一种灯盏花乙素晶型及其制备方法与流程

本发明属于药物化学
技术领域：
，特别涉及一种新的灯盏花乙素晶型和该晶型的制备方法。
背景技术：
：灯盏花为菊科植物短葶飞蓬erigeronbreviscapus(vant.)hand-mazz的干燥全草，主要分布于云南省，首载于《滇南本草》，用于治疗中风后遗症、风湿、胸痹等症。二十世纪七十年代经学者研究从中分离的灯盏花乙素(即野黄芩苷，scutellarin，cas号为27740-01-8)为治疗中风的有效成分。由于灯盏花乙素固有的面型分子结构，导致该化合物水溶性和脂溶性均较差。在日常注射剂生产过程中，采用碱性水溶液与灯盏花乙素分子中葡萄糖醛酸上的羧基成盐，最终溶解成水溶液。小体积配制灯盏花乙素水溶液过程因灯盏花乙素的溶解度差和溶解速度慢的理化性质还不会对注射剂产品质量构成威胁和生产过程造成不方便。但是，工业化大规模配液生产灯盏花乙素注射剂的过程中，因灯盏花乙素溶解度差和溶解速度慢将导致整个配液时间显著延长，并因此带来灯盏花乙素长期在碱性水溶液中产生降解产物，最终反映在产品质量上有关物质偏高，生产过程较长。有必要研究一种新的灯盏花乙素结晶形式，可以使灯盏花乙素在碱性水溶液中的溶解速度加快。中国专利cn200910164855.7公开了灯盏花乙素结晶i及其制备方法，提供了结晶溶剂量少，生产成本低，易工业化生产，收率高的灯盏花乙素结晶i及其制备方法。制得的结晶形态的灯盏花乙素与现有灯盏花素相比，具有纯度高，使用更安全，大规模生产或配制成治疗用制剂所需要的性能，对光、湿、热等稳定，在碱性溶液中更加稳定，便于工业化生产、储存。cn201410269593.1公开了灯盏花乙素二水合物结晶ii及其制备方法，提供了一种合成的高纯度灯盏花乙素二水合物结晶ⅱ，与不含结晶水的植物提取灯盏花乙素和已经报道的灯盏花乙素结晶ⅰ比较具有纯度高、稳定性好、低引湿性、在水和乙醇中的溶解性好、不会有潮解现象等优点。上述灯盏花乙素相关晶型专利均未提及灯盏花乙素在碱性水溶液中溶解速度提升的问题。口服固体药物被体内吸收并发挥作用取决于药物活性成分的水溶性和穿透内脏粘膜的渗透性，其中溶解为吸收过程的控制步骤。制药业中大约有90％的药物其活性成分包含在固体颗粒中，在这些固体药物化合物中约有三分之一不溶于水。水不溶性药物由于不能有效地溶解于胃肠液，因此，限制了其在人体内作用的发挥。提高药物的溶解度和溶解速率，已经成为制药业发展的一大挑战。根据noyes-whitney方程，由于颗粒粒径减小导致的比表面积增加和高润湿性，可以促进颗粒的快速溶解(陈鹏，张小岗.微粉化技术提高水不溶性药物溶解度[j].化学通报.2007，10：766-771)。常用的减小药物颗粒粒度的方法主要有低温气流粉碎法、球磨法、固态分散法等。前两种方法一般存在着能耗大、效率低、产品粒度分布宽、易使热不稳定药物的结构破坏与降解、粉碎过程中由于粉尘飞扬而污染环境等缺点。而固体分散法虽在一定程度上改善药物的溶出效果，但操作过程较复杂，成本较高(周敏毅，陈建峰，刘晓林.重结晶法制备微粉化布洛芬的初步探索[j].化工进展.2003，22(5)：524-527)。微粉结晶法是制备微粉化药物的又一种重要方法，是固体物质在一定条件下的容积中析晶时促使其微粉化的技术方法，这种方法无需特殊的粉碎设备，微粉粒径绝大部分在50微米以下，而且粒度均一性良好，幅度变化较小(张耿元.替格瑞洛的微粉化及其晶型，以及制备方法和药物应用[p].中国专利：201410033754.7，2014-01-24)。到目前为止，国内外尚没有公开通过微粉化途径获得能快速溶解的灯盏花乙素结晶的报道。技术实现要素：本发明的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种新的、溶解速度更快的灯盏花乙素晶型。本发明的另一目的是提供这种灯盏花乙素晶型的制备方法。本发明所述的灯盏花乙素晶型，命名为灯盏花乙素晶型ⅲ。本发明所述的灯盏花乙素晶型ⅲ，使用cu-kα辐射，λ＝1.5405a，以2θ角度表示的x-射线粉末衍射光谱特征如下：2θi/i0％8.0273.149.5113.2710.1836.8514.3437.4616.1810019.131021.1813.8625.8924.7426.8327.6329.0615.9538.7315.0146.5611.09本发明所述的灯盏花乙素晶型ⅲ，x-射线粉末衍射2θ位置16.18处衍射峰强度为100％。本发明所述的灯盏花乙素晶型ⅲ的dsc分析吸热转变温度为107-137℃。本发明所述的灯盏花乙素晶型ⅲ的熔融分解温度为195-201℃。本发明所提供的灯盏花乙素晶型ⅲ，是一种灯盏花乙素微粉化的晶型，其粒径在50微米以下，优选粒径在30微米以下，优选粒径在1-20微米，更优选1-10微米，而且其粉末的x-射线衍射图谱与现有的灯盏花乙素结晶粉末的x-射线衍射图谱明显不同。本发明所述的灯盏花乙素晶型ⅲ的制备方法包括以下步骤：一、将灯盏花乙素加入有机溶剂中，有机溶剂的加入量为在室温至溶剂回流温度下使灯盏花乙素完全溶解，再将溶解的溶液缓慢加入溶液体积5-12倍的含水溶剂中，并进行搅拌，使灯盏花乙素立即析出和分散在含水溶剂中；二、过滤，分离出固体，减压干燥，即得微粉化的灯盏花乙素晶型ⅲ。其中，搅拌的速度为500-1500r/min，所述的有机溶剂是甲醇、乙醇、异丙醇、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、二甲亚砜中的一种或多种。所述的含水溶剂是水与上述有机溶剂的混合溶剂，例如甲醇水溶液、乙醇水溶液或异丙醇水溶液等。所述的含水溶剂中水与有机溶剂的用量体积比为100：0～40。应当说明的是，上述制备方法中，含水溶剂可以为水或含有水的混合溶剂，当水与有机溶剂的用量体积比为100:0时，意味着此时的含水溶剂为水。所述水包括纯净水、蒸馏水、去离子水或注射用水。所述的减压干燥包括在室温～60℃任意温度下的干燥。本发明所述的灯盏花乙素晶型ⅲ与未微粉化样品相比，具有在甲醇、乙醇、碱性水溶液等溶剂中的溶解速度更快的优点，尤其是在碱性水溶液中溶解速度提升更为明显。此外，与未微粉化样品相比，杂质较少。提高溶解速度和减少杂质，在有些领域或许意义不大，但在制药领域，提高溶解速度哪怕是较小的数值都会带来较为重要的结果，减少杂质哪怕是较小的数值都会大大提高药品的安全性。灯盏花乙素作为注射用原料药，这两个数值的提高，能大大节省时间成本、提高产品质量，带来非常好的临床效果。溶解速度试验：精密称取灯盏花乙素精制品(未微粉化)和灯盏花乙素晶型ⅲ(微粉化)各3份，每份10mg，在25℃条件下，分别加入碱性水溶液(ph6-8)、甲醇、乙醇适量，超声使其溶解，记录溶解时间。结果见表1、表2、表3。表1不同灯盏花乙素样品在100ml不同溶剂中的溶解时间(min)从表1显示，灯盏花乙素晶型ⅲ与灯盏花乙素精制品(未微粉化)比较，具有较快的溶解速度。表2不同灯盏花乙素样品配制200l灯盏花乙素注射制剂溶解时间(h)样品名称碱性水溶液(ph6-8)灯盏花乙素精制品(未微粉化)3.0灯盏花乙素结晶ⅲ(实施例1)2.5灯盏花乙素结晶ⅲ(实施例2)2.8灯盏花乙素结晶ⅲ(实施例3)2.7灯盏花乙素结晶ⅲ(实施例4)2.8从表2显示，大规模配液生产灯盏花乙素注射剂时，溶解时间明显增加，而经过微粉化的灯盏花乙素晶型ⅲ能显著缩短配液时间。表3同一批灯盏花乙素样品经微粉化和未微粉化配制200l灯盏花乙素注射制剂有关物质检测结果样品名称杂质(％)灯盏花乙素精制品(未微粉化)1.4灯盏花乙素结晶ⅲ(实施例1)1.2从表3显示，灯盏花乙素晶型ⅲ与灯盏花乙素精制品(未微粉化)比较，杂质明显减少。附图说明图1为本发明所述的灯盏花乙素结晶ⅲ的x-射线粉末衍射图。图2为本发明所述的灯盏花乙素结晶ⅲ的dsc图。图3为本发明所述的灯盏花乙素结晶ⅲ的tg-dta图。图4为本发明所述的灯盏花乙素结晶ⅲ的hplc图。具体实施方式实施例1：取灯盏花乙素精制品1g加入50ml甲醇中，加热回流20～25min使其完全溶解，缓慢加入(或滴加)到300ml蒸馏水中，边滴加，边搅拌，搅拌速度为800r/min，灯盏花乙素立即析出并分散在水中。过滤，用蒸馏水搅洗或冲洗2-4次，过滤，30℃下减压干燥至恒重，即得微粉化的灯盏花乙素结晶ⅲ，收率90％。取上述粉末进行粉末粒径检测，粉末平均粒径为4-7微米。实施例2：取灯盏花乙素精制品1g加入45ml甲醇中，加热回流30min使其完全溶解，缓慢加入(或滴加)到400ml蒸馏水与乙醇的混合溶液(v:v＝360:40)中，边滴加，边搅拌，搅拌速度为750r/min，灯盏花乙素立即析出并分散在水中。过滤，用蒸馏水搅洗或冲洗2-4次，过滤，50℃下减压干燥至恒重，即得微粉化的灯盏花乙素结晶ⅲ，收率92％。取上述粉末进行粉末粒径检测，粉末平均粒径为6-8微米。实施例3：取灯盏花乙素精制品1g加入60ml甲醇与异丙醇的混合溶剂(v:v＝8:2)中，加热回流30～35min使其完全溶解，缓慢加入(或滴加)到800ml蒸馏水中，边滴加，边搅拌，搅拌速度为800r/min，灯盏花乙素立即析出并分散在水中。过滤，用蒸馏水搅洗或冲洗2-4次，过滤，60℃下减压干燥至恒重，即得微粉化的灯盏花乙素结晶ⅲ，收率89％。取上述粉末进行粉末粒径检测，粉末平均粒径为6-9微米。实施例4：取灯盏花乙素精制品1g加入60ml乙醇中，加热回流30～35min使其完全溶解，缓慢加入(或滴加)到600ml蒸馏水与异丙醇的混合溶液(v:v＝550:50)中，边滴加，边搅拌，搅拌速度为900r/min，灯盏花乙素立即析出并分散在该混合溶液中。过滤，用蒸馏水搅洗或冲洗2-4次，过滤，45℃下减压干燥至恒重，即得微粉化的灯盏花乙素结晶ⅲ，收率87％。取上述粉末进行粉末粒径检测，粉末平均粒径为3-7微米。灯盏花乙素结晶ⅲ中灯盏花乙素的纯度测定：色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1％磷酸溶液(40:60)为流动相；流速为每分钟1.0ml；柱温40℃；检测波长335nm。理论板数按野黄芩苷计算应不低于5000。对照品溶液的制备取野黄芩苷对照品10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇70ml，超声处理(功率300w，频率50khz)45分钟，取出，放置室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备取本品10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇70ml，超声处理(功率300w，频率50khz)45分钟，取出，放置室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。杂质测定：取本品适量(相当于野黄芩苷20mg)，置50ml量瓶中，加甲醇适量，超声处理(功率300w，频率50khz)45分钟，放至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。照[含量测定]项下的色谱条件，取对照溶液5μl，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10％，再精密量取供试品溶液与对照溶液各5μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2.5倍。供试品溶液色谱中，其他成分峰面积的和不得大于对照溶液主峰峰面积的2倍。当前第1页12