本发明涉及一种苯并二氮杂
背景技术：
瑞马唑仑，其结构如式(i)所示，化学名为3-[(4s)-8-溴-1-甲基-6-(2-吡啶基)-4h-咪唑[1，2-a][1，4]苯并二氮杂
目前已知该化合物是短效中枢神经系统(cns，centralnervoussystem)抑制剂，具有包括镇静催眠、抗焦虑、肌肉松弛和抗惊厥作用。目前多用于以下临床治疗方案中的静脉给药：如手术期间中的手术前镇静、抗焦虑和遗忘用途；在短期诊断、手术或内窥镜程序期间的清醒性镇静；在施用其它麻醉剂和止痛剂之前和/或同时，作为用于全身麻醉的诱导和维持的组分；icu镇静等。在专利申请cn101501019中报道，该化合物的游离碱稳定性较差，只适合于低温5℃保存，在40℃/75％相对湿度(开放)的条件下，样品潮解、变色，含量显著降低。
由于该化合物游离碱存在的稳定性问题，多国研发人员对该化合物的盐类进行了研究，如专利申请cn101501019b、wo2008/007081a1分别报道了式(i)化合物的苯磺酸盐、乙磺酸盐，并显示上述盐类有良好的热稳定性、低的吸湿性和高的水溶性，并且，cn104968348a中明确认为，上述苯磺酸盐、乙磺酸盐是式(i)化合物的最优选的盐类。
紧随其后，cn103221414b提出了一种式(i)化合物的托西酸盐，并表示该托西酸盐毒性低于苯磺酸盐，并且某些晶型的热稳定性、水溶性等更为良好。
将现有技术信息进行整理，可以得出如下相关内容(表1)：
表1
由上表内容可以看出，不管是瑞马唑仑游离碱，还是瑞马唑仑的已知盐类衍生物，水溶性均不高于11mg/ml，仅仅处于微溶的范围，这会增加其在临床使用的安全风险，在临床使用复溶时需要长时间震荡溶解，还有可能残留不溶性原料，导致药物剂量不准确，以及潜在的安全性风险，另外，在用于全麻这种药物需求量较大的适应症上，会加大稀释剂的用量，造成临床使用的极度不便。故瑞马唑仑已知盐类衍生物溶解性是较大的劣势，亟待进一步改善。
技术实现要素：
针对现有瑞马唑仑游离碱及其相关盐类存在的水溶性问题，本发明的目的是希望能够将瑞马唑仑的溶解性提高至易溶于水(30-100mg/ml)的程度。为了达到上述水溶性目标，发明人曾从多个方面入手进行了研究，例如现有盐类的晶型、制剂辅料、新的成盐类型等方面，希望能够找到提高水溶性，同时保证较好的成药性的可行手段。然而，对现有盐类晶型、制剂辅料的筛选研究最终以失败告终，并未找到更加合适的方法。而对多种盐类进行的研究中，前期试验过程中总共对20多种酸盐进行了筛选，发现有8种盐型，其中，硫酸盐、2-萘磺酸盐、甲磺酸盐、草酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、1，5-萘二磺酸盐等7种盐呈晶态形式，乙二磺酸盐呈现无定型。对上述盐类作出进一步的研究，结果如下表：
表2
其中，硫酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐存在多晶型现象。硫酸盐吸湿性高或结晶度较低，不易成药，1，5-萘二磺酸和2-萘磺酸的溶解度较低，而甲磺酸的结晶度较低，不易成药。
从上表可以看出，盐酸盐和氢溴酸盐的溶解度及其他方面的性质都较为理想，美国fda橙皮书收录【progressinpharmaceuticalsciences，2012，vol.36，no.4151】的2006年前上市的1356个化学结构明确的有机药物中，与酸成盐的药物523个(占38.6％)，其中，使用频率最高的与有机碱成盐的酸为盐酸(占53.4％)。由此可见，目前上市的诸多酸盐类药品中，盐酸盐是优势选择。
不过，在对盐酸盐的稳定性进行分析研究时，其结果却为发明人指出了使用比例最广的盐酸盐对于该化合物稳定性太差：
表3
由表3可见，盐酸盐虽然水溶性良好，但是稳定性极差，因此放弃盐酸盐。
本发明在对上述多种盐类进行长期的研究过程中意外地发现，式(i)化合物的氢溴酸盐溶解度极佳(＞100mg/ml)，显著优于该化合物当前各市售或研发的其他盐类产品，尤其适合注射剂的制备，并且各种晶型形式下的稳定性也相对较好(见表3)。基于上述原因，本发明实际提供了如式i所示化合物的氢溴酸盐：
其中，式(i)化合物与氢溴酸的化学配比为1∶1。
本发明在研究中还发现，式(i)化合物氢溴酸盐存在多种晶型，发明人截至当前已经发现了4种晶型，分别命名为i、ii、iii和α晶型。发明人对不同的晶型进行了理化性质的研究比对，最终发现α晶型的稳定性最为优异，且依然保持了良好的水溶性，基于上述如此良好的溶解性，可以将该晶型制备成对主药溶解性有较高要求的制剂(如注射剂)，同时，鉴于其良好的稳定性，注射剂中也可以无需限定于注射用粉剂(粉针)，也可以制备液体注射剂(水针)。
目前研究发现，式(i)化合物的光照降解杂质结构：
因此，本发明优选式(i)化合物氢溴酸盐以α晶型形式存在。将α晶型与其他三种晶型的x-射线粉末衍射图谱(cu-ka辐射)进行比较可以发现，α晶型同时在约13.7±0.2、16.0±0.2、19.2±0.2度2θ处有明显的特征峰，α晶型的差示扫描量热分析中，在170℃±2℃有熔融吸热峰。因此，本发明中使用上述粉末衍射特征峰和dsc熔融峰对α晶型的结构进行限定，在此限定基础上，可以将α晶型与其他三种晶型明确区分。
当然，除了上述三个明显的区别特征峰外，α晶型的x-射线粉末衍射图谱中还包括位于约8.2±0.2、10.3±0.2、12.6±0.2、15.1±0.2、20.7±0.2、22.8±0.2、23.2±0.2、25.5±0.2、26.2±0.2、27.7±0.2、28.4±0.2、30.7±0.2度2θ处的特征峰。
本发明具体实施方式中制备的α晶型的x-射线粉末衍射图谱如图3或4所示，dsc谱图如图5所示。
另据emea文件【20080124emea关于要求进行基因毒性杂质评估的函件】指出苯磺酸与甲苯磺酸等低级磺酸类存在一个潜在风险，即若在工艺过程中使用醇类，可能导致基因毒性杂质苯磺酸酯或甲苯磺酸酯的产生，同理，使用醇类清洁的反应罐或储存罐也可能提高该风险。因此，除了上述水溶性和稳定性的优势以外，氢溴酸为低毒性，溴离子是人体16种微量元素之一，在安全性方面可能也存在很大优势。
本发明还提供了上述氢溴酸盐α晶型的制备方法，它包括如下操作步骤：
(1)取式i所示化合物，与氢溴酸反应，将其在异丙醇和水组成的溶剂系统中制备成晶型iii，优选地在异丙醇中与氢溴酸水溶液反应，析出晶型iii，或将氢溴酸盐在异丙醇溶剂中结晶获得晶型iii；
(2)取晶体iii，在一定温度下暴露于具有高相对湿度的气体中，直至晶体iii转晶至α晶型。
其中，步骤(2)中，所述温度在50-60℃。
其中，步骤(2)中，所述高相对湿度是指相对湿度在65％以上。
进一步地，所述高相对湿度是指相对湿度在75％以上。
本发明一个具体实施方式中，所述气体为空气。
上述转晶方法亦可称为气相介导转晶，不同于溶剂介导转晶，气相介导转晶的介质是气体。转晶时间可以为数小时到数天、数周或数月，这取决于相对湿度和温度，这一时间可以通过常规检测手段确定。
基于式(i)化合物氢溴酸盐及其不同晶型极佳的溶解性(＞100mg/ml)，将其用于制备注射剂，能够更好的满足注射剂对原料溶解度的要求。因此，本发明还提供了将该氢溴酸盐用于制备具有镇静或催眠作用的注射剂中的用途。
本发明所述镇静或催眠作用，是针对哺乳动物产生。同时，该药物还具有一定的抗焦虑、诱导肌肉松弛、抗惊厥、麻醉的功效。具体给药剂量，可以参见现有技术中瑞马唑仑的有效用药剂量。
另外，本发明还提供了一种药物组合物，其含有如上所述的氢溴酸盐。当然，除了氢溴酸盐外，组合物中还可以包括及药学上可接受的辅料。
本发明中所述“药学上可接受的”是指包括任意不干扰活性成分的生物活性的有效性且对它被给予的宿主无毒性的物质。
“辅料”是药物制剂中除主药以外的一切附加材料的总称，辅料应当具备如下性质：(1)对人体无毒害作用，几无副作用；(2)化学性质稳定，不易受温度、ph、保存时间等的影响；(3)与主药无配伍禁忌，不影响主药的疗效和质量检查；(4)不与包装材料相互发生作用。
本发明一个具体实施方式中，所述药物组合物以注射用制剂形式存在。
其中，所述注射剂选自液体注射剂(水针)、注射用无菌粉末(粉针)或注射用片剂(系指药物用无菌操作法制成的模印片或机压片，临用时用注射用水溶解，供皮下或肌肉注射之用)。
其中，所述注射用粉剂的中除含有式i化合物的氢溴酸盐外，还至少含有赋形剂。本发明中所述赋形剂，为有意加到药物中的成分，其在所用的量上不应具有药理学特性，但是，赋形剂可以有助于药物的加工、溶解或溶出、通过靶向给药途径递药或有助于稳定性。
本发明所述赋形剂可以选自碳水化合物、无机盐、聚合物中的一种或两种以上的组合。其中碳水化合物包括单糖、寡糖或多糖类等。
单糖就是不能再水解的糖类，是构成各种二糖和多糖的分子的基本单位，可分为丙糖、丁糖、戊糖、己糖等，自然界的单糖主要是戊糖和己糖，例如，葡萄糖为己醛糖，果糖为己酮糖。
寡糖又称为低聚糖，是少数单糖(2-10个)缩合的聚合物。
多糖是由糖苷键结合的糖链，至少要超过10个的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物。
其中，式i化合物与赋形剂的质量比为(1∶0.5)～(1∶200)。基于对成本、有效成分浓度等的考虑，本发明中建议将式i化合物与赋形剂的质量比设为1∶5～1∶86。
本发明中所述注射用无菌粉末可通过常规的无菌分装或冷冻干燥等工艺获得。
本发明一个具体实施方式中，所述碳水化合物类赋形剂选自乳糖、麦芽糖、蔗糖、甘露醇、葡萄糖中的一种或两种以上的组合。本发明一个具体实施方式中，所述无机盐类选自氯化钠、氯化钾、氯化钙等。当然，目前在冻干粉针制剂中，常常将无机盐类与碳水化合物联合使用，因此，本发明在实际操作过程中，对赋形剂种类的选择可以遵循已知理论进行常规筛选而获得。例如，可以单独使用乳糖、甘露醇、葡萄糖，或者使用它们两者以上的组合物，又或者在单独或多个碳水化合物存在的基础上再加入氯化钠等无机盐。
本发明在研究过程中发现，采用式i化合物氢溴酸盐来作为原料制备冻干粉针剂时，选用多种不同的赋形剂均能够达到良好的稳定性和复溶性，且优于瑞马唑仑苯磺酸盐冻干粉针(cn201380036582.2)。这一发现，足以说明本发明提供的瑞马唑仑氢溴酸盐更适合用于制备冻干粉针剂。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其他多种形式的修改、替换或变更。
以下通过具体实施例的形式，对本发明的上述内容再做进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
图1为式(i)化合物氢溴酸盐iii晶型的x-射线粉末衍射谱图；
图2为式(i)化合物氢溴酸盐iii晶型的dsc谱图；
图3为式(i)化合物氢溴酸盐α晶型的x-射线粉末衍射谱图；
图4为式(i)化合物氢溴酸盐α晶型的x-射线粉末衍射谱图；
图5为式(i)化合物氢溴酸盐α晶型的dsc/tga谱图
图6为式(i)化合物氢溴酸盐α晶型的dvs谱图
图7为式(i)化合物氢溴酸盐i晶型的x-射线粉末衍射谱图；
图8为式(i)化合物氢溴酸盐i晶型的dsc谱图；
图9为式(i)化合物氢溴酸盐i晶型的tga谱图；
图10为式(i)化合物氢溴酸盐ii晶型的x-射线粉末衍射谱图；
图11为式(i)化合物氢溴酸盐ii晶型的dsc谱图；
图12为式(i)化合物氢溴酸盐ii晶型的tga谱图；
具体实施方式
本发明使用的式(i)化合物原料瑞马唑仑，可以通过购买市售产品获得，也可以按照已知方法进行制备(如专利us200,700,934,75a等)。
实施例1式(i)化合物的氢溴酸盐iii晶型的制备
向100ml三口瓶中准确称取式(i)化合物1.8g，加入8.2ml异丙醇搅拌使其全部溶解，然后将0.83g47％的氢溴酸水溶液溶于6.3ml异丙醇中，并滴加到式(i)化合物的异丙醇溶液中，搅拌析晶，过滤，55℃减压干燥得式(i)化合物的氢溴酸盐。
该结晶的x-射线衍射谱图见附图1，dsc和tga图谱见附图2，熔点在163℃，定义该晶型为式(i)化合物的氢溴酸盐iii晶型。
实施例2：式(i)化合物的氢溴酸盐α晶型的制备
氢溴酸盐iii晶型化合物在非流动状态的一定湿度的气体中，可以发生转晶，获得α晶型，特别是在湿度75％以上的空气中，通过气相界面介导，发生晶型转化。该法的优点是不通过溶剂介导，不发生损失，且不引入溶剂残留。
具体地，将上述实施例1中的式(i)化合物的氢溴酸盐iii晶型化合物200mg，在50～55℃-rh75％条件下敞口放置20小时。该结晶样品的x-射线衍射谱图见图3，在约6.85、8.16、10.25、12.63、13.48、13.73、15.01、16.05、16.25、17.59、19.15、20.65、22.74、23.18、23.95、24.75、25.40、26.16、27.69、28.30、30.65确定产物为式(i)化合物的氢溴酸盐α晶型。ic：溴离子含量15.74％，确认氢溴酸成盐比例1∶1；溶剂残留：异丙醇0.01％。
实施例3：式(i)化合物的氢溴酸盐α晶型的制备
将上述实施例1中的式(i)化合物的氢溴酸盐iii晶型化合物500mg，在55～60℃-rh75％条件下敞口放置60小时。该结晶样品的x-射线衍射谱图和dsc谱图经研究比对，确定产物为式(i)化合物的氢溴酸盐α晶型。
x-射线衍射谱图见图4，在约6.96、8.24、10.48、12.77、13.61、13.85、15.20、16.05、16.28、17.70、19.40、20.80、22.85、23.23、24.05、24.92、25.55、26.25、27.79、28.45、30.70，dsc/tga图见附图5，显示熔点为170℃，该样品由于在75％湿度下转晶后没有进一步干燥，含有4.3％的游离水，体现在tga上的60.78-79.45℃的一个失重平台；另外，dvs图谱显示在一定湿度下有和水结合的能力，为无结晶水晶型。确定产物为式(i)化合物的氢溴酸盐α晶型。
实施例4：式(i)化合物的氢溴酸盐i晶型的制备
向10ml单口瓶中准确称取式(i)化合物44mg(0.10mmol)，加入0.4ml乙酸乙酯搅拌使其全部溶解，反应温度降至4℃，然后将1.1ml氢溴酸的甲醇溶液(1mol/l，0.11mmol)滴加到式(i)化合物的乙酸乙酯溶液中，搅拌析晶，抽滤，乙酸乙酯淋洗，30℃减压干燥得式(i)化合物的氢溴酸盐，白色固体42mg，收率81％。
该结晶的x-射线衍射谱图见附图7，dsc图谱见附图8，在70℃、162℃和180℃附近有特征吸收峰，定义该晶型为式(i)化合物的氢溴酸盐的i晶型。式(i)化合物氢溴酸盐i晶型的tga谱图见附图9。
实施例5：式(i)化合物的氢溴酸盐ii晶型的制备
向1ml离心管中准确称取式(i)化合物22.26mg，加入100μl丙酮搅拌使其全部溶解，然后将10mg47％的氢溴酸水溶液溶于75μl丙酮中，并滴加到式(i)化合物的丙酮溶液中，搅拌析晶，离心，30℃减压干燥得式(i)化合物的氢溴酸盐，白色固体20mg，收率76％。
该结晶的x-射线衍射谱图见附图10，dsc图谱见附图11，在69℃、90℃、173℃及188℃附近有特征吸收峰，定义该晶型为式(i)化合物的氢溴酸盐ii晶型。式(i)化合物氢溴酸盐ii晶型的tga谱图见附图12。
实施例6本发明α晶型与其他晶型的比较
将式(i)化合物氢溴酸盐的α晶型与其他晶型进行比较，结果见表4：
表4
由上表可以看出，本发明制备的α晶型在强光、高热和高湿等因素条件下，仍然能够保证良好的稳定性，且明显优于其他三种晶型。
实施例7本发明α晶型与原盐晶型的稳定性对照
参照专利cn200780028964.5和cn201310166860.8制备式(i)化合物的苯磺酸盐i晶型，所得晶型在约7.19、7.79、9.38、12.08、14.06、14.40、14.72、15.59处有特征峰。
将该原研苯磺酸盐晶型与本发明氢溴酸盐α晶型进行如下稳定性比较，结果见表5：
表5
由上表可以看出，本发明制备的α晶型在强光、高热和高湿等因素条件下，都表现出了比原研苯磺酸盐晶型更好的稳定性。另外，从公开的数据来看，本发明制备的α晶型稳定性也比cn103221414b中的托西酸盐晶型更好。
实施例8注射用瑞马唑仑氢溴酸盐无菌粉末处方及工艺
按照表6的处方，采用如下制备工艺，制备无菌粉末，并对各处方的理化指标进行对比。
制备工艺：
处方1：在无菌条件下将瑞马唑仑氢溴酸盐直接分装至棕色西林瓶中，扎盖即得。
处方2～10：将赋形剂及瑞马唑仑氢溴酸盐溶于注射用水中，搅拌至溶解，用盐酸/氢氧化钠调整溶液ph值，分装入西林瓶，经冷冻干燥，即得。
表6注射用瑞马唑仑氢溴酸盐无菌粉末
各处方理化指标如下：
表7注射用瑞马唑仑氢溴酸盐无菌粉末理化指标
处方9、10为按照专利cn201380036582.2报导的工艺，分别制备瑞马唑仑氢溴酸盐、瑞马唑仑苯磺酸盐冻干粉针，两种冻干粉针比较如下：
表8瑞马唑仑氢溴酸盐冻干粉针与原研瑞马唑仑苯磺酸盐冻干粉针比较
注：1、加速放置条件为40℃，长期放置条件为25℃
2、复溶时间：注射用水/葡萄糖/生理盐水温和地涡旋至溶解完全混合均匀，记录完全溶解所花的时间。
从上表可以看出，本发明将瑞马唑仑氢溴酸盐的冻干粉针，在加速和长期稳定性实验中都保持了良好的稳定性，其稳定性和复溶性都优于瑞马唑仑苯磺酸盐冻干粉针(cn201380036582.2)。