、环烷基和杂环烷基基团任选地被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-3次；
R12在每次出现时独立地为H或-C1-C6烷基；
m是0、1、2或3；
n是1、2或3；
x是0、1、2或3；且
y是0、1、2或3。
在本文提供的式I的另一个实施方案中，
R4是H或C1-C3烷基；
每个R1在每次出现时独立地为OH、卤代、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基或-O-C1-C6杂烷基，其中烷基基团任选地被卤代或-OH取代1-3次；
每个R2在每次出现时独立地为OH、卤代、R6或OR6，其中R6在每次出现时独立地为-C1-C6烷基、-C3-C10环烷基、-C1-C4烷基-(C3-C10环烷基)，其中所述烷基和环烷基基团任选地被卤代或-OH取代1-3次；
Cy是
R11在每次出现时独立地为OH、卤代、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基或-O-C1-C6杂烷基，其中所述烷基基团任选地被卤代或-OH取代1-3次；
R12在每次出现时独立地为H或-C1-C6烷基；
m是0、1、2或3；
n是1、2或3；
x是0、1、2或3；且
y是0、1、2或3。
在本文提供的式I的一个实施方案中，R4是H。
在本文提供的式I的另一个实施方案中，R7和R8在每次出现时独立地为-C1-C6烷基、苯基、吡啶基、苄基或吡啶基甲基。
在本文提供的式I的另一个实施方案中，R7和R8在每次出现时独立地为-C1-C6烷基，其中所述-C1-C6烷基基团连结形成3-至7-元环。
在本文提供的式I的另一个实施方案中，每个R1在每次出现时独立地为卤代且x是1、2或3。
在本文提供的式I的另一个实施方案中，所述化合物具有式II：
或其药学上可接受的盐，其中X1是卤代。
在本文提供的式I和式II的另一个实施方案中，每个R2在每次出现时独立地为卤代、OH、-C1-C6烷基或-O-C1-C6烷基，其中所述烷基基团任选地被卤代或OH取代1-3次。
在一个特定的实施方案中，每个R2在每次出现时独立地为卤代或-C1-C3烷基-OH且y是1或2。
在本文提供的式I和式II的又一个实施方案中，每个R2在每次出现时独立地为OR6，其中R6在每次出现时独立地为-C1-C6烷基或-C3-C10环烷基，其中所述烷基和环烷基基团任选地被卤代或OH取代1-2次。
在本文提供的式I和式II的另一个实施方案中，所述化合物具有式III：
或其药学上可接受的盐。
在本文提供的式I-III的另一个实施方案中，Cy是
在一个特定的实施方案中，每个R11在每次出现时独立地为卤代、OH、-C1-C6烷基或-O-C1-C6烷基，其中所述烷基基团任选地被卤代或OH取代1-3次。
在本文提供的式I-III的又一个实施方案中，Cy是
且n是0、1或2。在一个特定的实施方案中，R11是-O-C1-C3烷基且n是1。在另一个特定的实施方案中，R11是OH或–C1-C3烷基-OH且n是1。在另一个特定的实施方案中，n是0。在另一个特定的实施方案中，R11是卤代且n是1。在又一个特定的实施方案中，R11是-C1-C3烷基且n是1。
在本文提供的式I-III的另一个实施方案中，Cy是
其中X2是卤代且n是0、1或2。在一个特定的实施方案中，n是0。
在本文提供的式I-III的另一个实施方案中，Cy是
在一个特定的实施方案中，每个R11在每次出现时独立地为OH或–C1-C3烷基，其中所述烷基基团任选地被卤代或OH取代1-3次且m是1或2。在另一个特定的实施方案中，m是0。
在另一方面，本文提供了式IV化合物：
或其药学上可接受的盐；
其中
R4是H或C1-C3烷基；
每个R1在每次出现时独立地为OH、卤代、-CN、-NO2、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-O-C1-C6杂烷基、-C3-C10环烷基、-C3-C10杂环烷基、芳基、杂芳基、-C1-C4烷基-(C3-C10环烷基)、-C1-C4烷基-(C3-C10杂环烷基)、-C1-C4烷基-(芳基)或-C1-C4烷基-(杂芳基)，其中所述烷基、杂烷基、环烷基,杂环烷基、芳基和杂芳基基团任选地被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-5次；
每个R3在每次出现时独立地为OH、-CN、-NO2、-C1-C6烷基、-C1-C6烷氧基、R9或OR9，其中R9在每次出现时独立地为-C1-C6杂烷基、-C3-C10环烷基、-C3-C10杂环烷基、芳基、杂芳基、-(CH2)1-4-(C3-C10环烷基)、-(CH2)1-4-(C3-C10杂环烷基)、-(CH2)1-4-(芳基)或-(CH2)1-4-(杂芳基)，其中所述烷基基团被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-5次；且所述烷氧基、-(CH2)1-4-、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基基团任选地被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-5次；
x是0、1、2、3、4或5；且
z是1、2、3或4。
在本文提供的式IV的一个实施方案中，
R4是H或C1-C3烷基；
每个R1在每次出现时独立地为OH、卤代、-CN、-NO2、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基、-O-C1-C6杂烷基、-C3-C10环烷基、-C3-C10杂环烷基、-C1-C4烷基-(C3-C10环烷基)或-C1-C4烷基-(C3-C10杂环烷基)，其中所述烷基、杂烷基、环烷基和杂环烷基基团任选地被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-3次；
每个R3在每次出现时独立地为OH、-CN、-NO2、-C1-C6烷基、-C1-C6烷氧基、R9或OR9，其中R9在每次出现时独立地为-C1-C6杂烷基、-C3-C10环烷基、-C3-C10杂环烷基、-(CH2)1-4-(C3-C10环烷基)或-(CH2)1-4-(C3-C10杂环烷基)，其中所述烷基基团被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-3次；且所述烷氧基、-(CH2)1-4-、杂烷基、环烷基和杂环烷基基团任选地被卤代、-OH、-CN或–NO2取代1-3次；
x是0、1、2或3；且
z是1、2或3。
在本文提供的式IV的另一个实施方案中，
R4是H或C1-C3烷基；
每个R1在每次出现时独立地为OH、卤代、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-C1-C6杂烷基或-O-C1-C6杂烷基，其中所述烷基基团任选地被卤代或-OH取代1-3次；
每个R3在每次出现时独立地为OH、-C1-C6烷基、-C1-C6烷氧基、R9或OR9，其中R9在每次出现时独立地为-C3-C10环烷基或-(CH2)1-4-(C3-C10环烷基)，其中所述烷基基团被卤代或-OH取代1-3次；且所述烷氧基、-(CH2)1-4-和环烷基基团任选地被卤代或-OH取代1-3次；
x是0、1、2或3；且
z是1、2或3.
在本文提供的式IV的另一个实施方案中，R4是H.
在本文提供的式IV的另一个实施方案中，每个R1在每次出现时独立地为卤代且x是1、2或3。
在本文提供的式IV的又一个实施方案中，每个R3在每次出现时独立地为OH或-C1-C6烷基，其中所述烷基基团被卤代或-OH取代1-3次且z是1、2或3。
在本文提供的式IV的又一个实施方案中，R3是-C1-C3烷基-OH且z是1。
在本文提供的式I的另一个实施方案中，所述化合物具有式V：
或其药学上可接受的盐；
其中
每个R1在每次出现时独立地为卤代、OH、-C1-C6烷基或-O-C1-C6烷基，其中所述烷基基团任选地被卤代或OH取代1-3次；
每个R2在每次出现时独立地为卤代、OH、-C1-C6烷基或-O-C1-C6烷基，其中所述烷基基团任选地被卤代或OH取代1-3次；
Cy是
R11在每次出现时独立地为-OH、卤代、-C1-C6烷基、-OC(O)CH3或-C3-C10环烷基；
R13和R14连同它们所连接的碳原子一起连结形成环丙基环；
m是1、2或3；
n是1、2或3；且
x是2或3。
在本文提供的式I的另一个实施方案中，所述化合物具有式Vx：
或其药学上可接受的盐；
其中
每个R1在每次出现时独立地为卤代、OH、-C1-C6烷基或-O-C1-C6烷基，其中所述烷基基团任选地被卤代或OH取代1-3次；
每个R2在每次出现时独立地为卤代、OH、-C1-C6烷基或-O-C1-C6烷基，其中所述烷基基团任选地被卤代或OH取代1-3次；
Cy是
R11在每次出现时独立地为-OH、卤代、-C1-C6烷基、-OC(O)CH3或-C3-C10环烷基；
R13和R14连同它们所连接的碳原子一起连结形成环丙基环；
m是1、2或3；
n是1、2或3；且
x是1、2或3。
在本文提供的式V的一个特定实施方案中，每个R1在每次出现时独立地为卤代。
在本文提供的式V的另一个特定实施方案中，每个R2在每次出现时独立地为卤代或-C1-C6烷基，其中所述烷基任选地被卤代取代1-3次。
在本文提供的式I的又一个实施方案中，所述化合物具有式Va：
或其药学上可接受的盐；
其中
每个R1在每次出现时独立地为卤代、OH、-C1-C6烷基或-O-C1-C6烷基，其中所述烷基基团任选地被卤代或OH取代1-3次；
每个R2在每次出现时独立地为卤代、OH、-C1-C6烷基或-O-C1-C6烷基，其中所述烷基基团任选地被卤代或OH取代1-3次；
Cy是
R11在每次出现时独立地为-OH、卤代、-C1-C6烷基、-OC(O)CH3、-H2PO4、或-C3-C10环烷基；
R13和R14连同它们所连接的碳原子一起连结形成环丙基环；
m是1、2或3；
n是1、2或3；且
x是1、2或3。
在本文提供的式Va的一个特定的实施方案中，x是2或3。
在本文提供的式Va的另一个特定的实施方案中，每个R1在每次出现时独立地为卤代。
在本文提供的式Va的又一个特定的实施方案中，每个R2在每次出现时独立地为卤代或-C1-C6烷基，其中所述烷基任选地被卤代取代1-3次。
在本文提供的式Va的又一个特定的实施方案中，Cy是
且R11在每次出现时独立地为-OH、卤代、-C1-C6烷基、-OC(O)CH3或-H2PO4，其中n和m是1、2或3且至少一个R11是H2PO4。
式I、Ia、Ib、II、III、IV、V、Vx和Va的某些优选的实施方案(包括其药学上可接受的盐)示于下表表1和表2中。式I、Ia、Ib、II、III、IV、V、Vx和Va的所有化合物以及其药学上可接受的盐，及表1和表2的化合物以及其药学上可接受的盐被认为是“本发明的化合物”。
合成方法编码是指在实验章节提供的合成方法。例如，“A01B01C01D01”是指对于区域A使用中间体A01，对于区域B使用中间体B01，对于区域C使用中间体C01及对于区域D使用中间体D01。
表1.
或其药学上可接受的盐。
在本文提供的式I的又一个实施方案中，式V化合物或其药学上可接受的盐选自：
表2.
或其药学上可接受的盐。
本发明的化合物可具有一个或多个立体中心，并且每个立体中心可以R或S构型独立地存在。在一个实施方案中，本文所述的化合物以光学活性或外消旋形式存在。应理解本文所述的化合物涵盖具有本文所述的治疗有效性质的外消旋、光学活性、区域异构和立体异构形式或其组合。
光学活性形式的制备以任何适当的方式实现，包括通过非限制性实例的方式、通过用再结晶技术拆分外消旋形式、从光学活性原料合成、手性合成或使用手性固定相的色谱分离。在一个实施方案中，一种或多种异构体的混合物用作本文所述的治疗性化合物。在另一个实施方案中，本文所述的化合物含有一个或多个手性中心。这些化合物通过任何方式制备，包括立体选择性合成、对映选择性合成和/或分离对映异构体和/或非对映异构体的混合物。拆分化合物及其异构体通过任何方式实现，借由非限制性实例包括化学工艺、酶促工艺、分步结晶、蒸馏和色谱。
在一个实施方案中，本发明的化合物可作为互变异构体存在。所有互变异构体包含在本文呈现的化合物的范围内。
本文所述的化合物还包括同位素标记的化合物，其中一个或多个原子被具有相同的原子数但具有与通常在自然界发现的原子质量或质量数独特原子质量或质量数的原子替代。适于纳入本文所述的化合物的同位素的实例包括但不限于2H、3H、11C、13C、14C、36Cl、18F、123I、125I、13N、15N、15O、17O、18O、32P和35S。在一个实施方案中，同位素标记的化合物可用于药物和/或底物组织分布研究中。在另一个实施方案中，用更重的同位素诸如氘取代得到更佳的代谢稳定性(例如增加的体内半衰期或降低的剂量需要)。在又一个实施方案中，用正电子发射同位素诸如11C、18F、15O和13N取代可用于正电子发射断层成像(PET)研究中以用于检测底物受体占位。同位素标记的化合物通过任何适合的方法或通过工艺使用同位素标记的试剂替代另外采用的非标记的试剂制备。
在一个实施方案中，本文所述的化合物通过其它方式标记，包括但不限于使用发色团或荧光部分、生物发光标签或化学发光标签。
本文所述的化合物和具有不同取代基的其它相关化合物使用本文所述和如例如Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis,第1-17卷(John Wiley和Sons,1991)；Rodd's Chemistry of Carbon Compounds,第1-5卷和副刊(Elsevier Science Publishers,1989)；Organic Reactions,第1-40卷(John Wiley和Sons,1991),Larock's Comprehensive Organic Transformations(VCH Publishers Inc.,1989),March,Advanced Organic Chemistry第4版,(Wiley 1992)；Carey和Sundberg,Advanced Organic Chemistry第4版,第A和B卷(Plenum 2000,2001)及Green和Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis第3版,(Wiley 1999)(其全部通过引用此类公开内容并入)所述的技术和材料合成。用于制备如本文所述的化合物的一般方法通过使用适当的试剂和条件修改以用于引入如本文提供的各式中存在的各个部分。
本文所述的化合物使用任何适合的程序从可从商业来源获得或使用本文所述的程序制备的化合物开始合成。
在一个实施方案中，反应性官能团，诸如羟基、氨基、亚氨基、硫代或羧基基团，被保护以避免它们不需要参与反应中。保护基团用于阻断一些或所有反应性部分，并且防止此类基团参与化学反应直至去除保护基团。在另一个实施方案中，每个保护基团可通过独特方式去除。在完全独特反应条件下裂解的保护基团满足差异去除的需求。
在一个实施方案中，保护基团通过酸、碱、还原条件(诸如，例如氢解)和/或氧化条件去除。基团诸如三苯甲基、二甲氧基三苯甲基、缩醛和叔丁基二甲基甲硅烷基是酸不稳定的且用于在氨基基团的存在下保护羧基和羟基反应性部分，所述氨基基团用可通过氢解去除的Cbz基团和碱不稳定的Fmoc基团保护。羧酸和羟基反应性部分用碱不稳定基团(诸如但不限于甲基、乙基和乙酰基)在用酸不稳定性基团(诸如氨基甲酸叔丁酯)阻断的胺的存在下，或者用酸和碱稳定但水解可移除的氨基甲酸酯阻断。
本发明的方法
本发明提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的本发明的化合物。
本发明还提供了根除有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的本发明的化合物。
本发明还提供了减少有需要的个体中与HBV感染相关的病毒载量的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的本发明的化合物。
本发明还提供了一种减少有需要的个体中HBV感染复发的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的本发明的化合物。
本发明还提供了减少有需要的个体中的HBV感染的不利生理影响的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的本发明的化合物。
本发明还提供了减少、减缓或抑制有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的本发明的化合物。
本发明还提供了一种在有需要的个体中诱导缓解由HBV感染引起的肝损伤的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的本发明的化合物。
本发明还提供了减少有需要的个体中针对HBV感染的长期抗病毒疗法的生理影响的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的本发明的化合物。
本发明还提供了预防性治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其中所述个体罹患潜伏的HBV感染，其包括向所述个体施用治疗有效量的本发明的化合物。
在一个实施方案中，本文所述的方法还包括施用至少一种选自由以下组成的组的另外的治疗剂：核苷酸/核苷类似物、进入抑制剂、融合抑制剂及这些或其它抗病毒机制的任何组合。在另一个实施方案中，共配制本发明的化合物和至少一种另外的治疗剂。在又一个实施方案中，共施用本发明的化合物和至少一种另外的治疗剂。
在一个实施方案中，所述个体是其它治疗类别的HBV药物(如HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒进入抑制剂、病毒成熟抑制剂、文献描述的衣壳组装调节剂、独特或未知机制的抗病毒化合物等或其组合)难治的。在另一个实施方案中，与其它治疗类别的HBV药物减少个体中的病毒载量程度相比，本发明的方法以更大程度或更快速率减少患有HBV感染的个体中的病毒载量。
在一个实施方案中，与单独施用至少一种另外的治疗剂相比，施用本发明的化合物或其药学上可接受的盐允许以在有需要的个体中获得类似的预防性治疗HBV感染的结果的更低的剂量或频率施用至少一种另外的治疗剂。
在一个实施方案中，与施用选自由HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒进入抑制剂、病毒成熟抑制剂、独特衣壳组装调节剂、独特或未知机制的抗病毒化合物及其任何组合组成的组的化合物，施用本发明的化合物或其药学上可接受的盐以更大的程度或以更快的速率减少了个体中的病毒载量。
在一个实施方案中，本发明的方法减少了患有HBV感染的个体中的病毒载量，因此允许较低的剂量或改变待使用的组合疗法的方案。
在一个实施方案中，与其它类别的HBV药物相比，本发明的方法引起更低的病毒突变和/或病毒抗性发生率，从而允许长期疗法并将对治疗方案中的改变的需求最小化。
在一个实施方案中，施用本发明的化合物或其药学上可接受的盐比施用选自由HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒进入抑制剂、病毒成熟抑制剂、独特衣壳组装调节剂、独特或未知机制的抗病毒化合物及其组合组成的组的化合物引起更低的病毒突变和/或病毒抗性发生率。
在一个实施方案中，本发明的方法提高血清转换率超过当前治疗方案的血清转换率。
在一个实施方案中，本发明的方法有需要的个体中增加和/或正常化和/或恢复正常健康、引发正常健康完全康复、恢复预期寿命和/或消除病毒感染。
在一个实施方案中，本发明的方法从感染了HBV的个体根除HBV，从而消除对长期和/或终生治疗的需求或者缩短治疗持续时间和/或允许其它抗病毒剂的给药减少。
在另一个实施方案中，本发明的方法还包括监测受试者的HBV病毒载量，并且其中所述方法进行一段时间使得HBV病毒不可检测。
因此，在一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的式II化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的式III化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的式IV化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的式V化合物或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1763_E1或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1763_E2或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1765或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1766_E1或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1766_E2或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1768或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1769或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1819或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1820或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1821或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1821_D1,或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1821_D2或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1822_D1或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1822_D2或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1826_D2或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1829_D1或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1829_D2或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1829-2或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1890或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1891或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1892或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1893或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1893_E1或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1893_E2或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1894或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1895或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1909或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1910,或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1914或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1915或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1916或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1917,或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1919或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1938或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1944或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1975或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1977或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1979或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1980或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1981或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1983或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1986或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1987或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物1989或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2002或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2004或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2007或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2024或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2033或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2114_D1或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2114_D2或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2121或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2123或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2199或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2202或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2205或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2206或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2433_D1或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2433_D2或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2492或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2505或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2547或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2548或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2550或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2617_D2或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2618_D1或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2618_D2或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2619_D2或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2625_D2或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2626_D2或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2632或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的化合物2634或其药学上可接受的盐。
组合疗法
本发明的化合物意在与用于治疗HBV感染的一种或多种另外的化合物组合使用。这些另外的化合物可包括本发明的化合物或已知治疗、预防或减少HBV感染的症状或作用的化合物。此类化合物包括但不限于HBV聚合酶抑制剂、干扰素、病毒进入抑制剂、病毒成熟抑制剂、文献描述的衣壳组装调节剂、逆转录酶抑制剂、TLR-激动剂及影响HBV生命周期和/或影响HBV感染结果的独特或未知的机制的其它药剂。
在非限制性实例中，本发明的化合物可与选自由以下组成的组的一种或多种药物(或其盐)组合使用：
HBV逆转录酶抑制剂及DNA和RNA聚合酶抑制剂，包括但不限于：拉米夫定(3TC、Zeffix、贺普丁、益平维和益平维-HBV)、恩替卡韦(贝乐克、Entavir)、阿德福韦二吡呋酯(肝适能、普旺、双-POMPMEA)、富马酸替诺福韦二吡呋酯(韦瑞德、TDF或PMPA)；
干扰素，包括但不限于干扰素α(IFN-α)、干扰素λ(IFN-λ)和干扰素γ(IFN-γ)；
病毒进入抑制剂；
病毒成熟抑制剂；
文献描述的衣壳组装调节剂，诸如但不限于BAY 41-4109；
逆转录酶抑制剂；
TLR-激动剂；和
独特或未知的机制的试剂，诸如但不限于AT-61((E)-N-(1-氯-3-氧代-1-苯基-3-(哌啶-1-基)丙-1-烯-2-基)苯甲酰胺)、AT-130((E)-N-(1-溴-1-(2-甲氧基苯基)-3-氧代-3-(哌啶-1-基)丙-1-烯-2-基)-4-硝基苯甲酰胺)及类似类似物.
在一个实施方案中，另外的治疗剂是干扰素。术语“干扰素”或“IFN”是指抑制病毒复制和细胞增殖并调节免疫响应的高同源性物种特异性蛋白质家族的任何成员。人干扰素分为三类；I型，其包括干扰素-α(IFN-α)、干扰素-β(IFN-β)和干扰素-ω(IFN-ω)，II型，其包括干扰素-γ(IFN-γ)及III型，其包括干扰素-λ(IFN-λ)。已开发且商购获得的干扰素的重组形式由如本文所用的术语“干扰素”涵盖。干扰素的亚型，诸如化学修饰或突变的干扰素也由如本文所用的术语“干扰素”涵盖。化学修饰干扰素包括聚乙二醇化干扰素和糖基化干扰素。干扰素的实例包括但不限于干扰素-α-2a、干扰素-α-2b、干扰素-α-n1、干扰素-β-1a、干扰素-β-1b、干扰素-λ-1、干扰素-λ-2和干扰素-λ-3。聚乙二醇化干扰素的实例包括聚乙二醇化干扰素-α-2a和聚乙二醇化干扰素α-2b。
因此，在一个实施方案中，式I、Ia、Ib、II、III、IV、V、Vx或Va的化合物可与选自由干扰素α(IFN-α)、干扰素β(IFN-β)、干扰素λ(IFN-λ)和干扰素γ(IFN-γ)组成的组的干扰素组合施用。在一个特定的实施方案中，干扰素是干扰素-α-2a、干扰素-α-2b或干扰素-α-n1。在另一个特定的实施方案中，干扰素-α-2a或干扰素-α-2b被聚乙二醇化。在一个优选的实施方案中，干扰素-α-2a是聚乙二醇化干扰素-α-2a(PEGASYS)。
在另一个实施方案中，所述另外的治疗剂选自免疫调节剂或免疫刺激器疗法，其包括属于干扰素类别的生物剂。
此外，所述另外的治疗剂可为独特或未知的机制的试剂，包括干扰HBV复制或持续性所需的其它关键病毒蛋白质或宿主蛋白的功能的试剂。
在另一个实施方案中，所述另外的治疗剂是阻断病毒进入或成熟或靶向HBV聚合酶的抗病毒剂，诸如核苷或核苷酸或非核苷(酸)聚合酶抑制剂。在组合疗法的另一个实施方案中，逆转录酶抑制剂和/或DNA和/或RNA聚合酶抑制剂是齐多夫定、去羟肌苷、扎西他滨、ddA、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韦、恩曲他滨、恩替卡韦、阿立他滨、阿替韦拉平、利巴韦林、阿昔洛韦、泛昔洛韦、伐昔洛韦、更昔洛韦、缬更昔洛韦、替诺福韦、阿德福韦、西多福韦、依非韦仑、奈韦拉平、地拉韦啶或依曲韦林.
在一个实施方案中，所述另外的治疗剂是TLR调节剂或TLR激动剂，诸如TLR-7激动剂或TLR-9激动剂。在组合疗法的另一个实施方案中，TLR-7激动剂选自由SM360320(9-苄基-8-羟基-2-(2-甲氧基-乙氧基)腺嘌呤)和AZD 8848([3-({[3-(6-氨基-2-丁氧基-8-氧代-7,8-二氢-9H-嘌呤-9-基)丙基][3-(4-吗啉基)丙基]氨基}甲基)苯基]乙酸甲酯)组成的组。
在本文提供的任何方法中，所述方法还可包括向所述个体施用至少一种HBV疫苗、核苷HBV抑制剂、干扰素或其任何组合。在一个实施方案中，HBV疫苗是RECOMBIVAX HB、ENGERIX-B、ELOVAC B、GENEVAC-B或SHANVAC B的至少一个。
在另一方面，本文提供了治疗有需要的个体中的HBV感染的方法，其包括通过向所述个体单独施用或与逆转录酶抑制剂组合施用治疗有效量的本发明的化合物减少HBV病毒载量；和向个体另外施用治疗有效量的HBV疫苗。逆转录酶抑制剂可为以下的一者：齐多夫定、去羟肌苷、扎西他滨、ddA、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韦、恩曲他滨、恩替卡韦、阿立他滨、阿替韦拉平、利巴韦林、阿昔洛韦、泛昔洛韦、伐昔洛韦、更昔洛韦、缬更昔洛韦、替诺福韦、阿德福韦、西多福韦、依非韦仑、奈韦拉平、地拉韦啶或依曲韦林。
对于本文所述的任何组合疗法，协同作用可例如使用适合的方法计算，诸如Sigmoid-E最大值公式(Holford&Scheiner,19981,Clin.Pharmacokinet.6:429-453)、Loewe相加性公式(Loewe&Muischnek,1926,Arch.Exp.Pathol Pharmacol.114:313-326)和中效公式(Chou&Talalay,1984,Adv.Enzyme Regul.22:27-55)。以上提及的每个公式可应用于实验数据以产生相应的图表以有助于评估药物组合的作用。以上提及的与公式相关的相应的图表分别为浓度-作用曲线、等效曲线和组合指数曲线。
施用/剂量/制剂
在另一方面，本文提供了药物组合物，其包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐连同药学上可接受的载体。
本发明的药物组合物中活性成分的实际剂量水平可变化以获得有效实现针对特定患者、组合物及施用模式所需的治疗响应而对患者无毒。
具体而言，所选的剂量水平将取决于多种因素，包括采用的特定的化合物的活性、施用时间、化合物排泄速率、治疗持续时间、与所述化合物组合使用的其它药物、化合物或材料、待治疗的患者的年龄、性别、体重、情况、一般健康状况和之前医疗史，及医学领域熟知的类似因素。
具有本领域一般技术的医师，如医生或兽医可容易地确定和开出所需药物组合物的有效量的处方。例如，医生或兽医可从药物组合物中采用的本发明的化合物的剂量低于为了获得所需治疗效果所需的剂量开始，并逐渐增加剂量直至获得所需的效果。
在特定的实施方案中，特别有利的是以剂量单位形式配制化合物以便于施用和剂量均一性。如本文所用的剂量单位形式是指适用作待治疗的患者的整体剂量的物理离散单位；每个单位含有经计算与所需药物媒介物结合产生所需疗效的预定量的治疗化合物。本发明的剂量单位形式由以下表示并且直接依赖于以下：(a)治疗化合物的独特特征和待实现的特定治疗效果，和(b)本领域固有的配混/配制此类治疗化合物用于治疗患者中的HBV感染的限制。
在一个实施方案中，本发明的组合物使用一种或多种药学上可接受的赋形剂或载体配制。在一个实施方案中，本发明的药物组合物包含治疗有效量的本发明的化合物和药学上可接受的载体。
用于施用的本发明的化合物可在以下的范围内：约1μg至约10,000mg、约20μg至约9,500mg、约40μg至约9,000mg、约75μg至约8,500mg、约150μg至约7,500mg、约200μg至约7,000mg、约3050μg至约6,000mg、约500μg至约5,000mg、约750μg至约4,000mg、约1mg至约3,000mg、约10mg至约2,500mg、约20mg至约2,000mg、约25mg至约1,500mg、约30mg至约1,000mg、约40mg至约900mg、约50mg至约800mg、约60mg至约750mg、约70mg至约600mg、约80mg至约500mg及任何和所有介于其间的全部或部分增量。
在一些实施方案中，本发明的化合物的剂量为约1mg至约2,500mg。在一些实施方案中，用于本文所述的组合物中的本发明的化合物的剂量是小于约10,000mg、或小于约8,000mg、或小于约6,000mg、或小于约5,000mg、或小于约3,000mg、或小于约2,000mg、或小于约1,000mg、或小于约500mg、或小于约200mg或小于约50mg。类似地，在一些实施方案中，如本文所述的第二化合物(即用于HBV治疗的另一种药物)的剂量是小于约1,000mg、或小于约800mg、或小于约600mg、或小于约500mg、或小于约400mg、或小于约300mg、或小于约200mg、或小于约100mg、或小于约50mg、或小于约40mg、或小于约30mg、或小于约25mg、或小于约20mg、或小于约15mg、或小于约10mg、或小于约5mg、或小于约2mg、或小于约1mg、或小于约0.5mg及其任何和所有全部或部分增量。
在一个实施方案中，本发明涉及经包装的药物组合物，其包含保持单独或与第二药剂组合的治疗有效量的本发明的化合物的容器；和用于使用所述化合物治疗、预防或减少患者中的一种或多种HBV感症状的说明书。
本发明的任何组合物的施用途径包括经口、经鼻、经直肠、阴道内、胃肠外、经颊、舌下或局部。用于本发明中的化合物可经配制以用于通过任何适当的途径施用，诸如用于经口或胃肠外，例如经皮、经粘膜(如舌下、经舌、(经)颊、(经)尿道、经阴道(如经-和阴道周)、鼻(内)和(经)直肠)、膀胱内、肺内、十二指肠内、胃内、硬膜内、皮下、肌肉内、皮肤内、气管内、静脉内、支气管内、吸入和局部施用。
适合的组合物和剂量形式包括例如片剂、胶囊、囊片、丸剂、凝胶盖、含片、分散液、混悬液、溶液、糖浆剂、颗粒剂、珠粒、经皮贴剂、凝胶剂、粉剂、小丸剂、乳浆剂、锭剂、乳膏剂、糊剂、硬膏剂、洗剂、圆盘、栓剂、用于经鼻或经口施用的液体喷雾、用于吸入的干粉或雾化制剂、用于膀胱施用的组合物和制剂等。应理解将用于本发明中的制剂和组合物不限于本文所述的特定制剂和组合物。
对于经口施加，特别适合的是片剂、糖衣丸、液体、滴剂、栓剂或胶囊、囊片和囊形片。意在用于经口使用的组合物可根据本领域已知的任何方法制备，并且此类组合物可含有一种或多种选自由适用于制备片剂的惰性无毒药学赋形剂组成的组的试剂。此类赋形剂包括例如惰性稀释剂，诸如乳糖；制粒剂和崩解剂诸如玉米淀粉；结合剂诸如淀粉；和润滑剂诸如硬脂酸镁。所述片剂可未包衣或它们可由已知技术包衣以为了精确或或延缓活性成分释放。用于经口使用的制剂还可呈现为硬明胶胶囊，其中活性成分与惰性稀释剂混合。
对于胃肠外施用，本发明的化合物可配制用于注射或输注，例如静脉内、肌肉内或皮下注射或输注或以用于以推注剂量施用和/或连续输注。可使用任选含有其它配制剂诸如助悬剂、稳定剂和/或分散剂的于油性或水性媒介物中的混悬液、溶液或乳液。
本领域的技术人员将认识到或能够仅使用本文所述的常规实验、特定程序的多种等效物、实施方案、权利要求和实施例确定。此类等效物被认为在本发明的范围内并且由其随附的权利要求覆盖。例如，应理解用领域内公认的替代物和仅使用常规实验对包括但不限于反应时间、反应尺寸/体积及实验溶剂诸如溶剂、催化剂、压力、大气条件如氮气氛及还原/氧化剂的反应条件的修改在本申请的范围内。
应理解，无论本文提供了什么值和范围，这些值和范围所涵盖的所有值和范围意在涵盖在本发明的范围内。此外，本申请也考虑了落入这些范围内的所有值以及值范围的上限或下限。
以下实施例进一步说明了本发明的各方面。然而，它们不以任何方式限制如本文所阐述的本发明的教导内容或公开内容。
实施例
本发明现在参考以下实施例描述。提供这些实施例仅用于说明目的，并且本发明不限于这些实施例，而是涵盖由于本文提供的教导内容而显著的所有变化。
材料：
除非另外说明，否则所有原料和树脂从商业来源获得并且不经纯化使用。
文库一般设计
区域A：
区域B：
区域C：
部分I中间体合成(区域A、B&C)
1区域A中间体的制备
1.1 A01/02的制备
1.1.1化合物2和3的制备
向化合物1(5.0g,21.5mmol)和2-重氮基乙酸乙酯(3.2g,28.1mmol)于THF(100mL)中的溶液在-78℃下在N2下添加BF3–Et2O(2.7mL,21.5mmol)。将反应混合物在–78℃下搅拌1.5小时，然后缓慢升温至28℃并搅拌1.5小时。将所得混合物用NaHCO3(饱和)猝灭且用EA(300mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥且真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到化合物2和3的混合物(3.4g,50％)。LCMS:320.0[M+1]。
1.1.2化合物4和5的制备
向化合物2和3(1g,3.1mmol)溶解于MeOH/H2O(10mL/2mL)的混合物添加KOH(0.53g,9.3mmol)，并加热至55℃持续2小时。将混合物用EA(80mL)稀释并用盐水(60mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到化合物4(0.32g,42％)和化合物5(0.22g,29％)。LCMS:248.0[M+1]。化合物4 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.34-7.40(m,5H),5.16-5.21(m,2H),4.06-4.11(m,2H),3.46-3.49(m,2H),2.51-2.55(m,2H),1.63-1.78(m,4H)。化合物51H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.34-7.39(m,5H),5.14(s,2H),3.62-3.69(m,4H),2.62-2.71(m,4H),2.75-2.81(m,2H)。
1.1.3化合物6的制备
向化合物4(0.32g,1.3mmol)于EtOH(20mL)中的溶液在0℃下添加NaBH4(74.2mg,1.9mmol)，并将混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物用NH4Cl(饱和)猝灭并用EA(80mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到所需产物(0.24g,74％)。LCMS:250.0[M+1]。
1.1.4化合物A01的制备
向化合物6(0.25g,1.0mmol)于MeOH(25mL)中的溶液添加Pd(OH)2/C(50mg)。将混合物在25℃下在25Psi压力下氢化16小时。过滤催化剂并将滤液浓缩以得到粗产物，其直接用于下一步(0.1g,87％)。
1.1.5化合物7的制备
向化合物5(0.32g,1.3mmol)于EtOH(20mL)中的溶液在0℃下添加NaBH4(74.2mg,1.9mmol)，并将混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物用NH4Cl(饱和)猝灭并用EA(80mL)萃取。将有机层干燥并浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到所需产物(0.24g,74％)。LCMS:250.0[M+1]。
1.1.6化合物A02的制备
向化合物5(0.25g,1.0mmol)于MeOH(25mL)中的溶液添加Pd(OH)2/C(50mg)。将混合物在25℃下在25psi压力下氢化16小时。过滤催化剂并将滤液浓缩以得到粗产物，其直接用于下一步(0.1g,87％)。
1.2 A03/04的制备
1.2.1化合物2的制备
向化合物1(0.8g,3.2mmol)于DCM(30mL)中的溶液在-78℃下在N2下添加DAST(1.1g,6.5mmol)。将反应混合物在–78℃下搅拌2小时，然后升温至28℃持续2小时。将所得混合物用NaHCO3(饱和)猝灭并用DCM(30mL)萃取。将有机层干燥并浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱PE:EA(30:1)纯化以得到所需产物(0.6g,74％)。LCMS:252.0[M+1]。
1.2.2化合物A03的制备
向化合物2(0.6g,2.4mmol)于MeOH(25mL)中的溶液添加Pd(OH)2/C(100mg)。将混合物在25℃下在H2气氛下氢化16小时。过滤催化剂并将滤液浓缩以得到粗产物(0.3g)，其直接用于下一步。
胺A04通过与胺A03相同的程序从4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸苄酯制备。
1.3 A05/06的制备
1.3.1化合物2的制备
向CH3MgBr(14.2mmol)于THF(10mL)中的溶液在0℃下在N2下添加于THF(20mL)中的化合物1(0.7g,2.8mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌2小时。将所得混合物用NH4Cl(饱和)猝灭并用EtOAc(30mL)萃取。将有机层干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱PE:EA(10:1)纯化以得到所需产物(0.2g,27％)。LCMS:264[M+1]。
1.3.2化合物A05的制备
向化合物2(0.34g,1.3mmol)于MeOH(25mL)中的溶液添加Pd(OH)2/C(50mg)。将混合物在25℃下在H2气氛下氢化16小时。过滤催化剂并将滤液浓缩以得到粗产物，其直接用于下一步(0.16g,94％)。
胺A06通过与胺A03相同的程序从4-氧代氮杂环庚烷-1-甲酸苄酯制备。
1.4 A07/08的制备
1.4.1.1化合物3和3’的制备
将化合物3和3′的混合物用与1.1.1相同的程序制备。
1.4.1.2化合物4和化合物4′的制备
向NaH(338mg,8.5mmol)于THF(30mL)中的混悬液在0℃下在N2下添加化合物3和化合物3′(2.7g,8.5mmol)的混合物于THF(30mL)中的溶液，并在室温下搅拌0.5小时。滴加选择物F(2.7g,8.5mmol)于DMF(15mL)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌3小时。将所得混合物用NH4Cl猝灭并用EA(200mL)萃取。将有机层用盐水洗涤、经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到化合物4(1.0g,35％)和化合物4′(0.9g,32％)。化合物4：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.28–7.39(m,5H),5.18(s,2H),4.40–4.68(m,1H),4.11–4.39(m,3H),3.45–3.63(m,1H),3.21–3.38(m,1H),1.85–2.45(m,4H),1.26–1.30(m,3H)。化合物4′:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝7.28–7.40(m,5H),5.14-5.18(m,2H),4.24–4.47(m,4H),3.88–4.00(m,1H),3.09–3.25(m,1H),2.85–2.91(m,2H),1.92–1.95(m,2H),1.27–1.35(m,3H)。
1.4.1.3化合物5的制备
将化合物4(0.72g,2.1mmol)和KOH(0.18g,3.2mmol)于MeOH/H2O(10mL/2mL)中的混合物加热至55℃持续2小时。将混合物用EA(80mL)萃取并用盐水(60mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其直接用于下一步(0.54g，粗)。LCMS:266.0[M+1]。
1.4.1.4化合物6的制备
向化合物5(0.54g,2.1mmol)于EtOH(8mL)中的溶液在0℃下添加NaBH4(0.12g,3.1mmol)，并将混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物用NH4Cl(饱和)猝灭并用EA(80mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到所需产物(0.22g,41％)。LCMS:268.0[M+1]。
1.4.1.5化合物A07的制备
向化合物6(0.22g,0.8mmol)于MeOH(25mL)中的溶液添加Pd(OH)2/C(45mg)。将混合物在25℃下在25Psi气压下氢化16小时。过滤催化剂并将滤液真空浓缩以得到粗产物，其直接用于下一步(0.1g,91％)。
1.4.1.6化合物5'的制备
将化合物4′(0.89g,2.6mmol)和KOH(0.22g,3.9mmol)于MeOH/H2O(10mL/2mL)中的混合物加热至55℃持续2小时。将混合物用EA(80mL)稀释并用盐水(60mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其直接用于下一步(0.65g，粗)。LCMS:266.0[M+1]。
1.4.1.7化合物6′的制备
向化合物5′(0.65g,2.6mmol)于EtOH(10mL)中的溶液在0℃下添加NaBH4(0.15g,3.9mmol)，并将混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物用NH4Cl(饱和)猝灭并用EA(80mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到所需产物(0.33g,50％)。LCMS:268.0[M+1]。
1.4.1.8化合物A08的制备
向化合物6′(0.33g,1.2mmol)于MeOH(30mL)中的溶液添加Pd(OH)2/C(60mg)。将混合物在25℃下在25Psi压力下氢化16小时。过滤催化剂并将滤液真空浓缩以得到粗产物，其直接用于下一步(0.15g,91％)。
非对映异构体的合成：
1.4.2.1化合物3的制备
向化合物1(5.0g,33.7mmol)的溶液添加丙-2-烯-1-胺(6.0g,101.3mmol)，然后将溶液在80℃下搅拌16小时。将混合物真空浓缩以得到粗化合物3(6.6g)直接用于下一步。
1.4.2.2化合物4的制备
向化合物3(6.6g,52.71mmol)于DCM(80mL)中的溶液在0℃下添加TEA(10.67g,105.4mmol)和CbzCl(13.49g,79.1mmol)，将溶液在25℃下搅拌2小时。将反应物用水(100mL)洗涤并用DCM(100mL)萃取，将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过硅胶上的柱色谱(PE:EA＝10:1)纯化以得到化合物4(5.0g,36.6％)。
1H NMR(400MHz,MeOD):δppm:7.25-7.47(m,5H),5.67-5.96(m,2H),5.08-5.23(m,3H),4.91-5.08(m,2H),3.86-3.96(m,2H),3.27(t,J＝7.5Hz,2H),1.95-2.11(m,2H),1.53-1.72(m,2H)。
1.4.2.3化合物5的制备
向化合物4(3.0g,11.57mmol)于DCM(300mL)中的溶液添加第一代格拉布催化剂(290mg,0.35mmol)，然后将溶液在55℃下在N2气氛下搅拌16小时。将混合物真空浓缩以得到粗产物，其通过硅胶上的柱色谱(PE:EA＝20:1)纯化以得到呈暗色液体的化合物5(1.9g,71％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm:7.30-7.43(m,5H),5.69-5.89(m,2H),5.09-5.24(m,2H),3.90-4.08(m,2H),3.47-3.72(m,3H),2.16-2.43(m,3H),1.76-1.94(m,2H)。
1.4.2.41化合物6的制备
向化合物5(1.0g,4.3mmol)于DCM(15mL)中的溶液添加m-CPBA(1.49g,8.65mmol)，然后将溶液在23℃下搅拌16小时。TLC显示原料完全耗尽。将溶液用水性Na2SO3洗涤并用DCM(20mL)萃取，将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过硅胶上的柱色谱(PE:EA＝3:1)纯化以得到呈无色液体的化合物6(420mg,40％)。
1.4.2.4化合物7A和7B的制备
将化合物6(800.00mg,3.24mmol)溶解于50mL单颈圆底烧瓶的HF/Et3N(522.32mg,6.48mmol)中。将混合物在100℃下在N2下搅拌14小时。冷却至20℃后，LCMS显示原料耗尽。将残余物用水性NaHCO3(80mL)洗涤，并用EA(70mL*2)萃取，将有机层干燥、真空浓缩以得到粗产物。将粗混合物通过柱色谱(PE/EA＝4:1)进一步纯化以得到呈黄色油状物的化合物7A(320.00mg,37.04％)和7B(70mg,8％)。
7A 1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm:7.30-7.45(m,5H),5.11-5.27(m,2H),4.28-4.64(m,1H),3.21-4.05(m,5H),1.60-2.20(m,4H)。
7B 1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm:7.30-7.48(m,5H),5.12-5.28(m,2H),4.21-4.55(m,1H),3.17-4.16(m,5H),1.41-2.12(m,4H)
1.4.2.5化合物A07_反式的制备
向化合物7A(460mg,1.72mmol)于CH3OH(40mL)中的溶液添加Pd(OH)2/C(85mg)。将形成的混合物在H2气氛下氢化2.5小时。过滤催化剂并将滤液浓缩以得到所需产物A07_反式(220mg,96％)。
A08_反式通过相同程序从7B制备。
1.4.2.6化合物8的制备
向PPh3(471.00mg,1.80mmol)于THF(2mL)和DEAD(312.73mg,1.80mmol)中的混合物在0℃下滴加于THF(15mL)中的4-硝基苯甲酸(300.10mg,1.80mmol,)，然后滴加化合物7A(400.00mg,1.50mmol)于THF(2mL)中的溶液。将反应混合物在25℃下搅拌12小时。TLC显示原料耗尽。添加水(50mL)。将反应混合物通过EA(35ml*3)萃取。干燥有机层，真空浓缩。将残余物通过柱色谱(PE/EA＝6/1,4/1)纯化以得到所需产物化合物8(200.00mg,32.10％)。LCMS[M+1]:417
1.4.2.7化合物9的制备
向化合物8(150.00mg,0.36mmol)于MeOH(10mL)中的混合物添加K2CO3(74.68mg,0.54mmol)。将混合物在25℃下搅拌1.5小时。TLC显示反应完成。将混合物直接通过硅胶色谱(PE/EA＝6/1,4/1)纯化以得到呈黄色油状物的化合物9(70.00mg,72.70％)。
1.4.2.8化合物A07_顺式的制备
向化合物9(70mg,0.26mmol)于CH3OH(20mL)中的溶液添加Pd(OH)2(20mg)。将形成的混合物在H2气氛下氢化2小时。过滤催化剂并将滤液浓缩以得到所需产物C(34mg,97％)。
A08_顺式通过相同的程序从7B制备。
1.5 A09的制备
1.5.1.1化合物3的制备
向化合物1(8.0g,34.3mmol)和2-重氮基乙酸乙酯(5.1g,44.7mmol)于THF(160mL)中的溶液在-78℃下在N2下添加BF3–Et2O(4.3mL,34.3mmol)。将反应混合物在–78℃下搅拌1.5小时，然后缓慢升温至28℃，并且继续搅拌1.5小时。将所得混合物用NaHCO3猝灭并用EA(500mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到所需产物(7.3g,67％)。LCMS:320.0[M+1]。
1.5.1.2化合物4的制备
向NaH(464mg,11.6mmol)于THF(40mL)中的悬浮液在0℃下在N2下添加化合物3(3.7g,11.6mmol)于THF(40mL)中的溶液，然后0.5后添加选择物F(4.4g,11.6mmol)于DMF(20mL)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌3小时。将所得混合物用NH4Cl(饱和)猝灭并用EA(300mL)萃取。将有机层用盐水洗涤、经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到所需产物(2.5g,64％)。LCMS:338.0[M+1]。
1.5.1.3化合物5的制备
将化合物4(2.5g,7.4mmol)和KOH(0.62g,11.1mmol)于MeOH/H2O(20mL/4mL)中的混合物加热至55℃持续2小时。将混合物用EA(100mL)稀释并用盐水(80mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其直接用于下一步(1.8g，粗)。LCMS:266.0[M+1]。
1.5.1.4化合物6的制备
向化合物5(1.8g,6.8mmol)于EtOH(30mL)中的溶液在0℃下添加NaBH4(0.39g,10.3mmol)，并将混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物用NH4Cl(饱和)猝灭并用EA(150mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到所需产物(1.2g,66％)。LCMS:268.0[M+1]。
1.5.1.5化合物A09的制备
向化合物6(1.2g,4.5mmol)于MeOH(50mL)中的溶液添加Pd(OH)2/C(0.24g)。将混合物在25℃下在25Psi压力下氢化16小时。过滤催化剂并将滤液真空浓缩以得到粗产物，其直接用于下一步(0.59g,98％)。
非对映异构体的合成：
5.1.2.1化合物2的制备
向苄基化合物1(5.00g,21.62mmol)于CH2Cl2(100mL)中的混合物一次性添加m-CPBA(9.33g,54.05mmol)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物浓缩并将残基通过硅胶色谱纯化以得到呈黄色油状物的化合物2(2.70g,10.92mmol,50.50％产率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.41-7.30(m,5H),5.18-5.07(m,2H),4.00-3.79(m,2H),3.20(t,J＝4.5Hz,2H),2.91-2.71(m,2H),2.34-2.18(m,3H),2.15-2.03(m,1H)。
5.1.2.2化合物3的制备
将化合物2(2.20g,8.90mmol,1.00当量)和HF-Et3N(2.15g,13.35mmol)充入100mL单颈圆底烧瓶。将混合物在100℃下在N2下搅拌16小时。TLC显示反应完成。然后将其用DCM(100mL)稀释、用盐水(100mL×2)洗涤、经Na2SO4干燥并真空浓缩。将残余物用硅胶上的柱色谱纯化(PE:EA＝1:1)以得到呈无色油状物的化合物3(1.5g,5.61mmol)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.42-7.28(m,5H),5.14(s,2H),4.51-4.29(m,1H),3.90-3.58(m,3H),3.48-3.25(m,2H),2.29-2.07(m,2H),1.99-1.84(m,1H),1.72(dt,J＝5.0,10.2Hz,1H)
5.1.2.3 A09_反式的制备
向化合物3(100.0mg,374.11umol,1.00当量)于MeOH(5mL)中的溶液在N2下添加Pd(OH)2(0.02g)。将混悬液真空脱气并用H2吹扫数次。将混合物在H2(50psi)下在25℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤并将滤液浓缩以得到呈黄色固体的A09_反式(40.00mg,300.39umol,80.29％产率)。
5.1.2.4化合物5的制备
向化合物3(400mg,1.5mmol)、化合物4(0.3g,1.8mmol)和PPh3(0.47g,1.8mmol)于THF(10mL)中的溶液在0℃下添加于无水THF(10mL)中的DEAD(0.312g,1.8mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。TLC显示反应完成。蒸发混合物并将残余物用硅胶上的柱色谱纯化(PE:EA＝10:1)以得到呈白色固体的化合物4(0.5g,80％)。
5.1.2.5化合物6的制备
向化合物5(500mg,1.2mmol)于MeOH(10mL)中的溶液添加K2CO3(165mg,1.2mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。TLC显示其完成。将混合物浓缩以得到呈黄色油状物的化合物6(300mg,粗)。
5.1.2.6 A09_顺式的制备
向化合物6(100.00mg,374.11umol,1.00当量)于MeOH(5mL)中的溶液在N2下添加Pd/C(0.02g)。将混悬液真空脱气并用H2吹扫数次。将混合物在H2(50psi)下在25℃下搅拌16小时。TLC(PE:EtOAc＝1:1)显示原料完全耗尽。过滤反应混合物并将滤液浓缩以得到呈无色油状物的A09_顺式(40.00mg,300.39umol,80.29％产率)。
1.6 A10的制备
1.6.1化合物3的制备
向化合物1(12.37g,56.5mmol)和化合物2(13.56g,56.5mmol)于甲苯(800mL)中的搅拌溶液添加Et3N(17.17g,170mmol)。将混合物加热至120℃并搅拌48小时。TLC显示原料完全耗尽。将混合物用饱和NH4Cl(100mL)洗涤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱(PE:EA＝2:1)纯化以得到呈黄色固体的化合物3(6.9g,产率:41.2％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.47-7.21(m,10H),3.87-3.61(m,5H),2.97-2.41(m,8H)。
LCMS:297[M+1]。
1.6.2化合物4的制备
将化合物3(2.2g,7.5mmol)溶解于MeOH(80mL)中，然后添加Pd(OH)2/C(500mg)。将所得的混合物在H2气氛下氢化过夜。TLC显示原料完全耗尽。过滤催化剂并将滤液浓缩以得到呈无色油状物的所需化合物4(0.8g,100％)。1H NMR(400MHz,MeOD)δ3.89-3.71(m,1H),2.97-2.63(m,8H)。
1.6.3化合物5的制备
将化合物4(522mg,4.5mmol)溶解于MeOH(30mL)中，然后添加Boc2O(972mg,4.5mmol)和Et3N(546mg,5.4mmol)。将混合物在15℃下搅拌12小时。TLC显示原料完全耗尽。将混合物真空浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱纯化以得到呈无色油状物的所需化合物5(860mg,92％)。
1.6.4化合物6的制备
向化合物5(972mg,4.5mmol)于EtOH(20mL)中的溶液在室温下添加NaBH3CN(837mg,13.5mmol)和HCHO(1.5g,18mmol)，然后将混合物在15℃下搅拌4小时。TLC显示原料完全耗尽。将混合物真空浓缩。将残余物通过硅胶柱(DCM:MeOH＝20:1)纯化以得到呈无色油状物的化合物6(610mg,59％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.99-3.85(m,1H),3.73-3.27(m,4H),2.97-2.51(m,4H),2.46-2.31(m,4H),1.51(s,9H)。
1.6.5化合物A10的制备
将化合物6(300mg,1.3mmol)溶解于DCM(20mL)中，然后添加TFA(20mL)。将所得的混合物在室温下搅拌2小时。TLC显示原料完全耗尽。将溶液浓缩以得到呈TFA盐的粗化合物A10(420mg，粗)。
1.7 A11/12的制备
1.7.1化合物3的制备
向化合物1(10g,80.0mmol)和NaOH(3.6g,90.0mmol)于H2O(160mL)中的溶液在0℃下添加化合物2(5.0g,100mmol)。将反应混合物加热至75℃持续3小时，然后冷却至25℃。添加(Boc)2O(21g,100mmol)并混合物持续搅拌16小时。将反应混合物用水稀释并用EA(200mL*2)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到所需产物(11.2g,57％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm:4.03(s,2H),3.78–3.77(m,3H),3.60–3.57(m,2H),2.72–2.67(m,2H),1.51–1.45(m,9H)。
1.7.2化合物4的制备
向化合物3(11.2g,46mmol)于EtOH-CHCl3(200mL/10mL)中的溶液添加PtO2(1.0g)。将混合物在25℃下在50Psi的H2气压下氢化16小时。过滤催化剂并将滤液浓缩以得到粗产物，其直接用于下一步(11.3g,99％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm:8.45–8.43(m,2H),3.91–3.89(m,2H),3.76–3.73(m,3H),3.51–3.48(m,2H),3.21–3.19(m,2H),2.10–1.99(m,2H),1.50–1.44(m,9H)。
1.7.3化合物5的制备
将化合物4(2.3g,9.3mmol)于MeOH(20mL)和NaOH(3N,4mL)中的溶液在25℃下搅拌2小时。TLC监测反应完成。将混合物用EA(150mL)稀释并用盐水(100mL)洗涤。将有机层干燥并浓缩以得到粗产物，其通过柱色谱纯化以得到所需产物(1.25g,63％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm:4.10–4.05(m,2H),3.60–3.58(m,2H),3.31–3.28(m,2H),1.91–1.85(m,2H),1.63–1.45(m,9H)。
1.7.4化合物A11的制备
向化合物5(0.5g,2.3mmol)于DCM(5mL)中的溶液添加TFA(5mL)，并在25℃下搅拌2小时。TLC监测反应完成。将混合物浓缩以得到粗产物(780mg,粗)。
1.7.5化合物6的制备
向化合物4(800mg,3.7mmol)于THF(20mL)中的溶液添加NaH(224mg,5.6mmol)并在25℃下搅拌0.5小时。然后，添加MeI(795mg,5.6mmol)。将混合物在室温下搅拌直至TLC监测反应完成。将混合物用水猝灭，用EA(50mL)稀释并用盐水(30mL)洗涤。将有机层干燥并浓缩以得到粗产物，其通过柱色谱纯化以得到所需产物(720mg,63％)。
1.7.6化合物A12的制备
向化合物6(720mg,2.3mmol)于DCM(5mL)中的溶液添加TFA(5mL)，并在25℃下搅拌2小时。TLC监测反应完成。浓缩混合物以得到粗产物(960mg,粗)。
1.8 A13的制备
1.8.1化合物3的制备
向化合物1(1.32g,10.5mmol)于DMF(20mL)中的溶液在0℃下添加NaH(960mg,24mmol)，将混合物在0℃下搅拌30分钟。然后于0℃添加化合物2(1.61g,10mmol)。将混合物在15℃下搅拌2小时。TLC显示原料完全耗尽。添加饱和NH4Cl(100mL)以猝灭反应。真空去除溶剂并将残余物用EA(100mL*2)萃取。将有机层浓缩并通过硅胶柱(PE:EA＝4:1)纯化以得到呈无色油状物的化合物3(1.1g,产率:51％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ:5.12-4.91(m,2H),4.29-4.03(m,4H),3.76-3.45(m,4H),1.47(s,9H)。
1.8.2化合物4的制备
向化合物3(212mg,1mmol)于THF/H2O(3mL/3mL)中的溶液在室温下添加K2OsO4·2H2O(18mg,0.05mmol)和NaIO4(491mg,2.3mmol)，然后将混合物在15℃下搅拌4小时。TLC显示原料完全耗尽。将混合物真空浓缩。将残余物通过硅胶柱(PE:EA＝5:1)纯化以得到呈黄色油状物的化合物4(170mg,77％)。LCMS:216[M+1]。
1.8.3化合物5的制备
向化合物4(425mg,2mmol)于EtOH(10mL)中的溶液添加NaBH4(150mg,4mmol)。将混合物在15℃下搅拌4小时。TLC显示原料耗尽。添加饱和NH4Cl(20mL)以猝灭反应。将混合物真空浓缩。将残余物用EA(50mL)萃取、经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到呈无色油状物的所需化合物5(370mg,87％)。
1.8.4化合物A13的制备
将化合物5(420mg,2mmol)溶解于DCM(20mL)中，然后添加TFA(20mL)。将所得的混合物在室温下搅拌2小时。TLC显示原料完全耗尽。浓缩溶液以得到直接用于下一步的呈TFA盐的所需粗化合物5(620mg,100％)。
1.9 A15的制备
1.9.1化合物3的制备
将化合物1(8.7g,65.7mmol)、化合物2(3.5g,32.7mmol)和K2CO3(9.06g,65.7mmol)于DMF(120mL)中的混合物在100℃下加热16小时。将混合物用EA(100mL)稀释，并用H2O(100mL*3)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过柱色谱纯化以得到呈无色油状物的所需产物3(5.1g,72.5％)。LCMS:256[M+1]。
1.9.2化合物4的制备
向化合物3(1.5g,6.97mmol)于甲苯(15mL)中的溶液添加CbzCl(1.42g,8.37mmol)。将混合物加热至110℃持续16小时。将混合物真空浓缩。将残余物用水和EA溶解。将有机层用水性Na2CO3洗涤、经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过柱色谱纯化以得到呈无色油状物的所需产物4(1.24g,产率：68.9％)。LCMS:260[M+1]。
1.9.3化合物5的制备
向化合物4(1.0g,3.86mmol)于DCM(60mL)中的溶液添加二氯化物Zhan催化剂1B(150mg,CAS:918870-76-5)。将混合物用N2吹扫10分子并在20℃下搅拌16小时。将混合物真空浓缩以得到粗产物，其通过柱色谱纯化以得到呈无色油状物的所需产物5(800mg,产率:89.7％)。LCMS:232[M+1]。
1.9.4化合物6的制备
向化合物5(800mg,3.46mmol)于DCM(30mL)中的溶液添加m-CPBA(774mg,4.5mmol)。将混合物在室温下搅拌5小时。将溶液通过水性Na2SO3猝灭并用DCM(60mL*2)萃取。将有机合并相经Na2SO4干燥，并浓缩以得到呈无色油状物的所需化合物7(812mg，产率：95.9％)。LCMS:248[M+1]。
1.9.5化合物7的制备
将化合物6(812mg,3.31mmol)溶解于MeOH(10mL)中，然后添加浓H2SO4(200mg)。将混合物在室温下搅拌1小时。将溶液用水性Na2CO3中和至pH＝7。将所得的混合物真空浓缩。将残余物用EA(60mL*2)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过柱色谱纯化以得到呈无色油状物的所需产物8(778mg，产率：84.9％)。LCMS:280[M+1]。
1.9.6化合物A15的制备
向化合物7(778mg,2.8mmol)于MeOH(70mL)中的溶液在N2下添加Pd(OH)2/C(100mg)。将混合物在H2气球下于23℃搅拌2小时。过滤混合物。将滤液浓缩以得到所需产物8(310mg，产率：78％)。
1.10 A16/17/18的制备
1.10.1化合物3的制备
将化合物1(5.0g,33.7mmol)和化合物2(6.0g,101.3mmol)的混合物加热至80℃持续16小时。将混合物真空浓缩。将残余物用DCM(100mL)溶解。在0℃下Et3N(7.6g,75.6mmol)，然后是CbzCl(12.8g,75.6mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将混合物用DCM(100mL)稀释并用水(100mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过硅胶上的柱色谱(PE:EA＝10:1)纯化以得到化合物4(4.4g,34％)。LCMS:260[M+1]。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.49-7.22(m,5H),5.95-5.67(m,2H),5.13(s,4H),5.08-4.91(m,2H),3.91(d,J＝5.6Hz,2H),3.31-3.23(m,2H),2.02(s,2H),1.74-1.57(m,2H)。
1.10.3化合物4的制备
向化合物3(2.0g,7.7mmol)于DCM(100mL)中的溶液添加二氯化物Zhan催化剂1B(236mg,CAS:918870-76-5)。将反应混合物在室温下在N2气氛下搅拌16小时。将混合物真空浓缩以得到粗产物，其通过硅胶上的柱色谱(PE:EA＝10:1)纯化以得到呈深色液体的化合物4(1.28g,72％)。LCMS:232[M+1]。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.40-7.27(m,5H),5.95-5.62(m,2H),5.13(d,J＝3.5Hz,2H),3.99(d,J＝2.8Hz,2H),3.63(d,J＝6.1Hz,2H),2.28-2.19(m,3H),1.89-1.75(m,2H)。
1.10.4化合物5的制备
向化合物5(900mg,3.9mmol)于DCM(40mL)中的溶液添加m-CPBA(1.34g,7.8mmol)，并在室温下搅拌16小时。TLC显示材料完全消耗。将反应混合物用Na2SO3溶液猝灭并用DCM(20mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过硅胶上的柱色谱(PE:EA＝30:1)纯化以得到呈无色液体的化合物6(900mg,83％)。LCMS:248[M+1]。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.37(s,6H),5.19-5.08(m,2H),4.32-4.18(m,1H),3.86-3.74(m,1H),3.56-3.38(m,1H),3.19-3.08(m,2H),2.80-2.66(m,1H),2.31-2.17(m,1H),2.02-1.94(m,1H),1.79-1.51(m,2H)。
1.10.5化合物6和6’的制备
向化合物6(700mg,2.83mmol)于MeOH(40mL)中的溶液在室温下添加浓H2SO4(0.1mL)，并将溶液搅拌1小时。TLC显示材料完全消耗。添加NaHCO3的水性溶液(1mL)以中和反应混合物。真空浓缩所得混合物，然后添加EtOAc(40mL)和水(20mL)以溶解残余物。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过硅胶上的柱色谱(PE:EA＝10:1)纯化以得到呈无色液体的化合物7B和7C的混合物(700mg，产率88.6％)。
1.10.6 A16和A17的制备
向化合物7B和7C(800mg,2.86mmol)的混合物于MeOH(20mL)中的溶液添加Pd(OH)2/C(200mg)，并将混合物在H2气球下搅拌4小时。TLC小时材料完全耗尽。过滤溶液并将滤液真空浓缩以得到呈液体的化合物C和D的混合物(370mg，产率88％)。
1.10.7化合物7制备
向化合物4(260mg,1.12mmol)于THF(5mL)和水(2mL)中的溶液添加OsO4(60mg)，然后添加NMO(131mg)。将反应物在室温下搅拌3小时。TLC显示原料完全耗尽。将混合物用水稀释并用EtOAc(30mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到呈无色液体的粗产物化合物8(186mg,62％)。LCMS:266[M+1]。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.43-7.29(m,5H),5.21-5.07(m,2H),3.88-3.81(m,1H),3.81-3.65(m,3H),3.32-3.17(m,2H),2.02-1.87(m,2H),1.74-1.45(m,2H)。
1.10.8化合物A18的制备
向化合物7(186mg,0.77mmol)于MeOH(20mL)中的溶液在室温下添加Pd(OH)2/C(40mg)并在H2气球下搅拌4小时。将混合物过滤并真空浓缩滤液以得到呈液体的粗产物化合物E(101mg,100％)。
1.11 A22的制备
1.11.1化合物2的制备
向化合物1(0.5g,2.0mmol)于THF(30mL)中的溶液在-78℃下在N2下添加LiHMDS(4.0mL,4.0mmol)。将反应混合物在–78℃下搅拌2小时。将MeI(0.86g,6.0mmol)在–78℃下添加至混合物，然后缓慢升温至28℃并搅拌1.5小时。将所得混合物用H2O猝灭并用EA(50mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到化合物2(0.4g,75％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ7.29-7.41(m,1H),5.03-5.23(m,1H),3.84-4.22(m,1H),2.60-3.23(m,2H),2.46-2.59(m,1H),1.69-1.90(m,2H),1.09(dd,J＝6.84,15.12Hz,3H),LCMS:262.0[M+1]。
1.11.3化合物3的制备
向化合物2(1.2g,4.6mmol)于EtOH(20mL)中的溶液在0℃下添加NaBH4(259mg,6.8mmol)，并将混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物用NH4Cl(饱和)猝灭并用EA(80mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到所需产物(650mg,54％)。LCMS:264.0[M+1]。
1.11.4化合物A22的制备
向化合物3(0.26g,1.0mmol)于MeOH(25mL)中的溶液添加Pd(OH)2(50mg)。将混合物在25℃下在25Psi压力下氢化16小时。过滤催化剂并将滤液浓缩以得到粗产物，其直接用于下一步(0.1g,77％)。
1.12 A23的制备
1.12.1化合物2的制备
向化合物1(2.0g,7.0mmol)于THF(50mL)中的溶液在0℃下在N2下添加NaH(336mg,8.4mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌0.5小时。在0℃下添加MeI(1.5g,10.5mmol)至混合物，然后缓慢升温至28℃并搅拌16小时。将所得混合物用H2O猝灭并用EA(50mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到化合物2(1.5g,71.4％)。
1.12.2化合物3的制备
将化合物2(1.5g,5mmol)和KOH(0.5g,9.0mmol)于MeOH/H2O(20mL/4mL)中的混合物加热至55℃持续2小时。将混合物用EA(80mL)稀释并用盐水(60mL)洗涤。将有机层经干燥Na2SO4并真空浓缩以得到粗产物,其直接用于下一步(1.5g,94％).
1.12.3化合物4的制备
向化合物3(1.3g,5.7mmol)于EtOH(20mL)中的溶液在0℃下添加NaBH4(260mg,6.9mmol)，并将混合物在25℃下搅拌2小时。将形成的混合物用NH4Cl(饱和)猝灭并用EA(80mL)萃取。将有机层干燥经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到所需产物(821mg,63％)。
1.12.4化合物A23的制备
向化合物4(0.82g,3.6mmol)于MeOH(10mL)中的溶液添加HCl/MeOH(4mL,4M)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物浓缩以得到粗HCl盐，其直接用于下一步(760mg，粗HCl盐)。
1.13 A24的制备
1.13.1化合物2的制备
向化合物1(1g,6.4mmol)于THF(30mL)中的溶液在-78℃下在N2下添加LiHMDS(12.8mL,12.8mmol)。将反应混合物在–78℃下搅拌2小时。将MeI(2.7g,19.2mmol)在–78℃下添加至混合物，然后缓慢升温至28℃并搅拌15小时。将所得混合物用H2O猝灭并用EA(50mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到化合物2(0.62g,57％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ3.92-4.17(m,4H),2.55-2.83(m,2H),2.31-2.43(m,1H),1.87-2.13(m,3H),1.69-1.81(m,1H),1.04(d,J＝6.65Hz,3H).LCMS:171.0[M+1]。
1.13.2化合物3的制备
向化合物2(0.5g,2.9mmol)于EtOH/H2O(20/1mL)中的溶液添加NH2OH.HCl(1.0g,14.7mmol)和NaOAc(0.7g,8.8mmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将所得的混合物用EA(80mL)稀释并用盐水(60mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到化合物3(0.4g,73％)。LCMS:186.0[M+1]。
1.13.3化合物4的制备
向化合物3(1.0g,5.4mmol)于丙酮(20mL)中的溶液添加TosCl(1.5g,8.1mmol)。将于H2O(30mL)中的NaOAc(1.7g,16.2mmol)添加至混合物。将混合物在16℃下搅拌2小时，然后缓慢升温至40℃并搅拌16小时。将所得的混合物用DCM(200mL)稀释并用盐水(60mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到化合物4(0.9g,83％)。
1.13.4化合物5的制备
向化合物4(0.9g,4.8mmol)于THF(15mL)中的溶液在16℃下添加LiAlH4(0.27g,7.2mmol)。将混合物在16℃下搅拌5小时。将混合物用水猝灭并过滤，然后添加CbzCl(1.2g,7.2mmol)至所述溶液。将混合物在40℃下过滤12小时。将所得的混合物用EA(20mL)稀释并用盐水(20mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到化合物5(0.75g,60％)。
1.13.4化合物5的制备
向化合物4(0.9g,4.8mmol)于THF(15mL)中的溶液在16℃下添加LiAlH4(0.27g,7.2mmol)。将混合物在16℃下搅拌5小时。将混合物用水猝灭并过滤。将t CbzCl(1.2g,7.2mmol)添加至滤液。将混合物在40℃下搅拌12小时。将所得混合物用EA(20mL)稀释并用盐水(20mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到化合物5(0.75g,60％)。
1.13.5化合物6的制备
向化合物5(0.75g,2.3mmol)于丙酮(15mL)和水(5mL)中的溶液在16℃下添加TosOH(0.6g,3.4mmol)。将混合物在40℃下搅拌12小时。将所得的混合物用EA(20mL)稀释并用盐水(20mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到化合物6(0.3g,50％)。
1.13.6化合物7的制备
向化合物6(0.30g,1.1mmol)于THF(15mL)中的溶液在16℃下添加NaBH4(50mg,1.3mmol)。将混合物在16℃下搅拌3小时。将所得的混合物用EA(20mL)稀释并用盐水(20mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到化合物7(0.30g,98％)。
1.13.8化合物A24的制备
向化合物7(0.30g,1.1mmol)于MeOH(25mL)中的溶液添加Pd/C(50mg)。将混合物在25℃下在H2气氛下氢化16小时。过滤催化剂并将滤液浓缩以得到粗产物，其直接用于下一步(0.14g,98％)。
1.14 A25的制备
1.14.1化合物3的制备
向铟(19.75g,172.03mmol,1.30当量)和3-溴丙-1-烯(20.81g,172.03mmol,1.30当量)于H2O(400mL)中的混合物在25℃下在N2下一次性添加2-氯乙醛(25.97g,132.33mmol,1.00当量)。将混合物在25℃下搅拌16小时。然后过滤混合物，将滤液用EtOAc萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，浓缩以得到呈黄色油状物的1-氯戊-4-烯-2-醇(13.00g,107.81mmol,81.47％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.79-5.89(m,1H),5.13-5.25(m,2H),3.86-3.97(m,1H),3.62-3.70(m,1H),3.50-3.59(m,1H),2.32-2.46(m,2H),2.24(brs,1H)。
1.14.2化合物5的制备
将1-氯戊-4-烯-2-醇(23.40g,194.06mmol,1.00当量)和丙-2-烯-1-胺(33.00g,578.03mmol,2.98当量)的混合物在90℃下搅拌16小时。将混合物冷却至25℃并在60℃下减压浓缩。将残余物倾倒至冰水(w/w＝1/1)(150mL)内并搅拌20分子。将水相用EA萃取。将合并的有机相用饱和盐水(200mL*2)洗涤、经无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱(DCM:MeOH＝30/1至10/1)纯化以得到呈黄色油状物的1-(烯丙基氨基)戊-4-烯-2-醇(16.00g,113.31mmol,58.39％产率)。
1.14.3化合物6的制备
向1-(烯丙基氨基)戊-4-烯-2-醇(4.23g,29.96mmol,1.00当量)于DCM(50mL)中的溶液添加CbzCl(6.13g,35.95mmol,1.20当量)和TEA(6.06g,59.92mmol,2.00当量)。将混合物在25℃下搅拌4小时。TLC检测到材料完全耗尽，将混合物用水洗涤，将水层用DCM萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥、浓缩并通过硅胶色谱(用PE:EA＝10:1洗脱)纯化以得到呈黄色油状物的所需产物N-烯丙基-N-(2-羟基戊-4-烯基)氨基甲酸苄酯(6.10g,22.15mmol,73.95％产率)。LCMS:276.0[M+1]。
1.14.4化合物7的制备
向N-烯丙基-N-(2-羟基戊-4-烯基)氨基甲酸苄酯(6.10g,22.15mmol,1.00当量)于DCM(400mL)中的溶液在N2保护下添加Zhan催化剂1B(812.63mg,1.11mmol,0.05当量)。将混合物在25℃下在N2保护下搅拌16小时。然后TLC检测到反应完成，蒸发溶剂，将残余物用色谱(硅胶，用PE:EA＝2:1洗脱)纯化以得到呈黄色油状物的3-羟基-2,3,4,7-四氢氮杂-1-甲酸苄酯(2.60g,10.51mmol,47.47％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.30-7.46(m,5H),5.63-5.89(m,2H),5.19(s,2H),3.96-4.13(m,2H),3.74-3.90(m,2H),3.54-3.70(m,1H),2.43(m,2H)。
1.14.5化合物8的制备
向3-羟基-2,3,4,7-四氢氮杂-1-甲酸苄酯(300.00mg,1.21mmol,1.00当量)于DCM(10mL)中的溶液在0℃下在N2保护下添加ZnEt2(2M,1.21mL,2.00当量)。然后将混合物在0℃下搅拌30秒且添加ClCH2I(533.55mg,3.03mmol,2.50当量)。将所得的混合物在25℃下搅拌16小时。LCMS检测到75％的所需产物和15％材料剩下。将混合物倾倒至NH4Cl溶液中，并用EA萃取，将合并的有机层经Na2SO4干燥、浓缩，将残余物于THF(3mL)和H2O(3mL)中稀释，添加NaIO4(258.81mg,1.21mmol,1.00当量)和K2OsO4(230.21mg,1.21mmol,1.00当量)，将混合物在25℃下搅拌30分钟，然后将反应物用饱和Na2SO3猝灭，用EA提取，将合并的有机层经Na2SO4干燥、浓缩，将残余物通过硅胶色谱(PE:EA＝3:1)纯化以得到呈无色油状物的3-羟基-5-氮杂双环[5.1.0]辛烷-5-甲酸苄酯(110.00mg,420.94umol,34.79％产率)。LCMS:262.0[M+1]。
1.14.6化合物A25的制备
向3-羟基-5-氮杂双环[5.1.0]辛烷-5-甲酸苄酯(110.00mg,420.94umol,1.00当量)于MeOH(10mL)中的溶液在N2下添加Pd-C。将混悬液真空脱气并用H2吹扫数次。将混合物在H2下在25℃下搅拌4小时。TLC显示原料完全耗尽。将反应混合物过滤并浓缩滤液以得到呈无色油状物的5-氮杂双环[5.1.0]辛-3-醇(37.00mg,290.93umol,69.11％产率)。
1.15 A26/A27的制备
1.15.1化合物2A和2B的制备
在冰浴处，向化合物1(9.0g,23.2mmol))于THF(135mL)中的溶液添加BH3-Me2S(7.0mL,70.0mmol)。在室温下搅拌溶液过夜后，轮流添加3M NaOH(9.3mL,27.8mmol)和H2O2(14.7g,116.0mmol)在冰浴处，并在室温下搅拌2小时。将混合物用Na2SO3溶液猝灭、用EtOAc(200mL*2)萃取并将有机层浓缩以得到粗混合产物，其直接用于下一步(9.36g,99.6％)。
1.15.2化合物3A和3B的制备
将化合物2A和2B(9.36g,23.0mmol)及戴斯马丁试剂(11.72g,27.6mmol)在DCM(160mL)中的混合物在室温下在N2下搅拌过夜。将混合物用Na2SO3溶液猝灭，用DCM(150mL*2)猝灭并浓缩有机层以得到粗产物，其通过Biotage色谱纯化以得到化合物3A(4.6g)和化合物3B(2.2g)。LCMS:427[M+23]
化合物10A 1H NMR(400MHz,CDCl3,10A):δppm:8.27-8.30(m,2H),7.93-7.96(m,2H),7.36-7.43(m,5H),4.60-4.67(m,2H),4.05(d,J＝18.2Hz,1H),3.82-3.87(m,1H),3.75(d,J＝18.2Hz,1H),3.62-3.66(dd,J＝14.6Hz,3.0Hz,1H),3.32-3.37(dd,J＝14.6Hz,7.0Hz,1H),2.63-2.67(m,2H),2.06-2.09(m,1H),1.82-1.86(m,1H)。
化合物10B 1H NMR(400MHz,CDCl3,10B):δppm:8.18-8.21(m,2H),7.94-7.97(m,2H),7.27-7.37(m,5H),4.62(d,J＝11.2Hz,1H),4.51(d,J＝11.2Hz,1H),3.75-3.93(m,3H),3.49-3.56(m,2H),3.02-3.08(m,1H),2.91-2.95(m,1H),2.56-2.71(m,2H)。
1.15.3化合物4A的制备
将化合物3A(4.6g,11.4mmol)和NaBH4(0.43g,11.4mmol)于MeOH(40mL)和THF(20mL)中的溶液在室温下搅拌30分钟。将混合物用NH4Cl溶液猝灭，蒸发溶剂，用EA(150mL*2)萃取并浓缩有机层以得到粗产物，其通过Biotage色谱纯化以得到呈白色固体的所需产物(4.21g,91％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm:8.28-8.34(m,2H),7.98-8.00(m,2H),7.28-7.38(m,5H),4.48-4.58(m,2H),4.00-4.04(m,1H),3.77-3.84(m,1.4H),3.54-3.57(m,1.6H),3.28-3.38(m,1H),3.17-3.23(m,0.6H),3.03-3.09(m,0.4H),2.42-2.67(m,1H),1.60-2.14(m,4H)。
1.15.4化合物5A的制备
向化合物5A(1.8g,4.4mmol)于DCM(20mL)中的溶液在-60℃下在N2下添加DAST(1.78g,11mmol)。将溶液在冰浴处搅拌2小时。用NaHCO3溶液猝灭，用DCM(100mL*2)萃取并浓缩有机层以得到粗产物，其通过Biotage色谱纯化以得到呈白色固体的所需产物(480mg,26.7％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm:8.25(d,J＝8.8Hz,2H),7.99(d,J＝8.8Hz,2H),7.31-7.40(m,5H),4.80-4.93(m,1H),4.50-4.57(m,2H),3.40-3.75(m,5H),1.78-2.07(m,4H)。
1.15.5化合物6A的制备
在冰浴处，向化合物5A(480mg,1.17mmol)于DMF(8mL)中的溶液添加LiOH(296mg,7.06mmol)，然后在N2下添加HSCH2CO2H(216mg,2.35mmol)。将混合物在室温下搅拌2小时。添加Boc2O(279mg,1.29mmol)并在室温下再搅拌30分钟。将混合物用NaClO溶液猝灭，用EA(50mL*2)猝灭并浓缩有机层以得到粗产物，其通过硅胶色谱纯化以得到呈油状物的所需产物(300mg,79.3％)。LCMS:346[M+23]
1.15.6化合物7A的制备
向化合物6A(300mg,0.9mmol)于CH3OH(50mL)中的溶液添加Pd(OH)2/C(300mg)。将混合物在60℃下在50Psi氢气压下氢化过夜。过滤催化剂并将滤液浓缩以得到呈油状物的所需产物(160mg,73.7％)。
1.15.6化合物26A的制备
将4M HCl-MeOH(10mL)添加至化合物13A(160mg,0.68mmol)。然后将溶液在室温下搅拌10分钟。蒸发溶剂并将残余物用Et3N碱化。其直接用于下一步。
1.15.7化合物4B的制备
将化合物3B(2.2g,5.4mmol)和NaBH4(0.20g,5.4mmol)于MeOH(20mL)和THF(10mL)中的溶液在室温下搅拌1小时。将混合物用NH4Cl溶液猝灭，蒸发溶剂，用EA(50mL*2)萃取并浓缩有机层以得到粗产物，其通过Biotage色谱纯化以得到呈油状物的所需产物(1.79g,81％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3,9B):δppm:8.27-8.33(m,2H),7.94-7.97(m,2H),7.27-7.35(m,5H),4.52-4.58(m,2H),4.11-4.17(m,1H),3.92-3.95(m,1H),3.54-3.72(m,2H),3.17-3.41(m,2H),1.84-2.21(m,4H)。
1.15.8化合物5B的制备
向化合物4B(2.16g,5.3mmol)于DCM(30mL)中的溶液在-60℃下在N2下添加DAST(2.14g,13.3mmol)。将溶液在室温下搅拌3小时。将混合物用NaHCO3溶液猝灭，用DCM(100mL*2)猝灭并将有机层浓缩以得到粗产物，其通过硅胶色谱纯化以得到呈浅黄色固体的所需产物(1.48g,68％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm:8.30-8.33(m,2H),7.94-7.99(m,2H),7.31-7.40(m,5H),4.75-5.04(m,1H),4.51-4.66(m,2H),3.11-3.96(m,5H),2.01-2.27(m,4H)。
1.15.9化合物6B的制备
在冰浴处，向化合物5B(560mg,1.37mmol)于DMF(8mL)中的溶液添加LiOH(346mg,8.23mmol)，然后在N2下添加2-巯基乙酸(252mg,2.74mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时。添加Boc2O(444mg,2.06mmol)并在室温下再搅拌30分钟。用NaClO溶液萃取，用EA(50mL*2)萃取并将有机层浓缩以得到粗产物，其通过硅胶色谱纯化以得到呈油状物的所需产物(300mg,67.8％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm:7.30-7.40(m,5H),4.94-5.05(m,1H),4.57-4.65(m,2H),3.59-4.09(m,3H),2.95-3.32(m,2H),1.99-2.40(m,4H),1.43-1.49(m,9H)。
1.15.10化合物7B的制备
向化合物6B(300mg,0.9mmol)于CH3OH(20mL)中的溶液添加Pd(OH)2(200mg)。将混合物在60℃下在50Psi氢气压下氢化过夜。过滤催化剂并将滤液浓缩以得到呈油状物的所需产物(200mg,91.7％)。
1.15.11化合物A27的制备
将4M HCl-MeOH(10mL)添加至化合物7B(190mg,0.81mmol)。然后将溶液在室温下搅拌10分钟。蒸发溶剂并将残余物用Et3N碱化。其直接用于下一步。
1.16 A28的制备
1.16.1化合物2的制备
向1,3-二氯丙-2-酮(20.00g,157.52mmol,1.00当量)于THF(94mL)中的混合物在14℃下一次性添加PPh3(37.18g,141.77mmol,0.90当量)。将混合物在80℃下搅拌18小时。将因此形成的氯化单鏻通过过滤分离，然后在14℃下用Na2CO3(20.03g,189.02mmol,1.20当量)/MeOH(250mL)–H2O(250mL)的溶液处理。在18小时后，沉淀出现，并从所述溶液过滤以得到呈白色固体的化合物2(55.57g,82.78％)。
1.16.2化合物4的制备
向N-丁-3-烯基氨基甲酸叔丁酯(3.16g,18.42mmol,1.30当量)于THF(20mL)中的混合物在-78℃下在N2下添加n-BuLi(2.5M,14.74mL,2.60当量)。将混合物在-20℃下搅拌1小时。然后将于THF(20mL)中的1-氯-3-(三苯基膦烯)丙-2-酮(5.00g,14.17mmol,1.00当量)在-78℃下在N2下添加至混合物。将混合物在-20℃下搅拌3小时。将所得混合物倾倒至水(30mL)中并搅拌20分钟。将水相用EA(10mL)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(20mL*2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝1/1)纯化以得到呈黄色固体的丁-3-烯-1-基(2-氧代-3-(三苯基膦烯)丙基)氨基甲酸叔丁酯(5.80g,11.90mmol,83.98％产率)。
1.16.3化合物5的制备
向N-丁-3-烯基-N-[2-氧代-3-(三苯基-膦烯)丙基]氨基甲酸叔丁酯(5.80g,11.90mmol,1.00当量)于THF(30mL)中的混合物在18℃下一次性添加HCHO(96.58g,1.19mol,100.00当量)。将混合物在18℃下搅拌15小时。TLC显示反应完成。将混合物用PE(100mL*3)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(200mL*2)洗涤，经无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝50/1,40/1)纯化以得到呈黄色固体的N-丁-3-烯基-N-(2-氧代丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯(1.40g,5.85mmol,49.16％产率)。
1.16.4化合物6的制备
向N-丁-3-烯基-N-(2-氧代丁-3-烯基)氨基甲酸叔丁酯(1.50g,6.27mmol,1.00当量)于DCM(250mL)中的混合物在18℃下在N2下一次性添加Zhan催化剂1B(150.00mg,204.43umol,0.03当量)。将混合物在18℃下搅拌10小时。TLC显示反应完成。将混合物真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝30/1,20/1)纯化以得到呈黄色固体的6-氧代-3,7-二氢-2H-氮杂-1-甲酸叔丁酯(850.00mg,4.02mmol,64.17％产率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)6.36-6.64(m,1H),5.88-6.14(m,1H),4.23-4.35(m,1H),4.16(s,1H),3.51-3.68(m,2H),2.62-2.78(m,2H),1.46(d,J＝17.32Hz,1H)
1.16.5化合物7的制备
向6-氧代-3,7-二氢-2H-氮杂-1-甲酸叔丁酯(540.00mg,2.56mmol,1.00当量)于BnOH(2.76g,25.56mmol,10.00当量)中的混合物在N2下一次性添加t-BuOK(28.68mg,255.61umol,0.10当量)。将混合物在20℃下搅拌12小时。LCMS显示反应完成。将混合物倾倒至水(100mL)中并搅拌20分钟。将水相用EA(40mL*2)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(20mL*3)洗涤，用无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩以得到呈黄色油状物的5-苄基氧基-3-氧代-氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(1.50g,粗)。
1.16.6化合物8的制备
向叔丁基5-苄基氧基-3-氧代-氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(700.00mg,2.19mmol,1.00当量)于EtOH(30mL)中的混合物在N2下一次性添加NaBH4(99.49mg,2.63mmol,1.20当量)。将混合物在18℃下搅拌6小时。TLC显示反应完成。将混合物倾倒水(150mL)并搅拌20分钟。将水相用EA(90mL*2)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(80mL*2)洗涤、用无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝10/1,2/1)纯化以得到呈黄色油状物的5-苄基氧基-3-羟基-氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(510.00mg,1.59mmol,72.55％产率)，其通过制备-HPLC(FA)纯化以得到193mg(D1)和190mg(D2)。
1.16.7化合物9的制备
向5-苄基氧基-3-羟基-氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(200.00mg,622.26umol,1.00当量,D2)于DCM(20mL)中的混合物在78℃下在N2下添加DAST(200.60mg,1.24mmol,2.00当量)。将混合物在-78℃下搅拌1小时。TLC显示反应完成。将混合物倾倒至饱和NaHCO3(10mL)中并搅拌5分钟。将水相用DCM(10mL*2)萃取。将合并的有机相用NaClO4(5mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝15/1)纯化以得到呈黄色油状物的5-苄基氧基-3-氟-氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(163.00mg,504.02umol,81.00％产率,D2)。
1.16.8化合物10的制备
向5-苄基氧基-3-氟-氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(163.00mg,504.02umol,1.00当量,D2)于MeOH(20mL)中的溶液在N2下添加Pd(OH)2(30.00mg,N/A)。将混悬液真空脱气并用H2吹扫数次。将混合物在H2(15psi)下在20℃下搅拌12小时。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)显示原料完全耗尽。将反应混合物过滤并将滤液浓缩以得到呈黄色油状物的3-氟-5-羟基-氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(115.00mg,492.97umol,97.81％产率,D2)。
1.16.9 A28的制备
向3-氟-5-羟基-氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(115.00mg,492.97umol,1.00当量,D2)于DCM(3mL)中的混合物在25℃下在N2下添加TFA(1mL)。将混合物在25℃下搅拌2小时。TLC显示反应完成。将混合物真空浓缩以得到呈黄色油状物的6-氟氮杂环庚-4-醇(240.00mg,粗,D2)。
1.17 A29的制备
1.17.1化合物3的制备
向化合物1(8.7g,65.7mmol)于DMF(120mL)中的溶液添加化合物2(3.5g,32.7mmol)，然后添加K2CO3(9.06g,65.7mmol)。将混合物加热至100℃持续16小时。将混合物用EA(100mL)稀释，并用H2O(100mLx 3)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过柱色谱纯化以得到呈无色油状物的所需产物3(5.1g,72.5％)。LCMS:256[M+1]。
1.17.2化合物4的制备
向化合物3(1.5g,6.97mmol)于甲苯(15mL)中的溶液添加CbzCl(1.42g,8.37mmol)。将混合物加热至110℃持续16小时。将混合物真空浓缩。将残余物用水和EA溶解。将有机层用水性Na2CO3洗涤、经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过柱色谱纯化以得到呈无色油状物的所需产物4(1.24g，产率：68.9％)。LCMS:260[M+1]。
1.17.3化合物5的制备
向化合物4(1.0g,3.86mmol)于DCM(60mL)中的溶液添加二氯化物Zhan催化剂1B(150mg,CAS:918870-76-5)。将混合物用N2吹扫10分钟并在20℃下搅拌16小时。将混合物真空浓缩以得到粗产物，其通过柱色谱纯化以得到呈无色油状物的所需产物5(800mg,产率:89.7％)。LCMS:232[M+1]。
1.17.4化合物6的制备
向化合物5(800mg,3.46mmol)于DCM(30mL)中的溶液添加m-CPBA(774mg,4.5mmol)。将混合物在室温下搅拌5小时。将溶液用水性Na2SO3猝灭并用DCM(60mL*2)萃取。将有机合并相经Na2SO4干燥并浓缩以得到呈无色油状物的所需化合物7(812mg，产率：95.9％)。LCMS:248[M+1]。
1.17.5化合物7的制备
将化合物7(812mg,3.31mmol)溶解于MeOH(10mL)中让，然后添加浓H2SO4(200mg)。将混合物在室温下搅拌1小时。将溶液用水性Na2CO3中和至pH＝7。将所得混合物真空浓缩。将残余物用EA(60mL*2)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过柱色谱纯化以得到呈无色油状物的所需产物8(778mg，产率：84.9％)。LCMS:280[M+1]。
1.17.6 A29的制备
向化合物7(778mg,2.8mmol)于MeOH(70mL)中的溶液在N2下添加Pd(OH)2/C(100mg)。将混合物在H2气球下在23℃下搅拌2小时。将混合物过滤，浓缩滤液以得到所需产物8(310mg，产率：78％)。
1.18 A20/A21的制备
1.18.1化合物2/2′的制备
向化合物1(1.8g,5.8mmol)于THF(40mL)中的溶液在0℃下添加BH3.Me2S(1.2mL,10M)，并将混合物在16℃下搅拌12小时。在0℃下向反应混合物添加NaOH(2.3mL,3M)和H2O2(3.3g,29.0mmol)，并将混合物在16℃下搅拌12小时。将所得混合物用Na2SO3(饱和)猝灭并用EA(150mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到化合物2和化合物2′(1.8g，粗)，其直接用于下一步。
1.18.2化合物3/3′的制备
向化合物2和化合物2′(1.8g,粗)于DCM(40mL)中的溶液在0℃下添加戴斯马丁(3.5g,8.2mmol)，并将混合物在16℃下搅拌16小时。将所得混合物用Na2SO3(饱和)猝灭并用DCM(100mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到化合物3(0.58g,32％)1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.39–8.42(m,2H),8.02–8.05(m,2H),3.73–3.78(m,1H),3.60–3.65(m,2H),3.51–3.56(m,2H),3.38(s,3H),2.90–2.97(m,2H),2.67–2.70(m,2H)和化合物3′(0.86g,48％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝8.39–8.43(m,2H),8.02–8.05(m,2H),4.04–4.09(m,1H),3.72–3.77(m,1H),3.64–3.68(m,2H),3.38(s,3H),3.20–3.30(m,1H),2.63–2.69(m,2H),2.09–2.19(m,1H),1.76–1.79(m,1H)。
1.18.3化合物4′的制备
向化合物3′(0.86g,2.6mmol)于EtOH(15mL)中的溶液在0℃下添加NaBH4(0.15g,3.9mmol)，并将混合物在18℃下搅拌1小时。将所得混合物用NH4Cl(饱和)猝灭并用EA(100mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到化合物4′(0.86g,粗)，其直接用于下一步。
1.18.4化合物5′的制备
向化合物4′(0.86g,2.6mmol)于DMF(10mL)中的溶液在0℃下添加LiOH.H2O(0.64g,15.6mmol)和HSCH2COOH(0.48g,5.3mmol)，并将混合物在16℃下搅拌2小时。然后添加Boc2O(0.85g,5.3mmol)，并将混合物再搅拌1小时。将所得混合物用NaClO(水性)猝灭并用EA(100mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到所需产物(0.39g,61％)。
1.18.5 A20的制备
向化合物5′(390mg,1.6mmol)于DCM(5mL)中的溶液添加TFA(3mL)并在16℃下搅拌0.5小时。真空浓缩反应混合物以得到粗产物(360mg，含有TFA)。
1.18.6化合物4的制备
向化合物3(0.58g,1.8mmol)于EtOH(10mL)中的溶液在0℃下添加NaBH4(0.10g,2.7mmol)，并将混合物在18℃下搅拌1小时。将所得混合物用NH4Cl(饱和)猝灭并用EA(100mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩为粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到所需产物(0.47g,81％)。
1.18.7化合物5的制备
向化合物4(0.47g,1.4mmol)于DMF(10mL)中的溶液在0℃下添加LiOH.H2O(0.35g,8.5mmol)和HSCH2COOH(0.26g,2.8mmol)，并将混合物在16℃下搅拌2小时。然后添加Boc2O(0.47g,2.1mmol)，并将混合物再搅拌1小时。将所得混合物用NaClO(水性)猝灭并用EA(100mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到所需产物(0.20g,57％)。
1.18.8 A21的制备
向化合物5(201mg,0.82mmol)于DCM(3mL)中的溶液添加TFA(3mL)并在16℃下搅拌0.5小时。真空浓缩反应混合物以得到粗产物(182mg,TFA)。
1.19化合物A34的制备
1.19.1化合物3的制备
向化合物1(50.00g,310.17mmol,1.00当量)于DMF(500mL)中的溶液，将混合物冷却至-10℃，然后添加NaH(27.29g,682.37mmol,2.20当量)，将混合物在0℃下搅拌40分钟，并在-5～0℃下滴加化合物2(38.77g,310.17mmol,1.00当量)，将混合物在18℃下搅拌3小时，TLC(PE:EA＝3:1)显示反应完成，将反应溶液倾倒至冰水中，用EA(200mL)萃取并用更多的水(300*3)洗涤有机相、经NaSO4干燥、浓缩。将残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝5/1)纯化以得到呈黄色固体的化合物3(30.00g,140.67mmol,45.35％产率)。
1.19.2化合物4的制备
向化合物3(1.00g,4.69mmol,1.00当量)于DCM(10mL)中的溶液添加m-CPBA(1.21g,7.04mmol,1.50当量)，将混合物在18℃下搅拌2小时，TLC(PE:EA＝3:1)显示反应完成，将混合物用NaSO3(30mL*5)洗涤，将有机相干燥并浓缩。将残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝10/1)纯化以得到呈无色油状物的化合物4(700.00mg,3.05mmol,65.10％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.91-3.54(m,8H),2.78-2.73(m,2H),1.48(s,9H)。
1.19.3化合物5的制备
将化合物4(600.00mg,2.62mmol,1.00当量)添加至HF-Et3N(15mL)中，将混合物在18℃下搅拌12小时，TLC(PE:EA＝3:1)显示反应几乎完成，将混合物倾倒至冰饱和NaHCO3(80mL)中，用EA(80mL*2)萃取，用盐水洗涤。将残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝7/1)纯化以得到呈无色油状物的化合物5(190.00mg,762.20umol,29.09％产率)。
1.19.4化合物A34的制备
将化合物5(190.00mg,762.20umol,1.00当量)添加HCl-二噁烷(5mL)并在17℃下搅拌30分钟，TLC(PE:EA＝1:1)显示反应完成，将混合物浓缩以得到化合物B(100.00mg,670.42umol,87.96％产率)。
1.20化合物A35/36的制备
1.20.1化合物2的制备
向甲基溴化镁(2.5M,4.46mL,3.00当量)于THF(30mL)中的溶液在N2下在0℃下添加化合物1(800.00mg,3.72mmol,1.00当量)，并且将温度保持在0-5℃，将混合物在室温下搅拌2小时，TLC(PE:EA＝3:1)显示反应几乎完成，将所述溶液倾倒至冰饱和NH4Cl(50mL)中，用EA萃取并浓缩。将残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝5/1纯化，以得到呈无色油状物的化合物2(560.00mg,2.42mmol,65.09％产率)。
1.20.2化合物A35的制备
向化合物2(560.00mg,2.42mmol,1.00当量)于MeOH(10mL)中的溶液添加HCl-MeOH(10mL)，将混合物在室温下搅拌30分钟，TLC(PE:EA＝1:1)显示反应完成，将混合物浓缩以得到呈浅黄色固体的化合物A(530.00mg，粗)。
1.21 A62的制备
1.21.1化合物3的制备
向乙烯基溴化镁(9.15g,69.69mmol)于THF(20mL)中的溶液在N2下在-10℃下添加化合物1(3.0g,13.94mmol)。然后将混合物在25℃下搅拌3小时。TLC监测反应完成。将混合物倾倒至水性NH4Cl(300mL)中并搅拌20分钟。将水相用EA(100mL*3)萃取。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝6/1,5/1)纯化以得到呈黄色油状物的所需产物化合物3(2.05g,8.43mmol,60.44％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm:5.93(dd,J＝17.1,10.7Hz,1H),5.39-5.56(m,1H),5.19(d,J＝10.8Hz,1H),3.63-3.97(m,5H),3.08-3.59(m,3H),1.41-1.60(m,9H)。
1.21.2化合物4的制备
向化合物3(500mg,2.06mmol)于THF(10mL)中的溶液在0℃下添加BH3/Me2S(0.5mL,5.14mmol,10M)，然后缓慢升温至25℃，并将反应混合物在25℃下搅拌12小时。在0℃下将溶液倾倒至水性NaOH(3.0mL,10.3mmol,3M)中，然后是H2O2(1.17g,10.3mmol,30％)。将混合物在25℃下搅拌1小时，TLC监测反应完成。将反应混合物用水性Na2SO3(50mL*2)洗涤，通过EA(80mL*3)萃取。将有机层浓缩以得到粗产物，其通过柱色谱(PE:EA＝5:1,2:1)纯化以得到所需产物(210mg,39％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm:3.31-4.02(m,9H),3.06-3.29(m,2H),1.69-1.93(m,2H),1.46-1.54(m,9H)
1.21.3化合物5的制备
向化合物4(210mg,0.8mmol)于THF(8mL)中的溶液在0℃下添加NaH(48mg,1.2mmol,60％)。在搅拌30分钟后，滴加MeI(0.8mmol)于THF(2mL)中的溶液，并在25℃下搅拌2小时。TLC监测到反应完成。将混合物倾倒至水中并用EA萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥并真空浓缩。将残余物通过柱色谱(PE/EA＝5/1,3/1)纯化以得到所需产物化合物5(90mg,41％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm:3.25-3.94(m,14H),1.75-1.89(m,3H),1.43-1.56(m,9H)
1.21.4 A62的制备
向化合物5(350mg,1.27mmol)于DCM(2mL)中的溶液添加TFA(2mL)。将形成的混合物搅拌2小时，并浓缩以得到可直接用于下一步的所需产物(210mg,94％)。
1.22 A37的制备
1.22.1化合物2的制备
向化合物1(400mg,1.84mmol)于DCM(4mL)中的溶液添加TEA(557.5mg,5.52mmol)、Ac2O(376mg,3.69mmol)，然后添加DMAP(44.9mg,0.33mmol)。将混合物在12℃下搅拌2小时。将混合物用EA(50mL*2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，浓缩以得到粗产物，其通过硅胶上的色谱纯化以得到呈无色油状物的化合物2(450mg,94.4％)。
1.22.2 A37的制备
将化合物2用HCl/二噁烷(4M)处理以得到化合物3。
1.23 A38-41的制备
1.23.1化合物2的制备
向化合物1(2.36g,10.95mmol)于DMF(23mL)中的溶液在0℃下分批添加NaH(1.26g,31.5mmol)。将混合物在0℃下搅拌40分钟。在0℃下滴加RX(219mmol)。将混合物在19℃下搅拌1小时。经混合物倾倒至冰水中，用EA稀释。将合并的有机层用H2O洗涤，经Na2SO4干燥，且在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱纯化以得到化合物2。
1.23.2 A38-41的制备
向化合物2(7.73mmol)于二噁烷(2mL)中的溶液添加HCl/二噁烷(4M)(2mL)。将混合物在19℃下搅拌1小时。将混合物真空浓缩以得到化合物A38-41。
1.24用于制备A42的程序
1.24.1化合物2的制备
向化合物1(3.0g,13.9mmol)于甲苯(30mL)中的溶液添加Na2CO3(736.7mg,69.5mmol)，然后添加[Ir(COD)Cl]2(189mg,0.28mmol)。将混合物真空脱气并用N2吹扫数次。通过注射器添加乙酸乙烯酯(4.78g,55.5mmol)。将反应混合物加热至110℃持续16小时。将混合物冷却至11℃并用EA萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥并浓缩。将残余物通过柱色谱纯化以得到呈无色油状物的化合物1(1.0g,29.8％)。
1.24.2化合物3的制备
向化合物2(1.0g,4.2mmol)于THF(5.0mL)中的溶液添加Pd(OAc)2(189.8mg,0.84mmol)，然后添加CH2N2/Et2O(100mL)。将混合物在8℃下搅拌16小时。将混合物用水性HCl(10mL)(3N)猝灭。将混合物用EA萃取。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩。将残余物溶解于THF/H2O(10mL/10mL)中并添加NaIO4(1.8g,8.4mmol)和KOsO4.2H2O(66.2mg,0.21mmol)。将混合物在8℃下搅拌40分钟。将混合物用EA萃取。将有机层用水性Na2SO3洗涤。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩。将残余物通过柱色谱PE:EA＝15:1纯化以得到呈褐色油状物的化合物3(240mg,22.4％)
1.24.3 A42的制备
向化合物3(100mg,0.39mmol)于DCM(2mL)中的溶液添加TFA(2mL)。将混合物在8℃下搅拌2小时。将混合物真空浓缩以得到呈褐色油状物的化合物3(91mg，粗)。
1.25 A43的制备
1.25.1化合物2的制备
向化合物1(10g,129.8mmol)于DCM(150mL)中的溶液添加Boc2O(28g,129.8mmol)，然后添加TEA(19.7g,194.7mmol)。将混合物在12℃下搅拌16小时。将混合物浓缩以得到粗产物，其通过硅胶PE:EA(10:1)上的色谱纯化以得到呈无色油状物的化合物2(18.3g,79.9％)。
1.25.2化合物4的制备
将于EtOH(12mL)中的化合物2(1.0g,6.2mmol)和化合物3(960.8mg,10.5mmol)冷却至0℃并用K2CO3(960.8mg,6.96mmol)处理。将混合物在12℃下搅拌16小时。将混合物用EA(100mL)稀释并通过硅藻土过滤。将挥发物减压去除以得到呈无色油状物的化合物4(1.4g,83.8％)。
1.25.3化合物5的制备
向化合物4(500mg,2.14mmol)于DMF(6mL)中的溶液在-5℃下分批添加NaH(246.7mg,6.4mmol)。在0℃下搅拌30分钟后，使得混合物在16℃下搅拌2小时。将混合物搅拌倾倒至冰水中，用EA(30mL*2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥、浓缩以得到粗产物，其通过硅胶PE:EA(15:1)上的色谱纯化以得到呈核酸油状物的化合物5(140mg，粗)。
1.25.4 A42的制备
将化合物5用HCl/MeOH(4M)处理以得到化合物D。
1.26用于A44的程序
1.26.1化合物3的制备
将化合物1(4.0g,37.3mmol)和化合物2(10g,74.7mmol)、K2CO3(12.9g,93.4mmol)于DMF(100mL)中的混合物在120℃下加热16小时。将混合物倾倒至水(200mL)中，用EA(100mL x 3)萃取，并将有机层用盐水(150mL)洗涤、经Na2SO4干燥并浓缩至干燥。将残余物通过硅胶色谱(PE:EA＝1:1至PE:EA＝1:0)纯化以得到呈褐色油状物的所需化合物3(5.1g,63.5％)。
1.26.2化合物4的制备
将化合物3(5.1g,23.7mmol)和CbzCl(4.4g,26.1mmol)于甲苯(100mL)中的溶液在110℃下加热16小时。任何将混合物浓缩至干，将残余物通过硅胶色谱(PE:EA＝5:1至PE:EA＝2:1)纯化以得到呈褐色油状物的所需化合物4(4.5g,72.5％)。
1.26.3化合物5的制备
向化合物4(4.5g,17.3mmol)于DCM(350mL)中的溶液添加Zhan催化剂(22.1mg,0.86mmol)，将混合物在25℃-30℃下搅拌16小时。将混合物浓缩至干。将残余物通过硅胶色谱(PE:EA＝20:1至PE:EA＝10:1)纯化以得到呈无色油状物的所需化合物5(2.7g,71.5％)。
1.26.4化合物6的制备
将NaHCO3(2.43g,29.1mmol)和RuCl3(200mg,1.08mmol)于EA/MECN/H2O(72ml/72ml/12ml)中的混合物添加过硫酸氢钾复合盐(35.3g,58.0mmol)，然后将化合物5(2.7g,11.6mmol)添加至以上混合物中。并且将反应物在40℃下搅拌10分钟，将混合物过滤并将滤液用Na2SO3(100ml)洗涤，将有机层经Na2SO4干燥并浓缩至干。将残余物用硅胶上的柱色谱纯化(PE:EA＝5:1至1:1)以得到呈无色油状物的化合物6(1.7g,54.5％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.41-7.28(m,5H),5.21-5.06(m,2H),4.45(t,J＝10.0Hz,1H),4.32-4.16(m,1H),4.16-4.00(m,2H),3.84(d,J＝15.1Hz,1H),3.34-3.10(m,2H),3.00-2.55(m,2H),2.18-2.07(m,1H),1.81-1.62(m,1H)
1.26.5化合物7的制备
向化合物6(1.7g,6.50mmol)于DCM(20mL)中的混合物一次性添加DMAP(1.2g,9.7mmol)，然后添加Ac2O(0.8g,7.8mmol)。将混合物在40℃下搅拌16小时。将混合物浓缩至干燥。将残余物用硅胶上的柱色谱(PE:EA＝5:1至3:1)纯化以得到呈无色油状物的化合物7(1.5g,79.5％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.43-7.30(m,5H),5.30-5.23(m,1H),5.18-5.07(m,2H),4.10-3.89(m,2H),3.75(t,J＝6.5Hz,1H),3.53-3.30(m,2H),2.89-2.61(m,2H),2.04-1.90(m,2H),1.86(td,J＝3.3,6.5Hz,1H)
1.26.6化合物8的制备
向化合物7(1.7g,4.9mmol)于DCM(15mL)中的溶液在-60℃下经过30分钟的时间在N2下滴加DAST(3.18g,19.6mmol)于DCM(5mL)中的溶液。将反应混合物在40℃下再搅拌12小时。TLC(PE:EtOAc＝1:1)显示原料完全耗尽。将反应物倾倒至水中，然后用DCM(50mL*3)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(50mL*2)洗涤、经无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱硅胶(PE/EA＝3/1,1/1)纯化以得到呈黄色油状物(soil)的化合物8(0.71g,44.31％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ＝7.42-7.30(m,5H),5.25-5.14(m,3H),3.75-3.58(m,2H),3.52-3.33(m,2H),2.50-2.29(m,1H),2.28-1.98(m,6H)
1.26.7化合物9的制备
向化合物8(770mg,2.35mmol)于MeOH(10mL)中的混合物一次性添加K2CO3(260mg,1.8mmol)，将混合物在40℃下搅拌1小时。将混合物倾倒至水(20ml)中、用EtOAc(20ml)萃取，将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤并浓缩至干燥以得到化合物9(560mg,83.3％)。
1.26.8 A44的制备
向化合物9(560mg,1.96mmol)于MeOH(10mL)中的溶液在N2下添加Pd(OH)2/C(10％,56mg)。将混悬液真空脱气并用H2吹扫数次。将混合物在H2(50psi)下在40℃下搅拌16小时。TLC(PE:EtOAc＝1:1)显示原料完全耗尽。过滤反应混合物并将滤液浓缩以得到呈黄色固体的化合物B(280mg,95.53％产率)。
1.27 A45的制备
1.27.1化合物3的制备
向化合物1(20.00g,119.31mmol,HCl盐)于MeOH(200mL)中的混合物在16℃下一次性添加TEA(12.07g,119.31mmol)和化合物2(12.66g,119.31mmol,1.00当量)。将混合物在16℃下搅拌16小时。在0℃下向混合物分批添加NaBH4(2.71g,71.59mmol)。将混合物在16℃下搅拌1小时。将混合物用H2O(50mL)猝灭。将混合物浓缩并通过快速色谱纯化以得到呈白色固体的化合物3(15.60g,50.73％产率)。
1.27.2化合物5的制备
向化合物3(9.00g,31.27mmol,)和化合物4(3.73g,31.27mmol)于MeOH(90mL)/H2O(10mL)中的混合物添加Na2CO3(3.98g,37.53mmol)，然后在16℃下在N2下一次性添加福尔马林(3.30g,40.66mmol)。将混合物在16℃下搅拌16小时。将混合物用EA(400mL*3)萃取。将合并的有机相用无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩以得到呈褐色油状物的化合物5(8.90g,74.42％)。
1.27.3化合物7的制备
向Zn(3.08g,47.06mmol)于THF(90mL)中的混合物在低于30℃下在N2下缓慢添加TMSCl(2.68g,24.71mmol,1.05当量)。将混合物在20℃下搅拌10分钟。在低于30℃下在N2下缓慢添加化合物6(5.25g,25.89mmol,1.10当量)。将混合物在20℃下再搅拌10分钟。缓慢添加化合物5(9.00g,23.53mmol,1.00当量)于THF(10mL)中的溶液。同时保持内部温度低于30℃。将混合物在20℃下再搅拌16小时。将混合物用水性NaHCO3(5mL)猝灭。将沉淀物通过过滤去除。将滤液用EA(100mL*2)萃取。将合并的有机相用1M HCl(10mL*2)洗涤、经无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱纯化以得到呈无色油状物的化合物7(4.00g,44％)。
1.27.4化合物8的制备
向化合物7(4.00g,10.32mmol)于THF(80mL)中的溶液在15℃下一次性添加t-BuOK(1.74g,15.49mmol)。将混合物在15℃下搅拌3小时。将混合物倾倒至水性NH4Cl中并用EA(10mL*2)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(200mL*2)洗涤、用无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱纯化以得到呈黄色油状物的化合物8(2.50g,70.97％)。
1.27.5化合物9的制备
将化合物8(2.50g,7.32mmol)溶解于HCl(50mL)中。将混合物加热至100℃并搅拌16小时。将混合物冷却至25℃并真空浓缩以得到呈褐色油状物的化合物9(1.52g,72％)。
1.27.6化合物10的制备
向化合物9(1.52g,5.29mmol)于MeOH(5mL)中的溶液在0℃下分批添加NaBH4(200.14mg,5.29mmol)。将混合物在15℃下搅拌16小时。然后将混合物倾倒至水性NH4Cl中并用EA(10mL*2)萃取。将合并的有机相用无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩以得到呈黄色油状物的化合物10(1.39g,96.85％)。
1.27.7化合物A45的制备
向化合物10(1.39g,5.12mmol)于MeOH(60mL)中的溶液在N2下添加Pd(OH)2/C(10％,0.2g)。将混悬液真空脱气并用H2吹扫数次。将混合物在H2(15psi)下在15℃下搅拌3小时。TLC(PE:EtOAc＝3:1)显示原料完全耗尽。过滤反应混合物并浓缩滤液。将粗产物通过硅胶色谱纯化以得到呈无色油状物的化合物A(511.00mg,66.03％)。
1.27 A46的制备
用于制备胺B的程序与胺A类似。LDA用于从化合物5至化合物6的环化步骤。
1.28 A47的制备
1.28.1化合物2的制备
向化合物1(5.00g,17.52mmol,)于DMF(50mL)中的溶液添加K2CO3(4.84g,35.04mmol)，然后在0℃下添加分批MeI(3.73g,26.28mmol)。将混合物在室温下搅拌16小时。TLC显示反应完成。将混合物冷却至室温并在60℃下减压浓缩。将残余物倾倒至冰水(w/w＝1/1)(150mL)中并搅拌20分钟。将水相用EA(400mL*3)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(200mL*2)洗涤、用无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱纯化以得到呈黄色固体的化合物2(3.60g,68.64％)。
1.28.2化合物3的制备
向化合物2(15.00g,50.11mmol,1.00当量)于MeOH(100mL)中的溶液添加于H2O(35mL)中的KOH(5.62g,100.21mmol,2.00当量)。将混合物加热至60℃持续3小时。将混合物冷却至室温并倾倒至水性NH4Cl中。将混合物用EA(50mL*3)萃取。将合并的有机相用无水Na2SO4干燥、过滤并真空干燥以得到呈褐色油状物的化合物3(9.00g,79.02％)。
1.28.3化合物4的制备
向化合物3(10.00g,43.99mmol)于甲苯(100mL)中的溶液在0℃下添加t-BuOK(7.40g,65.99mmol。将混合物在15℃下搅拌16小时。将混合物用EA萃取。将EA层用10％水性NaOH(50mL*3)洗涤。合并水层并调节PH＝4且用EA(100mL*3)萃取。将EA层经Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩以得到呈黄色油状物的化合物4(10.00g,89.04％)。
1.28.4化合物6的制备
向化合物4(9.00g,35.25mmol)于丙酮(100mL)中的溶液添加K2CO3(9.74g,70.50mmol)，然后添加化合物5(8.99g,52.88mmol)。将混合物在60℃下回流16小时。TLC显示反应完成。将混合物用EA(100mL*3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥、过滤并浓缩以得到残余物产物，其通过快速色谱纯化以得到呈黄色油状物的化合物6(7.80g,74.41％)。
1.28.5化合物7的制备
向二异丙基胺(6.18g,61.03mmol)于THF(80mL)中的溶液在-70℃下滴加n-BuLi(2.5M,22.19mL)。将混合物在-10℃下在N2下搅拌30分钟。在-70℃下滴加于THF(80mL)中的化合物6(5.50g,18.49mmol)。当完全添加时，将混合物在-30--20℃下搅拌30分钟。然后在-70℃下滴加CH3I(7.88g,55.48mmol,3.00当量)。使混合物在20℃下搅拌3小时。TLC显示原料近乎耗尽。将混合物倾倒至水性NH4Cl中并用EA(40mL*3)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(20mL*2)洗涤、用无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩至粗产物，其通过快速色谱纯化以得到呈黄色油状物的化合物7(1.50g,26.07％)。
1.28.6化合物8的制备
向化合物7(800.00mg,2.6mmol)于EtOH(10mL)中的溶液添加于H2O(0.8mL)中的NaOH(205.69mg,5.22mmol,)。将混合物在90℃下搅拌16小时。TLC显示原料耗尽。将混合物调节至pH＝7且用DCM萃取。将有机层真空浓缩以得到化合物8(900.00mg，粗)。
1.28.7化合物9的制备
向化合物8(900.00mg,3.73mmol)于THF(10mL)中溶液在0℃下一次性添加LiBH4(243.72mg,11.19mmol)。将混合物在20℃下搅拌1小时。然后将混合物用水性NH4Cl猝灭并用EA(50mL*2)萃取。将合并的有机相用无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱纯化以得到呈黄色油状物的化合物9(570.00mg,62.80％)。
1.28.8 A47的制备
将化合物5用HCl/二噁烷(4M)处理以得到化合物B。
1.29 A48/49的制备：
1.29.1化合物2的制备
向Mg(31.20g,1.30mol)和I2(10mmol)于THF(700mL)中的混合物在40℃下滴加于THF(700mL)中的化合物1(130.00g,963mmol)。当在1.5小时后完全添加时。将混合物在50℃下搅拌1小时。在-10℃下滴加于THF(700mL)中的丙酮(75.50g,1.30mol)。然后将混合物在20℃下再搅拌2小时。将混合物用水性NH4Cl猝灭并用DCM(200mL)萃取。将混合物在常压(190℃)下蒸馏以得到呈无色油状物的化合物2(60.00g,52.55％)。
1.29.2化合物3的制备
向化合物2(7.00g,61.30mmol)于TFA(104.84g,919.50mmol,15.00当量)中的溶液一次性添加2-氯乙腈(13.88g,183.90mmol)。将混合物加热至70℃持续16小时。将混合物用水性Na2CO3调节pH＝7并用EA萃取。将有机层浓缩并通过快速色谱纯化以得到呈黄色油状物的化合物3(4.20g,36％)。
1.29.3化合物4的制备
向化合物3(4.20g,22.14mmol)于EtOH(40mL)中的溶液添加硫脲(2.02g,26.57mmol)。将混合物在100℃下搅拌2小时。然后将混合物通过TLC检测。TLC显示SM耗尽。向混合物添加HOAc(8mL)并加热至90℃持续16小时。将混合物用水性Na2CO3调节PH＝12并添加CbzCl(7.55g,44.28mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物通过TLC)检测。TLC显示具有DP。将混合物用EA(500mL*2)萃取。将合并的有机相用无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱纯化以得到呈黄色油状物的化合物4(5.10g,93.14％)。
1.29.4化合物6的制备
向化合物4(5.00g,20.22mmol)于DMF(50mL)中的溶液在0℃下在N2下分批添加NaH(1.37g,34.37mmol)。当完全添加是。将混合物在5℃下搅拌30分钟。在0℃下滴加化合物5(4.89g,40.44mmol,2.00当量)。将混合物在27℃下搅拌4小时。将混合物通过TLC检测。TLC显示SM不完全耗尽。将混合物在27℃下持续搅拌2小时。将混合物倾倒至冰水中并用EA(200mL*2)萃取。将合并的有机层用水(100mL*3)洗涤、用无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱纯化以得到呈黄色固体的化合物6(3.20g,55.07％)。
1.29.5化合物7的制备
向化合物6(3.20g,11.13mmol)于DCM(60mL)中的溶液在N2下添加第二代格拉布(Grubb’s 2st)(320.00mg,388.85umol)。将混合物在28℃下在N2下搅拌16小时。将混合物通过TLC检测。TLC显示SM完全耗尽。过滤混合物。将滤液真空浓缩以得到残余物，其通过硅胶色谱纯化以得到呈黄色油状物的化合物7(2.70g,93.54％)。
1.29.6化合物8A、8B的制备
向化合物7(2.70g,10.41mmol)于THF(30mL)中的溶液在0℃下在N2下滴加BH3-Me2S(10M,3.12mL)。将混合物在29℃下搅拌16小时。然后将混合物在0℃下滴加至于H2O(4mL)中的水性NaOH(2.08g,52.05mmol,5.00当量)中。将H2O2(N/A,52.05mmol,5.00当量)缓慢添加至混合物中。然后将混合物在29℃下搅拌3小时。将混合物通过TLC检测。TLC显示SM完全耗尽。将混合物用水性Na2SO3猝灭并用EA(60mL*2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩。将残余物产物通过柱色谱纯化以得到呈无色油状物的化合物8A(700.00mg,24.24％)和呈无色油状物的化合物8B(1.20g,41.56％)。
1.29.7化合物A48的制备
向f化合物8A(700.00mg,2.52mmol)于MeOH(40mL)中的溶液在N2下添加Pd/C(10％,80mg)。将混悬液真空脱气并用H2吹扫数次。将混合物在H2(15psi)下在27℃下搅拌2小时。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1:1)显示原料完全耗尽。过滤反应混合物并将滤液浓缩以得到呈黄色油状物的化合物A48(320.00mg,88.66％)。
化合物A49was氢化from 8B.
1.30 A50的制备
1.30.1化合物2的制备
向化合物1(5.0g,44.2mmol)于THF(100mL)中的溶液在-5℃下分批添加NaH(2.6g,66.3mmol)，同时保持内部温度在-5～0℃之间。在0℃下搅拌30分钟后，滴加BnBr(6.8mL)。将混合物在16℃下搅拌16小时。将混合物搅拌倾倒至冰水中，用EA(100mL*2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥、浓缩以得到粗产物，其通过硅胶PE:EA(10:1)上的色谱纯化以得到呈无色油状物的化合物2(6.3g,70.8％)。
1.30.2化合物3的制备
向化合物2(2.03g,10.0mmol)于THF(50mL)中的溶液在-78℃下在N2气氛下滴加LDA(10mL)。在-78℃下搅拌1小时后，在-78℃下滴加碳酸二甲酯(1.8g,20.0mmol)。将混合物在16℃下搅拌2小时。将混合物用水性NH4Cl猝灭并用EA(100mL*2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥、浓缩以得到粗产物，其通过硅胶PE:EA(1:1)上的色谱纯化以得到呈无色油状物的化合物4(800mg,30.6％)。
1.30.3化合物5的制备
向LiAlH4(340mg,9.2mmol)于THF(10mL)中的溶液在-5℃下添加化合物4(800mg,3.06mmol)于THF(10mL)中的溶液，同时保持内部温度在-5～10℃之间。将混合物在0℃下搅拌3小时。缓慢添加H2O(0.5mL)，然后添加NaOH(15％,0.5mL)和H2O(1.5mL)。将所得的混合物过滤。用EA(50mL*2)萃取滤液。将合并的有机层经Na2SO4干燥、浓缩以得到呈无色油状物的化合物4(488mg,72.5％)。
1.30.4化合物A50的制备
向化合物4(488mg,2.23mmol)于MeOH(60mL)中的溶液在N2下添加Pd(OH)2(10％,50mg)。将混悬液真空脱气并用H2吹扫数次。将混合物在H2(15Psi)下在12℃下搅拌16小时。过滤混合物、浓缩滤液以得到化合物A(220mg,76.6％)。
1.31 A51的制备
1.31.1化合物4的制备
向化合物1(250mg,2.0mmol)于DCM(5mL)中的溶液添加TEA(0.3mL)，然后添加Boc2O(426mg,2.0mmol)。将混合物在12℃下搅拌2小时。将混合物浓缩并通过快速色谱纯化以得到化合物2(350mg,76.6％)。
1.31.2化合物5的制备
向化合物3(350mg,1.5mmol)于DCM(5mL)中的溶液添加戴斯马丁试剂(190mg,1.95mmol)。将混合物在12℃下搅拌2小时。将混合物用DCM(50mL)萃取并用水性NaHSO3洗涤数次并浓缩以得到化合物5(410mg，粗)。
1.31.3化合物4的制备
向MeMgBr(1.8mL,3M)于THF(3mL)中的溶液在0℃下滴加化合物3(410mg,粗)于THF(3mL)中的溶液。将混合物在12℃下搅拌2小时。将混合物用水性NH4Cl猝灭并用DCM(50mL)萃取、经Na2SO4干燥并浓缩以得到化合物6(340mg，粗)。
1.31.4化合物B的制备
将化合物2用TFA/DCM(1:1)处理以得到化合物B
1.32 A52的制备
向化合物1(2.60g,8.69mmol)于THF(30mL)中的溶液在0℃下一次性添加LiBH4(756.65mg,34.74mmol)。将混合物在15℃下搅拌16小时。TLC显示反应完成。将混合物用水性NH4Cl猝灭并用EA(50mL*3)萃取。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱纯化以得到呈无色油状物的化合物2(2.10g,93.18％)。将所得的固体用HCl/二噁烷处理以得到HCl盐。
1.33 A64的制备
1.33.1化合物2的制备
向1-氨基丙-2-醇(10.00g,133.14mmol,1.00当量)于DCM中的混合物在30℃下在N2下一次性添加Boc2O(29.06g,133.14mmol,1.00当量)。将混合物在30℃下搅拌5小时。TLC显示反应完成。将混合物浓缩以得到呈黄色油状物的N-(2-羟基丙基)氨基甲酸叔丁酯(23.00g,131.26mmol,98.59％产率)。
1.33.2化合物4的制备
向N-(2-羟基丙基)氨基甲酸叔丁酯(5.00g,28.54mmol,1.00当量)于DMF(100.00mL)中的混合物在0℃下在N2下一次性添加NaH(2.51g,62.79mmol,2.20当量)。将混合物在0℃下搅拌1小时，然后添加3-氯-2-(氯甲基)丙-1-烯(3.57g,28.54mmol,1.00当量)至混合物，将混合物在0℃下搅拌4小时。TLC显示反应完成。将混合物倾倒至水(100mL)中并搅拌5分钟。将水相用乙酸乙酯(100mL*2)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(100mL*2)洗涤、用无水Na2SO4干燥、浓缩并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化以得到呈黄色油状物的2-甲基-6-亚甲基-1,4-氧杂氮杂环庚烷-4-甲酸叔丁酯(2.20g,9.68mmol,33.91％产率)。
1.33.3化合物5的制备
向2-甲基-6-亚甲基-1,4-氧杂氮杂环庚烷-4-甲酸叔丁酯(2.40g,10.56mmol,1.00当量)于THF(50.00mL)中的混合物在at 30℃下在N2下一次性添加NaIO4(4.97g,23.23mmol,2.20当量)和K2OSO4(401.83mg,2.11mmol,0.20当量)。将混合物在30℃下搅拌5小时。TLC显示反应完成。将混合物倾倒至饱和NaSO3(100mL)中并搅拌5分钟。将水相用乙酸乙酯(30mL*2)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(30mL*2)洗涤、用无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝8/1)纯化以得到呈黄色油状物的2-甲基-6-氧代-1,4-氧杂氮杂环庚烷-4-甲酸叔丁酯(1.90g,8.29mmol,78.48％产率)。
1.33.4化合物6的制备
向2-甲基-6-氧代-1,4-氧杂氮杂环庚烷-4-甲酸叔丁酯(1.90g,8.29mmol,1.00当量)于EtOH(20.00mL)中的混合物在30℃下在N2下一次性添加NaBH4(376.33mg,9.95mmol,1.20当量)。将混合物在30℃下搅拌5小时。TLC显示反应完全。将混合物倾倒至饱和水(100mL)中并搅拌5分钟。将水相用乙酸乙酯(30mL*2)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(30mL*2)洗涤、用无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化以得到两点，第一点D1:494mg；第二点D2:656mg。
1.33.5 A64的制备
向6-羟基-2-甲基-1,4-氧杂氮杂环庚烷-4-甲酸叔丁酯(D1,494.00mg,2.14mmol,1.00当量)于MeOH(5.00mL)中的混合物在30℃下在N2下一次性添加HCl/MeOH(15.00mL)。将混合物在30℃下搅拌5小时。TLC显示反应完成。将混合物真空浓缩以得到呈黄色油状物的2-甲基-1,4-氧杂氮杂环庚烷-6-醇(385.00mg，粗)。
1.34 A65的制备
1.34.1用于制备化合物2的程序
在冰浴处，向化合物1(18g,0.24mol)和Et3N(29g,0.28mol)于DCM(180mL)中的溶液添加Boc2O(65g,0.28mol)。然后将混合物在室温下搅拌30分钟、用水洗涤并浓缩以得到粗产物，其通过硅胶色谱纯化以得到呈白色固体的所需产物(38.1g,90.7％)。
1.34.2用于制备化合物4的程序
在冰浴处，将化合物2(3.5g,20mmol)于DMF(30mL)中的溶液添加至NaH(1.76g,44mmol)于DMF(20mL)中的混合物内。在搅拌混合物30分钟后，将化合物3(2.5g,20mmol)添加并在室温下搅拌2小时、用NH4Cl溶液猝灭、用EA萃取、用水洗涤并浓缩以得到粗产物，其通过硅胶色谱纯化以得到呈油状物的纯产物(780mg,17.2％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm:4.94-5.10(m,2H),4.29-4.53(m,3H),4.07(d,J＝10.0Hz,1H),3.66-3.71(m,3H),1.43(m,9H),1.21(d,J＝7.1Hz,3H)。
1.34.3用于制备化合物5的程序
将化合物4(780mg,3.43mmol)、K2OsO4(54mg,0.20mmol)和NaIO4(1.69mg,7.90mmol)于THF-H2O(1:1,20mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。将混合物用EtOAc(50mL*2)萃取并将有机层浓缩以得到呈无油状物的粗产物(790mg)。
1.34.4用于制备化合物6的程序
将化合物5(787mg,3.43mmol)和NaBH4(130mg,3.43mmol)于MeOH(15mL)中的溶液在室温下搅拌30分钟、用NH4Cl溶液猝灭、蒸发溶剂、用EA(50mL*2)萃取并将有机层浓缩以得到粗产物，其通过硅胶色谱纯化以得到呈油状物的所需产物(517mg,65.2％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm:3.92-4.23(m,5H),3.02-3.47.53(m,3H),1.50(d,J＝6.4Hz,9H),1.01-1.04(m,3H)。
1.34.5 A65的制备
将4M HCl-二噁烷(10mL)添加至化合物6(500mg,2.16mmol)。然后将溶液在室温下搅拌30分钟。真空蒸发溶剂以得到HCl盐，其直接用于下一步中。
1.35 A66的制备
1.35.1化合物2的制备
向化合物1(10.00g,112.18mmol,1.00当量)于DCM(200mL)中的溶液添加Et3N(23.00g,227.30mmol,2.03当量)。将混合物冷却至0℃并添加Boc2O(38.40g,175.95mmol,1.57当量)，将混合物在20℃下搅拌1小时。将混合物用EA稀释并用水洗涤。将有机相真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝15/1)纯化以得到呈白色固体的化合物2(16.00g,84.54mmol,75.36％产率)。
1.35.2化合物4的制备
向化合物2(2.00g,10.57mmol,1.00当量)于DMF(60mL)中的溶液，将混合物冷却至-10℃。然后添加NaH(930.16mg,23.25mmol,2.20当量)，将混合物在0℃下搅拌40分钟，并在-5-0℃下滴加化合物3(1.59g,12.68mmol,1.20当量)。将混合物在20℃下搅拌3小时。TLC(PE:EA＝5:1)显示反应完成。将反应溶液倾倒至冰水中，用EA萃取并将有机相用更多的水洗涤、经Na2SO4干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝15/1)纯化以得到呈黄色固体的化合物4(1.00g,4.14mmol,39.20％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.02-4.98(d,2H),4.15-4.08(d,4H),3.64(s,2H),1.47(s,9H),1.40(s,6H)。
1.35.3化合物5的制备
向化合物4(1.00g,4.14mmol,1.00当量)于THF(5mL)和H2O(5mL)中的混合物添加NaIO4(2.04g,9.52mmol,2.30当量)，然后添加K2OsO4.2H2O(76.18mg,207.00umol,0.05当量)。将混合物在20℃下搅拌1小时。TLC显示反应完成。将反应溶液用EA稀释，用Na2SO3和盐水洗涤，将有机相浓缩以得到呈黄色油状物的产物化合物5(1.10g,粗)。
1.35.4化合物6的制备
向化合物5(1.10g,4.52mmol,1.00当量)于MeOH(10mL)中的溶液在0℃下添加NaBH4(512.97mg,13.56mmol,3.00当量)。将混合物在20℃下搅拌1小时，TLC显示反应完成，将反应混合物倾倒至冰饱和NH4Cl中并用EA萃取，将有机相浓缩，将残余物通过硅胶色谱(PE:EA＝6:1)纯化以得到呈无色油状物的产物化合物6(700.00mg,2.85mmol,63.13％产率)。
1.35.5 A66的制备
向化合物6(700.00mg,2.85mmol,1.00当量)于二噁烷(5mL)中的溶液添加HCl/二噁烷(5mL)，将混合物在23℃下搅拌1小时。TLC显示反应完成，将混合物浓缩以得到呈浅黄色固体的产物化合物D(600.00mg,粗)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.45(s,1H),3.93-3.92(m,2H),3.88-3.87(m,1H),3.77-3.74(m,2H),3.52-3.48(m,1H),1.53-1.49(m,6H)。
1.36 A52的制备：
1.36.1化合物2的制备
将化合物1(1.0g,8.6mmol)和NH2OH.HCl(3.0g,43mmol)、AcONa(2.1g,25.8mmol)于EtOH/H2O(20mL/20mL)中的混合物在25℃下搅拌1小时。然后将混合物用EA(150mL x 3)萃取、将有机层经Na2SO4干燥并浓缩以得到化合物2(1.0g,89.2％)。
1.36.2化合物3的制备
向化合物2(1.0g,7.6mmol)于丙酮/H2O(20mL/20mL)中的溶液添加TsCl(2.16g,11.4mmol)和Na2CO3(1.2g,23.2mmol)。将所得的混合物在60℃下搅拌16小时。将混合物浓缩以去除溶剂。将残余物用EA(20mL x 3)萃取。将有机层经Na2SO4干燥、过滤，将滤液浓缩以得到呈白色固体的化合物3(740mg,74％)。
1.36.3 A52的制备
向LiAlH4(200mg,5.2mmol)于THF(5mL)中的混悬液添加化合物3(370mg,2.8mmol)。将混合物在60℃下搅拌2小时。将反应物用H2O(0.2mL)猝灭、经Na2SO4干燥、过滤并将滤液浓缩以得到呈黄色油状物的所需化合物4(250mg,75.7％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)□δ＝3.08-3.02(m,1H),2.99-2.92(m,1H),2.89-2.82(m,1H),2.81-2.66(m,5H),2.00-1.85(m,2H)
1.37 A68的制备：
1.37.2.1化合物2的制备
向化合物1(45.00g,265.93mmol,1.00当量)于THF(225mL)和H2O(450mL)中的溶液添加NMO(71.65g,611.64mmol,2.30当量)和OsO4(500.00mg,1.97mmol,0.01当量)，将混合物在28℃下搅拌16小时。TLC显示反应完成。将反应溶液用EA稀释、用饱和Na2SO3和盐水洗涤。将有机相真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱(PE:EA＝3:1)纯化以得到化合物2(33.00g,162.38mmol,61.06％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)ppm 4.23(d,J＝2.38Hz,2H),3.52-3.63(m,2H),3.34(t,J＝12.11Hz,2H),3.13(br,1H),2.97(br,1H),1.45(s,9H)。
1.37.2.2化合物4的制备
向化合物2(33.00g,162.38mmol,1.00当量)于DCM(330mL)中的溶液在0℃下添加[乙酰氧基(苯基)-碘烷基]乙酸酯(78.45g,243.57mmol,1.50当量)，将混合物从0℃至28℃搅拌1小时。然后将混合物冷却至-60℃并添加于THF中的溴(乙烯基)镁(1M,974.28mL,6.00当量)，将混合物从-60℃至28℃搅拌2小时。TLC显示反应完成，将混合物用EA稀释并用饱和NH4Cl和盐水洗涤。将有机相浓缩，将残余物通过硅胶色谱(PE:EA＝10:1)纯化以得到呈无色油状物的化合物4(17.00g,66.06mmol,40.68％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)ppm 5.73-5.92(m,2H),5.25-5.40(m,2H),5.16(dd,J＝10.48,1.19Hz,2H),4.22-4.50(m,2H),3.56-3.75(m,1H),3.38(d,J＝11.17Hz,2H),2.82-2.98(m,1H),1.42-1.53(m,9H)。
1.37.2.3化合物5_反式和5_顺式的制备
向化合物4(13.00g,50.52mmol,1.00当量)于DCM(1.80L)中的溶液在N2下添加Zhan催化剂1B(1.20g,1.64mmol,0.03当量)，将混合物在30℃下搅拌30小时。TLC显示反应完成，浓缩反应混合物，并将残余物通过硅胶色谱(PE:EA＝2:1)纯化以得到具有较低极性的顺式异构体5_顺式(2.80g,12.22mmol,24.22％产率)和具有较高极性的反式异构体5_反式(2.80g,12.22mmol,24.22％产率)两者。
5_顺式:1HNMR(400MHz,氯仿-d)ppm 5.83(d,J＝1.63Hz,2H)4.26-4.43(m,2H)3.67(d,J＝13.55Hz,2H)3.38(dd,J＝13.68,8.28Hz,2H)1.48(s,9H)。
5_反式:1H NMR(400MHz,氯仿-d)ppm 5.82(s,2H)4.46(br.s.,2H)3.53-3.79(m,3H)3.34-3.46(m,1H)1.48(s,9H)。
1.37.2.4 6_顺式的制备
向化合物5_顺式(2.80g,12.21mmol,1.00当量)于MeOH(100.00mL)中的溶液在Ar下添加Pd/C(300.00mg)。将混悬液真空脱气并用H2吹扫数次。将混合物在H2(50psi)下在30℃下搅拌16小时。TLC显示反应完成。过滤混合物并浓缩滤液，将残余物通过硅胶色谱(PE:EA＝1:1)纯化以得到呈无色油状物的化合物6_顺式(1.50g,6.49mmol,53.12％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)ppm 3.95-4.08(m,2H)3.68-3.85(m,2H)3.25(ddd,J＝14.56,9.98,4.08Hz,2H)3.10(br,1H)2.02(br,1H)1.84-1.98(m,2H)1.66-1.76(m,2H)1.49(s,9H)。
1.37.2.5 A68_顺式的制备
向化合物6_顺式(500.00mg,2.16mmol,1.00当量)于二噁烷(10.00mL)中的溶液添加HCl/二噁烷(20.00mL)，将混合物在30℃下搅拌2小时，TLC显示反应完成，将混合物浓缩以得到呈黄色固体的A68_顺式(250.00mg,1.91mmol,88.24％产率)。
A68_反式通过相同的程序从化合物5_反式制备。
部分II用于靶标的一般程序
一般程序A
1.1用于制备化合物2的一般程序
将化合物1(4.53mmol)于SOCl2(10mL)中的混合物加热至回流过夜。浓缩混合物以得到粗产物，其直接用于下一步。
1.2用于制备化合物3的一般程序
向化合物2(1.08g,4.52mmol)于甲苯(10mL)中的煮沸溶液添加苯胺(4.52mmol)，并回流2小时。将混合物真空浓缩以得到固体，其直接用于下一步。
1.3用于制备iii的一般程序
向化合物3(0.3mmol)于MeCN(3mL)中的溶液在室温下添加胺(0.3mmol)和Et3N(30mg,0.33mmol)，并将混合物在室温下搅拌2小时。将混合物用CH2Cl2(20mL)稀释并用水洗涤。将有机相真空浓缩以得到粗产物，其通过制备-HPLC纯化以得到所需产物。
一般程序B
1.1化合物2的制备
将化合物1(9.5g,0.04mol)、NBS(8.3g,0.044mol)和(PhCO)2O(1.9g,8mmol)于CCl4(100mL)中的混合物加热至回流持续5小时。然后将混合物真空浓缩，并将残余物通过柱色谱(PE:AcOEt＝20:1)纯化以得到化合物2(4g,31％)。
1.2化合物3的制备
将化合物2(1g,3.24mmol)和AcOK(3.18g,32.4mmol)于丙酮(20mL)中的混合物搅拌18小时。然后将混合物过滤并用丙酮洗涤。真空浓缩滤液以得到化合物3(0.7g,78％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.26(d,J＝1.6Hz,1H),7.99-8.01(m,1H),7.48-7.50(d,J＝8Hz,1H),5.24(s,2H),3.95(s,3H),2.19(s,3H)。
1.3化合物4的制备
将化合物3(7.5g,0.026mol)、PMBSH(5.25g,0.034mol)、Pd2(dba)3(3.65g,5.2mmol)、Xantphos(3g,5.2mmol)和DIPEA(6.7g,5.2mmol)于1,4-二噁烷(80mL)中的混合物加热至100℃持续18小时。然后将混合物真空浓缩，并通过柱色谱(PE:AcOEt＝10:1)纯化以得到化合物4(6.9g,73％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(d,J＝1.6Hz,1H),7.86-7.89(m,1H),7.42-7.44(d,J＝8Hz,1H),7.19-7.21(m,2H),6.81-6.84(m,2H),5.17(s,2H),4.13(s,2H),3.94(s,3H),3.80(s,3H),2.13(s,3H)。
1.4化合物5的制备
将化合物4(3.60g,10mmol)和LiOH(4.20g,100mmol)于THF/H2O(50mL/10mL)中的混合物加热至60℃持续14小时。将反应混合物用HCl(1N)调节至pH＝6.0、用AcOEt萃取。将有机相经Na2SO4干燥并浓缩以得到化合物5(2.40g,80％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.02(d,J＝1.2Hz,1H),7.87-7.89(m,1H),7.56-7.58(d,J＝8Hz,1H),7.17-7.20(m,2H),6.81-6.83(m,2H),4.65(s,2H),4.12(s,2H),3.74(s,3H)。
1.5化合物6的制备
向化合物5(1.0g,3.4mmol)于THF(20mL)中溶液在0℃下添加TEA(1.0mg,10mmol)和AcCl(540mg,6.8mmol)。将所得的混合物在室温下搅拌14小时。将混合物用水稀释并用AcOEt萃取。将有机相经Na2SO4干燥、真空浓缩以得到直接用于下一步的粗产物。
1.6化合物7的制备
将化合物6(100mg,0.28mmol)、HATU(126mg,0.33mmol)、DIPEA(164g,0.43mmol)、3-氯-4-氟胺(63mg,0.43mmol)于DMF(5mL)中的混合物在室温下搅拌4小时。将混合物用AcOEt和水稀释，并将合并的有机层分离、经Na2SO4干燥并浓缩。然后将残余物通过柱色谱(PE:AcOEt＝5:1)纯化以得到化合物5(110mg,74％)。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.96-7.99(m,2H),7.79(d,J＝1.6Hz,1H),7.49-7.51(d,J＝8Hz,1H),7.16-7.28(m,3H),6.80-6.82(m,2H),5.16(s,2H),4.17(s,2H),3.74(s,3H),2.11(s,3H)。
1.7化合物8的制备
向化合物7(150mg,0.32mmol)于MeCN(8mL)、AcOH(0.1mL)和H2O(0.2mL)中的溶液在-15℃下添加1,3-二氯-5,5-二甲基咪唑啉啶-2,4-二酮(89mg,0.45mmol)并搅拌4小时。然后将混合物用水稀释并用DCM萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到直接用于下一步的粗产物(134mg，粗)。
1.8 iiii的制备
向化合物8(134mg,0.32mmol，粗)于MeCN(2mL)中的溶液添加TEA(106mg,1.05mmol)和胺(0.84mmol)。将所得的混合物在室温下搅拌直至原料耗尽。然后，向所得的混合物添加LiOH(150mg,3.6mmol)于MeOH/H2O(2mL/0.5mL)中的混合物并搅拌14小时。将混合物用水稀释并用EA萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩。残余物进行制备型HPLC以得到产物。
一般程序C
1.1化合物2的制备
向3-溴-4-羟基-苯甲酸甲酯(1.00g,4.33mmol,1.00当量)于甲苯(15.00mL)中的溶液添加乙酸乙烯酯(745.54mg,8.66mmol,2.00当量)、氯(1,5-环辛二烯)铱(I)二聚体(29.08mg,43.30umol,0.01当量)和Na2CO3(229.47mg,2.17mmol,0.50当量)。将混合物在100℃下在N2保护下搅拌16小时。TLC检测到反应完成，蒸发溶剂，将残余物通过色谱(硅胶，用PE:EA＝10:1洗脱)纯化以得到呈无色油状物的产物3-溴-4-乙烯基氧基-苯甲酸甲酯(730.00mg,2.84mmol,65.58％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.29(d,J＝1.76Hz,1H),7.99(dd,J＝8.53,2.01Hz,1H),7.06(d,J＝8.53Hz,1H),6.65(dd,J＝13.80,6.02Hz,1H),4.98(dd,J＝13.80,2.01Hz,1H),4.70(dd,J＝5.90,1.88Hz,1H),3.93(s,3H)。
1.2化合物3的制备
向3-溴-4-乙烯基氧基-苯甲酸甲酯(1.00g,3.89mmol,1.00当量)于DCM(15.00mL)中的溶液在0℃下在N2保护下添加ZnEt2(960.91mg,7.78mmol,2.00当量)。然后将混合物在0℃下搅拌30分钟，并添加ClCH2I(1.72g,9.73mmol,2.50当量)。将形成的混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物倾倒至NH4Cl溶液中，并用EA萃取，将合并的有机层经Na2SO4干燥、浓缩，将残余物稀释于THF(5.00mL)和H2O(5.00mL)中，添加NaIO4(832.00mg,3.89mmol,1.00当量)和K2OsO4(74.01mg,389.00umol,0.10当量)，将混合物在25℃下搅拌30分钟，然后将反应物用饱和Na2SO3猝灭、用EA萃取，将合并的有机层经Na2SO4干燥、浓缩，将残余物通过硅胶色谱(PE:EA＝10:1)纯化以得到呈无色油状物的产物3-溴-4-(环丙氧基)苯甲酸甲酯(530.00mg,1.95mmol,50.26％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)8.23(d,J＝2.01Hz,1H),8.00(dd,J＝8.78,2.01Hz,1H),7.28-7.33(m,1H),3.92(s,3H),3.88(t,J＝4.39Hz,1H),0.76-0.99(m,4H)。
1.3化合物4的制备
向3-溴-4-(环丙氧基)苯甲酸甲酯(530.00mg,1.95mmol,1.00当量)和(4-甲氧基苯基)甲烷硫醇(451.12mg,2.93mmol,1.50当量)于甲苯(10.00mL)中的溶液在N2保护下添加Pd2(dba)3(89.28mg,97.50umol,0.05当量)、Xantphos(112.83mg,195.00umol,0.10当量)和DIPEA(504.04mg,3.90mmol,2.00当量)。然后将混合物在100℃下在N2保护下搅拌16小时。TLC检测到反应完成，蒸发溶剂，将残余物用水洗涤，将水层用EA萃取，将合并的有机层经Na2SO4干燥、浓缩，将残余物通过硅胶色谱(PE:EA＝5:1)纯化以得到产物呈白色固体的4-(环丙氧基)-3-[(4-甲氧基苯基)甲基硫烷基]苯甲酸甲酯(600.00mg,1.74mmol,89.34％产率)。LCMS:345[M+1]。
1.4化合物5的制备
向4-(环丙氧基)-3-[(4-甲氧基苯基)甲基硫烷基]苯甲酸甲酯(1.00g,2.90mmol,1.00当量)于MeCN(8.00mL)、AcOH(100.00uL)和H2O(200.00uL)中的混悬液在-15℃下添加1,3-二氯-5,5-二甲基-咪唑啉啶-2,4-二酮(914.17mg,4.64mmol,1.60当量)，将混合物在-15℃下搅拌2小时。将残余物用水洗涤，将水层用EA萃取，将合并的有机层经Na2SO4干燥、浓缩以得到粗产物，其直接用于下一步。
1.1.5化合物7的制备
向3-氯磺酰基-4-(环丙氧基)苯甲酸甲酯(840.00mg,粗,2.89mmol,1.00当量)于MeCN(10.00mL)中的溶液添加1,4-氧杂氮杂环庚烷-6-醇(338.49mg,2.89mmol,1.00当量)和TEA(584.88mg,5.78mmol,2.00当量)。将所得的混合物在28℃下搅拌直至原料耗尽。去除溶剂并将残余物通过色谱(硅胶，用PE:EA＝3:1洗脱)纯化以得到呈白色固体的所需的化合物4-(环丙氧基)-3-[(6-羟基-1,4-氧杂氮杂环庚烷-4-基)磺酰基]苯甲酸甲酯(620.00mg,1.67mmol,57.76％产率)。LCMS:372[M+1]。
1.6化合物8的制备
向4-(环丙氧基)-3-[(6-羟基-1,4-氧杂氮杂环庚烷-4-基)磺酰基]苯甲酸甲酯(620.00mg,1.67mmol,1.00当量)于THF(5.00mL)和H2O(1.00mL)中的溶液。将形成的混合物在50℃下搅拌3小时。将反应混合物用1N HCl溶液中和并用EA萃取，将合并的有机层经Na2SO4干燥、浓缩以得到呈白色固体的粗产物4-(环丙氧基)-3-[(6-羟基-1,4-氧杂氮杂环庚烷-4-基)磺酰基]苯甲酸(510.00mg,1.43mmol,85.45％产率)。
1.7化合物2081的制备
向4-(环丙氧基)-3-[(6-羟基-1,4-氧杂氮杂环庚烷-4-基)磺酰基]苯甲酸(170.00mg,475.68umol,1.00当量)和3-氯-4-氟-苯胺(69.24mg,475.68umol,1.00当量)于MF(5.00mL)中的溶液添加HATU(180.87mg,475.68umol,1.00当量)和DIPEA(122.95mg,951.36umol,2.00当量)。将混合物在25℃下搅拌16小时。TLC检测到反应完成，将混合物倾倒至水中、用EA萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥、浓缩，将残余物通过制备型-HPLC(FA)纯化以得到呈白色固体的产物N-(3-氯-4-氟-苯基)-4-(环丙氧基)-3-[(6-羟基-1,4-氧杂氮杂环庚烷-4-基)磺酰基]苯甲酰胺(94.10mg,194.05umol,40.79％产率)。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.48(d,J＝2.01Hz,1H),8.23(dd,J＝8.66,2.13Hz,1H),7.96(dd,J＝6.78,2.51Hz,1H),7.70(d,J＝8.78Hz,1H),7.59-7.65(m,1H),7.27(t,J＝8.91Hz,1H),4.07-4.13(m,1H),4.03(t,J＝6.53Hz,1H),3.77-3.97(m,4H),3.61-3.73(m,2H),3.21-3.30(m,1H),3.11(dd,J＝14.56,7.53Hz,1H),0.84-1.04(m,4H)。LCMS:485/487[M+1]。
2082/2083通过与2081相同的程序制备。
一般程序D
1.1化合物2的制备
将4-溴-3-氯磺酰基-苯甲酸(6.90g,23.04mmol,1.00当量)于SOCl2(27.41g,230.40mmol,10.00当量)中的混合物在80℃下搅拌3小时。然后蒸发溶剂。将残余物于甲苯(50mL)中稀释，并添加MeOH(959.66mg,29.95mmol,1.30当量)，将形成的混合物在110℃下搅拌2小时。形成固体并蒸发溶剂，将固体用PE洗涤并过滤以得到呈白色固体的产物4-溴-3-氯磺酰基-苯甲酸甲酯(7.22g,23.03mmol,99.94％产率)。
1.2化合物4的制备
向4-溴-3-氯磺酰基-苯甲酸甲酯(7.22g,23.03mmol,1.00当量)于DCM(100mL)中的溶液添加氮杂环庚烷-4-醇(2.65g,23.03mmol,1.00当量)和TEA(2.33g,23.03mmol,1.00当量)。将所得的混合物在25℃下搅拌直至原料耗尽。去除溶剂并将残余物通过硅胶色谱(PE:EA＝1:1)纯化以得到所需化合物4-溴-3-(4-羟基氮杂环庚烷-1-基)磺酰基-苯甲酸甲酯(7.00g,17.85mmol,77.49％产率)。LCMS:393/395[M+1]。
1.3化合物5的制备
向4-溴-3-(4-羟基氮杂环庚烷-1-基)磺酰基-苯甲酸甲酯(1.00g,2.55mmol,1.00当量)于DMF(15mL)中的混合物在0℃下在N2下分配添加NaH(153.00mg,3.82mmol,1.50当量)。将混合物在25℃下搅拌30分钟。然后添加溴甲基苯(654.19mg,3.82mmol,1.50当量)并在25℃下搅拌16小时。TLC显示反应完成。将混合物倾倒至NH4Cl水溶液中并用EA萃取。将合并的有机相用饱和盐水洗涤、用无水Na2SO4干燥、过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱(用PE/EA＝10/1,2/1洗脱)纯化以得到呈白色固体的3-(4-苄基氧基氮杂环庚烷-1-基)磺酰基-4-溴-苯甲酸甲酯(550.00mg,1.14mmol,44.71％产率)。LCMS:482/484[M+1]。
1.4化合物6的制备
将于甲苯(20mL)中的3-(4-苄基氧基氮杂环庚烷-1-基)磺酰基-4-溴-苯甲酸甲酯(1.30g,2.69mmol,1.00当量)、烯丙基(三丁基)锡烷(1.07g,3.23mmol,1.20当量)LiCl(136.83mg,3.23mmol,1.20当量)和Pd(PPh3)4(310.85mg,269.00umol,0.10当量)脱气，然后在N2下加热至110℃持续16小时。TLC(PE:EtOAc＝1:1)显示原料和产物在相同的位点。将反应混合物倾倒至H2O中、用EA萃取。将有机相经无水Na2SO4干燥、真空浓缩以得到残余物，其通过柱色谱(硅胶，用PE:EA＝1:1洗脱)纯化以得到呈浅黄色固体的纯4-烯丙基-3-(4-苄基氧基氮杂环庚烷-1-基)磺酰基-苯甲酸甲酯(630.00mg,1.42mmol,52.80％产率)。
1.5化合物7的制备
向4-烯丙基-3-(4-苄基氧基氮杂环庚烷-1-基)磺酰基-苯甲酸甲酯(630.00mg,1.42mmol,1.00当量)于THF(10mL)和H2O(2mL)中的溶液在0℃下添加OsO4(36.10mg,142.00umol,0.10当量)和NaIO4(607.45mg,2.84mmol,2.00当量)。将混合物在25℃下搅拌3小时。TLC检测到反应完成，将混合物倾倒至饱和Na2S2O3溶液中、用DCM萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥、浓缩，将残余物于MeOH(10mL)中稀释，向形成的混合物添加NaBH3CN(88.86mg,1.41mmol,1.00当量)。将混合物在25℃下搅拌3小时。TLC检测到反应完成，将反应物用水猝灭、用EA萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥、浓缩，将残余物通过色谱(硅胶，用PE:EA＝3:1至1:1洗脱)纯化以得到产物3-(4-苄基氧基氮杂环庚烷-1-基)磺酰基-4-(2-羟基乙基)苯甲酸甲酯(340.00mg,759.71umol,53.88％产率)。LCMS:448[M+1]。
1.6化合物8的制备
向3-(4-苄基氧基氮杂环庚烷-1-基)磺酰基-4-(2-羟基乙基)苯甲酸甲酯(340.00mg,759.71umol,1.00当量)于MeCN(10mL)中的溶液添加PBSF(458.86mg,1.52mmol,2.00当量)、N,N-二乙基乙胺；三氢氟化物(244.95mg,1.52mmol,2.00当量)和TEA(307.50mg,3.04mmol,4.00当量)。将混合物在28℃下在N2保护下搅拌16小时。TLC检测到反应完成，将混合物倾倒至水中、用EA萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥、浓缩，将残余物通过色谱(硅胶，用PE:EA＝1:1洗脱)纯化以得到呈无色油状物的产物3-(4-苄基氧基氮杂环庚烷-1-基)磺酰基-4-(2-氟乙基)苯甲酸甲酯(180.00mg,400.42umol,52.71％产率)。
1.7化合物9的制备
向3-(4-苄基氧基氮杂环庚烷-1-基)磺酰基-4-(2-氟乙基)苯甲酸甲酯(180.00mg,400.42umol,1.00当量)于THF(5mL)和H2O(1mL)中的溶液。将形成的混合物在下搅拌3小时。将形成的混合物在25-50℃下搅拌3小时。将反应混合物用1N HCl溶液中和并浓缩以得带粗产物3-(4-苄基氧基氮杂环庚烷-1-基)磺酰基-4-(2-氟乙基)苯甲酸(160.00mg,367.39umol,91.75％产率)。
1.8化合物10的制备
向3-(4-苄基氧基氮杂环庚烷-1-基)磺酰基-4-(2-氟乙基)苯甲酸(80.00mg,183.69umol,1.00当量)和苯胺(202.06umol,1.10当量)于MeCN(5mL)中的溶液添加HATU(76.83mg,202.06umol,1.10当量)和DIEA(47.48mg,367.38umol,2.00当量)。将混合物在25℃下搅拌16小时。TLC检测到反应完成，将混合物倾倒至水中、用EA萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥、浓缩，将残余物通过制备型-TLC(用PE:EA＝2:1洗脱)纯化以得到呈白色固体的产物3-(4-苄基氧基氮杂环庚烷-1-基)磺酰基-N-(3-氯-4-氟-苯基)-4-(2-氟乙基)苯甲酰胺(65.00mg,115.44umol,62.85％产率)。
1.9 2205/2206的制备
向3-(4-苄基氧基氮杂环庚烷-1-基)磺酰基-N-(3-氯-4-氟-苯基)-4-(2-氟乙基)苯甲酰胺(65.00mg,115.44umol,1.00当量)于MeOH(15mL)中的溶液在N2下添加Pd/C(30.00mg,115.44umol,1.00当量)。将混悬液真空脱气并用H2吹扫数次。将混合物在H2下在25℃下搅拌16小时。TLC显示原料完全耗尽。过滤反应混合物，并将滤液浓缩、通过制备型-TLC(用PE:EA＝1:1洗脱)纯化以得到呈白色固体的产物N-(3-氯-4-氟-苯基)-4-(2-氟乙基)-3-(4-羟基氮杂环庚烷-1-基)磺酰基-苯甲酰胺(24.00mg,50.75umol,43.96％产率)。
一般程序E
1.1化合物2的制备
向化合物1(6.0g,21.6mmol)于MeOH(80mL)中的溶液在0℃下在N2下添加SOCl2(10.2g,86.5mmol)。将反应混合物加热至85℃持续3小时。将所得的混合物真空浓缩以得到化合物2(6.2g，粗)，其直接用于下一步。1H NMR(400MHz,DMSO)δ＝8.17–8.19(m,1H),8.03–8.05(m,2H),3.88(s,3H)。
1.2化合物3的制备
将化合物2(5.6g,19.2mmol)、PMBSH(3.8g,24.7mmol)、Pd2(dba)3(1.7g,1.9mmol)、Xantphos(2.2g,3.8mmol)和DIPEA(4.9g,38.0mmol)于1,4-二噁烷(100mL)中的混合物加热至100℃持续16小时。真空浓缩反应混合物并通过柱色谱纯化以得到化合物3(3.9g,56％)。
1.3化合物4的制备
向化合物3(1.2g,3.3mmol)于MeCN/HOAc/H2O(16/0.2/0.4,mL)中的溶液在-15℃下添加1,3-二氯-5,5-二甲基咪唑啉啶-2,4-二酮(0.97g,4.9mmol)并搅拌3小时。将反应混合物用水稀释并用EA萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其直接用于下一步(1.0g，粗)。
1.4化合物6的制备
向化合物4(1.0g,3.2mmol)于MeCN(10mL)中的溶液在25℃下添加化合物5(553mg,4.8mmol)和Et3N(810mg,8.0mmol)并搅拌1小时。将混合物用EA(100mL)稀释并用水(80mL)洗涤。将有机相真空浓缩以得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化以得到所需产物(0.54g,43％)。LCMS:392.0[M+1]。
1.5化合物8的制备
将化合物6(540mg,1.4mmol)、化合物7(261mg,2.1mmol)、Cs2CO3(898mg,2.8mmol)和Pd(dppf)Cl2(140mg,0.2mmol)于THF/H2O(10/1,mL)中的混合物加热至80℃持续16小时。将反应混合物用EA(100mL)稀释并用盐水(60mL)洗涤。将有机相真空浓缩以得到粗产物，其直接用于下一步(451mg，粗)。
1.6化合物9的制备
将化合物8(451mg,1.4mmol)和NaOH(112mg,2.8mmol)于THF/H2O(5/1,mL)中的混合物加热至35℃持续16小时。将反应混合物用水(80mL)稀释并用EA(80mL)萃取。将水相用HCl(2M)调节至pH＝6.0并用EA(80mL)萃取。将有机相经Na2SO4干燥并浓缩以得到粗产物，其直接用于下一步(305mg,71％)。
1.7 2018的制备
将化合物9(143mg,0.46mmol)、HATU(209mg,0.55mmol)、DIPEA(119mg,0.92mmol)、化合物9(80mg,0.55mmol)于MeCN(5mL)中的混合物加热至50℃持续3小时。将混合物用EA(80mL)稀释并用水(60mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩以得到粗产物，其通过制备型-HPLC纯化以得到所需产物(149.64mg,74％)。LCMS:441.0[M+1]。
一般程序F
1.1化合物2的制备
向化合物1(5g,0.023mol)于SOCl2(30mL)中的溶液在0℃下添加MeOH(1.104g,0.035mol)。并且将溶液在80℃下搅拌2小时。然后将溶液冷却至18℃并浓缩以去除溶剂。将其用水(20mL)洗涤并用EA(100mL)萃取、经Na2SO4干燥、浓缩以得到化合物2(5.3g,93.8％)。
LCMS:229[M+1]
1.2化合物3的制备
向化合物2(5.3g,0.023mol)于CCl4(50mL)中的溶液在N2下一次性添加NBS(3.72g,0.021mol)、BPO(557mg,0.002mol)。将混合物加热至80℃持续2小时。将混合物用饱和Na2SO3(50mL)洗涤并用EA(100mL*2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥并真空浓缩。将残余物通过PE纯化以得到化合物3(6.2g，粗)。
1.3化合物4的制备
向化合物3(6.2g,0.02mol)于MeCN(100mL)中的溶液一次性添加CsF(18.35g,0.121mol)、18-冠-6(1.06g,4.03mmol)，并将其加热至90℃持续16小时。将混合物过滤并在40℃下减压浓缩。将残余物通过硅胶上的柱色谱(PE/EA＝30/1,20/1,10/1)纯化以得到呈固体的化合物4(360.00mg,对于两步为7.24％)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)＝8.16-8.10(m,1H),8.05-7.99(m,1H),7.86-7.80(m,1H),5.54-5.49(m,1H),5.42-5.37(m,1H),3.95(s,3H)。
1.4化合物5的制备
向化合物4(0.36g,1.46mmol)于1,4-二噁烷(40mL)中的溶液在18℃下添加PMBSH(0.338g,2.19mmol)、DIPEA(0.337g,2.92mmol)、Xantphos(42.24mg,0.073mmol)。然后将Pd2(dba)3(66.85mg,0.073mmol)添加至溶液，并将其加热至120℃持续16小时。将混合物溶液浓缩并通过硅胶上的柱色谱(PE/EA＝30/1,20/1,10/1)纯化以得到化合物5(0.464g,99.2％)
LCMS:321[M+1]
1.5化合物6的制备
向化合物5(0.464g,1.45mmol)于THF(20mL)中的溶液添加LiOH(694.55mg,29.00mmol)于H2O(5mL)中的溶液。将混合物溶液加热至60℃持续2小时。将溶液通过添加HCl(3M)调节至pH<3。然后将其用EtOAc(200mL)萃取、经Na2SO4干燥、浓缩以得到化合物6(0.5g，粗)。
LCMS:307[M+1]。
1.6化合物8的制备
向化合物6(0.5g,1.63mmol)于DCM(20mL)中的溶液添加DIPEA(0.421g,3.26mmol)、HATU(0.93g,2.45mmol)。将混合物溶液在20℃下搅拌1小时。然后将化合物7(0.285,1.96mmol)添加至混合物并将其在20℃下搅拌16小时。将溶液用饱和NH4Cl(50mL)洗涤、用EtOAc(100mL*2)萃取、经Na2SO4干燥、浓缩以得到粗产物，其通过硅胶(PE/EA＝20/1,10/1,3/1)上的柱色谱纯化以得到化合物8(0.7g,98.97％)
LCMS:435[M+23]
1.7 2207-2208的制备
向化合物8(100mg,0.23mmol)于MeCN/AcOH/H2O(10mL,80:1:2)中的溶液在-5℃下添加DCDMH(90.81mg,0.46mmol)。将其在-5℃下搅拌2小时。然后添加胺(0.35mmol)、Et3N(69.96mg,0.69mmol)至溶液。将其在18℃下搅拌0.5小时。然后将其浓缩以得到粗产物，其通过制备型-HPLC纯化以得到所需产物。
一般程序G
2032的制备如下示例：
1.1化合物2的制备
向HSO3Cl(80mL)在0℃下分批添加化合物1(20.0g,0.13mol)，然后将所得的混合物加热至140℃持续4小时。在冷却至室温后，将混合物倾倒至冰水中。将所得的沉淀通过过滤收集并干燥以得到呈白色固体的所需化合物2(25.0g,76％)。
1.2化合物3的制备
将化合物2(3.0g,11.7mmol)添加至HNO3(4mL)于H2SO4(20mL)中的混合物，并加热至90℃持续4小时。在冷却至室温后，将混合物缓慢添加至冰水。将所得的沉淀通过过滤收集并干燥以得到呈白色固体的所需化合物3(1.3g,38％)。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ9.05(d,J＝2.0Hz,1H),8.76(d,J＝2.0Hz,1H)。
1.3化合物4的制备
将化合物3(1.3g,4.3mmol)和SOCl2(40mL)的混合物加热至90℃持续4小时。将混合物真空浓缩。将残余物用甲苯(10mL)溶解并加热至90℃。添加3-氯-4-氟苯胺(1.2mg,3.9mmol)并将混合物持续加热至回流持续4小时。将混合物浓缩以得到呈黄色固体的所需化合物4(1.6g，粗)，其不经进一步纯化就用于下一步中。
1.4化合物6的制备
向化合物4(0.8g，粗)和5(256mg,1.8mmol)于CH3CN(10mL)中的混合物添加Et3N(566mg,5.6mmol)，并在室温下搅拌4小时。将混合物用EA(50mL)稀释，将有机层用NH4Cl(50mL*2)洗涤并浓缩以得到呈黄色固体的所需化合物6(0.5g，粗)，其不经进一步纯化就用于下一步中。
1.5化合物7的制备
向化合物6(0.1g，粗)于MeOH(10mL)中的溶液添加氨(0.5mL,28％)，并将混合物加热至70℃持续4小时。将混合物真空浓缩以得到呈黄色固体的所需化合物7(80mg,粗)，其不经过纯化就用于下一步中。
1.6化合物8的制备
将化合物7(80mg，粗)、Fe(62mg,1.1mmol)和NH4Cl(59mg,1.1mmol)于MeOH-H2O(10mL/2mL)中的混合物加热至70℃持续4小时。将混合物过滤并用EA(50mL)洗涤。将滤液用饱和NH4Cl(50mL*2)洗涤并浓缩以得到呈白色固体的所需化合物8(75mg，粗)，其不经过纯化就用于下一步中。
1.7 2032的制备
将化合物8(75mg，粗)于甲酸(10mL)中的混合物微波加热至110℃持续10分钟。将混合物真空浓缩。将残余物溶解于MeOH-H2O(10mL/2mL)中，并添加K2CO3(57mg,0.4mmol)。将混合物加热至80℃持续2小时。在LCMS显示反应完成后，将混合物真空浓缩并用EA萃取。将有机相真空浓缩并将残余物经由酸性制备型-HPLC纯化以得到呈白色固体的2032(65.89mg，产率64.2％)。
一般程序H
2619_D2，2626_D2的制备如下示例：
向N-(3-氯-4-氟-苯基)-3-(3,6-二羟基氮杂环庚烷-1-基)磺酰基-4-氟-苯甲酰胺(300.00mg,650.93umol,1.00当量)、TEA(65.87mg,650.93umol,1.00当量)和DMAP(79.52mg,650.93umol,1.00当量)于DCM(30.00mL)中的溶液在0℃下滴加乙酰氯(51.10mg,650.93umol,1.00当量)。将混合物搅拌1小时。LCMS显示30％2433_D2和32％2626_D2产生，且25％原料剩余。将反应混合物用水洗涤。将有机层干燥并浓缩。将残余物通过制备型-HPLC纯化以得到呈白色固体的2619_D2(95.00mg,188.90umol,29.02％产率)和呈白色固体的2626_D2(90.00mg,165.15umol,25.37％产率)。
一般程序I
2632,2634的制备如下示例：
1用于制备2632的程序
1.1一般方案：
1.1.1 2638的制备
向N-(3-氯-4-氟-苯基)-3-(3,6-二羟基氮杂环庚烷-1-基)磺酰基-4-氟-苯甲酰胺(500.00mg,1.08mmol,1.00当量)于MeCN(30.00mL)中的溶液添加1H-四唑(455.98mg,6.51mmol,6.00当量)和N-二苄基氧基膦基-N-异丙基-丙-2-胺(1.12g,3.25mmol,3.00当量)。将混合物在30℃下搅拌2小时。然后添加H2O2(737.94mg,6.51mmol,6.00当量)，并将混合物在30℃下搅拌16小时。TLC显示材料剩余并且～1/3的所需产物检测到。将混合物倾倒至饱和Na2SO3(20mL)中，用乙酸乙酯(20mL*3)萃取、将合并的有机层经无水Na2SO4干燥、真空浓缩。将残余物通过色谱(硅胶，用石油醚/乙酸乙酯＝10/1～1/2洗脱)纯化以得到呈白色固体的[1-[5-[(3-氯-4-氟-苯基)氨基甲酰基]-2-氟-苯基]磺酰基-6-羟基-氮杂环庚烷-3-基]磷酸二苄酯(105.00mg,139.22umol,12.89％产率,95.61％纯度。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.46(dd,J＝6.59,2.26Hz,1H),8.23-8.31(m,1H),7.98(dd,J＝6.78,2.45Hz,1H),7.60-7.68(m,1H),7.52(t,J＝9.32Hz,1H),7.20-7.43(m,11H),5.07(d,J＝9.04Hz,4H),4.63(br.s.,1H),3.92(br.s.,1H),3.71-3.85(m,2H),3.18(dd,J＝15.07,7.16Hz,1H),2.98(dd,J＝14.32,7.54Hz,1H),1.96-2.09(m,1H),1.72-1.90(m,3H).LCMS:721/723[M+1]。
1.1.2化合物2632的制备
向[1-[5-[(3-氯-4-氟-苯基)氨基甲酰基]-2-氟-苯基]磺酰基-6-羟基-氮杂环庚烷-3-基]磷酸二苄酯(210.00mg,291.22umol,1.00当量)于MeOH(10.00mL)中的溶液在N2气氛下添加LiCl(12.34mg,291.22umol,1.00当量)和Pd/C(10％,20mg)。将混悬液脱气并用H2吹扫3次。将混合物在H2(15Psi)下在15℃下搅拌1小时。TLC显示材料完全耗尽。过滤反应混合物并浓缩滤液。将残余物通过制备型-HPLC(FA)纯化以得到产物呈白色固体的1-((5-((3-氯-4-氟苯基)氨基甲酰基)-2-氟苯基)磺酰基)-6-羟基氮杂环庚烷-3-基二氢磷酸酯(110.30mg,192.35umol,66.05％产率，94.32％纯度)。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.49(dd,J＝6.65,2.13Hz,1H),8.21-8.31(m,1H),8.02(dd,J＝6.65,2.64Hz,1H),7.61-7.70(m,1H),7.52(t,J＝9.29Hz,1H),7.27(t,J＝8.91Hz,1H),4.58(br.s.,1H),3.87-4.13(m,3H),3.03(dd,J＝14.56,7.78Hz,1H),2.88(dd,J＝13.80,9.03Hz,1H),2.10(dd,J＝11.67,6.15Hz,1H),1.80-2.01(m,3H).LCMS:527/529[M+1]。
2用于制备2634的程序
2.1一般方案：
2.1.1化合物1893i的制备
向N-(3-氯-4-氟-苯基)-4-氟-3-[(6-羟基-1,4-氧杂氮杂环庚烷-4-基)磺酰基]苯甲酰胺(500.00mg,1.12mmol,1.00当量)和N-二苄基氧基膦基-N-异丙基-丙-2-胺(772.99mg,2.24mmol,2.00当量)于MeCN(7.50mL)中的溶液添加2H-四唑(0.45M,7.46mL,3.00当量)。将混合物在25℃下搅拌4小时。然后添加H2O2(152.22mg,1.34mmol,3.00当量)，并将反应物在25℃下搅拌1小时。TLC显示反应完成。将混合物用饱和Na2SO3(10mL)猝灭、用EA(20mL*3)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥、浓缩。将残余物通过色谱(硅胶，用PE:EA＝2:1至1:1洗脱)纯化以得到呈白色固体的产物[4-[5-[(3-氯-4-氟-苯基)氨基甲酰基]-2-氟-苯基]磺酰基-1,4-氧杂氮杂环庚烷-6-基]磷酸二苄酯(1.00g,1.41mmol,89.92％产率)。1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.86(brs,1H),8.42(dd,J＝6.53,2.26Hz,1H),8.13-8.26(m,1H),7.95(dd,J＝6.53,2.51Hz,1H),7.71(dt,J＝7.15,4.20Hz,1H),7.24-7.39(m,10H),7.11(t,J＝8.78Hz,1H),5.07(t,J＝9.66Hz,2H),4.91-5.01(m,2H),4.40(d,J＝6.27Hz,1H),3.73-3.98(m,5H),3.57-3.69(m,2H),3.32(dd,J＝13.18,6.40Hz,1H).LCMS:707/709[M+1]。
2.1.2 2634的制备
向[4-[5-[(3-氯-4-氟-苯基)氨基甲酰基]-2-氟-苯基]磺酰基-1,4-氧杂氮杂环庚烷-6-基]磷酸二苄酯(1.00g,1.41mmol,1.00当量)于MeOH(20.00mL)中的溶液添加LiCl(60mg,1.41mmol,1.00当量)，然后在N2下添加Pd/C(15.00mg)。将混悬液真空脱气并用H2吹扫数次。将混合物在H2(15psi)下在25℃下搅拌1小时。LCMS显示反应完成。过滤反应混合物并浓缩滤液。将残余物通过制备型-HPLC(FA)纯化以得到呈白色固体的[4-[5-[(3-氯-4-氟-苯基)氨基甲酰基]-2-氟-苯基]磺酰基-1,4-氧杂氮杂环庚烷-6-基]二氢磷酸酯(433.00mg,821.90umol,58.29％产率)。1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.14(s,1H),8.51(d,J＝4.52Hz,1H),8.23(brs,1H),8.04(dd,J＝6.59,2.45Hz,1H),7.63-7.75(m,1H),7.50(t,J＝9.32Hz,1H),7.25(t,J＝8.95Hz,1H),4.49(brs,1H),3.79-4.07(m,5H),3.70(t,J＝8.85Hz,1H),3.34-3.47(m,2H)。LCMS:527/529[M+1]。
手性化合物的拆分
本发明所选的化合物的手性拆分根据表3中列出的条件进行。
表3.
实施例：HBV组装测定
根据由Zlotnick及同事(Nature Biotechnology 2006,24:358)所述的方法开发荧光猝灭体外组装HBV测定。所述测定基于以下观察：HBV核蛋白的C-末端在衣壳形成期间聚集在一起。该测定利用突变C150HBV衣壳蛋白，其中所有野生型半胱氨酸突变为丙氨酸，但C-末端半胱氨酸残基是保守的并且用荧光BoDIPY-FL染料标记。HBV C150Bo蛋白质是高度荧光的，然而在衣壳组装过程中荧光显著减少。因此，所述测定通过监测经标记的衣壳C150Bo蛋白质的荧光测量了测试化合物调节衣壳组装的能力和效能。
在典型的测定中，将突变HBV C150蛋白质(氨基酸1-150、C49A、C61A、C107A、150C)克隆至在大肠杆菌中表达的T7RNA-聚合酶基表达载体中，并纯化为匀质性二聚体。将纯化的HBV核蛋白脱盐并用BODIPY-FL染料标记。
在一个非限制性实施方案中，所述组装测定以96-孔板形式进行。组装反应在50mM Hepes缓冲液，pH 7.5和150mM NaCl中进行。将所述化合物与HBV CA蛋白质预孵育15分钟，并且组装反应通过添加NaCl起始。使反应在室温下持续1小时。
为了测定对衣壳组装的作用，每种测试化合物以至少4种独特浓度一式两份开始筛选。主要命中物是在组装测定中在10uM下显示活性的化合物。经鉴定的主要命中物在如本文其他地方所述的随访研究中确认。已知的HBV CA组装调节剂，诸如HAP-1和BAY 41-4109，用作这些实验中的对照化合物，并且展现出于文献一致的EC50值。测试化合物的EC50值经由分析剂量-响应曲线测定。
本发明所选的化合物在如上文所述的HBV组装测定中测定。所述组装测定以96-孔板形式进行。组装反应在50mM Hepes缓冲液，pH 7.5和150mM NaCl中进行。将所述化合物与HBV CA蛋白质预孵育15分钟，并组装反应通过添加NaCl起始。使反应在室温下持续1小时。所述96-孔板组装测定自始至终具有大于0.7的Z’因子，且逐板和逐天是稳健的且可重复的。
为了测定对衣壳组装的作用，每种测试化合物以5种独特浓度一式两份开始筛选：约30μM、10μM、3μM、1μM和0.3μM。主要命中物是在组装测定中在约10μM下显示>50％活性的化合物，并且这些活性化合物的代表性基团显示于表4中。
表4.
HBV组装测定(‘+’表示在约10μM下的>50％活性)
实施例：HBV复制斑点印迹测定的抑制
在细胞测定中，测试HBV组装测定中有活性的化合物的活性和毒性。在第一抗-病毒测定中，使用斑点印迹方法评估所述化合物抑制HBV-产生肝癌细胞系中HBV复制的能力。
简而言之，将HepG2-2.2.15细胞的汇合单层与含有各个浓度的测试化合物的完全培养基一起孵育。三天后，将培养基用含有适当稀释的测试化合物的新鲜培养基替代。在初始施用测试化合物后六天，收集细胞培养物上清液，并进行细胞裂解。将样品施加至Nylos膜上并通过UV交联将DNA固定至膜。在预杂交后，添加HBV探针并进行杂交过夜。将膜暴露于Kodak膜；抗病毒活性根据HBV DNA水平(EC50)减少计算。抗病毒活性的EC50根据活性化合物的剂量响应曲线计算。随时间推移的测定性能通过使用标准阳性对照化合物ETV、BAY 41-4109和HAP-1监测。
化合物细胞毒性(TC50)在相同的HepG2-2.2.15细胞系中使用如制造商(Promega)推荐的采用的CellTiter Blue-基细胞毒性测定测量。为了进行和展开这些结果。第二抗病毒测定在活性化合物上使用稳定的HBV细胞系HepG2.2.15和测量抗-HBV效能(通过实时PCR)和细胞毒性(通过CellTiter Blue)进行。在该测定中，在细胞接种后24小时，将HepG2-2.2.15细胞与含有各种浓度的测试化合物完全培养基孵育，其中BAY 41-4109和HAP-1用作阳性对照。在三天后，将培养基用含有适当稀释的测试化合物的新鲜培养基替代。将细胞培养物在初始施用测试化合物后六天收集，然后使用QIAamp 96DNA Blood Kit(Qiagen)进行HBV DNA萃取。将萃取的HBV DNA稀释并通过实时PCR分析。通过Ct值对HBV质粒标准品的量作图产生标准曲线。通过施加施加染料摄取方法(CellTiter Blue试剂盒，Promega)与上述方法类似地测定细胞毒性。
在细胞测定中，测试所选的化合物的活性和毒性。在第一抗-病毒测定中，使用斑点印迹方法，评估化合物抑制HBV复制在HBV-产生肝癌细胞系中的能力。
将HepG2-2.2.15细胞的的汇合单层与含有各个浓度的测试化合物的完全培养基一起孵育。三天后，将培养基用含有适当稀释的测试化合物的新鲜培养基替代。在初始施用测试化合物后六天，收集细胞培养物上清液，并进行细胞裂解。将样品施加至Nylos膜上并通过UV交联将DNA固定至膜。在预杂交后，添加HBV探针并进行杂交过夜。将膜暴露于Kodak膜；抗病毒活性根据HBV DNA水平(EC50)减少计算。抗病毒活性的EC50根据活性化合物的剂量响应曲线计算。随时间推移的测定性能通过使用标准阳性对照化合物ETV、BAY 41-4109和HAP-1监测。本发明所选化合物的结果示于表5中。
在相同的HepG2-2.2.15细胞系中，使用如由制造商(Promega)推荐所采用的CellTiter Blue-基细胞毒性测定测量细胞毒性(CC50)。
表5
“活性”表示斑点印迹-测定中的活性(‘+’表示在10μM下的>50％活性)
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尽管本发明已参考特定的实施方案得以公开，显然的是本发明的其它实施方案和变型可由本领域的技术人员设计而不偏离本发明的真正精神和范围。随附的权利要求书意在被理解为包括所有此类实施方案和等效变型。