微量样品中核酸的检测方法与流程

文档序号:11145805阅读:来源:国知局

技术特征:

1.微量样品中核酸的检测方法,包括:a.获得复合捕获体,所述复合捕获体包含磁性核心和包被于所述磁性核心外的外壳,所述外壳与抗体偶联,所述抗体对所述样品中细胞或病毒上的特定表位具有特异性亲和力;b.将所述样品置于一容器中以及将所述样品与所述复合捕获体接触,使捕获复合体与细胞或病毒结合;c.向所述容器施加磁场,使所述捕获复合体吸附到所述容器内壁上,去除废液;d.加入漂洗液对所述捕获复合体进行洗涤,得到捕获复合体-细胞结合物或捕获复合体-病毒结合物,去除废液;e.执行核酸扩增过程,对所述捕获复合体-细胞结合物或捕获复合体-病毒结合物中的核酸进行扩增或检测,所述捕获复合体对所述核酸扩增或检测过程不产生抑制作用;f.进行检测结果判定。

2.如权利要求1所述方法,所述核酸扩增的方法选自聚合酶链式反应、逆转录PCR、巢式PCR、多重PCR、半定量PCR、实时荧光定量PCR、原位PCR、连接酶链反应、随机扩增多态性DNA、环介导等温扩增、核酸序列依赖性扩增、重组PCR、锚定PCR、不对称PCR、反向PCR或免疫PCR中的一种或多种。

3.如权利要求1或2所述方法,还包括在将所述样品与所述复合捕获体接触前向所述样品中加入缓冲液的步骤。

4.如权利要求1所述方法,所述检测结果判定的方法选自凝胶电泳、核酸测序、核酸分子杂交中的一种或多种。

5.如权利要求1或2所述方法,所述样品选自淋巴液、泪液、汗液、尿液、唾液、全血、精液、脑脊液、肺腔液、腹膜液、关节的液体、羊水、组织间隙液、组织培养液或细胞培养液中的一种或多种。

6.如权利要求1或2所述方法,所述细胞选自人体细胞、动物细胞、植物细胞、细菌、真菌细胞或重组细胞中的一种或多种。

7.如权利要求6所述方法,所述人体细胞选自肠道脱落细胞、上皮脱落细胞、吞噬细胞、白细胞、干细胞、神经细胞中的一种或多种。

8.如权利要求1或2所述方法,所述抗体选自CD45特异性抗体、E.coli抗体、mAb RE-4D8、anti-M13抗体、甲型流感病毒核蛋白单克隆抗体中的一种或多种。

9.检测微量样品中核酸的装置,包括:a.复合捕获体,所述复合捕获体包含磁性核心和包被于所述磁性核心外的外壳,所述外壳与抗体偶联,所述抗体对所述样品中细胞或病毒上的特定表位具有特异性亲和力;b.使所述样品与所述复合捕获体接触的装置;c.磁场产生装置;d.扩增所述样品中细胞或病毒内的核酸的装置;e.检测所述样品中细胞或病毒内的核酸的装置。

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