本发明属于生物工程领域，尤其是涉及血红蛋白多肽粉的制备方法。
背景技术：
血液蛋白质具有极高的生物效价，含有人体所需的8 种必需氨基酸，其组成平衡，为优质蛋白源。但是目前动物血液，特别是羊血大部分被以污水的形式排放或丢弃，导致大量宝贵营养资源流失，并且给环境造成了严重污染。在羊血液中，血红蛋白占其总蛋白质含量的60-70％。血红蛋白生物活性肽具有很多极为重要的功能活性，如阿片样活性、ACE抑制活性、增强血管舒缓激肽活性、刺激细菌生长活性、镇痛活性、抗菌活性等。加工血红蛋白不但有助于环境的保护，而且可以充分利用血液中大量宝贵的蛋白质，开发为高附加值的功能产品。
技术实现要素：
本发明的目的是提供血红蛋白多肽粉的制备方法，其制备方法简单，所得的多肽分子量小，纯度高，利于人体吸收，可直接使用，具有显著的经济效益。
为了达到上述目的本发明提供的技术方案为：血红蛋白多肽粉的制备方法，其制备方法包括以下步骤：
血红蛋白的制备：向羊血中加入柠檬酸三钠，其中柠檬酸三钠与羊血的质量比为3-5/100，搅拌，然后在相对离心力4000-6000g离心6-10min，取下层液体得血红蛋白；
酶解液的制备：向2-5份血红蛋白中加入35-45份水，调pH至7-9，加热至90-95℃保持30-40min，接着降温至55-60℃，加入占血红蛋白质量3％-5％的巯基蛋白酶反应2-6h，然后再加入占血红蛋白质量2％-5％的木瓜蛋白酶，在45-55℃，pH为8的条件下水解7-10h，反应结束后灭酶活，过滤取上清液，得酶解液，该条件下，采用巯基蛋白酶与木瓜蛋白酶两种蛋白酶分步酶解，所得到的多肽分子量小，与蛋白质相比，更易消化吸收，同时致敏性低，扩大了其在医药食品中的应用；提高了其在等电点时的溶解度，增加了其在高离子强度下的稳定性，可用于食品的蛋白质强化；酶解也降低了产品的粘度，改变了其流变性质，方便了对其进行加工制造；且过程中没有有害物质的混入，对人体的健康没有任何不良影响，属于健康绿色生产工艺；
多肽粉的制备：将酶解液以9-10倍柱体积/h的流速通过阳离子交换树脂，接着以9-10倍柱体积/h的流速通过阴离子交换树脂，向所得洗脱液中加入占上清液质量7％-12％的β-环状猢精，经喷雾干燥即得多肽粉，该条件下，所制备的多肽具有很好的抗炎、抗衰老、增强机体免疫力，预防肿瘤、美容、养眼等多种功效，对大肠癌、肺癌、乳腺癌等具有非常好的抑制活性，且分子量小，纯度高，利于人体吸收，可直接使用，具有显著的经济效益。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：采用巯基蛋白酶与木瓜蛋白酶两种蛋白酶分步酶解，所得到的多肽分子量小，与蛋白质相比，更易消化吸收，同时致敏性低，扩大了其在医药食品中的应用；提高了其在等电点时的溶解度，增加了其在高离子强度下的稳定性，可用于食品的蛋白质强化；酶解也降低了产品的粘度，改变了其流变性质，方便了对其进行加工制造；且过程中没有有害物质的混入，对人体的健康没有任何不良影响，属于健康绿色生产工艺；所制备的多肽具有很好的抗炎、抗衰老、增强机体免疫力，预防肿瘤、美容、养眼等多种功效，对大肠癌、肺癌、乳腺癌等具有非常好的抑制活性，且分子量小，纯度高，利于人体吸收，可直接使用，具有显著的经济效益。
具体实施方式
以下通过实施例进一步详细描述：
实施例1：血红蛋白多肽粉的制备方法，其制备方法包括以下步骤：
1)血红蛋白的制备：向羊血中加入柠檬酸三钠，其中柠檬酸三钠与羊血的质量比为3/100，搅拌，然后在相对离心力4000-6000g离心6-10min，取下层液体得血红蛋白；
2)酶解液的制备：向2份血红蛋白中加入35份水，调pH至7，加热至90℃保持30min，接着降温至55℃，加入占血红蛋白质量3％的巯基蛋白酶反应2h，然后再加入占血红蛋白质量2％的木瓜蛋白酶，在45℃，pH为8的条件下水解7h，反应结束后灭酶活，过滤取上清液，得酶解液，该条件下，采用巯基蛋白酶与木瓜蛋白酶两种蛋白酶分步酶解，所得到的多肽分子量小，与蛋白质相比，更易消化吸收，同时致敏性低，扩大了其在医药食品中的应用；提高了其在等电点时的溶解度，增加了其在高离子强度下的稳定性，可用于食品的蛋白质强化；酶解也降低了产品的粘度，改变了其流变性质，方便了对其进行加工制造；且过程中没有有害物质的混入，对人体的健康没有任何不良影响，属于健康绿色生产工艺；
3)多肽粉的制备：将酶解液以9倍柱体积/h的流速通过阳离子交换树脂，接着以9倍柱体积/h的流速通过阴离子交换树脂，向所得洗脱液中加入占上清液质量7％的β-环状猢精，经喷雾干燥即得多肽粉，该条件下，所制备的多肽具有很好的抗炎、抗衰老、增强机体免疫力，预防肿瘤、美容、养眼等多种功效，对大肠癌、肺癌、乳腺癌等具有非常好的抑制活性，且分子量小，纯度高，利于人体吸收，可直接使用，具有显著的经济效益。
实施例2：血红蛋白多肽粉的制备方法，其制备方法包括以下步骤：
1)血红蛋白的制备：向羊血中加入柠檬酸三钠，其中柠檬酸三钠与羊血的质量比为5/100，搅拌，然后在相对离心力4000-6000g离心6-10min，取下层液体得血红蛋白；
2)酶解液的制备：向5份血红蛋白中加入45份水，调pH至9，加热至95℃保持40min，接着降温至60℃，加入占血红蛋白质量5％的巯基蛋白酶反应6h，然后再加入占血红蛋白质量5％的木瓜蛋白酶，在55℃，pH为8的条件下水解10h，反应结束后灭酶活，过滤取上清液，得酶解液，该条件下，采用巯基蛋白酶与木瓜蛋白酶两种蛋白酶分步酶解，所得到的多肽分子量小，与蛋白质相比，更易消化吸收，同时致敏性低，扩大了其在医药食品中的应用；提高了其在等电点时的溶解度，增加了其在高离子强度下的稳定性，可用于食品的蛋白质强化；酶解也降低了产品的粘度，改变了其流变性质，方便了对其进行加工制造；且过程中没有有害物质的混入，对人体的健康没有任何不良影响，属于健康绿色生产工艺；
3)多肽粉的制备：将酶解液以10倍柱体积/h的流速通过阳离子交换树脂，接着以10倍柱体积/h的流速通过阴离子交换树脂，向所得洗脱液中加入占上清液质量12％的β-环状猢精，经喷雾干燥即得多肽粉，该条件下，所制备的多肽具有很好的抗炎、抗衰老、增强机体免疫力，预防肿瘤、美容、养眼等多种功效，对大肠癌、肺癌、乳腺癌等具有非常好的抑制活性，且分子量小，纯度高，利于人体吸收，可直接使用，具有显著的经济效益。
实施例3：血红蛋白多肽粉的制备方法，其制备方法包括以下步骤：
1)血红蛋白的制备：向羊血中加入柠檬酸三钠，其中柠檬酸三钠与羊血的质量比为4/100，搅拌，然后在相对离心力4000-6000g离心6-10min，取下层液体得血红蛋白；
2)酶解液的制备：向3份血红蛋白中加入37份水，调pH至8，加热至93℃保持34min，接着降温至57℃，加入占血红蛋白质量5％的巯基蛋白酶，再加入占血红蛋白质量1‰普鲁兰多糖的以及血红蛋白质量0.3‰的2,4-己二烯酸，反应3h，接着加入占血红蛋白质量2％的木瓜蛋白酶，在48℃，pH为8的条件下水解8h，反应结束后灭酶活，过滤取上清液，得酶解液，所加入的2,4-己二烯酸、普鲁兰多糖具有协同作用，增强了巯基蛋白酶所含有的半胱氨酸的活性，提高了其催化水解肽键的能力，降低了酶解所得的多肽的分子量，提高了其经济效益；
3)多肽粉的制备：将酶解液以9倍柱体积/h的流速通过阳离子交换树脂，接着以10倍柱体积/h的流速通过阴离子交换树脂，向所得洗脱液中加入占上清液质量12％的β-环状猢精，经喷雾干燥即得多肽粉，该条件下，所制备的多肽具有很好的抗炎、抗衰老、增强机体免疫力，预防肿瘤、美容、养眼等多种功效，对大肠癌、肺癌、乳腺癌等具有非常好的抑制活性，且分子量小，纯度高，利于人体吸收，可直接使用，具有显著的经济效益。
以上实施方式仅用于说明本发明，而并非对本发明的限制，本领域的普通技术人员，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，还可以做出各种变化和变型。因此，所有等同的技术方案也属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由权利要求限定。