1.一种多重PCR检测脑炎相关病毒用引物组,其中,该引物组包括SEQ ID NO.1和3-22所示的引物;所述脑炎相关病毒包括乙型脑炎脑膜炎病毒、腮腺炎病毒、肠道病毒、单纯疱疹病毒、麻疹病毒、呼吸道合胞病毒、西尼罗病毒、蜱传脑炎脑膜炎病毒、流感病毒和腺病毒。
2.根据权利要求1所述的引物组,其中,所述引物组还包括SEQ ID NO.23-24所示的引物。
3.多重PCR检测脑炎相关病毒的检测方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
(1)提取待测样本的总核酸;
(2)对所述总核酸进行逆转录获得PCR模板;用权利要求1或2所述的引物组对所述PCR模板进行多重PCR扩增,获得多重PCR扩增后的物料;
(3)对所述多重PCR扩增后的物料进行核酸电泳检测,得到核酸电泳检测的结果;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有581bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有乙型脑炎脑膜炎病毒;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有189bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有腮腺炎病毒;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有221bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有肠道病毒;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有378bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有单纯疱疹病毒;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有330bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有麻疹病毒;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有123bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有呼吸道合胞病毒;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有277bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有西尼罗病毒;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有505bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有蜱传脑炎脑膜炎病毒;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有150bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有流感病毒;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有402bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有腺病毒。
4.根据权利要求3所述的检测方法,其中,SEQ ID NO.3-22所示的引物的最终使用浓度各自为0.1-0.8μM,SEQ ID NO.1所示的引物的最终使用浓度为0.4-0.8μM。
5.根据权利要求3或4所述的检测方法,其中,步骤(2)的反应条件包括如下a-i的程序:
a:49-51℃,28-32min;
b:94-96℃,13-18min;
c:94-96℃,28-32s,
d:54-56℃,28-32s,
e:71-73℃,58-62s,进行10个c-e的循环;
f:94-96℃,28-32s,
g:49-51℃,28-32s,
h:71-73℃,59-61s,进行30个f-h的循环;
i:71-73℃,5-10min。
6.根据权利要求3或4所述的检测方法,其中,所述核酸电泳检测包括核酸凝胶电泳和/或核酸毛细管电泳。
7.一种多重PCR检测脑炎相关病毒的试剂盒,其特征在于,该试剂盒包括权利要求1或2所述的多重PCR引物组、逆转录酶和DNA聚合酶;所述脑炎相关病毒包括乙型脑炎脑膜炎病毒、腮腺炎病毒、肠道病毒、单纯疱疹病毒、麻疹病毒、呼吸道合胞病毒、西尼罗病毒、蜱传脑炎脑膜炎病毒、流感病毒和腺病毒。
8.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括PCR反应缓冲液和dNTP。
9.权利要求1或2所述的引物组在制备检测脑炎相关病毒的试剂盒中的用途;其中,所述脑炎相关病毒包括乙型脑炎脑膜炎病毒、腮腺炎病毒、肠道病毒、单纯疱疹病毒、麻疹病毒、呼吸道合胞病毒、西尼罗病毒、蜱传脑炎脑膜炎病毒、流感病毒和腺病毒。